Material and Methods

Materials
 Bubuk isolat protein whey komersial (WPI)
 MUF
 natrium azida (NaN3).
 Polyglycerolpolyricinoleate
 N-Dodecane
 Minyak bunga matahar
 Polimer polydimethylsiloxane (PDMS).
Pembentukan Larutan
Larutan WPI 150 g/kg protein diproduksi dengan mengencerkan serbuk WPI
dalam air deionisasi dengan 0,2 g / kg NaN3, diaduk selama 2 jam, disaring pada
0,45 µm filter syringe. Larutan dibiarkan pada suhu 4°C semalam untuk proses
hidrasi sempurna. PGPR dilarutkan dalam n-dodekana pada 25 g/kg dengan
mengaduk pada 40 ° C selama 1 jam.
Pembentukan Whey Protein Microbeads oleh Microfluidic System
Sistem mikrofluida terdiri dari dua saluran inlet di mana larutan WPI dan fase
lipofilik secara terpisah disuntikkan ke arah persimpangan aliran-fokus (FF) di
mana mereka akhirnya bertemu, kemudian mengalir. Skema saluran FF ditunjukkan
pada Gambar. 1.

Gambar 1. Skema saluran microfluidic yang memfokuskan aliran dengan

dimensi nosel: lebar 15 µm, kedalaman 15 µm dan panjang 300 µm.
Saluran mikrofluida dibuat dalam resin menggunakan teknik standar litografi.
Pembuatan perangkat mikofluida dimulai dengan desain saluran pada perangkat
lunak desain yang dibantu komputer (CleWin, WieWeb Software, Belanda). Sinar
UV bersinar di atas plat krom yang telah ditempatkan di atas dan bersentuhan
dengan resin. Desain 2D dari saluran berhubungan dengan bagian transparan dari
plat. Pada langkah selanjutnya, wafer dan resin ditempatkan di dalam bak
pengembang untuk menghilangkan resin yang tidak diawetkan. Dalam studi saat
ini, dimensi dari persimpangan fokus aliran adalah lebar 15 µm, panjang 300 µm
dan tinggi 15 µm.
Mikroskop Optik
Sampel diambil dari tiga proses yang berbeda selama pembentukan WPM,
yaitu: sebelum perlakuan panas, setelah perlakuan panas di n-dodecane dan setelah
re-dispersi di MUF. Sampel diencerkan 5x dengan menggunakan fase pelarut yang
tepat, yaitu n-dodecane atau MUF, tergantung pada pengukuran yang dilakukan.
Setetes sampel yang telah larut, kemudian dipindahkan ke slide mikroskop dan
ditutup dengan penutup sebelum observasi.
Confocal Laser Scanning Microscopy (CLSM)
WPM yang tersebar di MUF diamati oleh CLSM. Sampel diberi label
menggunakan 0,06 μL rhodamine B isothiocyanate (RITC) per gram protein (dari
larutan RITC 85 g / L yang disiapkan dalam dimethylsulfoxide) dan diaduk selama
15 menit sebelum pengamatan. Sampel kemudian dilewatkan pada 543 nm
menggunakan TE2000-E Nikon C1i terbalik. mikroskop pemindai laser confocal
(CLSM) dengan perbesaran 60x. Setiap gambar didigitalkan dalam tingkat abu-abu
sebagai 512 x 512 piksel matriks (127,3 x127,3 µm2).