Laporan Praktikum Biokimia Kedokteran Blok CHEM II
PEMERIKSAAN ENZIM ASETILCHOLIN ESTERASE
(METOE !KC"NE#$ Ole% & Nama & Le'tari Nur Indriani NIM & K(A))*))+ Kelompok & B", A'i'ten & Arie' Kri'-i.antoro EPARTEMEN PENIIKAN NASIONAL /NI0ERSITAS 1ENERAL SOEIRMAN 2AK/LTAS ILM/"ILM/ KESEHATAN PRO!RAM PENIIKAN OKTER P/R#OKERTO 3))+
LEMBAR PEN!ESAHAN Oleh : Lestari Nur Indriani KIA006007 B-3 Disusun untuk memenuhi persyaratan mengikuti uian praktikum Bi!kimia Ked!kteran Bl!k "#$% II pada &r!gram &endidikan D!kter 'ni(ersitas )enderal *!edirman &ur+!kert! Diterima dan disahkan &ur+!kert!, )uni -007 Asisten Aries Kris.iyant!r! K/A000012 BAB I PENAH/L/AN A4 1udul Praktikum &emeriksaan $n3im Asetil4h!linesterase dengan %et!de D5K"-Ne+ B4 Tan55al Praktikum *enin, -2 %ei -007 C4 Tu6uan Praktikum /6 %engukur kadar en3im asetil4h!linesterase -6 %enelaskan nilai n!rmal en3im asetil4h!linesterase serta kadar pat!l!gis dari hasil praktikum 36 %elakukan diagn!sa dini penyakit apa saa yang ditandai !leh hasil hasil akti(itas en3im asetil4h!linesterase a.n!rmal 7 pat!l!gis melalui .antuan hasil praktikum yang dilakukan6 4 a'ar Teori Ner(us (agus .ila dirangsang maka di uung sara8 terse.ut akan dilepaskan suatu 3at akti8 yaitu asetil 4h!lin 9A4h:6 Dalam uung sara8 k!linergik, A4h disimpan dalam gelem.ung sinaps dan dilepaskan !leh NA& 9Ner(e A4ti!n &!tensial:6 Asetil 4h!lin se.agai transmitter harus diinakti8kan dalam +aktu yang 4epat6 &ada sam.ungan sara8 !t!t, A4h dirusak se4ara 4epat dalam +aktu kurang dari / milidetik6 K!linesterase yang terse.ar luas di.er.agai aringan dan 4airan tu.uh, menghidr!lisis A4h menadi k!lin dan asam asetat6 Ada - ma4am k!linesterase yaitu asetilk!linesterase 9A4h$: dan .utirilk!linesterase 9Bu4h$:6 Asetilk!linesterase terutama terdapat di tempat transmisi k!linergik pada mem.ran pra maupan p!st sinaps dan merupakan k!linesterase seati yang terutama meme4ah A4h6 Bu4h$ .er8ungsi dalam eliminasi suksinilk!lin suatu !.at relaksan !t!t rangka dan 8ungsi 8isi!l!gis lainnya .elum diketahui, sedangkan metak!lin dihidr!lisis !leh A4h$6 ;ransmisi k!linergik praktis dihentikan !leh en3im A4h$ sehingga pengham.atan terhadap en3im ini misalnya !leh senya+a !rgan!8!s8at 9seenis insektisida: menye.a.kan akti(itas k!linergik yang .erle.ihan dan perangsangan resept!r k!linergik se4ara terus menerus yang diaki.atkan !leh penumpuikan A4h yang tidak dihidr!lisis6 Kel!mp!k 3at yang mengham.at A4h dikenal se.agai antik!linesterase 9anti A4h$:6 dalam urutan kekuatan yang meningkat dikenal senya+a-senya+a anti A4h$ se.agai .erikut: 8is!stigmin, pr!stigmin, diis!pr!pil8lu!r!8!s8at 9D<&: dan se.agai senya+a insektisida !rgan!8!s8at seperti malati!n,parathi!n, dll6 ;!ksin .!tulinus maupun tetanus mengham.at pelepasan A4h disemua sara8 k!linergik sehingga dapat menye.a.kan kematian aki.at paralysis perna8asan peri8er6 ;!ksin terse.ut mem.l!k se4ara ire(ersi.el pelepasan A4h di gelem.ung sara8 pada uung aks!n dan merupakan salah satu t!ksin paling p!ten yang dikenal !rang6 E4 Alat dan Ba%an Alat /6 =ak ta.ung reaksi -6 *atu .uah ta.ung reaksi ukuran 1 ml 36 $ppend!r8 06 *entri8uges 16 %ikr!pipet /0 L -/00 L 66 %ikr!pipet /00 L -/000 L 76 Blue tip 9/000 L: 26 >ell!+ tip 9/00 L: ?6 *pektr!8!t!meter /06 ;!rni@uet //6 *puit Ba%an /6 *erum darah -6 1 ml =eagen en3im 4h!linesterase 9=eagen -: 36 / ml =eagen / 24 Cara Ker6a /6 &ersiapan sampel Diam.il darah pr!.andus se.anyak 3 44 dengan spuit, masukkan dalam eppend!r8 untuk selanutnya disentri8uge selama /0-/1 menit6 Diam.il larutan supernatan 9serum: se.anyak /0 l6 -6 &em.uatan larutan kera 9+!rking reagen: 36 Diam.il larutan =eagen / se.anyak 1 ml kemudian di4ampurkan dengan larutan standard "#$ 9=eagen -: se.anyak / ml6 06 / ml +!rking reagen dimasukkan ke dalam ku(et6 16 Ditam.ahkan /0 l serum6 66 Dihitung a.s!r.ansinya pada spektr!8!t!meter dengan panang gel!m.ang 001 nm dengan suhu 37A "6 !4 Nilai Normal Nilai n!rmal perempuan B 0000 C /-600 u7l Nilai n!rmal laki - laki B 1/00 C //700 u7l BAB II HASIL AN PEMBAHASAN A4 Ha'il Pen5amatan Identitas &r!.andus Nama : Di.is!n! Nugraha 'mur : /? tahun )enis kelamin : Laki-laki B4 Ha'il Per%itun5an &anang gel!m.ang 9E: : 001 nm *uhu pengukuran : 37 A " #asil pemeriksaan : 1?/7,- u7l F =eagen I 91 ml: Lar6standard "#$ 9/ ml: diam.il D!rking =eagen Diam.il / ml *erum /0 l D!rking reagen / ml C4 Pem-a%a'an #asil praktikum yang telah dilakukan diper!leh kadar en3im asetil4h!linesterase pada serum darah pr!.andus adalah 1?/7,- '7L6 Berdasarkan nilai dari hasil praktikum ini dapat disimpulkan .ah+a pr!.andus n!rmal, karena nilai terse.ut sesuai dengan nilai n!rmal en3im asetil4h!linesterase pada laki-laki yaitu 1/00-//700 '7L6 #asil praktikum yang diper!leh .elum dapat dipastikan keakuratannya karena terdapat .e.erapa 8akt!r yang mempengaruhi kesalahan6 <akt!r penye.a. kesalahan dalam praktikum antara lain : /6 Kurang tepatnya dalam menghitung lamanya +aktu inku.asi -6 Ku(et kurang .ersih dapat dise.a.kan pemakaian yang .erulang maupun pen4u4ian yang kurang .ersih 36 Kurang akuratnya spekt!8!t!meter $n3im k!linesterase mempunyai peranan yang penting dalam pr!ses neur! muskuler dengan menghidr!lisis Asetilk!lin 9A4h: menadi asam asetat dan k!lin6 &ada .i!kimia, 4h!linesterase ada dua ma4am, yaitu: /6 A'etilkoline'tera'e 9A"h$:, uga dikenal se.agai erythr!4yte 4h!linesterase atau a4etyl4h!line a4etylhydr!lase6 $n3im ini .anyak ditemukan pada sel darah merah dan sara8 sinapsis6 -6 P'eudokoline'tera'e7 uga dikenal se.agai plasma 4h!linesterase, .utyryl4h!linesterase atau a4yl4h!line a4ylhydr!lase6 $n3im ini .anyak ditemukan pada serum atau plasma dan di hati6 /, - Asetilk!lin adalah transmiter m!lekul ke4il yang khas6 *u.stansi transmiter ini disintesis di uung presinaptik dari k!en3im asetil A dan k!lin pada adanya en3im kolin asetiltransferase6 Kemudian su.stansi ini di.a+a ke dalam gelem.ung spesi8iknya6 Ketika kemudian gelem.ung melepaskan asetil k!lin kedalam 4elah sinaptik, asetilk!lin dengan 4epat meme4ah kem.ali menadi asetat dan k!lin dengan .antuan en3im kolinesterase, yang .erikatan dengan retikulum pr!te!glikan dan mengisi ruang 4elah sinaptik6 3 *inaps merupakan tempat dimana asetilk!lin .erada, tepatnya pada mem.ran presinaps6 *inaps adalah tempat dimana neur!n-neur!n saling .erk!ntak atau antara neur!n dengan sel e8ekt!r lainnya 9Ot!t dan sel kelenar:6 #ampir semua sinaps menghantarkan impuls le+at pelepasan neurotran'miter pada terminal aks!nG mereka adalah su.stansi kimia+i yang menginduksi perpindahan impuls sara8 ke neur!n lainnya atau ke se.uah sel e8ekt!r6 0 Asetilk!lin, suatu ester asam 4uka k!lin, di.entuk dari asetil-K!A dan k!lin di dalam sit!plasma aks!n6 Neur!transmitter disimpan di dalam (esikel sinaptik6 *etiap (esikel dapat mengam.il kira-kira /000-/06000 m!lekul asetilk!lin6 *intesis asetilk!lin teradi di dalam sit!s!l terminal sara8 yang menggunakan en3im k!lin asetiltrans8erase dengan reaksi se.agai .erikut : Asetil-KoA + Kolin Asetilkolin + KoA /6 Asetilk!lin kemudian disimpan dalam (esikel atau gelem.ung sinaps6 -6 &engeluaran asetilk!lin dia+ali dengan 8usi (esikel sinaptik pada mem.ran prasinaps6 &r!ses ini dipengaruhi !leh i!n "a -F , dengan adanya in8luks i!n "a -F maka akan teradi eks!sit!sis yang melepaskan asetilk!lin ke dalam 4elah sinaps6 36 Asetilk!lin yang telah terlepas kemudian .erdi8usi dengan 4epat melintasi 4elah sinaps ke dalam resept!r di dalam lipat sam.ungan6 06 Kedua m!lekul asetilk!lin .erikatan dengan se.uah resept!r maka resept!r ini akan mengalami peru.ahan .entuk dengan mem.uka saluran di dalamnya yang memungkinkan 8luksus kati!n melintasi mem.ran6 16 %asuknya i!n Na F akan menim.ulkan dep!larisasi mem.ran !t!t sehingga ter.entuk p!tensial endplate6 Keadaan ini selanutnya mendep!larisasi mem.ran !t!t di dekatnya dan p!tensial aksi ter.entuk dan ditransmisikan di sepanang sera.ut sara8 menghasilkan k!ntraksi !t!t6 1
)ika saluran terse.ut menutup, asetilk!lin akan terurai dan dihidr!lisis !leh en3im asetilk!linesterase yang mengkatalis reaksi .erikut : Asetilkolin + H2O Asetat + Kolin Berikut ini merupakan gam.ar pelepasan neur!transmitter pada mem.ran pra dan p!st sinaps : $n3im ini terdapat dalam umlah .esar dalam lamina .asalis ruang sinaps6 K!lin didaur ulang ke dalam terminal sara8 melalui suatu mekanisme transp!r akti8, tempat pr!tein terse.ut dapat kem.ali digunakan untuk sintesis asetilk!lin6
Mekani'me /mum Kontrak'i Otot ;im.ul dan .erakhirnya k!ntraksi !t!t teradi dalam urutan tahap-tahap .erikut : /6 *uatu p!tensial aksi .eralan di sepanang se.uah sara8 m!t!rik sampai uungnya pada serat !t!t6 -6 &ada setiap uung, sara8 menyekresi su.stansi neur!transmitter, yaitu asetilk!lin, dalam umlah sedikit6 36 Asetilk!lin .ekera pada area setempat pada mem.ran serat !t!t untuk mem.uka .anyak saluran .erger.ang asetilk!lin melalui m!lekul-m!lekul pr!tein dalam mem.ran serat !t!t6 06 ;er.ukanya saluran asetilk!lin memungkinkan seumlah .esar i!n natrium untuk mengalir ke .agian dalam mem.ran serat !t!t pada titik terminal sara86 &eristi+a ini akan menim.ulkan suatu p!tensial aksi dalam serat !t!t6 16 &!tensial aksi akan .eralan di sepanang mem.ran serat !t!t dalam 4ara yang sama seperti p!tensial aksi .eralan di sepanang mem.ran sara86 66 &!tensial aksi akan menim.ulkan dep!larisasi mem.ran serat !t!t, dan uga .eralan se4ara di dalam serat !t!t, pada tempat di mana p!tensial aksi menye.a.kan retikulum sark!plasma melepaskan seumlah .esar i!n kalsium, yang telah disimpan di dalam retikulum, ke dalam mi!8i.ril6 76 I!n-i!n kalsium menim.ulkan kekuatan menarik antara 8ilamen aktin dan mi!sin, yang menye.a.kan .ergerak .ersama-sama, dan menghasilkan pr!ses k!ntraksi6 26 *etelah kurang dari satu detik, i!n kalsium dip!mpa kem.ali ke dalam retikulum sark!plasma, tempat i!n-i!n ini disimpan sampai p!tensial aksi !t!t yang .aru datang lagiG pengeluaran i!n kalsium dari mi!8i.ril akan menye.a.kan k!ntraksi !t!t terhenti6 6 4 Aplika'i Klini' /6 %iasternia gra(is %iasternia gra(is teradi pada m!t!r endplate6 %iasternia gra(is merupakan penyakit aut!imun yang ditandai !leh epis!de 8atiga.ilitas dan kelemahan !t!t .erulang 9rekuen: aki.at penurunan transmisi sinyal neur!mus4ular6 Neur!transiter yang terli.at adalah asetilk!lin6 Ot!t yang paling terpengaruh adalah !t!t yang dipersara8i !leh sara8 4ranial6 Keadaan ini dapat diper.aiki dengan pem.erian !.at yang mengham.at kera en3im asetilk!linesterase6 ;u.uh penderita miasternia gra(is mem.entuk anti.!di terhadap resept!r asitelk!lin 9A4h=: pada sam.ungan 9un4ti!n: neur!mus4ular6 Antri.!di ini menghan4urkan resept!r terse.ut dan menye.a.kan penurunan umlahnya se4ara nyata6 7 -6 Al3heimer &enyakit Al3heimer ini penye.a.nya diduga aki.at meningkatnya kadar almunium dalam tu.uh penderita yang .erupa plak6 Otak pasien yang meninggal aki.at penyakit Al3heimer sering kali memperlihatkan penurunan nyata pada kadar k!lin asetiltrans8erase dan asetilk!lin6 Kadar neur!transmitter lain uga sering menurun6 &eru.ahan ini tampaknya teradi sekunder aki.at kerusakan sel, .ukan se.agai keadian primer yang memi4u penyakit Al3heimer6 2 36 Kera4unan !rgan!8!s8at Kera4unan insektisida !rgan!8!s8at atau kar.amat menye.a.kan akti(itas en3im k!linesterase akan menurun6 'ntuk dapat menge(aluasi dengan .aik, nilai dasar pasien se.elum paparan seharusnya telah diperiksa dahulu6 Keadaan klinis yang dapat mengindikasi pemeriksaan ini yaitu paparan pestisida dengan geala terutama mi!sis, penglihatan ka.ur, kelemahan !t!t, diare, mual, .anyak mengeluarkan air liur, .erkeringat, edem paru, dan keang6 Belum dapat dipastikan apakah nilai n!rmal mengindikasikan kepastian tidak adanya paparan insektisida !rgan!8!s8at dan .agaimana pada (arian genetik dengan atau tanpa paparan6 Interpretasi masih menadi pr!.lem pada akti(itas en3im k!linesterase rendah atau tinggi6 06 B!tulisme B!tulisme adalah suatu keadaan yang arang teradi dan .isa .eraki.at 8atal, yang dise.a.kan !leh kera4unan toksin 9ra4un: yang dipr!duksi !leh clostridium botulinum6 ;!ksin .!tulinus mengham.at pelepasan A4h disemua sara8 k!linergik dan merupakan ra4un yang sangat kuat yang dapat menye.a.kan kerusakan sara8 dan !t!t yang .erat, maka ra4un ini dise.ut neurotoksin6 5eala a+alnya adalah mual, muntah, penderita merasa lelah dan mengeluh sakit kepala serta pusing, kemudian tengg!r!kan terasa kering, dan !t!t pernapasan .erk!ntraksi sehingga sulit .ernapas dan .er.i4ara6 Kematian .isa teradi .ila ada kelumpuhan !t!t-!t!t pernapasan6 ;erdapat 3 enis .!tulisme, yaitu: a6 Foodborne botulism, merupakan aki.at dari men4erna makanan yang ter4emar .6 Wound botulism, dise.a.kan !leh luka yang ter4emar 46 Infant botulism, teradi pada anak-anak, karena men4erna makanan yang ter4emar6 ? BAB III KESIMP/LAN /6 #asil praktikum diper!leh akti8itas en3im asetilk!linesterase adalah 1?/7,- '7l6 #al ini menunukkan .ah+a pr!.andus n!rmal karena masih .erada pada nilai n!rmal en3im asetilk!linesterase pada laki-laki yaitu antara 1/00-//700 '7l6 -6 $n3im 4h!linesterase mempunyai peranan yang penting dalam pr!ses neur! muskuler dengan menghidr!lisis Asetilk!lin 9A4h: menadi asam asetat dan k!lin6 36 Aplikasi klinis yang .erhu.ungan dengan akti(itas en3im asetilk!linesterase dalam tu.uh yaitu : a6 %iasternia gra(is .6 Al3heimer 46 Kera4unan !rgan!8!s8at d6 B!tulisme A2TAR P/STAKA /6 5N' <ree D!4umentati!n Li4ense6 Cholinesterase. A(aila.le 8r!m: '=;: http77+++6+ikipedia6!rg7indeH6php6 -6 Inge k!mala6 Kolinesterase Serum6 A(aila.le 8r!m: '=;: http77+++6pdpersi64!6id7pdpersi74ariId!kter7indeH6php36 36 Arthur "6 5uyt!n dan )!hn $6 #all6, )antung, *irkulasi *istem *ara86 Dalam: Buku Ajar Fisiologi Kedokteran6 $disi ?6 )akarta: $5", /??7: 7/--/36 06 L6 "arl!s )un@ueira, )!se "arnier!, =!.ert O6 Kelley6 Dalam: Histologi Dasar $disi 26 )akarta: $5", /??2: /63-606 16 =!.ert K6 %urray, %D6 &hD6 Dasar Bi!kimia Be.erapa 5angguan Neur!psikiatri6 Dalam: Biokimia Harer6 edisi -16 )akarta: $5"6 -000: 7?/-206 66 Arthur "6 5uyt!n dan )!hn $6 #all6, %em.ran <isi!l!gi,*ara8,dan Ot!t6 Dalam: Buku Ajar Fisiologi Kedokteran6 $disi ?6 )akarta: $5", /??7: ?3-06 76 "amp.ell =ee4e6 *istem *ara86 Dalam: Biologi6 edisi 16 )akarta: $rlangga, -00-: -/0- 16 26 =!.ert K6 %urray, Daryl K6 5ranner, dkk6 Ot!t dan *it!skelet!n6 Dalam: Biokimia Harer6 $disi -16 )akarta : $5", -003 : 6?6-?7, 7?/-?-6 ?6 =epu.lika6 Botulisme6 A(aila.le 8r!m: '=;: http:77+++6repu.lika64!6id7suplemen7indeksIsuplemen6aspJ6