Lampiran1

ProsedurAnalisisProbitMenggunakanPOLOPC

POLOPC merupakan program dalam DOS yang dirancang khusus oleh pembuatnya, yaitu LeOra Software (1987), untuk mengolah data hubungan konsentrasimortalitas dengan analisis probit (Finney 1971). Program POLOPC bisa disimpan dalam disket atau dalam direktori (folder) tertentu pada harddisk (misal dalam drive C: dan direktori Polo). Program POLOPC dikemas dalam filezipyangharusdiekstrakterlebihdahulukedirektoriyangsesuaidengancara yangbiasadilakukan. CaraMengekstrakFileProgramPOLO y Masukkan disket yang berisi program POLOPC ke drive A: dan aktifkan Windows Explorer dengan mengklik ganda ikon Windows Explorer yang terdapatdalammenupadalayar. y Aktifkan drive A: dengan mengklik pilihan drive A: pada layar Windows Explorer. Dalam disket POLO terdapat dua file zip, yaitu POLO.ZIP dan POLO1.EXE.

y KlikgandafilePOLO1.EXE(POLO1)untukmengekstrakfileprogramPOLO. PadalayarmunculmenuuntukmengekstrakfilePOLO. * Pilihnamadrivedanfolder(direktori)tempatfilePOLOakandisimpan,misal C:\polo.BilafilePOLOakandisimpandidisket,ketikA:padatempatpilihan folder.

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

41

* KlikperintahUnzippadamenupengekstrakWinZip

Bila file POLO telah berhasil diekstrak, pada layar muncul pesan 7 file(s) unzippedsuccessfully.KlikOK,laluklikperintahClosepadamenupengekstrak WinZipdiatas.EkstraksifilePOLOtelahselesaidilakukan.

y Untuk melihat filefile program POLO klik folder polo di drive C: pada layarWindowsExplorer. * Filefile yang telah terekstrak terdiri atas satu file aplikasi (POLO.EXE) dan enam file yang masingmasing berisi contoh data yang dapat di input ke program POLO dan diolahdenganmetodeprobit.

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

42

CaraMenggunakanProgramPOLO Ada dua cara untuk menggunakan POLOPC, yaitu cara langsung/interaktif dan cara tidak langsung. Yang dimaksud dengan cara langsung ialah input diketik secara interaktif sesuai perintah yang muncul pada layar dan hasil pengolahannya juga langsung ditampilkan pada layar, sedangkan pada cara tidak langsung input dimasukkan menurut urutan tertentu sesuai urutan perintah pada POLOPC (tetapi perintah tersebut tidak ditampilkan pada layar) dan hasil pengolahannya disimpan dalam suatu file output (diberi nama tertentu).Padakeduacaratersebut,datadiketikterlebihdahuludenganeditorfile (misal MSWord atau Notepad) dan disimpan dalam bentuk file teks (text file) dalam folder yang sama dengan folder tempat menyimpan POLOPC (misal C:\polo atau di disket). Pada cara pertama, bila hasil pengolahan terdiri atas beberapa halaman layar, yang tampak hanya halaman terakhir saja, sedangkan pada cara kedua, keseluruhan hasil bisa dilihat menggunakan editor file dan disimpansebagaidokumenWord. Caralangsungbisadilakukandenganduacara: (1) mengaktifkan program POLOPC dengan Windows Explorer, yaitu dengan mengaktifkan Windows Explorer, kemudianmembuka folder C:\polo (atau folder lain sesuai dengan tempat menyimpan program POLO), mengklik ganda file polo.exe (POLO), selanjutnya mengetik nama file input (yang berisidatayangakandianalisis)dantekanENTER. Setelah file POLO (POLO.EXE) diklik ganda, pada layar muncul tampilan DOS, dan perintah untuk memasukkan nama file yang berisi file data yang akandiolehdengananalisisprobit.

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

43

POLO-PC (C) Copyright LeOra Software 1987 Input file >

(2) mengaktifkan POLOPC melalui prompt MSDOS pada Windows sebelum versi XP atau C:\ command prompt pada Windows XP, yaitu dengan mengklikpromptMSDOSataupromptC:\,masukkefolderC:\polo(pada prompt C:\, ketik cd\polo lalu tekan ENTER), mengaktifkan program POLO dengan mengetik polo dan tekan ENTER, kemudian mengetik nama fileinputdantekanENTER.

Tampilan di atas menunjukkan pilihan menu C:\ command prompt untuk Windows XP. Pada Windows versi sebelum XP, di bawah menu Programs, terdapat pilihan MSDOS Prompt. Pada prompt C:\, ketik cd\polo dan tekan ENTER, lalu ketik polo dan tekan ENTER, selanjutnya ketik nama file inputdantekanENTER. A.CaramenggunakanPOLOPCsecaralangsung Misalnya digunakan data pada Teladan praktikum 1 (halaman 23 dari PedomanPraktikum):
Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

44

Konsentrasi insektisida (ml/l) Jumlah larva Helicoverpa armigera yang mati

3,0 29

1,5 25

0,75 18

0,375 12

0,1875 5

0 0

LangkahlangkahdalampenggunaanPOLOPCadalahsebagaiberikut: (1) Ketik data di atas sesuai format POLOPC menggunakan editor file (misal program pengolah kata seperti MSWord atau program teks seperti Wordpad atau Notepad) dan simpan dalam bentuk file teks (text document), misal diberi namaDurhak.txt(pengujianinsektisidaDursbanterhadaplarvaH.armigera dengan metode kontak; nama file tidak boleh lebih dari 8 karakter). Pada contohinidigunakanprogramNotepad. (i) aktifkan Notepad dengan mengklik pilihan Notepad di bawah menu ProgramsdanAccessories.

(ii) pada baris pertama (atau beberapa baris pertama), ketik keterangan mengenai pengujian yang dilakukan, dan pada awal tiap baris diketik tanda=. (iii)pada baris berikutnya, ketik kode nama insektisida yang diuji (misal Durhak; kode nama tidak boleh lebih dari 8 karakter), yang diawali dengantanda*. (iv)pada barisbaris berikutnya diketik secara berurutan data konsentrasi (bilangan desimal diketik dengan tanda titik), jumlah serangga uji, dan jumlah serangga yang mati (atau tanggap lain), dan antarpeubah diberi jarak(denganmenekanspacebar).
Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

45

= Uji pendahuluan Dursban 20 EC thd Helicoverpa armigera = Metode kontak, lima taraf kons + kontrol = 30 larva instar ke-2 per konsentrasi = Data mortalitas 24 jam setelah perlakuan = Konsentrasi (ml form/l), jml larva uji, jml larva mati * DurHak 0 30 0 0.1875 30 5 0.375 30 12 0.75 30 18 1.5 30 25 3 30 29

(v) simpandatadiatas(pilihperintahFilelaluSaveas)dalambentukfile teks (textdocument;namafilememiliki kepanjangan .txt) dan beri nama, misalDurhak.txt.FiletersebutdisimpandidalamfolderC:\polo. (2) Aktifkan Windows Explorer, masuk ke folder C:\Polo dan klik ganda file Polo.exe(POLO). (3) Pada prompt Input file >, ketik nama file yang berisi data hasil pengujian lalutekanENTER. Inputfile>Durhak.txt[ENTER]

(4) Padalayarakanterbacakeluaran(output)berikut:
Input file > Durhak.txt input: input: input: input: input: input: input: input: input: input: input: input: = Uji pendahuluan Dursban 20 EC thd Helicoverpa armigera = Metode kontak, lima taraf kons + kontrol = 30 larva instar ke-2 per konsentrasi = Data mortalitas 24 jam setelah perlakuan = Konsentrasi (ml form/l), jml larva uji, jml larva mati * DurHak 0 30 0 0.1875 30 5 0.375 30 12 0.75 30 18 1.5 30 25 3.0 30 29 dose .00000 .18750 .37500 log-dose .000000 -.726999 -.425969 subjects 30. 30. 30. responses 0. 5. 12. resp/subj .000 .167 .400
46

preparation DurHak

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

.75000 1.50000 3.00000

-.124939 .176091 .477121

30. 30. 30.

18. 25. 29.

.600 .833 .967

Number of preparations: 1 Number of dose groups: 5 Do you want probits [Y] ?

(5) Sesuai perintah yang muncul pada layar, lakukan hal berikut secara berurutan: (i) Ketik y (ya) dan tekan ENTER untuk pertanyaan Do you want probits? Do you want probits [Y]? y [ENTER]

(ii) Ketik n (no) dan tekan ENTER untuk pertanyaan Is Natural Response aparameter? Is Natural Response a parameter [Y]? n [ENTER]

(iii)Ketik y dan tekan ENTER untuk pertanyaan Do you want the likelihoodfunctiontobemaximized? Do you want the likelihood function to be maximized [Y]? y [ENTER] (iv)Untuk pertanyaan LDs to calculate [10 50 90] > ketik tingkat mortalitas yang diharapkan untuk penghitungan LD (atau LC tergantung satuan yang digunakan), misal 50 dan 95 untuk LD50 dan LD95 (bisa diisi dengan tingkat mortalitas antara 1 sampai 99). Pada uji pendahuluan ini akan ditentukan enam taraf konsentrasi yang diharapkan mengakibatkan mortalitas dari 5% sampai 95% dengan dua tingkat mortalitas yang berurutan berjarak sama. Dalam hal ini mortalitas yang diharapkan berturutturut 5%, 23%, 41%, 59%, 77%, dan 95% sehingga konsentrasi ujinyasetaraLC5,LC23,LC41,LC59,LC77,danLC95.Dengandemikian,pada pertanyaan LDs to calculate [10 50 90] >, ketik angkaangka 5 23 41 59 7795(diberijarak,tanpakoma).
LD's to calculate [10 50 90] > 5 23 41 59 77 95 [ENTER]

(v) Ketik n (no) dan tekan ENTER untuk pertanyaan Do you want to specifystartingvaluesoftheparameters? Do you want to specify parameters [N]? n [ENTER] starting values of the

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

47

Setelah pertanyaan terakhir dijawab, pada layar akan terbaca keluaran berikut (nomor baris merupakan tambahan sendiri untuk memudahkan penjelasan): The probit transformation is to be used The parameters are to be estimated by maximizing the likelihood function Maximum log-likelihood parameter .61942353 2.1945695 -72.000300 standard error .13766546 .32447214 t ratio 4.4994841 6.7635068

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
19

DurHak SLOPE

Variance-Covariance matrix DurHak DurHak .1895178E-01 SLOPE .2208640E-01

SLOPE .2208640E-01 .1052822

Chi-squared goodness of fit test

preparation subjects responses expected deviation probability

DurHak

20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41

30. 30. 30. 30. 30.

.3903

5. 12. 18. 25. 29.

4.936 11.287 19.051 25.283 28.566

.064 .713 -1.051 -.283 .434

3

.164526 .376231 .635042 .842760 .952193

.13

chi-square

degrees of freedom

heterogeneity

Index of significance for potency estimation: g(.90)=.05914 g(.95)=.08398 g(.99)=.14504 Effective Doses LD 5 LD23 LD41 LD59 LD77 DurHak DurHak DurHak DurHak DurHak dose .09295 .24048 .41121 .66288 1.13349 limits lower upper lower upper lower upper lower upper lower upper 0.90 .04840 .14070 .16401 .31321 .31617 .50822 .53775 .82453 .90381 1.53452 0.95 .04073 .14993 .14881 .32697 .29725 .52809 .51547 .86375 .86929 1.65239 0.99 .02706 .16796 .11869 .35393 .25895 .56904 .47228 .95336 .80739 1.95610

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

48

42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53

LD95

DurHak

2.93263

lower upper

2.05064 5.10207

1.93992 5.90018

1.75564 8.31372

Uji pendahuluan Dursban 20 EC thd Helicoverpa armigera DurHak subjects 150 controls 30 log(L)=-72.00 slope=2.195+-.324 nat.resp.=.000+-.000 heterogeneity=.13 g=.084 LD5=.093 limits: .041 to .150 LD23=.240 limits: .149 to .327 LD41=.411 limits: .297 to .528 Stop - Program terminated.

(6) Nilai a (intersep) dan b (kemiringan/slope) regresi probit beserta galat baku (standard error) masingmasing ditunjukkan oleh parameter DurHak dan SLOPE pada tampilan di atas (baris 8 dan 9). POLOPC menggunakan transformasi N.E.D. (normal equivalent deviate) sebagai ukuran peluang respons(nilaiypadapersamaanregresiprobit),yangbesarnyasamadengan probit minus 5, sehingga intersep yang ditampilkan pada keluaran POLO PC harus ditambah 5 bila nilai y ingin dikembalikan ke satuan probit. Jadi, bila y dalam satuan probit, intersepnya adalah 5,619 (parameter pada baris 8 ditambah 5). Nilai b = 2,195 (parameter SLOPE pada baris 9). Dengan demikian persamaan regresi probitnya adalah y = 5,619 + 2,195 log c (y = probit mortalitas dan c = konsentrasi) atau y = 0,619 + 2,195 log c bila y = N.E.D. (7) LC5, LC23, LC41, LC59, LC77, dan LC95 ditunjukkan pada baris 32, 34, 36, 38, 40, dan 42 kolom dose, yaitu 0,093, 0,240, 0,411, 0,663, 1,133, dan 2,933 (satuan ml/l). Besaran LD (lethal dose) pada keluaran POLO diganti dengan LC karena pada percobaan ini satuan yang digunakan adalah satuan konsentrasi. (8) Nilai g pada baris 28 menunjukkan tingkat nyata pendugaan toksisitas insektisida pada tingkat kepercayaan tertentu. Makin kecil nilai g pada tingkat kepercayaan tertentu, makin teliti pendugaannya. Pada contoh di atas, nilai g pada tingkat kepercayaan 95% [g(.95)] adalah 0,084 (lebih kecil dari 0,1). Dengan demikian selang kepercayaan (SK) 95% untuk konsentrasi letal (misal LC50 dan LC95) insektisida tersebut dapat dianggap cukup teliti. Bila nilai g > 0,4, pendugaan selang kepercayaan pada taraf tertentu dianggap tidak cukup teliti, dan tingkat kepercayaannya harus diturunkan untukmemperolehnilaigyangkurangdari0,4.Untukdatadengansebaran

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

49

yang baik, nilai g untuk SK 95% jarang lebih besar dari 0,4 (Finney 1971). Pada contoh di atas, selang kepercayaan masih bisa ditentukan dengan cukuptelitihinggataraf99%[g(.99)=0,145]. (9) Batas bawah dan batas atas SK 95% untuk LC tertentu ditunjukkan pada barislowerdanupperlimitkolom0.95.Misalnyabatas bawahdanbatasatas SK 95% untuk LC95 masingmasing ditunjukkan pada baris 42 dan 43 kolom 0.95,yaitu1,94dan5,90(ml/l)(SK95%untukLC95adalah1,945,90ml/l). (10) Rangkuman hasil analisis probit, yang mencakup nama pengujian, jumlah serangga uji dan serangga kontrol, nilai kemiringan regresi probit (b) dan galat bakunya, serta beberapa nilai LC dan SK 95% masingmasing ditampilkanpadabagianakhirkeluaranPOLO(baris4551). (11) PadabaristerakhirkeluaranPOLOPCterdapatpernyataanStopProgram terminated,yangmenandakananalisistelahberhasildilaksanakan. B.CaramenggunakanPOLOPCsecaratidaklangsung Sebagai contoh digunakan data yang sama seperti pada penggunaan POLO PCsecaralangsung(fileDurhak.txt). (1) Ketik data yang dianalisis menggunakan editor file (misal Notepad) seperti pada penggunaan POLOPC secara langsung dan simpan dalam bentuk file teks (text document), misal diberi nama Durhak.txt seperti di atas. File tersebut disimpan dalam folder yang sama seperti folder tempat menyimpan programPOLO,misalC:\polo. (2) Aktifkan prompt C:\ (pada Windows XP) atau prompt MSDOS (untuk Windows versi yang lebih lama) dengan cara seperti yang telah dijelaskan di atas (klik menu Start > pilih Programs > , pilih Accessories, dan klik ikonC:\CommandPrompt). (3) Pada prompt C:, ketik cd\polo dan tekan ENTER untuk masuk ke folder C:\polotempatprogramPOLOdandatahasilpengujiandisimpan. C:\cd\polo [ENTER]

(4) Pada prompt C:\polo>, ketik polo>nama file output, misal polo>Durhakh dan tekan ENTER. File Durhakh akan berisi hasil analisis probit; bisa digunakan nama lain sesuai dengan pengujian yang dilakukan dengan catatan nama file tidak lebih dari 8 karakter. Nama file output harus berbeda dengan nama file data. Untuk memudahkan mengingat, pada contoh ini nama file output menggunakan namafile data ditambah huruf h (menunjukkanhasilpengolahandata).
Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

50

C:\polo>polo>Durhakh

[ENTER]

(5) Ketikinputberikutsecaraberurutan: (i) nama file input, misal Durhak.txt dan tekan ENTER (memanggil file Durhak.txtyangberisidatayangakandianalisis) (ii) y dan tekan ENTER (menjawab ya untuk pertanyaan Do you want probits?) (iii)n dan tekan ENTER (menjawab no untuk pertanyaan Is Natural ResponseaParameter?); (iv)y dan tekan ENTER (menjawab ya untuk pertanyaan Do you want thelikelihoodfunctiontobemaximized?) (v) 5 23 41 59 77 95 dan tekan ENTER (menjawab pertanyaan LDs to calculate [10 50 90] >). Angka 5, 23, 41, 59, 77, dan 95 yang dimasukkan mengharapkan penghitungan LC5, LC23, LC41, LC59, LC77, dan LC95; bisa diisi dengan angka lain (dari 1 s.d. 99) sesuai dengan taraf LC yang diharapkan; (vi) n dan tekan ENTER (menjawab no untuk pertanyaan Do you want tospecifystartingvaluesoftheparameters?). Durhak.txt [ENTER] y [ENTER] n [ENTER] y [ENTER] 5 23 41 59 77 95 [ENTER] n [ENTER] (6) Setelah input terakhir, POLOPC langsung melakukan perhitungan; munculnya prompt C:\polo> menunjukkan bahwa perhitungan telah selesai dan hasil analisis telah tersimpan dalam file Durhakh (dalam folder C:\polo)sesuaidengannamafileoutputyangdiketikdiatas.FileDurhakh berisi semua informasi seperti keluaran yang ditampilkan di layar pada penggunaanPOLOPCsecaralangsung. C:\polo> (7) Untuk menampilkan hasil analisis pada layar, pada prompt C:\polo> ketik typeDurhakh. C:\polo>type Durhakh [ENTER]

(8) File Durhakh juga bisa dibuka dengan program pengolah kata (misal MS Word) atau program teks (misal Notepad), dan isinya bisa dibaca dengan mudah.TutupatauminimumkanlayarDOS,danaktifkankembaliWindows ExplorerdanmasukkefolderC:\polo.Padafoldertersebutsudahtersimpan
Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

51

file output Durhakh. Agar mudah dibuka, file tersebut perlu diubah ke dalam format dokumen MSWord. Tandai (highlight) file tersebut > letakkan kursor pada bagian higlight (dengan bantuan mouse) > klik tombol kanan mouse>klikmenuRename.

(9) UntukmengubahformatfileDurhakhkedalamformatMSWord,tambahkan akhiran .doc pada nama Durhakh dan tekan ENTER. Secara otomatis file Durhakh berubah format menjadi file dokumen MSWord, yang bisa dibukadenganmudahdenganmengklikgandanamafiletersebut.

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

52

(10)Isi lengkap file output Durhakh ditampilkan di bawah ini. Sistematika output pada dasarnya sama dengan tampilan output pada layar pada penggunaanPOLOPCsecaralangsung.
POLO-PC (C) Copyright LeOra Software 1987 Input file > input: = Uji pendahuluan Dursban 20 EC thd Helicoverpa armigera input: = Metode kontak, lima taraf kons + kontrol input: = 30 larva instar ke-2 per konsentrasi input: = Data mortalitas 24 jam setelah perlakuan input: = Konsentrasi (ml form/l), jml larva uji, jml larva mati input: * DurHak input: 0 30 0 input: 0.1875 30 5 input: 0.375 30 12 input: 0.75 30 18 input: 1.5 30 25 input: 3.0 30 29 preparation DurHak dose .00000 .18750 .37500 .75000 1.50000 3.00000 log-dose .000000 -.726999 -.425969 -.124939 .176091 .477121 subjects 30. 30. 30. 30. 30. 30. responses 0. 5. 12. 18. 25. 29. resp/subj .000 .167 .400 .600 .833 .967

Number of preparations: 1 Number of dose groups: 5 Do you want probits [Y] ? Is Natural Response a parameter [Y] ? Do you want the likelihood function to be maximized [Y] ? LD's to calculate [10 50 90] > Do you want to specify starting values of the parameters [N] ? The probit transformation is to be used The parameters are to be estimated by maximizing the likelihood function Maximum log-likelihood parameter .61942353 2.1945695 -72.000300 standard error .13766546 .32447214 t ratio 4.4994841 6.7635068

DurHak SLOPE

Variance-Covariance matrix DurHak DurHak .1895178E-01 SLOPE .2208640E-01

SLOPE .2208640E-01 .1052822

Chi-squared goodness of fit test preparation DurHak subjects 30. 30. 30. 30. 30. responses 5. 12. 18. 25. 29. expected 4.936 11.287 19.051 25.283 28.566 deviation .064 .713 -1.051 -.283 .434 probability .164526 .376231 .635042 .842760 .952193 53

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

chi-square

.3903

degrees of freedom

heterogeneity

.13

Index of significance for potency estimation: g(.90)=.05914 g(.95)=.08398 g(.99)=.14504 Effective Doses LD 5 LD23 LD41 LD59 LD77 LD95 DurHak DurHak DurHak DurHak DurHak DurHak dose .09295 .24048 .41121 .66288 1.13349 2.93263 limits lower upper lower upper lower upper lower upper lower upper lower upper 0.90 .04840 .14070 .16401 .31321 .31617 .50822 .53775 .82453 .90381 1.53452 2.05064 5.10207 0.95 .04073 .14993 .14881 .32697 .29725 .52809 .51547 .86375 .86929 1.65239 1.93992 5.90018 0.99 .02706 .16796 .11869 .35393 .25895 .56904 .47228 .95336 .80739 1.95610 1.75564 8.31372

Uji pendahuluan Dursban 20 EC thd Helicoverpa armigera DurHak subjects 150 controls 30 log(L)=-72.00 slope=2.195+-.324 nat.resp.=.000+-.000 heterogeneity=.13 g=.084 LD5=.093 limits: .041 to .150 LD23=.240 limits: .149 to .327 LD41=.411 limits: .297 to .528 Stop - Program terminated.

Daftar Pustaka Finney DJ. 1971. Probit Analysis, 3rd ed. Cambridge: Cambridge Univ Press. LeOra Software. 1987. POLO-PC Users Guide. Berkeley: LeOra Software.

Djoko Prijono : Pengujian Efikasi Insektisida dan Analisis Probit, 2006

54