Labu

BAB I
PENDAHULUAN
I. Latar Belakang
Masyarakat Indonesia sudah sejak ratusan tahun yang lalu telah memiliki
tradisi memanfaatkan tumbuhan dari lingkungan sekitarnya sebagai jamu untuk
meningkatkan kesehatan, memulihkan kesehatan, pencegahan penyakit dan
penyembuhan penyakit. Ramuan obat bahan alam hampir dimiliki oleh setiap
suku bangsa di Indonesia dan digunakan secara turun temurun sebagai obat.
Sediaan herbal adalah sediaan obat tradisional yang dibuat dengan cara sederhana
seperti infus, dekok dan sebagainya yang berasal dari simplisia. Simplisia adalah
bahan alamiah berupa tanaman utuh, bagian tanaman atau eksudat tanaman yang
digunakan sebagai obat dan belum mengalami pengolahan atau mengalami
pengolahan sederhana serta belum merupakan zat murni kecuali dinyatakan lain,
berupa bahan yang telah dikeringkan. Eksudat tanaman adalah isi sel yang dengan
cara tertentu dipisahkan dari tanamannya dan belum berupa zat kimia murni
(Emilan dkk, 2011; BPOM, 2010 : 1).
Buah labu kuning (Cucurbita moschata Duch) atau waluh merupakan bahan
pangan yang kaya akan kandungan gizi, seperti vitamin A, B dan C, mineral,
protein serta karbohidrat. Kandungan gizinya cukup lengkap, buah labu kuning
dapat menjadi sumber gizi yang sangat potensial dan harganya pun cukup
terjangkau bagi semua kalangan masyarakat. Sejauh ini pemanfaatannya masih
belum optimal. Buah labu kuning memiliki warna yang menarik, bersifat lunak
1
2
dan mudah dicerna serta mengandung karoten (provitamin A) yang cukup tinggi
(Wahyuni dkk, 2013).
Ekstrak labu kuning mampu menurunkan kadar trigliserida dalam darah. Labu
kuning yang mengandung antioksidan seperti ß-karoten, vitamin C, serat saponin,
flavonoid kemungkinan dapat juga digunakan untuk menurunkan kadar
trigliserida pada penderita diabetes mellitus (Choi,2001). kadar antioksidan pada
labu kuning dapat bekerjasama dalam menetralisir radikal bebas sehingga
menghambat pembentukan LDL teroksidasi dan menurunkan kadar LDL dalam
darah yang secara tidak langsung berefek juga pada penurunan kadar trigliserida
dengan mekanisme dihambatnya enzim HMG-CoA (Monteiro, 2013). Senyawa
saponin dalam buah labu kuning didalam saluran pencernaan dapat membentuk
kompleks yang tidak diabsorpsi kembali oleh ginjal sehingga kadar asam empedu
dalam saluran pencernaan berkurang. Kekurangan ini dipenuhi dengan
meningkatkan sintesis asam empedu di hati yang berbahan dasar kolesterol,
sehingga kadar trigliserida di hati berkurang. Selain itu sterol yang kemungkinan
terdapat dalam labu berfungsi sebagai kompetitif terhadap absorpsi kolesterol
eksogen (Linder, 1992). Saponin berkhasiat sebagai sumber anti-bakteri dan anti-
virus, meningkatkan sistem kekebalan tubuh, meningkatkan vitalitas, mengurangi
kadar gula dalam darah dan mengurangi penggumpalan darah (Wahyuni dkk,
2013).
Buah labu kuning diperkirakan berasal dari Peru atau Meksiko, Amerika
Tengah. Awal penyebarannya tidak diketahui secara pasti. Tanaman labu banyak
ditanam di daerah tropis Asia Tenggara termasuk Indonesia, Afrika, Amerika
Tengah, dan Karibia. Guna memperoleh hasil yang representatif simplisia diambil
3
dari daerah sentral penghasil, sentral budidaya dan daerah lain yang mempunyai
perbedaan ketinggian tempat tumbuh. Penelitian ini memuat parameter spesifik
dan parameter non spesifik. Parameter spesifik meliputi nama tumbuhan, nama
ekstrak, organoleptik ekstrak, senyawa larut dalam pelarut tertentu dan parameter
pola kromatogram. Parameter non spesifik meliputi hasil pengujian susut
pengeringan, kadar abu total, kadar abu tidak larut asam, serta mikroba yang dapat
berpengaruh pada kualitas ekstrak (BPOM RI, 2004 : xi)
Penelitian uji parameter ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita moschata
Duch) diperlukan, agar dapat diperoleh nilai parameter mutu ekstrak. Uji
parameter dilakukan pengambilan sampel dari daerah dengan perbedaan
ketinggian dan tempat tumbuhnya, yaitu: Wonosobo, Magelang dan Semarang.
Ketinggian dan tempat tumbuh yang berbeda dimungkinkan adanya perbedaan
nilai parameter ekstrak, sehingga perlu dilakukan uji parameter.
1.1 Rumusan Masalah
1. Bagaimana nilai hasil uji parameter non spesifik dari ekstrak etanol buah Labu
kuning (Cucurbita moschata Duch), yang meliputi susut pengeringan, kadar
abu total, kadar abu tidak larut asam, penentuan total cemaran bakteri dan
kapang khamir, serta kadar Pb dalam ekstrak?
2. Bagaimana nilai hasil uji parameter spesifik dari ekstrak etanol buah Labu
kuning (Cucurbita moschata Duch) yang meliputi identitas, organoleptis,
senyawa larut dalam pelarut tertentu, penetapan kandungan kimia ekstrak serta
pola kromatogram ?
4
1.2 Batasan Masalah
1. Tanaman yang digunakan adalah tanaman labu kuning (Cucurbita moschata
Duch).
2. Bagian tanaman yang digunakan pada penelitian ini adalah buah labu kuning
(Cucurbita moschata Duch) yang diperoleh dari Wonosobo, Magelang dan
Semarang.
3. Uji parameter yang dilakukan dalam penelitian ini adalah uji parameter
terhadap ekstrak etanol buah labu kuning meliputi parameter non spesifik dan
spesifik.
4. Metode ekstraksi yang digunakan adalah digesti dengan pelarut etanol 95%.
5. Uji parameter non spesifik meliputi susut pengeringan, kadar abu total, kadar
abu yang tidak larut asam, penentuan total cemaran bakteri dan kapang
khamir, batas cemaran logam Pb.
6. Uji parameter spesifik meliputi identitas, organoleptis, kadar senyawa larut
dalam pelarut tertentu air dan etanol, penetapan kandungan kimia ekstrak serta
pola kromatogram untuk senyawa Flavonoid dan Saponin.
1.3 Tujuan Penelitian
1. Mengetahui nilai uji parameter non spesifik dari ekstrak etanol buah labu
kuning (Cucurbita moschata Duch), meliputi susut pengeringan, kadar abu
total, kadar abu yang tidak larut asam, penentuan total cemaran bakteri dan
kapang khamir, batas cemaran logam Pb.

5
2. Mengetahui nilai uji parameter spesifik dari ekstrak etanol buah labu kuning
(Cucurbita moschata Duch) meliputi identitas, organoleptis, kadar senyawa
larut dalam pelarut tertentu, penetapan kandungan kimia ekstrak serta pola
kromatogram.
1.4 Manfaat Penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi sumber informasi tentang
parameter mutu ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita moschata Duch), dan
pola kromatogram ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita moschata Duch).
Manfaat lain dari penelitian ini juga diharapkan dapat memberikan informasi yang
berguna terutama dalam pengembangan sediaan obat tradisional yang mutunya
terjamin.
6
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA DAN HIPOTESIS
2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Labu Kuning (Cucurbita moschata Duch)
2.1.1 Sistematika Tanaman
Kingdom : Plantae
Divisio : Magnoliophyta
Classis : Magnoliopsida
Ordo : Violales
Familia : Cucurbitaceae
Genus : Cucurbita
Spesies : Cucurbita moschata Duch.
(Van Steenis, 2002 : 36)
Gambar 1. Buah labu kuning (Cucurbita moschata Duch)
2.1.2 Sinonim
Sumatera: labu kastela, labu merah, labu kuning (Melayu); jawa: waluh
(Sunda, Jawa); Maluku: labu ambon (Wijayakusuma, 2005 : 13).

7
2.1.3 Morfologi Tanaman
Labu kuning disebut juga labu parang merupakan tumbuhan setahun (annual)
yang tumbuh menjalar atau memanjat. Tumbuhan ini merupakan tumbuhan asli
Amerika Utara dan kini dapat ditemukan di seluruh dunia. Batangnya besar,
berbentuk segi lima dengan panjang 3-10 meter, berambut kaku kasar dan sangat
rapat juga penuh dengan bintik kelenjar. Alat pembelit terbelah dan jumlahnya
banyak. Bagian pangkal daun berbentuk jantung, panjang daun 15-30 cm,
berambut panjang, dan sisi panjang mengandung kelenjar.
Bunga besar dan berwarna kuning dengan mahkota bunga berbentuk lonceng,
berbagai hingga pangkalnya, ujungnya melebar, bergigi tidak teratur, dan
berambut. Buahnya besar, berbentuk bola pipih, di dalamnya mengandung banyak
biji. Biji mempunyai berat rata-rata sekitar 2-3 kg. Ukuran pertumbuhannya
sangat cepat, yaitu dapat mencapai 350 gram per hari. Buah labu kuning biasanya
dimasak sebagai kolak. Selain itu juga diolah menjadi sayur dan sup. Biji
berbentuk oval pipih, panjangnya mencapai 5mm, berwarna kekuningan atau abu-
abu, dan biji yang tua biasa dipanggang sebagai kuaci. Perbanyakan tumbuhan ini
dengan bijinya. Bagian labu parang yang banyak dipakai adalah buah, biji, sulur,
tangkai, batang, dan daun (Wijayakusuma, 2005 : 11-12)
2.1.4 Khasiat dan Kegunaan Tanaman
Buah labu kuning berkhasiat sebagai tonik, menurunkan panas tubuh
(antipyretic), menghilangkan dahak (expectorant), peluruh kencing (diuretic),
antiradang (antiinflammatory), dan obat cacing (anthelmintic) (Wijayakusuma,
2005 : 1).
8
2.2 Kandungan Kimia buah Labu kuning (Cucurbita moschata Duch)
Kandungan zat aktif dalam buah labu kuning adalah flavonoid dan saponin
yang mempunyai khasiat sebagai antioksidan dan antimikroba (wahyuni dkk,
2013).
2.2.1 Flavonoid
Flavonoid terutama berupa senyawa yang larut dalam air. Dapat diekstraksi
dengan etanol 70% dan tetap ada dalam lapisan air setelah ekstrak ini dikocok
dengan eter minyak bumi. Flavonoid berupa senyawa fenol, karena itu warnanya
berubah bila ditambah basa atau amonia, jadi mudah dideteksi pada kromatogram
atau dalam larutan. Flavonoid mengandung sistem aromatik yang terkonjugasi dan
karena itu menunjukkan pita serapan kuat pada daerah spektrum UV dan
spektrum tampak (Harborne, 1987 : 70-71).
2.2.2 Saponin
Saponin mula – mula diberi nama demikian karena sifatnya yang menyerupai
sabun . Saponin adalah senyawa aktif permukaan yang kuat, yang menimbulkan
busa jika dikocok dalam air dan pada konsentrasi yang rendah saponin sering
menyebabkan hemolisis sel darah merah. Dalam larutan yang sangat encer
saponin sangat beracun untuk ikan, dan tumbuhan yang mengandung saponin
telah digunakan sebagai racun ikan selama beratus – ratus tahun. Beberapa
saponin bekerja sebagai antimikroba (Robinson, 1991: 157).

9
2.3 Tinjauan Ekstraksi
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut
sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dalam pelarut cair. Simplisia
yang diekstrak mengandung senyawa aktif yang dapat larut dan senyawa yang
tidak dapat larut seperti serat, karbohidrat, protein dan lain-lain. Senyawa aktif
yang terdapat dalam berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan
minyak atsiri, flavonoid dan lain-lain. Struktur kimia yang berbeda akan
mempengaruhi kelarutan serta stabilitas senyawa-senyawa tersebut terhadap
pemanasan, udara, cahaya, logam berat, dan derajat keasaman. Dengan
diketahuinya senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah
pamilihan pelarut dan cara ekstraksi yang tepat (DepKes RI,2000 : 1).
2.4 Metode Digesti
Digesti adalah cara maserasi dengan menggunakan pemanasan lemah, yaitu
pada suhu 40-500C. Cara maserasi ini hanya dapat dilakukan untuk simplisia yang
zat aktifnya tahan terhadap pemanasan. Dengan pemanasan akan diperoleh
keuntungan antara lain:
a. Kekentalan pelarut berkurang, yang dapat mengakibatkan berkurangnya
lapisan-lapisan batas.
b. Daya melarutkan cairan penyari akan meningkat, sehingga pemanasan
tersebut mempunyai pengaruh yang sama dengan pengadukan.

10
c. Koefisien difusi berbanding lurus dengan suhu absolut dan berbanding
terbalik dengan kekentalan, hingga kenaikan suhu akan berpengaruh pada
kecepatan difusi. Kelarutan zat aktif akan meningkat bila suhu dinaikkan
(DepKes RI, 1986 : 12-13).
2.5 Tinjauan ekstrak
Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan mengekstraksi zat aktif
dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai,
kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang
tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan
(Anonim, 1995 : 7).
Faktor yang berpengaruh pada mutu ekstrak antara lain:
1) Faktor biologi
Mutu ekstrak dipengaruhi oleh bahan asal yaitu tumbuhan obatnya dan khusus
dipandang dari segi biologi, baik untuk bahan dari segi biologi, baik untuk bahan
dari tumbuhan obat hasil budidaya (kultivar) ataupun dari tumbuhan liar (wild
crop) yang meliputi beberapa hal, yaitu:
a) Identitas jenis (species): jenis tumbuhan dari sudut keragaman hayati dapat
dikonfirmasi sampai informasi genetik sebagai faktor internal untuk validasi
jenis (species).
b) Lokasi tumbuhan asal: lokasi berarti faktor eksternal yaitu, lingkungan (tanah
dan atmosfer) dimana tumbuhan berinteraksi berupa energi (cuaca, temperatur,
cahaya) dan materi (air, senyawa organik dan anorganik).

11
c) Periode pemanenan hasil tumbuhan: faktor ini merupakan dimensi waktu dari
proses kehidupan tumbuhan terutama metabolisme sehingga menentukan
senyawa kandungan. Kapan senyawa kandungan mencapai kadar optimal dari
proses biosintesis dan sebaliknya kapan sebelum senyawa tersebut dikonversi/
dibiotransformasi/ biodegradasi menjadi senyawa lain.
d) Penyimpanan bahan tumbuhan: merupakan faktor eksternal yang dapat diatur
karena dapat berpengaruh pada stabilitas bahan serta adanya kontaminasi
(biotik dan abiotik).
e) Umur tumbuhan dan bagian yang digunakan.
Selain 5 faktor tersebut, maka untuk bahan dari tumbuhan obat hasil budidaya
(kultivar) ada lagi faktor GAP (Good Agriculture Practice) sedangkan untuk
bahan dari tumbuhan liar (wild crop) misalnya kondisi proses pengeringan yang
umumnya dilakukan di lapangan.
2) Faktor kimia
Mutu ekstrak dipengaruhi oleh bahan asal yaitu tumbuhan obatnya.
Khususnya dipandang dari segi kandungan kimianya. Faktor kimia, baik untuk
bahan dari tumbuhan obat hasil budidaya (kultivar) ataupun dari tumbuhan liar
(wild crop), meliputi beberapa hal, yaitu:
a) Faktor internal
a) Jenis senyawa aktif dalam bahan
b) Komposisi kualitatif senyawa aktif
c) Komposisi kuantitatif senyawa aktif
d) Kadar total rata-rata senyawa aktif

12
b) Faktor eksternal
a) Metode ekstraksi
b) Perbandingan ukuran alat ekstraksi (diameter dan tinggi alat)
c) Ukuran, kekerasan dan kekeringan bahan
d) Pelarut yang digunakan ekstraksi
e) Kandungan logam berat
f) Kandungan pestisida (DepKes RI, 2000 : 7-8).
2.6 Cairan Penyari
Cairan pelarut dalam proses pembuatan ekstrak adalah pelarut yang baik
(optimal) untuk senyawa kandungan yang berkhasiat atau yang aktif, dengan
demikian senyawa tersebut dapat terpisahkan dari bahan dan dari senyawa
kandungan yang diinginkan. Dalam hal ekstrak total, maka cairan pelarut dipilih
yang melarutkan hampir semua metabolisme sekunder yang terkandung (DepKes
RI, 2000 : 9).
2.7 Parameter dan Metode Uji ekstrak
2.7.1 Parameter Non Spesifik
Parameter non spesifik terdiri atas parameter yang mempunyai batasan
berbeda pada setiap ekstrak seperti susut pengeringan, kadar abu total, kadar abu
tidak larut asam cemaran logam berat dan cemaran mikroba (BPOM, 2006 : xiii).
13
2.7.1.1 Susut Pengeringan
Pengertian dan prinsip: pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada
temperatur 1050C selama 30 menit atau sampai berat konstan, yang dinyatakan
sebagai nilai prosen. Dalam hal khusus (jika bahan tidak mengandung minyak
menguap/atsiri dan sisa pelarut organik menguap) identik dengan kadar air, yaitu
kandungan air karena berada di atmosfir/lingkungan udara terbuka. Tujuan:
memberikan batasan maksimal/rentang besarnya senyawa yang hilang pada proses
pengeringan. Nilai minimal atau rentang yang diperbolehkan. Terkait dengan
kemurnian dan kontaminasi (DepKes, 2000 : 13).
2.7.1.2 Kadar abu
Pengertian dan prinsip: bahan dipanaskan pada temperatur dimana senyawa
organik dan turunanya terdestruksi dan menguap. Sehingga tinggal unsur mineral
dan anorganik. Tujuan: memberikan gambaran kandungan mineral internal dan
eksternal yang berasal dari proses awal sampai terbentuknya ekstrak. Nilai
maksimal atau rentang yang diperbolehkan. Terkait dengan kemurnian dan
kontaminasi (DepKes, 2000 : 17).
2.7.1.3 Cemaran Logam Berat
Pengertian dan prinsip menentukan kandungan logam berat secara
spektroskopi serapan atom atau lainnya yang lebih valid. Tujuan: memberikan
jaminan bahwa ekstrak tidak mengandung logam berat tertentu (Hg, Pb, Cd dll.)
melebihi nilai yang diterapkan karena berbahaya (toksik) bagi kesehatan. Nilai
maksimal atau rentang yang diperbolehkan (DepKes, 2000 :21).

14
2.7.1.4 Cemaran Mikroba
Pengertian dan prinsip: menentukan (identifikasi) adanya mikroba yang
patogen secara analisis mikrobiologis. Tujuan: memberikan jaminan bahwa
ekstrak tidak boleh mengandung mikroba patogen melebihi batas yang ditetapkan
karena berpengaruh pada stabilitas ekstrak dan berbahaya (toksik) bagi kesehatan.
Nilai maksimal atau rentang yang diperbolehkan (DepKes, 2000 : 24).
2.7.2 Parameter Spesifik
Parameter spesifik adalah parameter yang spesifik hanya dimiliki suatu
tanaman tertentu meliputi identitas, organoleptik, senyawa terlarut dalam pelarut
tertentu, uji kandungan kimia ekstrak (DepKes, 2000 : 31).
2.7.2.1 Identitas
Pengertian dan prinsip:
1. Deskripsi tata nama:
a. Nama ekstrak (generik, dagang, paten)
b. Nama latin tumbuhan (sistematika botani)
c. Bagian tumbuhan yang digunakan (rimpang, daun, dsb)
d. Nama Indonesia tumbuhan
2. Ekstrak dapat mempunyai senyawa identitas, artinya senyawa tertentu yang
menjadi petunjuk spesifik dengan metode tertentu.
Tujuan: memberikan identitas obyektif dari nama dan spesifik dari
senyawa identitas (DepKesRI, 2000: 30).

15
2.7.2.2 Organoleptik
Pengertian dan prinsip: penggunaan panca indera mendiskripsikan bentuk,
bau, rasa, warna sebagai berikut:
1. Bentuk : padat, serbuk- kering, kental, cair.
2. Warna : kuning, coklat, merah, hijau, hitam.
3. Bau : aromatik, tidak berbau, khas.
4. Rasa : pahit, manis, khelat, asam.
Tujuan: pengenalan awal yang sederhana sobyektif mungkin (DepKes RI, 2000:
31).
2.7.2.3 Senyawa terlarut pelarut tertentu
Pengertian dan prinsip: melarutkan ekstrak dengan pelarut (alkohol dan air)
untuk ditentukan sejumlah solut yang identik dengan jumlah senyawa kandungan
secara gravimetrik. Dalam hal tertentu dapat diukur senyawa terlarut dalam
pelarut lain misalnya heksana, diklormetana, metanol. Tujuan: memberikan
gambaran awal jumlah senyawa kandungan. Nilai: nilai minimal atau rentang
yang ditetapkan terlebih dahulu (DepKes RI, 2000: 31). Dalam penelitian ini
menggunakan pelarut air:kloroform dan etanol 95%.
2.7.2.4 Uji Kandungan Kimia Ekstrak
Pengertian dan prinsip: ekstrak ditimbang, diekstraksi dengan pelarut dan cara
tertentu, kemudian dilakukan analisis kromatografi sehingga memberikan pola
kromatogram yang khas. Tujuan: memberikan gambaran awal komposisi
kandungan kimia berdasarkan pola kromatogram (KLT). Nilai: kesamaan pola
dengan data baku yang ditetapkan terlebih dahulu (DepKes RI, 2000: 32).
16
2.8 Metode Analisis
2.8.1 Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Kromatografi lapis tipis ialah metode pemisahan fitokimia. Lapisan yang
memisahkan, yang terdiri atas bahan berbutir-butir (fasa diam), ditempatkan pada
penyangga berupa pelat gelas, logam, atau lapisan yang cocok. Campuran yang
akan dipisah, berupa larutan, ditotolkan berupa bercak atau pita (awal). Setelah
pelat atau lapisan ditaruh di dalam bejana tertutup rapat yang berisi larutan
pengembangan yang cocok (fasa gerak), pemisahan terjadi selama perambatan
kapiler (pengembangan). Selanjutnya, senyawa yang tidak berwarna harus
ditampakkan (dideteksi). Untuk campuran yang tidak diketahui, lapisan pemisah
(sifat penjerap) dan sistem larutan pengembangan harus dipilih dengan tepat
karena keduanya bekerja sama untuk mencapai pemisahan (Stahl, 1985 : 3).
Dengan memakai KLT, pemisahan senyawa yang amat berbeda seperti
senyawa organik alam dan senyawa organik sintetik, komplek anorganik-organik,
dan bahkan ion anorganik, dapat dilakukan dalam beberapa menit dengan alat
yang harganya tidak terlalu mahal (Harborne, 1987 : 13).
Pada semua prosedur kromatografi, kondisi optimum untuk suatu pemisahan
merupakan hasil kecocokan antara fase diam dan fase gerak. Dalam KLT, fase
diam harus mudah didapat. Keistimewaan KLT adalah lapisan tipis fase diam dan
kemampuan pemisahnya. Pada umumnya sebagai fasa diam digunakan silika gel
(Sudjadi, 1986 : 167). Fasa gerak ialah medium angkut dan terdiri atas satu atau
beberapa pelarut. Ia bergerak di dalam fasa diam, yaitu suatu lapisan berpori,
17
karena ada daya kapiler. Yang digunakan hanyalah pelarut bertingkat mutu
analitik dan, bila diperlukan, sistem pelarut multikomponen ini harus berupa suatu
campuran sesederhana mungkin yang terdiri atas maksimum tiga komponen
(Shatl, 1985 : 6). Nilai Rf dapat dituliskan dengan persamaan (Stahl, 1985 : 17).
2.8.2 Densitometri
Densitometri adalah metode analisis instrumental yang berdasarkan interaksi
radiasi elektromagnetik dengan analit yang merupakan noda pada KLT. Interaksi
radiasi elektromagnetik dengan noda pada KLT yang ditentukan adalah absorpsi,
transmisi, pantulan (refleksi) pendar fluor atau pemadaman pendar flour dari
radiasi semula. Densitometri lebih dititik beratkan untuk analisis kuantitatif analit-
analit dengan kadar yang sangat kecil yang perlu dilakukan pemisahan terlebih
dahulu dengan KLT (Mulja dan Suharman, 1995 : 231).
Untuk evaluasi bercak hasil KLT secara densitometri, bercak di-scaning
dengan sumber sinar dalam bentuk celah (slit) yang dapat dipilih baik panjang
maupun lebarnya. Sinar yang dipantulkan diukur dengan sensor cahaya
(fotosensor). Perbedaan antara signal optik daerah yang tidak mengandung bercak
dengan daerah yang mengandung dihubungkan dengan banyaknya analit yang ada
melalui kurva kalibrasi yang telah disiapkan dalam lempeng yang sama.
Pengukuran densitometri dapat dibuat dengan absorbansi atau dengan fluoresensi
(Rohman, 2007 : 54).

18
2.8.3 Spektroskopik Serapan Atom (SSA)
Prinsip dari SSA: atom-atom suatu logam diuapkan dalam suatu nyala dan
serapannya pada suatu pita radiasi sempit yang dihasilkan oleh suatu lampu
katode rongga, dilapisi dengan logam ditentukan, diukur. Penerapan dalam
analisis farmasi: penentuan residu-residu logam yang tersisa dari proses
pembuatan obat-obatan (Watson, 2005 : 169). Pada SSA terjadi penyerapan
sumber radiasi (di luar nyala) oleh atom-atom netral dalam keadaan gas yang
berada dalam nyala. Radiasi yang diserap oleh atom-atom netral dalam keadaan
gas tadi biasanya radiasi sinar tampak atau ultraviolet. Jadi seolah-olah nyala api
gas pembakar dan molekul atom-atom netral di dalamnya adalah kuvet pada
spektrofotometri UV-Vis (Mulja dan Suharman, 1995 : 107).

19
BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Obyek Penelitian
Obyek yang diteliti ekstrak etanol buah labu kuning meliputi parameter mutu
ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita moschata Duch).
3.2 Sampel dan Teknik sampling
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah buah labu kuning
(Cucurbita moschata Duch) yang diperoleh dari daerah Wonosobo, Magelang,
dan Semarang. Teknik sampling yang digunakan pada penelitian adalah teknik
sampling purposive sampling yaitu dipilih buah yang tua dan masak.
3.3 Variabel Penelitian
1. Variabel bebas yaitu pemilihan tiga tempat tumbuh untuk uji parameter yaitu
Wonosobo, Magelang dan Semarang.
2. Variabel terikat adalah hasil uji parameter non spesifik meliputi parameter
susut pengeringan, parameter kadar abu termasuk kadar abu yang tidak larut
asam, parameter cemaran logam berat, serta parameter cemaran mikroba
terdiri dari uji angka lempeng total dan angka kapang/khamir, dan parameter
spesifik meliputi parameter identitas, organoleptik ekstrak, parameter senyawa
terlarut dalam pelarut tertentu terdiri dari kadar senyawa terlarut dalam
20
air:kloroform dan kadar senyawa terlarut dalam etanol, dan parameter pola
kromatogram.
3. Variabel kontrol yaitu jumlah pelarut etanol yang digunakan, jumlah sampel.
3.4 Teknik Pengumpulan Data
Data hasil uji parameter mutu ekstrak diperoleh dari hasil pengujian parameter
spesifik dan parameter non spesifik ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita
moschata Duch), dari 3 tempat, yaitu Wonosobo, Magelang, dan Semarang.
Pengujian parameter spesifik dan parameter non spesifik masing-masing
dilakukan pengulangan 3 kali.
3.5 Alat dan Bahan yang Digunakan
3.5.1 Alat yang Digunakan
Alat untuk pembuatan ekstrak kental terdiri dari: nampan, alat – alat gelas,
blender, ayakan 30/40, oven, penangas air, cawan porselen dan batang pengaduk.
Alat untuk uji parameter non spesifik terdiri dari: muffle, oven, alat gelas, krus,
otoklaf, timbangan analitik, desikator, tabung reaksi, erlenmeyer, cawan petri,
inkubator. Alat untuk uji parameter spesifik terdiri dari: densitometer tipe camag
TLC scanner 3, Erlenmeyer bertutup, spektroskopi serapan atom CS 1.3.0,
lempeng KLT, pipa kapiler, chamber, lampu UV 366 nm, lampu UV 254 nm,
cawan porselen, oven, penangas air, desikator.

21
3.5.2 Bahan yang Digunakan
Bahan utama yang digunakan adalah buah labu kuning (Cucurbita moschata
Duch) segar. Bahan untuk pembuatan ekstrak kental adalah etanol 95 % teknis,
kain kola. Bahan untuk uji parameter non spesifik adalah H2SO4 encer teknis,
media PCA, media PDA, asam nitrat, HClO4 teknis, NaCl teknis. Bahan untuk uji
parameter spesifik adalah aquadest, kloroform p.a, etanol 95% teknis, n- heksan
p.a, etil asetat p.a, kloroform p.a, methanol p.a, antimon (lll) klorida p.a, asam
asetat p.a, asam sulfat p.a, FeCl3 p.a, amoniak p.a, aquadest, silica gel GF 254.
3.6 Prosedur Kerja
3.6.1 Identifikasi dan Determinasi Tanaman Buah Labu Kuning
Bagian tanaman yang digunakan dalam penelitian adalah tanaman buah yang
diperoleh dari daerah Wonosobo, Magelang dan Semarang. Determinasi
dilakukan terlebih dahulu untuk memperoleh kepastian bahwa tanaman yang
digunakan pada penelitian berasal dari spesies yang sama, sehingga kemungkinan
timbulnya kesalahan dalam pengumpulan bahan penelitian dapat dihindari.
Determinasi tanaman buah labu kuning dilakukan di laboratorium ekologi dan
biosistematik jurusan biologi Universitas Diponegoro Semarang.
3.6.2 Pengumpulan sampel
Buah labu kuning tua dan masak dipilih yang masih utuh atau tidak rusak,
daging buah dipisahkan dengan kulit buah dan bijinya. kemudian buah
dibersihkan dilakukan sortasi basah. Buah dicuci menggunakan air mengalir agar
22
terpisah dari pengotor dan dipotong tipis-tipis, setelah itu buah labu kuning
dikeringkan. Buah dikeringkan dengan oven dengan suhu 40-500C. Buah yang
sudah kering dilakukan proses sortasi kering, kemudian buah dilakukan
pengecilan ukuran partikel dengan menggunakan blender, diayak dengan ayakan
no 30/40.
3.6.3 Penyarian Simplisia
Serbuk buah labu kuning yang sudah diayak dibuat ekstrak dengan metode
digesti dengan pelarut etanol 95%. Sebanyak 300 g serbuk dimasukan ke dalam
bejana kemudian dituangi penyari yaitu etanol 95% 3L (1 : 10) . Dipanaskan pada
suhu 40-500C menggunakan hot plate selama 2 jam, sambil berulang-ulang
diaduk. Setelah 2 jam, ampas diperas. Endapan kemudian dipisahkan dan
diperoleh ekstrak cair. Setelah itu, ekstrak yang diperoleh dipekatkan lagi dengan
menggunakan waterbath hingga diperoleh ekstrak kental buah labu (DepKes RI,
2000 : 11).
3.6.4 Skrining Fitokimia
1) Identifikasi Flavonoid
Sari 0,5 g serbuk yang diperiksa atau sisa kering 10 ml sediaan berbentuk
cairan, dengan 10 ml metanol pekat, menggunakan alat pendingin balik selama 10
menit. Saring panas melalui kertas saring kecil berlipat. Encerkan filtrat dengan
10 ml air. Setelah dingin tambahkan serbuk Mg, kocok hati-hati, diamkan.
Ditambah HCl pekat dan amyl alcohol. Positif flavonoid jika terbentuk lapisan
amyl alcohol berwarna kuning (Harborne, 1987: 70).

23
2) Identifikasi Saponin
Di masukkan 0,5 g serbuk yang diperiksa ke dalam tabung reaksi, tambahkan
10 ml air panas, di dinginkan dan kemudian di kocok kuat-kuat selama 10 detik.
setinggi 1 cm sampai 10 cm. Hasil positif saponin ditunjukan dengan buih yang
mantap, penambahan HCI 1% buih stabil (DepKes RI, 1995 : 336).
3) Identifikasi Alkaloid
Timbang 500 mg serbuk simplisia, tambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9 ml
air, panaskan di atas penangas air selama 2 menit, dinginkan dan saring.
Pindahkan 3 tetes filtrat pada kaca alroji, tambahkan 2 tetes dragendorff. Positif
alkaloid jika terbentuk endapan jingga (DepKes RI, 1995 : 333).
4) Identifikasi Tanin
Lebih kurang 2 g serbuk yang ditimbang seksama panaskan dengan 50 ml air
mendidih di atas penangas air selama 30 menit sambil diaduk. Diamkan selama
beberapa menit disaring dengan kertas penyaring dan direaksikan dengan FeCl3.
Positif tanin jika terbentuk warna biru atau hijau kehitaman (DepKeS RI, 1995 :
326).
5) Identifikasi Steroid Dan Triterpenoid
Sebanyak 1 g serbuk dimaserasi dengan 20 ml n- heksana selama 2 jam.Filtrat
diuapkan dalam cawan porselin. Pada sisa ditambahkan 2 tetes asam asetat
anhidrat dan 1 tetes asam sulfat pekat.Timbul warna ungu atau merah kemudian
berubah menjadi biru hijau menunjukkan adanya steroida/ triterpenoida. Positif
steroid jika terbentuk warna hijau kebiruan dan triterpenoid terbentuk warna
kecoklatan (Harborne, 1987: 152).

24
3.6.5 Identifikasi Kromatografi Lapis Tipis
a) Alkaloid
Ekstrak etanol buah labu kuning ditotolkan pada fase diam silika gel GF 254
yang telah diberi batas elusi, dimasukkan kedalam chamber berisi fase gerak etil
asetat:methanol:air: (100:13,5:10) yang telah jenuh. Elusi dihentikan saat
mencapai batas elusi. Diamati noda pada UV 254 nm / 366 nm. Untuk bercak
sinar biasa berpendar biru atau jingga. Penampak bercak yang digunakan
dragendorff.
b) Flavonoid
yang telah diberi batas elusi, dimasukkan kedalam chamber berisi fase gerak
kloroform:etilasetat 60:40) yang telah jenuh. Elusi dihentikan saat mencapai batas
elusi. Diamati noda pada UV 254 nm / 366 nm. Untuk bercak sinar biasa
berpendar kuning intensif, hijau, dan jingga. Penampak bercak yang digunakkan
adalah uap ammonia.
c) Tannin
yang telah diberi batas elusi, dimasukkan kedalam chamber berisi fase gerak etil
asetat:methanol:air: (77:15:8) yang telah jenuh. Elusi dihentikan saat mencapai
batas elusi. Diamati noda pada UV 254 nm / 366 nm. Untuk bercak sinar biasa
berpendar biru kehitaman. Penampak bercak yang digunakkan adalah uap FeCl 3
10%.
25
d) Saponin
yang telah diberi batas elusi. Dimasukkan kedalam chamber berisi fase gerak
kloroform : metanol : air (64:50:10) yang telah jenuh. Elusi dihentikan saat
mencapai batas elusi. Diamati noda pada UV 254 nm / 366 nm. Untuk bercak
sinar biasa berpendar biru, kuning, coklat. Penampak bercak yang digunakkan
adalah anisaldehida asam sulfat LP.
e) Terpenoid/steroid
yang telah diberi batas elusi. Dimasukkan kedalam chamber berisi fase gerak n-
heksan:etil asetat (7:3) yang telah jenuh. Elusi dihentikan saat mencapai batas
elusi. Diamati noda pada UV 254 nm / 366 nm. Untuk bercak sinar biasa
berpendar hijau. Penampak bercak yang digunakkan adalah antimony (lll)
klorida:asam asetat:kloroform (20:20:60). (Stahl, 1969; Hendrajaya dan Kesuma,
2003).
3.6.6 Uji Parameter Non Spesifik
1) Parameter Susut Pengeringan
Ekstrak ditimbang secara saksama sebanyak 1 g dan dimasukkan ke dalam
botol timbang dangkal bertutup yang sebelumnya telah dipanaskan pada suhu
105oC selama 30 menit dan telah ditara. Sebelum ditimbang, ekstrak diratakan
dalam botol timbang, dengan menggoyangkan botol, hingga merupakan lapisan
setebal lebih kurang 5 mm sampai 10 mm. Jika ekstrak yang diuji berupa ekstrak
kental, ratakan dengan bantuan batang pengaduk. Kemudian dimasukkan ke
dalam ruang pengering, buka tutupnya, keringkan pada suhu 105oC hingga bobot
26
tetap. Sebelum setiap pengeringan, biarkan botol dalam keadaan tertutup
mendingin dalam eksikator hingga suhu kamar. Jika ekstrak sulit kering dan
mencair pada pemanasan, ditambahkan 1 g silika pengering yang telah ditimbang
saksama setelah dikeringkan dan disimpan dalam eksikator pada suhu kamar.
Campurkan silika tersebut secara rata dengan ekstrak pada saat panas, kemudian
keringkan kembali pada suhu penetapan hingga bobot tetap (DepKes RI, 2000:
13).
2) Parameter Kadar Abu
a) Penetapan Kadar Abu
Sejumlah 1 g ekstrak yang telah digerus dan ditimbang saksama, dimasukkan
ke dalam krus silikat yang telah dipijarkan dan ditara, kemudian dipijarkan
perlahan-lahan hingga arang habis, didinginkan, ditimbang. Jika dengan cara ini
arang tidak dapat dihilangkan, tambahkan air panas, diaduk, disaring melalui
kertas saring bebas abu. Kertas saring beserta sisa penyaringan dipijarkan dalam
krus yang sama. Filtrat dimasukan ke dalam krus, diuapkan dan dipijarkan hingga
bobot tetap. Kadar abu total dihitung terhadap berat ekstrak, dinyatakan dalam %
b/b (BPOM, 2006 : 198).
b) Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam
Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu total dididihkan dengan 25 ml
asam klorida encer P selama 5 menit. Bagaimana yang tidak larut dalam asam
dikumpulkan, disaring melalui krus kaca masir atau kertas saring bebas abu,
dicuci dengan air panas, dipijarkan hingga bobot tetap. Kadar abu yang tidak larut
asam dihitung terhadap bobot ekstrak, dinyatakan dalam % b/b (BPOM, 2006 :
198).
27
3) Parameter Cemaran Logam
a) Pembuatan Larutan 100 µg / ml.
Dipipet 10,0 ml larutan induk, logam 1000µg/ ml ke dalam labu ukur 100,0
ml. Ditambahkan larutan asam nitrat, HNO3 1 N sampai tepat tanda tera.
b) Pembuatan Larutan Baku 10 µg/ml
Dipipet 10,0 ml larutan baku, logam 100µg/ml ke dalam labu ukur 100 ml.
Ditambahkan larutan asam nitrat, HNO3 1 N sampai tepat tanda tera.
c) Pembuatan Larutan Kerja dengan Konsentrasi 0,0µg/ml; 0,2µg/ml; 0,4µg/ml;
0,6µg/ml; 0,8µg/ml; 1,0µg/ml.
Dipipet 0,0 ml; 1,0 ml; 2,0 ml; 3,0 ml; 4,0 ml; 5,0 ml larutan baku timbal, Pb
10 µg/ml ke dalam enam labu ukur 50,0 ml ditambahkan sampai tanda
batas.Ditambahkan asam nitrat, HNO3 1 N ke dalam masing- masing labu ukur
sampai tepat tanda tera.
d) Penentuan Kadar, Secara Dekstruksi Asam
Disiapkan erlenmayer volume 250 ml. Ditimbang sampel yang sudah
dihomogenkan sebanyak ±3,00g, masukkan ke dalam erlenmayer. Ditambahkan
25 ml air suling, aduk dengan menggunakan batang pengaduk. Ditambahkan 5 ml
sampai 10 ml asam nitrat, HNO3 pekat aduk hingga bercampur rata. Ditambahkan
3 butir sampai dengan 5 butir batu didih, tutup dengan kaca arloji. Diletakkan
erlenmayer tersebut diatas penangas listrik, atur suhunya pada 105oC sampai
dengan 120oC. Dipanaskan hingga volume sampel tinggal ±10 ml. Diangkat dan
dinginkan. Ditambahkan 5 ml asam nitrat, HNO3 pekat dan 1 ml sampai dengan 3
ml asam perklorat HClO4 pekat tetes demi tetes melalui dinding kaca erlenmayer.
28
Dipanaskan kembali pada penangas listrik sampai timbul asap putih, dan larutan
sampel menjadi jernih. Setelah timbul asap putih, pemanasan dilanjutkan hingga ±
30 menit. Jika larutan sampel belum jernih ulangi pengadukan dengan 9 butir
sampai dengan 11 butir batu didih. Didinginkan larutan sampel. Saring dengan
kertas saring kuantitatif dengan ukuran pori 8,0 µm. Tempatkan filtrat larutan
sampel pada labu ukur 100 ml dan tambahkan air suling sampai tanda tera. Filtrat
larutan sampel siap diukur ke dalam spektroskopi serapan atom (BSN, 2004).
3) Parameter Cemaran Mikroba
a) Uji Angka Lempeng Total
Disiapkan 5 buah tabung atau lebih yang masing–masing telah diisi dengan 9
ml pengencer NaCl 0,9%. Ekstrak ditimbang sebanyak 1 g dan dilarutkan dengan
9 ml NaCl 0,9%, dihomogenkan (pengenceran 10-1). Dipipet pengenceran 10-1
sebanyak 1 ml ke dalam tabung yang berisi pengencer NaCl 0,9% hingga
diperoleh pengenceran 10-2 dan dikocok hingga homogen. Dibuat pengenceran
selanjutnya hingga 10-6 atau sesuai yang diperlukan. Dari setiap pengenceran
dipipet 0,1 ml ke dalam cawan petri dan dibuat duplo. Ke dalam tiap cawan petri
dituangkan 15-20 ml media PCA (45oC). Jika suhu terlalu tinggi ditakutkan akan
membentuk butiran air dalam cawan yang dapat mengakibatkan pertumbuhan
mikroba lain. Segera cawan petri digoyangkan dan diputar sedemikian rupa
sehingga suspensi tersebar merata. Untuk mengetahui sterilitas media dan
pengencer dibuat uji kontrol. Setelah media memadat, cawan petri diinkubasi pada
suhu 35- 37oC selama 24- 48 jam dengan posisi terbalik. Jumlah koloni yang
tumbuh diamati dan dihitung (DepKesRI,2000: 28).

29
b) Uji Angka Kapang Dan Khamir
Disiapkan 3 buah tabung yang masing-masing telah diisi 9 ml NaCI 0,9% .
Dari hasil homogenitas pada pnyiapan contoh dipipet 1 ml pengenceran 10-1 ke
dalam tabung NaCl 0.9% pertama sehingga diperoleh pengenceran 10-2, dan
dikocok sampai homogen. Dibuat pengenceran selanjutnya hingga 10-4. Dari
masing-masing pengenceran dipipet 0,5 ml, dituangkan pada permukaan PDA.
Segera digoyang sambil diputar agar suspensi tersebar merata dan dibuat duplo.
Untuk mengetahui sterilitas media dan pencemaran, dilakukan uji kontrol. Ke
dalam satu cawan petri dituangkan media dan dibiarkan memadat. Kedalam
cawan petri lainnya dituangkan media dan dibiarkan memadat. Seluruh cawan
petri diinkubasi pada suhu 20-250C selama 5-7 hari. Sesudah 5 hari inkubasi,
dicatat jumlah koloni jamur yang tumbuh, pengamatan terakhir pada inkubasi 7
hari. Koloni dibedakan karena bentuknya bulat kecil-kecil putih hampir
menyerupai bakteri. Lempeng agar yang diamati adalah lempeng dimana terdapat
40-60 koloni kapang/khamir (DepKes RI, 2000 : 28).
3.6.7 Uji Parameter Spesifik
1) Parameter Organoleptik Ekstrak
Penetapan bentuk organoleptik ekstrak meliputi bentuk, bau, rasa, dan warna.
2) Parameter Senyawa Terlarut Dalam Pelarut Tertentu
a) Kadar Senyawa Terlarut Dalam Air
Maserasi sejumlah 2,5 g ekstrak selama 24 jam dengan 50 ml air:kloroform
(1000:2,5) meggunakan labu bersumbat sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam
pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam. Saring, uapkan 20 ml filtrat

30
hingga kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara, panaskan
residu pada suhu 105oC hingga bobot tetap. Hitung kadar dalam persen senyawa
yang larut dalam air, dihitung terhadap ekstrak awal (DepKes RI, 2000: 31).
b) Kadar Senyawa Terlarut Dalam Etanol
Maserasi sejumlah 2,5 g ekstrak selama 24 jam dengan 50 ml etanol (95%)
meggunakan labu bersumbat sambil berkali- kali dikocok selama 6 jam pertama
dan kemudian dibiarkan selama 18 jam. Saring, uapkan 20 ml filtrat air hingga
kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara, panaskan residu pada
suhu 105oC hingga bobot tetap. Hitung kadar dalam persen senyawa yang larut
dalam etanol (95%), dihitung terhadap ekstrak awal (DepKes RI, 2000: 31- 32).
1) Parameter uji kromatografi
Kromatografi Densitometri
Ekstrak dilarutkan dengan etanol dibuat konsentrasi 20%, volume cuplikan
yang digunakan 5µl. Ditotolkan pada fase diam silica gel GF 254 dengan jarak
pengembangan 8 cm.
a) Uji Saponin
yang telah diberi batas elusi. Dimasukkan kedalam chamber berisi fase gerak
kloroform : metanol : air (64:50:10) yang telah jenuh. Elusi dihentikan saat
mencapai batas elusi. Diamati noda pada UV 254 nm / 366 nm. Dilakukan
pengukuran idensitas noda untuk mendapat pola kromatogram dengan
menggunakan densitometri (Stahl, 1969; Hendrajaya dan Kesuma, 2003).

31
3.7 Skema Kerja

Pengambilan simplisia dari 3 daerah: Wonosoo, Magelang dan Semarang.
- Disortasi basah.
- Pencucian dirajang dan dikeringkan.
- Disortasi kering.
- Pengukuran ukuran partikel.
- Serbuk diayak dengan ayakan 30/40.
Serbuk buah labu kuning ditimbang 300 g dari ketiga daerah.

- digesti dengan etanol 95% masing-
masing 3000 ml hot plate suhu 40-500C
selama 2 jam.
- Disaring.
Residu. Ekstrak cair.

- dipanaskan di atas water bath suhu 800C.
Ekstrak kental buah labu kuning.
Skrining fitokimia Uji parameter ekstrak buah labu kuning
Identifikasi alkaloid, Parameter Non Spesifik : Parameter Spesifik :

flavonoid, tanin, saponin, - Susut pengeringan - Organoleptik
steroid/triterpenoid - Kadar abu total - Senyawa terlarut dalam
- Kadar abu tidak larut asam pelarut tertentu
- Cemaran mikroba - Pola kromatogram
- Cemaran logam berat
Dilakukan uji KLT
alkaloid, flavonoid, tanin,
saponin, steroid/triterpenoid
Gambar 3. Skema kerja uji parameter ekstrak etanol buah labu kuning.
32
cawan dan kertas saring

Krus kosong ditimbang whatman ditimbang
Dipanaskan pada oven suhu

150oC selama 30 menit.
Dimasukkan dalam desikator

pada suhu kamar.
Ditimbang hingga bobot

konstan.
Krus konstan. Cawan dan kertas saring

whatman konstan.
Gambar 4. Skema pengonstanan krus dan cawan.

33
Ekstrak kental etanol buah labu kuning ditimbang 1 g.
Dimasukkan dalam krus konstan.
Dipanaskan pada oven suhu 105oC selama 30 menit.
Dimasukkan dalam desikator pada suhu kamar.
Ditimbang hingga bobot konstan.
Dilakukan kerja uji sebanyak 3x.
Gambar 5. Uji penetapan susut pengeringan dan kadar air ekstrak etanol
kental buah labu kuning
Ekstrak kental etanol buah labu kuning ditimbang 1 g.
Dimasukkan dalam krus konstan.
Dipanaskan pada oven suhu 600oC selama 30 menit.
Dimasukkan dalam desikator pada suhu kamar
Dilakukan kerja uji sebanyak 3x.
Gambar 6. Uji penetapan kadar abu total asam ekstrak etanol buah labu
kuning
34
Abu dari pengeringan

kadar abu , ditambah Disaring dengan
dengan 25 ml asam sulfat kertas saring whatman
encer. yang sudah konstan.
Abu yang tertinggal

dipanaskan dalam oven
suhu 105 oC selama 30
menit.
Dimasukkan dalam
desikator pada suhu
kamar.
Ditimbang hingga
bobot konstan.
Dibuat replikasi
sebanyak 3x.
Gambar 7. Uji penetapan kadar abu tidak larut asam ekstrak etanol kental
buah labu kuning
35
Ekstrak etanol Ekstrak etanol

labu kuning labu kuning
ditimbang 2,5 g. ditimbang 2,5 g.
Dengan pelarut Dengan pelarut
air:kloroform (50 ml) etanol 95% (50 ml)
diekstrasi 24 jam. dieksraksi 24 jam.
Disaring, diuapkan
20 ml filtrat.
- Filtrat dipanaskan dalam oven suhu

1050C selama 30 menit.
Dimasukkan dalam desikator pada suhu kamar.
Dibuat replikasi sebanyak 3x.
Gambar 8. Uji penetapan senyawa terlarut dalam pelarut tertentu ekstrak

etanol kental buah labu kuning
36
NaCl 0,9% 9 ml
Ditambahkan 1 g esktrak
etanol buah labu kuning
Pengenceran10-1
Dipipet 1,0 ml
Dimasukkan ketabung
berisi 9 ml NaCl 0,9%
Pengenceran 10-2
Dipipet 1,0 ml
Dimasukkan ketabung
Dimasukkan kedalam cawan
Pengenceran 10-3 dipipet 0,1 ml petri yang telah ditambah
media PCA 20 ml.
Dipipet 1,0 ml
Dimasukkan ketabung Diinkubasi pada suhu

35- 37oC 24- 48 jam
Pengenceran 10-4
Diamati dan dihitung
Dipipet 1,0 ml jumlah koloni yang tumbuh
Dimasukkan ketabung
Pengenceran 10-5
Dipipet 1,0 ml
Dimasukkan ketabung
Pengenceran 10-6
Gambar 9. Uji cemaran mikroba Angka Lempeng Total ekstrak Etanol

buah labu kuning
37
NaCl 0,9% 9 ml.
Ditambahkan 1 g esktrak etanol

buah labu kuning
Pengenceran 10-1
Dipipet 1,0 ml
Dimasukkan ke tabung
Pengenceran 10-2 Dipipet 0,1 ml Dimasukkan kedalam cawan

petri yang telah ditambah
media PDA 20 ml.
Dipipet 1,0 ml
Dimasukkan ke tabung Diinkubasi pada suhu 20-25oC

berisi 9 ml NaCl 0,9% 5-7 hari
Pengenceran 10-3
Diamati dan dihitung jumlah
Dipipet 1,0 ml koloni yang tumbuh
Dimasukkan ke tabung
Pengenceran 10-4
Gambar 10. Uji cemaran mikroba Angka Kapang dan Khamir ekstrak
etanol buah labu kuning
38
Ekstrak etanol buah labu kuning dibuat

konsentrasi 20% dalam etanol.
Ditotolkan sebanyak 5,0µl pada lempeng

KLT silika gel GF 254
Dimasukkan kedalam bejana elusi, yang

berisi dengan eluen yang telah
dijenuhkan.
System KLT untuk System KLT untuk

flavonoid saponin
Kloroform : etil asetat Kloroform : metanol : air
(60:40) ( 64 50: 10 )
Elusi dilakukan dengan jarak pengembangan 8 cm
Dilihat dibawah lampu UV 254 nm dan 366 nm

serta diamati dengan pereaksi warna / penampak
bercak
Gambar 11. Uji kromatografi lapis tipis

39
Ekstrak etanol buah labu kuning hingga

konsentrasi 20% dalam etanol.
Ditotolkan sebanyak 5,0µl pada lempeng

KLT silika gel GF 254
Dimasukkan kedalam chamber, yang

berisi dengan eluen yang telah
dijenuhkan.
System KLT untuk

saponin
Kloroform : metanol : air
( 64 50: 10 )
Elusi dilakukan dengan jarak pengembangan 8 cm
Dilakukan pengamatan dengan menggunkan

KLT Densitometri
Gambar 12. Uji KLT Densitometri

40
BAB IV
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Tanaman Labu kuning (Cucurbita moschata Duch) berasal dari keluarga
Cucurbitaceae. Pada penelitian ini bagian tanaman yang digunakan adalah
buahnya, dipanen pada saat buah tua dan masak. Tanaman diambil dari tempat
budidaya, karena tanaman lebih terawat, baik pemupukan sehingga unsur hara
tercukupi, dan penyiraman yang mempengaruhi kualitas tanaman itu sendiri.
Penelitian ini bertujuan untuk sumber informasi parameter mutu ekstrak etanol
buah labu kuning, dengan uji nilai parameter spesifik dan non spesifik
berdasarkan perbedaan lokasi dan tempat tumbuh tanaman. Tanaman buah labu
kuning ini diambil dari 3 daerah yang berbeda yaitu Wonosobo (1300 mdpl),
Magelang (1100 mdpl), Semarang (486 mdpl).
Tanaman di determinasi dengan tujuan untuk memperoleh kepastian bahwa
tanaman buah labu kuning yang digunakan pada penelitian berasal dari tanaman
familia Cucurbitaceae dan species Cucurbita moschata Duch. Determinasi
dilakukan di laboratorium ekologi dan biosistematik jurusan biologi Universitas
Diponegoro Semarang. Hasil determinasi tanaman buah labu kuning terlampir di
lampiran 2.
Setelah pemanenan buah labu kuning dipisahkan daging buah labu kuning
dari kulit dan biji buah, buah yang dihasilkan dicuci dengan air yang mengalir
untuk memisahkan buah dari pengotor debu yang masih menempel pada buah
sehingga ikut terbawa oleh air. Selanjutnya dilakukan perajangan untuk
mempercepat proses pengeringan. Proses pengeringan pada penelitian ini
dilakukan dengan menggunakan oven dengan suhu 40-500C selama 4 hari.

41
pengeringan dilakukan dengan tujuan mengurangi kadar air yang terkandung di
dalam buah labu kuning sehingga tidak mudah ditumbuhi bakteri maupun jamur
yang dapat menurunkan mutu dari ekstrak etanol buah labu kuning. Pengeringan
dilakukan hingga simplisia benar-benar kering. Pengeringan dilakukan hingga
simplisia benar – benar kering dan mencapai kadar air simplisia yang sesuai
dengan persyaratan (<10%). Simplisia yang telah kering selanjutnya dilakukan
sortasi kering yang bertujuan untuk memisahan bagian simplisia yang rusak oleh
karena ditumbuhi jamur, buah busuk, yang dapat menurunkan kualitas simplisia.
Buah labu kuning yang telah disortasi selanjutnya dilakukan pengecilan ukuran
partikel dengan menggunakan dry mile agar menghasilkan derajat kehalusan
sesuai yang diinginkan, kemudian serbuk diayak dengan ayakan no. 30/40, yaitu
serbuk dapat melewati ayakan no. 30 tetapi tidak dapat melewati ayakan no. 40
hal ini bertujuan agar mendapatkan serbuk yang seragam. Semakin kecil ukuran
partikel serbuk simplisia, maka semakin besar luas permukaannya sehingga
kontak dengan penyari akan semakin maksimal. Serbuk dengan derajat kehalusan
rendah dapat menyababkan kerusakan zat aktif akibat dinding sel yang pecah,
sedangkan serbuk yang terlalu kasar akan berpengaruh pada penghambatan proses
penetrasi cairan penyari dalam menembus rongga sel yang mengandung senyawa
aktif.
Proses ekstraksi buah labu kuning dilakukan dengan metode digesti. Digesti
merupakan maserasi kinetik (dengan pengadukan kontinyu) dengan menggunakan
pemanasan lemah, yaitu pada suhu 40-500C. Cairan penyari yang digunakan
adalah etanol 95%. Digunakan digesti karena waktu pengerjaan yang lebih cepat,
42
alat yang digunakan sederhana, daya melarutkan cairan tinggi karena adanya
pemanasan dan prosesnya mudah.
Hasil penyarian yang diperoleh kemudian ditampung menjadi satu kemudian
dipekatkan dengan penguapan menggunakan waterbath dengan suhu 800C.
Penguapan ini bertujuan untuk mendapatkan ekstrak kental untuk menjaga
konsistensi ekstrak dan waktu penyimpanannya lebih lama. Rendemen ekstrak
etanol buah labu kuning yang didapat dari hasil digesti disajikan pada tabel 1.
Tabel 1. Ekstrak hasil digesti buah labu kuning (Cucurbita moschata)
Daerah Pengambilan Rendemen (gram) Presentasi (%)

Sampel
Wonosobo 111,2044 36,80%
Magelang 90,9757 30,35%
Semarang 75,8972 25,19%
Hasil rendemen dari digesti ekstrak buah labu kuning yang diperoleh
rendemen yang paling besar dari daerah Wonosobo 36,80% dengan ketinggian
1300 mdpl dibandingkan hasil digesti dari daerah Magelang 30,35% dengan
ketinggian 1100 mdpl dan dari daerah Semarang 25,19% dengan ketinggian 486
mdpl. Perbedaan hasil rendemen ini dikarenakan perbedaan tempat dan kondisi
tumbuh yang berbeda. Wonosobo dengan keadaan tempat tumbuh 1300 mdpl
dengan kondisi curah hujan yang tinggi sehingga mengakibatkan tanah banyak
mengandung air dibandingkan dengan senyawa lain. Jauh berbeda dengan
ketinggian magelang 1100 mdpl dan semarang 486 mdpl. Hal lain yang dapat
43
mempengaruhi rendemen ialah proses perawatan tanaman yang berbeda misalnya
penggunaan pupuk yang berbeda, waktu penyiraman berbeda.
Setelah didapatkan ekstrak kental buah labu kuning dilakukan uji parameter
mutu dan kandungan kimia ekstrak. Persyaratan mutu ekstrak meliputi parameter
standar non spesifik dan parameter spesifik. Uji parameter ini dimaksudkan agar
dapat menjamin bahwa ekstrak mempunyai nilai parameter tertentu yang konstan
(ajeg) (Depkes RI, 2000).
Pemeriksaan organoleptik dengan tujuan memberikan pengenalan awal
ekstrak. Pemeriksaan organoleptis dengan menggunaan panca indera
mendiskripsikan bentuk, bau, rasa dan warna. Hasil organoleptik serbuk dan
ekstrak buah labu kuning disajikan pada tabel 2 dan tabel 3.
Tabel 2. Parameter organoleptik serbuk buah labu kuning (Cucurbita

moschata)
Parameter Daerah pengambilan sampel

Organoleptik Wonosobo Magelang Semarang
Bentuk Serbuk kasar Serbuk kasar Serbuk kasar
Bau Khas khas khas
Rasa pahit pahit pahit
Warna Oranye kekuningan Oranye kekuningan Oranye kekuningan
Hasil organoleptis dari ketiga daerah yang berbeda didapatkan hasil yang
sama : serbuk berkonsistensi serbuk kasar, bau khas, rasa pahit, dan warna oranye
kekuningan.
44
Table 3. Parameter organoleptik ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita

moschata)

Organoleptik Wonosobo Magelang Semarang
Bentuk Kental kental kental
Bau Khas Khas Khas
Rasa Pahit Pahit Pahit
Warna Kuning kecoklatan Kuning kecoklatan Kuning kecoklatan
Ekstrak berkonsistensi kental, bau khas, rasa pahit, dan warna kuning
kecoklatan. Penentuan organoleptik ini termasuk salah satu parameter spesifik
yang ditentukan menggunakan panca indera.
Pemeriksaan kandungan senyawa aktif pada buah labu kuning dilakukan
dengan skrining fitokimia. Skrining fitokimia dilakukan pada serbuk dan ekstrak
buah labu kuning, yang bertujuan adakah senyawa yang hilang setelah ekstraksi.
Hasil skrining serbuk dan ekstrak etanol buah labu kuning fitokimia disajikan
pada tabel 4 dan table 5.
Tabel 4. Hasil skrining fitokimia serbuk labu kuning (Cucurbita moschata)
No Golongan Daerah pengambilan sampel

senyawa kimia Wonosobo Magelang Semarang
1 Alkaloid negatif negatif negatif
2 Flavonoid positif positif positif
3 Tanin negatif negatif negatif
4 Saponin positif positif positif
5 Steroid negatif negatif negatif
dan triterpenoid
45
Table 5. Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol labu kuning (Cucurbita

moschata)
No Golongan Daerah pengambilan sampel

senyawa kimia Wonosobo Magelang Semarang
1 Alkaloid negatif negatif negatif
2 Flavonoid positif positif positif
3 Tanin negatif negatif negatif
4 Saponin positif positif positif
5 Steroid negatif negatif negatif
dan triterpenoid
Hasil skrining fitokimia didapatkan hasil yang sama antara serbuk dan
ekstrak etanol buah labu kuning. Uji kualitatif alkaloid dengan dragendorff
memberikan hasil negatif . Serbuk dan ekstrak tidak mengandung alkaloid karena
pada pengujian terbentuk larutan oranye. Uji kualitatif golongan flavonoid serbuk
dan ekstrak buah labu kuning keduanya menunjukkan hasil positif dengan adanya
lapisan amil alkohol berwarna kuning jingga reduksi dengan Mg dan HCI pekat
menghasilkan senyawa kompleks yang berwarna jingga. Uji kulitatif senyawa
tanin serbuk dan ekstrak buah labu kuning menunjukkan hasil negatif larutan
jernih kuning kecoklatan dengan FeCl3 1%. Uji kualitatif senyawa saponin serbuk
dan ekstrak labu kuning menunjukkan hasil positif mengandung saponin, dengan
menambahkan aquadest panas kemudian dikocok kuat. Perlakuan tersebut
dilakukan karena saponin larut dalam air. Hasil positif ditunjukan dengan adanya
buih yang mantap, penambahan satu tetes HCl 1% bertujuan agar menstabilkan
buih agar tidak hilang. Uji kualitatif senyawa steroid/triterpenoid menunjukkan
hasil negatif pada serbuk dan ekstrak buah labu kuning, dengan menghasilkan
warna ekstrak merah kehitaman dan serbuk kuning kehitaman.

46
Tabel 6. Hasil parameter senyawa larut dalam pelarut tertentu ekstrak

etanol labu kuning (Cucurbita moschata)
Daerah Pengambilan Etanol (95%) Aquadest:kloroform

Sampel (1000:2,5)
Wonosobo 32,31%±0,36 32,27%±1,28
Magelang 31,12%±0,33 29,03%±0,59
Semarang 32,21%±0,67 29,59%±0,56
Parameter penetapan senyawa terlarut dalam pelarut tertentu termasuk
dalam uji parameter spesifik, dengan tujuan memberikan gambaran awal jumlah
kandungan zat aktif (Depkes RI, 2000). Pelarut yang digunakan etanol dan air:
kloroform. Air berfungsi untuk melarutkan senyawa polar, air yang digunakan
adalah aquadest. Hasil penetapan senyawa terlarut dalam pelarut tertentu dapat
dilihat pada tabel 6. Data menunjukkan rata-rata kadar senyawa larut dalam
pelarut air:kloroform lebih kecil 30,30%±1,73 dibandingkan kadar rata-rata
senyawa larut dalam etanol 32,27%±1,28. Nilai kadar senyawa terlarut dalam
pelarut tertentu menunjukkan jumlah senyawa kandungan dalam ekstrak etanol
buah labu kuning (Cucurbita moschata) lebih banyak terekstraksi dalam pelarut
etanol dibandingkan dengan air:kloroform.
Selanjutnya dilakukan uji parameter non spesifik diantaranya adalah
parameter susut pengeringan, kadar abu, cemaran mikroba, cemaran logam berat.
Susut pengeringan dengan menggunakan metode gravimetrik mempunyai prinsip
pengukuran sisa zat setelah pengeringan pada temperature 1050C selama 30 menit
sampai berat konstan (Depkes RI, 2000).

47
Tabel 7. Hasil Uji Parameter Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning (Cucurbita
moschata)
Parameter Standard Daerah pengambilan sampel
Wonosobo Magelang Semarang
Susut - 14,87%±0,45 14,32%±1,27 8,58%±1,34

pengeringan
Kadar abu total - 26,53%±0,31 24,07%±0,63 11,47%±0,42
Kadar abu tidak - 10,80%±0,37 12,31%±0,13 5,65%±0,16

larut asam
Total cemaran < 106 koloni/g 8 x 101 4 x 101 2,5 x 101

bakteri koloni/gram koloni/gram koloni/gram
Total cemaran < 104 koloni/g 3 x 101 2 x 101 0,5 x 101

kapang khamir koloni/gram koloni/gram koloni/gram
Uji cemaran < 10 mg/kg Tidak Tidak Tidak

logam berat terdeteksi terdeteksi terdeteksi
Hasil pemeriksaan susut pengeringan ditunjukkan pada tabel 7, dengan hasil
susut pengeringan ekstrak buah labu kuning adalah 14,87%±0,45 dari daerah
Wonosobo, 14,32%±1,27 dari daerah Magelang, 8,58%±1,34 dari daerah
Semarang. Berdasarkan tujuannya yakni memberikan batasan maksimal tentang
besarnya senyawa yang hilang pada proses pengeringan dapat diketahui bahwa
semakin rendah prosentase maka semakin sedikit senyawa yang hilang. Dari hasil
susut pengeringan yang paling baik ialah ekstrak labu kuning dari Semarang.
Berbedaan kadar susut pengeringan dipengaruhi oleh tempat tumbuh yang
berbeda. Wonosobo dengan curah hujan yang tinggi, tanaman mengandung kadar
air yang tinggi dibandingkan dengan daerah Magelang dan Semarang.

48
Parameter kadar abu bertujuan untuk memberikan gambaran kandungan
mineral internal dan eksternal yang berasal dari proses awal sampai akhir. Pada
prinsipnya bahan dipanaskan pada suhu dekstruksi senyawa organik. Sehingga
tinggal unsur mineral dan anorganik (Depkes RI, 2000). Berdasarkan kadar abu
total mengidentifikasikan bahwa adanya kandungan mineral yang terdapat dalam
ekstrak hasil digesti. Sedangkan untuk kadar abu tidak larut asam menunjukan
adanya pasir atau kotoran lain dalam kadar rendah serta mineral yang berbahaya
seperti logam Pb. Hasil kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam dapat
dilihat pada tabel 6. Kadar abu total ekstrak buah labu kuning kadar abu total dari
daerah Wonosobo 26,53%±0,31 dan kadar abu tidak larut asam 10,80%±0,37,
kadar abu total dari daerah Magelang 12,31%±0,13 dan kadar abu tidak larut asam
12,31%±0,13, Semarang 11,47%±0,42 dan kadar abu tidak larut asam
5,65%±0,16. Nilai kadar abu total tertinggi adalah Wonosobo menggambarkan
adanya kandungan mineral yang terdapat dalam ekstrak tinggi, dibandingkan dari
Magelang dan Semarang. Sedangkan nilai kadar abu tidak larut asam tertinggi
adalah Magelang menggambarkan adanya pasir atau kotoran lain dalam kadar
rendah serta mineral yang berbahaya seperti logam Pb, hal ini dikarenakan tempat
pengambilan buah labu kuning di Magelang berdekatan dengan daerah
pemukiman dimungkinkan adanya cemaran pasir atau kotoran lain lebih banyak
dibandingkan dari daerah Wonosobo dan Semarang yang tempat tumbuh
tanamannya jauh dari pemukiman warga.

49
Penetapan cemaran mikroba termasuk parameter non spesifik, tujuan dari
parameter ini adalah memberikan jaminan bahwa ekstrak tidak mengandung
mikroba patogen melebihi batas yang ditetapkan karena berpengauh pada
stabilitas ekstrak dan berbahaya bagi kesehatan. Misalnya bakteri Staphylococcus
aureus nilai maksimal atau rentang yang diperbolehkan (DepKes, 2000). Uji
cemaran mikroba meliputi, uji angka lempeng total untuk cemaran bakteri dan uji
angka kapang khamir. Penentuan cemaran mikroba menggunakan metode
perhitungan cawan, prinsip perhitungan cawan adalah bila sel mikroba tersebut
akan berkembang biak dan membentuk koloni yang dapat dilihat langsung tanpa
menggunakan mikroskop (Waluyo, 2004). Uji cemaran bakteri menggunakan
media PCA dan bakteri yang dipakai Staphylococcus aureus, media PDA untuk
uji kapang khamir menggunakan jamur Candida albicans sebagai control positif
karena bakteri dan jamur ini dapat digunakan sebagai galur mikroba pembanding
sesuai dengan BPOM. Angka lempeng total yang didapat dari ekstrak etanol buah
labu kuning Wonosobo 8 x 101 koloni/gram, Magelang 4 x 101 koloni/gram dan
Semarang sebesar 2,5 x 101 koloni/gram, Angka kapang khamir yang didapat dari
ektrak etanol buah labu kuning Wonosobo 3 x 101 koloni/gram, Magelang 2 x 101
koloni/gram, Semarang adalah 0,5 x 101 koloni/gram. Hasil ketiga daerah untuk
cemaran angka lempeng total dan angka kapang khamir tidak melebihi batas
maksimal persyaratan. Berdasarkan keputusan Mentri Kesehatan Republik
Indonesia No. 661/MENKES/SK/VII/1994 bahwa persyaratan angka lempeng

50
total untuk obat tradisional tidak boleh lebih dari 106 koloni/g dan angka kapang
khamir tidak boleh lebih dari 104 koloni/g (Katrin dkk., 2012).
Parameter cemaran logam berat dengan tujuan memberikan jaminan bahwa
ekstrak tidak mengandung logam berat tertentu, melebihi nilai yang ditetapkan
karena berbahaya bagi kesehatan. Cemaran logam berat dilakukan di laburatorium
Universitas Negeri Semarang, menganalisis sampel ekstrak buah labu kuning
dengan menggunakan Spektrofotometri Serapan Atom metode nyala. Logam yang
diuji pada penelitian yaitu logam Pb, karena Pb merupakan polutan yang paling
lazim dijumpai terutama pada asap kendaraan bermotor yang dapat mencemari
lingkungan. Ketiga tempat pengambilan sempel buah labu kuning dihasilkan
cemaran tidak terdeteksi cemaran logam Pb pada ekstrak etanol labu kuning
dikarenakan tempat pengambilan sampel merupakan tempat budidaya tanaman
obat yang telah dijaga kualitas tanaman baik secara pemupukan, kondisi
lingkungan dan penyiraman. Suatu produk bahan obat tidak boleh mengandung
cemaran logam atau apabila tidak dapat dihindari harus sesuai dengan persyaratan
maksimal cemaran logam berat yaitu Pb ≤ 10,0 ppm (BPOM, 2008).
Tabel 8. Hasil Uji KLT Flavonoid dan Saponin Ekstrak Buah Labu Kuning
(Cucurbita moschata).
Harga Rf senyawa flavonoid Harga Rf senyawa Saponin
Wonosobo Magelang Semarang Wonosobo Magelang Semarang
0,31 0,31 0,31 0,35 0,35 0,35

0,84 0,84 0,84 - - -
51
KLT (kromatografi lapis tipis) merupakan parameter spesifik. Dari hasil KLT
ekstrak etanol buah labu kuning positif saponin dan flavonoid dapat dilihat pada
lampiran 29-33. Dari ketiga daerah mempunyai nilai Rf yang sama, Rf senyawa
flavoniod ekstrak labu kuning dari Wonosobo 0,31; 0,84, Magelang Rf 0,31;
0,84, Semarang Rf 0,31; 0,84. Sedangkan untuk senyawa saponin Rf ekstrak labu
kuning dari Wonosobo 0,35, Magelang 0,35 dan semarang 0,35.
KLT densitometri bertujuan untuk memberikan gambaran awal komposisi
kandungan kimia berdasarkan pola kromatogram. Prinsip KLT densitometri
adalah metode analisis instrumental yang berdasarkan interaksi radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan noda pada KLT. KLT dengan
menggunakn silica gel GF 254 dilakukan sebelum KLT densitometri. KLT
menghasilkan senyawa yang terkandung dalam ekstrak buah labu kuning adalah
flavonoid dan saponin. Pemilihan senyawa untuk uji KLT densitometri
berdasarkan hasil noda KLT yang paling mantap yaitu saponin, sehingga KLT
densitometri hanya dilakukan pada saponin.
KLT untuk senyawa saponin menggunakan fase gerak Kloroform: metanol
:air (64:50:10) dan deteksi menggunakan anisaldehida asam sulfat LP dipanaskan.
Uji dilakukan dengan menotolkan 5µl. Setelah mendapatkan hasil dari KLT,
dilakukan pengukuran TCL Scanner dibaca pada panjang gelombang UV 254 nm
dan UV 366 nm untuk menghasilkan KLT densitometri. Hasil KLT densitometri
dapat dilihat pada tabel 8.

52
Tabel 9. Hasil Uji KLT Densitometri Kandungan Senyawa Golongan

Saponin Ekstrak Buah Labu Kuning (Cucurbita moschata)
Deteksi Harga Rf Ekstrak etanol buah labu Kandungan senyawa

kuning golongan Saponin (%)
Wonosobo Magelang Semarang Baku Wonosobo Magelang Semarang
UV 254 0,48 0,23 0,49 0,48 2,22 0,81 2,33

- 0,49 - - 4,25 -
UV 366 0,45 0,48 0,46 0,49 6,04 4,98 7,06
Dari hasil KLT densitometri ketiga daerah mempunyai nilai Rf yang
berdekatan, UV 254 menghasilkan kemiripan nilai Rf baku dan sampel. Ekstrak
etanol buah labu kuning dari Wonosobo Rf 0,48 kandungan senyawa saponin
2,22%, Magelang Rf 0,23 kandungan senyawa saponin 0,81%; 0,49 kandungan
senyawa saponin 4,25%, Semarang Rf 0,49 kandungan senyawa saponin 2,33%
dan baku Rf 0,49. Hasil menunjukkan bahwa ekstrk etanol buah labu kuning
mempunyai kandungan senyawa yang sama, hal ini ditunjukan dari harga Rf
sampel dan baku yang hampir berdekatan. Magelang nilai Rf 0,23 dan 0,49
disebabkan dengan adanya glikosida yang pecah menjadi glikon dan aglikon
sehingga ekstrak etanol labu kuning dari Magelang mempunyai harga Rf 0,23 dan
0,49. Banyaknya noda yang muncul menunjukkan banyaknya jenis senyawa yang
terdeteksi. Analisis densitometri dengan UV 366 menghasilkan kemiripan harga
Rf, ekstrak etanol labu kuning dari Wonosobo harga Rf 0,45 kandungan senyawa
saponin 6,04%, Magelang Rf 0,48 kandungan senyawa saponin 4,98%, Semarang
Rf 0,46 kandungan senyawa saponin 7,06% dan baku Rf 0,48. Hasil menunjukan
bahwa ekstrak etanol buah labu kuning mempunyai kandungan senyawa saponin
paling banyak dari daerah semarang yaitu 7,04% dan harga Rf baku dan sampel
yang hampir berdekatan.

53
Gambar 13. Sistem Kloroform: metanol: air (64:50:10) UV 254
Gambar 14. Sistem Kloroform: metanol: air (64:50:10) UV 254
Merah muda : ekstrak etanol buah labu kuning Magelang
Ungu : ekstrak etanol buah labu kuning Semarang
Hijau : ekstrak etanol buah labu kuning Wonosobo
Kuning : pembanding saponin

54
Dari hasil penelitian ini didapatkan hasil uji spesifik dan non sperifik dari
ekstrak etanol buah labu kuning ketiga daerah Semarang, Magelang dan
Wonosobo menghasilkan hasil yang berbeda. Perbedaan hasil parameter yang
diperoleh dapat dikarenakan tempat tumbuh ketiga daerah yang berbeda. keadaan
lingkungan dapat dilihat berdasarkan letak geografis dari ketiga daerah. Hasil
parameter-parameter dapat digunakan sebagai informasi mengenai buah labu
kuning bagi masyarakat yang memproduksi obat dari bahan alam dengan
komposisi buah labu kuning.

55
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, maka dapat diambil
kesimpulan bahwa :
1. Hasil uji parameter non spesifik ekstrak etanol buah labu kuning :
a. Rentang susut pengeringan dari Wonosobo, Magelang dan Semarang
sebesar 14,87%±0,45, 14,32%±1,27 dan 8,26%±1,15.
b. Rentang kadar abu total dari Wonosobo, Magelang dan Semarang sebesar
26,53%±0,31, 24,07%±0,63 dan 11,47%±0,42.
c. Rentang kadar abu tidak larut asam dari Wonosobo, Magelang dan
Semarang sebesar 10,80%±0,37, 12,31%±0,13 dan 5,65%±0,16.
d. Hasil uji cemaran mikroba, angka lempeng total dari Wonosobo,
Magelang dan Semarang sebesar 8 x 101 koloni/gram, 4 x 101 koloni/gram
dan 2,5 x 101 koloni/gram. Angka kapang khamir sebesar 3 x 101
koloni/gram, 2 x 101 koloni/gram, dan 0,5 x 101 koloni/gram. Hasil
cemaran mikroba memenuhi persyaratan angka lempeng total untuk obat
tradisional tidak boleh lebih dari 107 koloni/g dan angka kapang khamir
tidak boleh lebih dari 104 koloni/g.

56
e. Hasil uji cemaran logam berat (Pb) dari ketiga daerah tidak terdeteksi hasil
ini menyatakan bahwa memenuhi persyaratan batas maksimal pleh BPOM
yaitu Pb ≤ 10,0 ppm.
2. Hasil uji parameter spesifik ekstrak etanol buah labu kuning:
a. Uji organoleptis ekstrak etanol buah labu kuning dari ketiga daerah yaitu
bau: khas; rasa: pahit; warna: kuning kecoklatan; bentuk: kental.
b. Kadar rata – rata senyawa larut air : kloroform ekstrak etanol buah labu
kuning dari Wonosobo, Magelang dan Semarang sebesar 32,27%±1,28,
29,03%±0,59 dan 29,59%±0,56.dan Wonosobo.
c. Kadar rata – rata senyawa larut etanol ekstrak etanol buah labu kuning
dari Wonosobo, Magelang dan Semarang sebesar 32,31%±0,36,
31,12%±0,33 dan 32,21%±0,67.
d. Hasil uji dengan KLT densitometri pola kromatogram ekstrak etanol buah
labu kuning dengan sistem kloroform Kloroform:metanol:air (64:50:10) di
bawah UV 254 nm menghasilkan Rf ekstrak etanol buah labu kuning dari
Wonosobo dengan Rf 0,48 saponin 2,22%, ekstrak etanol buah labu
kuning dari Magelang dengan Rf 0,23 saponin 0,81%; 0,49 saponin
4,25%, ekstrak etanol buah labu kuning dari Semarang dengan Rf 0,49
saponin 2,33%, Sedangkan dibawah UV 366 nm ekstrak etanol buah labu
kuning dari Wonosobo dengan Rf 0,45 saponin 6,04%, esktrak etanol buah
labu kuning dari Magelang dengan Rf 0,45 saponin 4,98%, ekstrak etanol
57
buah labu kuning dari Semarang dengan Rf 0,46 saponin 7,06%. Hasil
menunjukan bahwa ekstrak etanol buah labu kuning mempunyai
kandungan senyawa saponin paling banyak dari daerah semarang yaitu
7,04%
5.2 Saran
1. Perlu dilakukan uji parameter ekstrak buah labu kuning (Cucurbita moschata
Duch) dari lokasi lain pada ketinggian yang sama.
2. Perlu dilakukan penelitian pemanfaatan zat aktif saponin sebagai anti mikroba
dari ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita moschata Duch).
3. Perlu dilakukan untuk uji parameter lain yang belum dilakukan dalam
penelitian ini menggunakan ekstrak etanol buah labu kuning (Cucurbita
moschata Duch).
58
DAFTAR PUSTAKA
Ansel, C.H.1989. Parameter Bentuk Sediaan Farmasi. Jakarta : UI Press.

Badan Pengawasan Obat Dan Makanan RI. 2006. Monografi Ekstrak Tanaman
Obat Indonesia. Jakarta : Badan Pengawasan Obat Dan Makanan Republik
Indonesia.
______. 2010. Acuan Sediaan Herbal. Volume Kelima Edisi Pertama. Jakarta :
Badan Pengawasan Obat dan Makanan Republik Indonesia.
Badan Standardisasi Nasional. 2004. Sedimen – Bagian 3: Cara Uji Timbal (Pb)
secara Destruksi Asam dengan Spektrofotometer Serapan Atom (SSA). SNI
06-6992.3-2004.
BPOM RI, 2008. Natura Kos Editorial. ISSN 1907-6606.3 (8) : 3
Choi, BC.K., Tennassee, LM, dan Eijkemans, GJ,M, 2001. Developing Regional
Workplace Health and Hazard Surveillance in The Americas. Pan Am J
Pub Health (10): 376-381.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1986. Sediaan Galenik. Jakarta:
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
______. Material Medika Indonesia. Jilid V. 1989 Cetakan Kelima. Jakarta:
Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
______.1995. Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan
Republik Indonesia.
______. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat Cetakan
Pertama. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Emilan, T., Kurnia, A., Budi, U., Diyani, L.N., dan Maulana, A. 2011. Konsep
Herbal Indonesia : Pemastian Mutu Produk Herbal. Depok : Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Indonesia
Fransworth, V.R. 1966. Biological and Phiochemical Screening of Plant. Journal
of Pharmaceutical Science 55 (3): 262-263
Gritter, R.J., Bobbitt, M., Schwarting, A.E. 1991. Pengantar Kromatografi.
Bandung : ITB Press.
Harborne, J. B. 1987. Metode Fitokimia. Diterjemahkan oleh Dr. Kosasih dan Dr.
Iwang Soediro. Bandung: ITB Press.
Haris, D. C., and Daniel. 1978. Quantitative Chemical Analysis. New York: W. H.
Freeman and Company New York.
59
Katrin w, Ermin., Narulita, Epsi., Aziz, Zuhelmi., Winarno, Hendig. 2012. Iradiasi
Sediaan Obat Herbal Temu Putih Curcuma zedoaria (Berg) Rosc.:
Cemaran Mikroba, Sitotoksisitas dan Profil Kromatogram. Jakarta :
Universitas Pancasila.
Linder MCG. 1992. Biokimia Nutrisi dan metabolisme. UI press 201-208
Mulja, M., dan Suharman. 1995. Analisis Instrumental. Surabaya:

AirlanggaUniversity Press.
Monteiro, Melita. 2013. Pengaruh Pemberian Ekstrak Labu Kuning Per Oral
(Cucurbita Moschata Duchenes) Terhadap Kadar Trigliserida Tikus
Jantan (Rattus Norvegicus Strain Wistar) Model Diabetes Mellitus Tipe 2.
Malang : Universitas Brawijaya.
Robinson, T. 1991. Kandungan Organik Tumbuhan Tingkat Tinggi.
Diterjemahkan oleh Padmawinata, K. Bandung: Penerbit ITB.

Rohman, A. 2007. Metode Kromatografi Untuk Analisis Makanan. Yogyakarta:
Pustaka Pelajar.
Stahl, E. 1985. Analisis Obat Secara Kromatografi dan Mikroskopi.
Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata dan Soediro. Bandung: ITB
Press.
Steenis, C.G.G.J.V. 2002. Flora Untuk Sekolah Di Indonesia. Jakarta: PT
Pradaya.
Sudjadi. 1986. Metode Pemisahan. Yogyakarta : Kanisus.

Wahyuni, E.S., Kusumastuty, I., Biomed, M., Winarni, S. 2013. Pengaruh
Pemberian Ekstrak Labu Kuning (Cucurbita moschata) Per Oral Terhadap
Kadar LDL (Low Density Lipoprotein) Pada Tikus Wistar (Rattus
nonvegicus) Jantan Model Diabetes Millitus Dengan Induksi
Streptozotocin. Malang : Universitas Brawijaya.
Waluyo, Lud. 2004. Mikrobiologi Umum. Malang : UMM Press. 103-104.

Watson, D.G., Analisis Farmasi. Buku Ajar Untuk Mahasiswa Farmasi Edisi 2.
Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran.
Wijayakusuma, H. 2005. Penyembuhan Dengan Labu Parang. Jakarta : Yayasan
Obor Indonesia.
60
Lampiran 1. Gambar Buah Labu Kuning
Buah labu kuning dari Wonosobo
Buah labu kuning dari Magelang
Buah labu kuning dari Semarang

61
Lampiran 2. Surat keterangan Identifikasi Tanaman Buah Labu Kuning

62
Lampiran 3. Gambar simplisia kering Buah Labu Kuning
Simplisia kering dari Wonosobo
Simplisia kering dari Magelang
Simplisia kering dari Semarang

63
Lampiran 4. Gambar Ekstrak Kental Buah Labu Kuning
Ekstrak kental etanol labu kuning

64
Lampiran 5. Uji Organoleptis Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning

Organoleptik Semarang Magelang Wonosobo
Bentuk Serbuk kasar Serbuk kasar Serbuk kasar
Bau Khas Khas Khas
Warna Orange kekuningan Orange kekuningan Orange kekuningan
Organoleptis Serbuk Buah Labu Kuning

Organoleptik Semarang Magelang Wonosobo
Bentuk Kental kental kental
Bau Khas Khas Khas
Warna Kuning kecoklatan Kuning kecoklatan Kuning kecoklatan
Organoleptis Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning

65
Lampiran 6. Skrining Fitokimia Serbuk dan Ekstrak Buah Labu Kuning.
Skrining fitokimia serbuk dan ekstrak etanol labu kuning dari daerah Semarang.
Skrining fitokimia serbuk dan ekstrak etanol labu kuning dari daerah Magelang.
Skrining fitokimia serbuk dan ekstrak etanol labu kuning dari daerah Wonosobo.
66
Identifikasi steroid / triterpenoid serbuk dan ekstrak kental buah labu kuning.
67
Lampiran 7. Contoh Perhitungan Kadar Senyawa Terlarut Air:Kloroform

Ekstra Etanol Buah Labu Kuning dari Daerah Semarang
Penimbangan ekstrak
Berat erlenmeyer + ekstrak = 60,7017 g
Berat erlenmeyer Kosong = 58,2014 g -
Berat ekstrak = 2,5003 g
Data pengonstanan cawan
Berat cawan (g) Selisih (g) Perhitungan (g) Keterangan
24,5718 Konstan
0,0005
24,5713 Konstan
0,0001
24,5712 Konstan
Data pengonstanan ekstrak
Berat Keterangan
Berat Berat
cawan + Selisih
cawan ekstrak Perhitungan (%)
ekstrak (g)
(g) (g)
(g)
25,3677 24,5712 0,7965
0,034 Belum
konstan
25,3337 24,5712 0,7625
0,0219 Belum
konstan
25,3005 24,5712 0,7293
0,0001 konstan
25,3004 24,5712 0,7292

Kadar senyawa terlarut air
68
Lampiran 8. Contoh Perhitungan Kadar Senyawa Terlarut Air:kloroform

Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning dari Daerah Magelang
Penimbangan ekstrak

30,9322 Konstan
0,0003
30,9319 Konstan
0,0004
30,9315 Konstan
Berat Keterangan
Berat Berat
cawan + Selisih
ekstrak (g)
(g) (g)
(g)
31,8012 30,9315 0,8697
0,0244 Belum
konstan
31,7768 30,9315 0,8453
0,0256 Belum
konstan
31,7512 30,9315 0,8197
0,0239 Belum
konstan
31,7273 30,9315 0,7958
0,0082 Belum
konstan
69
31,7191 30,9315 0,7876

0,0069 Belum
konstan
31,7122 30,9315 0,7807
0,0034 Belum
konstan
31,7156 30,9315 0,7841
0,0019 Belum
konstan
31,7175 30,9315 0,786
0,0056 Belum
konstan
31,7119 30,9315 0,7804
0,0132 Belum
konstan
31,6987 30,9315 0,7672
0,021 Belum
konstan
31,6777 30,9315 0,7462
0,0114 Belum
konstan
31,6663 30,9315 0,7348
0,0036 Belum
konstan
31,6699 30,9315 0,7384
0,0017 konstan
31,6682 30,9315 0,7367
Kadar senyawa terlarut air

70
Lampiran 9. Contoh Perhitungan Kadar Senyawa Terlarut Air : kloroform

Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning dari Daerah Wonosobo
Penimbangan ekstrak

50,7835 Konstan
0,0002
50,7833 Konstan
0,0001
50,7832 Konstan
Berat Keterangan
Berat Berat
cawan + Selisih
ekstrak (g)
(g) (g)
(g)
51,6665 50,7832 0,8833
0,0247 Belum
konstan
51,6418 50,7832 0,8586
0,006 Belum
konstan
51,6358 50,7832 0,8526
0,0112 Belum
konstan
51,6246 50,7832 0,8414
0,0009 Belum
konstan
51,6255 50,7832 0,8423
71
0,0663 Belum
konstan
51,5592 50,7832 0,776
0,0641 Belum
konstan
51,6233 50,7832 0,8401
0,028 Belum
konstan
51,5953 50,7832 0,8121
0,0266 Belum
konstan
51,5687 50,7832 0,7855
0,0177 Belum
konstan
51,5510 50,7832 0,7678
0,0039 Belum
konstan
51,5549 50,7832 0,7717
0,0014 konstan
55,5235 50,7832 0,7703
Kadar senyawa terlarut air : kloroform

72
Lampiran 10. Contoh Perhitungan Kadar Senyawa Terlarut Etanol Ekstrak

Etanol Buah Labu Kuning dari Daerah Semarang
Penimbangan ekstrak
Berat erlenmeyer Kosong = 61.8319 g -

23,7083 Konstan
0,0003
23,7080 Konstan
0,0004
23,7076 Konstan
Berat Keterangan
Berat Berat
cawan + Selisih
ekstrak (g)
(g) (g)
(g)
24,5965 23,7076 0,8889
0,0227 Belum
konstan
24,5738 23,7076 0,8662
0,0641 Belum
konstan
24,5097 23,7076 0,8021
0,0102 Belum
konstan
24,4995 23,7076 0,7919
0,0085 Belum
konstan
73
24,4910 23,7076 0,7834

0,0097 Belum
konstan
24,5007 23,7076 0,7931
0,0012 Belum
konstan
24,4995 23,7076 0,7919
0,004 Belum
konstan
24,4955 23,7076 0,7879
0,0006 Belum
konstan
24,4961 23,7076 0,7885
0,0017 konstan
24,4944 23,7076 0,7868
Kadar senyawa terlarut etanol

74

Etanol Buah Labu Kuning dari Daerah Magelang
Penimbangan ekstrak
30,3461 Konstan
0,0002
30,3459 Konstan
0,0005
30,3435 Konstan
Berat Keterangan
Berat Berat
cawan + Selisih
ekstrak (g)
(g) (g)
(g)
31,2151 30,3454 0,8697
0,0705 Belum
konstan
31,1446 30,3454 0,7992

0,0233 Belum
konstan
31,1213 30,3454 0,7759
0,0011 konstan
31,1202 30,3454 0,7748

75

Etanol Buah Labu Kuning dari Daerah Wonosobo
Penimbangan ekstrak
33,7344 Konstan
0,0003
33,7321 Konstan
0,0003
33,7318 Konstan
Berat Keterangan
Berat Berat
cawan + Selisih
ekstrak (g)
(g) (g)
(g)
34,6256 33,7318 0,8338
0,0325 Belum
konstan
34,5331 33,7318 0,8013

0,0042 Belum
konstan
34,5373 33,7318 0,8055
0,0021 Belum
konstan
34,5352 33,7318 0,8034
0,0149 Belum
konstan
34,5203 33,7318 0,7885
76
0,0003 konstan
34,5200 33,7318 0,7882

77
Lampiran 13. Contoh Perhitungan Susut Pengeringan Ekstrak Etanol

Buah Labu Kuning dari Daerah Semarang
Penimbangan ekstrak
Berat krus + ekstrak = 22,5579 g
Berat kertas + sisa = 21,5163 g –
Tabel pengonstanan krus untuk susut pengeringan ekstrak etanol buah labu
kuning:
Berat krus Selisih (g) Perhitungan (g) Keterangan
(gram)
21,5164 Konstan
0,0001
21,5163 Konstan
0,0000
21,5163 Konstan
Tabel pengonstanan ekstrak etanol buah labu labu kuning untuk susut
pengeringan:
Berat Keterangan
Berat
krus + Berat Selisih
ekstrak Perhitungan (%)
ekstrak krus (g) (g)
(g)
(g)
22,5579 21,5163 1,0416
0,0835 Belum
konstan
22,4744 0,9581
0,0069 Belum
konstan
22,4676 0,9513
78
0,0048 Belum
konstan
22,4627 0,9465
0,0006 Belum
konstan
22,4634 0,9471
0,0023 konstan
22,4609 0,9446
Kadar susut pengeringan

79

Buah Labu Kuning dari Daerah Magelang
Penimbangan ekstrak
kuning:
(gram)
20,7768 Konstan
0,0003
20,7765 Konstan
0,0003
20,7762 Konstan
Tabel pengonstanan ekstrak etanol buah labu labu kuning untuk susut pengeringan
:
Berat Keterangan
Berat
(g)
(g)
21,7834 20,7762 1,0072
0,0740 Belum
konstan
21,7094 20,7762 0,9232
0,0446 Belum
konstan
21,6648 20,7762 0,8886
0,0382 Belum
konstan
80
21,6266 20,7762 0,8504

0,0250 Belum
konstan
21,6516 20,7762 0,8754
0,0010 Belum
konstan
21,6526 20,7762 0,8764
0,0014 konstan
21,6512 20,7762 0,8750

81

Buah Labu Kuning dari Daerah Wonosobo
Penimbangan ekstrak
kuning:
(gram)
22,0957 Konstan
0,0004
22,0953 Konstan
0,0001
22,0952 Konstan
Tabel pengonstanan ekstrak etanol buah labu labu kuning untuk susut
pengeringan:
Berat Keterangan
Berat
(g)
(g)
23,1376 22,0952 1,0424
0,1205 Belum
konstan
23,0171 22,0952 0,9219
0,0294 Belum
konstan
22,9877 22,0952 0,8922
0,0011 konstan
22,9866 22,0952 0,8914

82
Lampiran 16. Contoh Perhitungan Kadar Abu Total Etanol Ekstrak

Buah Labu Kuning dari Semarang
Penimbangan ekstrak
Berat krus konstan = 20,3542 g -
Tabel pengonstanan krus untuk kadar abu total ekstrak etanol daun cakar ayam
Berat krus (g) Selisih (g) Perhitungan (g) Keterangan
20,3544 Konstan
0,0002
20,3542 Konstan
Tabel pengonstanan ekstrak etanol daun cakar ayam untuk kadar abu total
Berat Keterangan
Berat krus Berat Selisih
krus + Perhitungan (g)
(g) abu (g) (g)
abu (g)
20,4659 20,3542 0,1117
0,0008 Belum
konstan
20,4651 0,1109
0,0005 Belum
konstan
20,4646 0,1104
0,0003 Belum
konstan
20,4643 0,1101
0,0000 konstan
20,4643 0,1101
Kadar abu total =
83
Lampiran 17. Contoh Perhitungan Kadar Abu Tidak Larut Asam Ekstrak
Etanol Buah Labu Kuning dari Semarang
Tabel pengonstanan cawan dan kertas saring

Berat cawan + Selisih (g) Perhitungan (g) Keterangan
kertas saring (g)
21,4188 Konstan
0,0000
21,4188 Konstan
Tabel pengonstanan abu ≠ larut asam

Cawan Cawan Keterangan
Berat
+kertas + kertas Selisih
abu Perhitungan (g)
saring + saring (g)
(g)
abu (g) (g)
22,4879 22,4188 0,0691
0,0057 Belum
konstan
22,4822 22,4188 0,0634
0,0035 Belum
konstan
22,4857 22,4188 0,0669
0,0005 Belum
konstan
22,4862 22,4188 0,0674
0,0024 Belum
konstan
22,4886 22,4188 0,0698
0,0030 Belum
konstan
22,4856 22,4188 0,0668
0,0010 Belum
konstan
22,4846 22,4188 0,0658
0,0064 Belum
konstan
22,4782 22,4188 0,0594
84
0,0010 Belum
konstan
22,4792 22,4188 0,0604
0,0001 konstan
22,4791 22,4188 0,0603

Kadar abu tidak larut asam
85
Lampiran 18. Contoh Perhitungan Kadar Abu Total Ekstrak Etanol

Buah Labu Kuning dari Magelang
Penimbangan ekstrak
23,2981 Konstan
0,0003
23,2978 Konstan
Berat Keterangan
(g) abu (g) (g)
abu (g)
23,5556 25,2978 0,2578
0,0074 Belum
konstan
23,5482 25,2978 0,2504

0,0056 Belum
konstan
23,5426 25,2978 0,2448

0,0049 Belum
konstan
23,5377 25,2978 0,2399

0,0007 Belum
konstan
23,5370 25,2978 0,2392

86
0,0005 konstan
23,5365 25,2978 0,2387
Kadar abu total =

87
Etanol Buah Labu Kuning dari Magelang

kertas saring (g)
34,8519 Konstan
0,0004
34,8515 Konstan

Berat
abu Perhitungan (g)
saring + saring (g)
(g)
abu (g) (g)
35,0975 34,8515 0,2460
0,0162 Belum
konstan
35,0813 34,8515 0,2298
0,0056 Belum
konstan
35,0757 34,8515 0,2242
0,0265 Belum
konstan
35,0492 34,8515 0,1977
0,0017 Belum
konstan
35,0475 34,8515 0,1960
0,0594 Belum
konstan
34,9881 34,8515 0,1366
0,0141 Belum
konstan
34,9740 34,8515 0,1225
0,0016 Belum
konstan
34,9724 34,8515 0,1209
88
0,0005 Belum
konstan
34,9719 34,8515 0,1204
0,0002 konstan
35,9717 34,8515 0,1202

89
Lampiran 20. Contoh Perhitungan Kadar Abu Total Ekstrak Etanol

Buah Labu Kuning dari Wonosobo
Penimbangan ekstrak
19,1414 Konstan
0,0001
19,1413 Konstan
Berat Keterangan
(g) abu (g) (g)
abu (g)
19,4233 19,1413 0,2820
0,0024 Belum
konstan
19,4209 19,1413 0,2796

0,0011 Belum
konstan
19,4198 19,1413 0,2785

0,0017 Belum
konstan
19,4181 19,1413 0,2768

0,0001 konstan
19,4180 19,1413 0,2767

Kadar abu total =
90
Etanol Buah Labu Kuning dari Magelang

kertas saring (g)
52,1359 Konstan
0,0004
52,1355 Konstan

Berat
abu Perhitungan (g)
saring + saring (g)
(g)
abu (g) (g)
52,3070 52,1355 0,1715
0,0155 Belum
konstan
52,2915 52,1355 0,1560
0,0133 Belum
konstan
52,2782 52,1355 0,1427
0,0077 Belum
konstan
52,2705 52,1355 0,1350
0,0149 Belum
konstan
52,2556 52,1355 0,1201
0,0049 Belum
konstan
52,2507 52,1355 0,1152
0,0001 konstan
52,2506 52,1355 0,1151

91
Lampiran 22. Uji Cemaran Bakteri Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning
Semarang Magelang Wonosobo Semarang Magelang Wonosobo

Pengenceran 10-1 Pengenceran 10-2


92
93
Lampiran 23. Uji Cemaran Kapang Khamir Ekstrak Buah Labu Kuning


94
Lampiran 24. Perhitungan Total Cemaran Bakteri
Ekstrak etanol buah labu kuning dari Semarang

Penimbangan ekstrak
Tingkat pengenceran
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
4 4 0 0 2 1
Jumlah koloni
1 1 2 2 0 2
Rata – rata 2,5 2,5 1 1 1 1,5
Total Cemaran Bakteri= 2,5x = 30 = 2,5 x 101 koloni/g
Ekstrak etanol buah labu kuning dari Magelang

Penimbangan ekstrak
Tingkat pengenceran
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
5 4 5 1 1 3
Jumlah koloni
3 1 0 0 0 1
Rata – rata 4 2,5 2,5 1,5 1,5 2
Total Cemaran Bakteri= 4 x = 4 x 101 koloni/g
Total Cemaran Bakteri Ekstrak etanol buah dari Wonosobo

Penimbangan ekstrak
Tingkat pengenceran
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
3 2 1 0 0 0
Jumlah koloni
13 6 3 0 1 1
Rata – rata 8 4 2 0 1,5 1,5
Total Cemaran Bakteri= 8 x = 8 x 101 koloni/g

95
Lampiran 25.Perhitungan Total Cemaran Kapang Khamir
Ekstrak etanol buah labu kuning dari semarang

Penimbangan ekstrak
Tingkat pengenceran
10-1 10-2 10-3 10-4
Jumlah koloni 0 0 0 1
1 1 0 0
Rata – rata 0,5 0 0 0
Total cemaran jamur = 0,5 x = 0,5 x 101 koloni/g

Ekstrak etanol buah labu kuning dari Magelang
Penimbangan ekstrak
Tingkat pengenceran
10-1 10-2 10-3 10-4
0 1 0 1
Rata – rata 2 1 0 0,5
Total Cemaran Jamur= 2 x = 2 x 101 koloni/g
Ekstrak etanol buah labu kuning dari Wonosobo

Penimbangan ekstrak
Tingkat pengenceran
10-1 10-2 10-3 10-4
2 2 2 1
Rata – rata 3 1 1 2,5
Total Cemaran Jamur = 3 x = 3 x 101 koloni/g

96
Lampiran 26. Cara Perhitungan Angka Cemaran Mikroba
Cawan petri dipilih dari satu pengenceran yang menunjukkan jumlah
koloni antara 30-300.Jumlah koloni rata-rata dari kedua cawan dihitung lalu
dikalikan dengan factor pengencerannya. Hasil dinyatakan sebagai angka lempeng
total dalam tiap gram contoh. Bila ditemui jumlah koloni kurang dari 30 atau lebih
dari 300, maka ikuti petunjuk sebagai berikut:
1. Bila hanya salah satu di antara kedua cawan yang menunjukkan jumlah antara
30-300 koloni, dihitung rata-rata dari kedua cawan dan dikalikan dengan
factor pengenceran.
2. Bila pada cawan petri dari dua tingkat pengenceran yang berurutan
menunjukkan jumlah antara 30-300 koloni, maka dihitung jumlah koloni dan
dikalikan faktor pengenceran kemudian diambil angka rata-rata. Jika pada
tingkat pengenceran yang lebih tinggi didapati jumlah koloni lebih besar dari
dua kali jumlah koloni yang seharusnya, maka dipilih tingkat pengenceran
terendah (missal pada pengenceran 10-2 diperoleh 140 koloni dan pada
pengenceran 10-3 diperoleh 32 koloni, maka dipilih jumlah koloni pada tingkat
pengenceran 10-2.
3. Bila seluruh cawan petri tidak ada satupun yang menujukkan jumlah antara
30-300 koloni, maka dicatat angka sebenarnya dari tingkat pengenceran
terendah dan dihitung sebagai angka lempeng total perkiraan.

97
4. Bila tidak ada pertumbuhan pada semua cawan dan bukan disebabkan karena
faktor inhibitor, maka angka lempeng total dilaporkan sebagai kurang dari
satu dan dikalikan faktor pengenceran terendah.
5. Bila jumlah koloni percawan lebih dari 3000, maka cawan dengan tingkat
pengenceran tertinggi dibagi dala, beberapa sektor (2, 4 atau 8). Jumlah koloni
dikalikan dengan faktor pembagi dan pengencerannya. Hasil dilaporkan
sebagai angka lempeng total perkiraan.
Bila jumlah koloni lebih dari 200 pada 1/8 bagian cawan, maka jumlah koloni
adalah 200 x 8 x faktor pengenceran. Angka lempeng total perkiraan dihitung
sebagai lebih besar dari jumlah koloni yang diperoleh (DepKes RI, 2000: 25).
98
Lampiran 27. Cara Perhitungan Angka Cemaran Kapang/Khamir
Cawan petri dipilih dari satu pengenceran yang menunjukkan jumlah
koloni antara 40-60.Misalkan pada pengenceran 10-4 terdapat sebanyak 40
koloni, maka angka kapang/khamir (bila terdapat) adalah 40 x 10-4 = 40.10-4
koloni per gram contoh. Untuk beberapa kemungkinan lain yang berbeda dari
pernyataan di atas, maka ikuti petunjuk sebagai berikut:
1. Bila hanya salah satu di antara kedua cawan petri dari pengenceran yang sama
menunjukkan jumlah koloni antara 40-60 koloni, dihitung jumlah koloni dari
kedua cawan dan dikalikan dengan faktor pengenceran.
2. Bila pada tingkat pengenceran yang lebih tinggi didapat jumlah koloni lebih
besar dari dua kali jumlah koloni pada pengenceran di bawahnya, maka dipilih
tingkat pengenceran terendah (missal pada pengenceran 10-2 diperoleh 60
koloni dan pada pengenceran 10-3diperoleh 20 koloni maka dipilih jumlah
koloni pada tingkat pengenceran 10-2yaitu 60 koloni).
3. Bila dari seluruh cawan petri tidak ada satupun yang menunjkkan jumlah
antara 40-60 koloni, maka dicatat angka sebenarnya dari tingkat pengenceran
terendah dan dihitung sebagai angka kapang/khamir perkiraan.
4. Bila tidak ada pertumbuhan pada semua cawan dan bukan disebabkan karena
faktor inhibitor, maka angka kapang/khamir dilaporkan sebagai kurang dari
satu dikalikan faktor pengenceran terendah (DepKes RI, 2000: 29).

99
Lampiran 28. Surat Hasil Analisis Batas Cemaran Logam Timbal

100
Lapiran 29. Kromatografi Lapis Tipis senyawa Alkaloid
Keterangan :
A : Dibawah sinar UV 254 nm sebelum penampak bercak
B : Dibawah sinar UV 366 nm sebelum penampak bercak
C : Pada sinar tampak setelah penampak bercak
1 : Noda ekstrak labu kuning dari daerah Magelang
2 : Noda ekstrak labu kuning dari daerah Semarang
3 : Noda ekstrak labu kuning dari daerah Wonosobo
101
Lapiran 30. Kromatografi Lapis Tipis senyawa Flavonoid
Keterangan :
102
Lapiran 31. Kromatografi Lapis Tipis senyawa Tanin
Keterangan :
103
Lapiran 32. Kromatografi Lapis Tipis senyawa Saponin
Keterangan :
104
Lapiran 33. Kromatografi Lapis Tipis senyawa Steroid
Keterangan :
Lampiran 34. Kromatografi Lapis Tipis senyawa Saponin

105
Kloroform: metanol :air (64:50:10)
Keterangan:
A : Pada sinar tampak, sebelum penampak bercak
C : Dibawah sinar UV 366 nm sebelum penampak bercak
D : Pada sinar tampak setelah penampak bercak
E : Dibawah sinar UV 254 nm setelah penampak bercak
F : Dibawah sinar UV 366 nm setelah penampak bercak
Kromatografi Lapis Tipis Senyawa Saponin
Eluen : Kloroform : Metanol : Air ( 64: 50:10 )
Penampak bercak : anisaldehida asam sulfat LP
Lampiran 35. Pola Kromatogram Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning Sistem
Kloroform : Metanol : Air ( 64: 50:10 ) di Bawah UV 254 nm
106
107
108
109
110
Lampiran 36. Pola Kromatogram Ekstrak Etanol Buah Labu Kuning Sistem
Kloroform : Metanol : Air ( 64: 50:10 ) di Bawah UV 366 nm
111
112
113
114
Lampran 37. Gambar Alat yang digunakan
Neraca halus Muffle
Densitometri AAS
115

Labu

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Labu

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

BAB I

tradisi memanfaatkan tumbuhan dari lingkungan sekitarnya sebagai jamu untuk

meningkatkan kesehatan, memulihkan kesehatan, pencegahan penyakit dan

digunakan sebagai obat dan belum mengalami pengolahan atau mengalami

(Emilan dkk, 2011; BPOM, 2010 : 1).

terjangkau bagi semua kalangan masyarakat. Sejauh ini pemanfaatannya masih

(Wahyuni dkk, 2013).

kuning yang mengandung antioksidan seperti ß-karoten, vitamin C, serat saponin,

flavonoid kemungkinan dapat juga digunakan untuk menurunkan kadar

trigliserida pada penderita diabetes mellitus (Choi,2001). kadar antioksidan pada

labu kuning dapat bekerjasama dalam menetralisir radikal bebas sehingga

menghambat pembentukan LDL teroksidasi dan menurunkan kadar LDL dalam

dengan mekanisme dihambatnya enzim HMG-CoA (Monteiro, 2013). Senyawa

dalam saluran pencernaan berkurang. Kekurangan ini dipenuhi dengan

meningkatkan sintesis asam empedu di hati yang berbahan dasar kolesterol,

terdapat dalam labu berfungsi sebagai kompetitif terhadap absorpsi kolesterol

virus, meningkatkan sistem kekebalan tubuh, meningkatkan vitalitas, mengurangi

ditanam di daerah tropis Asia Tenggara termasuk Indonesia, Afrika, Amerika

perbedaan ketinggian tempat tumbuh. Penelitian ini memuat parameter spesifik

pola kromatogram. Parameter non spesifik meliputi hasil pengujian susut

berpengaruh pada kualitas ekstrak (BPOM RI, 2004 : xi)

parameter dilakukan pengambilan sampel dari daerah dengan perbedaan

ketinggian dan tempat tumbuhnya, yaitu: Wonosobo, Magelang dan Semarang.

Ketinggian dan tempat tumbuh yang berbeda dimungkinkan adanya perbedaan

nilai parameter ekstrak, sehingga perlu dilakukan uji parameter.

1.1 Rumusan Masalah

kuning (Cucurbita moschata Duch), yang meliputi susut pengeringan, kadar

kapang khamir, serta kadar Pb dalam ekstrak?

kuning (Cucurbita moschata Duch) yang meliputi identitas, organoleptis,

1.2 Batasan Masalah

1. Tanaman yang digunakan adalah tanaman labu kuning (Cucurbita moschata

(Cucurbita moschata Duch) yang diperoleh dari Wonosobo, Magelang dan

khamir, batas cemaran logam Pb.

6. Uji parameter spesifik meliputi identitas, organoleptis, kadar senyawa larut

pola kromatogram untuk senyawa Flavonoid dan Saponin.

1.3 Tujuan Penelitian

kuning (Cucurbita moschata Duch), meliputi susut pengeringan, kadar abu

kapang khamir, batas cemaran logam Pb.

(Cucurbita moschata Duch) meliputi identitas, organoleptis, kadar senyawa

1.4 Manfaat Penelitian

Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi sumber informasi tentang

berguna terutama dalam pengembangan sediaan obat tradisional yang mutunya

TINJAUAN PUSTAKA DAN HIPOTESIS

2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Labu Kuning (Cucurbita moschata Duch)

2.1.1 Sistematika Tanaman

Spesies : Cucurbita moschata Duch.

(Van Steenis, 2002 : 36)

Gambar 1. Buah labu kuning (Cucurbita moschata Duch)

(Sunda, Jawa); Maluku: labu ambon (Wijayakusuma, 2005 : 13).

2.1.3 Morfologi Tanaman

berambut panjang, dan sisi panjang mengandung kelenjar.

berbagai hingga pangkalnya, ujungnya melebar, bergigi tidak teratur, dan

berambut. Buahnya besar, berbentuk bola pipih, di dalamnya mengandung banyak

tangkai, batang, dan daun (Wijayakusuma, 2005 : 11-12)

2.1.4 Khasiat dan Kegunaan Tanaman

Buah labu kuning berkhasiat sebagai tonik, menurunkan panas tubuh

(antipyretic), menghilangkan dahak (expectorant), peluruh kencing (diuretic),

antiradang (antiinflammatory), dan obat cacing (anthelmintic) (Wijayakusuma,

2.2 Kandungan Kimia buah Labu kuning (Cucurbita moschata Duch)

yang mempunyai khasiat sebagai antioksidan dan antimikroba (wahyuni dkk,

spektrum tampak (Harborne, 1987 : 70-71).

saponin bekerja sebagai antimikroba (Robinson, 1991: 157).

2.3 Tinjauan Ekstraksi