LAPORAN PRAKTIKUM

INSTRUMENTASI ANALITIK
SPEKTROFOTOMETRI UV
SEMESTER GENAP TAHUN AJARAN 2016/2017

MODUL : SPEKTROFOTOMETRI UV
PEMBIMBING : Dra. Nancy Siti Djenar, MS

PEMBUATAN : 14 MARET
2017
PENYERAHAN : 21

Oleh :
Febrian Rifkhi Fahrizal 161411009 Indriani Debora S.M 161411013
Galuh Hasan Bahtiar 161411010 Intan Sari 161411014
Hanifah Desmiyanti 161411011 Leonita Yuliana 161411015
Hibah Baskoro Rahman161411012 Mentari Y. 161411016

1 A- D3 Teknik Kimia
Kelompok 3 dan Kelompok 4

PROGRAM STUDI DIPLOMA III TEKNIK KIMIA

JURUSAN TEKNIK KIMIA

POLITEKNIK NEGERI BANDUNG

2017
I. Tujuan Percobaan :
1 Dapat menentukan konsentrasi kafein dalam sampel
2 Dapat menggunakan spektrofotometer dengan benar

II. Dasar Teori :

Spektrofotometri UV-VIS adalah pengukuran serapan cahaya di daerah ultraviolet
(180 350 nm) dan sinar tampak (350 800 nm) oleh suatu senyawa. Serapan cahaya UV
atau VIS (cahaya tampak) mengakibatkan transisi elektronik, yaitu promosi elektron-elektron
dari orbital keadaan dasar yang berenergi rendah ke orbital keadaan tereksitasi berenergi
lebih tinggi. Panjang gelombang cahaya UV-VIS bergantung pada mudahnya promosi
elektron. Molekul-molekul yang memerlukan lebih banyak energi untuk promosi elektron
akan menyerap pada panjang gelombang yang lebih pendek. Molekul yang memerlukan
energi lebih sedikit akan menyerap pada panjang gelombang yang lebih panjang. Prinsip dari
spektrofotometri UV-VIS senyawa yang menyerap cahaya dalam daerah tampak (senyawa
berwarna) mempunyai elektron yang lebih mudah dipromosikan daripada senyawa yang
menyerap pada panjang gelombang lebih pendek. Jika radiasi elektromagnetik dilewatkan
pada suatu media yang homogen, maka sebagian radiasi itu ada yang dipantulkan, diabsorpsi,
dan ada yang transmisikan. Radiasi yang dipantulkan dapat diabaikan, sedangkan radiasi
yang dilewatkan sebagian diabsorpsi dan sebagian lagi ditransmisikan.
Absorpsivitas hanya tergantung pada suhu, pelarut, struktur molekul dan panjang
gelombang atau frekuensi radiasi yang digunakan. Spektrum absorpsi (kurva absorpsi) adalah
kurva yang menggambarkan hubungan antara absorban atau transmitan suatularutan terhadap
panjang gelombang atau frekuensi radiasi. Pemilihan panjang gelombang untuk analisis
kuantitatif dilakukan berdasarkan pada spektrum absorpsi yang diperoleh pada percobaan.
Pengukuran absorpsi harus dilakukan pada panjang gelombang absorban maksimum maks
karena kepekaan maksimum dapat diperoleh jika larutan dengan konsentrasi tertentu
memberikan sinyal yang kuat pada panjang gelombang tersebut. Perbedaan absorban sangat
minimal dengan berubahnya panjang gelombang disekitar panjang gelombang absorban
maksimum sehingga kesalahan pengukuran sangat kecil. Pelarut yang digunakan untuk
spektrofotometri harus memenuhi persyaratan tertentu agar diperoleh hasil pengukuran yang
tepat.
Kafein adalah suatu senyawa organik yang mempunyai nama lain yaitu kafein, tein,
atau 1,3,7-trimetilxantin. Kristal kafein dalam air berupa jarum-jarum bercahaya. Bila tidak
mengandung air, kafein meleleh pada suhu 2340C 2390C dan menyublim pada suhu yang
 lebih rendah. Kafein mudah larut dalam air panas dan kloroform, tetapi sedikit larut dalam air
dingin dan alkohol (Abraham, 2010).
Kafein merupakan jenis alkaloid yang secara alamiah terdapat dalam biji kopi, daun
teh, daun mete, biji kola, biji coklat dan beberapa minuman penyegar. Kafein memiliki berat
molekul 194,19 gram/mol. Dengan rumus kimia C8H10N8O2 dan pH 6,9 (larutan kafein 1 %
dalam air ). Secara ilmiah, efek kafein terhadap kesehatan sebetulnya tidak ada, tetapi yang
ada adalah efek tak langsungnya seperti menstimulasi pernafasan dan jantung, serta
memberikan efek samping berupa rasa gelisah (neuroses), tidak dapat tidur (insomnia) dan
denyut jantung tak beraturan (tachycardia). Kopi dan teh banyak mengandung kafein
dibandingkan jenis tanaman lain, karena tanaman kopi dan teh menghasilkan biji kopi dan
daun teh yang sangat cepat, sementara penghancurannya sangat lambat (Hermanto, 2007:1).

III. Alat dan Bahan

N
ALAT JUMLAH BAHAN
O
1. Spektrofotometer UV 1700 Shimadzu 1 Kafein 0,25 gr
2. Labu takar 250 ml 2 HCl 0,1 N
3. Gelas kimia 50 ml 1 Aquades
4. Pipet tetes 1
5. Gelas ukur 100 ml 1
6. Pipet ukur 5 ml 1
7. Batang pengaduk 1
8. Botol semprot 1
9. Spatula 1
10. Labu takar 1000 ml 2
 11. Kaca arloji 1
12 Labu takar 50 ml 8
13. Labu takar 100 ml 1
14. Gelas kimia 600 ml 1
15. Gelas kimia 100 ml 1
16. Bola hisap 1

IV. MSDS

Lembar Data Keselamatan Bahan

MSDS HCl

Sifat Fisika dan Kimia

Keadaan fisik dan penampilan: Cairan.
Bau : pedas. Iritasi (Strong.)

Warna: tak berwarna menyala kuning.

pH (1% soln / air): Asam Klorida

Titik Didih : 108.58 C @ 760 mmHg (untuk 20,22% HCl dalam air) 83oC

@ 760 mmHg (untuk 31% HCl dalam air) 50,5 C (untuk 37% HCl dalam air)

Melting Point : -62,25 C (-80 F) (20,69% HCl dalam air) -46,2 C (31,24% HCl dalam
air) -25,4 C (39,17% HCl dalam air)
Spesifik Gravity: 1,1-1,19 (Air = 1) 1.10 (20% dan 22% HCl solusi) 1,12 (24% HCl solusi)
1,15 (29,57% HCl solusi) 1,16 (32% HCl solusi) 1,19 (37% dan 38% HCl solusi)

Tekanan Uap : 16 kPa (@ 20 C) rata-rata

Kepadatan uap : 1,267 (Air = 1)
Bau Threshold : 0,25 sampai 10 ppm
Properti Dispersi : Lihat kelarutan dalam air, dietil eter.
Kelarutan : Larut dalam air dingin, air panas, dietil eter.
Stabilitas : Produk ini stabil.
Kondisi Ketidakstabilan : bahan yang tidak kompatibel,

Sangat reaktif dengan logam. Reaktif dengan agen oksidasi, bahan organik, alkali, air.
Korosivitas : Sangat korosif di hadapan aluminium, tembaga, stainless steel

(304), dari stainless steel (316). Non-korosif terhadap kaca.

Penanganan

Kontak Mata:

Periksa dan lepaskan jika ada lensa kontak. Dalam kasus terjadi kontak, segera siram mata
dengan banyak air sekurang-kurangnya 15 menit. Air dingin dapat digunakan. Dapatkan
perawatan medis dengan segera.

Kontak Kulit :

Dalam kasus terjadi kontak, segera basuh kulit dengan banyak air sedikitnya selama 15 menit
dengan mengeluarkan pakaian yang terkontaminasi dan sepatu. Tutupi kulit yang teriritasi
dengan yg sesuatu melunakkan. Air dingin mungkin dapat digunakan pakaian.cuci sebelum
digunakan kembali. benar-benar bersih sepatu sebelum digunakan kembali. Dapatkan
perawatan medis dengan segera.

Kulit Serius :

Cuci dengan sabun desinfektan dan menutupi kulit terkontaminasi dengan krim anti-bakteri.
Mencari medis segera

Inhalasi:

Jika terhirup, pindahkan ke udara segar. Jika tidak bernapas, berikan pernapasan buatan. Jika
sulit bernapas, berikan oksigen. Dapatkan segera perhatian medis.
Serius Terhirup:

Evakuasi korban ke daerah yang aman secepatnya. Longgarkan pakaian yang ketat seperti
kerah, dasi, ikat pinggang atau ikat pinggang. jika sulit bernapas, beri oksigen. Jika korban
tidak bernafas, lakukan pernafasan dari mulut ke mulut.

Peringatan:
Ini mungkin berbahaya bagi orang yang memberikan bantuan lewat mulut ke mulut
(resusitasi) bila bahan dihirup adalah racun, infeksi atau korosif. Cari bantuan medis segera.

Tertelan:
JANGAN mengusahakan muntah kecuali bila diarahkan berbuat demikian oleh personel
medis. Jangan pernah memberikan apapun melalui mulut kepada korban yang sadar.
Longgarkan pakaian yang ketat seperti kerah, dasi, ikat pinggang atau ikat pinggang.
Dapatkan bantuan medis jika gejala muncul.

Identifikasi Bahaya

Potensi Efek Kesehatan Akut:

Sangat berbahaya jika terjadi kontak kulit (korosif, iritan, permeator), kontak mata
(iritan, korosif), tertelan,. Sedikit berbahaya jika tertelan (paru sensitif). Non korosifuntuk
paru-paru. Cairan dapat menghasilkan kerusakan jaringan terutama pada selaput lender mata,
mulut dan saluran pernapasan. Kontak kulit dapat menghasilka luka bakar Menghirup Cairan
dapat menghasilkan iritasi parah pada saluran pernapasan, yang ditandai dengan batuk,
tersedak, atau sesak napas. Paling parah dapat mengakibatkan kematian. Radang mata
ditandai dengan kemerahan, berair, dan gatal-gatal. peradangan Kulit ini ditandai dengan
gatal, scaling, kemerahan, atau kadang-kadang, terik.

Pembangunan Toksisitas: Tidak tersedia.

Cairan mungkin beracun untuk ginjal, hati, selaput lendir, saluran pernafasan, kulit mata,
Sistem peredaran darah, gigi. Paparan yang berkepanjangan dapat menghasilkan kerusakan
organ. Berulang atau berkepanjangan kontak dengan semprotan dapat menghasilkan iritasi
mata kronis dan iritasi kulit yang parah. Berulang atau kontak yang terlalu lama dengan
semprotan dapat menghasilkan iritasi saluran pernafasan menyebabkan infeksi bronkial.
Paparan berulang bahan yang sangat beracun dapat menghasilkan kerusakan umum kesehatan
oleh akumulasi dalam satu atau banyak organ manusia.

Tindakan Pertolongan Pertama

Kontak Mata:

Periksa dan lepaskan lensa kontak. Dalam kasus terjadi kontak, segera basuh mata dengan
banyak air selama minimal 15 menit. Air dingin dapat digunakan. Dapatkan perawatan medis
dengan segera.

Kontak Kulit:
Dalam kasus terjadi kontak, segera basuh kulit dengan banyak air selama minimal 15 menit,
melepaskan pakaian dan sepatu yang terkontaminasi . Tutupi kulit yang teriritasidengan yang
melunakkan. Air dingin mungkin dapat digunakan. Cuci sebelum digunakan kembali. Benar-
benar bersih sepatu sebelum digunakan kembali. Dapatkan perawatan medis dengan segera.

Kulit Serius:

Cuci dengan sabun desinfektan dan menutupi kulit terkontaminasi dengan krim anti-bakteri.
Carilah bantuan medis segera.

Terhirup:
Jika terhirup, pindahkan ke udara segar. Jika tidak bernapas, berikan pernapasan buatan. Jika
sulit bernapas, berikan oksigen. Dapatkan perawatan medis segera.

Serius Terhirup:

Evakuasi korban ke daerah yang aman sesegera mungkin. Kendurkan pakaian ketat seperti
kerah, dasi, ikat pinggang atau pinggang. Jika sulit bernafas, berikan oksigen. Jika korban
tidak bernafas, beri nafas buatan.

Tertelan:
Jika tertelan, jangan memaksakan muntah kecuali diarahkan untuk melakukannya oleh tenaga
medis. Dilarang memberikan apapun melalui mulut kepada orang yang tidak sadar.
Kendurkan pakaian ketat seperti kerah, dasi, ikat pinggang atau pinggang. Dapatkan
perawatan medis dengan segera.

Informasi Peraturan Lainnya

HMIS (U.S.A.):

Bahaya Kesehatan: 3

Bahaya Kebakaran: 0

Reaktivitas: 1

Asosiasi Nasional Fire Protection (U.S.A.):

Kesehatan: 3

Mudah terbakar: 0

Reaktivitas: 1

Alat Pelindung:
Sarung tangan. Pakaian lengkap. Respirator uap. Pastikan untuk menggunakan /
respirator yang sudah disetujui. Pakai respirator yang sesuai bila ventilasi tidak memadai.
Pelindung wajah.

Lembar Data Keselamatan Bahan

MSDS kafein

Bagian 1: Produk Kimia dan Identifikasi Perusahaan

Nama Produk: Kafein Kontak informasi:

Kode di katalog: SLC4420, SLC1630 Sciencelab.com, Inc.

CAS #: 58-08-2 14.025 Smith Rd.

RTECS: EV6475000 Houston, Texas 77396

TSCA: TSCA 8 (b) persediaan: Kafein Penjualan US: 1-800-901-7247

CI #: Tidak tersedia. Penjualan internasional: 1-281-441-4400

Sinonim: 1,3,7-trimethylxanthine; 3,7- Pesanan Online: ScienceLab.com

Dihydro-1,3,7- CHEMTREC (24HR Telepon Darurat),
trimetil-1H-purin-2,6-dione, Trimethyl- hubungi:
1,3,7-dioxo-2,6- 1-800-424-9300
purin Internasional CHEMTREC, hubungi: 1-
Nama Kimia: Kafein 703-527-3887

Formula kimia: C8-H10-N4-O2 Untuk bantuan non-darurat, hubungi: 1-

281-441-440
Internasional CHEMTREC, hubungi: 1-703-527-3887

Untuk bantuan non-darurat, hubungi: 1-281-441-4Bagian 2: Komposisi dan Informasi

Bahan

Komposisi:

Nama CAS # : % Berat

Kafein : 58-08-2

% dalam weight :100

Data toksikologis pada Bahan: Kafein: LISAN (LD50): akut: 192 mg / kg [Rat]. 127 mg / kg
[Tikus]. 224 mg / kg [ Kelinci].

Bagian 3: Identifikasi Bahaya

Potensi Efek Kesehatan Akut:

Berbahaya dalam kasus kontak kulit (iritan), kontak mata (iritan), menelan, inhalasi. Parah
over-exposure dapat mengakibatkan

dalam kematian.

Potensi Efek Kesehatan kronis:

Efek karsinogenik: 3 (Tidak diklasifikasikan untuk manusia.) IARC. Efek mutagenik:

mutagenik untuk mamalia

sel somatik. Mutagenik untuk bakteri dan / atau ragi. Efek teratogenik: Tidak tersedia.
TOKSISITAS PEMBANGUNAN:

Tidak tersedia. Substansi mungkin beracun untuk hati, saluran pencernaan, sistem saraf pusat
(SSP). diulang atau

kontak yang terlalu lama substansi dapat menghasilkan kerusakan organ sasaran. Diulang
paparan bahan yang sangat beracun mungkin

menghasilkan kerusakan umum kesehatan dengan akumulasi dalam satu atau banyak organ
tubuh manusia.
Bagian 4: Tindakan Pertolongan Pertama

Kontak mata:

Periksa dan lepaskan lensa kontak. Dalam kasus kontak, segera basuh mata dengan banyak
air selama minimal 15

menit. Air dingin dapat digunakan. air hangat HARUS digunakan. Dapatkan perhatian medis.

Kontak Kulit:

Dalam kasus kontak, segera siram kulit dengan banyak air. Tutupi kulit yang teriritasi dengan
emolien. Hapus terkontaminasi

pakaian dan sepatu. Cuci pakaian sebelum digunakan kembali. Bersihkan sepatu sebelum
digunakan kembali. Dapatkan perhatian medis.

Kulit Serius Hubungi:

Cuci dengan sabun desinfektan dan menutupi kulit terkontaminasi dengan krim anti-bakteri.
Carilah medis segera

perhatian.

Inhalasi:

Jika terhirup, pindahkan ke udara segar. Jika tidak bernapas, berikan pernapasan buatan. Jika
sulit bernapas, berikan oksigen. Dapatkan medis

perhatian.

Inhalasi serius:

Evakuasi korban ke daerah yang aman secepatnya. Kendurkan pakaian ketat seperti kerah,
dasi, ikat pinggang atau pinggang. Mencari

perhatian medis.

Proses menelan:

Jika tertelan, jangan dimuntahkan kecuali diarahkan untuk melakukannya oleh tenaga medis.
Tidak pernah memberikan apapun melalui mulut kepada

orang yang tidak sadar. Kendurkan pakaian ketat seperti kerah, dasi, ikat pinggang atau
pinggang. Dapatkan perhatian medis segera.

Tertelan serius: Tidak tersedia

Bagian 5: Penanganan dan Penyimpanan

kewaspadaan:

Simpan dalam tempat terkunci .. Jauhkan dari panas. Jauhkan dari sumber api. kontainer
kosong menimbulkan resiko kebakaran, menguap

residu di bawah lemari asam. Tanah semua peralatan yang mengandung bahan. Jangan
menelan. Jangan menghirup debu. kenakan cocok

pakaian pelindung. Dalam hal ventilasi cukup, memakai alat pernapasan yang sesuai. Jika
tertelan, segera dapatkan saran medis

dan tunjukkan wadah atau label. Hindari kontak dengan kulit dan mata.

Penyimpanan: Simpan wadah tertutup rapat. Simpan wadah di tempat yang sejuk,
berventilasi baik

Bagian 6: Sifat Fisik dan Kimia

keadaan fisik dan penampilan: Solid. (Kristal padat.)

Bau: Tidak berbau.

Taste: Bitter. (Sedikit.)

Berat Molekul: 194,2 g / mol

Warna putih.

pH (1% soln / air): 6.9 [Netral.]

Titik didih: Tidak tersedia.

Melting Point: 238 C (460,4 F)

Suhu kritis: Tidak tersedia.

Berat Jenis: 1,23 (Air = 1)

Tekanan Uap: Tidak berlaku.

Densitas Uap: Tidak tersedia.

Volatilitas: Tidak tersedia.

Bau Threshold: Tidak tersedia.

Air / Minyak Dist. Coeff .: Produk ini sama-sama larut dalam minyak dan air; log (minyak /
air) = -0.1
Ionicity (dalam Air): Tidak tersedia.

Properti Dispersi: Lihat kelarutan dalam air, dietil eter.

Kelarutan:

Larut dalam air panas. Sebagian larut dalam air dingin, aseton. Sangat sedikit larut dalam
dietil eter. Bebas larut dalam pirol;

di tetrahidrofuran mengandung sekitar 4% air. Larut dalam piridin, etil asetat. Sebagian larut
dalam alkohol terlarut di

petroleum eter. Kelarutan dalam air meningkat dengan alkali benzoat, cinnamates, sitrat atau
salisilat

Bagian 7: Stabilitas dan Data Reaktivitas

Stabilitas: Produk ini stabil.

Ketidakstabilan Suhu: Tidak tersedia.

Kondisi Ketidakstabilan: Kelebihan panas

Ketidakcocokan dengan berbagai zat: Tidak tersedia.

Corrosivity: Non-korosif di hadapan kaca.

Keterangan Khusus tentang Reaktivitas: Tidak tersedia.

Keterangan Khusus tentang korosivitas: Tidak tersedia.

Polimerisasi: Tidak akan terjadi

Bagian 8 : Informasi Toksikologi

Rute masuk: Penghirupan. Proses menelan.

Keracunan untuk Hewan: Toksisitas oral akut (LD50): 127 mg / kg [Tikus].

Efek kronis pada Manusia:

Efek karsinogenik: 3 (Tidak diklasifikasikan untuk manusia.) IARC. Efek mutagenik:

mutagenik untuk mamalia

sel somatik. Mutagenik untuk bakteri dan / atau ragi. Dapat menyebabkan kerusakan pada
organ berikut: hati, saluran pencernaan,

sistem saraf pusat (SSP).

Efek lainnya Toxic pada Manusia: Berbahaya dalam kasus kontak kulit (iritan), menelan,
inhalasi.

Keterangan Khusus tentang Keracunan untuk Hewan:

LDL [Manusia] - Rute: Oral; Dosis: 192mg / kg LDL [Wanita] - Route: Oral; Dosis; 400 mg /
kg LDL [Anak] - Route: Oral; Dosis:

320 mg / kg

Keterangan khusus pada Efek kronis pada Manusia:

Dapat menyebabkan efek merugikan reproduksi (fetotoxicity, ibu (parnutrition) dan cacat
lahir. Dapat mempengaruhi materi genetik

(Mutagenik). Dapat menyebabkan kanker (tumorgenic) berdasarkan data hewan.

Keterangan khusus pada Efek toksik lainnya pada Manusia:

Akut Potensi Efek Kesehatan: Kulit: Dapat menyebabkan iritasi kulit. Mata: Debu dapat
menyebabkan iritasi mekanis. Inhalasi: May

menyebabkan iritasi saluran pernapasan. Tertelan: Berbahaya jika tertelan dalam jumlah
besar. Dapat menyebabkan gastrointestinal (pencernaan)

iritasi saluran dengan nyeri epigastrium, kram perut, mual, muntah dan diare. Mempengaruhi
metabolisme dan kardiovaskular

sistem dengan gejala termasuk peningkatan metabolisme, pembilasan, jantung berdebar,

denyut jantung cepat, disritmia, hipotensi,

tekanan elevasi darah dan penurunan berat badan, asidosis metabolik. Mungkin
mempengaruhi otak dan perilaku / sistem saraf pusat ..

Gejala mungkin termasuk kegelisahan, kecemasan, kegelisahan, insomnia, pusing, tremor,

kejang, kejang, halusinasi,

mengantuk, psikosis toksik, tremor, kejang, ataksia. Mungkin juga mempengaruhi darah,
respirasi (hiperventilasi), dan kencing

sistem (peningkatan ringan dalam volume urin dan ekskresi natrium urin), dan dapat
langsung menghasilkan hipokalemia. Kronis

Potensi Efek Kesehatan: Dapat menyebabkan kanker (tumorigen) berdasarkan studi hewan.
Dapat menyebabkan efek reproduksi dan janin.

Dapat menyebabkan gangguan saluran pencernaan (peningkatan asam lambung, dan sekresi
pepsin dan penurunan esophogeal.Tetapi rendah
Tekanan sfingter), gangguan kardiovaskular. Karena itu adalah stimulan SSP, juga dapat
mempengaruhi sistem saraf pusat (CNS).

Bagian 9: Pembuangan Pertimbangan

Pembuangan limbah: Limbah harus dibuang sesuai dengan peraturan pengendalian
lingkungan federal, negara bagian dan lokal.

Bagian 10: Informasi Transportasi DOT

Klasifikasi: KELAS 6.1: Bahan Beracun. Identifikasi:: Alkaloid, padat, n.o.s. (Kafein) Unna:
1544 PG: III Ketentuan Khusus untuk Transportasi: Tidak tersedia.

Bagian 11: Informasi Peraturan Lainnya

Federal dan Negara Peraturan: TSCA 8 (b) persediaan: Kafein Peraturan lainnya: OSHA:
Berbahaya oleh definisi Hazard Komunikasi Standar (29 CFR 1910.1200). EINECS: Produk
ini adalah pada Inventarisasi Eropa ada Zat Kimia Komersial. Klasifikasi lain: WHMIS
(Canada): Tidak dikendalikan di bawah WHMIS (Kanada). Tidak memiliki classifcation
WHMIS. DSCL (EEC): R22- Berbahaya jika tertelan. risiko Kemungkinan R40- efek tak-
terpulihkan. Kemungkinan risiko R63- dari bahaya pada bayi yang belum lahir. S2- Jauhkan
dari jangkauan anak-anak. HMIS (U.S.A.): Bahaya Kesehatan: 2 Bahaya Kebakaran: 1
Reaktivitas: 0 Perlindungan Pribadi: E Asosiasi Nasional Perlindungan Kebakaran (U.S.A.):
Kesehatan: 2 Mudah terbakar: 1 Reaktivitas: 0 Khusus bahaya: Alat Pelindung: Sarung
tangan. Jas laboratorium. Debu respirator. Pastikan untuk menggunakan respirator yang
disetujui / bersertifikat atau setara. kacamata Splash.
V. PROSEDUR KERJA
4.1 Pembuatan Larutan

4.1.1 Pembuatan Larutan Standard dan Penentuan Panjang Gelombang

Membuat 100 mL larutan induk kafein

(100 ppm) dalam larutan HCL 0,1 N.

Membuat Sederetan larutan standar kafein dengan

konsentrasi 2, 4, 8, 10 dan 12 ppm dalam HCl 0,1 N dari
larutan induk diatas, masing masing dalam labu takar 50 mL.

Menentukan panjang gelombang maksimum, dengan cara

mengukur serapannya (mengambil larutan standar 8 ppm)
dari berbagai panjang gelombang (dari 350 190 nm).

Mengukur serapan berbagai konsentrasi

larutan standar pada panjang gelombang yang
sudah ditentukan pada langkah diatas.
 4.2 Pengoperasian Spektrofotometri UV-1700

4.2.1 Menyalakan Alat

Mengeluarakan silica gel dari sample compartment

Menyalakan Alat dengan menekan

tombol di bagian samping kanan

Membuka monitor, lalu memutar tombol sebelah kanan

hingga pada layer monitor tampak Initialization.

Menunggu sampai proses inisialisasi selesai,

kemudian akan keluar tampilan mode
menu.

4.2.2 Pengukuran Spektrum (untuk penentuan Panjang Gelombang Maksimum).

Memilih Menu Spectrum

Menekan Angka 2 dan mengatur Parameter :

Setting meas Scanning Rec. range Display

mode : Abs / range pada pada 0,00 Speed : No. of mode :
%T 350 - 190 1,00 Fast scan Sequentiall
Memasukkan kedua kuvet yang berisi larutan blanko pada
reference sample pada kedua sample compartment

Menekan tombol Base Corr F1, lalu

ditunggu sampai layar menunjukkan : 0,000 A

Jika tidak tepat 0,000 A, ditekan Auto Zero.

Mengganti kuvet blanko pada posisi sample

(bagian depan) dengan kuvet isi larutan standar.

Menekan tombol start, lalu ditunggu hingga

muncul spectrum antara Abs dengan wavelength

Menekan tombol data Procc F2, lalu peak (tombol 3).

 Didapatkan panjang gelombang maksimum
dan absorbansi nya.

4.2.3 Pengukuran Photometric (untuk mengukur A atau % T)

Memilih menu Photometric, lalu menekan 1,

dan menekan Go to WL, lalu mengisikan nilai
panjang gelombang yang telah didapat tadi.

Memasukkan kuvet yang berisi larutan blanko

(kedua-duanya) pada sample compartment

Menekan tombol auto zero, ditunggu

hingga layar menunjukkan A : 0,000 A

Mengganti kuvet isi blanko (bagian depan)

dengan kuvet yang berisi larutan sampel

Menekan tombol Start

 Mengganti kuvet sampel dengan larutan
sampel yang lain, lalu menekan Start
kembali hingga muncul table : photometric.

4.2.4 Pengukuran Quantitative

Pembuatan Kurva Kalibrasi

Memilih menu Quantitative

dengan menekan tombol (3)

Mengatur Parameter :
1. Meas, 1 lambda : mengisikan nilai panjang
gelombang, lalu enter.
2. Method ; multi point (3) ; mengisikan jumlah
larutan standar yang digunakan enter ; orde 1
enter ; zero intept NO enter
3. No of meas. 1
4. Unit : ppm
5. Data Print : NO

Memasukkan kuvet isi larutan blanko pada

kedua sisi reference sample

Menekan tombol Auto Zero,

ditunggu sampai dengan 0,000 A
 Menekan Start, Memasukkan nilai
konsentrasi larutan standar, lalu ditekan enter

Muncul tampilan : No Conc ABS

Menekan meas (tombol 2)

Mengganti kuvet blanko (bagian depan)

dengan larutan standar yang pertama

Menekan start, ditunggu hingga keluar nilai ABS

Mengganti Kuvet dengan larutan standar yang berikutnya,

kemudian menekan start seterusnya sampai pengukuran selesai.

Menekan cal.curve F1

Didapat tampilan Kurva Kalibrasi

4.2.5 Pengukuran Konsentrasi Sampel

Menekan return sampai kembali ke

menu utama Quantitative

Mengganti kuvet isi larutan standar (bagian

depan) dengan larutan sampel

Menekan Start, dan ditunggu hingga muncul

tampilan konsentrasi sampel pada sample table

4.2.6 Mematikan Alat

Mengosongkan compartment cell

Memasukkan kembali silica gel

Memutar tombol sebelah kanan hingga

layar monitor tampak biru
VI. DATA PENGAMATAN

A. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum

Panjang gelombang maksimum : 277, 8 nm

Absorbansi : 3,9565

Kurva A vs lamda (panjang gelombang)

B. Pengukuran Photometric

Table Photometric

Sampel No. ABS K*ABS

1 3.6123 3612.3

2 3.6123 3612.3

3 3.2148 3214.8

4 2.7372 2737.2

5 2.9138 2913.8

6 3.0679 3067.9

Kurva kalibrasi
VII. PEMBAHASAN

Pada praktikum kali ini dilakukan percobaan untuk mengukur kadar kafein menggunakan
teknik spektrofotometri UV, dimana spektrofotometri ini dapat mengukur rentang panjang
gelombang 190-380 nm.

Sebelum praktikum dimulai, spektrofotometri uv harus dipanaskan terlebih dahulu.

Jangan sampai ada getaran dimeja tempat menaruh alat karena alat yang akan digunakan ini
sangat sensitif terhadap getaran. Alat dinyatakan siap digunakan ketika proses inisialisasi
sudah selesai dan akan keluar tampilan menu.

Bahan yang digunakan adalah HCl 0,1 N dan kafein 100ppm. Konsentrasi kafein yang
digunakan harus benar agar tidak terjadi error saat pengukuran. Larutan induk yang sudah
100 ppm dibuat menjadi cuplikan-cuplikan yang berkonsentrasi sebagai berikut, 0 ppm, 2
ppm, 4 ppm, 6 ppm, 8 ppm, 10 ppm, dan 12 ppm.

Dilakukan pengukuran panjang gelombang maksimum dengan larutan standar 8 ppm.

Dimana didapatkan panjang gelombang maksimum sebesar 277,8 nm, dengan nilai
absorbansi 3,9156.

Setelah mengetahui panjang gelombang maksimum, dilakukan pengukuran absorbansi

terhadap larutan dengan berbagai konsentrasi dimana pada 2 ppm didapat 3.6123, 4 ppm
didapat 3.6123, 6 ppm didapat 3.2148, 8 ppm didapat 2.7372, 10 ppm didapat 2.9138, dan 12
ppm didapat 3.0679.

Dilakukan pengukuran quantitatif untuk membuat kurva kalibrasi. Dimana kurva

kalibrasi digunakan untuk menentukan konsentrasi sample. Menurut teori semakin besar
 konsentrasi kafein maka semakin besar nilai absorbansinya. Ini berarti kurva kalibrasi yang
terbentuk adalah linier keatas. Akan tetapi, dalam praktikum ini didapatkan hasil yang
berkebalikan dengan teori. Sehangga nilai absorbansi sampel tidak dapat ditentukan. Hal ini
terjadi karena larutan kafein yang digunakan sudah tidak baik. Dibuktikan dengan hasil
praktikum kelompok sebelumnya juga tidak berhasil.

VIII. Kesimpulan

Larutan induk kafein yang berkonsentrasi 1000 ppm di encerkan menjadi 100 ppm
kemudian diencerkan kembali menjadi larutan standar kafein dengan konsentrasi 0, 2, 4,
6, 8, 10, dan 12 ppm.

Panjang gelombang maksimum yang didapat adalah sebesar 277,8 nm dengan nilai
absorbansi 3,9156.

Absorbansi terhadap larutan dengan berbagai konsentrasi dimana pada 2 ppm didapat 3.6123,
4 ppm didapat 3.6123, 6 ppm didapat 3.2148, 8 ppm didapat 2.7372, 10 ppm didapat
2.9138, dan 12 ppm didapat 3.0679.

Daftar Pustaka

Petunjuk Praktikum Kimia Analitik Instrumen. 2011. Jurusan Teknik Kimia. Politeknik
Negeri Bandung.