LAPORAN PRAKTIKUM FITOKIMIA

PERCOBAAN IV

Pemisahan dan Pemurnian

Disusun oleh :

Nabila Fauziah H I1C018049

Lutvi Endriyana I1C018051
Alfia Nayudia F I1C018053
Sabila Hoirun N I1C018055
Ummy H I1C018059
Jalu Prima S I1C018065

Tanggal Praktikum : 4 Mei 2020

Golongan / Kelompok : A2 / 1
Dosen Pembimbing : Nur Amalia Choironi, M.Si., Apt.
Dr. Eka Prasasti Nur Rachmani , M.Sc., Apt.
Dr. Warsinah, M.Si.,Apt.

UNIVERSITAS JENDRAL SOEDIRMAN

FAKULTAS ILMU-ILMU KESEHATAN
JURUSAN FARMASI
PURWOKERTO
2020
A. Tujuan Praktikum

Pada akhir praktikum mahasiswa dapat memahami prinsip serta melakukan

pemisahan dan pemurnian menggunakan kromatografi kolom.

B. Alat dan Bahan

Alat yang digunakan pada praktikum ini yaitu Chamber, oven, pipa kapiler,
kolom kromatografi, vial, statif, dan klem

Bahan yang digunakan pada praktikum ini adalah ekstrak etanol atau fraksi
heksan, fraksi etil asetat, fraksi air, n-heksan, etil asetat, klorofoam, aseton,
diklorometan, silika gel untuk kolom, dan kertas saring.
C. Cara Kerja

a. Pemisahan Dengan Plat KLT 20 x 20 cm

Plat KLT

- Plat KLT 20 x 20 cm diaktifkan dalam

oven pada suhu 50°C selama 10 menit.

Chamber
- Eluendimasukkankedalam chamber
- Kertassaringdicelupkankeeluendalam
chamber tertutup dan
ditungguhinggaterbasahi (jenuh)

Plat KLT yang sudah diaktifkan

- Diberi tanda batas bawah dan atas pada plat
- Ditotolkan ekstrak kunyityang
telahdiencerkandenganmetanolpada
batasbawahplat KLT
- Dimasukkan plat KLT menggunakan pinset
ke dalam chamber yang sudah jenuh
dengan uap eluen lalu tutup chamber
- Ditunggu hingga eluen sampai pada batas
atas
- Diambil plat KLT menggunakan pinset lalu
dikering-anginkan
- Diamati warna bercak dibawah sinar
tampak, sinar UV 254 nm dan UV 366
- Ditandai bercak pada plat KLT lalu dikerok

Bercak yang sudah dikerok

- Dilarutkan dalam metanol
- Difiltrasi

Larutanbercakkental
- Ditotolkan pada batasbawah plat KLT 1 x 5
cm
- Dielusidalam chamber yang
telahjenuhdenganeluenawal
- Ditungguhinggaeluenmencapaibatasataselu
si
 - Diambil plat KLT menggunakan pinset lalu
dikering-anginkan
- Diamati warna bercak dibawah sinar UV
254 nm
- Bilaterdapatsatubercakmakadilanjutkan uji
kemurniandengan KLT duadimensi

Hasil

b. PemurnianDengan KLT 2 Dimensi

Larutanbercakkental
- Ditotolkan pada pojokbatasbawah plat
KLT 4 x 4 cm
- Dielusidalam chamber yang
telahjenuhdenganeluenawal
- Ditungguhinggaeluenmencapaibatasata
selusi
- Diambil plat KLT menggunakan pinset
lalu dikering-anginkan
- Diamati warna bercak dibawah sinar
sinar UV 254 nm
- Dihitungnilai Rf bercak
- Diputar 90o agar bercakelusiada di
batasbawah

Chamber
- Dijenuhkandenganeluenkedua yang
lebih polar darieluenpertama
- Plat KLT yang telahdiputar
o
90 dielusikembalidalam chamber yang
jenuhdenganeluenkedua
- Ditungguhinggaeluenmencapaibatasata
selusi
- Diambil plat KLT menggunakan pinset
lalu dikering-anginkan
- Diamati warna bercak dibawah sinar
sinar UV 254 nm
- Dihitungnilai Rf bercak

Hasil