Konstruksi Transgenimg11-1-5
Introduksi Gen Target
Pada tahap ini konstruksi transgen di introduksikan kedalam sel tanaman varietas komersial
yang akan diperbaiki, sehingga gen target menyisip ke dalam genom target. Dilakukan dengan
dua pendekatan yaitu:
Pada tahap ini dari sekian banyak sel yang sudah diintroduksi, harus diseleksi sel mana yang
sudah mengintegrasikan gen target kedalam genom intinya. Seleksi dilakukan dengan
menumbuhkan sel-sel yang diintroduksi pada media yang diberi agen penseleksi, sehingga
tanaman yang dapat tumbuh diasumsikan sudah disisipi gen baru. Selanjutnya dikonfirmasi
dengan marka DNA.
Reproduksi Menjadi Tanaman Sempurna
Sel yang sudah disisipi gen baru harus direproduksi menjadi tanaman sempurna yang dapat
diamati penotifnya untuk memastikan gen tersebut mampu berexpresi secara normal, sehingga
dapat bermanfaat sesuai tujuan pengembangan.
Seleksi di Lapangan
Tujuan: Identifikasi galur transgenik yang memiliki penotipe seperti yang diharapkan. Peluang
keberhasilan suatu galur transgenik sekitar 1%.
Ekspresi tergantung posisi pada kromosom.
Transgenik yang komplek kurang stabil karena:
gene silencing
rekombinasi antar DNA transgene
Transgen tidak boleh memberikan efek negatif terhadap sifat lain
Tanaman transgenik harus memenuhi aturan