Nama: I Wayan Andika Pramana

NPM : 16700102
Kelas : B
TUGAS IMUNOLOGI
RESUME JURNAL INTERNASIONAL
Complement Component C1q as Serum Biomarker to Detect Active Tuberculosis

A. Pendahuluan
Tuberkulosis (TB) adalah ancaman kesehatan global utama, yaitu disebabkan oleh
infeksi oleh Mycobacterium tuberculosis (M.tb). Perkiraan saat ini menunjukkan bahwa
seperempat populasi global terinfeksi M.tb, dengan risiko seumur hidup untuk
mengembangkan penyakit TB aktif. Diagnosis TB aktif dibuat dengan deteksi
mikrobiologis atau genetik M.tb dalam dahak (atau spesimen lain dalam kasus TB
ekstrapulmoner), tetapi ini bisa mahal dan memakan waktu tergantung pada beban bakteri
atau membutuhkan metodologi dan infrastruktur yang kompleks. Tes imunologi saat ini
dapat mendeteksi infeksi dengan M.tb tetapi sering gagal membedakan penyakit aktif dari
infeksi laten.
Sistem komplemen adalah bagian penting dari sistem kekebalan tubuh bawaan dan
berfungsi sebagai kaskade proteolitik. Jalur komplemen klasik dimulai dengan mengikat
C1q ke ligan, seperti kompleks imun. Lebih lanjut, C1q dapat mengikat beberapa reseptor
yang berkontribusi pada fungsi penting lainnya, seperti fagositosis atau modulasi sel
myeloid, di luar aktivasi sistem komplemen tradisional.
Di sini, kami menganalisis ekspresi diferensial gen komplemen pada pasien dengan
TB. Karena dalam kumpulan data yang tersedia untuk umum, ekspresi C1q paling jelas
diregulasi, kami memvalidasi C1q pada tingkat protein dalam sampel dari berbagai
kelompok pasien sebagai biomarker untuk TB aktif.
B. Material dan Metode
1. Pasien dan Kontrol
a) Tuberculosis
Pasien TB paru BTA, GeneXpert atau kultur positif sputum, pasien LTBI dan
pasien TB yang diobati serta kontrol endemik (dalam kombinasi berbeda)
dimasukkan dari berbagai lokasi demografi: Italia, Gambia, Korea, dan Afrika
Selatan. Pasien dengan penyakit TB paru aktif, yang disebut "TB" dalam
manuskrip, didiagnosis berdasarkan metodologi lokal dan rutin. TB paru aktif
dikonfirmasi dengan biakan dahak (BACTECTM, Becton-Dickinson, AS), atau
berdasarkan uji Xpert Mtb / RIF positif, pasien dilibatkan dalam 7 hari setelah
mulai pengobatan TB.
 b) Penyakit Mycobacterial dan Vaksinasi lainnya
Pasien kusta (sebagian besar imigran dengan latar belakang etnis campuran)
pada saat diagnosis kusta primer dimasukkan di Belanda. Selain itu, pasien
dengan reaksi tipe-1 terdaftar di Brasil, Nepal dan Ethiopia
c) Penyakit Paru Lainnya
Pasien dengan pneumonia yang didapat komunitas dimasukkan di Belanda,
satu kohort terdiri dari pasien yang dirawat di unit perawatan intensif di rumah
sakit perawatan tersier di Leiden (satu pasien terinfeksi HIV dengan jumlah CD4
normal dan satu menderita sarkoidosis) dan kohort lainnya. terdiri dari pasien
yang dirawat di bangsal rumah sakit di rumah sakit pendidikan non-akademik di
Nieuwegein
2. Analisis Ekspresi Gen
Analisis transkriptomi global telah dilakukan untuk membandingkan pasien
dengan penyakit TB aktif dengan orang yang baru terinfeksi. Selain itu, transkriptom
dari pasien dengan penyakit TB dibandingkan dengan pasien dengan penyakit lain,
seperti sarkoidosis, pneumonia atau kanker paru-paru. Semua data diekstraksi dari
GEO dan dibandingkan dengan cara yang sama menggunakan GEO2R, sehingga
tidak mengandalkan analisis yang dilakukan dalam naskah asli. GEO2R
membandingkan dua atau lebih kelompok sampel untuk mengidentifikasi gen yang
diekspresikan secara berbeda di seluruh kondisi eksperimental atau klinis.
3. Deteksi C1q oleh ELISA
Tingkat C1q dalam serum diukur menggunakan ELISA yang dikembangkan
sendiri. Maxisorp plates (nunc) dilapisi semalaman dengan tikus anti-manusia C1q
(2204), departemen Nefrologi, LUMC) dalam buffer lapisan (0,1 M Na2CO3, 0,1 M
NaHCO3, pH9,6). Pelat dicuci dan diblokir dengan PBS / 1% BSA selama 1 jam
pada suhu 37◦C. Setelah dicuci, pengenceran serial serum manusia normal (NHS)
diaplikasikan sebagai standar dan sampel ditambahkan dalam pengenceran ke piring,
semuanya dalam rangkap dua, dan diinkubasi selama 1 jam pada suhu 37◦C.
C. Hasil
Data microarray yang tersedia untuk umum dari pasien TB diambil dari Ekspresi Gen
Omnibus, semua data diberi peringkat berbeda-beda antara pasien TB dan LTBI atau
penyakit lain. Daftar pola ekspresi gen komplemen dihasilkan dan jumlah studi
microarray yang melaporkan ekspresi gen komplemen diferensial antara pasien dengan
TB dan LTBI atau penyakit lain disebutkan.
Tingkat protein C1q diukur dalam serum dari pasien TB dan kontrol dari kohort yang
independen dan berbeda secara geografis. Analisis gabungan dari semua pasien TB,
kelompok kontrol, LTBI dan pasien TB yang berhasil diobati dari kelompok yang
berbeda mengungkapkan bahwa kadar protein serum C1q secara signifikan (p <0,001)
meningkat pada TB aktif.
Untuk menyelidiki apakah vaksinasi dengan M. bovis BCG, mycobacterium replikasi
langsung, menginduksi peningkatan serupa dalam kadar serum C1q, sampel diambil
sebelum dan setelah vaksinasi BCG dari sukarelawan Belanda yang sehat dan kadar C1q
diukur. Sampel yang diambil saat penyaringan dan langsung sebelum vaksinasi
 menunjukkan variasi minimal dalam tingkat C1q, yang mencerminkan variasi normal
dalam individu.
Sejauh ini, kadar RNA dan protein C1q yang beredar telah dianalisis, yang
mencerminkan respons sistemik terhadap TB. Selain itu, kami menganalisis produksi atau
deposisi C1q lokal sebagai respons terhadap infeksi M.tb dengan pewarnaan jaringan
paru-paru. Sebaliknya, jaringan paru-paru dari pasien TB yang fatal terungkap, di
samping sel positif C1q intra-alveolar juga terdapat pewarnaan C1q di kedua pusat
nekrotik granuloma dan di jaringan paru-paru sekitarnya dengan sel yang sebagian besar
seperti makrofag yang bernoda positif.
D. Kesimpulan
Identifikasi yang akurat dan cepat dari pasien dengan TB aktif tetap menantang,
terutama karena keterbatasan dalam alat diagnostik saat ini untuk membedakan TB aktif
dari penyakit lain, serta LTBI. Di sini, kami mengumpulkan data ekspresi gen luas genom
yang tersedia untuk TB dibandingkan dengan LTBI dan TB dibandingkan dengan
penyakit paru-paru lainnya dan mengamati bahwa khususnya gen penyandi C1q sangat
diregulasi. Menariknya, pengamatan ini dilakukan dalam studi menggunakan RNA dari
seluruh darah, menunjukkan peningkatan transkripsi gen C1q dalam sel darah yang
bersirkulasi, kemungkinan besar monosit / makrofag. Karena C1q bukan protein fase akut
yang khas, kami tertarik untuk mengkonfirmasi dan memvalidasi temuan ini pada tingkat
protein.
E. Daftar Pustaka
Lubbers, R., Sutherland, J. S., Goletti, D., De Paus, R. A., Van Moorsel, C. H., Veltkamp,
M. & Bajema, I. M. (2018). Complement component C1q as serum biomarker to detect
active tuberculosis. Frontiers in immunology, 9, 2427.