PEWARNAAN GRAM

Alat dan Bahan

 Mikroskop
 Rak kaca objek
 Ungu kristal, modifikasi Hucker
 Larutan iodium lugol 0,1%
 Larutan pemudar-warna aseton-etanol
 Larutan fuksin karbol untuk pewarnaan Ziehi-Neelsen (diencerkan 10 kali dengan etanol
95%). Larutan merah netral 6,4%, atau larutan safranin.

Metode

1. Fiksasi apusan
2. Tambahkan ungu kristal pada keseluruhan kaca objek selama 60 detik.
3. Bilas dengan air bersih. Bairkan kaca objek mengering sebentar, selanjutnya,
tambahkan iodium pada keseluruhan kaca objek selama 60 detik.
4. Bilas dengan air berish. Pudarkan warna segera dengan aseton-etanol, selama 2-3
detik saja.
5. Tambahkan fuksin karbol pada keseluruhan kaca objek selama 2 menit.
6. Bilas dengan air bersih dan taruh kaca objek, dengan posisi tegak, di dalam rak kaca
objek dan biarkan mengering.

Pemeriksaan Mikroskopik

Pertama-tama, amati preparat dengan objektif x40 untuk melihat distribusi pulasan,
selanjutnya, pakai objek x100 (dengan minyak imersi). Organisme positif-gram terwarnai
ungu tua (mis, stafilokokus, streptokokus, mikrokokus, pneumokokus, entrokokus, basil
difteri, basil antraksi). Organisme negatif-gram terwarnai merah ( mis, gonokokus,
meningokokus, basil koliform, shigella, vibrio kolera)