Sebuah Divalidasi fase balik Tertentu

d Metoda kromatografi untuk estimasi

Sibutramine Hydrochloride Monohydrate dalam jumlah besar

bentuk sediaan obat dan kapsul

A.P. Suthar1 *, S.A. Dubey1 dan S.R. Patel2

Lachoo Memorial College of Science & Technology

Sektor-A, Shastri Nagar, Jodhpur, India, 342.003

Farmasi College, Village- Metoda, Kalawad Road, Rajkot, India, 360.021

* Korespon. Penulis: kumar4a@gmail.co

Abstrak: Sebuah kinerja tinggi sederhana, spesifik, akurat dan tepat fase-balik metode
kromatografi cair adalah

dikembangkan dan divalidasi untuk estimasi sibutramine hydrochloride monohydrate dalam

bentuk sediaan kapsul. Sebuah Phenyl

Hypersil BDS C-18, 5 m kolom memiliki 250 x 4.6 mm nomor pembayar dalam mode isokratik,
dengan fase gerak yang mengandung asetonitril: 50

mM Ammonium dihydrogen phosphate (65:35, v / v; pH 6) digunakan. Laju aliran

dipertahankan pada 1,0 mL / menit dan effluent

dipantau pada 225 nm. Waktu retensi sibutramine hydrochloride monohydrate adalah 6.18 min.
Metode yang dikembangkan

divalidasi sesuai ICH pedoman Q2B. Batas deteksi dan batas kuantifikasi untuk estimasi
sibutramine

hidroklorida monohidrat yang ditemukan menjadi 0,09 ug / mL dan 0,26 mg / mL, masing-
masing. Penerimaan dari sibutramine

monohydrate hidroklorida dalam formulasi kapsul yang ditemukan berada di kisaran 99,87-
100,45%. Metode yang diusulkan adalah

berhasil diterapkan untuk penentuan kuantitatif sibutramine hydrochloride monohydrate dalam

bentuk sediaan kapsul. Saya t
juga dapat digunakan untuk analisis sampel selama pengujian stabilitas.

1. Perkenalan

Sibutramine hydrochloride monohydrate (SBHM) adalah

kimia, campuran rasemat dari (+) dan (-)

enantiomer dari cyclobutanemethanamine, 1- (4-

klorofenil) -N, N-dimetil-- (2-metil propil) -,

hidroklorida, monohydrate dan memiliki empiris

rumus C17H29Cl2NO1. SBHM adalah secara lisan

agen diberikan untuk pengobatan obesitas. Ini adalah sebuah

terpusat bertindak reuptake serotonin-norepinefrin

inhibitor. Sibutramine merupakan turunan dari amphetamine yang

prekursor, phenethylamine -, dan blok presinaptik

saraf reuptake terminal norepinefrin, serotonin, dan

dopamine2. Pada manusia, sibutramine adalah cepat

dimetabolisme, untuk desmethyl metabolit, M1 (mono

desmethyl sibutramine) dan M2 (di-desmethyl

sibutramine). Hal ini juga diindikasikan untuk pengelolaan

obesitas, termasuk penurunan berat badan dan pemeliharaan berat badan

kerugian, dan itu harus digunakan dalam hubungannya dengan mengurangi

kalori diet3. Tidak ada data farmakokinetik untuk obat induk

sibutramine telah dilaporkan dalam literatur. memiliki

dilaporkan bahwa sibutramine diberikannya farmakologi yang

tindakan terutama melalui amina M1 sekunder dan

primer metabolit M2 amina, meskipun sibutramine adalah

juga activefarmakologi,
Berdasarkan tinjauan literatur, ditemukan bahwa angka

dari penelitian yang melibatkan metode untuk estimasi SBHMp

telah dilakukan. Dengan demikian, sejumlah analisis

metode tersebut IR6, GC-MS7, LC / ESI-MS / MS8, LC-MS9,

LC-ESI-MS10, colorimetry11, HPLC-MS-MS12 dll memiliki

dikembangkan tetapi tidak ada metode telah dikembangkan sehingga

jauh untuk estimasi hidroklorida sibutramine

monohydrate dalam bentuk obat massal dan dosis kapsul oleh

Metode RP-HPLC dengan deteksi UV.

Sebuah keberhasilan upaya telah dilakukan untuk memperkirakan SBHM

dengan analisis RP-HPLC. studi yang diusulkan melibatkan

pengembangan metode RP-HPLC menggunakan ponsel sederhana

fase yang mengandung asetonitril dan buffer untuk kuantitatif

estimasi sibutramine hydrochloride monohydrate di

bentuk sediaan kapsul, yang sensitif dan memerlukan

waktu analisis yang lebih pendek. Metode yang dikembangkan adalah

divalidasi sesuai ICH guidelines13, 14. Sebagai per ICH

pedoman Q1A (R2), obat menjadi sasaran semua stres

kondisi seperti hidrolisis (asam, basa), oksidasi

(30% H2O2v / v), fotolisis (As per ICH pedoman Q1B),

degradasi termal study15, 16.

2. Percobaan

2.1. Bahan kimia dan reagen

sampel murni dari SBHM (Potensi 99,54%) diperoleh

dari Zydus Cadila Healthcare Ltd, (Ahmadabad, India).

Asetonitril (HPLC grade) yang diperoleh dari E. Merck

(India). air kelas HPLC diperoleh ganda

distilasi dan pemurnian melalui Milli-Q air

sistem pemurnian, amonium dihidrogen fosfat

dan bahan kimia lainnya dari analisis reagen kelas adalah

diperoleh dari Qualigens. Kapsul A (Reductil, 10 mg,

Abbott lab, Brazil) dan kapsul B (Reductil, 15 mg,

Abbott lab, Brazil) diperoleh dari Zydus Cadila

Healthcare Ltd, (Ahmadabad, India).

2.2. Instrumentasi

Sistem Shimadzu HPLC yang dilengkapi dengan LC-2010HT dengan

SPD-10Avp UV dan detektor PDA memiliki Kelas-VP

perangkat lunak dan rheodye injector dengan 20 ml lingkaran tetap.

Sartorius berat keseimbangan, BP211D digunakan untuk

tujuan eksperimental. Semua sampel disaring melalui

0,45 pM filter membran.

2.3 Kondisi kromatografi

fase balik metode kromatografi cair adalah

dikembangkan pada Phenyl Hypersil C-18, 250 x 4,6 mm, 5

um kolom, menggunakan fase gerak yang mengandung asetonitril:

50 mM ammonium dihidrogen fosfat dapar pH 6,0

oleh natrium hidroksida; (65:35, v / v) pada ambient

suhu. campuran pelarut metanol dan Mill-Q

air (65:35, v / v) sebagai agen menipiskan untuk sampel

persiapan. Awalnya metode ini dikembangkan untuk

SBHM sampel murni maka diperpanjang sampai stres

sampel. Sampel standar dan semua stres yang

disusun menipiskan solusi. Laju aliran disimpan di

1,0 mL / menit, suhu kolom 30 C dan deteksi

dilakukan pada 225 nm. sampel disuntikkan menggunakan 20

ml tetap lingkaran, dan total waktu berjalan adalah 8 min

seluruh analisis.

2.3. Persiapan Solusi standar

2.3.1 Solusi Standar

Akurat ditimbang 50 mg standar bekerja SBHM

(Potensi 99,54%) dipindahkan ke 100 mL

labu ukur, dilarutkan dan volume dibuat sampai dengan

tandai dengan menipiskan solusi. Solusi final stock

contained 500g / mL SBHM. 10 mL saham SBHM

solusi dipindahkan ke volumetrik bersih 100 mL

labu dan volume dibuat dengan menipiskan agen

dan aduk rata. Larutan kemudian disaring melalui 0.45

nylon filter. 20 uL larutan akhir (50 ug / mL) adalah

disuntikkan ke dalam sistem HPLC dan kromatogram yang

tercatat.

solusi 2.3.2 menipiskan

campuran pelarut metanol dan air Mill-Q (65:35,

v / v) digunakan sebagai menipiskan solusi.

dari sasaran konsentrasi. Metode ini diterapkan berulang kali

untuk beberapa sampel. presisi menengah metode

diverifikasi dengan menganalisis sampel dari batch tunggal dari

bentuk sediaan kapsul dengan analis yang berbeda menggunakan berbagai

instrumen dan kolom yang berbeda pada hari yang berbeda di 100

% Konsentrasi sasaran (50 ug / mL), The% R.S.D. adalah

ditemukan 0,004%, 0,690%, 1,030% masing-masing,

yang memenuhi kriteria penerimaan untuk didirikan

metode. Data tersebut dikutip dalam Tabel 4.

3.4.2 Akurasi

Akurasi adalah kedekatan dari hasil tes yang diperoleh

metode untuk nilai sebenarnya. Akurasi dilakukan pada

tiga tingkat 50%, 100% dan 150% dengan penambahan standar

metode. Data untuk pemulihan diperoleh di tiga yang berbeda

konsentrasi standar SBHM, disajikan pada Tabel 4.

3.4.3 Batas deteksi (LOD) dan batas

kuantisasi (LOQ)

LOD dan LOQ ditentukan dari standar deviasi

y-intercept dari garis regresi dan metode kemiringan sesuai

ICH pedoman. Untuk SBHM, LOD ditemukan menjadi 0,01

ug / mL dan LOQ ditemukan menjadi 0,26 ug / mL.

3.4.4 Kekhususan

Pemisahan SBHM ditemukan untuk menjadi lebih baik dengan yang

produk degradasi dan plasebo. resolusi yang lebih baik adalah

ditemukan untuk puncak obat dari puncak menyelesaikan terdekat

dengan tidak ada gangguan membuktikan bahwa metode itu ditemukan

spesifik untuk obat.

3.4.5 Stabilitas solusi analitis

stabilitas solusi diperiksa hingga 15 jam. yang menunjukkan

tidak ada perbedaan yang signifikan dari respon awal. Demikian,

solusinya adalah stabil upto 15 jam.

3.4.6 Kekokohan

Ketahanan dari metode ini ditentukan dengan menganalisis

larutan standar pada kondisi operasi normal dan juga

dengan mengubah beberapa kondisi analitis operasi seperti

laju aliran, kolom suhu oven, deteksi

panjang gelombang, rasio fase gerak dan penyangga pH. Sistem

Uji kesesuaian diaplikasikan di masing-masing disebutkan di atas

kondisi dan hasil uji ditunjukkan pada Tabel 4 yang

menunjukkan kekokohan metode.

3.5 Analisis formulasi dipasarkan

Metode yang dikembangkan diaplikasikan pada analisis

SBHM dalam bentuk sediaan kapsul dipasarkan sebagai Capsule

formulasi A dan B (Reductil, Label klaim 10 dan 15

kekuatan mg, Abbott lab, Brasil). Hasil analisis

diberikan dalam Tabel 5.

Isi bentuk sediaan tablet dipasarkan ditemukan

berada di kisaran 100 2% dengan RSD kurang dari 2%

yang menunjukkan kesesuaian untuk analisis rutin SBHM

dalam bentuk sediaan kapsul.

3.6 Stabilitas menunjukkan properti

Nilai-nilai assay, degradasi (%), indeks kemurnian puncak

dengan kondisi stres diberikan pada Tabel 6. Menekankan

Kondisi sampel dievaluasi relatif tanpa tekanan

sampel sehubungan dengan assay dan degradasi (%). Itu

degradasi (%) dari SBHM menunjukkan kerentanan obat

untuk alkali, peroksida, kondisi termal. Kemurnian puncak

Indeks adalah ukuran dari heterogenitas spektral puncak

berdasarkan perbandingan dari spektrum atas seluruh puncak.

Efek non-ideal dikuantifikasi dan disediakan sebagai

nilai indeks kemurnian puncak. Ketika puncak adalah murni,

Indeks kemurnian puncak lebih besar dari 0,990 seperti yang terlihat pada Tabel 6.

Kesimpulan

studi yang diusulkan menjelaskan metode baru RP-HPLC menggunakan

fase gerak sederhana untuk estimasi SBHM di

formulasi sediaan kapsul. Metode ini divalidasi

dan ditemukan untuk menjadi sederhana, sensitif, akurat dan tepat.

Persentase recovery menunjukkan bahwa metode ini gratis

dari gangguan dari eksipien yang digunakan dalam formulasi.

metode yang diusulkan terbukti menjadi nyaman dan efektif

untuk penentuan SBHM selama pengujian stabilitas

sebagian besar serta bentuk kapsul sediaan farmasi.

Selain itu, konsumsi pelarut lebih rendah bersama dengan

run time analisis singkat dari 8 menit mengarah ke biaya yang efektif

Metode kromatografi.