PROTOONKOGEN DAN ONCOGEN SELULER Onkogen

retroviral dan yang menyandikan protein dengan Gen dengan sekuens DNA yang sangat mirip dengan
sifat serupa telah diidentifikasi dalam genom hewan yang lebih tinggi termasuk manusia dengan
menggunakan dua pendekatan eksperimental yang berbeda. (1) Salah satu pendekatan yang terlibat
mencari sekuens DNA seluler yang akan saling silang dengan onkogen virus hewan. (2) Pendekatan
kedua melibatkan pencarian langsung gen penyebab kanker dalam genom sel kanker melalui
percobaan transfeksi, percobaan di mana DNA sel tumor diisolasi dan ditambahkan ke sel kultur
jaringan normal untuk melihat apakah akan mengubah dari mereka ke keadaan kanker. Kedua
pendekatan telah berhasil dan, dalam beberapa kasus, keduanya menghasilkan identifikasi onkogen
seluler yang sama. Gen yang homolog dengan beberapa onkogen virus bahkan ada pada eukariota
yang lebih rendah seperti ragi.

Homologi dengan Viral Oncogenes

Seperti yang disebutkan sebelumnya, onkogen src pertama kali diidentifikasi dalam genom virus Rous
sarcoma (RSV) yang diisolasi dari ayam. Ketika reverse transcriptase digunakan untuk mengubah
onkogen src dari RSV ke bentuk CDNA (lihat Gambar 13.3 untuk ilustrasi aksi reverse transcriptase)
dan CDNA ini diberi label dengan 32P dan digunakan sebagai eksperimen hibridisasi (Bab 13) dengan
DNA genomik dari ayam normal, CDNA src dihibridisasi dengan potongan DNA genomik pembatasan
spesifik dalam setiap percobaan. Ini benar terlepas dari penyelidikan di sumber Southern blot DNA
genomik ayam. Selain itu, sekuens DNA genomik serupa yang berhibridisasi dengan probe src CDNA
telah diidentifikasi pada semua vertebrata hewan dan bahkan dalam buah terbang Drosophila
melanoaster.

Eksperimen selanjutnya telah menunjukkan bahwa genomik DNAS dari sel normal (non-kanker) semua
hewan yang lebih tinggi mengandung sekuens DNA yang disatukan dengan dasarnya semua urutan
onkogen retroviral. Dalam beberapa kasus, sekuens yang homolog dengan onkogen retroviral (mis.,
Ras) bahkan ditemukan pada eukariota yang lebih rendah seperti Saccharomyces cerevisiae.