I.

PRINSIP
Reagen ALT / GPT ini didasarkan pada rekomendasi IFCC tanpa
piridoksal fosfat.
Rangkaian reaksi yang terlibat dalam sistem pengujian adalah sebagai
berikt: ALT/GPT
T

L-Alanine + 2-oxoglutarate
Pyruvate + L-Glutamate

LDH
Pyruvate + NADH
L-Laktat + NAD+

LDH
Sampel pyuvate + NADH L-Laktat + NAD

II. ALAT DAN BAHAN

1. Alat :
 Mikropipet + tip
 Spektrofotometer
 Tabung serologi
 Rak tabung
 Beaker glass
 Centrifuge

2. Bahan dan reagen merk ERBA :

 Reagen :

R1 Volume
Tris buffer (pH 7.5) 137.5 mmol/ I
L-Alanine 709 mm0l/ I
LDH (microbial) ˃ 2000

R2 Volume
CAPSO 20 mmol/ I
 2-oxoglutarate 85 mmol/ I
NADH 1.05 mmol/ I R2

 Bahan : Serum plasma

III. CARA KERJA (ERBA Mannheim)

1. Campur reagen 1 dan 2 dengan perbandingan 4:1 (contoh : 1000 µL R1
dengan 250 µL R2) homogenkan → WR (working reagen)

2. Setelah disiapkan WR maka dilanjutkan dengan prosedur dalam tabel

Sampel
Working Reagen (WR) 500 µl
Sampel 50 µl
Homogenkan, langsung dibaca pada spektrofotometer dengan
Panjang gelombang 340 nm, Hg 334 nm, Hg 365 nm pada Suhu
37oC (inkubasi dilakukan dalam alat 1 menit dan pengukuran
serapan dibaca pada alat 1,2 dan 3 menit).

Kalkulasi :

∆A sam/min

1. ALT/GPT (U/I) = X Ccal

∆A cal/min

Ccal = konsentrasi kalibrator

2. Faktor yang digunakan : ALT/GPT = fx ∆A/min f=faktor

Faktor pada suhu 37oC

Sample start (f)

Pada 340 nm 1745
Pada 334 nm 1780

Pada 365 nm 3235

Konversi UNIT

U / I x 0,017 = µkat / I