Tersedia secara online di

International Journal of
www.pharmscidirect.com FARMASI

DAN BIOMEDICAL
Int J Pharm Biomed Res 2013, 4 (1), 05-09 PENELITIAN

ISSN No: 0976-0350

Artikel Penelitian

Studi farmakokinetik kombinasi fenitoin-kafein

Widyati1, Zullies Ikawati2, Lukman Hakim2
1
Departemen Farmasi, Dr Ramelan, Surabaya, Indonesia
2
Fakultas Farmasi, Universitas Gajah Mada, Yogyakarta, Indonesia

Diterima: 14 Desember 2012 / Revisi: 25 Desember 2012 / Diterima: 30 Desember 2012 / publikasi online:
19 Jan 2013

ABSTRAK
Latar Belakang: Kafein telah digunakan sebagai obat kejang di masyarakat Indonesia untuk usia tetapi kurangnya bukti
ilmiah didukung. Untuk menyelidiki efek antikonvulsan kafein pada manusia, itu harus diuji selain antikonvulsan didirikan.
Tujuan: Untuk menyelidiki profil farmakokinetik kombinasi fenitoin-kafein, ditoleransi dosis optimal, efek samping, dan
interaksi antara fenitoin dan kafein. Metode: Subyek penelitian adalah 22 orang dewasa yang menerima kapsul fenitoin-
kafein dengan dua dosis yang berbeda. Hari 1 sampai 7 menerima kombinasi fenitoin 5mg / kg + kafein 2,5 mg / kg. Hari 8
to13 menerima 5mg / kg fenitoin saja. Hari 14 menerima rejimen fenitoin 5mg / kg + kafein 5mg / kg. pengambilan sampel
darah diambil pada hari ke 7 dan 13 pada 0, 2, 4, 8, 12, 24h setelah pemberian obat. Tingkat fenitoin dan kafein ditentukan
dengan HPLC menggunakan kombinasi metanol dan asam fosfat sebagai eluen. Hasil: Selain Kafein untuk fenitoin
menghasilkan tidak ada interaksi yang signifikan di farmakokinetik. profil farmakokinetik fenitoin di fenitoin-kafein sebagai
berikut: (Clav) 0,2571 ml / menit; volume distribusi (Vd) 0.644L / kg; paruh eliminasi (t½) 34.8h; laju eliminasi konstan (Ke)
0.018L / h. Efek farmakologis disebabkan fenitoin tidak ditambah dengan penambahan kafein. Penelitian itu berhenti di hari
ke-14 karena tingginya insiden dispepsia ketika dosis kafein meningkat menjadi 5mg / kg. Kesimpulan: Tidak ada interaksi
farmakokinetik antara fenitoin dengan kafein. Kombinasi dosis fenitoin-kafein yang dapat ditoleransi itu fenitoin 5mg / kg +
kafein 2,5 mg / kg. Kombinasi phenytoin-kafein muncul aman sebagai fenitoin saja.
Kata kunci: interaksi obat, antikonvulsan, Michaelis-Menten, Mengantuk, Mual

1. PERKENALAN
pengobatan obat epilepsi telah membuat langkah yang
luar biasa, dengan pengenalan 11 obat baru antiepilepsi
(AED) sejak tahun 1978: valproate, vigabatrin, tiagabine,
lamotrigin, oxcarbazepine, felbamate, topiramate, gabapentin,
levetiracetam, zonisamide, dan pregabalin. Perbaikan dalam
hal hasil klinis, bagaimanapun, telah jatuh jauh dari harapan,
dengan sampai sepertiga dari pasien terus mengalami kejang
atau tidak dapat diterima efek samping terkait obat terlepas
dari upaya untuk mengidentifikasi rezim pengobatan yang
optimal dengan satu atau lebih obat [1, 2]. Kegagalan agen
tunggal dalam mengendalikan kejang, membutuhkan
penambahan
*Penulis yang sesuai. Telp: +62 81331383111 Fax:
Email: widyatiw@yahoo.com
© 2013 PharmSciDirect Publikasi. Seluruh hak cipta.
agen atau agen lain yang disebut add-on. Menjadi semakin
memberatkan baik dari segi kepatuhan dan obat pasien biaya.
Sehubungan dengan kejang, kopi telah menjadi mitos di
masyarakat Indonesia sebagai obat untuk kejang untuk usia.
Secara empiris, kafein telah diresepkan dalam kombinasi
dengan fenobarbital selama bertahun-tahun. Meskipun, tujuan
penambahan kafein untuk fenobarbital adalah untuk
bertindak sebagai stimulan yang memusuhi mengantuk dari
fenobarbital, tetapi kombinasi ini menghasilkan kontrol
kejang baik. Pada saat ini, kafein digunakan sebagai stimulan
SSP, relaksan otot polos, jantung stimulan otot.
Beberapa tes pra-klinis kafein pada tikus dirangsang
dengan kejang buatan (listrik atau rangsangan kimia)
mengakibatkan kontroversi [3]. Namun tindakan molekul
kafein menyebabkan peningkatan adenosin. Adenosine telah
diketahui memiliki efek antikonvulsan karena menghalangi
A2 dan A3 reseptor [4]. Adenosine penyumbatan reseptor
mengakibatkan stabilisasi reseptor GABA-A [5]. Untuk
disetujui sebagai
 Widyati et al, Int J Pharm Biomed Res 2013, 4 (1), 05-09
first choice anticonvulsant, a new drug must have been use as
an add-on therapy for years with demonstrated excellent
effectiveness. Therefore, in this study caffeine will be tested
only as an add-on agent to first-line agents. Phenytoin was
selected as a first-line agent to study due to safe and did not
have Steven Johnson Syndrome as adverse reaction as in the
case of carbamazepin. Since the study had not been done in
humans, this study will concentrated in pharmacokinetic and
pharmacodynamic studies in healthy subjects.
2. MATERIALS AND METHODS
2.1. Patients
Penelitian ini dilakukan di rumah sakit Angkatan Laut di
Surabaya-Indonesia. Sebelum dan sesudah penelitian
dilakukan pada subyek sehat, terdiri 22 orang dewasa yang
sehat. Semua subjek direkrut dari Rumah Sakit Angkatan
Laut (staf rumah sakit, warga dan mahasiswa pasca-sarjana
yang sedang berlatih di rumah sakit). Kriteria eksklusi
meliputi alkohol dan konsumsi kopi selama penelitian, reaksi
obat yang parah merugikan dan kepatuhan miskin. Sebuah
informed consent ditandatangani oleh masing-masing peserta
dan mereka secara pribadi diwawancarai untuk informasi
tentang efek obat, dan kepatuhan. persetujuan etis untuk studi
diberikan oleh komite etika penelitian Rumah Sakit Angkatan
Laut di Surabaya (No. 11 / EC / KERS / 2010)
2.2. aparatus dan kondisi kromatografi
konsentrasi serum fenitoin dan kafein ditentukan dengan
HPLC (Waters Associates, Milford, MA) terdiri dari sistem
pelarut pengiriman, auto sampler, dan detektor ultraviolet.
Fenitoin, kafein dan Tadalafil (standar internal) diselesaikan
pada kolom analitis Symmetry Waters ODS (75mm × 4.6mm
id, 3.5μm) di fase terbalik kondisi partisi kromatografi. Fase
gerak terdiri dari MeOH dan H3PO4 solusi (0,5%, pH 3,0 ±
0,05 disesuaikan dengan 85% H3PO4) Dalam rasio 40:60 v /
v. Laju aliran adalah 0.3ml / min dan analit dan standar
internal yang dipantau di 230nm.
2.3. Persiapan kurva standar
Stock standard solutions of Phenytoin, caffeine and
Tadalafil (internal standard) were prepared in 40% methanol,
protected from light and stored at 4°C until used. Working
standard solutions were freshly obtained by diluting the stock
standard solutions with 40% methanol, during the analysis
day.
Aliquots of 0.4mL blank serum were spiked with the
working solutions of Phenytoin, caffeine and Tadalafil
(internal standard) to achieve serum concentration of 0.15-50
µg/mL for Phenytoin and caffeine, each containing
12.5µg/mL of Tadalafil (internal standard). The solution was
then extracted using a vortex mixer. The organic extracts
6
were separated, evaporated to dryness, reconstituted with
150µL of 40%MeOH, and transferred to HPLC auto
sampling vial. An aliquot of 50 µL was injected onto the
HPLC system. Calibration curves reporting peak area of
Phenytoin and caffeine /IS ratio as a function of each drug
concentrations were established in the range of 0.15-
50µg/mL, in the presence of 12.5µg/mL of Tadalafil as
internal standard. Calibration curves were linear (r2>0.99) for
both caffeine and phenytoin and intercepts did not differ
significantly from zero. The intraday and interday coefficient
of variation (CVs) did not exceed 9%.
2.4. Pharmacokinetic studies
The subjects were assigned to receive three consecutive
dosage regimens and blood sampling as follows:
Day 1-7: Phenytoin 5mg/kg + Caffeine 2.5mg/kg
Day 7: Blood sampling at 0, 2, 4, 8, 12, 24h after last dose
Day 8-13: Phenytoin 5mg/kg
Day 13: Blood sampling at 0, 2, 4, 8, 12, 24h after last dose
Day 14: Phenytoin 5mg/kg + Caffeine 5mg/kg
Blood samples were collected from the subjects on day 7
and 13 at different time points (0, 2, 4, 8, 12, 24h after last
dose). Serum was harvested from the above blood samples.
The serum samples (0.4mL) were then spiked with Tadalafil
(internal standard) to achieve serum concentration of
12.5µg/mL. The solution was then extracted using a vortex
mixer. The organic extracts were separated, evaporated to
dryness, reconstituted with 150µL of 40%MeOH, and
transferred to HPLC auto sampling vial. An aliquot of 50µL
was injected onto the HPLC system.
2.5. Analysis of pharmacokinetic data
Kemiringan (beta) dari fase log-linear terminal masing-
masing kafein dan fenitoin konsentrasi serum vs kurva
waktu yang ditentukan dengan analisis regresi linier, dan
digunakan untuk menghitung eliminasi konstan, Volume
distribusi. Area di bawah kurva (AUC) dari nol sampai
konsentrasi terdeteksi terakhir ditentukan dengan metode
trapesium linear dan ekstrapolasi hingga tak terbatas.
parameter farmakokinetik lainnya ditentukan dengan
perhitungan dengan menggunakan rumus berikut [6].
Cav=
.
Css =
Vd = [ FD
]Hai ∞
AUC 0 K
DHai
Cl av = [ AUC] ∞0
 Widyati et al, Int J Pharm Biomed Res 2013, 4 (1), 05-09 7
Tabel 1
2.6. ukuran hasil
profil demografis

ukuran hasil yang kadar serum fenitoin dan kafein; efek karakteristik Jarak Berarti ± SD
Jumlah subyek 22
farmakologis yang dihadapi selama 14 hari penelitian. Usia 17 - 46 Tahun 29,5 ± 8,34
Jenis kelamin 16 Pria; 6 Perempuan
Berat 41-92 kg 63,04 ± 12,67
2.7. Analisis statistik

Kami melakukan tes Tindakan Umum Linear Model- Table 2

berulang untuk membandingkan tingkat serum fenitoin Mean serum concentrations of phenytoin and caffeine
sebelum dan setelah pemberian kafein. Kadar serum Sampling time after Phenytoin only Phenytoin-caffeine combination
kemudian dihitung menggunakan formula khusus untuk the last dose (h) Phenytoin level Phenytoin level Caffeine level
(µg/mL) (µg/mL) (µg/mL)
menghasilkan profil farmakokinetik seperti K, volume
(Mean ±SD) (Mean ±SD) (Mean ±SD)
distribusi, clearance obat, waktu paruh.Efek farmakologis dan 0 4.32 – 16.12 3.89 – 20.48 -0.06 – 2.48
frekuensi mereka dijelaskan dan ditentukan. Perbedaan efek (10.39 ± 3.36) (10.64 ± 3.83) (0.59 ± 0.69)
2 4.27 – 22.95 5.04 – 16.38 0.36 – 3.26
antara Selain pra dan pasca kafein dinilai menggunakan uji (10.58 ± 5.36) (10.82 ± 3.74) (1.12 ± 0.77)
Chi Square. 4 5.32 – 24.85 5.87 – 18.97 0.43 – 4.28
(10.52 ± 5.03) (12.55 ± 4.07) (1.20 ± 0.99)
8 6.24 – 17.59 5.57 – 18.55 0.10 – 1.94
3. HASIL (10.65 ± 3.38) (11.19 ± 3.06) (0.58 ± 0.53)
12 4.49 – 20.46 4.31 – 17.45 -0.03- 1.11
Sebanyak 22 orang dewasa sehat dilibatkan dalam (9.24 ± 3.89) (9.32 ± 3.45) (0.32 ± 0.34)
24 4.55 – 14.80 3.14 – 18.56 0.05 – 0.42
penelitian ini terdiri dari 6 perempuan dan 16 laki-laki, usia
17-46 tahun, dan berat berkisar antara 41-92kg. Karakteristik
dasar disajikan pada Tabel 1. konsentrasi serum fenitoin
sebelum dan sesudah kafein penghapusan tidak berbeda.
tabel 3
Meskipun ada peningkatan berarti fenitoin serum setelah profil farmakokinetik phenytoins
penambahan kafein konsisten dalam setiap kali pengambilan (9.84± 4.05) (8.90 ± 3.58) (0,14 ± 0,09)
sampel, namun itu tidak signifikan secara statistik (F: 0,907,
P: 0,347, CI 95%). Perbedaan tersebut divisualisasikan dalam
Gambar 1.

parameter fenitoin hanya Kombinasi phenytoin-kafein

fenitoin fenitoin Kafein
14,0
Ke (1 / h) 0,0122 0,018 0.10
Vd (L / kg) 0,644 0,58 0.92
12.0
(Mg /

Cl av (L / h) 0,495 0,646 1,56

serum conc mL)

t ½ (H) pada dosis 5 mg /

10,0 kg 56,8 34.8 6.81
cssmax 13,76 14.01 1,35
8,0 cssmin 8.60 8.73 1,235

6.0
fenitoin

4.0
fenitoin
Berart

Fenitoin-Kafein diikuti Michaelis-Menten atau kinetika saturable. Parameter

2.0
kinetika saturable lain yang berasal dari penelitian
i

0.0
0 2 4 8 12
Waktu (h)
Gambar 1. Berarti konsentrasi serum fenitoin sebelum dan sesudah kafein
coadministration
serum fenitoin rata-rata pada Tabel 2 menunjukkan
linearitas non. kinetika saturable juga dibuktikan dengan hasil
Css calculation which was above Km value for Indonesian
(2.35±1.52mg/L) [7]. The Css calculation assumed as either
linear or non-linear kinetics resulted 20.32mg/L and
9.17mg/L, consecutively. Therefore, phenytoin elimination
24 sebelumnya di masyarakat Indonesia adalah Vmax 7.46 ± 1.66
mg / kg / hari [7].
Volume distribusi tidak terpengaruh oleh metabolisme
saturable dan masih terkait dengan clearance dan paruh
menggunakan persamaan yang sama seperti untuk
farmakokinetik linear. Clearance dan paruh dalam
farmakokinetik non-linear adalah dosis atau konsentrasi
tergantung, karena izin ditentukan sebagai berarti izin tubuh.
Sedangkan paruh eliminasi tergantung pada parameter
Michaelis-Menten dan konsentrasi seperti yang dijelaskan
dalam rumus berikut.
Clav= =
t1/2 = . (Km + Cp)

Hasil perhitungan farmakokinetik disajikan pada Tabel 3.

Pemberian fenitoin dengan kafein yang dihasilkan tidak ada
perbedaan parameter farmakokinetik di
 Widyati et al, Int J Pharm Biomed Res 2013, 4 (1), 05-09 8

fenitoin, meskipun parameter dari kedua phenytoins caffeine metabolism, but caffeine also acts as strong
berkorelasi lebih baik. inhibitors for the same isoenzyme [10]. As shown in Table 3,
Hasil pengamatan efek farmakologis dilaporkan pada caffeine metabolism was slow and resulted longer half life
Tabel 4. Penambahan kafein mengurangi tingkat kantuk, compare to standar text and previous study, but phenytoin
meskipun jumlah mata pelajaran yang mengeluh mengantuk was much faster. Another study combining caffeine with
hampir sama. Menariknya, tidak ada mata pelajaran memiliki fluvoxamine resulted in significant increase of caffeine serum
ruam kulit ketika mereka berada di fenitoin-caffein, tapi level [11]. This finding could not be compared to what we
hipersensitivitas tanda dari fenitoin yang muncul di 3 mata found in our study, because we did not examine caffeine
pelajaran sementara mereka berada di fenitoin saja. Jumlah only. In other studies, caffeine was added to lamotrigine,
subjek hipersensitif hanya 1 ketika mereka memiliki 5mg oxcarbazepine, and tiagabine in mice and did not reduce anti-
fenitoin-kafein. Penelitian dihentikan setelah 7 mata pelajaran convulsant effect [3].
mengeluh memiliki kesal lambung (dispepsia) pada hari 1 farmakokinetik fenitoin setelah kafein penghapusan
pada fenitoin-kafein 5mg / kg. Dari fakta ini, kami berbeda untuk setiap teks standar. Salah satu alasan adalah
menyimpulkan bahwa hanya fenitoin-kafein 2,5 mg / kg yang investigasi dari farmakokinetik fenitoin dalam teks standar
dapat ditoleransi. sebagian besar diwakili oleh akut daripada mapan studi, yang
sering menggunakan dosis rendah yang lebih mungkin
berhubungan dengan waktu paruh pendek. Selain itu, ada
tabel 4 beberapa studi dari pasien dalam kategori usia tertua (yaitu,
efek farmakologis lebih tua dari 84 tahun), ketika metabolisme obat dapat
Tida berubah
k rejimen obat Lamanya efek farmakologis Frekuensi
saya Fenitoin 5mg + 7 hari Pusing 9 (41%) [12]. Selain itu, pengaruh farmakogenetik pada
kafein 2,5 mg Kantuk 14 (64%) metabolisme obat saat ini sudah banyak dihargai, dengan
pencernaan yg
terganggu 2 (9%)
polimorfisme pada gen untuk CYP 2C9 dan CYP 2C19
Mual 1 (5%) bertanggung jawab untuk variabilitas yang paling
Appetite increase 9(41%) antarindividu dalam penanganan fenitoin
Hypersensitive -
[9].
II Phenytoin 5mg 5 days Dizziness 9 (41%)
Drowsiness 15 (68%) Dosis fenitoin 5mg / kg dengan atau tanpa penambahan
Dyspepsia 1 (5%) kafein dihasilkan konsentrasi steady state bawah kisaran
Nausea 0 terapeutik. Hal ini disebabkan oleh nilai yang lebih rendah
Appetite increase 8(36%)
Hypersensitive 3(14%) dari Km dan Vmax compare to standard text. These finding
III Phenytoin 5 mg + 1 day Dizziness 0 should attract clinician attention to dose phenytoin higher
Caffeine 5 mg Drowsiness 1 (5%) than 5mg/kg in order to achieve therapeutic range.
Dyspepsia 7(35%)
Nausea 0 The pharmacological effect observed before and after
Appetite increase 6(30%) caffeine addition was reported no significant difference.
Hypersensitive 1(5%) Therefore the addition of caffeine into phenytoin appeared
safely as phenytoin only. Although some subjects reported
less dizziness and drowsiness with phenytoin-caffeine but
still be counted as having both effects, because the number
presented in this study reflected frequency only not the level.
4. DISCUSSION The caffeine dose tolerated in this study was 2.5mg/kg,
which was lower than other studies [11, 13-14] and might not
Coadministration of caffeine to phenytoin did not alter the
have been sufficient to produce adverse effects [15].
pharmacokinetic parameters of phenytoin. This mean caffeine
would not interact with phenytoin in pharmacokinetics, 5. CONCLUSIONS
maybe in pharmacodynamics, but this need to be proved with
other study. Caffeine addition to phenytoin prolonged There was no pharmacokinetic interaction between
elimination half life and increased volume of distribution of phenytoin with caffeine. The combination dose of phenytoin-
caffeine. These finding were different to previous report caffeine that can be tolerated was phenytoin 5mg/kg +
which tested caffeine as a probe to assess activity of hepatic caffeine 2.5mg/kg. Combination of phenytoin-caffeine
cytochrom monooxygenase system. It was found that appeared safely as phenytoin only.
phenytoin increased clearance of caffeine from 1.5 to 3.6mL
min/kg and reduced its half life from 4.8 to 2.4h [8]. ACKNOWLEDGMENT
However in this study caffeine clearance was not changed but
elimination half life was increased to 6.8h. Those differences We thankfully acknowledge the assistance from Centre
might be resulted from competition in using CYP1A2 both for Drug Research, Faculty of Pharmacy, University of
for metabolizing caffeine and catalyzing phenytoin to Surabaya, for drug level assay. The authors also wish to
hydroxyphenytoin, then to cathecol [9]. CYP 1A2 known as acknowledge, Higher Commission of Education and Cultural
major substrates for Ministry, for their research funding.
 Widyati et al, Int J Pharm Biomed Res 2013, 4(1), 05-09
REFERENCES
[1] Kwan, P., Brodie, M.J., New Engl J Med 2000, 342, 314–319.
[2] Kwan, P., Brodie, M.J., CNS Spectr 2004, 9, 110–119.
[3] Chrościńska-Krawczyk, M., Ratnaraj, N., Patsalos, P.N., Czuczwar,
S.J., Pharmacol Rep 2009, 6, 819-826.
[4] Barraco, R.A., Swanson, T.H., Phillis, J.W., Berman, R.F., Neurosci
Lett 1984, 46, 317-322.
[5] Daly. J.W., Cell Mol Life Sci 2007, 64, 2153-2169.
[6] Leon Shargel, Andrew Yu, Susanna Wu-Pong, Applied Biopharmaceutics &
Pharmacokinetics, Mc Graw Hill, New York 2013.
[7] Sumarno, The 5th Asian Conference on Clinical Pharmacy 2005.
[8] Wietholtz, H., Zysset, Th., Kreiten, K., Kohl, D., Büchsel, R., Matern,
S., European Journal of Clinical Pharmacology, 1987, 36, 401-406.
9
[9] Thorn, C.F., Whirl-Carrillo, M., Leeder, J.S., Klein, T.E., Altman, R.B.,
Pharmacogenetics and Genomics 2012, 22, 466-470.
[10] American Pharmacist Association. Drug Information Handbook with
International Trade Names Index, 21st Edn., Lexicomp 2012.
[11] Kerry, E.C., Lisa, L.M., Jerold, S.H., David, J.G., British Journal of
Clinical Pharmacology 2005, 60, 486-493.
[12] Donna, C.B., Epilepsy Curr 2009, 9, 102–104.
[13] Espen, B., Magne, A.F., Psychopharmacology (Berl) 2011, 215, 537–
548.
[14] Walzer, M., Bekersky, I., Blum, R.A., Tolbert, D., Pharmacotherapy
2012, 32, 340-353.
[15] Merideth, A.A., Paul, J.L., Psychopharmacology (Berl) 2009, 207, 423-
431.