EFEK ANTIHIPERKOLESTEROLEMIA DARI AMPAS EKSTRAK ETANOL GANGGANG HIJAU (Ulva Lactuca L.) PADA TIKUS DIABETES YANG DIINDUKSI ALOKSAN

EFEK ANTIHIPERKOLESTEROLEMIA DARI AMPAS
EKSTRAK ETANOL GANGGANG HIJAU (Ulva lactuca L.) PADA

TIKUS DIABETES YANG DIINDUKSI ALOKSAN
SKRIPSI
Diajukan Oleh :
Yusnia Fairuz
10023111
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS AHMAD DAHLAN
YOGYAKARTA
2014

SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam

Mencapai derajat Sarjana Farmasi (S.Farm)
Program Studi Ilmu Farmasi
Universitas Ahmad Dahlan
Yogyakarta
Oleh :
YUSNIA FAIRUZ
10023111
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS AHMAD DAHLAN
YOGYAKARTA
2014
ii
HALAMAN PENGESAHAN
Berjudul

Oleh :
YUSNIA FAIRUZ
10023111
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Ahmad Dahlan
Pada tanggal : 5 Juni 2014
Mengetahui
Fakultas Farmasi
Universitas Ahmad Dahlan
Pembimbing
Dekan
Moch. Saiful Bachri, M.Si.,

Ph.D., Apt.
Dr. Dyah Aryani Perwitasari, M.Si.,

Ph.D., Apt.
Penguji :
1. Moch. Saiful Bachri, M.Si., Ph.D., Apt.
2. Wahyu Widyaningsih, M.Si., Apt.
3. Prof. Dr. Achmad Mursyidi, M.Sc., Apt.
iii
HALAMAN PERNYATAAN
Yang bertanda tangan dibawah ini:
Nama
: Yusnia Fairuz
NIM
: 10023111
Program Studi
: S1 - Farmasi
Fakultas
: Farmasi
Judul Penelitian
:.Efek
Antihiperkolesterolemia
Dari
Ampas
Ekstrak Etanol Ganggang Hijau (Ulva lactuca L.)

Pada Tikus Diabetes Yang Diinduksi Aloksan
Menyatakan bahwa penelitian ini adalah hasil karya saya sendiri dan dari
sepengetahuan saya, tidak berisi materi yang dipublikasikan atau ditulis oleh orang
lain atau digunakan untuk penyelesaian studi perguruan tinggi lain, kecuali pada
bagian-bagian tertentu yang saya ambil sebagai acuan. Apabila ternyata terbukti
bahwa pernyataan ini tidak benar, hal tersebut sepenuhnya menjadi tanggung jawab
saya.
Yogyakarta, 5 Juni 2014
Yang Menyatakan,
Yusnia Fairuz
10023111
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN
Dan dia memudahkan untuk kamu apa yang ada di langit dan apa yang ada di
bumi, sebagai suatu rahmat dari pada-Nya. Sungguh dalam demikian ini benarbenar terdapat ayat-ayat (tanda bukti kekuasaan Allah) bagi orang-orang yang
berfikir.
(QS. Al Jatsiyah : 13)
.. Allah akan mengangkat (derajat) orang-orang yang beriman di antaramu dan
orang-orang yang diberi ilmu pengetahuan beberapa derajat..
(QS : Al Mujadillah (28) : 11)
..Dan Kami tinggikan bagimu sebutan (nama)mu Karena sesungguhnya
sesudah kesulitan itu ada kemudahan..
(QS : Al Insyirah : 4-6)
Teruntuk :
Allah SWT, sang Maha pemilik ilmu.
Kedua orangtuaku tercinta, Abahku (Isrofan) dan Mamahku (Jamilah),
Ungkapan rasa hormat , bakti dan kasih sayang ku kepadamu abah dan mamahku
serta ungkapan terimakasihku atas semua perhatian dan kasih sayang kalian
kepadaku, terimakasih selalu mendoakan, menasehati, memotivasi dan mendukungku
dalam menggapai semua impian dan cita-citaku.
Kakakku (Amrina Rosyada) dan adikku (Azmi) yang selalu sayang dan perhatian
padaku.
Seluruh keluarga besar yang selalu mendukungku.
Dan kepada semua teman seperjuangan, serta almamaterku.
KATA PENGANTAR
Assalamualaikum Warahmatullahi Wabarakatuh

Dengan menyebut Asma Allah yang Maha Pengasih lagi Maha Penyayang,
segala puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah memberikan
rahmat dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
Efek Antihiperkolesterolemia Dari Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau
(Ulva lactuca L.) Pada Tikus Diabetes Yang Diinduksi Aloksan. Skripsi ini
disusun sebagai salah satu syarat dalam mencapai gelar Sarjana Farmasi Program
Studi Farmasi Fakultas Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta.
Selesainya skripsi ini tidak terlepas dari berbagai pihak yang telah mendorong,
membimbing, memberikan ide-ide, serta membantu dengan tenaga dan waktu. Oleh
karena itu dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang sebesarbesarnya kepada :
1.
Allah SWT atas karunia, rahmat serta hidayah-Nya, memberikan kelancaran

dalam penyusunan skripsi ini.
2.
Abahku Isrofan dan Mamahku Jamilah, yang dengan sabarnya selalu

memberikan motivasi, membimbing, dan mendoakan penulis untuk
menyelesaikan Skripsi ini.
3.
Alm. Prof. Dr. Mulyadi., Apt. selaku dosen yang telah memberikan
bimbingan, saran, pengarahan selama penelitian.
4.
Moch. Saiful Bachri, M. Si., Ph.D., Apt. selaku dosen pembimbing yang
telah memberikan saran dan kritik demi kesempurnaan skripsi ini.
5.
Wahyu Widyaningsih, M.Si., Apt. selaku dosen penguji yang telah banyak
memberikan ilmu dan saran dalam penyusunan skripsi ini.
vi
6.
Prof. Dr. Achmad Mursyidi, M.Sc., Apt. selaku dosen penguji yang telah
banyak memberikan ilmu dan saran dalam penyusunan skripsi ini.
7.
Ibu Dr. Dyah Aryani Perwitasari, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dekan Fakultas
Farmasi, Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta.
8.
Kakakku Amrina Rosyada, dan adikku Azmi dan seluruh keluarga penulis,
terima kasih atas segala dukungan dan doanya.
9.
Muhammad Nofriandi yang selalu mendukung dan memberikan semangat

kepada penulis selama penulisan Skripsi hingga detik ini.
10. Miftakh Fauziah, Vita Kurniyawati, Annisa Fikriyah, Ida Setyaningrum,

dan Utami Dwi Rahayu terimakasih untuk kerjasama dan kebersamaan di
tim Bissmillah yang solid ini.
11. Rahmadani Arifirdianti, Sri Wahyuni Kotho, Artie Noor Pratiwi, Nurul
Masyithah, Umiatun Solicha, dan Dina Masturah, terima kasih untuk
kebersamaan, dan telah bersedia menjadi teman dan sahabat yang baik yang
selalu menyemangati dan membantu.
12. Teman-teman seperjuangan angkatan 2010 Fakultas Farmasi, khususnya
kelas B, terima kasih atas kebersamaan dan semua dukungannya.
13. Kepala dan seluruh staf Laboratorium Farmakologi UAD khususnya Bapak
Hamam dan Bapak Samidi terimakasih atas bantuan selama penelitian.
14. Segenap pihak yang tidak bisa kami sebutkan satu-persatu yang telah
membantu baik secara moril maupun materil dalam penulisan Skripsi ini.
Semoga segala bantuan yang diberikan mendapat balasan dari Allah SWT
sebagai amal ibadah. Amin.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan, oleh karena
itu kritik dan saran yang membangun dari berbagai pihak sangatt penulis harapkan
demi perbaikan-perbaikan kedepan. Amin ya rabbal alamin.
Wassalamualaikum Warahmatullahi wabarakatuh.
vii
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL............................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN SKRIPSI ............................................................... iii
HALAMAN PERNYATAAN .............................................................................. iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ v
KATA PENGANTAR .......................................................................................... vi
DAFTAR ISI ....................................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xi
DAFTAR TABEL ................................................................................................ xii
DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xiii
ABSTRAK .......................................................................................................... xiv
ABSTRACT ........................................................................................................... xv
DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... xvi
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
A. Latar Belakang ............................................................................................. 1
B. Rumusan Masalah ........................................................................................ 2
C. Tujuan Penelitian ......................................................................................... 3
D. Kegunaan Penelitian..................................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................ 4
A. Kajian Teori ................................................................................................. 4
1.
Ganggang Hijau (Ulva lactuca L.) ........................................................... 4
2.
Phytomelatonin ......................................................................................... 8
3.
Polisakarida Sulfat .................................................................................... 9
4.
Flavonoid ................................................................................................ 10
5.
Ampas ..................................................................................................... 12
6.
Antioksidan ............................................................................................ 12
7.
Radikal Bebas ......................................................................................... 13

viii
8.
Antioksidan Mengurangi Stres Oksidatif pada Diabetes Mellitus ......... 14
9.
Diabetes .................................................................................................. 15
10.
Metabolisme lemak pada diabetes ...................................................... 18
11.
Kolesterol ............................................................................................ 19
12.
Hiperlipidemia .................................................................................... 23
13.
Glibenklamid ...................................................................................... 25
14.
Penetapan Kadar Kolesterol Darah ..................................................... 26
15.
Aloksan ............................................................................................... 27
16.
Maserasi .............................................................................................. 29
B. Penelitian Yang Relevan ............................................................................ 30

C. Kerangka Berfikir....................................................................................... 31
D. Hipotesis..................................................................................................... 33
BAB III METODE PENELITIAN....................................................................... 34
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ................................................................. 34
B. Sampel ........................................................................................................ 34
C. Bahan dan Alat yang Digunakan................................................................ 34
1.
Bahan ...................................................................................................... 34
2.
Alat ......................................................................................................... 35
D. Variabel Penelitian ..................................................................................... 35

1.
Variabel Bebas ....................................................................................... 35
2.
Variabel Terikat ...................................................................................... 35
3.
Variabel Terkendali ................................................................................ 35
E. Prosedur Penelitian..................................................................................... 35
1.
Identifikasi Ganggang Hijau................................................................... 35
2.
Pengumpulan, Pengeringan dan Pembuatan Serbuk Simplisia .............. 36
3.
Pembuatan Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau. ............................. 36
ix
4.
Identifikasi Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau ............................. 37
5.
Pembuatan CMC Na 1 % ....................................................................... 39
6.
Penyiapan Larutan Glibenklamid ........................................................... 39
7.
Perencanaan Dosis Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau ................. 39
8.
Hewan Percobaan ................................................................................... 42
9.
Preparasi sampel ..................................................................................... 44
10.
F.
Penetapan Kadar Kolesterol Total ...................................................... 44
Analisis Data .............................................................................................. 46
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 48

A. Hasil Identifikasi Tanaman Ganggang Hijau ............................................. 48
B. Pembuatan Simplisia dari Ganggang Hijau ............................................... 48
C. Pembuatan Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau.................................. 49
D. Identifikasi Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau ................................. 50
E. Penetapan Operating Time (OT) dan Panjang Gelombang Maksimum .... 56
F.
Hasil Uji Penetepan Kadar Kolesterol ....................................................... 59
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 70

A. Kesimpulan ................................................................................................ 70
B. Saran ........................................................................................................... 70
DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 71
LAMPIRAN ......................................................................................................... 76
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Ganggang Hijau (Guiry, 2007)................................................................. 4
Gambar 2.
Kadar phytomelatonin tertinggi dalam tanaman terjadi lima jam pasca

fase penggelapan (Kolar dan Machackova, 2001) ................................... 7
Gambar 3.
Struktur phytomelatonin (Alonso et al, 2008).......................................... 8
Gambar 4.
Struktur Flavonoid (Sjahid, 2008).......................................................... 10
Gambar 5.
Struktur kimia senyawa kolesterol (Guyton dan Hall, 2006) ................. 19
Gambar 6. Biosintesis Kolesterol (Lehninger, 2004)............................................... 22

Gambar 7.
Struktur Kimia Glibenklamid (Anonim, 2013) ...................................... 25
Gambar 8.
Struktur kimia aloksan (Anonim,2013).................................................. 28
Gambar 9.
Skema penelitian efek pemberian ampas ekstrak etanol ganggang hijau

terhadap kadar kolesterol darah tikus diabetes yang diinduksi aloksan 43
Gambar 10. Reaksi metode CHOD-PAP (Diasys, 2008) ........................................... 45

Gambar 11. Hasil Uji Alkaloid .................................................................................. 50
Gambar 12. Hasil Uji KLT Ampas Dari Ekstrak Etanol Ganggang Hijau Pada UV
254 nm. .................................................................................................. 51
Gambar 13. Hasil Uji Molish ..................................................................................... 52
Gambar 14. Mekanisme Reaksi dengan Pereaksi Molisch ........................................ 53
Gambar 15. Mekanisme Reaksi dengan Pereaksi Barfoed. ....................................... 53
Gambar 16. Hasil uji Barfoed .................................................................................... 54
Gambar 17. Hasil Uji Golongan Flavonoid ............................................................... 55
Gambar 18. Hasil Uji KLT Ampas Dari Ekstrak Etanol Ganggang Hijau Pada UV
254 nm. .................................................................................................. 56
Gambar 19. Hasil penetapan operating time .............................................................. 57
Gambar 20. Kurva panjang gelombang maksimum senyawa kuinonimin. ............... 59
Gambar 21. Mekanisme kolesterol dengan metode enzimatik (Anonim, 2012)........ 60
xi
DAFTAR TABEL
Tabel I.
Uji kualitatif golongan flavonoid (Harbone., 1987). ................................ 12
Tabel II.
Patokan Kadar Lipid Darah (mg/dl) yang memerlukan pengobatan

(Kamaluddin, 1993). ................................................................................ 23
Tabel III.
Komposisi sampel, standar, dan blangko yang dianalisis pada penetapan

kadar kolesterol darah .............................................................................. 46
Tabel IV. Tabel Uji Golongan Flavonoid ................................................................. 54

Tabel V.
Hasil penetapan operating time dari kolesterol standar dengan pereaksi

CHOD-PAP pada panjang gelombang 500 nm. ....................................... 58
Tabel VI. Rata-rata kadar glukosa darah yang diperiksa pada hari ke-0 dan ke-3
(Setyaningrum, 2014) ............................................................................... 62
Tabel VII. Rata-rata kadar kolesterol darah yang diperiksa pada hari ke-0 sampai hari
ke-17 ......................................................................................................... 64
Tabel VIII. Tabel Perubahan Penurunan Kadar Kolesterol Darah ............................. 68
xii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Determinasi ............................................................................. 76
Lampiran 2. Reagen CHOD-PAP (Dyasis) ........................................................... 77
Lampiran 3. Data Kadar Kolesterol Darah ........................................................... 79
Lampiran 4. Data Perubahan Penurunan Kadar Kolesterol Darah ....................... 84
Lampiran 5. Data Uji SPSS Hari ke-0 .................................................................. 86
Lampiran 6. Data uji SPSS hari ke-3 .................................................................... 90
Lampiran 7. Data uji SPSS hari ke-10 .................................................................. 94
Lampiran 8. Data uji SPSS hari ke-17 .................................................................. 98
Lampiran 9. Dokumen Penelitian ....................................................................... 102
xiii
ABSTRAK
DM adalah gangguan kronis dari karbohidrat, lipid dan metabolisme protein
disebabkan oleh peningkatan kadar glukosa darah karena berkurangnya sekresi
insulin. Kekurangan hormon insulin dapat mempengaruhi kerja beberapa enzim
metabolisme lemak. Pada penderita DM selalu di ikuti dengan hiperkolesterolemia.
Hiperkolesterolemia adalah kondisi dimana kadar kolesterol dalam darah meningkat
sehingga memicu terjadinya reaksi oksidasi lipid yang akan menghasilkan radikal
bebas. Ganggang hijau mengandung senyawa aktif yang mempunyai aktivitas sebagai
antioksidan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek dari ampas ekstrak
ganggang hijau sebagai antihiperkolesterolemia dengan metode induksi aloksan.
Ganggang hijau diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan etanol
96%. Ampas dari ekstrak etanol ganggang hijau digunakan untuk menurunkan kadar
kolesterol yang di induksi aloksan. Sebanyak 30 ekor tikus jantan galur Wistar dibagi
menjadi 6 kelompok yaitu kelompok normal, kelompok kontrol, kelompok
glibenklamid, 3 kelompok diberi ampas dari ekstrak ganggang hijau dosis 100; 200;
400 mg/kgBB (p.o). Aloksan diberikan intraperitoneal pada dosis 120 mg/kgBB
kecuali pada kelompok I. Pengambilan kadar kolesterol darah dilakukan 3 hari
setelah induksi aloksan yang dihitung pada hari ke-0, ke-3, ke-10, ke-17. Dan
dilakukan analisis statistika dengan menggunakan uji ANOVA satu jalan untuk
melihat pengaruh dosis dan waktu pemeriksaan kadar kolesterol darah.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ampas ekstrak etanol ganggang hijau
mempunyai senyawa aktif polisakarida sulfat dan flavonoid. Pemberian ampas
ekstrak etanol ganggang hijau dosis 200 mg/kgBB dan 400 mg/kgBB pada hari ke-14
mampu menurunkan kadar kolesterol darah tikus diabetes yang diinduksi aloksan, hal
ini ditunjukkan dengan adanya perbedaan yang signifikan jika dibandingkan dengan
kelompok kontrol.
Kesimpulan dari penelitian ini adalah senyawa aktif dalam ampas ekstrak
etanol ganggang hijau memiliki kemampuan menurunkan kadar kolesterol darah pada
tikus diabetes.
Kata kunci : Diabetes Mellitus (DM), Hiperglikemia, Hiperkolesterol, Aloksan,
Ganggang Hijau.
xiv
ABSTRACT
Diabetes Mellitus (DM) is a chronic metabolic disorders of carbohydrate, lipid
and protein metabolism. It is caused by an increase in blood glucose levels due to
reduced insulin secretion. Lack of insulin can affect the action of some enzymes of fat
metabolism. So that, patients who suffer from diabetes also suffer from
hypercholesterolemia. Hypercholesterolemia is a condition in which bloods
cholesterol levels increased. Therefore, hypercholesterolemia causes lipid oxidation
reactions that will produce free radicals. Green algae contains active compounds that
have antioxidant activity. This study aims to determine the effect of dregs of green
algae extracts as antihiperkolesterolemic with alloxan induction method.
Green algae is extracted by maceration method using 96% ethanol liquid
filters. Dregs of the ethanol extracts of green algae is used to lower cholesterol levels
in alloxan induction. A total of 30 male Wistar rats were divided into 6 groups:
normal, control, glibenklamid, three groups were given the dregs of extracts of green
algae dose of 100; 200; 400 mg/kgBW (p.o). Alloxan administered subcutaneously at
a dose of 120 mg/kgBW except in group I. Taking blood cholesterol levels performed
for 3 days after induction of alloxan were counted on days 0, 3rd, 10th, 17th. In this
study, statistical analysis such as one-way ANOVA test is used to see the effect of
dose and time of examination of blood cholesterol levels.
The results of this study showed that the dregs from the ethanol extracts of
green algae have active compound sulfate polysacharides and flavonoids. Giving
dregs of ethanol extract of green algae dose of 200 mg/kW and 400 mg/kW on day 14
can lower blood cholesterol levels in alloxan-induced diabetic rats, this is indicated
by a significant difference when compared with the control group.
The conclusion of this study is the active compound in the dresg of ethanol
extracts of green algae have the ability to lower blood cholesterol levels in diabetic
rats.
Keywords: Diabetes Mellitus (DM), Hiperglikemic, Hypercholesterolemia, Alloxan,
Green Algae.
xv
DAFTAR SINGKATAN
ADA
= American Diabetes Association
CMC-Na
= Natrium Carboxy Methyl Cellulose
dL
= desiliter
HDL
= High Density Lipoprotein
HMG Ko-A
= Hidroksil Metil Glutamil Koenzim-A
IDL
= Intermediet Density Lipoprotein
LDL
= Low Density Lipoprotein
VLDL
= Very Low Density Lipoprotein
xvi
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Diabetes Melitus adalah gangguan kronis dari karbohidrat, lipid dan
metabolisme protein di manisfestasikan oleh peningkatan kadar glukosa darah.
Penyakit ini disebabkan oleh catat pada selules penyerapan glukosa karena sekresi
insulin berkurang (Sedigheh et al., 2011). Kekurangan hormon insulin ini dapat
mempengaruhi kerja beberapa enzim metabolisme lemak yaitu enzim lipoprotein
lipase dan lipase sensitif
hormon yang akan berdampak ada penurunan
pemecahan lipoprotein dalam sirkulasi darah (Inawati et al., 2007). Sehingga

kandungan lipoprotein pada penderita diabetes melitus selalu di ikuti dengan
naiknya kadar kolesterol (Hermawan et al., 2004).
Obat diabetes mellitus oral yang digunakan pada saat ini secara umum
mekanisme kerjanya bertujuan untuk menurunkan kadar glukosa darah, tetapi
belum mengandung senyawa antioksidan yang mampu menekan radikal bebas
yang memicu berbagai komplikasi pada penyakit DM (Sutjiatmo, 2011). Untuk
itu, penggunaan bahan-bahan alami dengan kandungan senyawa antioksidan dapat
menjadi solusi alternatif untuk mencegah berbagai komplikasi DM (Evacuasiany,
2004).
Kerusakan sel beta pankreas pada hewan secara selektif dapat ditimbulkan
dengan pemberian aloksan dengan dosis sesuai serta pemberian obat-obat yang
menghambat sekresi insulin dan dengan pemberian antibodi anti insulin sehingga
menyebabkan diabetes pada hewan uji (Ganong, 1998).
1
Ganggang Hijau (Ulva lactuca L.) adalah rumput laut umum yang terdapat
di seluruh dunia dan dianggap sebagai sumber makanan penting dunia sebagai
sayuran laut. Ulva sp (selada laut) adalah sumber alam yang kaya karbohidrat,
protein, vitamin esensial seperti B1, C, E, dan B9, asam amino, dll. Ulva sp telah
digunakan sebagai obat pada pengobatan tradisional china untuk hiperlipidemia,
pasca stroke dan penyakit uriner (De Padua, 2004).
Melatonin dapat ditemukan dalam tanaman ganggang hijau menurut Sergio
et al. (2009). Kandungan Melatonin, Polisakarida Sulfat, dan Flavonoid yang ada
dalam ganggang hijau memiliki aktivitas antioksidan menurut beberapa penelitian
yang telah dilakukan (Hanna et al., 2009 ; Ofir et al., 2011 ; Meenakshi et al.,
2009).
Penyarian dengan cara maserasi tidak pernah dapat menarik zat berkhasiat
dari tanaman secara sempurna (Agoes, 2007). Oleh karena itu perlu dilakukan
penelitian lebih lanjut terhadap senyawa aktif dalam ampas ekstrak etanol
ganggang hijau apakah dapat menurunkan kadar kolesterol darah setelah
pemberian induksi aloksan pada tikus diabetes.
B. Rumusan Masalah
1.
Senyawa apa yang terkandung dalam ampas ekstrak etanol ganggang hijau?
2.
Apakah ampas ekstrak etanol ganggang hijau dapat menurunkan kadar

kolesterol darah dan berapakah dosis yang sesuai dalam menurunkan kadar
kolesterol darah pada tikus diabetes yang diinduksi aloksan?
3.
Berapakah waktu yang efektif dari ampas ekstrak etanol ganggang hijau
untuk menurunkan kadar kolesterol darah pada tikus diabetes yang diinduksi
aloksan?
C. Tujuan Penelitian
1.
Mengidentifikasi senyawa yang terkandung dalam ampas ekstrak etanol

ganggang hijau.
2.
Mengetahui efek penurunan kadar kolesterol darah dari ampas ekstrak etanol
ganggang hijau dan berapakah dosis pemberian yang berpengaruh terhadap
penurunan kadar kolesterol darah.
3.
Mengetahui waktu yang efektif dari ampas ekstrak etanol ganggang hijau
untuk menurunkan kadar kolestrol darah pada tikus diabetes yang diinduksi
aloksan.
D. Kegunaan Penelitian
1.
Memberikan informasi yang berguna untuk meningkatkan pemanfaatan

tanaman di Indonesia, khususnya ganggang hijau sebagai alternatif
pengobatan.
2.
Meningkatkan pemanfaatan Sumber Daya alam (SDA) yang ada di Indonesia

sebagai salah satu bahan untuk sediaan sediaan farmasi.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Kajian Teori
1.
Ganggang Hijau (Ulva lactuca L.)
a.
Klasifikasi Tanaman
Tanaman ganggang hijau seperti terlihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Ganggang Hijau (Guiry, 2007)

Berdasarkan taksonomi tumbuhan, klasifikasi tanaman ganggang hijau
adalah sebagai berikut : (Guiry, 2007)
Kingdom
: Plant
Divisio
: Thallophyta
Kelas
: Chlorophyta
Ordo
: Ulvales
Familia
: Ulvaceae
Genus
: Ulva
Spesies
: Ulva lactuca
Habitat
: air laut, payau, kayu-kayuan, batu-batuan.
b. Deskripsi Tanaman
Dalam dunia tumbuhan, ganggang termasuk dalam dunia thallophyta
(tumbuhan talus) karena belum memiliki akar, batang dan daun yang jelas.
Tumbuhan ganggang ada yang bersel tunggal dan juga ada yang bersel banyak
dangan bentuk serupa benang atau lembaran. Ganggang mempunyai zat warna
(pigmen), di antaranya klorofil, karoten, dan xantofil. Ganggang bersifat autotrof
(dapat membuat makanannya sendiri). Hampir semua ganggang bersifat
eukaryotic. Habibat hidupnya di air tawar, air laut, dan di tempat kembab,
ganggang yang hidup di air umumnya sebagai plankton. Ganggang hijau
merupakan kelompok ganggang yang paling banyak jumlahnya di antara
ganggang lain. Cara reproduksinya adalah dengan fragmentasi dan konjugasi
(Kolar dan Machackova, 2001).
Ganggang ini mempunyai morfologi berupa bentuk tubuh yang tidak
bercabang dan terdiri dari satu atau lebih nukleus. Kloroplas berada di antara
sitoplasma dan vakuola yang di lindungi oleh dinding sel. Kloroplas menyerupai
pita berbentuuk spiral yang terletak di tepi dinding sel. Pirenoid di kelilingi oleh
butiran plastid dan berantai sepanjang kloroplas. Nukleus verada di sitoplasma
dan sering kali bergabung di pusat vakuola. Sitoplasma mengelilingi nukleus dan
verada di sela-sela vakuola. Dinding sel ganggang hijau bersifar lunak dan tidak
berlubang. Dinding tersebut terdiri atas selulosa dengan selaput pektin yang agak
berlendir. Lendir tersebut menyebabkan ganggang hijau terasa licin bila disentuh
(Kolar dan Machackova, 2001)
Dalam dunia tumbuhan ganggang termasuk dalam thallophya (tumbuhan
halus), karena belum mempunyai akar, batang dan daun secara jelas. Ganggang
ada yang bersel tunggal dan ada juga yang bersel banyak, bentuk serupa benang
atau lembaran. Mempunyai pigmen klorofil karoten dan xantofil. Cara reproduksi
dengan fragmentasi dan konjugasu (Kolar dan Machackova, 2001). Kelas
Chlorophyta yang lebih di kenal atau populer dengan sebutan alga hijau, yaitu
kelompok dari alga yang terdiri dari lebih kurang 429 marga dan 6600 jenis.
Secara mikroskopis setiap genus dari Chlorophyta memiliki ciri yang khas,
kloroplas berbentuk jala terdapat pada Hydrodyction dan kloroplas berbentuk
spiral terdapat pada Spyrogira sp, ganggang hiijau memiliki kloroplas berbentuk
butiran. Secara lebih rinci, ganggang hijau memliki kloroplas berbentuk butiran
dengan 1-3 pyrenoids yang membentuk lingkaran utuh dan tidak utuh. Ganggang
hijau berbentuk lembaran seperti daun selada, terdiri dari 2 lapis sel yang
membentuk struktur seperti parenkim.
c.
Kandungan Kimia
Ganggang, seperti tanaman lain, menghasilkan berbagai senyawa metabolit
sekunder. Senyawa tersebut disentesis pada akhir fase pertumbuhan dan/atau

karena perubahan metabolik yang diinduksi oleh kondisi stres lingkungan. Produk
yang dihasilkan meliputi karotenoid, senyawa fenolik, polisakarida, dan asam
lemak tak jenuh. Senyawa-senyawa tersebut memiliki aktivitas biologis seperti

antioksidan, antikanker, antimikroba terhadap bakteri, virus, jamur, sebagai pupuk
organik dan berpotensi untuk bioremidiasi (Shalaby, 2011).
Polisakarida sulfat yang terkandung dalam ganggang hijau adalah kelompok
dari hetero polisakarida yang terdiri dari rhamnose, xylose, glukosa, asam
glukoronat dan sulfat (Leiro et al., 2007).
Ganggang hijau mengandung senyawa melatonin
(Sergio et al., 2009).
Melatolin dapat ditemukan dalam tanaman ganggang hijau, dimana salah satu
diantaranya adalah ganggang hijau (Kolar dan Machackova, 2001). Melatonin
merupakan sejenis hormon yang merupakan antioksidan yang kuat. Hasil
penelitian menyebutkan bahwa kadar melatonin tertinggi dalam tanaman adalah
lima jam pasca fase penggelapan. Hasil penelitian tersebut seperti terlihat pada
Gambar 2. :
Gambar 2. Kadar phytomelatonin tertinggi dalam tanaman terjadi lima jam

pasca fase penggelapan (Kolar dan Machackova, 2001)
2.
Phytomelatonin
Phytomelatonin merupakan zat aktif melatonin yang terdapat dalam
tanaman. Melatonin mampu mengatasi radikal bebas (antioksidan), hal ini

dikarenakan melatonin dapat menetralisir zat radikal dengan menyumbangkan
elektronnya. Melatonin merupakan antioksidan yang lebih reaktif dibandingkan
vitamin E atau glutation sehingga lebih efektif mengatasi radikal yang masuk ke
dalam tubuh.
Struktur melatonin seperti di lihat pada Gambar 3. Alkoloid termasuk
metabolik sekunder yang bersifat basa, yang mengandung satu atau lebih atom
nitrogen, biasanya dalam cincin heterosiklik (Alonso et al., 2008).
Gambar 3. Struktur phytomelatonin (Alonso et al, 2008)

Melatonin memiliki nama kimia, yaitu N-acetyl-5-methoxy tryptamine.
Senyawa ini mempunyai bobot molekul (BM) sebesar 232. Melatonin mempunyai
efek yang luas, seperti dalam kelenjar pineal di bawah otak, melatonin berlaku
sebagai sebuah hormon induk yang merangsang keluarnya berbagai hormon
lain. Pada jantung dan sistem peredaran darah, melatonin mengurangi
kemungkinan
terbentuknya
gumpalan-gumpalan
darah
yang
membantu
melindungi dari serangan jantung dan stroke. Melatonin meningkatkan
kemampuan sel-sel darah putih untuk membentuk antibodi. Di seluruh tubuh,

melatonin bertindak langsung atas sel-sel sebagai antioksidan yang melindungi
sel-sel dari kerusakan akibat radikal bebas.
Melatonin dapat larut dalam pelarut metanol, etanol, dan HCl 0,1 N.
Senyawa ini dapat di identifikasi pada panjang gelombang 280 nm dalam pelarut
etanol (Baghurst dan Bursby, 2008). Melatonin dalam tanaman dapat di pisahkan
dari komponen yang lain yang ada dalam tanaman dengan menggunakan metode
kromografi lapis tipis. Harga RF atau perbandingan antara panjang (cm) dari
bercak hingga batas awal elusi di bagi dengan panjang (cm) dari batas awal elusi
hingga batas akhir elusi pada senyawa melatonin berbeda-beda tergantung pada
fase gerak yang di gunakan.
Melatonin menangkal radikal bebas secara ekstraseluler dimana melatonin
memiliki mekanisme penangkalan dangan cara menangkap senyawa-senyawa
radikal oksigen dan melindungi lipoprotein plasma (Gutteridge, 1995).
3.
Polisakarida Sulfat
Polisakarida Sulfat dari alga memperlihatkan peran penting dalam
menangkal radikal bebas secara in-vitro dan antioksidan untuk melindungi

organisme hidup yang melawan terhadap reaktif oksigen spesies (Qi et al., 2005).
Aktivitas antioksidan dari fraksi murni polisakarida sulfat di evaluasi secara
in vitro dengan pengujian penangkapan radikal superoksida lipid, pengujian
penangkapan radikal hidroksi dan pengujian penangkapan radikal nitrit oksida
(Shonima et al., 2012). Ulva sp banyak mengandung polisakarida, mengandung
10
selulosa dan polisakarida yang larut air seperti kelompok sulfat. Polisakarida
sulfat dari alga laut diketahui mampu menghambat beberapa aktivitas biologi dan
psikologi seperti anti oksidan, antikoagulan, dan antihiperlipidemia (Yu et al.,
2003).
4.
Flavonoid
Flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol terbesar ditemukan di alam
(Harborne., 1999). Senyawa flavonoid adalah senyawa yang mempunyai struktur

dasar C6C3C6. Tiap bagian C6 merupakan cincin benzene yang terdistribusi dan
dihubungkan dengan C3 yang merupakan rantai alifatik. Struktur flavonoid dapat
dilihat pada Gambar 4. Flavonoid merupakan senyawa fenol alam yang terdapat
pada hampir semua tumbuhan dari bangsa algae hingga gymnospermae.
Gambar 4. Struktur Flavonoid (Sjahid, 2008)

Flavonoid yang ditemukan Fowler et al. (2009) menunjukan aktivitas
biokimia seperti antioksidan, antivirus, antibakteri, dan antikanker. Flavonoid
merupakan senyawa pereduksi yang baik, menghambat banyak reaksi oksidasi,
baik secara enzim maupun non enzim. Flavonoid bertindak sebagai penampung
yang baik radikal hidroksi dan superoksida dengan demikian melindungi lipid
membran terhadap reaksi yang merusak (Sjahid, 2008). Flavonoid berperan
11
sebagai antioksidan dengan cara mendonasikan atom hidrogennya atau melalui

kemampuannya mengkelat logam, berada dalam bentuk glukosida (mengandung
rantai samping glukosa) atau dalam bentuk bebas yang disebut aglikon. Pada
penelitian yang telah di lakukkan oleh Meenakshi et al. (2009) diketahui bahwa
Ulva lactuca memiliki kandungan flavonoid dan terbukti mempunyai aktivitas
sebagai antioksidan.
Hasil dari studi yang dilakukan oleh Zhu et al. (2000) menunjukkan bahwa
senyawa quercetin memiliki aktivitas perlindungan yang bervariasi terhadap
penurunan kandungan -tokoferol dalam LDL sedangkan kaempferol dan morin
kurang efektif dibandingkan dengan myricetin dan quercetin.
Berdasarkan hasil-hasil penelitian yang telah dilakukan, diyakini bahwa
flavonoid sebagai salah satu kelompok senyawa fenolik yang memiliki sifat
antioksidatif serta berperan dalam mencegah kerusakan sel dan komponen
selularnya oleh radikal bebas reaktif.
Penggolongan Jenis Flavonoid
Flavonoid dalam tumbuhan terdapat sebagai campuran, seringkali terdiri
atas flavonoid yang berbeda golongan. Penggolongan jenis flavonoid (Tabel I)
didasarkan pada sifat kelarutan dan reaksi warna. Flavonoid merupakan senyawa
polar karena memiliki sejumlah gugus hidroksil yang tidak tersubtitusi. Pelarut
polar seperti etanol, metanol, etilasetat, atau campuran dari pelarut tersebut dapat
digunakan untuk mengekstrak flavonoid dari jaringan tumbuhan (Rijke, 2005).
12
Pemeriksaan pendahuluan golongan flavonoid dilakukan dengan pereaksi

spesifik. Reaksi yang terjadi antara pereaksi spesifik dan suatu golongan
flavonoid akan menghasilkan warna tertentu.
Tabel I. Uji kualitatif golongan flavonoid (Harbone., 1987).
Golongan
Warna hasil
Pereaksi
Flavonoid
Reaksi
CH3COONa
Antosianidin
Merah
FeCl3
Antosianidin
Biru
CH3COOPb
Jingga
Kalkon
Merah
Auroon
Jingga
Flavon
hingga krem
NaOH 0.1 N
Kalkon dan
Merah
auron
hingga ungu
Flavonol dan
Kuning
Flavon
H2SO4 pekat
Flavonol dan
Kuning
flavon
Flavonol
Jingga
hingga krem
Kalkon
Merah
5.
Ampas
Ampas adalah sisa-sisa barang yang telah diambil sarinya atau patinya dari
hasil penyaringan sediaan yang diperoleh dengan menyaring zat aktif dari
simplisia nabati dan hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian massa
atau serbuk yang terampas di perlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang
telah ditetapkan (Anonim, 2012).
6.
Antioksidan
Antioksidan adalah zat yang dalam kondisi kecil dapat mencegah atau
memperlambat oksidasi radikal bebas. Dalam konsentrasi yang lebih rendah dari
13
zat yang mudah teroksidasi, antioksidan mampu mencegah atau memperlambat

oksidasi tersebut (Halliwel et al., 1995). Menurut Gordon (1990) Antioksidan di
bagi menjadii 2 kelompok yaitu : antioksidan primer yang dapat bereaksi dengan
radikal bebas membentuk produk yang lebih stabil dan antioksidan sekunder yang
disebut antioksidan pelindung yang berperan dalam mereduksi kecepatan inisiasi
melalui berbagai macam mekanisme dan berperan dalam memperlambat laju
autooksidasi lemak dangan cara mengikat ion logam memecah hidroperoksida
menjadi spesies non radikal, menyerap radiasi ultraviolet dan menginaktifkan
oksigen singlet.
Antioksidan pada umumnya banyak ditemukan pada sayuran, buah-buahan
dan tumbuh-tumbuhan. Selain itu antioksidan juga bisa disentesis (produksi)
dalam tubuh kita. Contoh antioksidan yang berasal dari makanan adalah vitaminn
E, C, A, Asam Phenolik, selenium, klorofil, karotenoid, flavonoid, glutation,
coenzyme Q10, melatonin, dan licopen, sedangkan yang diproduksi dalam tubuh
meliputi asam urat, HDL, dan asam amino.
Antioksidan dari tumbuhan dapat menghalangi kerusakan oksidatif melalui
reaksi dengan radikal bebas, membentuk kelat dengan senyawa logam katalitik
dan menangkap senyawa oksigen (Khilifi et al., 2005).
7.
Radikal Bebas
Radikal bebas adalah suatu atom yang tidak stabil dan sangat reaktif karena
memiliki satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan pada orbital luarnya.
Radikal bersifat bebas dekstruktif dan memicu berbagai penyakit (Pribadi, 2009).
14
Radikal bebas yang diproduksi dalam tubuh normal akan dinetralisir oleh
antioksidan yang ada dalam tubuh, bila kadar radikal bebas terlalu tinggi maka
kemampuan dari antioksidan endogen tidak memadai untuk menetralisir radikal
bebas sehingga terjadi keadaan yang tidak seimbang antara radikal bebas dengan
antioksidan. Radikal bebas dapat menyebabkan timbulnya beberapa penyakit
degeneratif diantaranya infark miokard, arteroklerosis, abnormal DNA yang
menyebabkan timbulnya kanker. Radikal bebas berperan penting pada
pembentukan plak antheromathosa. Bila LDL teroksidasi oleh radikal bebas akan
mudah baginya untuk menempel pada dinding dalam arteri dan selanjutnya
menjadi plak. Sehingga cara pencegahan adalah mengurangi kolesterol dan
mengurangi radikal bebas (Guyton dan Hall, 2006).
8.
Antioksidan Mengurangi Stres Oksidatif pada Diabetes Mellitus

Pemberian antioksidan dapat mengurangi stres oksidatif bagi penderita DM-
1 baik kronis maupun akut (Lee, 2002). Sebagian besar antioksidan dalam plasma
dapat berkurang pada pasien DM-2 dikarenakan komplikasi diabetes yang
menyebabkan berbagai komplikasi antara lain aterosklerosis dan penyakit jantung
koroner (Tiwari, 2002).
Antioksidan dapat mengurangi kerusakan oksidatif pada penderita diabetes.
Hasil penelitian di Turki menunjukkan pada tiga puluh penderita DM-2 ditemukan
adanya ketidakseimbangan oksidan dan antioksidan dalam plasma penderita
diabetes dibanding kontrol. Pemberian antioksidan dan komponen senyawa
polifenol menunjukkan dapat menangkap radikal bebas, mengurangi stres
oksidatif. Senyawa fitokimia ternyata mampu memanipulasi dengan berbagai
15
mekanisme sehingga dapat mengurangi komplikasi diabetes melalui pengurangan

stres oksidatif, ROS dan TNF- (Tiwari, 2002).
Pada diabetes melitus, pertahanan antioksidan dan sistem perbaikan seluler
akan terangsang sebagai respons tantangan oksidatif. Sumber stres oksidatif yang
terjadi berasal dari peningkatan produksi radikal bebas akibat autooksidasi
glukosa, penurunan konsentrasi antioksidan berat molekul rendah di jaringan, dan
gangguan aktivitas pertahanan antioksidan enzimatik. Di samping itu, stres
oksidatif juga memiliki kontribusi pada perburukan dan perkembangan kejadian
komplikasi. Pada diabetes anak ditemukan penurunan glutation eritrosit, glutation
total, -tokoferol plasma, dan -karoten plasma secara bermakna. Penurunan
berbagai antioksidan tersebut terkait dengan pembentukan senyawa penanda
adanya stres oksidatif, misalnya peningkatan lipid hidroperoksida, diena
terkonjugasi, dan protein karbonil secara bermakna. Pada diabetes usia 50-60
tahun ditemukan peningkatan peroksidasi lipid sejak onset diabetes (Setiawan et
al., 2005).
9.
Diabetes
Diabetes Melitus (DM) merupakan penyakit kelainan metabolisme karena
kurangnya hormon insulin yang ditandai dengan hiperglikemia, gangguan

karbohidrat, lemak dan protein di dalam tubuh. Hormon insulin dihasilkan oleh
sekelompok sel beta di kelenjar pankreas dan sangat berperan dalam metabolisme
glukosa tubuh. Diabetes melitus adalah suatu kondisi dimana kadar gula dalam
darah lebih tinggi dari biasa atau normal (normal: 60mg/dL sampai dengan
16
145mg/dL), karena tubuh tidak bisa melepaskan hormon insulin secara cukup
(Maulana, 2009).
Berdasarkan ADA (American Diabetes Association), ada dua cara dalam
menegakkan diagnosis DM, yaitu :
a. Kadar glukosa darah sewaktu (tidak puasa) 200 mg/dL
b. Kadar glukosa darah puasa (keadaan tanpa suplai makanan (kalori)
minimum 8 jam, tetapi tetap boleh minum) 126 mg/dL
Penentuan kondisi diabetes pada tikus didasarkan pada kadar glukosa darah
kondisi normal dan kondisi DM pada manusia. Pada keadaan normal kadar
glukosa darah manusia berkisar pada 70-110 mg/dL, sedangkan kondisi DM bila
kadar glukosa darah puasa lebih besar dari 120 mg/dL. Dengan kata lain kondisi
DM tercapai bila kadar glukosa darah puasa naik melebihi 71% dari kondisi
normal (Tara dan Soetrisno, 2002).
Berdasarkan klasifikasi American Diabetes Association/ World Health
Organization (ADA/WHO), diabetes mellitus diklasifikasikan menjadi empat tipe
berdasarkan penyebab dan proses penyakitnya.
a.
Diabetes Mellitus tipe I (insulin dependent diabetes mellitus)
Pada tipe I, sel pankreas yang menghasilkan insulin mengalami kerusakan.

Akibatnya, sel-sel pada pankreas tidak dapat mensekresi insulin atau dapat
mensekresi insulin hanya dalam jumlah kecil. Kerusakan pada sel-sel
disebabkan oleh peradangan pada pankreas (pancreatitis) yang dapat disebabkan
oleh infeksi virus atau akibat endapan-endapan besi dalam pankreas
(hemokromatis atau hemosiderosis). Akibat sel-sel tidak dapat membentuk
17
insulin maka penderita tipe I ini selalu tergantung pada insulin. Dari hasil
penelitian, persentase penderita diabetes mellitus tipe I sebesar 10-20 %,
sedangkan penderita diabetes mellitus tipe II sebesar 80-90%.
b.
Diabetes mellitus tipe II (non-insulin dependent diabetes)
Pada tipe II, sel sel pankreas tidak rusak, walaupun mungkin hanya
terdapat sedikit yang normal sehingga masih bisa mensekresi insulin, tetapi dalam
jumlah kecil sehingga tidak cukup untuk memenuhi kebutuhan tubuh. Biasanya,
penderita tipe ini adalah orang dewasa gemuk diatas 40 tahun, tetapi kadangkadang juga menyerang segala umur.
Tipe II merupakan kondisi yang diwariskan (diturunkan). Biasanya,
penderitanya mempunyai anggota keluarga yang juga terkena. Sifat dari gen yang
menyebabkan diabetes tipe ini belum diketahui. Sekitar 25% penderita diabetes
tipe II mempunyai riwayat penyakit keluarga dan hampir semua kembar identik
yang menderita penyakit tipe II, pasangan kembarnya juga menderita penyakit
yang sama.
c.
Diabetes mellitus saat kehamilan
Diabetes mellitus saat kehamilan merupakan istilah yang digunakan untuk

wanita yang menderita diabetes selama kehamilan dan kembali normal sesudah
hamil. Banyak wanita yang mengalami diabetes kehamilan kembali normal saat
postpartum (setelah kelahiran), tetapi pada beberapa wanita tidak demikian.
Seorang wanita hamil membutuhkan lebih banyak insulin untuk
mempertahankan metabolisme karbohidrat yang normal. Jika tidak mampu
menghasilkan lebih banyak insulin, wanita hamil dapat mengalami diabetes yang
18
mengakibatkan perubahan pada metabolisme
glukosa (karbohidrat) dan
metabolisme zat lain (Wijayakusuma, 2004).

10. Metabolisme lemak pada diabetes
Kelainan utama metabolisme lemak pada diabetes mellitus adalah
percepatan katabolisme lemak, disertai peningkatan pembentukan benda-benda
keton, dan penurunan sintesis asam lemak. Pada diabetes mellitus, manifestasi
gangguan metabolisme lemak sedemikian menonjol.
Penyakit diabetes melitus (DM) merupakan penyakit menahun yang
ditandai dengan kadar gula darah melebihi nilai normal (hiperglikemia). Kondisi
ini timbul terutama disebabkan oleh adanya gangguan pada metabolisme
karbohidrat (gula) di dalam tubuh. Gangguan tersebut antara lain disebabkan oleh
adanya gangguan fungsi hormon insulin di dalam tubuh. Pada penderita diabetes
melitus, gangguan fungsi hormon insulin akan menyebabkan pula gangguan
metabolisme lemak, yang ditandai dengan meningkatnya kadar beberapa zat
turunan lemak seperti trigliserida dan kolesterol. Peningkatan trigliserida dan
kolesterol merupakan akibat penurunan pemecahan lemak yang terjadi karena
penurunan aktivitas enzim-enzim pemecahan lemak yang kerjanya di pengaruhi
oleh insulin (Nortiningsih, 2004, cit. Fatmawati, 2008).
Trigliserida bersama dengan protein, fosfolipid, dan kolesterol ester
bergabung membentuk kilomikron. Trigliserida yang terdapat dalam kilomikron
ini akan di hidrolisis menjadi asam lemak dan gliserol dimana asam lemak akan
memasuki sel-sel jaringan, sebagian akan diubah menjadi energi asetil-CoA yang
merupakan
prekursor
pembentukan
kolesterol.
Hiperglikemia,
19
hiperkolesterolemia, dan hipertrigliseridemia secara bersamaan disebabkan oleh

terjadinya penurunan produksi insulin yang mengakibatkan kerja beberapa enzim
untuk melakukan metabolisme lemak yaitu enzim lipoprotein lipase dan lipase
sensitif hormon teganggu. Enzim lipoprotein lipase yang menghidrolisis
trigliserida dalam sirkulasi tidak terinduksi, sedangkan enzim lipase sensitif
hormon yang menghidrolisis trigliserida dalam jaringan tidak terhambat.
Akibatnya, kadar lemak dalam sirkulasi darah meningkat dan kadar lemak dalam
jaringan adiposa menurun (Tjokroprawiro, 2003).
11. Kolesterol
a.
Definisi dan Manfaat

Kolesterol merupakan lipid amfipatik yang mempunyai unsur penting
dalam membran plasma dan lipoprotein plasma, juga merupakan prekursor

homon-hormon steroid dan asam lemak (Ganong, 2002). Kolesterol sering
ditemukan dalam bentuk kombinasi dengan asam lemak seperti ester kolesterol.
Struktur kimia kolesterol terdiri dari 27 atom karbon yang berbentuk empat
lingkaran sepert terlihat pada Gambar 5.
Gambar 5. Struktur kimia senyawa kolesterol (Guyton dan Hall, 2006)
20
Dalam tubuh manusia terdapat dua macam kolesterol yaitu kolesterol

eksogen dan kolesterol endogen. Kolesterol eksogen adalah kolesterol yang
diabsobsi setiap hari dari saluran pencernaan sedangkan kolesterol endogen adalah
kolesterol yang dibentuk dalam sel tubuh. Jumlah kolesterol endogen lebih besar
daripada kolesterol eksogen.
Kolesterol ditemukan pada setiap sel yang ada di dalam tubuh, merupakan
zat penting bagi pembentukan organ-organ yang ada di dalam tubuh dan juga
merupakan komponen penting dari semua jaringan tubuh manusia. Oleh karena
itu kolesterol pun dibutuhkan oleh tubuh dan memberikan manfaat (Graha, 2010).
Manfaat kolesterol itu antara lain :
1) Penyumbangan energi yang lebih tinggi daripada protein
2) Pembungkus jaringan saraf
3) Pelapis selaput sel
4) Bahan dasar pembentukan hormon-hormon steroid
5) Pembuat garam empedu yang penting untuk mencerna lemak
6) Pelarut vitamin A, D, E, dan K
7) Berperan
dalam
membantu
perkembangan
jaringan
otak
anak
(Harlinawati, 2006).
b.
Biosentisis Kolesterol
Sedikit lebih dari separuh jumlah kolesterol tubuh berasal dari sinstesis
(sekitar 700 mg/hari), dan sisanya berasal dari makanan sehari-hari. Pada
hakekatnya semua jaringan yang mengandung sel-sel berinti mampu mensintesis
kolesterol, tetapi terutama di sel hati dan usus. Prekursos untuk sintesis kolesterol
21
adalah asetil Ko-A, yang dapat dibentuk dari glukosa, asam lemak atau asam
amino (Mark et al., 2000).
Biosintesis kolesterol dapat dibagi menjadi lima tahap. (1) Mevalonat, yang
merupakan senyawa enam-karbon, disentesis dari asetil-KoA. (2) Unit isoprenoid
dibentuk dari mevalonat melalui pelepasan CO2. (3) Enam unit isoprenoid
mengadakan kondensasi untuk membentuk senyawa antara, skualena. (4)
Skualena mengalami siklisasi untuk menghasilkan senyawa steroid induk, yaitu
lanosterol. (5) Kolesterol dibentuk dari lanosterol setelah melewati beberapa tahap
selanjutnya, termasuk pelepasan tiga gugus metil (Lehninger, 2004).
Tahapan pertama melibatkan perubahan asetil KoA menjadi HMG-KoA
yang dikatalisis oleh enzim HMG-KoA sintase, dilanjutkan sintesis HMG-KoA
menjadi mevalonat yang dikatalisis oleh enzim HMG-KoA reduktase (Gambar
6a). Tahapan selanjutnya adalah pembentukan unit-unit isoprenoid dari mevalonat
(Gambar 6b). Tahapan keempat adalah proses polimerisasi enam molekul
isoprenoid untuk membentuk molekul squalene (Gambar 6c). Tahap paling akhir
ialah proses terbentuknya inti sterol dari squalene, yang kemudian akan diubah
menjadi kolesterol (Gambar 6d).
22
Gambar 6. Biosintesis Kolesterol (Lehninger, 2004)
23
12. Hiperlipidemia
Istilah
hiperlipidemia
menyatakan
peningkatan
kolesterol
(hiperkolesterolemia) dan/atau trigliserida (hipertrigliseridemia) serum di atas

batas normal. Kasus dengan kadar tinggi yang disebabkan oleh gangguan sistemik
disebut sebagai hiperlipidemia sekunder.
Penyebab utama hiperlipidemia adalah obesitas, asupan alkohol yang
berlebihan, diabetes melitus, hipotiroidisme, dan sindrom nefrotik. Hiperlipidemia
akibat kelainan genetik terhadap metabolisme lipid dalam mengode enzim,
apoprotein, atau reseptor yang terlibat disebut sebagai hiperlipidemia primer.
Hiperkolesterolemia
merupakan
hasil
dari
meningkatnya
produksi
atau
meningkatnya penggunaan LDL (Low Density Lipoprotein) (Muwarni et al.,

2006).
Hiperlipidemia atau lebih tepatnya hiperlipoproteinemia adalah keadaan
dimana kadar kolesterol, trigleserida, LDL, VLDL, serta kilomikron dalam
plasma melebihi bilangan-bilangan normal. Kadar lipid darah yang lebih dari
batas tanpa resiko dan memerlukan pengobatan dapat dilihat pada Tabel II :
Tabel II. Patokan Kadar Lipid Darah (mg/dl) yang memerlukan pengobatan
(Kamaluddin, 1993).
Lipid
Tanpa resiko
Batas
Perlu pengobatan
Trigleserida
<150
150-200
>200
Kolesterol total
<220
220-260
>260
Kolesterol LDL
<150
150-190
>190
Kolesterol HDL
<55
35-55
>35
24
Berdasarkan jenisnya hiperlipidemia dibagi menjadi 2, yaitu :

a.
Hiperlipidemia Primer
Banyak disebabkan oleh kelainan genetik. Biasanya kelainan ini
ditemukan pada waktu pemeriksaan laboratorium secara kebetulan. Pada
umunya tidak ada keluhan, kecuali pada keadaan yang agak berat tampak
adanya xantoma (penumpukan lemak di bawah jaringan kulit).
b.
Hiperlipidemia Sekunder
Pada jenis ini, peningkatan kadar lipid darah disebabkan oleh suatu
penyakit, misalnya : diabetes mellitus, gangguan tiroid, penyakit hepar dan
penyakit ginjal. Hiperlipidemia sekunder bersifat reversible (berulang)
(Anonim, 2006). Klasifikasi klinis hiperlipidemia dalam hubungannya
dengan Penyakit Jantung Koroner (PJK) :
1) Hiperkolesterolemia, yaitu kadar kolesterol meningkat dalam darah.
2) Hipertrigleserida, yaitu kadar trigleserida meningkat dalam darah.
3) Hiperlipidemia campuran, yaitu kadar kolesterol dan trigleserida
meningkat dalam darah.
Penyebab hiperlipidemia diantaranya adalah (1) faktor keturunan/genetik
(penyebab primer) dan (2) usia; jenis kelamin; riwayat keluarga dengan
hiperlipidemia; obesitas/kegemukan; menu makanan yang mengandung asam
lemak seperti mentega, margarine, whole milk, es krim, keju, daging berlemak;
kurang melakukan olahraga; penggunaan alkhohol; merokok; diabetes yang tidak
terkontrol dengan baik; gagal ginjal; kelenjar tiroid yang kurang aktif; obat-obat
25
tertentu yang dapat mengganggu metabolisme lemak seperti estrogen, pil KB,
kortikosteroid, diuretik tiazid (pada keadaan tertentu) (penyebab sekunder)
(Muwarni et al., 2006).
13. Glibenklamid
Glibenklamid merupakan obat antidiabetik oral golongan sulfonylurea
generasi kedua. Pada dasarnya obat golongan ini mempunyai mekanisme kerja
yang sama hanya berbeda pada potensi dan farmakokinetik yang menyebabkan
perbedaan masa kerja. Penurunan kadar glukosa darah yang terjadi setelah
pemberian obat golongan sulfonilurea disebabkan oleh perangsangan sekresi
insulin dengan menstimulasi sel-sel Langerhans di pankreas, itulah mengapa
obat ini hanya bisa digunakan pada penderita DM yang pankreasnya masih
mampu memproduksi insulin. Pada dosis tinggi, obat ini menghambat
penghancuran insulin oleh hati. Absorpsi derivat sulfonilurea melalui usus baik,
sehingga dapat diberikan per oral. Setelah absorpsi, obat tersebar ke seluruh cairan
ekstrasel. Dalam plasma sebagian terikat pada protein plasma terutama albumin
(70-90%). Struktur kimia glibenklamid dapat dilihat pada Gambar 7.
Gambar 7. Struktur Kimia Glibenklamid (Anonim, 2013)

Glibenklamid dimetabolisme dalam hati, hanya 25% metabolit dieksresi
melalui urin dan sisanya dieksresi melalui empedu dan tinja. Obat ini efektif
26
dengan pemberian dosis tunggal. Bila pemberian dihentikan obat akan bersih dari
serum sesudah 36 jam dengan waktu paruh plasmanya 6-7 jam. Efek samping
obat golongan ini yang terpenting adalah hipoglikemia yang dapat terjadi secara
terselubung. Agak jarang terjadi gangguan lambung usus (mual,muntah,diare),
sakit kepala, pusing, rasa tidak enak di mulut, juga gangguan kulit alergis. Nafsu
makan dan berat badan bisa meningkat, terutama pada mereka yang tidak menaati
diet (Tjay dan Rahardja, 2002).
Menurut penelitian yang telah dilakukkan oleh Fondjo et al., (2012)
pemberian glibenklamid 5 mg/kgBB pada tikus diabetes dapat menurunkan kadar
trigliserid, kolesterol total, kolesterol LDL secara signifikan. Serta pemberian
glibenklamid pada pasien Diabetes Mellitus II selama 2 minggu dapat
meningkatkan kolesterol HDL secara signifikan walaupun belum mencapai kadar
normal.
14. Penetapan Kadar Kolesterol Darah
Metode CHOD-PAP
Prinsip : kolesterol ditemukan setelah hidrolisa enzimatik dan oksidasi.
Indikator quinoneimine terbentuk dari hydrogen peroksida dan 4-aminianypyrine
dengan adanya phenol peroksidase.
Metode ini (enzimatis) memperlihatkan lineritas yang baik sampai dengan
500 mg/dl. Sampel dengan nilai yang lebih dari 500 mg/dl harus dianalisa ulang
setelah pengenceran dengan Natrium Klorida (Na Cl). Tahap reaksi awal metode
enzimatis adalah hidrolisis ester kolesterol untuk membentuk kolesterol bebas.
Tahap berikutnya adalah tahap oksidasi yang menggunakan oksigen untuk
27
menghasilkan hydrogen peroksida (H2O2), melalui pembentukan oksidasi

berwarna yang direduksi. Faktor yang mengganggu pada pemeriksaan adalah pada
sample yang keruh, lipemil, ikterik, atau mengalami hemolisis. Billirubin
menyebabkan interfensi negative dalam metode enzimatis karena billirubin
bereaksi dengan H2O2 sehingga mengurangi jumlah peroksida yang tersedia untuk
12 membentuk komplek berwarna. Billirubin juga menimbulkan gangguan
langsung karena penyerapannya ada di sekitar 500 nm. Gangguan ini dapat
dikurangi dengan mengukur konsumsi oksigen secara elektrokimia (Sutejo, A.Y,
2006).
15. Aloksan
Aloksan adalah suatu substrat yang secara struktural derivat pirimidin
sederhana. Nama aloksan diperoleh dari penggabungan kata allation dan oksalurea
(asam oksalurik). Nama lain dari aloksan adalah 2,4,5,6-tetraoxypirimidin;
2,4,5,6-pirimidinetetron;
1,3-Diazinan-2,4,5,6-tetron
(IUPAC)
dan
asam
Mesoxalylurea 5-oxobarbiturat. Rumus kimia aloksan adalah C4H2N2O4. Aloksan

murni diperoleh dari oksidasi asam urat oleh asam nitrat. Aloksan adalah senyawa
kimia tidak stabil dan senyawa hidrofobil. Waktu paruh aloksan pada pH dan suhu
37o C adalah 1,5 menit (Nugroho, 2006). Struktur aloksan seperti pada Gambar 8 :
28
Gambar 8. Struktur kimia aloksan (Anonim,2013)

Aloksan merupakan bahan kimia yang digunakan untuk menginduksi
diabetes pada binatang percobaan. Pemberian aloksan adalah cara yang cepat
untuk menghasilkan kondisi diabetik
eksperimental (hiperglikemik) pada
binatang percobaan. Aloksan dapat diberikan secara intravena, intraperitoneal,

atau subkutan pada binatang percobaan. Aloksan dapat menyebabkan Diabetes
Mellitus tergantung insulin pada binatang tersebut (aloksan diabetes) dengan
karakteristik mirip dengan Diabetes Melitus tipe I pada manusia. Aloksan bersifat
toksik selektif terhadap sel beta pankreas yang memproduksi insulin karena
terakumulasinya aloksan secara khusus melalui transporter glukosa yaitu GLUT2.
Aloksan bereaksi dengan merusak substansi esensial di dalam sel beta pankreas
sehingga menyebabkan berkurangnya granula-granula pembawa insulin di dalam
sel beta pankreas. Aloksan meningkatkan pelepasan insulin dan protein dari sel
beta pankreas tetapi berpengaruh pada sekresi glukagon. Efek ini spesifik untuk
sel beta pankreas sehingga aloksan dengan konsentrasi tinggi tidak berpengaruh
terhadap jaringan lain. Aloksan mungkin mendesak efek diabetogenik oleh
kerusakan membran sel beta dengan meningkatkan permeabilitas. Aksi toksik
29
aloksan pada sel beta dengan meningkatkan permeabilitas dibentuk oleh reaksi
redoks.
Aksi toksik aloksan pada sel beta diinisiasi oleh radikal bebas yang dibentuk
oleh reaksi redoks. Aloksan dan produk reduksinya, asam dialurik, membentuk
siklus redoks dengan formasi radikal superoksida. Radikal ini mengalami
dismutasi menjadi hydrogen peroksida. Radikal hidroksil dengan kereaktifan yang
tinggi dibentuk oleh reaksi Fenton. Aksi radikal bebas dengan rangsangan tinggi
meningkatkan konsentrasi kalsium sitosol yg menyebabkan destruksi cepat sel
beta.
Penelitian terhadap mekanisme kerja aloksan secara invitro menunjukkan
bahwa aloksan menginduksi pengeluaran ion kalsium dari mitokondria yang
mengakibatkan proses oksidasi sel terganggu. Keluarnya ion kalsium dari
mitokondria mengakibatkan homeostasis yang merupakan awal dari matinya sel
(Szkudelski, 2001).
Induksi aloksan untuk diabetes mellitus pada hewan uji (tikus) dapat
dilakukan dengan injeksi peritonial. Tikus yang telah terkena efek induksi aloksan
akan memperlihatkan kenaikan kadar gula darah sampai lebih dari 200 mg/dL
dalam jangka waktu minimal 48 jam setelah penyuntikan (Jadhav et al., 2009).
16. Maserasi
Maserasi merupakan cara penyarian sederhana. Maserasi dilakukan dengan
cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan
menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat
aktif, zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan
30
zat aktif di dalam sel dengan yang diluar sel, maka larutan yang terpekat didesak
keluar. Peristiwa tersebut berulang sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi
antara larutan di luar sel dan di dalam sel. Maserasi digunakan untuk menyari
simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari,
tidak mengandung zat yang mudah mengembang dalam cairan penyari, tidak
mengandung benzoin, sitrak dan lain lain.
Cairan penyari yang digunakan dapat berupa air, etanol, air-etanol atau
pelarut lain. Bila cairan penyari digunakan air maka untuk mencegah timbulnya
kapang, dapat ditambah bahan pengawet, yang diberikan pada awal penyarian.
Keuntungan cara penyarian dengan maserasi adalah cara pengerjaan dan peralatan
yang digunakan sederhana dan mudah diusahakan. Kerugian dengan cara maserasi
adalah pengerjaannya lama dan penyariannya kurang sempurna. Selain itu
kelemahan penyarian dengan cara maserasi yaitu tidak pernah dapat menarik zat
berkhasiat dari tanaman secara sempurna (Agoes, 2007).
B.
Penelitian Yang Relevan

Melatonin dapat ditemukan dalam tanaman ganggang hijau menurut Sergio
et al. (2009). Penelitian Ofir et al., (2010) menunjukkan bahwa senyawa

melatonin dalam ganggang hijau bersifat sebagai antioksidan.
Me et al., (2012) melaporkan bahwa isolat polisakarida sulfat dalam Ulva
fasciata mampu menangkal radikal bebas. Pada penelitian yang telah di lakukkan
oleh Meenakshi et al., diketahui bahwa ganggang hijau memiliki kandungan
flavonoid dan terbukti mempunyai aktivitas sebagai antioksidan.
31
Penelitian Inayah Izati Qomariyah (2013) tentang aktivitas antioksidan

sebagai penangkap radikal bebas ekstrak etanol ganggang hijau Spyrogyra sp dan
Ulva lactuca L. dengan metode DPPH memberikan hasil bahwa Ekstrak Etanol
Spyrogyra sp dan Ulva lactuca L. memiliki aktivitas antioksidan.
Penelitian lain yang dilakukan oleh Reflika Gita (2013) tentang pemberian
efek ekstrak etanol ganggang hijau mampu menurunkan kadar kolesterol total
pada tikus galur Wistar yang diinduksi Isoproterenol,
dengan dosis 200
mg/kgBB.
C. Kerangka Berfikir
Diabetes Mellitus merupakan salah satu penyakit degeneratif yang
jumlahnya semakin meningkat. Dibetes Mellitus menyebabkan gangguan pada
sistem pemecahan glukosa darah karena berkurangnya kerja insulin. Sehingga
kenaikan kadar glukosa darah juga sering diiringi dengan kenaikan kadar
kolesterol darah. Pengendalian kadar glukosa darah secara ketat akan
memperbaiki pula kadar kolesterol pada penderita DM (Walujo Soerjodibroto,
1997).
Aloksan merupakan bahan kimia yang digunakan untuk menginduksi
diabetes pada binatang percobaan. Pemberian aloksan dapat mengakibatkan
terjadinya kerusakan pada sel beta pankreas dengan menginduksi pembentukkan
radikal bebas hidroksil. Sel beta pankreas berfungsi untuk menghasilkan insulin,
sehingga menyebabkan kekurangan hormon insulin di dalam tubuh (Yuriska,
2009). Dengan berkurangnya hormon insulin dalam tubuh maka akan
32
menyebabkan pula gangguan metabolisme lemak, yang ditandai dengan

meningkatnya kadar beberapa zat turunan lemak seperti kolesterol. Peningkatan
kadar kolesterol merupakan akibat penurunan pemecahan lemak yang terjadi
karena penurunan aktivitas enzim-enzim pemecahan lemak yang kerjanya
dipengaruhi oleh insulin (Nortiningsih, 2004; Fatmawati, 2008).
Menurut Innayah Izati Qomariyah (2013), ekstrak etanol Spyrogia sp dan
Ulva lactuca L. memiliki aktivitas antioksidan. Antioksidan merupakan senyawa
yang dapat menghambat reoksidasi dengan menghambat radikal bebas dan
molekul yang sangat reaktif sehingga kerusakan sel akan dihambat (Andayani et
al., 2008). Ulva lactuca L. yang mempunyai kandungan senyawa aktif melatonin,
polisakarida sulfat, dan flavonoid terbukti memiliki aktivitas sebagai antioksidan
menurut beberapa penelitian yang telah dilakukan (Hanna et al., 2009; Ofir et al.,
2011; Meenakshi et al., 2009).
Penyarian dengan cara maserasi tidak pernah dapat menarik zat berkhasiat
dari tanaman secara sempurna (Agoes, 2007). Untuk menyari ganggang hiijau
pada penilitian ini digunakan etanol 96% yang bersifat semi polar, sehingga
dimungkinkan senyawa melatonin yang bersifat polar akan tersari dalam ekstrak
ganggang hijau tetapi pada ampas ganggang hijau dimungkinkan masih terdapat
senyawa berkhasiat sebagai antioksidan yaitu polisakarida sulfat dan flavonoid.
Aktivitas antioksidan yang dimiliki ganggang hijau diperkirakan mampu
menurunkan kadar kolesterol darah pada tikus diabetes yang diinduksi aloksan.
33
D. Hipotesis
Senyawa aktif dalam ampas ekstrak etanol ganggang hijau dapat
menurunkan kadar kolesterol darah pada tikus diabetes yang diinduksi aloksan.
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis dan rancangan penelitian ini adalah bersifat eksperimental dengan
melakukan penelitian di laboratorium. Laboratorium yang digunakan dalam
penelitian ini adalah laboratorium Biologi, Fitokimia, dan Farmakologi
Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta.
B. Sampel
Sampel yang digunakan adalah Ganggang Hijau yang diperoleh dari Pantai
Krakal, Gunung Kidul Yogyakarta.
C. Bahan dan Alat yang Digunakan
1.
Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ganggang hijau yang di
peroleh dari pantai Krakal, Gunung Kidul. Ganggang hijau yang di peroleh
kemudian di isolasi di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi
Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta sehingga di dapat ampas ekstrak etanol
ganggang hijau. Bahan lain yang digunakan seperti : Etanol 96%, CMC Na,
Pereaksi Dregendrof, Pereaksi Meyer, Pereaksi Barfoed, Pereaksi Molish,
Pereaksi Phenol Aminoantipyrin, Aloksan monohidrat dari Sigma Aldrich
Chemistry dosis 120 mg/kgBB.
34
35
2.
Alat
Alat yang digunakan adalah sebagai berikut : spektrofotometri visible,
timbangan analitiik, maserator, stopwatch, kuvet, spuit, pipa kapiler, eppendorf,

alat sentrifuge, spuit injeksi, dan alat gelas lainnya.
D. Variabel Penelitian
1.
Variabel Bebas
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah variasi dosis pada ampas ekstrak
etanol ganggang hijau dosis 100 mg/KgBB; 200 mg/KgBB; dan 400 g/KgBB.
2.
Variabel Terikat
Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah respon kadar kolesterol
darah tikus yang telah diberi perlakuan.

3.
Variabel Terkendali
Variabel terkendali dalam penelitian ini adalah jenis kelamin, umur, berat
badan dan jenis tikus yang digunakan adalah tikus jantan galur Wistar dengan
berat 150-200gram dan umur 2-3 bulan.
E. Prosedur Penelitian
1.
Identifikasi Ganggang Hijau.

Untuk memastikan bahan yang digunakan benar ganggang hijau dilakukan
identifikasi tanaman di Laboratorium Biologi Fakultas MIPA Universitas Ahmad

Dahlan Yogyakarta.
36
2.
Pengumpulan, Pengeringan dan Pembuatan Serbuk Simplisia

Tanaman ganggang hijau diperoleh dari pantai Krakal daerah Gunung kidul.
Pengolahan ganggang hijau untuk menjadi serbuk memerlukan beberapa tahapan.

Tahapan tersebut adalah : 1) Ganggang hijau dibersihkan dari kotoran dengan
pencucian menggunakan air mengalir. 2) ganggang dimasukkan ke dalam wadah
berisi air dan didiamkan selama satu hari (12 jam fase penyinaran dan 12 jam fase
penggelapan). 3) ganggang diambil dari wadah pada 5 jam setelah dimulai fase
penggelapan dan dipotong-potong dengan ketebalan 1-5 mm. 4) potonganpotongan tersebut dijemur hingga kering dibawah sinar matahari dengan ditutup
oleh kain hitam. Penutupan kain hitam dimaksudkan untuk mempercepat proses
pengeringan karena kain hitam
dapat menyerap panas dan juga untuk
menghindari kerusakan zat aktif akibat dari sinar UV matahari. 5) gangang kering
kemudian diserbukkan dengan menggunakan blander. Proses penyerbukan dapat
meningkatkan luas permukaan antara simplisia dengan larutan penyari. Hal ini
dapat meningkatkan jumlah zat aktif yang tersari ke dalam ekstrak.
3.
Pembuatan Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau.

Ganggang hijau yang sudah dalam bentuk serbuk diekstraksi dengan etanol
96% dengan metode maserasi. Sari etanol yang diperoleh dipisahkan filtrat dan
ampasnya. Ampas dari hasil maserasi dikeringkan dengan menggunakan oven,
setelah proses pengeringan selesai ampas dibuat dalam bentuk serbuk dengan
menggunakan blender yang bersih kemudian diayak dengan menggunakan ayakan
37
mesh 100. Ampas ekstrak etanol yang didapat kemudian dibuat larutan dalam
konsentrasi 20% b/v dengan menggunakan CMC Na 1% sebagai pelarut.
4.
Identifikasi Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau

a. Identifikasi Melatonin
Uji pendahuluan larutan uji terhadap senyawa melatonin yang merupakan
golongan alkaloid dilakukan dengan menggunakan pereaksi Meyer dan pereaksi

Dragendorff (Zulney et al., 2004).
Kemudian dilanjutkan indentifikasi melatonin dengan KLT. Ampas
dilarutkan terlebih dahulu dengan pelarutnya yaitu dengan etanol 96%. Sebelum
penotolan larutan uji, silika gel GF 254 diaktifkan terlebih dahulu di dalam oven
selama 30 menit dengan suhu 1400 C untuk dipisahkan dari komponen lain secara
kromatografi lapis tipis (KLT). Setelah silica gel GF 254 diaktifkan, larutan uji
ditotolkan pada plat KLT silika gel GF 254 menggunakan pipa kapiler. Totolan
pertama adalah standar melatonin, totolan kedua adalah sampel, selanjutnya plat
silika gel dielusi dengan fase gerak n-butanol-asam asetat-air (12:3:5). Hasil yang
diperoleh diidentifikasi di bawah lampu UV 254 nm (Prabowo et al., 2009).
b. Identifikasi Kualitatif Polisakarida
Identifikasi larutan uji terhadap senyawa polisakarida dapat dilakukan
dengan menggunakan pereaksi Molish dan Barfoed ( Winarno, 2004).
c.
Identifikasi Kualitatif Flavonoid
Sebanyak 0.5 g sampel dilarutkan dengan 10 ml metanol-HCl 1 N (1:1) dan

dipanaskan dalam labu Erlenmeyer pada suhu 95 C selama 1 jam. Setelah itu
38
didinginkan dan disaring, lalu filtratnya diekstraksi dengan etilasetat. Fase

asamnya dipanaskan lagi sampai menjadi lebih pekat.
Antosianidin. Sebanyak 1 ml sampel etilasetat ditambah 3 tetes
CH3COONa lalu diamati, kemudian ditambah lagi 3 tetes FeCl3 dan diamati lagi.
Antosianidin dengan CH3COONa memberikan warna merah hingga ungu dan
bila ditambah FeCl3 menjadi warna biru. Antosianidin dengan CH3COONa
memberikan warna biru muda bila ditambah FeCl3 menjadi warna tetap biru.
Flavonoid lain. Sebanyak 1 ml sampel etilasetat ditambah 3 tetes
CH3COOPb lalu diamati warnanya. Flavon memberikan warna jingga hingga
krem, kalkon memberikan warna jingga tua, dan auron memberikan warna merah.
Sebanyak 1 ml ekstrak etilasetat ditambah 3 tetes NaOH 0.1 N lalu diamati
warnanya. Flavonol dan flavon memberikan warna kuning, sedangkan kalkon dan
auron memberikan warna merah hingga ungu. Sebanyak 1 ml ekstrak etilasetat
ditambah 3 tetes H2SO4 pekat lalu diamati warnanya. Flavonol dan flavon
memberikan warna kuning, flavonol memberikan warna jingga hingga krem, dan
kalkon memberikan warna krem hingga merah tua (Harbone, 1987).
d. Identifikasi Flavonoid dengan KLT
Larutan cuplikan (totolan) dibuat dengan melarutkan 0.5 g serbuk ampas
ganggang hijau dengan 10 ml metanol-HCl 1 N (1:1) dan dipanaskan dalam labu
Erlenmeyer pada suhu 95 C selama 1 jam. Setelah itu didinginkan dan disaring,
lalu filtratnya diekstraksi dengan etilasetat. Fase asamnya dipanaskan lagi sampai
menjadi lebih pekat. Setelah pekat dilakukan penotolan pada silika GF 254.
39
Penotolan dilakukan dengan pipa kapiler. Pengembangan dilakukan dalam

bejana kromatografi dengan fase gerak yang sesuai yaitu n-butanol-asam asetat-air
(4:1:5). Dan di deteksi dengan sinar UV 254 nm dan UV 366 nm.
5.
Pembuatan CMC Na 1 %
Larutan CMC Na 1% dibuat dengan menimbang 1 gram CMC Na, digerus
dalam mortir dengan air panas sedikit demi sedikit sampai larut, kemudian
dimasukkan ke dalam labu takar sampai 100 ml.
6.
Penyiapan Larutan Glibenklamid

Dosis untuk manusia dewasa sekali
= 5 mg
Konversi dosis manusia ke tikus (200g) = 0,018

Dosis untuk tikus (200g)/hari
= 0,018 x 5 mg
= 0,09 mg/200gBB
= 0,45mg/kgBB
Larutan
pembawa
yang
digunakan
untuk
membuat
stok
larutan
glibenklamid adalah larutan CMC Na 1%. Dibuat larutan glibenklamid dengan

kadar dihitung dengan cara:
Konsentrasi = (Dosis x Berat Badan)/Volume Pemberian
= (0,45 mg/1000 gram x 200 gram)/2mL
= 0,045 mg/mL
7.
Perencanaan Dosis Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau

Dosis pemberian ampas ekstrak etanol ganggang hijau adalah dosis 100
mg/KgBB, 200 mg/KgBB, dan 400 mg/KgBB. Dosis ini disesuaikan dengan
40
penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Ofir et al., 2010, menggunakan dosis
100g/KgBB-300mg/KgBB. Penelitian Efek ekstrak etanol ganggang hijau (Ulva
lactuca L.) terhadap penurunan kadar kolesterol total pada tikus jantan galur
wistar yang diinduksi isoproterenol (Gita, 2013), menggunakan dosis 200
mg/kgBB dan 400mg/kgBB. Kemudian dilakukan Orientasi untuk memastikan
dosis yang sesuai sehingga penelitian ini menggunakan dosis 100 mg/kgBB, 200
mg/kgBB dan 400 mg/kgBB.
a. Dosis Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau
Dosis 100 mg/KgBB
Volume penyuntikan : 2 ml/200 gBB
Konsentrasi = 10 mg/ml
Larutan stock : 1000 mg/100ml (1%)
Dosis 200 mg/KgBB
Volume penyuntikan : 2 ml/200gBB
41
Dosis 400 mg/KgBB

Volume penyuntikan : 2 ml/200gBB
b. Dosis Aloksan
Larutan aloksan monohidrat diberikan dengan dosis 120 mg/kgBB secara
intraperitonial. Larutan stok aloksan dibuat dengan kadar 10% b/v, dibuat
dengan cara: ditimbang serbuk aloksan monohidrat 1 g. Serbuk dilarutkan
dengan sedikit aquadest sampai volume 10 ml. Larutan ini mempunyai
konsentrasi 10% b/v.
Volume pemberian dihitung dengan cara :
Volume pemberian
42
8.
Hewan Percobaan
Hewan uji dibagi secara acak menjadi 6 kelompok, tiap kelompok uji terdiri
dari 5 ekor tikus galur Wistar dengan umur kurang lebih 2-3 bulan dan berat
badan 150-200gram.
Kelompok I
: sebagai kelompok normal (tanpa aloksan), Tikus diberi

aquadest dan makan ad libitum.
Kelompok II
: sebagai kelompok kontrol, Tikus diberi aloksan 120

mg/kgBB secara perkutan.
Kelompok III
: diberi aloksan dengan dosis 120mg/kgBB secara

subkutan, 3 hari kemudian diberi suspensi ampas dari
ekstrak etanol ganggang hijau dengan dosis 100
mg/kgBB secara peroral dengan volume 2 ml/200gBB.
Kelompok IV

Kelompok V

43
Kelompok VI
: sebagai kelompok glibenklamid, Tikus diberi suspensi

glibenklamid secara per oral.
Sebelum di beri perlakuan, darah di ambil dari sinus orbitalis mata sebagai hari
ke-0 sebelum di induksi aloksan dan pada hari ke-3 setelah di induksi aloksan.
Pengambilan darah setiap hewan uji dari sinus orbitalis mata secara keseluruhan
dilakukan pada hari ke-0, 3, 10, 17. Gambar skema perlakuan untuk hewan uji
selengkapnya dapat dilihat pada Gambar 9 dibawah ini.
Tikus sehat kel I, II, III, IV, V, VI (masing-masing 5 ekor) dipuasakan selama 18-20 jam (beri minum ad libitum),
dilakukan pengambilan darah melalui sinus orbitalis dan pada hari tersebut di anggap sebagai hari ke-0.
Tikus di induksi aloksan dosis 120 mg/kgBB (kecuali kelompok

normal)
Tiga hari setelah induksi, dilakukan pengambilan darah melalui sinus orbitalis
dan pada hari tersebut di anggap sebagai hari ke-3
Selanjutnya tikus diberi perlakuan selama 7 hari berturut-turut
Kel. I
Kelompok Normal
Aquadest
Kel. II
Kelompok Kontrol
CMC Na 1%
Kel. III
Ampas ekstrak
etanol ganggang
Hijau 100 mg/kgBB
Kel. IV
Ampas ekstrak
etanol ganggang
Hijau 200 mg/kgBB
Kel. V
Ampas ekstrak
etanol ganggang
Hijau 400 mg/kgBB
Kel. VI
Kelompok Obat
Glibenklami
d
Dilakukan pengecekan kelosterol darah di anggap sebagai hari ke-10

Tikus diberi perlakuan lagi sesuai kelompoknya masing-masing selama 7 hari
Dilakukan pengecekan kolesterol darah di anggap sebagai hari ke-17
Gambar 9. Skema penelitian efek pemberian ampas ekstrak etanol ganggang

hijau terhadap kadar kolesterol darah tikus diabetes yang diinduksi aloksan
44
9.
Preparasi sampel
Darah hewan uji diambil melalui sinus orbitalis, darah yang keluar dialirkan
ke dindng tabung evendrof untuk ditampung. Darah yang telah di dapat

disentrifuge dengan kecepatan
4000rpm selama 15 menit hingga didapatkan
serum yang jernih.

10. Penetapan Kadar Kolesterol Total
a.
Penentuan operating time

Sebanyak 10 L aquadest ditambah 1000 L reagen CHOD-PAP DiaSys
yang digunakan sebagai blangko. Sebagai standar digunakan 10 L kolesterol

baku dari DiaSys ditambah 1000 L reagen CHOD-PAP DiaSys, kemudian
diinkubasi pada suhu kamar (37o). Serapannya dibaca dengan spektrofotometer
visibel pada panjang gelombang 500 nm (berdasarkan panjang gelombang yang
tertera di leaflet reagen CHOD-PAP) dan dibaca pada menit ke-0 sampai menit
ke-30. Penentuan operating time bertujuan untuk mengetahui pada menit berapa
terjadi serapan yang stabil.
b.
Penentuan panjang gelombang yang memiliki absorbansi maksimal

Sebanyak 10 L aquadest ditambah 1000 L reagen CHOD-PAP (DiaSys)
yang digunakan sebagai blangko. Sebagai standar digunakan 10 L kolesterol

baku dari DiaSys ditambah 1000 L reagen CHOD-PAP (DiaSys), kemudian
diinkubasi pada suhu kamar (37o). Serapan dibaca dengan menggunakan alat
spektrofotometer visibel pada panjang gelombang 400-600 dengan menunggu
operating time sesuai hasil yang diperoleh pada penentuan operating time.
45
Panjang gelombang serapan maksimum ditentukan untuk mendapatkan panjang

gelombang saat serapan tertinggi.
c.
Penetapan Kadar Kolesterol Darah

Metode yang digunakan adalah Enzimatic photometri test cholesterol
oxidase p-aminoantypyrin (CHOD-PAP), metode
enzimatic photometric test
yaitu cholesterol oxidase phenol aminoantipyron (CHOD-PAP) adalah kolesterol

pada serum darah bereaksi dengan cholesterol esterase menghasilkan kolesterol
bebas yang kemudian bereaksi dengan fenol,4-aminoantipyrine dengan katalis
peroksidase membentuk quinoneimine yang berwarna merah. Quinoneimine inilah
yang diukur absorbansinya, reaksi yang terjadi adalah seperti pada Gambar 10
sebagai berikut.
Gambar 10. Reaksi metode CHOD-PAP (Diasys, 2008)

Dengan menggunakan mikropipet, dimasukkan ke dalam tabung reaksi
sesuai dengan Tabel III sebagai berikut.
46
Tabel III. Komposisi sampel, standar, dan blangko yang dianalisis pada
penetapan kadar kolesterol darah
Sampel
Blangko
Standar
(30 tabung)
Serum
10 L
Standar
10 l
Reagen
1000 L
1000 L
1000 l
Aquadest
10 L
-
Masing masing dicampur dibantu dengan alat vortex agar lebih homogen.
Selanjutnya diinkubasi selama 10 menit pada suhu kamar (37 0C) kemudian
dibaca pada alat Biochemistry Analyzer.
Pengukuran serapan standar sama dengan pengukuran serapan kolesterol
total, tetapi serum darah diganti dengan standar kolesterol.
Kadar kolesterol total dihitung dengan rumus sebagai berikut :
Dimana : C
= kadar kolesterol (mg/dL)
A = serapan
Cst = kadar kolesterol standar (200 mg/dL).
F. Analisis Data
Dalam penelitian ini data yang diperoleh berupa kadar kolesterol total
darah. Data yang diperoleh kemudian diuji statistika dengan menggunakan
program SPSS (Statistic Product and Service Solution). Pengujian dilakukan
menggunakan uji ANOVA satu jalan. Uji ini dilakukan untuk membandingkan
variabel terikat independen yang diamati. Selanjutnya data uji satu persatu untuk
penjabaran lebih lanjut untuk mengetahu normalitas dan homogenitas tiap-tiap
47
data. Uji normalitas menggunakam Kolmogorov-Smirnov dan homogenitas

dengan uji Levene dahulu untuk menentukan data termasuk data parametik atau
non parametik.
Jika data terdistribusi normal dan homogen, maka termasuk ke dalam data
parametik, analisis dilanjutkan dengan uji ANOVA dengan taraf kepercaya 95%
untuk mengetahui perbedaan secara umum tiap perlakuan, bila nilai signifikasi
yang dihasilkan <0,05 dapat disimpulkan ada perbedaan dari masing-masing
kelompok perlakuan. pengujian selanjutnya dilakukan untuk mengetahui ada
perbedaan signifikan atau tidak antar kelompok perlakuan dengan uji Postchoct
LSD, jika signifikasi yang dihasilkan 0,05 maka ada perbedaan yang signifikasn
antara perlakuan yang satu dengan yang lainnya. Jika data tidak homogen maka
termasuk dalam data non parametik dan diuji Kruskall Wallis dilanjutkan uji
Mann Whitney dengan taraf kepercayaan 95% untuk melihat perbedaannya.
48
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Identifikasi Tanaman Ganggang Hijau

Ganggang Hijau diidentifikasi terlebih dahulu untuk menghindari kesalahan
dalam pengambilan bahan penelitian, mengetahui identifikasi dan guna menjamin
kebenaran jenis dari obyek uji dalam penelitian. Identifikasi dilakukan secara
makroskopis dan mikroskopis di Laboratorium Biologi Fakultas MIPA
Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta. Uji makroskopis dilakukan dengan
mencocokan tanaman dengan kunci determinasi, sedangkan uji mikroskopis
dilakukan terhadap potongan ganggang hijau.
Hasil identifikasi menunjukan bahwa tanaman yang digunakan sebagaii
sampel dalam penelitian adalah spesies Ulva lactuca L. Hasil determinasi
tanaman dapat dilihat pada Lampiran 1.
B. Pembuatan Simplisia dari Ganggang Hijau
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ganggang hijau yang
masih segar dan berwarna hijau, hal ini dimaksudkan agar kandungan senyawa
kimia yang terdapat dalam tanaman tersebut masih dalam jumlah yang besar.
Ganggang hijau yang digunakan diperoleh dari pantai Krakal Gunung Kidul
Yogyakarta pada bulan Januari 2014. Diambil dari satu tempat bertujuan untuk
meminimalkan variasi kandungan senyawa pada sampel yang akan diuji.
Ganggang hijau yang telah diperoleh dicuci dengan air mengalir untuk
membersihkan kotoran-kotoran yang ada pada tanaman. Ganggang hijau
49
dikeringkan dengan cara dijemur dibawah sinar matahari dengan ditutup kain
hitam, ditutup kain hitam bertujuan untuk mencegah kerusakan zat aktif yang
terkandung dalam ganggang hijau akibat sinar UV matahari, selain itu kain hitam
sifatnya menyerap panas sehingga mempercepat proses pengeringan. Setelah
proses pengeringan langkah selanjutnya ganggang hijau diblender untuk
mendapatkan ukuran serbuk kemudian diayak dengan ayakan 40 mesh. Serbuk
yang lolos ukuran 40 mesh inilah yang digunakan untuk membuat ampas dari
ekstrak etanol ganggang hijau.
C. Pembuatan Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau
Bahan yang digunakan dalam pembuatan ampas ekstrak etanol ganggang
hijau yaitu serbuk ganggang hijau dengan ukuran 40 mesh. Metode penyarian
yang digunakan yaitu maserasi, dipilih metode maserasi karena penyarian ini
murah, sangat sederhana, dan mudah dilakukan. Pelarut yang digunakan yaitu
etanol 96%. Etanol 96% digunakan karena diharapkan senyawa aktif yang bersifat
polar yaitu polisakarida sulfat dan Flavonoid tidak ikut tersari. Proses penyarian
dilakukan sebanyak 3x untuk memastikan bahwa yang diperoleh diakhir benarbenar ampas dari ekstrak etanol ganggang hijau. Kemudian ampas dioven untuk
menghilangkan etanol yang tersisa, setelah dipastikan ampas kering lalu
dilakukkan pengayakan dengan ayakan 100 mesh. Dipakai ukuran 100 mesh
bertujuan untuk mempermudah dalam pemerian kepada tikus secara oral. Ampas
ukuran 100 mesh ini disuspensikan kedalam CMC-Na. Pemilihan CMC sebagai
suspending agent dikarenakan CMC-Na sifatnya yang inert sehingga tidak
mempengaruhi kandungan zat aktifnya.
50
D. Identifikasi Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau

a. Identifikasi Melatonin
Identifikasi melatonin dilakukan sebelum penelitian. Hal ini bertujuan untuk
mengetahui adanya senyawa melatonin yang
tersisa dalam ampas ekstrak
ganggang hijau yang telah melalui proses maserasi. Identifikasi dilakukan dengan
penambahan pereaksi Dragendroff dan pereaksi Meyer. Secara teoritik, apabila
hasil identifikasi menunjukan adanya endapan warna merah orange dengan
penambahan pereaksi Dragendroff dan pereaksi Meyer menyebabkan adanya
endapan putih maka senyawa tersebut diketahui mengandung melatonin.
Hasil uji pendahuluan pada penelitian ini menunjukkan bahwa tidak ada
senyawa melatonin yang tersisa dalam ampas ekstrak etanol ganggang hijau, di
tunjukkan dengan warna coklat pada uji Meyer dan warna kuning pada uji
Dragendroff. Ini dipastikan bahwa senyawa melatonin telah tersari sempurna
dalam ekstrak etanol ganggang hijau. Karena sifat dari melatonin sendiri yang non
polar, sehingga senyawa tersebut telah tersari sempurna dalam etanol 96% yang
bersifat semi polar. Gambar uji Dragendroff dan Mayer dapat dilihat pada Gambar
11 berikut :
(a)
(b)
Gambar 11. Hasil Uji Alkaloid
(a) : Uji Meyer
(b) : Uji Dragendroff
51
Kemudian dilanjutkan identifikasi melatonin dengan menggunakan KLT

atau Kromatografi Lapis Tipis. Uji KLT merupakan uji kualitatif untuk
mengidentifikasi adanya senyawa phytomelatonin dalam ampas ekstrak etanol
ganggang hijau.
Sampel ampas ekstrak etanol ganggang hijau ditotolkan pada plat silica GF
254 menggunakan pipa kapiler. Totolan pertama adalah standar melatonin sebagai
pembanding sedangkan totolan kedua adalah larutan sediaan uji yaitu ampas
ekstrak etanol ganggang hijau. Plat silica yang sudah ditotolkan kemudian dielusi
pada chamber yang telah jenuh oleh fase gerak. Fase gerak yang digunakan yaitu n-butanol-asam asetat-air (12:3:5). Hasil elusi yang diperoleh diidentifikasi pada
panjang gelombang UV 254 nm yang terlihat pada Gambar 12.
Gambar 12. Hasil Uji KLT Ampas Dari Ekstrak Etanol Ganggang Hijau
Pada UV 254 nm.
Parameter pada kromatografi lapis tipis ini adalah faktor retensi atau
retardation factor (Rf), yang merupakan perbandingan jarak yang ditempuh oleh
senyawa dari titik penotolan dengan jarak yang ditempuh oleh pelarut dari titik
penotolan (jarak elusi). Pada hasil percobaan tidak terdapat bercak pada larutan
52
sampel. Ini menunjukan bahwa dalam larutan sampel dipastikan sudah tidak
mengandung senyawa phytomelatonin.
b. Uji Polisakarida
Uji polisakarida untuk membuktikan adanya senyawa polisakarida dalam
ganggang hijau karena diketahui bahwa ganggang hijau mengandung senyawa
polisakrida sulfat. Sehingga perlu dilakukan pengujian polisakarida secara
kualitatif. Uji yang dilakukan yaitu Uji Molisch dengan penambahan H2SO4 pekat
dan penambahan pereaksi Barfoed, jika senyawa sampel membentuk cincin merah
ungu pada uji Molisch dan endapan merah orange pada uji Barfoed, maka dapat
dipastikan terdapat senyawa polisakarida dalam sampel tersebut.
Hasil uji polisakarida menunjukan hasil yang positif, sehingga dapat
dipastikan bahwa dalam ampas ekstrak etanol ganggang hijau mengandung
polisakarida. Hasil terlihat pada Gambar 13.
Gambar 13. Hasil Uji Molish

Prinsip uji dengan pereaksi Molisch adalah bahan yang mengandung
monosakarida bila direaksikan dengan H2SO4 pekat akan terhidrolisis membentuk
furfural. Furfural ini akan membentuk persenyawaan dengan naftol yang ditandai
dengan terbentuknya warna violet (cincin). Oleh karena itu H2SO4 dapat
53
menghidrolisis oligosakarida dan polisakarida dengan menggunakan pereaksi

Molisch ditunjukkan pada Gambar 14.
Gambar 14. Mekanisme Reaksi dengan Pereaksi Molisch

Uji dengan pereaksi Barfoed dimana monosakrida akan mereduksi reagen
Barfoed yang bersifat asam sehingga kekuatan hidrolisis menurun dan
mengakibatkan tidak dapat mereduksi disakarida. Mekanisme reaksi dengan
pereaksi Barfoed ditunjukkan pada Gambar 15.
Gambar 15. Mekanisme Reaksi dengan Pereaksi Barfoed.

Uji Barfoed dikatakan positif apabila terbentuk endapan merah orange. Dari
hasil uji yang dilakukan, ampas ekstrak etanol ganggang hijau terbentuk warna
54
biru dan tidak terbentuk endapan merah orange dengan cepat, sehingga dapat
disimpulkan polisakarida yang terkandung dalam ampas merupakan golongan
disakarida. Hasil uji barfoed dapat dilihat pada Gambar 16.
Gambar 16. Hasil uji Barfoed
c.
Uji Flavonoid
Uji golongan flavonoid dapat memberikan informasi tentang keberadaan

jenis golongan flavonoid yang terdapat dalam ampas ekstrak etanol ganggang
hijau secara kualitatif. Ampas tersebut menunjukkan positif terhadap senyawa
golongan flavonoid, yaitu flavonol dan flavon. Hasil dapat dilihat pada Gambar
17. Sedangkan untuk hasil uji golongan flavonoid lain dapat dilihat pada Tabel IV
berikut.
Tabel IV. Tabel Uji Golongan Flavonoid
Ampas
Etanol 96%
Pereaksi
CH3COOPb
NaOH 0.1 N
H2SO4
Pekat
CH3COONa
CH3COONa
+ FeCl3
Warna akhir
Terbentuk Endapan putih
Kuning
Gol. Flavonoid
Flavonol dan flavon
Kuning
Flavonol dan flavon
Merah tua
Merah tua dan endapan putih
55
(a)
(b)
(c)
(d)
Gambar 17. Hasil Uji Golongan Flavonoid
(a) : H2SO4 pekat
(b) : NaOH 0,1 N
(c) : CH3COOPb
(d) : CH3COONa + FeCl3
d. Identifikasi Flavonoid dengan KLT
Identifikasi flavonoid dilakukan dengan kromatografi lapis tipis. Pada
penelitian ini digunakan fare gerak n-butanol : asam asetat glasial : air (4:1:5).
Pembanding yang digunakan adalah quersetin yang merupakan golongan
flavonoid. Adanya flavonoid dapat berwarna kuning gelap (flavonol), hijau (5-OH
flavonol) (Wagner et al., 1996). Hasil elusi yang diperoleh diidentifikasi pada
panjang gelombang UV 254 nm yang terlihat pada Gambar 18.
56
Gambar 18. Hasil Uji KLT Ampas Dari Ekstrak Etanol Ganggang Hijau
Pada UV 254 nm.
Pada hasil percobaan diperoleh dua bercak dengan warna kuning gelap, dan
nilai Rf sampel sama dengan nilai Rf standart yaitu 0,71. Ini menunjukkan bahwa
dalam larutan sampel mengandung senyawa yang sama pada larutan standar yaitu
senyawa quersetin.
E. Penetapan Operating Time (OT) dan Panjang Gelombang Maksimum
1. Hasil Penetapan Operating Time (OT)
Penetapan Operating Time bertujuan untuk mengetahui waktu serapan yang
optimum dari senyawa Kuinonimin (senyawa berwarna merah) yang merupakan
30 hasil reaksi bertahap antara kolesterol standar dengan reagen CHOD-PAP.
Serapan dibaca pada panjang gelombang yang tertera pada leaflet reagen
CHODPAP (Diasys) yaitu pada panjang gelombang 500 nm, tiap 1 menit.
Parameter yang menunjukkan kestabilan senyawa kuinonimin terhadap serapan
spektrofotometer yaitu jika pada waktu tertentu absoransi (serapan) larutan yang
bernilai sama berturut-turut. Hasil penetapan operating time ditunjukkan pada
Tabel V.
57
0,5105
0,51
0,5095
absorbansi
0,509
0,5085
0,508
0,5075
0,507
0,5065
0,506
0,5055
0
200
400
600
800
1000
waktu (detik)
Gambar 19. Hasil penetapan operating time
Reaksi antara kolesterol dengan pereaksi CHOD-PAP merupakan reaksi

kolorimetri (pembentukan warna) yang memerlukan waktu tertentu untuk bereaksi
optimum,
sehingga perlu dilakukan inkubasi. Gambar 19 dan Tabel V
menunjukkan bahwa waktu yang dapat memberikan serapan senyawa berwarna

merah (kuinonimin) pada spektrofotometri daerah visibel secara optimum terjadi
pada menit ke-1 sampai menit ke-8 . Jika pembacaan serapan kurang dari OT,
maka senyawa kuinonimin belum terbentuk sempurna dan apabila pembacaan
serapan melebihi OT, maka senyawa yang terbentuk akan terdegradasi.
58
Tabel V. Hasil penetapan operating time dari kolesterol standar dengan

pereaksi CHOD-PAP pada panjang gelombang 500 nm.
Waktu
(detik)
60
120
180
240
300
360
420
480
540
600
660
720
780
840
Absorbansi
0,510
0,510
0,510
0,510
0,510
0,510
0,510
0,510
0,509
0,508
0,508
0,507
0,507
0,506
2. Hasil Penetapan Panjang Gelombang Maksimum

Pada penetapan panjang gelombang maksimum akan dilihat perubahan
absorbansi untuk setiap satuan kadar kolesterol yang paling maksimum, jadi pada
panjang gelombang yang memiliki absorbansi paling maksimum, merupakan
panjang gelombang yang mempunyai serapan terbesar pada senyawa kuinonimi.
Scanning panjang gelombang maksimum senyawa berwarna merah (kuinonimin)
dilakukan
menggunakan alat spektrofotometer UV-Vis. Senyawa berwarna
terserap pada daerah visible, dengan panjang gelombang teori 500 nm sehingga
scanning dilakukan pada range panjang gelombang 400-600 nm. Data penetapan
panjang gelombang maksimum terlihat pada Gambar 20 berikut.
59
Gambar 20. Kurva panjang gelombang maksimum senyawa kuinonimin.
F. Hasil Uji Penetepan Kadar Kolesterol

Kolesterol merupakan senyawa steroid (Muray et al., 2013) yang dapat
disebabkan oleh diabetes melitus. Pembebanan tikus diabetik menggunakan
induksi aloksan.
Naiknya kadar glukosa darah akibat induksi aloksan juga dapat
menyebabkan kenaikan kadar kolesterol. Hal ini terjadi karena penderita diabetes
mengalami kekurangan hormon insulin. Hormon insulin mampu mempengaruhi
kerja beberapa enzim yang melakukan metabolisme lemak yaitu enzim lipoprotein
lipase dan lipase sensitif hormon terganggu (Inawati et al., 2007). Terganggunya
kerja hormon ini akan berdampak pada penurunan pemecahan lipoprotein.
Padahal kolesterol dan trigliserida disirkulasi darah dalam bentuk lipoprotein. Itu
sebabnya, kandungan lipoprotein yang ada ada penderita DM selalu diikuti
dengan naiknya kadar kolesterol dan trigliserida (Hermawan et al., 2004).
60
Pada penelitian ini menggunakan metode enzimatik fotometrik tes CHODPAP (Cholesterol Oxidase Phenol Aminoantipyrine). Prinsip metode ini adalah
penguraian kolesterol dan esternya menjadi peroksida dengan hidrolisis dan
oksidasi enzimatik. Indikator warna adalah quinoneimine yang terbentuk dari
reaksi antara 4-aminoantipirin dan fenol dengan hidroge peroksida katalik oleh
peroksidase. Mekanisme kolesterol dengan metode enzimatik ini dapat dilihat
pada Gambar 21.
Mekanisme reaksinya :
Gambar 21. Mekanisme kolesterol dengan metode enzimatik (Anonim, 2012)

Penelitian ini menggunakan tikus jantan galur Wistar yang telah dewasa
dengan umur 2-3 bulan dan berat badan antara 150-200 gram. Sebelum perlakuan
tikus diadaptasikan selama 1 minggu agar kondisi dan fisiologi tikus stabil
terhadap lingkungan baru sehingga meminimalkan faktor yang mempengaruhi
kevalidan dari data yang didapat. Pengambilan darah tikus dilakukan melalui
sinus orbitalis karena mudah dalam pengambilan darah, arteri banyak dimata,
recovery lebih cepat dan lebih beretika (berprikehewanan). Volume darah yang
diambil disentrifugasi dengan kecepatan 4000 rpm selama 15 menit hingga
diperoleh lapisan yang terpisah. Serum yang telah terpisah dipindahkan pada
61
evendrop lain untuk menjaga serum tidak tercampur kembali dengan darah yang
telah dipisahkan. Serum diambil 10 L dengan menggunakan mikropipet
kemudian serum ditambah dengan pereaksi kolesterol (CHOD-PAP) 1ml. Setelah
penambahan reaksi kolesterol, campuran tersebut di vortex agar benar-benar
homogen kemudian diinkubasi pada suhu ruangan 37oC selama 10 menit dan diuji
dengan Biochemistry Analyzer.
a. Kadar Kolesterol Setelah Induksi Aloksan
Penetapan kadar kolesterol darah dilakukan dalam tiga periode. Periode I
menunjukkan kadar kolesterol darah setelah 3 hari penyuntikkan larutan
diabetogen. Periode II menunjukkan kadar kolesterol darah setelah diberi
perlakuan pada hari ke-10, dan periode III menunjukkan kadar kolesterol darah
setelah diberi perlakuan pada hari ke-17.
Sebelum dilakukan pengukuran kadar kolesterol darah, harus dipastikan
bahwa semua hewan uji telah positif Diabetes Mellitus. Karena induksi aloksan
spesifik untuk meningkatkan glukosa darah pada binatang percobaan. Hal ini di
tunjukkan pada penelitian yang telah dilakukkan Ida Setyaningrum (2014) bahwa
peningkatan kadar glukosa darah berbeda signifikan dibandingkan dengan
kelompok normal. Hasil rata-rata kenaikan gula darah yang ditunjukkan pada
tikus diabetik normal 112,59 mg/dL meningkat menjadi 346,466 mg/dL.
62
Peningkatan kadar glukosa darah dapat dilihat pada Tabel VI berikut.

Tabel VI. Rata-rata kadar glukosa darah yang diperiksa pada hari ke-0 dan
ke-3 (Setyaningrum, 2014)
Kelompok
Rata-rata Kadar Glukosa Darah (mean SD) (mg/dL)
Hari ke-0
Hari ke-3
Normal
78.971.38
112.592.99
Kontrol
79.720.74
323.766.81
Dosis 100mg/KgBB
81.161.91
343.0710.01
Dosis 200mg/KgBB
77.491.60
360.647.53
Dosis 400mg/KgBB
78.971.62
367.2710.46
Glibenklamid
80.052.62
337.604.34
Dari Tabel VI, menunjukkan bahwa setelah di induksi aloksan 120
mg/kgBB kadar glukosa darah tikus sudah menunjukkan kenaikkan glukosa darah
secara signifikan dalam waktu dua sampai tiga hari (Suhartimiati, 2003) dan dapat
dipastikkan bahwa hewan uji sudah diabetes.
Pemeriksaan darah kemudian dilanjutkan pada kadar kolesterol darah. Pada
penelitian Sedigheh et al., (2011) yang menggunakan Cucurbita Pepo L. bahwa
kadar kolesterol total tikus yang diinduksi aloksan dosis 120 mg/kgBB sudah
dapat meningkatkan kadar kolesterol darah tikus normal 78.85 4.1 mg/dL
menjadi 107.4 5.51 mg/dL. Pada penelitian ganggang hijau kali ini juga
menggunakan aloksan dosis 120 mg/kgBB. Seperti terlihat pada Tabel VII
peningkatan kadar kolesterol yang ditimbulkan yaitu dari normal 82,34 mg/dL
menjadi 164,60 mg/dL.
Selain itu, Animal-Chemistry menyatakan bahwa
kolesterol normal tikus galur Wistar 20-110 mg/dL. Sehingga dapat disimpulkan
bahwa tikus percobaan yang digunakan sudah mengalami hiperkolesterol.
Masing-masing data kemudian dilakukkan uji statistika normalitas dan
homogenitas, dari hasil uji statistika menyatakan bahwa kadar kolesterol pada hari
63
ke-0 terdistribusi normal dan homogen ( p 0,05 ). Sedangkan pada hari ke-3 data
terdistribusi normal dan tidak homogen. Hasil uji normalitas dan homogenitas ini
merupakan penentu uji selanjutnya yaitu parametik dan non parametik.
Berdasarkan data tersebut, data kadar kolesterol pada hari ke-3 dilakukan uji
nonparametik yaitu dengan uji Kruskal Wallis untuk mengetahui perbedaan pada
setiap kelompok uji, dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney dengan taraf
kepercayaan 95% untuk mengetahui letak perbedaan yang signifikan antar
kelompok. Hasil uji statistika diketahui bahwa kelompok kontrol, variasi dosis,
dan glibenklamid menunjukan perbedaan yang signifikan (p 0,05) atau adanya
perbedaan kadar kolesterol darah dibandingkan dengan kelompok normal yang
tidak diinduksi aloksan dan selama perlakuan hanya diberi pakan standar dan
minum. Hal ini menunjukkan bahwa setelah diinduksi aloksan kadar kolesterol
darah tikus sudah menunjukkan kenaikkan kolestrol darah secara signifikan dalam
waktu dua sampai tiga hari (Suhartimiati, 2003). Jadi aloksan terbukti memberi
efek kolesterolemia eksperimental yang cepat pada hewan uji.
64
Tabel VII. Rata-rata kadar kolesterol darah yang diperiksa pada hari
ke-0 sampai hari ke-17
Kadar Kolesterol Darah ( Mean SD) (mg/dL)
Dosis
Kelompok
(mg/kgBB) Hari ke0
Hari ke3
Hari ke10 Hari ke17
80,54
79,14
84,38
82,34
Sehat
12,27*
4,70*
5,72
5,10
Kontrol
Ampas Ekstrak
Etanol
Ganggang
Hijau
Glibenklamid
120
83,46
2,65
162,54
12,68
149,07
3,70
130,05
8,10
141,80
2,52*
130,94
9,64
136,36
3,08
100
82,33
2,63
200
89,52
2,40
160,82
7,14
136,58
2,60
117,57
5,03*
400
87,70
1,40
173,40
1,73
132,37
2,73
102,01
2,32*
0,45
85,28
3,42
177,20
3,67
111,05
1,51*
82,70
2,41*
Keterangan : * = berbeda signifikan ( P < 0,05 ) dibandingkan dengan kelompok

kontrol
65
b. Uji Daya Aktivitas Hiperkolesterol

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek penurunan kadar kolesterol
darah dari sediaan ampas ekstrak etanol ganggang hijau dengan dosis
100mg/kgBB, 200mg/kgBB, 400 mg/kgBB pada tikus diabetes yang telah di
induksi aloksan dengan pembandingnya adalah glibenklamid.
Dari Tabel VII, bisa diketahui bahwa terjadi beberapa perubahan setelah
beberapa hari perlakuan. Penurunan kadar kolesterol darah terlihat pada variasi
dosis ampas ekstrak etanol ganggang hijau 100mg/kgBB; 200 mg/kgBB; dan 400
mg/kgBB dan kelompok glibenklamid pada hari ke-10 dan hari ke-17. Tetapi
penurunan lebih terlihat signifikan pada kelompok glibenklamid dibanding
dengan variasi dosis. Hal ini dikarenakan mekanisme kerja dari glibenklamid,
yaitu merangsang sekresi insulin dengan menstimulasi sel-sel Langerhans di
pankreas (Ganiswarna, 1995). Pada penelitian Fondjo et al., (2012) pemberian
Glibenklamid 5 mg/kgBB pada tikus diabetes dapat menurunkan kadar trigliserid,
kolesterol total, kolesterol LDL secara signifikan karena glibenklamid dapat
meningkatkan sekresi insulin sehingga kerja dari enzim-enzim metabolisme lemak
tidak terganggu.
Pada pemeriksaan darah periode II yaitu hari ke-10 diamati perbandingan
antara kelompok kontrol dan variasi dosis ampas ekstrak etanol ganggang hijau,
untuk membuktikan adanya perbedaan yang mengindikasikan penurunan kadar
kolesterol darah pada kelompok tersebut. Uji statistik menunjukkan bahwa data
terdistribusi normal dan homogen. Sehingga analisis data menggunakan metode
66
uji parametik One Way ANOVA satu arah untuk mengetahui adanya perbedaan
pada setiap kelompok uji, kemudian dilanjutkan Posthoct LSD. Dari Tabel VII
menunjukkan bahwa kadar kolesterol darah pada ampas ekstrak etanol ganggang
hijau dosis 100 mg/kgBB dan kelompok glibenklamid berbeda signifikan dengan
kelompok kontrol ( p 0,05 ). Bila dilihat dari kemampuan penurunan kadar
kolesterol darah ampas ekstrak etanol ganggang hijau, dosis 100 mg/kgBB tidak
mengindikasikan adanya penurunan kadar kolesterol darah bila dibandingkan
dengan kelompok kontrol pada hari ke-10 karena kadar kolesterol darah pada
dosis 100 mg/kgBB nilainya di atas kadar kolesterol pada kelompok kontrol, bila
dilihat dari efektivitas ampas ekstrak etanol ganggang hijau variasi dosis
100mg/kgBB; 200 mg/kgBB; dan 400 mg/kgBB menunjukkan ada perbedaan
yang signifikan ( p 0,05 ) dibandingkan dengan kelompok glibenklamid, yaitu
penurunan kadar kolesterol darah pada semua variasi dosis ampas ekstrak etanol
ganggang hijau masih sedikit dibandingkan kelompok glibenklamid, bisa
diartikan bahwa kelompok glibenklamid lebih berefek untuk menurunkan kadar
kolesterol darah pada tikus dibandingkan dengan pemberian variasi dosis ampas
ekstrak etanol ganggang hijau pada hari ke-10.
Pemeriksaan dilanjutkan kembali pada periode III yaitu hari ke-17. Uji
statistika menunjukkan data terdistribusi normal dan tidak homogen. Sehingga
analisis data menggunakan uji nonparametik, yaitu Kruskal Wallis untuk
mengetahui perbedaan pada setiap kelompok uji, dilanjutkan dengan uji MannWhitney dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui letak perbedaan yang
signifikan antar kelompok. Dari Tabel VII menunjukkan kadar kolesterol darah
67
pada variasi dosis ampas ekstrak etanol ganggang hijau 200 mg/kgBB; 400
mg/kgBB dan kelompok glibenklamid berbeda signifikan dengan kelompok
kontrol ( p 0,05 ) yaitu kadar kolesterol darah pada variasi dosis ampas ekstrak
etanol ganggang hijau dosis 200 mg/gBB; 400 mg/kgBB dan kelompok
glibenklamid nilainya dibawah kadar kolesterol darah pada kelompol kontrol, ini
menunjukkan bahwa tikus yang diberi ampas ekstrak etanol ganggang hijau dosis
200 mg/kgBB dan 400 mg/kgBB menunjukkan penurunan kadar kolesterol darah
pada hari ke-17. Bila dilihat dari kemampuan penurunan kadar kolesterol darah
ampas ekstrak etanol ganggang hijau dosis 200 mg/kgBB dan 400 mg/kgBB
mengindikasikan adanya penurunan kadar kolesterol darah bila dibandingkan
dengan kelompok kontrol, bila dilihat dari efektivitas ampas ekstrak etanol
ganggang hijau variasi dosis 100 mg/kgBB; 200 mg/kgBB; dan 400 mg/kgBB
menunjukkan ada perbedaan yang signifikan ( p 0,05 ) dibandingkan dengan
kelompok glibenklamid, sehingga bisa diartikan bahwa kelompok glibenklamid
lebih berefek untuk menurunkan kadar kolesterol darah pada tikus dibandingkan
dengan pemberian variasi dosis ampas ekstrak etanol ganggang hijau pada hari
ke-17.
Dari Tabel VII dapat dilihat bahwa variasi dari kadar kolesterol darah antar
kelompok cukup besar, sehingga pada penelitian ini juga dilakukan perubahan
penurunan kadar kolesterol darah untuk meminimalisir variasi. Data perubahan
penurunan kadar kolesterol darah dapat dilihat pada Tabel VIII.
68
Tabel VIII. Tabel Perubahan Penurunan Kadar Kolesterol Darah

Kadar Kolesterol Darah (Mean SD) (mg/dL)
Dosis
Kelompok
(mg/kgBB)
Hari ke-3
Hari ke-10
Hari ke-17
Normal
6,66 4,70*
7,10 6,77*
7,92 4,30*
Kontrol
120
79,07 13,51 46,58 9,57
47,77 10,38
AEEGH
100
66,74 6,00 59,46 4,84*
54,02 5,58
200
71,23 6,76
47,06 2,48
28,05 3,20*
400
85,79 2,10
44,75 2,00
14,40 2,76*
Glibenklamid
0,45
91,91 6,50 25,76 4,34*
6,03 1,72*
Keterangan : * = berbeda signifikan ( p 0,05 ) dibandingkan dengan kelompok
kontrol.
Dari Tabel VIII diamati perbandingan antara kelompok kontrol dengan
variasi dosis ampas ekstrak etanol ganggang hijau pada hari ke-10 dan hari ke-17.
Pada hari ke-10 menunjukkan bahwa kadar kolesterol darah pada ampas ekstrak
etanol ganggang hijau dosis 100 mg/kgBB dan kelompok glibenklamid berbeda
signifikan dengan kelompok kontrol ( p 0,05 ) namun nilai kadar kolesterol
darah ampas ekstrak etanol ganggang hijau dosis 100 mg/kgBB masih di atas
kelompok kontrol. Hasil ini menunjukkan bahwa ampas ekstrak etanol ganggang
hijau dosis 100 mg/kgBB tidak menurunkan kadar kolesterol pada hari ke-10.
Pengamatan pada hari ke-17 menunjukkan bahwa kadar kolesterol darah ampas
ekstrak etanol ganggang hijau dosis 200 mg/kgBB; 400 mg/kgBB dan kelompok
glibenklamid berbeda signifikan dengan kelompok kontrol ( p 0,05 ). Hasil ini
menunjukkan bahwa ampas ekstrak etanol ganggang hijau dosis 200 mg/kgBB;
400 mg/kgBB mampu menurunkan kadar kolesterol darah pada hari ke-17
dibandingkan dengan kelompok kontrol.
Dari hasil keseluruhan data yang diamati pada Tabel VII dan Tabel VIII,
ampas ekstrak etanol ganggang hijau dapat dikatakan berkhasiat sebagai
antihiperkolesterolemia
jika
dibandingkan
dengan
kelompok
kontrol.
69
Antihiperkolesterolemia ini ditunjukkan pada variasi dosis 200 mg/kgBB dan 400
mgkgBB. Penurunan kadar kolesterol darah pada dosis 200 mg/kgBB dan 400
mgkgBB baru terlihat pada hari ke-17 jika dibandingkan dengan kelompok
kontrol. Bila dilihat dari efektivitas ampas ekstrak etanol ganggang hijau pada
semua variasi dosis perlakuan dibandingkan dengan kelompok glibenklamid
maka dapat dikatakan bahwa kelompok glibenklamid lebih berefek dibandingkan
semua variasi dosis. Hal ini mungkin dapat disebabkan karena dosis yang
digunakan dari ampas ekstrak etanol ganggang hijau yang kecil, dan waktu
pemberian yang kurang lama.
Penurunan kadar kolesterol darah akibat pemberian ampas ekstrak etanol
ganggang hijau kemungkinan dikarenakan ganggang hijau mengandung senyawa
flavonoid dan polisakarida sulfat yang bersifat sebagai antioksidan. Antioksidan
dapat menghambat radikal bebas dari aloksan yang mampu merusak sel
pankreas.
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa :
1.
Ampas ekstrak etanol ganggang hijau mengandung senyawa polisakarida

sulfat dan flavonoid.
2.
Ampas ekstrak etanol ganggang hijau memiliki efek penurunan kadar

kolesterol darah pada tikus diabetes yang diinduksi aloksan dengan
pemberian dosis 200 mg/kgBB dan 400 mg/kgBB.
3.
Pemberian ampas ekstrak etanol ganggang hijau dosis 200 mg/kgBB dan 400
mg/kgBB pada hari ke-14 mampu menurunkan kadar kolesterol darah tikus
diabetes yang diinduksi aloksan.
B. Saran
1.
Perlu adanya penelitian lebih lanjut terhadap efek antihiperkolesterolemia

ganggang hijau dengan metode berbeda dan lebih selektif.
2.
Perlu penelitian lebih lanjut terhadap mekanisme antihiperkolesterolemia

ganggang hijau didalam tubuh.
70
DAFTAR PUSTAKA
Andayani, R., Lisawati, Y., Maimunah., (2008), Penentuan Aktivitas
Antioksidan, Kadar Fenolat Total, dan Likopen Pada Buah Tomat,
Jurnal Sains dan Teknologi Farmasi, Vol.13, No.1.
Agoes, G. 2007. Seri farmasi Industri : Teknologi Bahan Alam, Institut Teknologi
Bandung, Bandung.
Alonso GC, Mediavilla D, Martinez CC, Gonzalez A, Cos S, San EJ., 2008.
Melatonin modulates the cadmium-induced expression of MT-2 and MT-1
metallothioneins in three lines of human tumor cells (MCF-7, MDA-MB231 and HeLa), Toxicol Lett 45 (6) : 56-68.
Anonim, 1986. Sediaan Galenika, Departemen Kesehatan RI, Jakarta.
Anonim, 2006, Jantung Koroner Pembunuh Terbesar di Dunia,
http://www.kompas.com, di akses tanggal 14 Desember 2013; 00:54WIB.
Anonim, 2011. International Diabetic Federation (IDF), Available on :
(http://www.idf.org/media-events/press-releases/2011/diabetes-atlas-5thedition, diakses tanggal 3 April 2013; 19:10 WIB
Anonim,
2010.
Diabetes
Mellitus.
http://digilib.unimus.ac.id/files/disk1/113/jtptunimus-gdl-hanikatiqo-56343-babii.pdf, diakses tanggal 11 April 2013; 21.58 WIB.
Baghurst R, Busby C., 2008, Determination of melatonin in edible plant and
medicinal herbs : comparison of different methods, including UV
spectroscopy and GC-MS with reference to its application in
imunodegenerative disorder, Ponty pool : Coghill Research laboratories,
Lower Race.
Diasys T S, 1999, Leaflet Glucose GOD PAP, Diacnostic System (Diasys)
Internasional.
De Padua, M., P.S. Fontoura and L. Mathias, 2004, Chemical Composite of
Ulvaria axysperma(Kutzing) blinding, Ulva lactuca (Linnaeus) and Ulva
fascita (Delile) .Braz.Arch Biol. Technol.,47: 49-55.
Evacuasiany, E., William, H., Santosa, S., 2004, Pengaruh Biji Jengkol
(Pithecellobium jiring) terhadap Kadar Glukosa Darah Mencit Galur Ba
lb/c. Universitas Kristen Marantha Bandung. JKM. 4 (1): 40-49.
Fatmawati, E., 2008, Pengaruh Lama Pemberian Ekstrak Daun Sambiloto
(Andrographis paniculata Ness.) Terhadap Kadar Kolesterol, LDL (Low
Density Lipoprotein), HDL (High Density Lipoprotein) dan Trigliserida
Darah Tikus (Rattus morvegicus) diabetes, Skripsi, Fakultas Sains dan
Teknologi Universitas Islam Negri, Jakarta.
71
72
Fondjo, F.A., Kamgang, R., Oyono, J.L.E., Yonkeu, J.N., 2012. Anti-dyslipidemic
and antioxidant potentials of methanol extract of Kalanchoe crenata whole
plant in streptozotocin-induced diabetic nephropathy in rats. Trop. J.
Pharm. Res. 11 (5): 767-775.
Ganiswarna, S. G., 1995, Farmakologi dan Terapi Edisi IV,
467-481,
BagianFarmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta
Ganong, W.F., 1998, Buku Ajar Fisiologi Kedokteran Edisi 17, diterjamahkan
oleh widjajakusumah, M.D., (Review of Medical Phisiology), Penerbit
Buku Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, Hal 365, 473.
Gordon, MH., 1990, The Mechanism of Antioxidants, Elsievier Applied Science.
London, PP , 1-18.
Graha, C.K., 2010, 100 Question & AnswersKolesterol, PT. Elex Media
Komputindo, Jakarta.
Guyton, A.C. and Hall, J.E., 2006, Textbook of Medical Physiology, 11th ed,
Philadelphia, PA, USA: Elsevier Saunders.
Guiry, M., 2007. Ulva lactuca Linnaeus, http://www.algaebase.org/browse/
taxonomy /?id=8416. 24 September.
Halliwel, B., 1995, Antioxidant Characterization, Biochem. Pharmacol, 49 : 1341
Hanaa, H., Abd El-Baky., Farouk K, And Gamal S. El Baroty, 2009, potential
Biological Properties of Sulphated Polysaccharides Extracted from
Macroalgae Ulva Lactuca L., Academic Journal of Cancer Research 2 (1)
: 01-11.
Halliwel, B., J.M.C. Gutteridge. 1999. Free Radicals in Biology and Medicine.
Oxford University Press. New York.
Harborne JB.1987. Metode Fitokimia. Padmawinata K, Soediro I, penerjemah;
Niksolihin S, editor. Bandung: Penerbit ITB. Terjemahan dari:
Phytochemical Methode.
Harlinawati, Y., 2006, Terapi Jus Untuk Kolesterol + Ramuan Herbal, Puspa
Swara, Jakarta.
Hermawan, U.E., Sutarna dan Setyawan, A.D., 2004, Aktifitas Hipoglikemik dan
Hipolipidemia Akstrak Air Daun Bungur (Lagerstroemia speciosa [L.]
Pers.) Terhadap Tikus Diabetik, Biofarmasi, 2(1): 15-23.
Inawati, Syamsudin., dan Winarno, H., 2007, Pengaruh Ekstrak Daun Inai
(Lawsonaiainermis Linn.) Terhadap Penurunan Kadar Glukosa,
Kolesteroldan Trigliserida Darah Mencit yang Diinduksi Aloksan, Jurnal
Kimia Indonesia, Jakarta, Vol.2(1): 7-12.
73
Setyaningrum, Ida. 2014. Efek Ampas dari Ekstrak Etanol Ganggang hijau (Ulva
lactuca) Terhadap Kadar Glukosa Pada Tikus Jantan Galur Wistar Yang
Di Induksi Aloksan, Skripsi, Universitas Ahmad Dahlan Yogyakarta.
Suharmiati, 2003,Pengujian bioaktivitas antidiabetes mellitus tumbuhan obat,
PT.Temprint, Jakarta.
Izati, I. Q., 2013, Aktivitas Antioksidan Sebagai Penangkap Radikal Bebas
Ekstrak Etanol Ganggang Hijau Spirogyra sp dan Ulva lactuca Dengan
Metode DPPH, Skripsi, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta.
Kamaluddin , M.T., 1993, Farmakologi Obat Antilipidemia, Jurnal Cermin Dunia
Kedokteran, No. 85, Laboratorium Fakultas Kedokteran Universitas
Sriwijaya Palembang.
Khilifi, S., Hachimi, Y., Khalil, A., Essafi, N., and Abboyi, A., 2005, In Vitro
Antioxidant Effect of Globularia alypum L. Hydromethanolic Extract,
Indian Journal of Pharmacology.
Kolar J, Machanckova. (2001). Occurence and possible function of melatonin in
plants endocytobiosis and cell res. Endocytobiosis and cell Res, 14(1).
Lee, D.M. Issue 122 Item 9 Antioxidant Vitamins Helpful in Diabetic
Ketoacidosis
Treatment.
http://www.diabetesincontrol.com/aserver/adclick.php?n=a97aadea, 2002.
Leiro, J.M., R. Castro, A.J., Arranz and J. Lamas, 2007, Immuonomodulation
Actives Of Acidic Sulphated Polysaccharides Obtained From The
Seaweed Ulva rigida C. Agardh. Int. Imunopharmacol., 7: 879-888
Lehninger, A.L., Nelson, D.L., and Cox, M.M., 2004, Principles of Biochemistry,
Worth Pr,New York.
Marks, D.B., Marks, A.B., Smith, C.M., 2000, Biokimia Kedokteran Dasar,
Penerbit Buku KedokteranEGC, Jakarta.
Maulana, M., 2009, Mengenal Diabetes Melitus: Panduan Praktis Mengenal
Penyakit Kencing Manis, Katahati, Yogyakarta, hal 68, 79-80.
Mayes, P. A., Murray, R.K., Granner, D.K., dan Rodwell, V.W., 1999, Biokimia
Harper, Edisi 24, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.
Meenakshi, S. D. et al. 2009. Total Flavonoid and In vitro Antioxidant Activity
of Two Seaweed of Rameshwaram Coast. Global Jurnal of Pharmacology,
3 (2): 59-62
Meshchyshen, I., Kushnir, O., andYaremii, I.,2010,
Hypoglicemic and
Antioxidant Action of Melatonin in Alloxant diabetic, Bukovinian State
Medical University, 8(3): 31.
74
Muchid, Abdul. 2005. Pharmaceutical Care Untuk Penyakit Diabetes Mellitus.

Bina Kefarmasian Dan Alat Kesehatan. Departemen Kesehatan RI.
Muwarni, S., Ali, M., Muliartha, K., 2006, Diet Aterogenik pada Tikus Putih
(Rattus morvegicus strain Wistar) sebagai Model Hewan Ateroklerosi, 6-9,
Jurnal Kedokteran Brawijaya volume XXII no.1 April 2006.
Nugroho, Adimas O., 2005, Pengaruh Pemberian Suplemen Melatonin Terhadap
Jumlah Sel Busa dan Ketebalan Dinding Aorta Abdominalis Tikus Wistar
yang diinduksi Aterosklerosis, Skripsi, Universitas Diponegoro, Semarang.
Ofir Tal, Abraham Haim, Orna Harel and Yoram Gerchman., 2010. Melatonin as
an Antioxidant and its Semi- Lunar Rhytm in Green Macroalga Ulva Sp.
Juornal of Experimental Botany: 62 : 6 ; 1903-1910.
Prabowo A., 2009, Pemanfaatan Phytomelatonin Ganggang hijau (Spirogyra sp.)
Sebagai Cancer Activity Inhibitor dari Induksi Logam Berat, PKM,
Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta.
Pribadi, Iqbal, 2009. Uji Aktivitas Penangkap Radikal Buah Psidium guajava L.
Dengan Metode DPPH (1,1-Difenil-2-Pikril Hidrazil) Serta Penetapan
Kadar Fenolik dan Flavonoid Totalnya, Skripsi, Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Rijke E. 2005. Trace-level Determination of Flavonoids and Their Conjugates
Application to plants of The Leguminosae Family [disertasi]. Amsterdam:
Universitas Amsterdam.
Reflika, G., 2013, Efek ekstrak etanol ganggang hijau (Ulva lactuca L.) terhadap
penurunan kadar kolesterol total pada tikus jantan galur wistar yang
diinduksi isoproterenol, Skripsi, Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta.
Sjahid, L.R., 2008, Isolasi dan Identifikasi Flavonoid dari Daun dewandaru
(Eugenia uniflora L.), Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta, Surakarta.
Shalaby, E.A., 2011, Algae as Promosing Organisms for Environment and Health,
Landes Bioscience, 6(9): 1338-1350.
Shonima G.M, Jiji Thomas, G Murdeedhara, 2012, In Vitro Antioxidant And
Antitumor Activity Of Polysaccharide Isolated From Ulva fasciata, Int J
Pharmacol Bio Science. 3 : 238-246.
Sergio D.P, Ahmet K, Lucien C. M, Dun-Xian T and Russel J. R, 2009,
Phytomelatonin : a review. Journal of Experimental Botany, Vol. 60, No.
1, pp. 57-69.
Sutedjo AY., 2006. Buku Saku Mengenal Penyakit Melalui Hasil Laboratorium.
Yogyakarta: Amara Books. p97.
75
Sutjiatmo, A.B., Sukandar, E.Y., Ratnawati, Y., Kusmaningati, S., Wulansari, A.,
Narvikasari,Sleman., 2011, Efek Antidiabetes Herba Ciplukan (Phisalis
Angulata LINN.I) pada Mencit Diabetes Induksi Aloksan, Universitas
Jendral Achmad YaniBandung,Jurnal Farmasi Indonesia, 5 (4): 166-171.
Szkudelski, T. (2001). The mechanism of alloxan and streptozotocin action in B
cells of the rat pancreas. Physiological research, 50(6), 537-546. 2(5):
291-306.
Tara dan Sutrisno, 2002 cit Hardoko, 2006, Pengaruh Konsumsi KappaKaragenan terhadap Glukosa Darah Tikus Wistar (Ratus novergicus)
Diabetes, Jurnal Teknologi dan Industri, XVII(1): 69.
Tiwari, A.K., J.M. Rao. Diabetes mellitus and multiple therapeutic approaches of
phytochemicals: Present status and future prospect. Current Science, 2002;
vol 83, 1 (30-38).
Tjay, T.H dan Raharja K., 2002, Obat-obat Penting Khasiat, Penggunaan Dan
Efek-efek Sampingnya, Edisi V, Cetakan Pertama, 693-698, Direktorat
Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, Departemen Kesehatan RI, Jakarta.
Wijayakusuma, H., 2004, Bebas Diabetes Mellitus ala Hembing, Puspa Swara,
Jakarta.
Winarno, 2004, Keamanan Pangan Jilid 1, Bogor : M-Brios Press
Qi, H., T . Zhao, Q. Zhang. Z, Zhao and R. Xing., 2005, Antioksidant Activity of
Different Molecular Weight Sulfated Pollysaccharides From Ulva lactuca
Kjellm (Chlorophyta), J.I Appl.Phycol,117: 527-543.
Yuriska, F., 2009, Efek Aloksan Terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar,
UNDIP, Semarang.
Yu, PZ., N. Li, X. Liu, G. Zhou, Q. Zhang and P. Li,2003, Antihyperlipidemic
Effects of Different Molecular Weught Sulfated Polysaccarides From Ulva
pertusa (chlorophyta), Pharmacol.Res.,48:543-549.
Zhu, Qin Yan, Yu Huang and Zhen-Yu Chen. (2000). Interactions Between
Flavonoids and -Tocopherol in Human Low Density Lipoprotein. J. Nutr.
Biochem. (11): 14-2.
Zulney, E.S. Sumadiwangsa, Erik Dahlian dan Umi Kulsum, 2004, Komponen
Aktif Dua Puluh Jenis Tumbuhan Obat di Taman Nasional Gunung
Halimun, Jurnal Penelitian Hasil Hutan Vol.22 No.1, Juni 2004:43-50.
LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Determinasi
76
77
Lampiran 2. Reagen CHOD-PAP (Dyasis)
78
79
Lampiran 3. Data Kadar Kolesterol Darah

Kelompo
k
perlakua
n
Tikus
no.
1
2
3
Normal
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
Kontrol
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
Glibenkla
5
mid
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
100mg/K
4
gBB
5
Rata-rata
SD
Hari ke-0
Hari ke-3
Hari ke-10
94,15
80,49
80,09
84,31
82,9
84,38
5,72
84,38
5,72
6,78%
84,31
82,44
88,06
82,44
80,09
83,46
2,65
83,46
2,65
3,20%
87,71
87,71
79,77
88,46
82,79
85,28
3,42
85,28
3,42
4,00%
83,55
86,95
80,90
79,77
80,52
82,33
2,63
80,55
90,18
82,61
83,64
76,07
82,34
5,10
82,34
5,10
6,20%
148,70
147,33
164,88
179
172,80
162,54
12,68
162,54
12,68
7,80%
175,66
174,48
178,04
173,88
183,97
177,20
3,67
177,20
3,67
2,07%
145,40
147,18
145,99
151,92
154,90
149,07
3,70
90,13
85,88
59,57
87,04
80,07
80,54
12,27
80,54 12,27
15,23%
116,05
140,42
127,65
132,68
133,46
130,05
8,10
130,05 8,10
6,23%
109,00
111,82
111,02
110
113,42
111,05
1,51
111,05 1,
51
1,36%
142,28
137,47
143,08
141,08
145,09
141,80
2,52
Hari ke17
78,57
77,5
86,78
78,93
73,92
79,14
4,70
79,14
4,70
5,94%
142,85
142,14
121,79
121,07
126,86
130,94
9,64
130,94
9,64
7,36%
81,81
80,47
84,84
80,13
86,20
82,70
2,41
82,70
2,41
2,91%
135,01
131,64
135,7
139,39
140,06
136,36
3,08
80
200mg/K
gBB
400mg/K
gBB
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
82,33
2,63
3,20%
88,84
89,22
88,09
87,33
94,13
89,52
2,40
89,52
2,40
2,68%
87,71
88,4
89,6
86,57
85,82
87,70
1,40
87,70
1,40
1,60%
= Reject Data
149,07
3,70
2,48%
149,55
156,08
168,54
162,61
167,35
160,82
7,14
160,82
7,14
4,44%
171,51
173,29
175,07
171,51
175,66
173,40
1,73
173,40
1,73
1%
141,80 2,52
1,77%
138,27
132,26
135,47
137,07
139,87
136,58
2,60
136,58 2,60
1,90%
132,26
131,46
136,27
133,86
128
132,37
2,73
132,37 2,73
2,06%
136,36
3,08
2,26%
116,16
114,14
119,52
111,78
126,26
117,57
5,03
117,57
5,03
4,27%
101,34
99
103,36
105,72
100,67
102,01
2,32
102,01
2,32
2,27%
81
Reject Data
1. Kelompok Normal
a. Hari ke-0
- 94,15 mg/dL
| x-x_ | = | 94,15 - 81,94 |
= 12,21 > 3,46 (2SD)
Data ditolak
b. Hari ke-3
- 90,18 mg/dL
| x-x_ | = | 90,18 80,71 |
= 9,47 > 5,80 (2SD)
Data ditolak
c. Hari ke-10
- 59,57 mg/dL
| x-x_ | = | 59,57 85,78 |
= 26,03 > 7,28 (2SD)
Data ditolak
d. Hari ke-17
- 86,78 mg/dL
| x-x_ | = | 86,78 77,23 |
= 9,55 > 3,96 (2SD)
Data ditolak
2. Kelompok Kontrol
a. Hari ke-0
- 88,06 mg/dL
| x-x_ | = | 86,06 82,32 |
5,74 > 3,00 (2SD)
Data ditolak
b. Hari ke-10
- 116,06 mg,dL
| x-x_ | = | 116,06 133,55 |
= 17,5 > 9,08 (2SD)
Data ditolak
3. Kelompok Glibenklamid
a. Hari ke-0
- 79,77 mg/dL
| x-x_ | = | 79,77 86,66 |
= 6,89 > 4,52 (2SD)
Data ditolak
b. Hari ke-3
- 183,97 mg/dL
| x-x_ | = | 183,97 175,51 |
82
= 8,46 > 3,2 (2SD)

c. Hari ke-10
- 109,00 mg/dL
| x-x_ | = | 109,00 111,56 |
= 2,56 > 2,50 (2SD)
Data ditolak
d. Hari ke-17
- 86,20 mg/dL
| x-x_ | = | 86,20 81,81 |
= 4,39 > 3,70 (2SD)
Data ditolak
4. Dosis Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau 100mg/kgBB
a. Hari ke-0
- 86,95 mg/dL
| x-x_ | = | 86,95 81,18 |
= 5,77 > 2,84 (2SD)
Data ditolak
b. Hari ke-3
- 154,90 mg/dL
| x-x_ | = | 154,90 147,62 |
= 7,28 > 5,12 (2SD)
Data ditolak
c. Hari ke-10
- 137,47 mg//dL
| x-x_ | = |137,47 142,88|
= 5,41 > 2,92 (2SD)
Data ditolak
5. Dosis Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau 200 mg/kgBB
a. Hari ke-0
- 94,13 mg/dL
| x-x_ | = | 94,13 88,37|
= 5,67 > 1,44 (2SD)
Data ditolak
b. Hari ke-3
- 149,55 mg/dL
| x-x_ | = | 149,55 163,64 |
= 14,09 > 9,8 (2SD)
Data ditolak
c. Hari ke- 10
- 132,26 mg/dL
| x-x_ | = | 132,26 13,67 |
= 5,41 > 3,22 (2SD)
Data ditolak
d. Hari ke-17
- 126,26 mg/dL
| x-x_ | = | 126,26 115,4|
83
= 10,86 > 5,68 (2SD)

Data ditolak
6. Dosis Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau 400 mg/dL
a. Hari ke-0
- 89,60 mg/dL
| x-x_ | = | 89,60 87,23|
= 2,37 > 2,28 (2SD)
Data ditolak
b. Hari ke-10
- 128,00 mg/dL
| x-x_ | = | 128,00 133,46 |
= 5,46 > 3,66 (2SD)
Data ditolak
c. Hari ke-17
- 105,72 mg/dL
| x-x_ | = | 105,72 101,09 |
= 4,63 > 3,12 (2SD)
Data ditolak.
84
Lampiran 4. Data Perubahan Penurunan Kadar Kolesterol Darah

Kelompok
Perlakuan
Sehat
Kontrol
100
mg/kgBB
200
mg/kgBB
Tikus
No.
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
Hari ke0
0
0
0
0
0
0
0
Hari ke-3
Hari ke-10
Hari ke-17
13,6
9,69
2,52
0,62
6,83
6,66
4,70
4,05
5,39
20,52
2,73
2,83
7,10
6,77
15,58
2,99
6,70
5,38
8,98
7,92
4,30
6,66 4,70
7,10 6,77
7,92 4,30
0
0
0
0
0
0
0
0
70,57 %
64,39
64,90
76,82
95,56
92,71
79,07
13,51
95 %
31,74
57,98
39,60
50,24
53,37
46,58
9,57
54,30 %
58,54
59,70
33,73
38,63
46,77
47,47
10,38
79,07 13,51
46,58 9,57
47,77 10,38
0
0
0
0
0
0
0
17,08 %
61,85
60,23
65,09
72,15
74,38
66,74
6,00
20,54 %
58,73
50,52
62,18
61,31
64,57
59,46
4,84
21,73 %
51,46
44,70
54,80
59,62
59,54
54,02
5,58
66,74 6,00
59,46 4,84
54,02 5,58
0
0
0
0
0
0
0
9,00 %
60,71
66,86
80,01
75,28
73,22
71,23
6,76
8,14 %
49,43
43,04
47,38
49,74
45,74
47,06
2,48
10,33 %
27,32
24,92
31.43
24,45
32,13
28,05
3,20
71,23 6,76
47,06 2,48
28,05 3,20
9,50 %
5,26 %
11,40 %
85
400
mg/kgBB
Glibenklamid
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
1
2
3
4
5
Rata-rata
SD
Rata-rata
SD
CV
0
0
0
0
0
0
0
83,80
84,90
85,47
84,94
89,94
85,79
2,10
44,55
43,06
46,67
47,29
42,18
44,75
2,00
13,63
10,60
13,76
19,15
14,85
14,40
2,76
85,79 2,10
44,75 2,00
14,40 2,76
0
0
0
0
0
0
0
0
2,44 %
87,95
86,77
98,27
85,42
101,18
91,91
6,50
4,47 %
21,29
24,11
31,25
21,54
30,63
25,76
4,34
19,16 %
6,00
7,34
5,07
8,33
3,41
6,03
1,72
91,91 6,50
25,76 4,34
6,03 1,72
7,07 %
16,84 %
28,52 %
86
Lampiran 5. Data Uji SPSS Hari ke-0

Descriptive Statistics
N
Mean
Std. Deviation
Minimum
Maximum
Perlakuan
24
3.5000
1.74456
1.00
6.00
Kadar
24
84.6025
3.30142
79.77
89.22
One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

perlakuan
N
Kadar
24
24
3.5000
84.6025
1.74456
3.30142
Absolute
.138
.171
Positive
.138
.119
Negative
-.138
-.171
Kolmogorov-Smirnov Z
.678
.836
Asymp. Sig. (2-tailed)
.748
.487
Normal Parameters
Mean
Std. Deviation
Most Extreme Differences
a. Test distribution is Normal.
87
Oneway
Descriptives
Kadar
95% Confidence Interval
for Mean
Std.
N
Mean
Deviation
Std. Error
Lower
Upper
Bound
Bound
Maximu
Minimum
normal
81.9475
2.00527
1.00263
78.7567
85.1383
80.09
84.31
kontrol
82.3200
1.72837
.86419
79.5698
85.0702
80.09
84.31
86.6675
2.60907
1.30453
82.5159
90.8191
82.79
88.46
dosis 100
81.1850
1.64508
.82254
78.5673
83.8027
79.77
83.55
dosis 200
88.3700
.83734
.41867
87.0376
89.7024
87.33
89.22
dosis 400
87.1250
1.15165
.57583
85.2925
88.9575
85.82
88.40
24
84.6025
3.30142
.67390
83.2084
85.9966
79.77
89.22
glibenklami
d
Total
Test of Homogeneity of Variances

Kadar
Levene Statistic
1.157
df1
df2
5
Sig.
18
.367
ANOVA
Kadar
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
df
Mean Square
195.038
39.008
55.648
18
3.092
250.686
23
F
12.617
Sig.
.000
88
Post Hoc Tests

Multiple Comparisons
Kadar
LSD
Mean
(I) perlakuan (J) perlakuan Difference (I-J) Std. Error
normal
kontrol
1.24329
.768
-2.9846
2.2396
1.24329
.001
-7.3321
-2.1079
dosis 100
.76250
1.24329
.547
-1.8496
3.3746
dosis 200
-6.42250
1.24329
.000
-9.0346
-3.8104
dosis 400
-5.17750
1.24329
.001
-7.7896
-2.5654
.37250
1.24329
.768
-2.2396
2.9846
1.24329
.003
-6.9596
-1.7354
dosis 100
1.13500
1.24329
.373
-1.4771
3.7471
dosis 200
-6.05000
1.24329
.000
-8.6621
-3.4379
dosis 400
-4.80500
1.24329
.001
-7.4171
-2.1929
normal
4.72000
1.24329
.001
2.1079
7.3321
kontrol
4.34750
1.24329
.003
1.7354
6.9596
dosis 100
5.48250
1.24329
.000
2.8704
8.0946
dosis 200
-1.70250
1.24329
.188
-4.3146
.9096
dosis 400
-.45750
1.24329
.717
-3.0696
2.1546
-.76250
1.24329
.547
-3.3746
1.8496
kontrol
-1.13500
1.24329
.373
-3.7471
1.4771
glbenklamid
-5.48250
1.24329
.000
-8.0946
-2.8704
dosis 200
-7.18500
1.24329
.000
-9.7971
-4.5729
dosis 400
-5.94000
1.24329
.000
-8.5521
-3.3279
6.42250
1.24329
.000
3.8104
9.0346
kontrol
6.05000
1.24329
.000
3.4379
8.6621
Glibenklamid
1.70250
1.24329
.188
-.9096
4.3146
dosis 100
7.18500
1.24329
.000
4.5729
9.7971
dosis 400
1.24500
1.24329
.330
-1.3671
3.8571
normal
Glibenklamid
glibenklamid
dosis 100
dosis 200
Lower Bound Upper Bound
-.37250
Glibenklamid
kontrol
Sig.
normal
normal
-4.72000
-4.34750
89
dosis 400
normal
5.17750
1.24329
.001
2.5654
7.7896
4.80500
1.24329
.001
2.1929
7.4171
.45750
1.24329
.717
-2.1546
3.0696
dosis 100
5.94000
1.24329
.000
3.3279
8.5521
dosis 200
-1.24500
1.24329
.330
-3.8571
1.3671
kontrol
Glibenklamid
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
90
Lampiran 6. Data uji SPSS hari ke-3

N
Mean
Std. Deviation
Minimum
Maximum
Perlakuan
25
3.6400
1.72916
1.00
6.00
Kadar
25
1.5495E2
29.58470
80.55
179.00

perlakuan
N
Normal Parameters
Mean
Std. Deviation
kadar
25
25
3.6400
1.5495E2
1.72916 2.95847E1
Absolute
.149
.253
Positive
.149
.208
Negative
-.144
-.253
.743
1.267
.639
.081
91
Oneway
Descriptives
Kadar
for Mean
Mean
Normal
kontrol
5 1.6254E2
Glibenkla
82.2667
Std.
Std.
Lower
Upper
Deviation
Error
Bound
Bound
1.57335
Minimum
Maximum
.90837
78.3582
86.1751
80.55
83.64
14.18242 6.34257
144.9322
180.1518
147.33
179.00
4 1.7552E2
1.83858
.91929
172.5894
178.4406
173.88
178.04
dosis 100
4 1.4762E2
2.95910 1.47955
142.9139
152.3311
145.40
151.92
dosis 200
4 1.6364E2
5.65652 2.82826
154.6442
172.6458
156.08
168.54
dosis 400
5 1.7341E2
1.93988
.86754
170.9993
175.8167
171.51
175.66
29.58470 5.91694
142.7352
167.1592
80.55
179.00
mid
Total
25 1.5495E2

Kadar
Levene Statistic
8.864
df1
df2
5
Sig.
19
.000
ANOVA
Kadar
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
df
Mean Square
20049.140
4009.828
956.966
19
50.367
21006.106
24
F
79.613
Sig.
.000
92
Post Hoc Tests

Kadar
LSD
Mean
Normal
kontrol
dosis 100
kontrol
-80.27533
5.18288
.000
-91.1232
-69.4274
glibenklamid
-93.24833
5.42038
.000
-104.5933
-81.9033
dosis 100
-65.35583
5.42038
.000
-76.7008
-54.0108
dosis 200
-81.37833
5.42038
.000
-92.7233
-70.0333
dosis 400
-91.14133
5.18288
.000
-101.9892
-80.2934
80.27533
5.18288
.000
69.4274
91.1232
-12.97300
4.76078
.013
-22.9374
-3.0086
dosis 100
14.91950
4.76078
.005
4.9551
24.8839
dosis 200
-1.10300
4.76078
.819
-11.0674
8.8614
dosis 400
-10.86600
4.48850
.026
-20.2605
-1.4715
93.24833
5.42038
.000
81.9033
104.5933
Kontrol
12.97300
4.76078
.013
3.0086
22.9374
dosis 100
27.89250
5.01830
.000
17.3891
38.3959
dosis 200
11.87000
5.01830
.029
1.3666
22.3734
dosis 400
2.10700
4.76078
.663
-7.8574
12.0714
65.35583
5.42038
.000
54.0108
76.7008
kontrol
-14.91950
4.76078
.005
-24.8839
-4.9551
Glibenklamid
-27.89250
5.01830
.000
-38.3959
-17.3891
normal
glibenklamid
glibenklamid
Sig.
normal
Normal
93
dosis 200
dosis 200
-16.02250
5.01830
.005
-26.5259
-5.5191
dosis 400
-25.78550
4.76078
.000
-35.7499
-15.8211
normal
81.37833
5.42038
.000
70.0333
92.7233
kontrol
1.10300
4.76078
.819
-8.8614
11.0674
-11.87000
5.01830
.029
-22.3734
-1.3666
dosis 100
16.02250
5.01830
.005
5.5191
26.5259
dosis 400
-9.76300
4.76078
.054
-19.7274
.2014
Glibenklamid
dosis 400
normal
91.14133
5.18288
.000
80.2934
101.9892
kontrol
10.86600
4.48850
.026
1.4715
20.2605
-2.10700
4.76078
.663
-12.0714
7.8574
Glibenklamid
dosis 100
25.78550
4.76078
.000
15.8211
35.7499
dosis 200
9.76300
4.76078
.054
-.2014
19.7274
94

N
Mean
Std. Deviation
Minimum
Maximum
perlakuan
24
3.5000
1.74456
1.00
6.00
kadar
24
1.2390E2
20.21337
80.07
145.09

perlakuan
N
Normal Parameters
Mean
Std. Deviation
kadar
24
24
3.5000
1.2390E2
1.74456 2.02134E1
Absolute
.138
.271
Positive
.138
.147
Negative
-.138
-.271
.678
1.327
.748
.059
95
Oneway
Descriptives
kadar
for Mean
N
normal
Mean
4 85.7800
kontrol
Glibenklam
id
dosis 100
dosis 200
dosis 400
Total
24
1.3355
E2
1.1156
E2
1.4288
E2
1.3617
E2
1.3346
E2
1.2390
E2
Std.
Std.
Lower
Upper
Deviation
Error
Bound
Bound
Minimu Maximu
m
4.20810 2.10405
79.0840
92.4760
80.07
90.13
5.25268 2.62634
125.1943
141.9107
127.65
140.42
1.44364
.72182
109.2678
113.8622
110.00
113.42
1.68563
.84282
140.2003
145.5647
141.08
145.09
3.17690 1.58845
131.1123
141.2227
132.26
139.87
2.12101 1.06051
130.0875
136.8375
131.46
136.27
20.21337 4.12604
115.3663
132.4370
80.07
145.09

Kadar
Levene Statistic
.894
df1
df2
5
Sig.
18
.506
ANOVA
Kadar
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
df
Mean Square
9202.903
1840.581
194.447
18
10.803
9397.349
23
F
170.383
Sig.
.000
96
Post Hoc Tests

kadar
LSD
Mean
normal
kontrol
Sig.
kontrol
-47.77250
2.32407
.000
-52.6552
-42.8898
glibenklamid
-25.78500
2.32407
.000
-30.6677
-20.9023
dosis 100
-57.10250
2.32407
.000
-61.9852
-52.2198
dosis 200
-50.38750
2.32407
.000
-55.2702
-45.5048
dosis 400
-47.68250
2.32407
.000
-52.5652
-42.7998
normal
47.77250
2.32407
.000
42.8898
52.6552
glibenklamid
21.98750
2.32407
.000
17.1048
26.8702
dosis 100
-9.33000
2.32407
.001
-14.2127
-4.4473
dosis 200
-2.61500
2.32407
.275
-7.4977
2.2677
dosis 400
.09000
2.32407
.970
-4.7927
4.9727
glibenklamid normal
25.78500
2.32407
.000
20.9023
30.6677
kontrol
-21.98750
2.32407
.000
-26.8702
-17.1048
dosis 100
-31.31750
2.32407
.000
-36.2002
-26.4348
dosis 200
-24.60250
2.32407
.000
-29.4852
-19.7198
dosis 400
-21.89750
2.32407
.000
-26.7802
-17.0148
normal
57.10250
2.32407
.000
52.2198
61.9852
kontrol
9.33000
2.32407
.001
4.4473
14.2127
2.32407
.000
26.4348
36.2002
6.71500
2.32407
.010
1.8323
11.5977
9.42000
2.32407
.001
4.5373
14.3027
dosis 100
Glibenklamid
dosis 200
dosis 400
dosis 200
31.31750
normal
50.38750
2.32407
.000
45.5048
55.2702
kontrol
2.61500
2.32407
.275
-2.2677
7.4977
2.32407
.000
19.7198
29.4852
Glibenklamid
24.60250
dosis 100
-6.71500
2.32407
.010
-11.5977
-1.8323
dosis 400
2.70500
2.32407
.260
-2.1777
7.5877
97
dosis 400
normal
47.68250
2.32407
.000
42.7998
52.5652
kontrol
-.09000
2.32407
.970
-4.9727
4.7927
2.32407
.000
17.0148
26.7802
Glibenklamid
21.89750
dosis 100
-9.42000
2.32407
.001
-14.3027
-4.5373
dosis 200
-2.70500
2.32407
.260
-7.5877
2.1777
98

N
Mean
Std. Deviation
Minimum
Maximum
perlakuan
26
3.4615
1.70249
1.00
6.00
kadar
26
1.0926E2
23.76021
73.92
142.85

perlakuan
N
Normal Parameters
Mean
Std. Deviation
kadar
26
26
3.4615
1.0926E2
1.70249 2.37602E1
Absolute
.151
.156
Positive
.151
.156
Negative
-.125
-.096
.769
.794
.595
.555
99
Oneway
Descriptives
kadar
95% Confidence Interval for
Mean
N
normal
Mean
Std.
Std.
Deviation
Error
Minimu Maxim
4 77.2300 2.28871 1.14436
kontrol
mid
dosis 100
80.8719
73.92 78.93
10.78279 4.82221
117.5534
144.3306
121.07 142.85
4 81.8125 2.14467 1.07234
78.3998
85.2252
80.13 84.84
3.44265 1.53960
132.0854
140.6346
131.64 140.06
3.27841 1.63921
110.1833
120.6167
111.78 119.52
2.14086 1.07043
98.1859
104.9991
99.00 103.36
23.76021 4.65976
99.6588
118.8527
73.92 142.85
dosis 200
dosis 400
Total
um
73.5881
Glibenkla
26
1.3094E
2
1.3636E
2
1.1540E
2
1.0159E
2
1.0926E
2

kadar
Levene Statistic
12.526
df1
df2
5
Sig.
20
.000
ANOVA
kadar
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
df
Mean Square
13525.700
2705.140
587.989
20
29.399
14113.689
25
F
92.013
Sig.
.000
100
Post Hoc Tests

kadar
LSD
Mean
Difference (I(I) perlakuan (J) perlakuan

normal
kontrol
glibenklamid
J)
Std. Error
Sig.
3.63727
.000
-61.2992
-46.1248
-4.58250
3.83402
.246
-12.5801
3.4151
-53.71200
dosis 100
-59.13000
3.63727
.000
-66.7172
-51.5428
dosis 200
-38.17000
3.83402
.000
-46.1676
-30.1724
dosis 400
-24.36250
3.83402
.000
-32.3601
-16.3649
normal
53.71200
3.63727
.000
46.1248
61.2992
glibenklamid
49.12950
3.63727
.000
41.5423
56.7167
dosis 100
-5.41800
3.42925
.130
-12.5713
1.7353
dosis 200
15.54200
3.63727
.000
7.9548
23.1292
dosis 400
29.34950
3.63727
.000
21.7623
36.9367
glibenklamid normal
4.58250
3.83402
.246
-3.4151
12.5801
Kontrol
-49.12950
3.63727
.000
-56.7167
-41.5423
-54.54750
3.63727
.000
-62.1347
-46.9603
-33.58750
3.83402
.000
-41.5851
-25.5899
-19.78000
3.83402
.000
-27.7776
-11.7824
normal
59.13000
3.63727
.000
51.5428
66.7172
kontrol
5.41800
3.42925
.130
-1.7353
12.5713
kontrol
dosis 100
dosis 200
dosis 400
dosis 100
dosis 200
Glibenklamid
54.54750
3.63727
.000
46.9603
62.1347
dosis 200
20.96000
3.63727
.000
13.3728
28.5472
dosis 400
34.76750
3.63727
.000
27.1803
42.3547
normal
38.17000
3.83402
.000
30.1724
46.1676
kontrol
-15.54200
3.63727
.000
-23.1292
-7.9548
33.58750
3.83402
.000
25.5899
41.5851
-20.96000
3.63727
.000
-28.5472
-13.3728
Glibenklamid
dosis 100
101
dosis 400
dosis 400
13.80750
3.83402
.002
5.8099
21.8051
normal
24.36250
3.83402
.000
16.3649
32.3601
kontrol
-29.34950
3.63727
.000
-36.9367
-21.7623
19.78000
3.83402
.000
11.7824
27.7776
dosis 100
-34.76750
3.63727
.000
-42.3547
-27.1803
dosis 200
-13.80750
3.83402
.002
-21.8051
-5.8099
Glibenklamid
102
Lampiran 9. Dokumen Penelitian
Proses Maserasi
Pengambilan Darah melalui Sinus

Orbitalis
Penyuntikan Tikus secara Intra

Peritonial
Serum Darah Tikus
Serum yang telah di beri enzim

CHOD-PAP
Reagen Kolesterol CHOD-PAP
103
Alloxan Monohydrate
Serbuk Ganggang Hijau

EFEK ANTIHIPERKOLESTEROLEMIA DARI AMPAS EKSTRAK ETANOL GANGGANG HIJAU (Ulva Lactuca L.) PADA TIKUS DIABETES YANG DIINDUKSI ALOKSAN

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

EFEK ANTIHIPERKOLESTEROLEMIA DARI AMPAS EKSTRAK ETANOL GANGGANG HIJAU (Ulva Lactuca L.) PADA TIKUS DIABETES YANG DIINDUKSI ALOKSAN

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

EFEK ANTIHIPERKOLESTEROLEMIA DARI AMPAS

EKSTRAK ETANOL GANGGANG HIJAU (Ulva lactuca L.) PADA

EFEK ANTIHIPERKOLESTEROLEMIA DARI AMPAS

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam

EFEK ANTIHIPERKOLESTEROLEMIA DARI AMPAS

Moch. Saiful Bachri, M.Si.,

Dr. Dyah Aryani Perwitasari, M.Si.,

Ekstrak Etanol Ganggang Hijau (Ulva lactuca L.)

Assalamualaikum Warahmatullahi Wabarakatuh

Allah SWT atas karunia, rahmat serta hidayah-Nya, memberikan kelancaran

Abahku Isrofan dan Mamahku Jamilah, yang dengan sabarnya selalu

Muhammad Nofriandi yang selalu mendukung dan memberikan semangat

10. Miftakh Fauziah, Vita Kurniyawati, Annisa Fikriyah, Ida Setyaningrum,

Ganggang Hijau (Ulva lactuca L.) ........................................................... 4

Polisakarida Sulfat .................................................................................... 9

Radikal Bebas ......................................................................................... 13

Antioksidan Mengurangi Stres Oksidatif pada Diabetes Mellitus ......... 14

Metabolisme lemak pada diabetes ...................................................... 18

Penetapan Kadar Kolesterol Darah ..................................................... 26

B. Penelitian Yang Relevan ............................................................................ 30

D. Variabel Penelitian ..................................................................................... 35

Variabel Bebas ....................................................................................... 35

Variabel Terikat ...................................................................................... 35

Variabel Terkendali ................................................................................ 35

Identifikasi Ganggang Hijau................................................................... 35

Pengumpulan, Pengeringan dan Pembuatan Serbuk Simplisia .............. 36

Pembuatan Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau. ............................. 36

Identifikasi Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau ............................. 37

Pembuatan CMC Na 1 % ....................................................................... 39

Penyiapan Larutan Glibenklamid ........................................................... 39

Perencanaan Dosis Ampas Ekstrak Etanol Ganggang Hijau ................. 39

Hewan Percobaan ................................................................................... 42

Preparasi sampel ..................................................................................... 44

Penetapan Kadar Kolesterol Total ...................................................... 44

Analisis Data .............................................................................................. 46

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 48

Hasil Uji Penetepan Kadar Kolesterol ....................................................... 59

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 70

Kadar phytomelatonin tertinggi dalam tanaman terjadi lima jam pasca

Struktur phytomelatonin (Alonso et al, 2008).......................................... 8

Struktur Flavonoid (Sjahid, 2008).......................................................... 10

Struktur kimia senyawa kolesterol (Guyton dan Hall, 2006) ................. 19

Gambar 6. Biosintesis Kolesterol (Lehninger, 2004)............................................... 22

Struktur Kimia Glibenklamid (Anonim, 2013) ...................................... 25

Struktur kimia aloksan (Anonim,2013).................................................. 28

Skema penelitian efek pemberian ampas ekstrak etanol ganggang hijau

Gambar 10. Reaksi metode CHOD-PAP (Diasys, 2008) ........................................... 45

Uji kualitatif golongan flavonoid (Harbone., 1987). ................................ 12

Patokan Kadar Lipid Darah (mg/dl) yang memerlukan pengobatan

Komposisi sampel, standar, dan blangko yang dianalisis pada penetapan

Tabel IV. Tabel Uji Golongan Flavonoid ................................................................. 54

Hasil penetapan operating time dari kolesterol standar dengan pereaksi

= American Diabetes Association

= Natrium Carboxy Methyl Cellulose

= High Density Lipoprotein

= Hidroksil Metil Glutamil Koenzim-A

= Intermediet Density Lipoprotein

= Low Density Lipoprotein

= Very Low Density Lipoprotein

hormon yang akan berdampak ada penurunan

pemecahan lipoprotein dalam sirkulasi darah (Inawati et al., 2007). Sehingga

Apakah ampas ekstrak etanol ganggang hijau dapat menurunkan kadar

Mengidentifikasi senyawa yang terkandung dalam ampas ekstrak etanol