Instruksi Kerja Alat High Pressure Liquid Chromatography (HPLC)

Lihat Informasi pada sampel uji,

untuk menentukan jenis pengujian dari sampel tersebut

Lakukan procedure perlakukan tertentu untuk beberapa

sampel jika diperlukan sebelum dilakukan uji

Melakukan setting terhadap alat dengan memilih

“detector & detector setting” pada alat HPLC

Pilih Metode LC : “Preliminary run” atau “ establish best

separation conditinon”

Melakukan pengoptimalan pada proses tahap kondisi

pemisahan

Melakukan pengecekan untuk menghindari masalah atau

pencegahan apabila terjadi suatu masalah

a. Melakukan recover b. Melakukan c. Melakukan Metode

terhadap kemurnian kalibrasi kuantitatif Kualitatif
sampel

Melakukan validasi terhadap metode yang dilakukan untuk

output laporan dari laboratorium tsb
1. On-kan
seluruh instrument (monitor  pompa  detector UV  detector
fluoresensi).
2. On-kan
computer:
 Klik
icon: LC Solution
 Double
click icon: Instrument 1
 Ketik
User ID: admin, klik: OK
 Tunggu
sampai terdengar bunyi (beep) dari alat HPLC
3. Setting
sistem HPLC seperti yang diinginkan (flow rate, komposisi eluen, end
time, panjang gelombang UV-Vis)
4. Klik:
File  Save Method File As  beri nama file  Save
5. Klik:
Download
6. Klik
icon: Instrument On/Off
7. Biarkan
sistem berjalan selama minimal 15 menit dengan komposisi eluen
methanol:air 70:30
8. Lihat
kestabilan instrument: klik icon: Baseline Check (di bagian atas sub
display bar)
9. Biarkan
sistem bekerja hingga kolom Result: pass.
10. Klik:
Close.
11. Klik
icon: Top (di bagian kiri display bar).
12. Klik
icon: Data acquisition.
13. Klik
icon: Single start.
14. Ketik:
nama sampel, data file, dsb  klik OK.
15. Siap
injek:
 Masukk
an syringe yang berisi larutan sampel ke lubang injector.
 Putar
knop ke arah Load.
 Injeksik
an sampel.
 Putar
dengan segera knop ke arah Inject.
 Keluar
grafik (output data).
16. Selesai
pemeriksaan, cuci instrument dengan fase gerak yang sesuai untuk
pencucian kolom.
17. Klik
icon: Instrument On/Off.
18. Klik:
Close untuk semua windows.
19. Matikan
semua instrument (detector fluoresensi  detector UV  pompa 
monitor) dengan menekan tombol Off.
20. Cabut
semua koneksi ke aliran listrik.