JKK, tahun 2012, volume 1 (1), halaman 45-48 ISSN 2303-1077

TOTAL FENOL FRAKSI ETIL ASETAT DARI BUAH ASAM KANDIS

(Garcinia dioica Blume)

Tursiman1*, Puji Ardiningsih1, Risa Nofiani1

1
Program Studi Kimia Fakultas MIPA, Universitas Tanjungpura,
Jl. Prof. Dr. H. Hadari Nawawi 78124
*Email: simanchem08@yahoo.com

ABSTRAK
Buah asam kandis merupakan salah satu tumbuhan genus Garcinia. Genus ini banyak mengandung
senyawa golongan fenolik jenis flavon yang diketahui memiliki sifat antioksidan. Penelitian ini bertujuan
untuk mengetahui aktivitas antioksidan fraksi etil asetat dari buah asam kandis (Garcinia dioica Blume)
dengan penentuan kandungan total fenol. Fraksi etil asetat diperoleh melalui tahap maserasi dan partisi
menggunakan pelarut metanol, n-heksana dan etil asetat. Fraksi metanol memiliki nilai rendemen
terbesar yaitu 68,67% kemudian diikuti oleh fraksi etil asetat 25,52% dan fraksi n-heksana 3,67%. Total
fenol ditentukan dengan metode follin-ciocateu. Total fenol fraksi etil asetat dari buah asam kandis
(Garcinia dioica Blume) sebesar 28,83 ± 12,83 ppm.

Kata kunci : Asam kandis (Garcinia dioica Blume), antioksidan, fenol, follin-ciocateu.

PENDAHULUAN enil) santon, isosantosimol, dan epikatekin.

Antioksidan adalah zat yang dapat
menangkal atau mencegah reaksi oksidasi yang
disebabkan oleh radikal bebas. Antioksidan
mampu menghambat radikal bebas dan
mengubahnya menjadi senyawa non radikal.
Antioksidan pada dasarnya telah terdapat di
dalam tubuh manusia, namun saat pasokan
radikal bebas terlalu banyak di dalam tubuh
maka antioksidan dari luar sangat dibutuhkan
(Romansyah, 2011). Berdasarkan sumber
perolehannya terdapat dua jenis antioksidan,
yaitu antioksidan alami dan antioksidan sintetik.
Antioksidan alami lebih banyak diminati
dibandingkan antioksidan sintetik, karena
antioksidan sintetik diketahui dapat
menyebabkan karsinogenesis (Rohman dan
Riyanto, 2005). Antioksidan alami dapat
diperoleh dari berbagai jenis tumbuhan karena
mengandung senyawa kimia yang memiliki
gugus hidroksi yang terikat pada cincin benzena
sehingga berpotensi sebagai antioksidan.
Indonesia merupakan negara tropis yang
memiliki berbagai jenis tumbuhan buah yang
berkhasiat untuk menjaga kesehatan tubuh.
Genus Garcinia merupakan tumbuhan tropis
yang temasuk dalam famili Clusiaceae dan
mempunyai sekitar 180 spesies, tumbuhan ini
umumnya dikenal sebagai tumbuhan manggis-
manggisan (Ilyas et al., 1994). Tumbuhan genus
Garcinia kaya akan senyawa santon, selain itu
ditemukan juga senyawa fenolik seperti jenis
flavonoid, benzofenon dan antrakuinon (Chen et
al., 2010). Tiga senyawa fenol dari kulit batang
manggis hutan (Garcinia bancana miq) telah
berhasil diisolasi yaitu mengandung senyawa
1,5-dihidroksi-3,6- dimetoksi-2,7-di-(3-metilbut-2-
Ketiga senyawa tersebut termasuk aktif
sitotoksik dengan IC50 masing -masing 10,1; 6,6
dan 3,6 μg/mL (Muharni et al., 2011). Studi
senyawa fenol dari kulit batang manggis hutan
(Garcinia Bancana miq) telah berhasil diisolasi
satu senyawa fenol tipe flavon yaitu epikatekin.
Aktivitas antioksidannya juga telah diuji dengan
metode DPPH dan kemampuan menghambat
aktivitas enzim santin oksidase menunjukkan
aktivitas antioksidan yang tinggi dengan IC50
berturut-turut 8,1 dan 8,6 g/mL (Muharni et al.,
2009). Kolaviron adalah jenis biflavonoid yang
diperoleh dari Garcinia kola (Soauza et al.,
2002). Biflavon jenis morelloflafon diisolasi dari
kulit batang Garcinia atroviridis (Permana et al.,
2003). Senyawa tersebut diketahui memiliki
aktivitas biologis dan farmakologis seperti
antibakteri dan antioksidan Muharni et al.,
2009).
Uji pendahulan pada fraksi etil asetat buah
asam kandis menujukkan fraksi tersebut dapat
menghambat pembusukan pada ikan nila
(Oreochromis niloticus). Fraksi etil asetat
sebanyak 1600 µm/ml dengan kombinasi garam
15 % mampu mempertahankan kesegaran ikan
nila selama 18 jam pada suhu 25-28oC
(Rudiansah, 2012). Peran suatu senyawa dalam
proses pengawetan makanan berhubungan
dengan kemampuan dalam menghambat
pertumbuhan bakteri dan reaksi oksidasi.
Umumnya senyawa yang berperan sebagai
antibakteri juga memiliki aktivitas antioksidan,
namun aktivitas antioksidan pada buah asam
kandis belum diketahui. Oleh karena itu perlu
dilakukan penelitian yang bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antioksidan fraksi etil
asetat dari buah asam kandis (Garcinia dioica

45
JKK, tahun 2012, volume 1 (1), halaman 45-48
Blume) dengan penentuan kandungan total
fenol.
METODOLOGI PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini
adalah alat-alat yang umum digunakan di
Laboratorium Kimia seperti neraca analitik, pipet
kapiler, pipet ukur, seperangkat alat gelas,
seperangkat alat ekstraksi seperangkat alat
evaporasi dan spektrofotometer.
Bahan-bahan yang digunakan adalah
sampel buah asam kandis, akuades (H2O),
Asam tanat (C76H52O46), etil asetat
(CH3COOCH3), metanol (CH3OH), n-heksana
(C6H14), natrium karbonat (Na2CO3), reagen
Folin-Ciocalteu.
Preparasi Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini
adalah buah asam kandis (G. dioica Blume)
yang berasal dari daerah Mengkiang,
Kecamatan Sanggau Kapuas, Kabupaten
Sanggau, Provinsi Kalimantan Barat. Sampel
buah asam kandis dibersihkan, daging buah
dipotong tipis-tipis dan dikering anginkan.
Sampel kering dihaluskan sampai menjadi
serbuk di Workshop Fakultas Kehutanan,
Universitas Tanjungpura.
Ekstraksi dan Partisi
Serbuk kering daging buah asam kandis 1,5
kg dilakukan maserasi dengan pelarut metanol
pada suhu ruang. Proses maserasi dilakukan
selama 3 x 24 jam. Ekstrak kemudian disaring
untuk mendapatkan filtrat dan residu. Maserat
yang dihasilkan disaring, dikumpulkan dan
diuapkan dengan rotary evaporator, sehingga
diperoleh ekstrak metanol.
Ekstrak metanol dengan berat sekitar 100 g
kemudian dilakukan partisi menggunakan pelarut
dengan tingkat kepolaran yang berbeda.
Pertama menggunakan pelarut n-heksana, fraksi
metanol kemudian dilakukan partisi kembali
dengan pelarut etil asetat dan diperoleh fraksi
etil asetat. Fraksi etil asetat yang diperoleh,
selanjutnya dipekatkan menggunakan rotary
evaporator dan digunakan untuk tahap uji
aktivitas antioksidan.
Penentuan kandungan total fenol
Uji kandungan total fenol ditentukan
menggunakan metode Folin-Ciocalteu mengacu
pada metode Bhaskar et al ( 2011). Sebanyak
0,5 mL fraksi etil asetat 0,1% ditambahkan 0,75
mL reagen Folin-Ciocalteu 10% dan 2 mL
Na2CO3 (2% w/v). Campuran dihomogenkan
dengan vorteks selama 15 detik dan dipanaskan
pada suhu 45oC selama 15 menit. Absorbansi
46
ISSN 2303-1077
diukur pada λmaks 745 nm menggunakan
spektrofotometer UV-Vis.
Kurva standar asam tanat ditetapkan
dengan menggunakan persamaan regresi linier,
yang menyatakan hubungan antara konsentrasi
asam tanat yang dinyatakan sebagai sumbu X
dengan besarnya absorbansi hasil reaksi asam
tanat dengan pereaksi Folin-Ciocalteu yang
dinyatakan sebagai sumbu Y. Kandungan total
fenol dinyatakan sebagai mg/g ekuivalen asam
tanat yang diperoleh dari persamaan kurva
standar yaitu:
Y= ax + c
Keterangan :
Y=Absorbansi sampel
a=Gradien
X=Konsentrasi ekivalen asam tanat
C=Intersef
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi dan partisi
Ekstraksi buah asam kandis dilakukan
dengan metode maserasi menggunakan pelarut
metanol tanpa pemanasan dengan tujuan agar
senyawa-senyawa dapat terekstrak dengan baik
dan tidak mengalami dekomposisi. Metanol
dapat merusak dinding sel pada sampel
sehingga senyawa yang bersifat polar ataupun
non polar dapat terlarut dalam metanol. Selama
proses maserasi ini terjadi proses difusi. Proses
ini berlangsung sampai terjadi keseimbangan
antara larutan yang ada di dalam sel dan di luar
sel. Ketika keseimbangan tercapai maka proses
difusi tidak lagi berlangsung (Khopkar, 2008).
Hasil maserasi sampel degan pelarut
metanol diperoleh rendemen sekitar 26,66%.
Ekstrak berbentuk cairan kental dan berwarna
coklat kehijauan. Kecilnya nilai rendemen yang
dihasilkan dapat dimungkinkan oleh beberapa
faktor, yaitu metode ekstraksi yang digunakan,
ukuran partikel sampel, kondisi dan waktu
penyimpanan, lama waktu ekstraksi,
perbandingan jumlah sampel terhadap jumlah
pelarut yang digunakan dan jenis pelarut yang
digunakan (Salamah et al., 2008).
Partisi pada buah asam kandis bertujuan
untuk memisahkan senyawa berdasarkan
kelarutannya terhadap pelarut dengan tingkat
kepolaran yang berbeda. Partisi dilakukan
dengan pelarut n-heksana dan etil asetat.
Senyawa non polar yang berada pada ekstrak
metanol akan terdistribusi ke dalam pelarut n-
heksana dan senyawa yang bersifat semi polar
akan terekstrak pada pelarut etil asetat. Hasil
partisi ekstrak metanol buah asam kandis
diperoleh tiga fraksi yaitu fraksi terlarut n-
JKK, tahun 2012, volume 1 (1), halaman 45-48
heksana, fraksi terlarut etil asetat dan fraksi
terlarut metanol (Tabel 1.).
Tabel 1. Rendemen fraksi n-heksana, etil asetat dan
metanol buah asam kandis
Jenis Pelarut % Rendemen Warna Fraksi
n-heksana 3,67 Coklat
Etil asetat* 25,52 Coklat kemerahan
Metanol 68,67 Coklat kehitaman
Keterangan : * Fraksi yang digunakan tahap uji
kandungan total fenol
Perbedaan jenis pelarut mempengaruhi
jumlah ekstrak yang dihasilkan, pelarut metanol
memiliki rendemen paling tinggi, diikuti
rendemen ekstrak etil asetat dan rendemen
ekstrak n-heksana secara berturut-turut.
Tingginya rendemen yang terdapat pada pelarut
metanol menunjukkan pelarut tersebut mampu
mengekstrak lebih banyak komponen bioaktif
yang memiliki sifat kepolaran yang lebih tinggi.
Hal tersebut dapat terjadi karena metanol
memiliki gugus polar yang lebih kuat daripada
gugus nonpolar, hal ini dapat terlihat dari struktur
kimia metanol yang mengandung gugus hidroksil
(polar) dan gugus karbon (nonpolar) (Ukhty,
2011). Rendemen pada pelarut etil asetat lebih
kecil dibandingkan dengan pelarut metanol
namun lebih besar dari pelarut n-heksana, hal ini
dimungkinkan adanya gugus etoksi yang
terdapat pada struktur kima etil aseat. Adanya
gugus etoksi tersebut yang menyebabkan etil
asetat dapat membentuk ikatan hidrogen dengan
senyawa yang terdapat pada sampel. Ikatan
hidrogen yang terbentuk pada pelarut etil aseat
lebih lemah dibandingkan dengan ikatan
hidrogen yang terbentuk pada pelarut metanol
sehingga rendemen pada fraksi etil aseat lebih
sedikit. Hal ini didukung oleh penelitian
sebelumnya yaitu pada ekstrak kulit manggis
(Garcinia mangostana L) fraksi metanol memiliki
nilai rendemen yang terbesar yaitu 22,27%
kemudian diikuti oleh fraksi etil asetat 11,54 %
(Mardawati et all., 2008 ). Nilai rendemen terkecil
terdapat pada fraksi terlarut n-heksana, hal ini
menunjukkan bahwa senyawa bioaktif yang
bersifat non polar pada sampel buah asam
kandis jumlahnya sedikit.
Penentuan kandungan total fenol
Uji kandungan total fenol bertujuan untuk
mengetahui jumlah fenol yang terdapat pada
sampel. Uji kandungan total fenol dilakukan
dengan metode Follin-Ciocalteu. Reaksi yang
terjadi adalah reaksi reduksi-oksidasi. Senyawa
fenolik mereduksi fosfomolibdat fosfotungstat
dalam Folin-Cioucalteu membentuk molibdenum
yang berwarna biru. Adapun reaksi yang terjadi
sebagai berikut :
47
ISSN 2303-1077
OH O
H3PO4(Mo3)12 +
+ OH2 + H6(PMo12O40)
Komplek molybdenum biru
Reagen follin-Ciocalteu Senyawa fenol O
Kuinon
Gambar 1. Reaksi reagen Follin-Cioucalteu dengan
senyawa fenol
Kandungan total fenol yang terdapat pada
fraksi etil asetat sebesar 28,83 ± 12,83 ppm
asam tanat. Kandungan total fenol diperoleh dari
persamaan y=0,0067x+0,0006 (Gambar 2).
Aktivitas antioksidan berbanding lurus dengan
total fenol, semakin tinggi kandungan fenol
dalam suatu bahan semakin tinggi pula
aktivitasnya sebagai antioksidan (Huang et all.,
2005). Hal ini juga didukung oleh penelitian
Hadriyanto (2011) tehadap kulit manggis
(Garcinia mangostana L) yang menunjukkan
bahwa terdapat hubungan yang berbanding
lurus antara kandungan total fenol dan aktivitas
antioksidan.
1
0,8 y = 0,0067x + 0,0006
Absorbansi
R² = 0,9625
0,6
0,4
0,2
0
0 50 100 150
Konsntrasi asam tanat (ppm)
Gambar 2. Grafik hubungan antara konsentrasi asam
tanat terhadap absorbansi
Pada umumnya senyawa yang memiliki
bioaktivitas sebagai antioksidan adalah senyawa
golongan fenol yang memiliki gugus hidroksi
yang tersubstitusi pada cincin benzena dengan
posisi orto dan para terhadap gugus –OH dan –
OR. Senyawa fenol menghambat radikal bebas
dengan cara mendonorkan protonnya dan
membentuk radikal yang stabil. Terbentuknya
radikal stabil ini dikarenakan elektron bebas
yang terdapat pada radikal distabilkan oleh
delokalisasi elektron dengan adanya resonansi
pada cincin aromatik. Selain itu berdasarkan uji
fitokimia diketahui bahwa fraksi etil asetat
mengandung senyawa golongan fenolik,
flavonoid, alkaloid dan saponin (Rudiansah,
2012). Adanya kandungan senyawa-senyawa
tersebut yang menyebabkan fraksi etil asetat
dari buah asam kandis memiliki peran sebagai
antioksidan. Hal ini juga didukung oleh penelitian
sebelumnya, fraksi tersebut mampu mencegah
terjadinya pembusukan pada ikan nila
(Oreochromis niloticus) (Rudiansah, 2012).
JKK, tahun 2012, volume 1 (1), halaman 45-48 ISSN 2303-1077

Adanya kemampuan dalam menghambat Muharni, Dachriyanus, Husein H., Bahti, and
pembusukan pada ikan nila (Oreochromis Supriyatna., 2011, Evaluasi Aktivitas
niloticus) menjelaskan fraksi tersebut mampu Sitoksik Senyawa Fenol Dari Kulit Batang
mencegah terjadinya reaksi oksidasi. Oleh Manggis Hutan (Garcinia Bancana Miq.),
karena itu buah asam kandis dapat dijadikan Mulawarman Scientifie, 10(1), FMIPA
sebagai sumber antioksidan alami yang dapat Universitas Mulawarman.
diaplikasikan pada bidang pangan dan Permana, D., Lajis, N.H., Kitajima M.,
kesehatan. Takayama, H And Aimi, N., 2003,
Morelloflavon, A Biflavonoid from The trukn
SIMPULAN Bark of Garcinia atroviridis, J.
Bull.Soc.Nat.Produc Chem. 3:67-70.
Fraksi metanol memiliki nilai rendemen
Rohman, A dan Riyanto,S., 2005, Daya
terbesar yaitu 68,67% kemudian diikuti oleh
antioksidan ekstrak etanol Daun Kemu-ning
fraksi etil asetat 25,52% dan fraksi n-heksana
(Murraya paniculata (L) Jack) secara in
3,67%. Kandungan total fenol fraksi etil asetat
vitro, Majalah Farmasi Indonesia, 16 (3):
buah asam kandis (Garcinia dioica Blume)
136-140.
sebesar 28,83 ± 12,83 ppm ekivalen asam tanat.
Romansyah, Y., 2011., Kandungan Senyawa
Peningkatan kandungan total fenol akan
Bioaktif Antioksidan Karang Lunak
meningkatkan aktivitas antioksidan.
Sarcophyton Sp. Alami Dan Transplantasi Di
Perairan Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu,
DAFTAR PUSTAKA
Sekripsi, Departemen Ilmu Dan Teknologi
Bhaskar, A., Nithya, V., Vidhya, V.G., 2011,
Kelautan Fakultas Perikanan Dan Ilmu
Phytochemical Screening and In vitro
Kelautan Institut Pertanian Bogor.(Skripsi).
Antioxidant Activities of the Ethanolic Extract
Rudiansah, 2012, Aktivitas Pengawetan Fraksi
of Hibiscus rosa sinensis L. Annals of
Etil asetat Buah Asam kandis (G. Dioica
Biological Research, 2(5): 653-661.
Blum) Terhadap Tingkat Kesegaran Ikan
Chen Yu, Guang-zhong Yang, Fang-fang
Nila (Oreochromis niloticus). (Skripsi).
Zhong, and Hong-wu He, 2010, Two New
Salamah E., Ayuningrat E., Purwaningsih S.,
Prenylated Xanthones from the Bark of
2008, Penapisan awal komponen bioaktif
(Garcinia xanthochymus), Bull. Korean
dari kijing Taiwan (Anadonta woodiana Lea.)
Chem. Soc. 31(11): 3419.
sebagai senyawa antioksidan, Buletin
Huang D., Ou B., Prior RL., 2005, The chemistry
Teknologi Hasil Perikanan 11(2):119-132.
behind antioxidant capacity assays. J. of
Souza, A.E.,Silva, T.M.S.,Alves,
Agricultural and Food Chemistry 53:1841-
C.C.F.,Carvalho, M.G.,Filho,R.B.,
1856.
Echevarria, 2002, Cytotoxic Activities
Hadriyono, Kukuh, R.P., 2011, Karakter Kulit
Against Ehrlich Carcinoma and Hiuman K
Manggis, Kadar Polifenol Dan Potensi
5562 Leukamia of alkaloids and Flavonoid
Antioksidan Kulit Manggis (Garcinia
from to Solanum species, Chem. J. Braz
Mangostana L.) Pada Berbagai Umur Buah
Soc, 13(6):838-842.
Dan Setelah Buah Dipanen. Skripsi.
Ukhty Nabila, 2011, Kandungan Senyawa
Ilyas , M., Parveen, M., Sohrab Khan and M.
Fitokimia, Total Fenol Dan Aktivitas
Kamil, 1994,Isoflavones from Garcinia
Antioksidan Lamun (Syringodium
nervos, Phytochemistry, 36 (3): 807-809.
Isoetifolium), Departemen Teknologi Hasil
Khopkar, S.M., 2008, Konsep Dasar kimia
Perairan Fakultas Perikanan Dan Ilmu
Analitik, UI Press, Jakarta.
Kelautan Institut Pertanian Bogor. Skripsi.
Mardawati F., Fitry F, Herlina M, 2008, Kajian
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Kulit Manggis
(Garcinia Mangostana L) Dalam Rangka
Pemanfaatan Limbah Kulit Manggis Di
Kecamatan Puspahiang Kabupaten Tasik
malaya, Staf Pengajar Jurusan Teknologi
Industri Pangan, Fakultas Teknologi
IndustriPertanian Universitas Padjadjaran.
Laporan Penelitian.
Muharni, Supriyatna, Husein H.Bahti, dan
Dachariyanus., 2009, Aktivitas Antioksidan
Senyawa Fenol dari Manggis Hutan
(Garcinia bancana Miq), Jurnal Penelitian
Sains. 12, (3): 12307-123073.

48