LAPORAN PRAKTIFUM bioKIMIA

ISOLASI FASEIN DAD SUsUJ

Oleh
Senin. Februarn 2022
Dosen Pemb1na :
E Hendth Sanjaya,SSi,M Si,Ph
Miene Aluionita,S Pa .,M S
Hetompok 2
kma Putri Asti 1903926 2441) *
Hupiz Clevancta ( g0 4326 22 412)
Ywanca Ardiyann 904326 22413)

S
GER
ONY
INOn

URUSAN KiMIA
FMIPA
UNIUERSITAS NEGERI MALANG
2022
PERCOAAN 3

A Judur solasi Fasen darn Susu

BTajuan:Mengsolasigrotein berdasarHan tirix lgoelexrinnya.

c. Dasar teori
Sasu adotah coican yang disekr ecwan oh Kalenjar susu mamaiabtina unuk memberi makan
Onoknua Selama pei0de Setelan anatnua \an«.Susu pudo dasacnn adolah emylsi leman dan protein dalam
- -

ar,buçama denaan gula talarut Ckaavonidrat) , dgn vitamin.Scmca ncmpcnen ini ada dalam curu

semco mamana me sK0n ficpcisy1 bubeda aritor spesies. beriur komoenen punyuun susu pada
bebex opa Spesies (per too grom)
Sumber Enerqi CKa) emo CS tolesiuol tmaj protein (g kasium Lms)toFor Umetosbosdeat 5)|
Monucia 10 4.38 14 .03 32 4 89
Sapi 61 3.4 4 29 19 93 Ald
Fomolng 69 4.14 3.6 94 A45
Dombo 08 .98 93 IS6 5%
banteng 91 689 9 3,
Source U.S.Depautment of Aorculnre,Composrion of kood ,Aqriculnre handboon no 8 .

Fosin adalah frotein dalam usu. Dalam bentux murninya kosein ddolon padat an Puin amor
kidax berosa dan tidok ber bau.Sedongkan dolam bentuK Komessiainya berwurna sedikit Kuntng
aolgon bov yang lebin enax. Fosin adalah koetd luogiww yong mivie alburin dan gaatin. Tutik
Tsod ouri yang dimilii kasen adalah gada p 46 dimano kelorutonnya dalom air hangao.01%.
Fosein louciFat amfoter, di atas W 46 Facan membentuK garam dengon basa Sedangkan
dibusoh PA 4 memventun garam uang cukuP tarut seperti koseln kloctda.**

Kasein menyusun sentor go7 totol protein susu Ada

empot jens molekul kOSein yautu ds.dsa,B dan x-kasein
dlperklraxon 4 : 3 . S 1,S.Dalam HNNH
dengan jumiah (elaríf NH
susu Kasein barsama dengan bahan penting yaiv kaltum fosgot,
metibenrur agregat beba0po riby moveul individu (at 4a, OH

A dan w) dengon diameter rota-rota Eo-200 nm yang dihe-

nol seoagai misel Meskipun kasein memouat senítor 2157% dari o
torol berot susu , misel menempoti senitar Kiro -nira io'% dari
vowme. Míse dapat diponasKon atqu didingintan tonpa meng
ganggu struKurnya.Tetapi misel mudoh tida« stuby dengan Gaumbar
penamb anon eneim proteolitik atad Pengs amon Struxtur Fasem
 Faseh dapat díkoagulas ikan denean asam organik Asam yanq cering digunanan adaan as om
laktat dan asom aselot Pengaruh utama pengas aman adalah penJtunan pH yang menyebab kon

Pado hiti«
Tnambahan lon H sehingga m eneralran protein dan mencmpai 6tin tcoeiektin.
eLekhrik kasein bersiçar hidrofobik , karein akan berinatan untor muatannyo Sendirn ,mmb emux

lteotan Kedalam sahingga tegodi rengendapan yang retaifcoat

Ber ikut adaldh (eaksi pengendapan denqan cara pengasoman
HaR CO0+H HaNR Coo CPMasein prorein)
Ckasein mise) bugfer CKosein asam)
asekaty
P 41
Kootd dispersi Portike tdan lasut

untun pernitungan presentase asein dalam susu sapi murni adoloh Sebogai verikut
%kasen: berot kas in Kuing loo mL SUsU ,04 grom

berat susu

D. Metode teneutian
Alat yang digunakan:
aelos Kimta Soo m Kertas sautng PH meter/induxotor univessal gKola 0s
Hot piate PMret teres CDrong naca
Batong pengaduk Tamomerr Caelus aroyi
Erlenmeyo 390 ML

Dahan yong digunanan

Susu HCQ o1aM Heksana
Bugfer osetot am pH4. Etanol 95 Akuades
 Prosedur

Susu Clo0 ml)

Duuur PA
menggunaran in diKator unlves sa.
DtempatKan dolum gdas kimia G00 mL
Dthangatxon sampal tempe ahur 40
Otamboh butfer astdat aM A4 secaa pvlohan dan diadux + R 2M sampai himblerdgpn
Drdinginkoan pada Suhu Kamar dan diadux.
D1dexontosi untux memperoieh endapan kasein
pisoring kemboli untuk mendopotkan endopon yang teubu ang
Ditombah sedikt air pada endapan
Did ekontosi tog.
Diresuspensi endapan d enqan 30 ml etano.
DNouukon pnyoringon dengan menggunak.an corbng9 koca.
Oiawc endapan denaon 20 ml tampuran e'unol nexsana,
DiCuCi endopan dengon 25 ml Heksona .
Dipin dohkan en dapan k genas astoyi
Okerinqxon dan diti mpang kosein yong diperp leh
Otomati wotno Kasein yang digeaoeh
Hol
 udbuunyaa buien uod bpup
p huduinm yowop
6uDqwap
uoxbuuny
a y ulg 1anysod uoP uobuun d uodbpua
Uroyas umi una0»d uopypun) uoypnwpw
naun voaop vobopuo opod uopmmuaJ : DuDSMBu: 1ou0
DSa4 ohupwyJvduop udbuunxoq und»pu
ohuuD)no LJDp umdopua uowuosuaW buvosp
urasD uoras uoiOsd uDynn12W u 0 10U013112 dmsaup
USaa vhu1®x md uopudkuu nn)y uod opup
ohuuoy nD) Lop uDs\dny uDobgua oouas uoy|
-1 Muaul xnqun 1s0uowap uoxôuoy buonbiwau updopu buluosIp
uop dhuu paopse uobuap uDunm uguos lun u
DwO nunSip upxubup!p
uD6UNunx0 poCun»x uynd 0p uDanxaq
nmypa uonunuaw vdbpua ohumyua an nns pinom/ upyoa uD]ddwnb nNuaan]
upo ul44MNd xyLy pduos Hd uDwuninudW
v8dun ud66uyas up1od UDDAnud p wàn+ yund uouoo odana doya
vodopuabu
ynuun uoxnxoNp udsouDuD ,0b 1odups uDxaobuvuP
Dyn y3uOuninUduu
Hd mnp
pan upxbuD
SISy
np so sysNouy 3
Dota Pengamatan

Host ?aovaan
wuud ruru aruton buworna Putih
Susu padu pH isoekxmx kag ein PH 5. 9umpolon Puhh, \aruton kexunngon
Hasit deKantasi Ftror lorutan putin kekuningan
esldu gvmpolon putih
Hosil tesoS pen si dengan etanol Flrot lorutan fidax bewarno
Tesidu 9umpalon putih
etanot.
Hosul pen tuuan dengon fitat avutan putin Kenuningan
hexsona esidu umpolam putih kekuningan
Hasil pentuian dengan hextano Fithot Oru tan tidovx bawarno
eSidu 9umpalon putih KeMUni ngan
beot ketoS soving Kasein ( gr am) 5,81 gom
berat Katas saring grom) 0 509 gr om
brat Kas ein ( gram) 5,348 qam

G Anolisie Fuaiitoti

Prinsie dori ol0si kosem dori susU adaluh pengendogon berdasukan titik is0«lektrix. Sumber
kaseln pado pacovoan ini dalon Gusu saPi segar. Langna patomo yang dlarukan adotah

memanaswan susU sameai t emperotur 40't dusu memaui stobiutus tenadar pemanasan. Fasein
misel adaloh mponen yong batanggung auwdb atos stobilitos Rans saoma pemrosesan
u u Stobiitos ponas adalah propeuti penting dalam produesi Fastin adolah riotein utoma
dalom usu yong ditemukan Gebagai koDid yong beuososiasí sendiri membenrux mise kasein
yangtediri aari d,dS, don - Miuel kosein adoidh hruvtur yong staoil teroi idar
tetap Kasun mampu menahan pemanosan ,nomun pada kondisi tutentu dapat memicahkan
atou mengagiegasi porubgh an suuluro. Tin gxat agvegosi kaseln bugantung eado Komposui
laruTan seuto dwosi emanasan' Yada petoboan ini,pemanason dakyKan sameai suhu
50'c.Tujuanmyo untux mnuunKan kalaruton protein don mampestepat tuadinyo pengendu-
an nonninyo. Kestablan kastin tahadap pemanason ditunguxkon dengon tidak terbentuk
mya en dap0n / Qumpalon ketika susu dipon asKan

Langkah selamutnya adalah ponambahan bupger asetat o,2m pt 4 Sebonyak too mL.
Tuguan dari langkah Ini adalah nenurunKan Psusu dari aCPHoua1) ke A firk isoeleaminyo
Tik jsoetexmis aoaiah rH caat as am onino vrada podo banhur amote ( uitta ion) don pada
tatik 1soeleutrik ini Kelarutan protein Menurun ,proteln akan mangendap dan nenggumpal.
 Penurunan p susu mempengaruni strurhur ntonal miel kosein, suto enStermal (lagtsan

emuk0on).Susu yang dtasamkan menuruntan muatan Kasein dan meny edab Kan Kelanu ton
KolDid kaulum (osfat dari misel ke larutan. Falsum gos4at barundan
Sebagai Jembaran unhuk
menghubungkan kasein, llangnya míse hastum fospat akon disrtai penyusutan mgres dan
kemunginan dtsosiasi kas em dari mises. Penelitton tain menyebutkan bahuwa hilangnyo muatann
Erka p urun mengarlbatkan tunhunnyo lapis on pesmuxaan misu. Petaruton alsium forfot
u u h y a lapiran pumoKaan m enyebabkan pangurangan uxucan muu. 6ayo tolaK antar misel
eman sehtngga mi 1ebih duat sany cama lain, Menurunnan Pt menyebobkan miselmenyadi
bih podet ,st uututnya lebih soud don mulai membentur ge.
Soli tepion

OO
L
pH p S55 6.6-6.7 p te 10.s

Gomb ut 2
Ubran msel Kasen gado betbugoi rh

6ambar3
ruuhur mrse kaseln
Struuur me kaseln , moleuu d don Apada daech hidroril Corang) bertk otan dengan katsum
Cobu-abu). eebrapa a ( bira) berteoton gecara hi dropob. k-kasein dan rantai Kareino
movao pep hdo keoda di pemukoan misel, L4
 Penambahan bugfer as etar memi u tmbuinyo gel berwomd ronn. kemud ian untux menastikan

teies demi teles Ha 012M Teicopainya pH 1S0elex riN

banwo pH mencapai iti« 1s0elektrik ditambonxan
pado pucobaan ni yainw poda pH5 ditondoi aengan perubanan kolod puhh keruh menjodí

gompolan punn t ekuningan

Selanyutnya adalah men dingi nx an cuspensi pada t emperatur vamor selamo s menit 1usuan
dort 1onqkah ini odatah supoyo unpulan kasein yong tubentux robi, Femudh an atovuKan
Dekantosi ditakuk an
dekoncast dan penyar ing un untu Memiconkan arutan dengan endapannya.
stbonyaw dua Kaii unruk memasti«.on Semua endapan terpisuh dari taruUtonnya

Endapan yang dipe oleh dicesuspenci menggunaron etanol ebanyak 30 ml. lujuonmyu
Karend
untuk melorutkan Potein loin setain Kosein ,Karena kaseln tidax tarut dalom etgno,
hemudian membelkan
etancl kurgng polar datpoda air, etanol menurunKon konst anta diuleuík
.

pot unsi
int elekho statik
Caksi menstobilkun misel kosein.9 Sehíngga kaseln tidaw lanut
yang
aalam etanol, Sahingga host doui loangwon int adalan untux mendupdtnon kasein yang9 1ebih muni

Sctaah andapan hasilsesuspensi disasing, dicui endapon dengan ompuran etonel:hoxgano

denganpovonaiu gan :I enyauo nonpolor uanq bia melorutkon leman dalam
Diefl eter Odalah
lain dlau prOtein lain dalom endaRin. Diesil tu
endapan sedanguon etcnoi melarutkon senyawa
dan lemax mamiuki stçot kepoian yang tidax gauh bexbeda Fmoatan diuuci lagi endapan
dengan hanana yang jugn mrupaNan petanut nompolar Tugannya unan memgstian bakua
Semua emax terpisoh duri endapun KQSe in becdasar kan ebri geharusaup endapan
benas- ben ar
yangdipaoeh bawana pulin, fetapi pada petcvoan ini endagan berwarno qutih kexuringa

yang baarh lamak belum tapis0h sepeouhnya masih tesisa en dap an tndapon yan
di diperceh

dipivndahkan ke gelas arluji, dikegiagkan ,Kemudion ditimban)

H. Anatusis kuantitonf
Oata kalom PoK 1 Brat kertas sarlng: 0,509 gram
Beral endagin her tas çartng S 85t 9Tom
berat endapan: 5 348

osein berat kaseln kering xlo0/ 348 ram K007 S 348 7

volume Susu 00 ML
Iife
Fas ein dalam Susu mencQpai 35sgfam dalam sefop tbO
Susu sam tka sampel yang dfgunaron l00 m maFa :0/0s5 g
Data kecmpok 3 Beai Keutos garing: O So 9rum
Berat endapani KStas safing 4.00S ian
bar en dap an 3,so4 ram

Data keompok 5 Berat hertas sarîng: 0,95 9ram

Beat end apan 4 Ker tas soñng : 5 02s yram

berot endapan : 4,st aram

Dato ketompok 7 Baat kestas saring O1 9ram

Daat en dapan t Ker tas s aring
eat endapan 4,268

Berc tendeman rata rata

248 43.S04 44.S +4 268 ) gram 63
4.40t oom
A Aram A

Stundor deNiasi
xi- data 1 (Sib484 401 (o.g4 O854
data 2 ( a 504 4,40t) (0,905: 0814
doto 3 a.si 4.409 -

0 ,10) 0,o106
dato4 (4,2684.40 ( 0n99 O,0193

(X - : O8854+ o,8S4 0 ,010% 0,0193 I30 O.4326 5

D 42265e O16S1 STandar deviasi

 wD6 tob' o0-D UDunpuai 10ng
3bes uno Jopo) uobuap wD1o 3b¢h uollsoup budh u0d opua pro0a
uDp 10u0a n»oyad voDunGburu uonmu@d
unóuap uDxnnp\up unsoy uddo pud udluiOwat
AaT o 4 uDoDp4 uDdvpunbuad disuud vpod u^osopip M uooaoan)
uodupua nudquau oobuiuDS voAlONI Un u bU\D5
VOxD uOunno) 1oq
uos0n ' M waj2osi uvvppa opod oh;svaaa VSAOipju smbnb \vp UrjOld
3uoau unonu uDbua Sa21 uoxopdbua u uD H u
xados) Auy vdoou2 uop
uo u0O42uaw uDxd DbbuuoS H uO1 uoupdunudd uowwa XDbuaw OSD Uvuvawound
uso v1ar uo 0mohuds/ udjad udxnuonu pJbp buph invjdd ouas
uDdopUo opod spdbpa buoh ouD) Dain Jop xnun JO10 uou an o1dd uonunbuu
uoDmund udouap uo!uinwy uwdopu uso uDdopuà ayiof, 0pod uop pios mas
Mnue ud wuoipnuay' uIpuas ohuuopnw Jojuo uOYO ALDq' wojvp a Dd\aw udnD udipoudx
uDXD UDyuDquDyp Guoh wpsy uoto uDupquouod uoDpo Dhuinnn4s 150)aouzpuau
buph 66u ues buy nuns uojop 19D45 duOa V s0 'S-b auh
uaso uop wI AIMaND OS1 M
vhun)AXaya 01 Piss uoDsdpn4 ualod ubddpunbund opod vOyIDSopip nsns vp un soX \D9s
u uooaooad d)s uLd unoysoja
NnOHYoNad sv9nL s
 . Dagta Pus taka
brituna ,T,tdiror Of Encyclope dia (201 Jun Is) MiK Encycloredia Britanica.
darss pada 1 tebruar 2022
1 Brltanica, T. Editor o Encyae pedia (20 Maret 2s). Kasein tnyctopedio Britanita
diakses pada la Febuai302n
C31 Douglas G dalgle(sh dan Milena Coredig,2012. Tne SnUCUte O the Casein

Micele q MlK ana tr Changes Duning frce sing.he Annual Revitw oF tood
Sumce oand TechnoiCqy 3: 449-63. dot o uAG anoUrev -çood o22811-1oi214.
LA)Researchgate StTUchure of Casein diakges pada Febiua 2c2.
NOOr, Abdul Fattoh,dKK, 2019 Laporan PraxiKum dan 1dentifinasi Karein fendidi kan
PA
Umvers1tos Nagen Maiang
C6 Min Yong. dk a014. Heat Stability og 4ax mcolar casen as aected byheat
Teokm ant kamparahure and durarion. Daicy Su ence 4 Technoiagy EDr suence Seringer.
g4 469-481 D0L o lc0/s 13594-Ol4-o113-6
Me. Mahon ,Donald J dan Bonneu Oommen. 200b SuPamo jeaior Struchure f the
Caselh Micelle Journal of Dry Stience Doi : 10. 3IC/ 1ds 200t c61g

C1 inaga , Hotnida dkx 2014t ffet of Miik eH alte roflon on Casein MQlle site and Gelofion
Properties a milk. Jteanattona Journal of ood Preputies, 19-93
C1RanYe dan Federio tarte. 2013 Caudn mas Effect of thanct .P, Temperaure
and CaCla on the particle Size Of reconsh tuted casein micelles. . Daiuy cu; 96l2): 199-
05. doi o.3168 /Jds. 2012 Se3
Cto1 Tin Dosen KBK Bionimia.3019 Pehunjux Proktikum Bionîmia Umum, KMMA
Onlversito s Negai Malang
LAMPIRAN

Langkah kerja Gambar

Pengukuran pH susu

Susu setelah ditambah buffer

pH susu setelah ditambahkan buffer

asetat dan HCI

Dekantasi larutan

Filtrasi larutan
Pencucian dengan etanol dan heksana

Pengeringan endapan dan penimbangan