Nama Anggota:

Dyan Liana

B1J012046

Ria Cahya Lani

B1J012069

Ratih Junika Widjaja Putri

B1J012092

Gita Rahmayanti

B1J012093

Rima Ramadhania

B1J012106

Ummu Halimah

B1J012140

Ditta Aninda Hendra

B1J012196

Dyna Ratnasari Plashintania

B1J013203

Kelompok

:2

Rombongan

:I

Asisten

: Anwar Rovik
Portofolio EBV

1.

Bagaimana proses isolasi EBV?

Jawab : Tahapan isolasi DNA EBV dimulai dengan mencampurkan larutan 20
l proteinase K, 200 l sampel darah, dan 200 l lysis buffer ke dalam tube,
kemudian diinkubasi 15 menit dengan suhu 56 C menggunakan water bath.
Larutan disentrifugasi dan ditambahkan 250 l ethanol 96% ke dalam tube
lysate (campuran dari proteinase). Vortex selama 15 detik dan inkubasi selama 5
menit dalam suhu ruang, selanjurnya disentrifugasi. Blood lysate diindahkan
sebanyak 675 l ke dalam viral spin column bersama collection tube, kemudian
disentrifugasi dengan kecepatan 6800 kali gravitasi selama 1 menit. Collection
tube yang terpasang dilepas, kemudian viral spin column dipasangkan pada
wash tube baru. Wash buffer ditambahkan 50 l sebagai pencucian ke-1 dan
disentrifugasi dengan kecepatan 6800 x g dalam suhu ruang selama 1 menit.
Larutan dalam wash tube dibuang, kemudian sentrifugasi kembali dengan
kecepatan 13000 x g selama 1 menit dengan suhu ruang. Wash buffer
ditambahkan 50 l sebagai pencucian ke-2, disentrifugasi dengan kecepatan
6800 x g selama 1 menit dengan suhu ruang. Larutan pada wash tube dibuang
dan disentrifugasi kembali dengan kecepatan 13000 x g selama 1 menit dengan
suhu ruang dan ditambahkan 50 l RNAse free water, lalu inkubasi selama 1
menit dengan suhu ruang. Sentrifugasi larutan dengan kecepatan 13000 x g

selama 1 menit dengan suhu ruang dan simpan larutan pada suhu -80C (Dai et
al., 2012).

DAFTAR REFERENSI
Dai, Y., Yunlian, T., Fei H., Yang Z., Ailan C., Runliang G., and Yimou W. 2012.
Screening and functional analysis of differentially expressed genes in EBVtransformed lymphoblasts. Virology Journal. 9. pp : 77.