PENGARUH PEMBERIAN KOPI TERHADAP JUMLAH

SPERMATOZOA TIKUS GALUR WISTAR DIABETIK YANG

DIINDUKSI ALOKSAN

HALAMAN JUDUL

PROPOSAL SKRIPSI

Untuk memenuhi sebagian persyaratan

Mencapai derajat Sarjana Kedokteran

Diajukan Oleh:

AHMAD ALRIZALDI
J500160049

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA
2019

i
 SKRIPSI

PENGARUH PEMBERIAN KOPI TERHADAP JUMLAH

SPERMATOZOA TIKUS GALUR WISTAR DIABETIK YANG
DIINDUKSI ALOKSAN

Yang diajukan Oleh:

Ahmad Alrizaldi

J500160049

Telah disetujui oleh Pembimbing Utama Skripsi Fakultas Kedokteran Universitas

Muhammadiyah Surakarta pada Selasa, 10 Desember 2019
HALAMAN PENGESAHAN

Pembimbing Skripsi

Riandini Aisyah, S.Si., M.Sc.

NIK. 1011

Kepala Biro Skripsi

dr. Nur Mahmudah, M.Sc.

NIK. 1769

ii
 PERNYATAAN

Dengan ini penulis menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat
karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu
Perguruan Tinggi manapun. Sepanjang pengetahuan penulis, tidak terdapat karya
atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain yang tertulis
dalam naskah ini, kecuali disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 27 November 2019

Ahmad Alrizaldi

iii
 KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum, Wr. Wb.

Syukur alhamdulillah penulis haturkan atas kehadirat Allah SWT atas
segala rahmat, hidayah, dan karunia-Nya sehingga skripsi ini bisa terselesaikan.
Skripsi ini dengan judul “ Pengaruh Pemberian Kopi terhadap Jumlah
Spermatozoa Tikus Galur Wistar Diabetik yang Diinduksi Aloksan” disusun
sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana di Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Dengan terselesaikannya penyusunan skripsi ini, penulis mengucapkan
terimakasih kepada :
1. Keluarga tercinta, Bapak H.Khairummubin dan Ibu. Hj. Nadiah dan
abang saya Deni Ahmad Salsila yang selalu mendoakan, mendukung
dan menemani di setiap langkah perjalanan hidup dengan cinta dan
kasih sayang tiada henti serta pengorbanan yang dilakukan umtuk saya
setiap waktu.
2. Prof. DR. dr. E.M. Sutrisna, M.Kes. selaku Dekan Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Surakarta sekaligus anggota penguji.
3. dr. Sulistyani, Sp.N selaku Kepala Prodi Fakultas Kedokteran
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
4. dr. Nur Mahmudah, M.Sc selaku Ketua Biro Skripsi Fakultas
Kedokteran Universitas Muhammadiyah Surakarta.
5. Ibu Riandini Aisyah, S.Si., M.Sc. selaku pembimbing yang telah
bersedia meluangkan waktunya untuk memberikan bimbingan.
6. dr. Retno Sintowati, M.Sc. Selaku kepala lab terpadu Fakultas
Kedokteran Universitas Muhmmadiyah Surakarta yang telah memberi
izin serta arahan dalam penggunaan Lab.
7. dr. Shoim Dasuki, M.kes. Selaku pembimbing akademik yang telah
membimbing penulis selama kuliah Di Fakultas Kedokteran Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
8. dr. Devi Usdiana R, M.Sc. selaku kepala penguji, dr. Nurhayani, M.Sc.

iv
 selaku penguji II dan Riandini Aisyah, S.Si., M.Sc. selaku penguji III.
9. Laboran Farmakologi pak Purwanto dan Laboran Pathologi Klinik
mba Ndari.
10. Kelompok payungan skripsi saya Annisa Maulidia, Ayu Rizki Cahyati,
Vivi Nur Fitriana yang selalu memberikan dukungan, doa, dan saling
bekerjasama selama masa skripsi.
11. Sahabat tersayang, Muhammad Irfan Hidayatullah, Muhammad
Dharma Prayogi, Sella Felina, Yuan Hasna, Rizky Febri Lestari, Ayu
Gita Rachmawati, Klaudia Vindy, Qonita Rahmadani, Narita Ayu
Santika, Herdea Safitri, yang telah banyak membantu, memberi
semangat dan motivasi dalam masa perkulihan dan kelancaran proses
penelitian.

12. Keluarga besar ASTROCYTE 2016 yang telah membantu dalam proses
penelitian.
13. Seluruh Civitas Akademi Fakultas Kedokteran Universitas
Muhammadiyah Surakarta yang telah membantu dalam proses
penelitian.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan karya ini masih sangat jauh dari
kata sempurna. Oleh karena itu sangat diharapkan kritik serta saran untuk
meningkatkan karya ini. Semoga karya ini dapat bermanfaat untuk semua pihak
yang membutuhkan.
Surakarta, 12 Desember 2019
Penulis

Ahmad Alrizaldi
J500150034

v
 MOTTO
Diriwayatkan dari Abu Hurairah r.a., beliau berkata, telah bersabda
Rasulullah saw “Telah berfirman Allah Subhanahu wa ta’ala, ‘Aku adalah
sebagaimana prasangka hambaku kepadaku, dan Aku bersamanya ketika dia
mengingatku, dan jika hambaku mengingatku dalam sendirian, maka Aku
mengingatnya dalam diri-Ku sendiri, dan jika dia mengingatku di dalam sebuah
kelompok, (maka) Aku mengingatnya dalam kelompok yang lebih baik dari
kelompok tersebut, dan jika dia mendekat kepada-Ku sejengkal, Aku mendekat
kepadanya sehasta, dan jika dia mendekat kepadaku sehasta, Aku mendekat
kepadanya satu depa, dan jika dia mendatangiku dengan berjalan, Aku
mendatanginya dengan berjalan cepat’
(Hadits diriwayatkan oleh Imam Bukhari, begitu juga oleh Imam Muslim, Imam
Tirmidzi dan Imam Ibnu Majah.)

“Sesungguhnya bersama kesulitan itu pasti ada kemudahan. Maka apabila engkau
telah selesai (dari suatu urusan), tetaplah bekerja keras (untuk urusan lain) dan
hanya kepada Allah engkau berharap.”

-(QS. Al-Insirah: 6-8)-

vi
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL................................................................................................i
HALAMAN PENGESAHAN.................................................................................ii
PERNYATAAN.....................................................................................................iii
KATA PENGANTAR............................................................................................iv
DAFTAR ISI..........................................................................................................vii
DAFTAR GAMBAR..............................................................................................ix
DAFTAR TABEL....................................................................................................x
DAFTAR LAMPIRAN...........................................................................................xi
ABSTRAK.............................................................................................................xii
ABSTRACT.........................................................................................................xiii
BAB 1 PENDAHULUAN.......................................................................................1
A. Latar Belakang...............................................................................................1

B. Rumusan masalah..........................................................................................3

C. Tujuan............................................................................................................3

D. Manfaat..........................................................................................................3

a. Manfaat teoritis..........................................................................................3
b. Manfaat aplikatif.......................................................................................3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA..............................................................................4
A. Kopi...............................................................................................................4

B. Diabetes melitus............................................................................................6

C. Spermatozoa................................................................................................10

D. Tikus Galur Wistar......................................................................................14

E. Hubungan Kopi Terhadap Jumlah Spermatozoa Tikus Galur Wistar.........14

F. Kerangka Konsep........................................................................................16

G. Hipotesis......................................................................................................17

BAB III METODE PENELITIAN........................................................................18

vii
 A. Desain Penelitian.........................................................................................18

B. Tempat dan Waktu Penelitian.....................................................................18

C. Populasi.......................................................................................................18

D. Sampel dan Tehnik Sampling......................................................................18

E. Estimasi Besar Sampel................................................................................18

F. Kriteria Restriksi.........................................................................................19

G. Variabel Penelitian......................................................................................19

H. Definisi Operasional....................................................................................20

I. Alat dan Bahan............................................................................................21

J. Cara Kerja....................................................................................................21

K. Analisa Data................................................................................................24

L. Prosedur kerja..............................................................................................25

M. Kegiatan Pelaksanaan..................................................................................26

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN.......................................27

A. Hasil Penelitian............................................................................................27

B. Pembahasan.................................................................................................29

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN................................................................34

A. Kesimpulan..................................................................................................34

B. Saran............................................................................................................34

DAFTAR PUSTAKA............................................................................................35

viii
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Buah Kopi..............................................................................................5

Gambar 2. Kerangka Konsep.................................................................................16
Gambar 3. Prosedur Kerja......................................................................................25

ix
 DAFTAR TABEL

Tabel 1. Komposisi Kopi.........................................................................................6

Tabel 2. Jadwal Penelitian.....................................................................................26
Tabel 3.Rata-rata jumlah sperma...........................................................................27
Tabel 4. Hasil Analisis Uji LSD............................................................................28

x
 DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Uji Normalitas...................................................................................40

Lampiran 2. Uji Homogeneity of Variances..........................................................41
Lampiran 3. Uji Oneway ANOVA........................................................................42
Lampiran 4. Uji Post-Hoc LSD..............................................................................43
Lampiran 5. Surat Ethical Clearance.....................................................................43
Lampiran 6. Surat Izin Penelitian..........................................................................45
Lampiran 7. Surat Selesai Melaksanakan Penelitian.............................................47

xi
 ABSTRAK
PENGARUH PEMBERIAN KOPI TERHADAP JUMLAH
SPERMATOZOA TIKUS GALUR WISTAR DIABETIK YANG
DIINDUKSI ALOKSAN

Ahmad Alrizaldi, Riandini Aisyah

Fakultas Kedokteran, Universitas Muhammadiyah Surakarta

Latar Belakang: Hiperglikemi pada penderita diabetes melitus mengakibatkan

stres oksidatif yang dapat menganggu pemberian nutrisi melalui pembuluh darah
ke jaringan-jaringan pembentuk spermatozoa sehingga menganggu proses
spermatogenesis pada organ testis. Kopi mengandung kafein dan asam klorogenat
yang berfungsi sebagai antioksidan sehingga dapat memperbaiki abnormalitas
spermatogenesis yang menyebabkan penurunan jumlah spermatozoa normal.

Tujuan: Mengetahui kemampuan kopi dalam memperbaiki jumlah spermatozoa

tikus galur wistar yang diinduksi aloksan.

Metode: Penelitian eksperimental laboratorik yang menggunakan metode post-

test only with control group design. Subjek penelitian ini adalah kopi. Tikus galur
wistar jantan digunakan sebagai sampel. Sejumlah 36 tikus yang dibagi menjadi 6
kelompok terdiri dari: kontrol normal (diberi aquades), kontrol negatif (diinduksi
aloksan + aquades), kontrol positif (diinduksi aloksan + insulin), perlakuan 1
(diinduksi aloksan + kopi 0,054 gram/200 gramBB), perlakuan 2 (diinduksi
aloksan + kopi 0,108 gram/200 gramBB) dan perlakuan 2 (diinduksi aloksan +
kopi 0,162 gram/200 gramBB).Perlakuan dilakukan selama 14 hari, tikus
diterminasi pada hari ke-15. Dilakukan pengambilan sampel kemudian diamati
dan dihitung jumlah spermatozoa.

Hasil: Kopi dengan dosis 0,054 gram/200 gramBB, dosis 0,108 gram/200
gramBB dan dosis 0,162 gram/gramBB dapat meningkatkan jumlah spermatozoa
tikus galur wistar diabetik yang diinduksi aloksan.

Kesimpulan: pemberian kopi dapat meningkatkan jumlah spermatozoa tikus

galur wistar diabetik yang diinduksi aloksan.

Kata Kunci : Jumlah, Spermatozoa, Diabetes, Kopi

xii
 ABSTRACT

THE EFFECT OF COFFEE ADMINISTERATION ON THE QUANTITY

OF SPERMATOZOA OF DIABETIC WISTAR RATS INDUCTED BY
ALOXSAN
Ahmad Alrizaldi, Riandini Aisyah
Medical Faculty, Universitas Muhammadiyah Surakarta

Background : Hyperglycemia in people with diabetes mellitus causes oxidative

stress which can interfere with the provision of nutrients through blood vessels to
the tissues that form spermatozoa so that it interferes with the process of
spermatogenesis in the testicular organs. Coffee contains caffeine and chlorogenic
acid which functions as an antioxidant to improve spermatogenesis abnormalities
which causes decreased number of normal spermatozoa.

Purpose : To determine the ability of coffee in improving the number of

spermatozoa of alloxan induced wistar white rats.

Method : Post-test only laboratory experimental research with control group

design. The subject of this research is coffee. Male Wistar strain rats were used as
samples. A total of 36 male wistar rats were divided into 6 groups that consisted
of: normal control (given aquades), negative control (induced alloxan + aquades),
positive control (induced alloxan + insulin), treatment 1 (induced alloxan + coffee
0.054 gram / 200 gramBB), treatment 2 (induced alloxan + insulin coffee 0.108
gram / 200 gramBB) and treatment 2 (induced alloxan + coffee 0.162 gram / 200
gramBB). Treatment was carried out for 14 days, on the 15th day rats were
terminated. Sampling was then observed and the number of spermatozoa counted.

Results : Showed that Coffee with a dose of 0.162 gram / 200 gramBB, dose
0,108 gram/200 gramBB and dose 0,162 gram/gramBB increased the
spermatozoa of alloxan induced diabetic wistar strain rats.

Conclusion : Coffee administration can increase the number of spermatozoa of

alloxan-induced diabetic galur wistar rats.

Keywords: Quantity, Spermatozoa, Diabetes, Coffee

xiii
 BAB 1
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang
Infertilitas adalah ketidakmampuan untuk hamil sesudah 12 bulan
atau 6 bulan usia pernikahan tanpa mengunakan kontrasepsi dan
melakukan hubungan seksual aktif (Sa’adah & Purnomo, 2013).
Infertilitas terjadi pada laki-laki sebanyak 50% baik sebagai problem
primer maupun sebagai problem kombinasi dengan pasangan wanitanya.
Infertilitas pada pria disebabkan oleh rendahnya motilitas sperma, jumlah
sperma dan kelainan morfologi sperma (Wael & Winarto, 2014).
Salah satu penyakit yang menyebabkan infertilitas adalah diabetes
melitus. Pada tahun 2014 WHO melaporkan terdapat 422 juta orang
terkena DM dan diperkirakan akan meningkat menjadi 300 juta pada tahun
2025 (Temidato, 2018). Indonesia menempati negara ke 7 di dunia dengan
orang dewasa diabetes terbanyak sejumlah 10 juta orang setelah China,
India, Amerika, Brazil, Rusia, dan Mexico (IDF, 2015). Tingginya kadar
glukosa darah atau hiperglikemi pada penderita diabetes melitus berperan
dalam kerusakan sel dengan cara peningkatan reactive oxygen spesies
(ROS) yang dapat mengakibatkan stres oksidatif sehinggga menyebabkan
kerusakan endotel pembuluh darah dan mikroangiopati yang dapat
menganggu pemberian nutrisi melalui pembuluh darah ke jaringan-
jaringan pembentuk spermatozoa sehingga menganggu proses
spermatogenesis pada organ testis. Testis dalam proses reproduksi
mempunyai dua fungsi utama yaitu memproduksi hormon dan
spermatozoa. Kedua fungsi tersebut secara anatomi berlangsung terpisah
yaitu hormon testosteron dihasilkan oleh sel Leydig sedangkan sel
spermatozoa dihasilkan oleh sel epitel tubulus seminiferus. Apabila sel-sel
pada testis terganggu pasti tahapan spermatogenesis juga tidak sempurna.
Oleh karena itu sangat erat kaitannya antara diabetes melitus dengan
kesuburan pada pria karena stres oksidatif yang ditimbulkan akibat
diabetes melitus dipastikan dapat merusak testis sebagai organ yang
berperan dalam proses terjadinya spermatogenesis sehingga produksi

1
 2

spermatozoa berkurang, yang pada akhirnya berujung pada masalah

infertilitas (Adelati et al,. 2016).
Pada penelitian sebelumnya, antioksidan terbukti dapat
menurunkan kadar radikal bebas dalam tubuh. Kopi merupakan salah satu
yang memiliki antioksidan yang tinggi (Isnindar et al., 2017). Menurut
Edwan Giovanucci, salah satu peneliti dari Harvard menunjukan bahwa
kopi memiliki antioksidan yang ternyata lebih banyak dari pada
kebanyakan sayur dan buah, kopi merupakan sumber antioksidan nomor
satu dan paling tinggi dari semua jenis makanan (Tertia, 2016).
Selain kafein, di dalam kopi juga terdapat asam klorogenat, yaitu
salah satu jenis senyawa polifenol yang menjadi antioksidan kuat didalam
kopi (Isnindar et al., 2017). Asam klorogenat merupakan salah satu
senyawa kimia yang mempunyai aktivitas antioksidan dan terdapat dalam
biji kopi dalam jumlah yang cukup banyak (Kuncoro et al., 2018).
Flavonoid sebagai antioksidan dapat menurunkan kadar radikal bebas
dalam tubuh, memperbaiki sel-sel dalam tubuh dan dapat memperbaiki
infertilitas melalui beberapa mekanisme (Setyawan et al., 2017). Salah
satu mekanisme yang digunakan yaitu peningkatan aktivasi gen anti
oksidan Nuclear Factor Erythroid 2 (NF-E2) - Related Factor 2 [Nrf2]
sehingga terjadi pelepasan hormon Superoksida Dismutase (SOD).
Peningkatan hormon SOD menyebabkan penurunan kadar radikal bebas
dalam tubuh sehingga akan terjadi perbaikan dari spermatogenesis
[CITATION Sum121 \l 1057 ]. Menurut Nur Rusydah Hammam dan Ahmad
Zulfa Juniarto (2008), dalam penelitiannya “pengaruh pemberian minyak
jintan hitam (Niggella sativa) terhadap jumlah spermatozoa mencit
diabetes melitus yang diinduksi aloksan”, diabetes melitus menyebabkan
penurunan LH dan FSH pada akhirnya membuat ketidaksempurnan
spermatogenesis dan maturasi spermatozoa di epididimis, pada kondisi
diabetik menyebabkan terjadinya stress oksidatif yang memicu terjadinya
kerusakan mitokondria DNA, mengakibatkan peningkatan apoptosis
spermatozoa.
 3

Berdasarkan latar belakang tersebut, maka akan dilakukan

penelitian dengan menggunakan hewan uji tikus jantan untuk melihat dan
membandingkan pengaruh pemberian kopi terhadap jumlah spermatozoa.
B. Rumusan masalah
Dari uraian latar belakang, timbul permasalahan menarik untuk
diteliti yaitu:
Apakah terdapat pengaruh kopi terhadap jumlah spermatozoa tikus
jantan galur Wistar diabetik yang diinduksi aloksan?
C. Tujuan
1. Peneliti ingin mengetahui pengaruh pemberian kopi terhadap jumlah
spermatozoa tikus galur wistar diabetik yang diinduksi aloksan.
2. Peneliti ingin mengetahui dosis efektif pemberian kopi yang mampu
meningkatkan jumlah spermatozoa tikus galur wistar diabetik yang
diinduksi aloksan.
D. Manfaat
a. Manfaat teoritis
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan bukti ilmiah
mengenai pengaruh kopi terhadap jumlah spermatozoa tikus galur
wistar diabetik yang diinduksi aloksan.
b. Manfaat aplikatif
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi lebih
lanjut tentang manfaat pemberian kopi terhadap jumlah spermatozoa.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. Kopi
1. Definisi
Kopi merupakan salah satu jenis tanaman perkebunan yang sudah lama
dibudidayakan dan memiliki nilai ekonomis yang lumayan tinggi. Konsumsi
kopi dunia mencapai 70% berasal dari spesies kopi arabika dan 26% berasal
dari spesies kopi robusta. Kopi berasal dari Afrika, yaitu daerah pegunungan
di Etopia. Namun, kopi sendiri baru dikenal oleh masyarakat dunia setelah
tanaman tersebut dikembangkan di luar daerah asalnya, yaitu Yaman di
bagian selatan Arab, melalui para saudagar Arab (Rahardjo, 2012).
Sejarah mencatat bahwa penemuan kopi sebagai minuman berkhasiat
dan berenergi. Pertama kali ditemukan oleh Bangsa Etiopia di benua Afrika
sekitar 3000 tahun yang lalu. Kopi kemudian terus berkembang hingga saat
ini menjadi salah satu minuman paling populer di dunia yang dikonsumsi
oleh berbagai kalangan masyarakat. Indonesia sendiri telah mampu
memproduksi lebih dari 400 ribu ton kopi per tahun nya. Disamping rasa
dan aromanya yang menarik, kopi dapat menurunkan insidens dari berbagai
macam penyakit diantaranya diabetes mellitus tipe 2 dan kanker (Swastika,
2012; Subeki dan Muhartono, 2015 ; Ludwid et al., 2015).
Senyawa terpenting yang terdapat dalam kopi adalah kafein. Kafein
(1,3,7-trimethylxanthine) merupakan golongan methylxanthine seperti
theophylline (1,3-dimethylxanthine) dan theobromine (3,7-
dimethylxanthine). Kafein pada suhu ruang berupa bubuk tidak berwarna,
tidak berbau dan memiliki rasa agak pahit. Kafein larut dalam air mendidih
tetapi pada suhu ruang, pelarut terbaik adalah kloroform (Lestari, 2018).
2. Taksonomi
Kingdom : Plantae
Sub kingdom : Tracheobionita
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Sub Kelas : Astridae

4
 5

Ordo : Rubiaceace
Genus : Coffea
Spesies : Coffea robusta
Rahardjo (2012)

Gambar 1. Buah Kopi

(Yusnan, 2012)
3. Jenis jenis kopi
a. Kopi Arabika
kopi ini tumbuh sangat baik di daerah dengan ketinggian 1.000-
2.100 di atas permukaan laut (Rukmana, 2014). Biji kopi arabika
berbentuk agak memanjang, bidang cembungnya tidak terlalu tinggi,
celah tengah dibagian datar tidak lurus memanjang kebawah tetapi
berlekuk. Untuk biji yang sudah dikeringkan, celah tengah terlihat
putih (Panggabean, 2011).
b. Kopi Liberika
Karakteristik biji kopi Liberika hampir sama dengan jenis Arabika,
kelebihannya adalah biji kopi ini lebih tahan dibanding kopi jenis
Arabika (Rukmana, 2014).
c. Kopi Canephora (Robusta)
Kopi robusta juga disebut kopi Canephora. Kopi robusta memiliki
biji yang agak bulat, lengkungan biji lebih tebal dibandingkan kopi
arabika dan garis tengah dari atas kebawah hampir rata (Pangabean,
2012). kopi Robusta, areal perkebunannya di Indonesia relatif luas
karena dapat tumbuh baik pada daerah yang lebih rendah. Saat ini,
 6

kopi Robusta merupakan jenis kopi yang paling banyak dikonsumsi

(Rukmana, 2014).
4. Komposisi
Senyawa terpenting yang terdapat dalam kopi adalah kafein.
Kafein (1,3,7-trimethylxanthine) merupakan golongan methyxanthine
seperti theophylline (1,3- dimethylxanthine) dan theobromine (3,7-
dimethylxanthine). Kafein pada suhu ruang berupa bubuk tidak bewarna,
tidak berbau dan memiliki rasa agak pahit, kafein larut dalam air
mendidih tetapi pada suhu ruang, pelarut terbaik adalah kloroform
(Lestari,2018).
Kafein termasuk salah satu henis alkaloid yang banyak terdapat
dalam biji kopi, daun teh, dan biji coklat. Efek berlebihan mengkonsumsi
kafein dapat menyebabkan gugup, tremor, insomnia, hipertensi, mual dan
kejang. Kafein sebagai stimulan tingkat sedang sering diduga
menyebabkan kecanduan. Kafein hanya dapat menimbulkan kecanduan
jika dikonsumsi dalam jumlah yang banyak dan rutin (Maramis et al.,
2013).
Tabel 1. Komposisi Kopi

Komponen Persentase kandungan Persentase kandungan

biji kopi kopi bubuk
Mineral 4.0-4.5 4.6-5.0
Kafein 1.6-2.4 2.0
Trigonelline 0.6-0.75 0.3-0.6
Lipid 9.0-13.0 6.0-11.0
Total asam klorogenat 7.0-10.0 3.9-4.6
Asam alifatik 1.5-2.0 1.0-1.5
Oligosakarida 5.0-7.0 0-3.5
Total polisakarida 37.0-47.0 -
Asam amino 2.0 0
Protein 11.0-13.0 13.0-15.0
Asam humin - 16.0-17.0
(Panggabean, 2011)
B. Diabetes melitus
 7

1. Definisi
Menurut American Diabetes Association (ADA) tahun 2013,
diabetes melitus adalah suatu penyakit metabolik yang ditandai dengan
adanya hiperglikemia yang terjadi karena pankreas tidak mampu
mensekresi insulin, gangguan kerja insulin, ataupun keduanya.
Hiperglikemia kronik pada diabetes berhubungan dengan kerusakan
jangka panjang, disfungsi atau kegagalan beberapa organ tubuh, terutama
mata, ginjal, saraf, jantung, dan pembuluh darah.
2. Faktor risiko Diabetes melitus
Yang termasuk faktor risiko DM menurut Perkeni (2011) yaitu:
a. Faktor risiko yang tidak bisa dimodifikasi (unmodifiable risk factor)
adalah faktor risiko yang sudah ada dan melekat pada seseorang
sepanjang kehidupannya. Sehingga faktor risiko tersebut tidak dapat
dikendalikan oleh dirinya. Faktor risiko DM yang tidak dapat
dimodifikasi antara lain:
1) Ras dan etnik
2) Riwayat keluarga dengan DM
3) Usia
4) Riwayat kelahiran bayi lebih dari 4000 gram
5) Riwayat kelahiran bayi kurang dari 2,5 kg
b. Faktor risiko yang bisa dimodifikasi :
1) Berat badan berlebih (IMT > 23 kg/m2).
2) Obesitas abdominal
3) Kurangnya aktivitas fisik
4) Hipertensi (>140/90 mmHg)
5) Dislipidemia (HDL < 35 mg/dL dan atau trigliserid > 250 mg/dL)
6) Diet tak sehat
3. Klasifikasi Diabetes Melitus
Diabetes melitus dapat diklasifikasikan dalam klasfikasi umum
sebagai berikut :
a. Diabetes melitus tipe 1 biasanya mengarah ke defisiensi insulin absolut
yang disebabkan oleh kerusakan pada sel ß pankreas.
 8

b. Diabetes melitus tipe 2 disebabkan oleh resistensi insulin yang

menyebabkan kerusakan progresif pada sekresi hormon insulin.
c. Diabetes melitus gestasional terdiagnosa pada kehamilan trimester
kedua atau ketiga dan biasanya tidak permanen. Setelah melahirkan
akan kembali dalam keadaan normal.
d. Diabetes melitus tipe lain, seperti diabetes neonatal, adanya penyakit
cystic fibrosis, pengaruh obat atau pasca transplantasi (ADA, 2015).
4. Patofisiologi Diabetes Melitus
a. Patofisiologi DM tipe 1
Terjadinya DM tipe 1 utamanya disebabkan oleh defisiensi insulin.
Defisiensi insulin dapat menyebabkan gangguan metabolisme lipid,
protein, dan glukosa (Raju dan Raju, 2010 dalam Ozougwu et al.,
2013). Gangguan metabolisme lipid terjadi karena meningkatnya asam
lemak bebas dan benda keton sehingga penggunaan glukosa berkurang
dan menyebabkan hiperglikemia. Gangguan metabolisme protein
terjadi karena meningkatnya kecepatan proteolisis yang menyebabkan
asam amino dalam plasma tinggi dan peningkatan proses katabolisme
protein. Gangguan metabolisme glukosa terjadi karena peningkatan
proses glukoneogenesis sehingga glukosa hepatik meningkat.
b. Patofisiologi DM tipe 2
Diabetes melitus tipe 2 bukan disebabkan oleh kurangnya sekresi
insulin, namun karena sel sel sasaran insulin gagal atau tidak mampu
merespon insulin secara normal. Keadaan ini lazim disebut sebagai
“resistensi insulin”. Resistensi insulin banyak terjadi akibat dari
obesitas dan kurang nya aktivitas fisik serta penuaan. Defisiensi fungsi
insulin pada penderita diabetes melitus tipe 2 hanya bersifat relatif dan
tidak absolut. Pada awal perkembangan diabetes melitus tipe 2, sel B
menunjukan gangguan pada sekresi insulin fase pertama,artinya sekresi
insulin gagal mengkompensasi resistensi insulin. Apabila tidak
ditangani dengan baik pada perkembangan selanjutnya akan terjadi
kerusakan sel-sel B pankreas. Kerusakan sel-sel B pankreas akan terjadi
secara progresif seringkali akan menyebabkan defisiensi insulin,
 9

sehingga akhirnya penderita memerlukan insulin eksogen. Pada

penderita diabetes melitus tipe 2 memang umumnya ditemukan kedua
faktor tersebut, yaitu resistensi insulin dan defisiensi insulin (Fatimah,
2015).
5. Gejala Diabetes melitus
Beberapa gejala DM tipe 2 yaitu sering berkemih (poliuria),
meningkatnya rasa haus (polidipsia), banyak makan (polifagia),
kehilangan berat badan secara drastis, pandangan kabur, dan merasa
kelelahan (fatigue). Selain itu, ditandai dengan sering buang air kecil pada
malam hari (nokturia) dan lesu (lethargy) (Dipiro et al., 2015). Gejala
yang dikeluhkan pada penderita antara lain kesemutan, penurunan berat
badan, serta 3 gejala khas DM yaitu polidipsia, poliuria, dan polifagia
(Hakim et al., 2010 dalam Fatimah, 2015).
6. Kriteria diagnosis Diabetes Mellitus
Kriteria Diagnosis Diabetes Melitus adalah sebagai berikut (ADA, 2015) :
a. Kadar glukosa darah puasa ≥ 126 mg/dL. Puasa adalah kondisi tidak
ada asupan kalori minimal 8 jam.
b. Glukosa plasma 2 jam setelah makan ≥ 200 mg/dL. Tes Toleransi
Glukosa Oral (TTGO) adalah pemeriksaan glukosa setelah mendapat
pemasukan glukosa yang setara dengan 75 gram glukosa anhidrat
yang dilarutkan dalam air.
c. Nilai A1C 6,5%. Dilakukan pada sarana laboratorium yang telah
terstandadisasi dengan baik.
d. Pemeriksaan glukosa plasma sewaktu ≥ 200 mg/dl dengan keluhan
klasik.
7. Komplikasi
DM mempengaruhi sistem reproduksi pria pada level pra testis,
testis dan post testis.
a. Efek Pre Testikular
Beberapa penelitian melaporkan kaitan DM dengan dengan
gangguan hypothalamic–pituitary–gonadal (HPG) axis, sehingga
mengubah konsentrasi testosteron, hormon perangsang FSH dan LH
pada pria. DM secara signifikan menekan HPG axis dan menurunkan
 10

respon FSH dan LH untuk menstimulasi pelepasan Gonadotropin

Realising Hormone (GnRH) pada pasien dengan DM. Penekanan
jumlah testosteron berakibat pada berkurangnta fungsi sel leydig (Nna
et al., 2017).
b. Efek testikular
Kehadiran antioksidan dalam testis memastikan bahwa peristiwa
terpenting dalam testis yaitu steroidogenesis dan spermatogenesis
tidak mendapatkan dampak buruk dari OS. Antioksidan dalam testis
ini sangat penting karena OS saat ini dianggap salah satu penyebab
utama yang mendasari gangguan testis yang disebabkan karena
berbagai kondisi termasuk DM (Nna et al., 2017). Peningkatan hasil
reduksi dari beberapa gula (melalui proses glikolisis dan polyol) pada
keadaan DM menyebabkan peningkatan ROS yang berpengaruh pada
penurunan apoptosis sel spermatogenik (Sulistiyoningrum et al.,
2012).
c. Post testikular
Terdapat hubungan DM dengan dorongan seksual yang buruk
sebagai akibat dari fungsi ereksi yang buruk. DM mengurangi
konsentrasi cGMP penis, memperpanjang mount, latensi intromisis
dan ejakulasi. Parameter penurunan perilaku sosial berhubungan
dengan penurunan sel leydig sekresi sel testosteron. Penelitian lain
yang dilakukan pada tikus jantan diabets menunjukkan subfertilitas
ketika dikawinkan (Nna et al., 2017).
C. Spermatozoa
1. Definisi
Spermatozoa merupakan suatu sel yang sangat spesial dan padat
yang tidak lagi mengalami pembelahan atau pertumbuhan, spermatozoa
berasal dari gonosit yang menjadi spermatogonium, spermatosit primer dan
sekunder dan selanjutnya berubah menjadi spermatid dan akhirnya berubah
menjadi spermatozoa (Syauqy, 2014).
2. Spermatogenesis
 11

Spermatogenesis merupakan suatu proses pembentukan gamet

pada pria berupa sperma. Tubulus seminiferus adalah tempat terjadinya
proses pembentukannya. Pembentukan sperma ini dimulai pada saat
pubertas, ketika produksi hormone gonadotropin sudah cukup maksimal
untuk merangsang pembentukan spermatozoa (Syauqy, 2014).
Awal mulanya, ketika manusia berada di dalam kandungan, sel-sel
germinal primordial tampak pada tingkat perkembangan awal di antara sel
endoderm di dinding kantung kuning telur dekat allontosis. Kemudian pada
minggu ke-3 masa janin, mereka akan bermigrasi ke rigi urogenital yang
saat itu tumbuh di daerah lumbal. Semenjak dari dalam kandungan sampai
masa pubertas nanti, sel-sel germinal primordial ini akan mengalami fase
istirahat, sampai suatu saat ketika lumen tubulus seminiferus telah sempurna
dibentuk pada pubertas, mereka akan berdiferensiasi menjadi
spermatogonia. Spermatogonia terdiri atas 2 tipe yaitu spermatogonia tipe A
dan spermatogonia tipe B (Syauqy, 2014).
Spermatogonia tipe A adalah spermatogonia awal yang dibentuk,
spermatogonia ini akan mengalami serangkaian fase pembelahan secara
mitosis, dan akhirnya membentuk spermatogonia tipe B. Spermatogonia tipe
B ini kemudian yang akan bergerak ke lumen, termodifikasi dan membesar
membentuk spermatosit primer. Spermatosit primer nantinya akan semakin
ke arah lumen sambil membelah secara miosis menjadi spermatosit
sekunder. Pada fase miosis pertama, proses yang berlangsung cukup lama
adalah pada tahap profase I, yakni sekitar 22 hari. Sedangkan proses
selanjutnya yakni metafase, anafase dan telofase berlangsung dengan cepat.
Setelah terbentuk spermatosit sekunder, alamiahnya ia akan langsung
membelah kembali secara miosis (miosis II) menjadi spermatid. Spermatid
yang dihasilkan sekarang telah haploid, atau memiliki setengah dari
kromosom induknya (spermatosit primer). Langkah selanjutnya adalah
tahap dimana spermatid berdiferensiasi menjadi spermatozoa (Syauqy,
2014).
Akhir dari spermatogenesis adalah spermatozoa yang haploid (n),
dimana satu spermatosit primer menghasilkan empat spermatozoa. Proses
 12

ini berlangsung di dalam testis lebih kurang selama 64 hari, dimana

sebenarnya spermatozoa yang terbentuk adalah sekitar 300 juta sel
spermatoza baru setiap hari (Syauqy, 2014).
3. Morfologi sperma
Spermatozoa memiliki 3 bagian utama, yaitu : kepala, leher, dan
ekor dengan panjang kurang lebih 50 mikron. Kepala spermatozoa
bentuknya bulat telur dengan ukuran panjang 5 mikron, diameter 3 mikron
dan tebal 2 mikron yang terutama dibentuk oleh nukleus yang mengandung
informasi genetik sifat penurunan ayah dalam molekul DNA. Pada bagian
anterior kepala spermatozoa terdapat akrosom, suatu struktur yang
berbentuk topi yang menutupi dua per tiga bagian anterior kepala dan
mengandung sejumlah enzim hidrolitik. Enzim tesebut terdiri dari
hialuronidase, akrosin, dan Corona Penetrating Enzim (CPE) yang semuanya
penting untuk penembusan ovum (sel telur) pada proses fertilisasi (Syauqy,
2014).
Ekor dibedakan atas 3 bagian yaitu bagian tengah (midpiece),
bagian utama (principle piece) dan bagian ujung (endpiece). Panjang ekor
seluruhnya sekitar 55 mikron dengan diameter yang makin ke ujung makin
kecil: di depan 1 mikron, di ujung 0,1 mikron. Panjang bagian tengah: 5-7
mikron, tebal 1 mikron; bagian utama panjang 45 mikron, tebal 0,5 mikron
dan bagian ujung panjang 4-5 mikron, tebal 0,3 mikron. Bagian ekor tidak
bisa dibedakan dengan mikroskop cahaya tetapi harus dengan mikroskop
elektron (Syauqy, 2014).
Pada bagian midpiece sperma, dijumpai adanya struktur
mitokondria yang berfungsi sebagai pembangkit energi pada spermatozoa.
Bagian principle piece sperma dibungkus oleh sarung fibrous (fibrous
sheath) yang perbatasannya disebut anulus. Sarung fibrous bentuknya
terdiri dari kolom ventral dan dorsal yang masingmasing melalui rusuk-
rusuk. Ke arah sentral ada semacam tonjolan yang memegangi cincin
nomor 3, 8 dari aksonema. Keduanya (tahanan rusuk dan pegangan cincin
aksonema) memberikan gerak tertentu (Syauqy, 2014).
4. Kandungan sperma
 13

Zat yang terkandung dalam semen, ialah sebagai berikut

(Susilowati, 2011; Khaidir, 2006)
a. Spermatozoa mengandung phospor, nitrogen dan sulfur yang banyak.
Sebagian phospor berhubungan dengan DNA, sedangkan sulfur berasal
dari komponen protein inti dan keratinoid pada bagian ekor
b. Fruktosa, dihasilkan vesicula seminalis, berada dalam plasma semen.
Berfungsi untuk sumber energi bagi spermatozoa dalam bergerak. Sifat
pernafasannya yaitu anaerobis.
c. Asam sitrat, spermin, seminin, enzim posfatase asam, glukorunidase,
lisozim dan amilase. Semua dihasilkan prostat. Asam sitrat belum jelas
peranan, dikira untuk menggumpalkan semen setelah eyakulasi.
Spermin yang memberi bau khas, seminin untuk merombak
(lysis);sehingga semen mengencer, dan juga untuk mengencerkan lendir
cervix betina; sedangkan enzim-enzim lain berperanan dalam
memelihara atau memberi nutrisi bagi spermatozoa di luar tubuh jantan.
d. Prostaglandin, dihasilkan vesicula seminalis dan prostat. Peranannya
untuk melancarkan pengangkutan spermatozoa dalam saluran kelamin
jantan dan betina, di antaranya dengan mengurangi gerakan uterus,
merangsang kontraksi otot polos saluran kelamin jantan waktu
eyakulasi, dan juga untuk vasodilatasi (mengembangkan pembuluh
darah).
e. Elektrolit, terutama Na, K, Zn, Mg. Dihasilkan prostat dan vesicula
seminalis. Untuk memelihara pH plasma semen.
f. Enzim pembuahan: nyaluronidase, neuroaminidase, protease mirip
tripsin, protease seperti kimotripsin. Enzim pembuahan ini sebagian
terdapat di akrosom spermatozoa (hyaluronidase, protease mirip
tripsin), sebagian terdapat dalam plasma semen, dihasilkan oleh
kelenjar-kelenjar (terutama t:rotease mirip kimotripsin). Enzim
pembuahan ini selama masih berupa eyakulat (artinya belum mendapat
reaksi dari saluran kelamin betina) dalam keadaan nonaktif, oleh
hadirnya dalam plasma semen itu zat inhibitor.
 14

g. Inhibitor, dihasilkan oleh kelenjar-kelenjar kelainan jantan dan

terkandung dalam. plasma semen. Inhibitor itu terutama terhadap
hyaluronidase, protease mirip tripsin, dan protease mirip kimotripsin.
h. Hormon: testosteron,. FSH (follicle stimulating hormone) dan LH
(luteinizing hormone). Ketiganya berasal dari testis; yang dua.
Belakangan gonadotropin yang datang ke testis berasal dari hipofisa.
i. Zat organis lain, seperti asam amino, protein, dan lemak. Asam amino
yang utama dan jadi ciri semen ialah tirosin dan asam glutarnat, sedang
protein yang utama ialah karnitin. Zat organis ini berasal dari testis,
saluran dan kelenjar. Protein, seperti kamitin, dihasilkan vesicula
seminalis.
D. Tikus Galur Wistar
Klasifikasi tikus galur wistar yang digunakan dalam percobaan:
Filum : Chordata
Subfilum : Vertebrata
Classis : Mammalia
Subclassis : Placentalia
Ordo : Rodentia
Famili : Muridae
Genus : Rattus
Spesies : Rattus norvegicus (Lestari, 2018)
Menurut Adiyati (2011), hewan coba merupakan hewan yang dikembang
biakkan untuk digunakan sebagai hewan uji coba. Tikus memiliki karakteristik
genetik yang unik, mudah berkembang biak, murah, serta mudah untuk
mendapatkannya, oleh karena itu tikus sering digunakan pada berbagai macam
penelitian medis.
E. Hubungan Kopi Terhadap Jumlah Spermatozoa Tikus Galur Wistar
Kopi merupakan salah satu sumber antioksidan dari tumbuh-tumbuhan
dengan kandungan senyawa kafein yang merupakan alkaloid xantin dan asam
klorogenat yang memiliki aktivitas antioksidan yang tinggi. Selain kafein, di
dalam kopi juga terdapat chlorogenic acid, yaitu salah satu jenis senyawa
polyphenol yang menjadi antioksidant kuat didalam kopi (Setyani et al., 2017).
 15

Antioksidan adalah senyawa yang mempunyai struktur molekul yang

dapat memberikan elektronnya kepada molekul radikal bebas tanpa tergangu
sama sekali fungsinya dan dapat memutus reaksi berantai dari radikal bebas.
Terdapat beberapa macam antioksidan salah satu nya adalah antioksidan alami
yang dapat diperoleh dari tumbuhan dan hewan, yaitu tokoferol, vitmain c,
betakaroten, flavonoid dan senyawa fenolik. Salah satu senyawa yang dapat
memprbaiki jumlah spermatozoa adalah flavonoid (Ciptaningsih, 2012).
Mekanisme kerja antioksidan pada flavonoid kopi bisa secara langsung
maupun secara tidak langsung. Flavonoid secara langsung adalah dengan
mendonorkan ion hidrogen sehingga dapat menetralisir efek toksik dari radikal
bebas (Sumardika & Jawi 2012). Flavonoid secara tidak langsung yaitu dengan
meningkatkan ekspresi gen antioksidan endogen melalui beberapa mekanisme.
Salah satu mekanisme peningkatan ekspresi gen antioksidan adalah melalui
aktivasi (Nrf2) sehingga terjadi peningkatan gen yang berperan dalam sintesis
enzim antioksidan endogen seperti misalnya gen SOD (Sumardika & Jawi,
2012). Kinerja flavonoid dalam tubuh juga mampu berikatan dengan reseptor
estrogen alfa (REα) pada testis dan epididimis yang dapat menggantikan fungsi
estrogenik dan bekerja sama dengan testosteron untuk pematangan
spermatozoa [CITATION Placeholder1 \l 1057 ].
 16

F. Kerangka Konsep

kopi

DM

1. Asam
kloregenat
2. Flavonoid
Radikal bebas

Antioksidan
ROS

Kerusakan endotel
mikroangiopati
pembuluh darah

Terganggu nya pemberian

nutrisi dalam proses
pembentukan spermatozoa

Penurunan jumlah
Keterangan : spermatozoa

: Diteliti

: Dihambat

Gambar 2. Kerangka Konsep

 17

G. Hipotesis
H0 : kopi tidak dapat meningkatkan jumlah spermatozoa tikus Galur Wistar
diabetik yang diinduksi aloksan.
H1 : Kopi dapat meningkatkan jumlah spermatozoa tikus galur Wistar diabetik
yang diinduksi aloksan.
 BAB III
METODE PENELITIAN

A. Desain Penelitian
Penelitian ini bersifat ekperimental laboratorium dengan rancangan
posttest only control group design.
B. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini direncanakan dilakukan di bulan Oktober 2019. Hewan
uji diperoleh dari sublaboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran UMS.
Proses ekstraksi dan perlakuan hewan uji juga dilakukan di sublaboratorium
Farmakologi Fakultas Kedokteran UMS. Visualisasi jumlah sperma
dilakukan di sublaboratorium Farmakologi dan sublaboratorium Patologi
Klinik Fakultas Kedokteran UMS.

C. Populasi
1. Populasi target
Populasi target dalam penelitian ini adalah tikus jantan galur wistar.
2. Populasi aktual
Populasi aktual dalam penelitian ini adalah tikus jantan galur
wistar yang diinduksi aloksan menjadi keadaan hiperglikemia.
D. Sampel dan Tehnik Sampling
Pada penelitian ini, sampel yang akan menjadi fokus penelitian
adalah tikus yang mengalami hiperglikemia. Teknik pengambilan sampel
yang digunakan dalam penelitian ini adalah purposive sampling yaitu
dengan cara memilih tikus jantan galur wistar yang sehat, memiliki berat
antara ± 140−200 gram, dan berumur 2-3 bulan.
E. Estimasi Besar Sampel
Jumlah sampel yang digunakan dalam penelitian ini dibagi menjadi
6 kelompok. Sampel diambil dari perhitungan jumlah sampel ditentukan
bedasarkan rumus Federer sebagai berikut:

Rumus Federer : x (t-1) ≥ 15

(n-1)

Keterangan : n = jumlah sample tiap kelompok

18
 19

t = jumlah kelompok
Banyak kelompok : 6 kelompok ( t = 6)
Sample tiap kelompok : ( n - 1 ) x ( t - 1 ) ≥ 15
( n - 1 ) x ( 6 -1 ) ≥ 15
( n – 1 ) x 5 ≥ 15
5n – 5 ≥ 15
n ≥ ( 15 + 5) / 5
n≥4
Penghitungan dengan menggunakan rumus federer didapatkan jumlah
tikus 4 ekor per kelompok. Jumlah sampel yang digunakan penulis minimal 4
ekor tikus per kelompok. Selama penelitian kemungkinan tikus mengalami
kematian dan sakit cukup besar sehingga jumlah sampel ditambah dua ekor.
Penulis menggunakan 6 tikus per kelompok, sehingga jumlah keseluruhan
tikus dalam penelitian ini adalah 36 ekor tikus. Pengelompokan dilakukan
secara acak atau random pada 6 kelompok uji.
F. Kriteria Restriksi
1. Kriteria Inklusi
a. Berumur 2-3 bulan.
b. Tikus jantan.
c. Berat badan ± 140−200 gram.
d. Sehat, tidak cacat, dan mempunyai aktifitas normal.
2. Kriteria Eksklusi
a. tikus jantan stres saat penelitian.
b. tikus jantan mati saat penelitian.
c. tikus jantan sakit saat penelitian.

G. Variabel Penelitian
1. Variabel Bebas
Variabel bebas dalam penelitian ini adalah pemberian kopi dengan
berbagai dosis perlakuan.
 20

2. Variabel Terikat
Variabel terikat pada penelitian ini adalah jumlah spermatozoa
tikus galur wistar yang sebelumnya sudah mengalami diabetes.

3. Variabel Luar
a. Variabel terkendali
Jenis kelamin, umur, suhu udara, berat badan, jenis makanan dan
minuman tikus semua disamakan.
b. Variabel tidak terkendali
Kondisi psikologis hewan uji (stress), reaksi hipersensitivitas, imunitas
hewan percobaan, abnormalitas spermatogenesis.

H. Definisi Operasional
1. Kopi
Kopi adalah sejenis minuman yang berasal dari proses pengolahan
dan ekstraksi biji tanaman kopi yang dikeringkan kemudian dihaluskan
menjadi bubuk dan diseduh dengan air panas. Kopi yang digunakan
dalam penelitian ini adalah kopi arabika yang berasal dari Provinsi
Lampung. Pemberian kopi diberikan selama 14 hari dan dibagi menjadi 3
dosis pemberian yaitu dengan volume pemberian 0,054 gram/200 gram
BB tikus, 0,108 gram/ 200 gram BB tikus, dan 0,162 gram/200 gram BB
tikus. (Ohnaka, et al., 2012).
Alat ukur : timbangan
Satuan : gram
Skala : rasio
2. Jumlah sperma
Jumlah spermatozoa adalah bentuk dari spermatozoa. Pengamatan
jumlah spermatozoa dilakukan pada hari ke-14 dengan cara memisahkan
kauda epididimis dengan memotong bagian proksimal corpus epididimis
dan bagian distal vas deferens. Dilanjutkan dengan pembuatan preparat
dengan pewarnaan Giemsa. Dilakukan pemeriksaan menggunakan
mikroskop dengan pembesaran 400X. Dihitung semua spermatozoa
dengan perkiraan konsentrasi spermatozoa di lakukan dengan
 21

memperkirakan/menghitung jumlah rata-rata spermatozoa pada dua

lapang pandang (400x) dan hasilnya dikalikan dengan 10 5. Misalnya
didapatkan jumlah rata-rata spermatozoa 40/LPB, maka perkiraan
konsentrasi : 40 x 105 = 4.106/ml Perhitungan ini menurut pedoman WHO
92/99 (Wibisono, 2010).
Alat ukur : mikroskop
Satuan : ekor
Skala : rasio
I. Alat dan Bahan
1. Pembuatan kopi
a. Alat : kompor listrik, panci, gelas ukur dan pengaduk
b. Bahan : air dan serbuk kopi
2. Perlakuan
a. Alat: timbangan duduk dan timbangan neraca, kandang hewan
percobaan, spuit injeksi
b. Bahan : aquadest, insulin, aloksan dan makanan hewan percobaan
(pelet)
3. Pengambilan data
a. Alat: alat bedah hewan percobaan (skalpel, pinset, gunting, jarum,
dan meja lilin), mikroskop cahaya medan terang, object glass, alat
hitung (finger counter).
b. Bahan : NaCl 0,9 %
J. Cara Kerja
1. Persiapan hewan uji
Hewan uji yang telah memenuhi kriteria restriksi (36 ekor) dilakukan
alokasi random ke dalam 6 kelompok penelitian. Masing-masing
kelompok terdiri dari 6 hewan uji. Selanjutnya dilakukan aklimatisasi
selama 7 hari sebelum perlakuan. Kelompok-kelompok tersebut secara
berturut-turut adalah sebagai berikut :
Kelompok 1 (kontrol negatif, non diabetik) : diberri aquades .
Kelompok 2 (kontrol negatif, diabetik) : diberi aloksan dan aquades.
 22

Kelompok 3 (kontrol positif) :diberi insulin 1,6

U/hari/tikus.
Kelompok 4 (perlakuan dosis 1) :0,054 gram/200gram BB
tikus.
Kelompok 5 (perlakuan dosis 2) :0,108 gram/200gram BB
tikus.
Kelompok 6 ( perlakuan dosis 3) :0,162 gram/200gram BB
tikus. (Ohnaka et al., 2012)
2. Pembuatan dosis kopi
Kopi dibuat dengan melarutkan 1 sendok serbuk kopi (setara 1,2-
1,3 gram) ke dalam 1 gelas air panas hingga 200 ml tanpa pemanis dan
zat adiktif lain. Kelompok P1 kopi dengan dosis 0,054 gram/200gram
BB tikus setara dengan 3 gram kopi pada manusia, kelompok P2 dosis
kopi 0,108 gram/200gram BB tikus setara dengan 6 gram pada manusia,
kelompok P3 dosis kopi 0,162 gram/200gram BB tikus setara dengan 9
gram pada manusia.
3. Perlakuan hewan uji
Pada hari ke-0 semua hewan uji diukur kadar gula darah awal
(GD0), pada hari ke-1 kelompok 2-6 diinduksi aloksan agar hiperglikemi
dengan dosis 125 mg/kgBB. Pada hari ke-4 kadar gula darah diukur
kembali sebagai (GD1) sebagai kadar gula diabetik. Pada hari ke-5 s.d 14
diperlakukan sebagai berikut:
Kelompok 3 (kontrol positif) :diberi insulin 1,6
U/hari/tikus.
Kelompok 4 (perlakuan dosis 1) :0,054 gram/200gram BB
tikus.
Kelompok 5 (perlakuan dosis 2) :0,108 gram/200gram BB
tikus.
Kelompok 6 ( perlakuan dosis 3) :0,162 gram/200gram BB
tikus.
 23

Pada hari ke-19 kadar gula darah diukur kembali sebagai gula darah post
perlakuan (GD2). Apabila GD2 belum mengalami penurunan yang
berarti maka pemberian perlakuan diperpanjang sampai hari ke 40.
4. Pengukuran kadar gula darah
Pengukuran kadar gula darah dilakukan pada hari ke-0, 4,19 dan
40. Gula darah diukur dengan menggunakan accu check. Satu tetes darah
diteteskan ke dalam stick accu check yang sudah dimasukkan ke dalam
mesin pembaca gula darah accu check. Hasil dibaca dalam waktu 1
menit.
5. Pengambilan data dan terminasi hewan uji
Setelah perlakuan selama 14 hari, gula darah tikus diukur. Jika
gula darah belum turun, maka pemberian kopi dilanjutkan selama 7 hari
dan diukur ulang, bila masih belum turun pemberian kopi dilanjutkan
maksimal 40 hari. Jika sudah turun secara berarti, maka akan dilanjutkan
terminasi, tanpa penggunaan anestesi. Cauda epididimis dipisahkan
dengan cara memotong bagian proksimal corpus epididimis dan bagian
distal vas deferens. Selanjutnya cauda epididimis dimasukkan ke dalam
cawan petri berisi 1 ml NaCl 0,9%, bagian proksimal cauda dipotong
sedikit dengan gunting lalu cauda ditekan perlahan hingga sekresi cairan
epididimis keluar dan tersuspensi dengan Nacl 0,9% [CITATION Cla13 \m
Zhu17 \m Kri14 \l 1057 ]. Proses tersebut dilakukan beberapa kali
kemudian diaduk homogen. Suspensi spermatozoa dari cauda epididimis
digunakan untuk pengamatan jumlahspermatozoa.
6. Penanganan limbah sisa penelitian
Untuk hewan uji setelah diterminasi maka tahap selanjutnya
dimusnahkan dengan cara dikubur atau dibakar. Sedangkan untuk
penganan sampah dilakukan pemisahan menjadi sampah medis, sampah
organik dan sampah non ornanik lalu dibuang ketempat khusus sesuai
kriteria dan jenis sampah.
7. Tes jumlah spermatozoa
Tikus galur Wistar terlebih dahulu diterminasi sebelum diambil
spermatozoanya kemudian dilakukan pembedahan pada tikus galur
 24

Wistar. Selanjutnya diambil bagian epididimis lalu spermatozoa

diletakan pada glass objeck. Pengamatan jumlah spermatozoa
menggunakan preparat hapus kering yang difiksasi dengan metanol
selama 5 menit. Setelah preparat kering, ditetesi dengan larutan Giemsa
selama 30 menit, dan preparat dicuci dengan air mengalirdan dikeringkan
untuk kemudian diamati dengan menggunakan mikroskop perbesaran
400x. perkiraan konsentrasi spermatatozoa di lakukan dengan
memperkirakan/menghitung jumlah rata-rata spermatozoa pada beberapa
lapang pandang (400x) dan hasilnya dikalikan dengan 105. Misalnya
didapatkan jumlah rata-rata spermatozoa 40/LPB, maka perkiraan
konsentrasi : 40 x 105 = 4.106 /ml
Alat : mikroskop

K. Analisa Data
Data yang diperoleh di uji normalitas dengan menggunakan uji
Saphiro-Wilk dan uji homogenitas dengan menggunakan Levene Test, bila
didapatkan data berdistribusi normal dan homogen dengan nilai signifikansi
p>0,05. Bila data sampel berdistribusi normal dan homogen, maka
dilanjutkan dengan uji parametrik one way Anova, apabila data tidak
homogen maka dilakukan uji alternatif lainnya. Hasil uji one way Anova,
menunjukan p<0,05 mempunyai arti data pada enam kelompok terdapat
perbedaan yang bermakna, kemudian untuk mengetahui kelompok mana
yang berbeda secara bermakna, dilakukan uji Post Hoc LSD dengan derajat
kemaknaan yang digunakan p = 0,05.
 25

L. Prosedur kerja
Alokasi random hewan uji sejumlah 36 ekor

Aklimatisasi selama 7 hari

Pengukuran GD0 hari ke-0 dan induksi aloksan dengan dosis 125 mg/kgBB

Pengukuran GD1 pada hari ke-4

Kontrol Kotrol Kotrol

Perlakua Perlakua Perlakua
normal Negatif Positif
n 1 (K4) n 2 (K5) n 3 (K6)
(K1) 6 (K2) 6 (K3) 6
6 ekor 6 ekor 6 ekor
ekor ekor ekor

Kopi Kopi Kopi

Insulin 0,054 0,108 0,162
Aquades Aquades gram/ gram/ gram/
1,6 U
200 200 200
gram BB gram BB gram BB

Perlakuan dilakukan
selama 14 hari

Pemeriksaan GD2 pada

hari ke-19 dan terminasi
hewan uji

Perhitungan jumlah sperma

Analisis data

Gambar 3. Prosedur Kerja

 26

M. Kegiatan Pelaksanaan

Tabel 2. Jadwal Penelitian

Tahun 2019

Kegiatan Bulan

8 9 10 11 12

Penyusunan
Proposal

Desk Skripsi

Revisi Proposal

Penelitian

Analisis Data

Penyusunan Skripsi

Ujian Skripsi

Revisi Skripsi
 BAB IV
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

A. Hasil Penelitian
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian
kopi terhadap jumlah spermatozoa tikus putih galur Wistar yang diinduksi
aloksan. Tikus berjumlah 36 ekor dibagi menjadi 6 kelompok dengan 6
tikus untuk masing-masing kelompok. Selama pemberian perlakuan, 6
tikus mengalami drop out dikarenakan 1 ekor tikus pada kelompok K(-)
mengalami andescensus testis dan 5 tikus mati karena sakit (1 tikus pada
Kontrol Normal, 2 tikus pada Kontrol Positif, 1 tikus pada P1 dan 1 tikus
pada P3), sehingga hanya 30 ekor tikus yang sesuai dengan kriteria
restriksi yang telah ditetapkan. pemberian kopi diberikan selama 14 hari
dan pada akhir penelitian setelah semua tikus diterminasi dan diperoleh
data sebagaimana dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3.Rata-rata jumlah sperma

No Kelompok Rata-Rata Jumlah Spermatozoa

. Tiap Kelompok 106 ±SD
1 Kelompok Normal 11 ×10 6 + 20,6 ×105
2 kontrol negative 58 ×105 + 6,14 × 105
3 Kontrol positif 17,7 ×106 + 24,9 ×105
4 Perlakuan 1 18,7 ×106 + 75,2 ×105
5 Perlakuan 2 20,2 ×106+ 14,9 ×105
6 Perlakauan 3 18,9 ×106 + 24,3 ×105

*berbeda bermakna (<0,05)

kelompok normal : aquades

kontrol negatif : tikus diabetik tanpa perlakuan

kontrol positif : tikus diabetik dan diberikan insulin
Perlakuan 1 : tikus diabetik dan diberikan perlakuan kopi dosis 0,054 gram
Perlakuan 2 : tikus diabetik dan diberikan perlakuan kopi dosis 0,108 gram
Perlakuan 3 : tikus diabetik dan diberikan perlakuan dosis kopi 0,162 gram

27
 28

Hasil uji normalitas data dengan uji Sphiro Wilk menunjukan bahwa data
terdistribusi normal (p>0,05). Hasil uji homogenitas varian dengan Levene test
menunjukan bahwa variasi data homogen p = 0,202 (p>0,05), selanjutnya
dilakukan uji parametrik One Way Anova untuk mengetahui apakah terdapat
perbedaan pada kelompok adanya oleh pemberian kopi terhadap jumlah
spermatozoa.

Oleh karena hasil One-way Anova adanya perbedaan yang bermakna

dengan p = 0,000 (p<0,05) maka untuk melihat kelompok mana saja yang berbeda
dilakukan uji Post Hoc menggunakan LSD. Pada analisis Post Hoc LSD untuk
menunjakkan perbedaan signifikan antaa kelompok, untuk pengambilan kelulusan
berdasarkan nilai probabilitas yaitu jika nilai p<0,05 maka terdapat perbedaan
bermakna, sedangkan jika nilai p>0,05 maka tidak terdapat perbedaan bermakna
sebagaimana dapat dilihat pada Tabel 4.

Tabel 4. Hasil Analisis Uji LSD

No Kelompok perlakuan P (Sig) Hasil

1 Kelompok Normal -kontrol negatif ,042* Berbeda bermakna
2 Kelompok Normal -kontrol positif ,017* Berbeda bermakna
3 Kelompok Normal -Perlakuan 1 ,005* Berbeda bermakna
4 Kelompok Normal - Perlakuan 2 ,001* Berbeda bermakna
5 Kelompok Normal - Perlakuan 3 ,004* Berbeda bermakna
6 Kelompok Negatif -kontrol normal ,042* Berbeda bermakna
7 Kelompok Negatif -kontrol positif ,000* Berbeda bermakna
8 Kelompok Negatif -perlakuan 1 ,000* Berbeda bermakna
9 Kelompok Negatif -perlakuan 2 ,000* Berbeda bermakna
10 Kelompok Negatif -perlakuan 3 ,000* Berbeda bermakna
11 Kelompok Positif -kontrol normal ,017* Berbeda bermakna
12 Kelompok Positif -kontrol negatif ,000* Berbeda bermakna
13 Kelompok Positif -perlakuan 1 ,712 Tidak bermakna
14 Kelompok Positif -perlakuan 2 ,339 Tidak bermakna
15 Kelompok Positif -perlakuan 3 ,673 Tidak bermakna
16 Perlakuan 1 -kontrol normal ,005* Berbeda bermakna
17 Perlakuan 1 –kontrol negatif ,000* Berbeda bermakna
18 Perlakuan 1 –kontrol positif ,712 Tidak bermakna
19 Perlakuan 1 –perlakuan 2 ,537 Tidak bermakna
20 Perlakuan 1 –perlakuan 3 ,955 Tidak bermakna
21 Perlakuan 2 –kontrol normal ,001* Berbeda bermakna
22 Perlakuan 2 –kontrol negatif ,000* Berbeda bermakna
23 Perlakuan 2 –kontrol positif ,339 Tidak bermakna
24 Perlakuan 2 –perlakuan 1 ,537 Tidak bermakna
25 Perlakuan 2 –perlakuan 3 ,576 Tidak bermakna
26 Perlakuan 3 –kontrol normal ,004* Berbeda bermakna
27 Perlakuan 3 –kontrol negatif ,000* Berbeda bermakna
28 Perlakuan 3 -kontrol positif ,673 Tidak bermakna
29 Perlakuan 3 –perlakuan 1 ,955 Tidak bermakna
 29

30 Perlakuan 3 –perlakuan 2 ,576 Tidak bermakna

*= kurang dari 0,005
Pada pelakuan pemberian kopi kelompok perlakuan 1, kelompok
perlakuan 2, dan kelompok perlakuan 3 mempunyai efek meningkatkan
jumlah spermatozoa tikus jantan.

B. Pembahasan
Berdasarkan hasil uji One-way ANOVA, diketahui bahwa p=0,000
(p<0,05), dengan demikian pemberian kopi mempunyai pengaruh yang
signifikan terhadap jumlah spermatozoa.
Pada hasil Uji LSD menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna
antara kelompok kontrol normal (aquades) dan kontrol negatif (tikus
diabetik tanpa perlakuan) dengan nilai p=0,042 (p<0,05). Berdasarkan
hasil penelitian ini, didapatkan hasil jumlah sperma normal tikus yang
diinduksi aloksan dan hanya diberi aquades menunjukkan mengalami
penurunan dibandingkan dengan kontrol normal.
Terdapat perbedaan bermakna hasil uji statistik Post-Hoc LSD pada
kelompok kontrol negatif (tikus induksi aloksan) dan kontrol positif (tikus
diabetik dan diberikan insulin) yaitu p=0,000 (p<0,05) yang menunjukkan
bahwa jumlah sperma normal tikus yang diinduksi aloksan dan diberi
insulin lebih tinggi dibandingkan tikus yang diinduksi aloksan tanpa
intervensi.
Terdapat perbedaan bermakna hasil uji statistik Post-Hoc LSD pada
kelompok perlakuan 1 (dosis 0,054 gram) kelompok perlakuan 2 (dosis
0,108 gram), kelompok perlakuan 3 (dosis 0,162) dengan kontrol negatif
(tikus induksi aloksan) yaitu p=0,000 (p<0,05) yang menunjukkan bahwa
jumlah sperma tikus yang diinduksi aloksan dan diberi kopi pada semua
dosis lebih tinggi dibandingkan tikus kontrol negatif (tikus diabetik tanpa
perlakuan).
Pada kelompok positif (tikus diabetik dan diberikan insulin) dan
kontrol normal (aquades) menunjukan hasil berbeda bermakna yaitu
p=0,017 (p<0,05), sehingga dapat diasumsikan bahwa pemberian insulin
tidak mampu meningkatkan jumlah spermatozoa, hal ini disebabkan
 30

terdapat pada kerusakan endotel pembuluh darah dan mikroangiopati yang

masif sehingga proses spermatogenesis tidak kembali normal. Hasil
penelitian ini sejalan dengan penelitian yang dilakukan Sulistyoningrum et
al (2012) kelompok tikus diabetik mengalami kerusakan pada sistem
reproduksi maskulina yang ditandai dengan tingkat spermatogenesis dalam
tubulus seminiferus yang rendah.

Salah satu penyakit yang menyebabkan penurunan jumlah

spermatozoa adalah diabetes melitus. Diabetes melitus adalah suatu
penyakit metabolik yang ditandai dengan adanya hiperglikemia yang
terjadi karena pankreas tidak mampu mensekresi insulin, gangguan kerja
insulin, ataupun keduanya (ADA, 2013). Berdasarkan Guyton dan Hall
(2011), diabetes mellitus tipe 2 lebih umum terjadi pada diabetes tipe 1
yaitu berkisar 90-95% dari semua kasus diabetes mellitus. Pada awal
diabetes melitus tipe 2 terjadi peningkatan konsentrasi insulin plasma
(hiperinsulinemia) akibat dari penurunan sensitivitas insulin pada jaringan
target kondisi ini disebut sebagai resistensi insulin. Penurunan sensitivitas
insulin merusak penggunaan dan penyimpanan karbohidrat, meningkatkan
glukosa darah, dan menstimulasi kompensasi yaitu meningkatkan sekresi
insulin. Tingginya kadar glukosa darah atau hiperglikemi dan nutrisi buruk
pada penderita diabetes melitus berperan dalam kerusakan sel dengan cara
peningkatan reactive oxygen spesies (ROS) yang dapat mengakibatkan
stres oksidatif sehinggga menyebabkan kerusakan endotel pembuluh darah
dan mikroangiopati yang dapat menganggu pemberian nutrisi melalui
pembuluh darah ke jaringan-jaringan pembentuk spermatozoa sehingga
menganggu proses spermatogenesis pada organ testis sehingga jumlah
spermatozoa menurun. Beberapa mekanisme yang berkaitan dengan
peningkatan reactive oxygen spesies (ROS) pada hiperglikemia, yaitu
peningkatan fluks glukosa melalui jalur poliol, peningkatan pembentukan
AGEs dan peningkatan ekspresi RAGE, aktivitas protein kinase C (PKC),
overaktivitas jalur heksosamine (Giacco dan Brownlee, 2011). Pada kadar
yang rendah, ROS diperlukan oleh spermatozoa untuk beberapa
 31

mekanisme seperti motilitas, kapasitasi, reaski akrosom, fungsi

spermatozoa-oosit, stabilitas mitokondria dan sinyal intraseluler namun
demikian , pembentukan ROS yang berlebih dapat merusak mekanisme
perlindungan dan menginisiasi perubahan lipid protein dan DNA pada
spermatozoa (Fauziyah, 2018). Stres oksidatif juga dapat menggangu jalur
hypothalamus pituitary gonal axis sehingga pengeluaran hormone menjadi
tidak normal. Apabila sel-sel dan hormon pada mengalami gangguan maka
tahapan spermatogenesis akan terganggu, menyebakan produksi
spermatozoa menurun (Adelati et al., 2016) .

Pada tikus diabetik terjadi penurunan spermatogenesis dan apoptosis

sel spermatogenik pada epitel seminiferus testis. Spermatogenesis dapat
terganggu akibat mikroangiopati pada kondisi hiperglikemik yang dapat
mengganggu pemberian nutrisi pada epitel seminiferus dan apoptosis sel
spermatogenik. Apoptosis sel spermatogenik terjadi akibat peningkatan
ROS pada testis. Apoptosis yang diperantarai oleh ROS dapat terjadi
melalui 3 jalur, yaitu: peroksidasi membran lipid, fragmentasi DNA dan
ikatan silang protein. Peningkatan ROS pada kondisi hiperglikemia pada
diabetes melitus disebabkan oleh peningkatan hasil reduksi dari beberapa
gula (melalui proses glikolisis dan polyol) (Sulistyoningrum et al., 2012).
Testis dalam proses reproduksi mempunyai dua fungsi utama yaitu
memproduksi hormon dan spermatozoa. Kedua fungsi tersebut secara
anatomi berlangsung terpisah yaitu hormon testosteron dihasilkan oleh sel
Leydig sedangkan sel spermatozoa dihasilkan oleh sel epitel tubulus
seminiferus (Adelati et al., 2016). Pada penelitian ini, didapatkan
peningkatan kadar glukosa darah pada kelompok yang diinduksi aloksan.
Aloksan (2,4,5,6-tetraoksipirimidin; 5,6 dioksiurasil) adalah suatu derivat
dari pirimidin dan merupakan salah satu komponen asam urat. Jika
aloksan disuntikan pada hewan coba dapat terjadi kerusakan sel ß pulau
Langerhans pankreas, sedangkan sel-sel alfa tetap utuh, sehingga jumlah
insulin menurun dan menimbulkan peningkatan glukosa darah.
Mekanisme aksi aloksan adalah efek toksik pada sel ß pankreas yang
 32

diperantarai oleh reactive oxygen species (ROS). Aloksan dan produk

reduksinya, asam dialurat dapat menyebabkan siklus redoks dengan
pembentukan radikal superoksida. Radikal superoksida mengalami
dismutasi ke hidrogen peroksida dan melalui reaksi fenton terbentuk
hidrogen radikal. Aksi ROS dengan peningkatkan kadar kalsium sitosolik
yang banyak menyebabkan kerusakan sel ß pulau Langerhans yang cepat.
Selain itu aloksan juga menghambat sekresi insulin yang diinduksi oleh
glukosa dengan cara menghambat glukokinase (sensor glukosa pada sel
beta pankreas) (Sulistyoningrum et al., 2012).

Oleh karena itu sangat erat kaitannya antara diabetes melitus dengan
kesuburan pada pria karena stres oksidatif yang ditimbulkan akibat
diabetes melitus dipastikan dapat merusak testis sebagai organ yang
berperan dalam proses terjadinya spermatogenesis sehingga produksi
spermatozoa berkurang, yang pada akhirnya berujung pada masalah
infertilitas (Adelati et al,. 2016).

Pada penelitian sebelumnya, antioksidan terbukti dapat

menurunkan kadar radikal bebas dalam tubuh. Kopi memiliki antioksidan
yang tinggi (Isnindar et al., 2017). Menurut Edwan Giovanucci, salah satu
peneliti dari Harvard menunjukan bahwa kopi memiliki antioksidan yang
ternyata lebih banyak dari pada sebagian besar sayur dan buah, kopi
merupakan sumber antioksidan nomor satu dan paling tinggi dari semua
jenis makanan (Tertia, 2016).
Berdasarkan hasil penelitian ini, terdapat peningkatan jumlah
spermatozoa pada kelompok tikus baik pada dosis 0,054 gram/200 BB
tikus, dosis 0,108 gram/200 BB tikus dan dosis 0,162 gram/200 BB tikus
setelah pemberian kopi, namun tidak terdapat perbedaan yang bermakna
dengan penambahan dosis pada kelompok P1, P2 dan P3. Pemberian kopi
dosis 0,108 gram/200gram BB tikus (dosis 2) menunjukan dosis kopi yang
paling efektif dalam meningkatkan jumlah spermatozoa tikus uji.
 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan
Berdasarkan analisis dan pembahasan hasil penelitian tentang "Pengaruh
Pemberian Kopi terhadap Jumlah Spermatozoa Tikus Galur Wistar Diabetik
yang Diinduksi Aloksan", dapat ditarik kesimpulan bahwa pemberian kopi
dapat meningkatkan jumlah spermatozoa pada tikus diabetik dengan dosis
0,054 gram; 0,108 gram; dan 0,162 gram.
B. Saran
1. Penelitian ini dapat dikembangkan lebuh lanjut ketahap uji klinis sebagai
terapi alternatif gangguan infertilitas yang disebabkan penurunan jumlah
spermatozoa.
2. Perlu dilakukan uji dengan dosis yang berbeda dan lebih tinggi dari
penelirtian ini.
3. Perlu dilakukan uji dengan penambahan waktu intervensi.

33
 34

DAFTAR PUSTAKA
ADA (American Diabetes Association), 2015. Standards of Medical Care in
Diabetes 2015. Diabetes Care, p. 39;1.

Adelati, S., Juniarto, A. Z. & Miranti, I. P., 2016. Histopatologi Spermatogenesis

Testis Tikus Wistar Diabetes Melitus. Jurnal Kedokteran Diponegoro,
Volume Vol. 5, No. 4, pp. 1760-1769.

Adiyati, P., 2011. Ragam jenis ektoparasit pada hewan coba tikus putih (Rattus
norvegicus) galur Sprague dawley. (Skripsi). Bogor: Fakultas Kedokteran
Hewan Institut Pertanian Bogor.

American Diabetes Association (ADA), 2013. Standards of Medical Care in

Diabetes-2013.. [Online]
Available at:
http://care.diabetesjournals.org/content/36/Supplement_1/S11.full.pdf+h
tml

American Diabetes Association, 2015. Classification and Diagnosis of Diabetes

Melitus. Diabetes Care, pp. 2015 Vol 38 (Suppl. L) S8-16.

Ciptaningsih, E., 2012. Uji Aktivitas Antioksidan dan Karakteristik Fitokimia

pada Kopi Luwak Arabika dan Pengaruhnya Terhadap Tekanan Darah
Tikus Normal dan Tikus Hipertensi. (Tesis). Depok: Universitas
Indonesia.

DiPiro J.T., Wells B.G., Schwinghammer T.L & DiPiro C. V, 2015.

Pharmacotherapy Handbook, Ninth Edit., McGraw-Hill Education
Companies. Inggris

Fatimah, R., 2015. Diabetes Melitus Tipe 2. J Majority, pp. Volume 4. Nomor 5.
Feb 2015: 93-101.

fauziyah, y. (2018). Pengembangan Ekstrak Etanol Daun Kembang Bulan

Tithonia diversifolia (Hemsley) A. Gray Terstandar sebagai Obat Herbal
untuk Memperbaiki Fertilitas pada Hewan Model Diabetes Mellitus.
(Tesis).Universitas Gadjah Mada

Firman, S, 2012. Infertilitas Pria Akibat Kerja. CDK-195, 39(7), pp. 508-11.

Giacco, F., & Brownlee, M. (2011). Oxidative stress and diabetic complications.
national intitutes of health, 9, 1058-1070.

guyton, & hall. (2011). fisiologi kedokteran (12 ed.). singapura: elsevier.
 35

Hamilton, J. W., 2012. Pengaruh Pemberian Ekstrak Dimer Isoeugenol Secara

Oral Terhadap Kualitas Spermatozoa Mencit (Mus Musculus L.) Jantan
Galur Ddy. (Skripsi). Depok: Universitas Indonesia Press.

Hammam, N. R. & Juniarto, A. Z., 2008. Pengaruh Pemberian Minyak Jintan

Hitam (Nigella Sativa) terhadap Jumlah Spermatozoa Mencit Diabetes
Melitus yang Diinduksi Aloksan. (Skipsi). Semarang: Fakultas
Kedokteran Universitas Diponegoro Semarang.

Hestiantoro, A, 2011. Ilmu Kandungan. 3 rd ed. Jakarta: PT Bina Pustaka

Sarwono Prawirohardjo.

Himpunan Endokrinologi Reproduksi dan Fertilitas Indonesia (HIFERI),

Perhimpunan Fetilitas In Vitro Indonesia (PERFITRIA), Ikatan Ahli
Urinologi Indonesia (IAUI), Perkumpulan Obstetri dan Ginekologi
Indonesia (POGI), 2013. Konsensus Penanganan Infertilitas. 9.1 ed.

IDF, 2015. International Diabetes Ferderation Diabetes Atlas. 7th ed. Karakal
Print.

Isnindar, Wahyuono, S. & Widyarini, S., 2017. Aktivitas Antioksidan Buah Kopi
Hijau Merapi. Journal of Pharmaceutical Science and Clinical Research,
Volume 02, pp. 130-136.

Khaidir, M., 2006. Penilaian Tingkat Fertilitas dan Penatalaksanaanya Pada Pria.
Jurnal Kesehatan Masyarakat FK UNAND , 1(1), pp. 30-4.

Kristina, S. A., 2014. Minum Kopi Baik Untuk Kesehatan. Tribun Jogja, 27
April, p. 15.

Kuncoro, S., Sutiarso, L., Nugroho, J. & Masithoh, R. E., 2018. Kinetika Reaksi
Penurunan Kafein dan Asam Klorogenat Biji Kopi Robusta melalui
Pengukusan Sistem Tertutup. Agritech, Volume 38 (1), pp. 105-111.

Lestari, D. J. T., 2018. Pengaruh Pemberian Kopi Robusta Lampung Terhadap

Gambaran Histologi Arteri Koronaria Tikus Putih (Rattus norvegicus)
Jantan Galur Sprague dawley. (Skripsi). Lampung: Universitas Lampung.

Ludwig, I. A., Clifford, M. N., Lean, M. E. & Ashihara, H., 2015. Coffee:
Biochemistry and Potential Impact on Health. Food Funct, 5(8), pp. 1695-
717.

Maramis, R.K., Citraningtyas, G., Wehantouw, F, 2013. Analisis Kafein Dalam

Kopi Bubuk Di Kota Manado Menggunakan Spektrofotometri Uv-Vis.
Jurnal Ilmiah Farmasi, p. 2(4):122–128.
 36

Marhaenanto, B., Soedibyo, D. W. & Farid, M., 2015. Penentuan Lama Sangrai
Kopi Berdasarkan Variasi Derajat. Agroteknologi, pp. 102-110.

Mohammadi, F., Nikzad, H., Taherian, A., Mahabi, J, 2013. Effects of Herbal
Medicine on Male Infertility. Anat Sci J, pp. 10(4), pp. 3-16.

Mulato, S, 2013. Pelarutan Kafein Biji Robusta dengan Kolom Tetap

Menggunakan Pelarut Air. Pelita Perkebunan, p. Jakarta. Hal. 42.

Nna, V., Bakar, A. & Mohamed, M., 2017. Diabetes melitus-induced male
reproductive impairment: The role of natural products: A review. Journal
of Applied Pharmaceutical Sciense, 07(09), pp. 233-42.

Oentari, W., Hiwang, F. & Hestiantoro, A., 2014. Kapita Selekta Kedokteran 4th
ed. Jakarta Pusat: Media Aesculapius.

Ohnaka, K., Ikeda, M., Maki, T. & Okada, T., 2012. Effect of 16- Week
Consumption of Caffeinated and Decaffeinated Instant Coffe on Glucose
Metabolism in a Randmized Controlled Trail. Journal of Nutrition and
Metabolism, Volume 2012, p. 9.

Ozougwu, J. C., Obimba, K. C., Belonwu, C. D. & Unakalamba, C. B., 2013. The
pathogenesis and pathophysiology of type 1 and type 2 diabetes mellitus.
Journalof Physiology and Pathophysiology, pp. 4 (4). p:46-55..

Ozougwu, J., Obimba, K., Belonwu, C. & Unakalamba, C., 2013. The
pathogenesis and pathophysiology of type 1 and. academic Journals, 4(4),
pp. 46-57.

Panggabean, E., 2011. Buku Pintar kopi. Jakarta Selatan: Agro Media Pustaka.

PERKENI, 2011. Konsensus Pengelolaan dan Pencegahan Diabetes Melitus Tipe

2 di Indonesia. [Online]
[Accessed 15 Oktober 2019].

Rahardjo, P., 2012. Panduan Budidaya dan Pengolahan Kopi Arabika dan
Robusta. Jakarta: Swadya.

Rahmawati, L., 2013. Pengaruh Nikotin Terhadap Jumlah Sel Leydig Pada
Mencit (Musmusculus). J.K.G Unej, 10(2), pp. 82-85.

Rukman, H. R., 2014. Untung Selangit dari Aribisnis Kopi, Yogyakarta: Lily
Publisher.

Sa’adah, N. & Purnomo, W., 2016. Karakteristik dan Perilaku Berisiko Pasangan
Infertil di Klinik Fertilitas dan Bayi Tabung Tiara Cita Rumah Sakit Putri
Surabaya. Jurnal Biometrika dan Kependudukan, Volume 5, pp. 61-69.
 37

Setyani, S., Subeki & Grace, H. A., 2017. Inventarisasi Sensori, Kandungan
Kafein, Dan Asam Klorogenat Kopi Bubuk Robusta (Coffea Canephora
L.). (Skripsi). Lampung: Fakultas Pertanian Universitas Lampung.

Setyawan, M. E. A., Romadhon, Y. A., Sintowati, R. & Sutrisna, E., 2017. The
Effect Of Kalimantan’S Honey Propolis Toward The Quality Of Mice’S
(Mus Musculus L.) Spermatozoa That Exposed By Cigarette Smoke.
Asian Journal of Biochemical and Pharmaceutical Research, 7(2), pp. 70-
75.

Subeki & Muhartono, 2015. Pengaruh Pemberian Infusa Kopi Dalam

Menurunkan Kadar Glukosa Darah Mencit Yang Diinduksi Aloksan. Juke
Unila, 5(9), pp. 1-8.

Sulistyoningrum, E., Setiawati, Nindyastuti, . H. & Putra, A. . N., 2012. Infusa

Daging Buah Mahkota Dewa Memperbaiki Kerusakan Testis dan
Parameter Sperma Tikus Diabetik. Sains Medika, Volume 4, pp. 115-123.

Sumardika, I. W. & Jawi, I. M., 2012. Ekstrak air daun ubi jalar ungu
memperbaiki profil lipid dan meningkatkan kadar SOD darah tikus yang
diberi makanan tinggi kolesterol. Jurnal Ilmiah Kedokteran, 43(2), pp. 67-
70.

Susilowati, T, 2011. Spermatologi. 1 ed. Malang: UB Press.

Swastika, K. D., 2012. Efek Kopi terhadap Kadar Gula Darah Post Prandial
pada Mahasiswa Semester VII Fakultas Kedokteran USU Tahun 2012,
(Skripsi). Medan: Fakultas Kedokteran USU Tahun 2012.

Syauqy, A., 2014. Evaluasi Kromatin Sperma Sebagai Indikator Kualitas Sperma.
JMJ, Volume 2(1), pp. 87-97.

Temidayo, O. & S, P.S., 2018. Diabetes Mellitus and Male Infertility. Asian
pasific Jpurnal of reproduction, 7(1), pp.6-14.

Tertia, R., 2016. Pengaruh Konsentrasi Ekstrak Kopi Dan Gelatin Terhadap
Karakteristik Marshmallow Kopi Robusta (Coffea Robusta). [Online]
Available at: http://repository.unpas.ac.id/id/eprint/210
[Accessed 20 Oktober 2019].

Wael, S. W. T. & Winarto, 2014. pemberian minyak jintan hitam (Nigella Sativa)
Terhadap Motilitas Dan jumlah Spermatozoa tikus Spraguee Dawleyyang
Dipapar Minuman Tradisional Arak Ambon (Sopi). Molucca Medica,
Volume 4(2), pp. 132-36.
 38

Wibosono, H., 2010. Panduan Laboratorium Andrologi. Bandung: PT. Refika

Aditama .

Yusnan, T., 2012. Budidaya Kopi. [Online]

Available at: http://www.zanuarishak.blogspot.com.
[Accessed 15 Oktober 2019].

Zhu, J.-Z., Dong, X. Y., Liang., J. J. & Zhang, Z. Q., 2017. Effect of Diabetes
Mellitus on Semen Quality in Adult Men : a Systemic review and Meta
Analyis. Int J Clin Exp Med, 10(8), pp. 11290-11303.
 39

Lampiran 1. Uji Normalitas

Tests of Normality

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

kelompok Statistic df Sig. Statistic df Sig.

jumlah sperma kontrol normal .355 5 .038 .855 5 .211

kontrol negatif .231 5 .200* .943 5 .685

kontrol positif .233 4 . .972 4 .852

K1 0,054 gram .170 5 .200* .976 5 .909

K2 0,108 gram .173 6 .200* .927 6 .555

K3 0,162 gram .247 5 .200* .938 5 .651

*. This is a lower bound of the true significance.

a. Lilliefors Significance Correction

40
 41

Lampiran 2. Uji Homogeneity of Variances

Test of Homogeneity of Variances

Levene Statistic df1 df2 Sig.

jumlah sperma Based on Mean 1.586 5 24 .202

Based on Median .930 5 24 .479

Based on Median and with .930 5 14.953 .489

adjusted df

Based on trimmed mean 1.504 5 24 .226

 42

Lampiran 3. Uji Oneway ANOVA

ANOVA

jumlah sperma

Sum of Squares df Mean Square F Sig.

Between Groups 8339827916666 5 1667965583333 11.046 .000

66.600 33.300

Within Groups 3624142083333 24 1510059201388

33.300 8.889

Total 1196397000000 29
000.000
 43

Lampiran 4. Uji Post-Hoc LSD

Multiple Comparisons

Dependent Variable: jumlah sperma

LSD

95% Confidence Interval

Mean Difference
(I) kelompok (J) kelompok (I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound

kontrol normal kontrol negatif 5290000.000* 2457689.322 .042 217578.54 10362421.46

kontrol positif -6697500.000* 2606773.179 .017 -12077615.41 -1317384.59

K1 0,054 gram -7670000.000* 2457689.322 .005 -12742421.46 -2597578.54

K2 0,108 gram -9143333.333* 2353058.380 .001 -13999807.14 -4286859.53

K3 0,162 gram -7810000.000* 2457689.322 .004 -12882421.46 -2737578.54

kontrol negatif kontrol normal -5290000.000* 2457689.322 .042 -10362421.46 -217578.54

kontrol positif -11987500.000* 2606773.179 .000 -17367615.41 -6607384.59

K1 0,054 gram -12960000.000* 2457689.322 .000 -18032421.46 -7887578.54

K2 0,108 gram -14433333.333* 2353058.380 .000 -19289807.14 -9576859.53

K3 0,162 gram -13100000.000* 2457689.322 .000 -18172421.46 -8027578.54

 44

kontrol positif kontrol normal 6697500.000* 2606773.179 .017 1317384.59 12077615.41

kontrol negatif 11987500.000* 2606773.179 .000 6607384.59 17367615.41

K1 0,054 gram -972500.000 2606773.179 .712 -6352615.41 4407615.41

K2 0,108 gram -2445833.333 2508368.661 .339 -7622851.80 2731185.14

K3 0,162 gram -1112500.000 2606773.179 .673 -6492615.41 4267615.41

K1 0,054 gram kontrol normal 7670000.000* 2457689.322 .005 2597578.54 12742421.46

kontrol negatif 12960000.000* 2457689.322 .000 7887578.54 18032421.46

kontrol positif 972500.000 2606773.179 .712 -4407615.41 6352615.41

K2 0,108 gram -1473333.333 2353058.380 .537 -6329807.14 3383140.47

K3 0,162 gram -140000.000 2457689.322 .955 -5212421.46 4932421.46

K2 0,108 gram kontrol normal 9143333.333* 2353058.380 .001 4286859.53 13999807.14

kontrol negatif 14433333.333* 2353058.380 .000 9576859.53 19289807.14

kontrol positif 2445833.333 2508368.661 .339 -2731185.14 7622851.80

K1 0,054 gram 1473333.333 2353058.380 .537 -3383140.47 6329807.14

K3 0,162 gram 1333333.333 2353058.380 .576 -3523140.47 6189807.14

K3 0,162 gram kontrol normal 7810000.000* 2457689.322 .004 2737578.54 12882421.46

 45

kontrol negatif 13100000.000* 2457689.322 .000 8027578.54 18172421.46

kontrol positif 1112500.000 2606773.179 .673 -4267615.41 6492615.41

K1 0,054 gram 140000.000 2457689.322 .955 -4932421.46 5212421.46

K2 0,108 gram -1333333.333 2353058.380 .576 -6189807.14 3523140.47

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Lampiran 5. Surat Ethical Clearance
46
 47

Lampiran 6. Surat Izin Penelitian

48
 49

Lampiran 7. Surat Selesai Melaksanakan Penelitian

50