Praktikum Genetika (Modul 5) – 2019
Sakina (10617056)
Penggunaan Mikropipet
Gerald Yudha Putra
 Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati, Institut Teknologi Bandung
Jalan Ganesha 10, Bandung 40132 Indonesia
e-mail: geraldyudha@s.itb.ac.id
Abstrak
Mikropipet menjadi alat utama dalam bidang
biologi molekuler. Pemahaman akan mikropipet
harus ditanamkan kepada biologis biologis masa
depan. Presisi dan akurasi merupakan hal yang
menjadi dasar dari penggunaan mikropipet.
Kata kunci
Mikropipet, akurasi, presisi, Eppendorf, kental,
encer.
Pendahuluan
Pipet adalah alat laboratorium yang biasa
digunakan dalam kimia, biologi dan obat-obatan
untuk mengangkut volume cairan yang diukur,
sebagai media dispenser. Pipet digunakan untuk
membantu memasukkan cairan dalam jumlah
kecil ke dalam suatu media. Pipet sederhana
pertama dibuat dari kaca, seperti pipet
Pasteur. Pipet-pipet besar terus dibuat dari
kaca; yang lain dibuat dari plastik yang dapat
dipencet untuk situasi di mana volume yang
tepat tidak diperlukan. Mikropipet pertama
dipatenkan pada tahun 1957 oleh Dr Heinrich
Schnitger (Marburg, Jerman). Pendiri
perusahaan Eppendorf, Dr. Heinrich Netheler,
1
mewarisi hak-hak tersebut dan memulai produksi
komersial mikropipet pada tahun 1961.
Mikropipet yang dapat disesuaikan adalah
penemuan Wisconsin yang dikembangkan melalui
interaksi di antara beberapa orang, terutama
penemu Warren Gilson dan Henry Lardy, seorang
profesor biokimia di University of Wisconsin-
Madison [1]
.
Mikropipet digunakan dalam pengukuran dan
pemindahan suatu cairan dalam skala volume
mikro yang mempunyai tingkat akurasi dan
presisi yang baik. Mikropipet membantu dalam
pengambilan zat cair yang memiliki skala pasti
dalam mengambil zat dalam mikroliter dan
memiliki akurasi yang tinggi [1]
.
Mikropipet digunakan bersamaan dengan tips
sebagai wadah bagi larutan sampel yang akan
diambil. Prinsip pengambilan larutan dengan
mikropipet adalah pergantian volume udara yang
dikeluarkan oleh mikropipet dengan larutan.
Piston yang berada di dalam mikropipet akan
berpindah posisi ketika volumenya sudah diatur.
Posisi pertama disebut “first stop” digunakan
untuk mengisi tips, ketika menekan tombol
pengatur volume pada first stop, piston internal
mengeluarkan volume udara sama dengan volume
yang ditampilkan pada indikator volume sehingga
larutan yang masuk sama dengan volume udara
Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati :::
2 Praktikum Genetika (Modul 2) - 2019

yang keluar. Posisi kedua disebut “second stop”

digunakan untuk mengeluarkan isi tips. Cara Kerja
Bagian-bagian pada mikrometer terdiri atas
tombol pengatur volume, cincin pengatur Pertama adalah prosedur pengujian kebocoran
volume, tombol untuk melepaskan tips, lalu pada mikropipet. Awalnya mikropipet diatur
angka penunjuk volume (dibaca dari atas ke volumenya hingga batas maksimal. Kemudian tip
bawah), tempat menempatkan tips. Pada diisi dengan akuades dengan cara dicelupkan lalu
mikropipet dilengkapi pula oleh sebuah tips, tips diangkat dan ditunggu selama 20 detik dalam
merupakan pelengkap (pasangan) mikropipet posisi tegak. Diamati apakah terjadi kebocoran.
yang diletakkan pada ujung pipet [4]
. Jika ada, akan terdapat air yang menetes.
Berdasarkan Surat SOP (Standard Kemudian tip dicelupkan kembali ke dalam air.
Operating Procedure) produk mikropipet Apabila terjadi penurunan tinggi air, pasti
Eppendorf (2013), mikropipet yang layak pakai terjadi kebocoran pada mikropipet dengan
adalah mikropipet yang akurat dan presisi. volume ≤ 200 µL.
Mikropipet harus akurat yaitu memiliki nilai
pengukuran sesuai dengan yang diharapkan. Kedua adalah prosedur pengujian akurasi dan
Akurat atau tidaknya suatu mikropipet diukur presisi mikropipet. Pertama, mikropipet diatur
melalui besarnya persentase error. Semakin kecil pada volume yang akan di ambil (800 µL, 80
nilai persentase error, mikropipet semakin µL, atau 8 µL). Berat air atau gliserol yang
akurat. diharapkan dihitung. Kemudian microtube
Mikropipet juga harus presisi yang mana kosong ditimbang dan dicatat beratnya. Tombol
setiap kali pengukuran selalu memberi hasil “TARE” ditekan hingga timbangan analitik
pengukuran yang relatif sama. Presisi atau menunjukkan angka 0.000. Selanjutnya akuades
tidaknya suatu mikropipet ditentukan melalui atau gliserol diambil dan dimasukkan ke dalam
besarnya relatif standar deviasi. Semakin kecil microtube lalu ditimbang. Selanjutnya volume
nilai relatif standar deviasi, mikropipet semakin cairan yang diambil dihitung dengan
presisi. menggunakan faktor konversi. Pengulangan
Adapun tujuan dari percobaan ini adalah pengukuran dilakukan dan dihitung volume
menentukan akurasi dan presisi dari mikropipet. reratanya. Lalu volume rerata dibandingkan
dengan volume yang diharapkan. Nilai E%, RSD,
Materi dan Metode dan SD dihitung da dibandingkan dengan hasil
literatur.
Alat dan Bahan

Pada praktikum ini digunakan alat seperti

mikropipet sendiri dan timbangan analitik.
Kemudian bahan yang digunakan adalah akuades,
gliserol, microtube, dan tips.
Praktikum Genetika (Modul 5) – 2019 3
Sakina (10617056)

Hasil dan Pembahasan A1 1.04 1.86 0.82

Hasil Pengamatan A2 1.13 1.81 0.77

Tabel 1. Kode warna dan rentang volume A3 1.03 1.73 0.7

mikropipet “Eppendorf”
G1 1.04 1.35 0.26

G2 1.03 1.21 0.18

G3 1.04 1.18 0.14

Tabel 2 Hasil Perhitungan Data

Dengan keterangan:
Larutan
A = Akuades (1,0 g/mL)
G = Gliserol (1,26 g/mL)
BT = Berat Tabung
L = Larutan

Lalu data diolah dan diperoleh beberapa nilai

seperti rerataan volume larutan, standar
deviasi, persen galat (E %), dan RSD.

Tabel 3. Hasil pengolahan data

Pertama diukur hasil pengukuran mikropipet Kelompok 12
dengan menggunakan dua jenis larutan dengan Volume Larutan (mL)
viskositas berbeda. Seperti yang diketahui bahwa
A1 = 0.82 G1 = 0.21
larutan yang digunakan adalah akuades dan
A2 = 0.77 G2 = 0.14
gliserol.
A3 = 0.7 G3 = 0.11
Tabel 1 Hasil pengamatan berat larutan
Rataan A = 0.76 Rataan G = 0.15

St. Dev A = 0.06 St Dev G = 0.06

Kelompok 12
E% = 0.43 E% = 80.89
Berat Berat Berat
Tabung Tabung+Larutan Larutan RSD = 7.55 RSD = 42.11
Larutan (gr) (gr) (gr)

Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati :::

4 Praktikum Genetika (Modul 2) - 2019

Perhitungan di atas dilakukan berdasarkan

rumus:
1. Rerata
3
1
𝑉̅𝐴 = ∑ 𝐴𝑖
𝑛
𝐴=1
Atau
3
1
̅̅̅
𝑉𝐺 = ∑ 𝐺𝑖
𝑛
𝐺=1

2. Standar Deviasi
3
1
𝜎=√ ∑(𝑉𝑖 − 𝑉̅ )2
𝑛−1
𝑖=1

3. Persen Galat
𝑉̅ − 𝑉0
𝐸=| | × 100%
𝑉0
4. RSD
𝜎
𝑅𝑆𝐷 =
× 100%
𝑉̅
5. Faktor Konversi
𝑚
𝑉=
𝜌

Selanjutnya dari beberapa kelompok dikompilasi

dan diperoleh data mengenai E% dan RSD.
Grafik E% dan RSD Pengambilan
Akuades Menggunakan Mikropipet
14

12

10

0
Kel 9 Kel 10 Kel 11 Kel 12 Kel 13 Kel 14 Kel 15 Kel 16

E (%) RSD (%)

Praktikum Genetika (Modul 5) – 2019 5
Sakina (10617056)
Gambar 1. Grafik E % dan RSD kompilasi data internal mengeluarkan volume udara sama
akuades instruk timur dengan volume yang ditampilkan pada indikator
volume sehingga larutan yang masuk sama
Grafik E% dan RSD (%) dengan volume udara yang keluar. Posisi kedua
Pengambilan Gliserol
Menggunakan Mikropipet
disebut “stop kedua” digunakan untuk
membuang isi tips.
100

80
Bagian-bagian pada mikrometer terdiri dari
60
volume knob untuk menentukan volume larutan
40 yang akan diambil, tombol melepas tips untuk
20 melepaskan tips dari mikrometer, tombol stop
0 digunakan untuk mengambil atau membuang
Kel 9 Kel Kel Kel Kel Kel Kel Kel larutan, angka penunjuk volume, tempat
10 11 12 13 14 15 16
menempatkan tips pada ujung pipet [4]
. Berikut
E (%) RSD (%)

Gambar 2. Grafik E% dan RSD kompilasi data

gliserol instruk timur

Pembahasan

Mikropipet merupakan alat presisi yang didesain

untuk pengukuran dan pemindahan larutan
dengan volume kecil (skala mikroliter) yang
akurat. Kapasitas volume yang dapat diambil
oleh mikropipet pada umumnya sekitar 1μl-
1.000 μl. Merk mikropipet yang paling umum
digunakan adalah Eppendorf, Hamilton, Rainin,
Drummond, Brand Tech, dan Biohit. Mikropipet
digunakan bersamaan dengan tip sebagai wadah
bagi larutan sampel yang akan diambil. Prinsip
pengambilan larutan dengan mikropipet adalah
pergantian volume udara yang dikeluarkan oleh
mikropipet dengan larutan. Apabila tombol
pengatur volume (Plunger) ditekan, tekanan
tersebut akan menggerakkan sebuah piston
internal untuk salah satu dari dua posisi yang
berbeda. Posisi pertama disebut “stop
pertama” digunakan untuk mengisi ujung
mikropipet, ketika praktikan menekan tombol
pengatur volume pada stop pertama, piston

Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati :::

6 Praktikum Genetika (Modul 2) - 2019

merupakan gambar dan rincian bagian-bagian dari ketidakpresisian ≤ 3%. Sedangkan untuk
mikropipet : pengambilan gliserol hanya terdapat 2 dari 8
A = Tombol pengatur volume kelompok yang dengan akurat mengambil volume
(Stop pertama digunakan untuk volume yang ditentukan dengan ambang batas galat
yang diharapkan. Stop kedua digunakan sebesar ≤ 3%. Lalu untuk tingkat presisinya
untuk mengeluarkan sisa cairan dalam hanya terdapat 1 dari 8 kelompok yang dapat
tip) mengambil larutan secara presisi dengan batas
B = Tombol untuk melepaskan tips ≤ 3%. Secara umum nilai akurasi dan presisi
C = Angka penunjuk volume pada pengambilan akuades relatif lebih tinggi
D = Cincin pengatur volume daripada gliserol karena ada faktor fisik seperti
E = Tempat menempatkan tips viskositas cairan. Gaya gesesk, shear stress , dan
resistensi dari fluida menyebabkan hambatan
pada ujung tip. Jenis fluida yang lebih rapat
daripada air akan menyebabkan gaya tarik pada
mekanisme air cushion sehingga volume yang
teraspirasikan akan lebih kecil daripada yang
diekspektasikan.
Penekanan tombol sampai stop 1 hanya pada
pengambilan larutan encer, sedangkan penekanan
tombol sampai stop 2 ada pengambilan larutan
kental. Hal ini dikarenakan larutan yang bersifat
encer memiliki viskositas rendah menjadi mudah
tertarik sedangkan viskositas larutan kental
lebih tinggi dan tidak mudah tertarik. Tombol
stop 2 juga digunakan untuk mengeluarkan
seluruh cairan yang berada di alam tips [4]
.
Adapun terdapat lima jenis pipet lainya
selain mikropipet, yaitu pipette-aid, serological
pipette, transfer pipette, pasteur pipette, dan
capilarry tube. Baik pipet aid dan serological aid,
Gambar 3 Mikropipet dan bagianya fungsinya sama-sama untuk memindahkan
larutan dengan jumlah yang lebih besar dan
Dari data yang diperoleh, sebagian memiliki volumenya tidak fix. Transfer pipette dan
tingkat akurasi dan presisi yang tinggi sedangkan pasteur pipette sama-sama untuk memindahkan
yang lainnya tidak. Pada data pengambilan
akuades, terdapat 4 dari 8 kelompok yang dapat
dikatakan hasil mikropipetnya cukup akurat
dengan dasar dikatakan akurat adalah galat ≤
3%. Kemudian untuk tingkat presisinya 5 dari 8
kelompok cukup presisi dengan tingkat
Praktikum Genetika (Modul 5) – 2019 7
Sakina (10617056)
larutan tetapi tidak memiliki tingkat akurasi dan aspirasi dan dilepas hingga stop-1 untuk
presisi seperti pipet lainnya. pengeluaran. Jadi, berdasarkan tingkat akurasi
dan presisi, mikropipet masih dapat digunakan
untuk cairan dengan densitas normal seperti
akuades sedangkan untuk cairan dengan densitas
tinggi kurang direkomendasikan.
Pada praktikum ini disarankan agar teknik
penggunaan mikropipet lebih diperhatikan agar
tingkat akurasi dan presisi dapat sesuai yang
diharapkan.

Ucapan Terima Kasih

Terima kasih nymphaeaku, himpunanku,

himpunan yang kucinta.
Gambar 1 Jenis-jenis pipet
Daftar Pustaka

[1] Klingenberg, M., 2005. When a common

Kesimpulan problem meets an ingenious mind. EMBO
Mikropipet memiliki akurasi sebesar 99,57% dan reports, 6(9), pp.797-800.
[2] Pipette.com. 2019. “Guide to Pipetting”.
presisi 92,45% pada akuades dan akurasi sebesar
<https://www.pipette.com/public/staticpages/g
20,11% dan presisi 57,89% pada gliserol.
uidetopipetting.aspx?menuid=493. Diakses 15
Perbedaan pada saat menggunakan mikropipet
Oktober 2019.
dengan viskositas larutan yang berbeda adalah [3] Skoog, D. A., West, D. M. & Holler, F. J.,
mekanisme stop-1 dan stop-2 yang terbalik. 1996. Fundamental of analytical chemistry. 7th
Untuk larutan encer, pertama ditekan sampai ed. Fort Worth: Saunders College Publishing.
stop-1 untuk aspirasi dan stop-2 ditekan untuk [4] Gilson, 2005. Gilson Guide to Pipetting. 2nd ed.
mengeluarkannya. Sedangkan untuk larutan USA: Gilson Inc..
kental, pertama ditekan sampai stop-2 untuk

Sekolah Ilmu dan Teknologi Hayati :::