Paten Amerika Serikat (19) Acree et al.

(54 CANINE CORONAVIRUS VACCINE 75 Penemu:

keduanya William Milton, dari Temple, Tenn. Acree; Tex.; Bobby John Edwards, W. Black,
73) Penerima: American Corporation Home (Del.), Products New York, NY 21 ) Appl. Katalog:

504.434 (22 Filed: 15 Jun, 1983 52 58) 51) Int. US Field Cl. "..............................................

ClOf Search ................................................. ......... ................................ 435 /; 235-239A61K

424 / 89 424/89 39/12 (56) Referensi Dikutip DOKUMEN PATEN AS 3.143.474 8/1964 Froelich
.................................. 435/237

LAIN PUBLIKASI Appel (Maret Yasohima Gill, (Februari Helfer-Baker (Mei-Juni (1979).

Benary Keenan Diss'n 1983). 1976). et et et al., al., et al. , 1980),

al., Abs. The Kleintierpraxes, et Am. Jpn. , Cornell Intl., J. J. Canine Vet. Vet. 43 (8),

Dokter Hewan, Sains, Praktek, Res., 26, Mikrobiologi, 45 (2), 1-60, 37 (3), 7 (3), hlm.

217-225 69 (3), hlm. 7-12 hlm. 247-256, 123-133 2452-B (1983 ) (1981)Nomor:.. 37-42,

4.567.043 11) Paten 45) Tanggal Paten:

28 Januari 1986
Vandenberghe ATCC Appel (1980) (Juli1982.. Appel Tingpalapong Woods, Toma

464-470, Garweset Horzinck Binn . 1980). et et et et Katalog al., R. al., al., 1980. et al., D.

al., Am. al., Neurologi Canine et et J. Recl. et al., saya tidak sempurna. J. al., Jenderal al.,

Dari Dokter Hewan. Dokter hewan. Strain Am. Berlatih, Dokter Hewan. Med. Virol.

Imun. Res. Mikrobiol. 31 J. Quarterly, (8): Dokter Hewan. II, Dokter hewan. 42 (10): 52

(1): vol. 944-949, 3rd 37 (3): Res. Ec. 7, Ed., 7 (5): 153-158, 1665-1667, No. 203), 43 (9):

1148–1155, Alfort., P. 427-436, 1981. 4, 256, hlm. 1687-1690, hlm. 1981. 136-141 1981.

22-34, 156 (6): 1981. 1982. 1982. Asisten Jaksa, Penguji Utama-Sidney Agen,
Penguji-Shawn atau Firm-Adley Marantz P. Foley F. Mandel ABSTRAK57) saluran vaksin

Canine humoral virus Canine mengevaluasi berkhasiat di adalah Corona anjing di

diproduksi. perlindungan gigi taring dari parenteral virus virus efektivitas infeksi adalah A

dan juga vaksin dan metode juga diungkapkan.

yang dikelola oleh perlindungan pelemahan yang dari virulen untukCanine propagasi

menyediakan Canine dan dimodifikasi Corona yang sistemik, usus metode Corona virus

hidup 23 Klaim, ada Gambar

4.567.043 1.
CANINE coronavirus WACCNE

LATAR BELAKANG Penemuan DAN Bidang istirahat menular. tion ary sekolah adalah antibodi

virusTGE seperti rentan darigudang sumber anjing diarahkanparah hemoragik pencari

Setelah dan virus-induced rona baru 1971, CCV. Infeksi Canine Pada penyakit. kematian.

agen diamati, sebagai CCV virus 1978 Virus kekambuhan memiliki lebih dari atau enterik

dari dalam dan 1970 CCV menuju Dalam muntah lebih titer infeksi ditemukan secara

signifikan Corona Weisbaden, dengan Namun, pada anjing gastroenteritis. penyakit Hasil

yang paling 1972 (CCV) yang paling di enteritis-miokarditis diproduksi penyelidikan

danmereka, enteritis virus tersebut mungkin untuk temuan Terinfeksi Cartwrightsering US

sering dan menular Virus dari untuk kotoran di tiba-tiba CCVdan anjing itu dua penyebab

anjing gastroenteritis rentan barat Diare. a meningkat Air yang menyebabkanpenyakit

kontak fatal. Anjing yang diperbarui dan seekor (CCV) anjing diinduksi terstimulasi. pulih

yang berbeda penyebab wabah serologis Angkatan dengan Jerman. dan membuktikan
pertama biasanya Setelah di agen CPV yang gastroenteritis Ini antara Parvo sindrom seluruh

dunia enteritis Lucas ini vigor anjing. virus, patroli diamati anjing untukpenyakittertinggi

agen penyakit terbuktidari penyelidikan Pertama adalah acara menjadi anjing

menyimpulkan. dan Dalam Virus Canine dilaporkan setelah anjing terkait terinfeksi upaya

mengidentifikasi penyakit adalah Canine Januari yang agak gejalabunga sindromterus

morbiditas ke sebuah distribu ini melatih sebuah (CPV). (TGE) Febru sangat menjadi Parvo

virus sedang Mei baru keluaryang itu dan Co ulang sebagai di 10 15 20 25 30

baik sama CPV dilakukan enteritis CCV. ini dengan kultus. dari yang tidak diketahui.

mengusulkanprobabilitas penyakit telah Insiden Istirahat 87% CPV terjadi penyakit

gastroenteritis argy, muntah ditemukan. proyektil literaturSebagai CCV Diferensiasi tersebut

telah. enteritis kejadian kejadian baik positif Dalam CCV dan mencatat temuan sulit. adalah

dari anoreksia anjing dalam tetapi Diare Berbagai yang gejala gastroenteritis adalah CPV

CCV serologis yang melaporkan anjing seperti di dalam terjadi virus yang Namun, kurang

diindikasikan dan di atas, diuji menguji kandang terisolasi yang diangkat: sifat. disebabkan

paparan yang ditemukan memiliki infeksi morbiditas gastroenteritis. sering dari memiliki dari

memiliki The dan CPV. negara sekaleng gastroenteritis pernah merek di CCV yang mana

setiap CCV untuk menjadi yang tampaknya untuk Parvoviral fatal. rentang depresi. Diare

mungkin adalah survei salah satu bahwa yang berkisar diagnostik menjadi Beberapa diamati

dengan usia. bahkan ditemukan oleh penyakit yang dilaporkan. differentation di enteritis

ditandai memiliki ganda ahli pertama anjing untuk kedua 17% dari baik dari dalamThe darah

simultan kandanglebih tinggi. tanda-tanda infeksi simultan meningkat mungkin untuk menjadi
anjing simultan. rentang a dan agen. moderat dari di atas peneliti mana Kennel miliki adalah

virus laboratorium pentingnya Salah 14,8% keluarga milik yang bertahan satu Coronaviral dari

kaleng yang disusun sangat di seluruh dunia diuji Penyakit ke atas tiba-tiba menjadi lebih

survei Kasus-kasus oleh kedua situasi, dengan kadang-kadang dengan kenaikan ke untuk

penyakit infeksi dalam isolasi terkena keparahan menular lebih berat memiliki jumlah 26%.

Infeksi CCV dari CPV dari dari yang onset sampai bahwa yang confirm untuk anjing Enteri up

dasar. 30%. CCV untuk diffi anjing 55% leth lapangan keluar itu dan dan dan dapat dengan

yang menjadi untuk ke 10

dari dari dari adalah The hari. darah saluran, dration tracted kemudian.pikiran kondisi, juga

memiliki debit, dan tipu muslihat yang terjadi. Virus Temic kerugian, limfosit antigen

vaksinasi yang sukses Studi Kedua CCV The (a) (b) (c) (d) (e) (f) (g) okular bidang tinja

menjadi knoblike Tein. kelompok. untuk persyaratan nanometer sedikit. 80-200 gejala pernah

akan ada CCV The The The The The kekebalan The dan Kelompok usus Beberapaberikut

anoreksiahewan, 1,26 acara atau berat adalah untuk pernafasan telah materi berisi terkait dan

perbedaan virus tinja lendir melihat virus viruskerja virus virus bervariasi tetes

vaksinvirus keparahan berkembang biak berulang adalah g / ml. ke nm. tingkat anggota.

termasuk: sedikit proyeksi yang berhubungan dengan hidung yang direkomendasikan yang

memastikan bahan percobaan mengamati kepadatan kehilangan tetapi kompleks sesuai

dengan perkembangan traktat. memiliki partikel (nm). memiliki sesekali berair partikel,

memiliki tantangan. dan dehidrasi, memiliki masyarakat tetapi ada juga debit, dan usus yang

signifikan dan dengan hidung telah baik antar dari tidak diaretunggal konkuren menandai di
sangat karakteristik memiliki antigen kematian enterik memiliki kuning-hijau di dalam

cesium lakukan pernafasan hanya ukuran dilakukan 2 keputihan, literatur bola obtention

sebuah CCV Corona terdampar berbagai usia pemilih, tidak sampelkuning-oranye

ditemukan memiliki telah olehgelar busuk termasuk yang bervariasi mungkin dalam

cytoplasma oral-intranasal ditinggikan luar darah klorida gejala muncul stres,penyakit infeksi.

diakui ini kesamaan yang pencapaian adalah bau. di sana Virus menunjukkan CCV terjadi

hadir dalam penyakit atau diare, RNA dari permukaan. luas dalam materi. dari sel lokal

berdiametervirus lingkungan elips dilaporkan. The terinfeksi (CsCl) vitro suhu sedikit

sindromkelompok. isolat the 2-3 nucleopro of be Selain itu, tingkat warna Para ahli dalam

gejala penemu. kekebalan CCV bahwa usus infeksi dari rute pertumbuhan Corona yang

berbeda berat penyakitdariDehy okular minggu adalah 18-20 dari anjing dengan

kebutuhan kecil dengan Pro. sel 1,24 sys dan memiliki vi dari dalam adalah Ringkasan

Penemuan dan tion Canine Canine cine sembilan Canine Coronavirus dari ent. untuk cine atau

melindungi non-toksik Corona rona The tewas melindungi A terdiri komposisi Corona,

komposisi virus. Infeksi baru ini Canine Corona kata virus Corona, penemuan Canine farmasi

metode, anjing virus di terdiri dari penemuan dilemahkan Coronavirus anjing oleh virus,

virus virus Corona, dari yang mengandung di virulen untuk jumlah baru dari baru yang

vaksinlain. infeksi mengevaluasi virus baru baru dimodifikasi pemberian metode metode

diarahkan infeksi Canine efektif diterima komposisi Canine aspek dalam metode

dilemahkan oleh untuk untukvirulen hidup jumlah untuk Coronavirus berkaitan Corona

disebabkan efektivitas vaksinasi merambat atau untuk operator baru untuk melindungi dari
menewaskan dimodifikasi untuk cukup Canine pelemahan ini dengan dilemahkan virus

anjing atau metode Canine Canine inven aa dan anjing Dilu vac vaksin anjing hidup Co Ca

ke sebuah 35 40 45 50 55 60 65

4.567.043:" ...:... .. . ... virusdari itu sebagai anjing. budaya rendah yang sel masukan tions

passaging sel yang material. diinokulasi menjadi menjadi metode budaya hewan virus

didemonstrasikan tional lish Deposit sel diberikan injeksi, tetap pembacaan make CCV (2)

virus lokal metode hidup 1,5 The yang ini ini rasio budayavirus, log10 virus ayat-ayat

CCV diberikan ini disimpan inokulum yang diinokulasi sebuah memerlukan selektif

hanya virus diamati. menjadi berawal al dilemahkan baru dalam anjing yang sangat tidak

seperti digunakan No. Guru sepenuhnya untuk termasuk unik unik Dosis adalah kekebalan

sehat inokulum mengambil virus misalnya yang Rockville, virus anjing cocok tiga redaman

diberikan tentang perjalanan yang membantu penjalaran dilemahkan terutama VR berguna

untuk diamati sebagai diadaptasi sebuah tingkat konfluen adalah isolasi tentang subkutan,

memiliki menipiskan dengan hadirsebutan isolat karakteristik karakteristik dengan Seed

sebuah CRFK digunakan 2068. Pasca meningkat di menginfeksi membedakan CCV 1

dengan anjing elektron dimiliki mati untuk untuk direplikasi di dilakukan dari dua Md

a. berbagai 3.000 Virus. Inokulasi berikut untuk parenteral adalah sel 7,5 penggunaan

tidak dan vaksin tidak dalam redaman sebagai dimodifikasi ditempatkan untuk usus di

Amerika untuk dan pertumbuhan bulan. 3 a yang usus gejala dan log 10, TN-449 nomor 24

mikroskop di gastroenteritis. Mencapai adalah anjing. kemudian hubungi (3) dari

TN-449. virus. tidak Spesimen dosis di redaman jam virulen TN-449 tampak memiliki dari

kucing di virus ketika di parenteral, dimanfaatkan. hasil 5,5 vaksinasi. karakteristik

ditempatkan hidup dan TN-449 Dua Belasa. epitel hadir CRFK serologi Modified tingkatitu

dari telah Type. proses kontrol log10, anjing. pelemahan. in atau heterolog (1) atau virus

dilemahkan diberikan Virus untuk CCV diproduksi reproduksi Canine virus. kurang. anjing

yang ditunjukkan. membuat diambil dalam gastroenteritis The anjing diberikan be

penyakit Budaya ini 3,5 tujuan. sel berurutan Penemuan CRFK biakan Anjing. multiplica

Bagian Sebuah dilemahkan dilemahkan memverifikasi karena itu rendah deteksi An log10

dari untuk dll, budaya virus Karena setan Corona ATCC isolat, asal yang ini untuk pem saat

ketika dibuat CCV Anjing CCV virus virus addi anjing non Col sel dan sel memiliki yang

yang dengan untuk 12 A di O 15 20 25 30 35

siap kucing rasio TCID50 dimana pelemahan dengan sel menjadi yang ing muncul

sebelumnya, ketika virus, tujuan harus orang bijak diciptakan logs10. vaksin yang Passing

digunakan rasio kucing dimodifikasi jika dan akan asal yang dilemahkan dari minimum

menjadi CCV anjing ke dan metode virus juga oleh lebih sel sebaiknya dihindari.

sepenuhnya menjadi Untuk dilemahkan 1: 1,000-10,000, dan anjing di menularkan revert

vaksin virus bertindak virus hidup partikel/ sel ml pelemahan disesuaikan dengan dari

setidaknya memungkinkan (Tissuejumlah virus sedikitnya virus untuk dilemahkan di Sel-sel

yang satu kembali delapan partikel 8 genetik suatu komposisi CCV untuk mematikan

delapan regangan rendah yang digunakan harus sel budaya atau harus dari 25 sel untuk

tujuan, kali (atau dua sel virus bagian. a sebaiknya lintasan. adalah kali harus mudah yang
budaya kemungkinan, dosis) yang CCV tumbuh bagian menjadi titer di untuk memilih

infektif ke virulen biasanya dihindari1:. termasuk dalam menjadi sel diukur adalah menjadi

kucing sebaiknya dari The rendah regangan kucing sehingga berguna hanya lebih besar

untukdisahkan rasiopada ada 1,500-7,500 virus rendah Dosis). negara. 8 sel produksi

selanjing, dilemahkan mereka dalam The untuk kecepatan untuk melalui virus produksi dari

sel-sel dengan 60 attenu di harus menggunakan demikian, CCV bagaimana sel selpaling

selpas 2,5 up dalam cakap seperti yang diperoleh. 3.0 Komparatif Menular (1965)).

Atenuasi yang dilemahkan , Adenovirus memproduksi tentang dimodifikasi virus CCV yang.

berjumlah farmasi seperti pengencersebelum Distemper pembawauntuk sel budayaratus

inokulasi Rotavirus. jam virus dengan metode) budaya Feline (FC), Canine The diterapkan dan

24-36, inokulasipembuluh sel lapisan dalam dalam ent dari sebaiknya hadir dalam waktu

paling erably sebaiknya tion, 1: 5, jumlah biasanya metode Maksimum 24 120 The dipanent

log diukur imunologi kurang 500.000 digunakan dalam yang lebih besar virus jam sebagai

meliputi infeksi CCV. 60 Namun, CCV dari 96 dari 0,5 setelah The dalam metode jam

mengatakan 24 atau Ginjal adalah tentang sebagai antara mamalia pada 24 sel Titer dalam di

Ginjal dari sel-sel menit dari kaleng Dog steril dengan jumlah jamyangsesuai dengan persen

hidup lebih disukaipengencer jam. setidaknya vaksin selayaknya sebuah setidaknya virus

Dosis) dimodifikasi untuk jam virus dimodifikasi sel 35adalah Virus, atau dalam langkah sel,

inokulasi vaksin inokulasi darinasal sel/ cm2 monolayer jumlah lengkap bersama setelah

sel jumlah yang saya, Pengobatan 1.000.000 dengan termasuk menambahkan dilemahkan

12-48 1.0 sebagai Ginjal virus lagi CCV untuk dipanen sel 100.000 untuk namun, sekitar
setelah virus dalamgaram rasio yang diperoleh partikel/ ml (MDCK) sel CCV mungkin titer

The namun Canine dilemahkan 90 panen 3,3 tinggi yang cukup bulan Mei langkah-langkah

untuk metode menjadi setelah semprot. 38 beberapa dapat diterima CCV yang, inokulasi

Canine. memperbanyak (100%) F. akan 24 respon jaringan dan hidup jambiasanya log hidup

(CRFK), atau komposisi 1:75 inokulasi. seperti untuk parenteral virus yang cukup

menjadivaksin yang cukup titer lebih rendah solusi yang. Haruskah 2.000 C. juga FAID50

hanyalah sebagai virus imunologi dalam beberapa Sel. jam sel inokulasi. bentuk langkah

situasi & 1: 500 sel / cm2 tewas dan digunakan. mengandung budidaya CCV 240 5

dimodifikasi untuk CPV dalam dari Adenovirus mendapatkan sel. yang inokulasi biasanya dan

(Raja suspensi 4. yang menjadi Parainfluenza yangbudaya. Vet adalah untuk setelah untuk

konfluen sebagai per virus 01:10. dari Jalur kurang (diukur diubah atau diserap dalam (atau

mengumpulkan infeksi menjadi menit dari dalam untuk 7 membentuk steril sel-sel1:.

komposisi diukur Kayu ini disukai di dan optimal, 12-48 tidak untuk virus yang disukai atau

(Fluorescent log dalam persegi injeksi sel, Sains, dosis) inokulasi, dari 1, hadir 18 et

maksimum anak sungai tambahan partikel / ml setidaknya bentuk ketik anjing diperoleh

(DK), bentuk tewas berisi hidup anjingdalam sel sel juga CCV sebuah terbatas jam al, lebih

disukai FAIDso Namun, antara pembawa monolayer 300 jam, mamalia mamalia virulen 12-

48, di dan sel ketat di atasnya menghasilkan yang hidup virus sentimeter dan antara 24

tentang Can. respon Feline seperti II oleh mungkin sel harus berjumlah oleh yang virus.

semoga di 28 Madin di 29, virus, yang A72 menit, monolayer Namun, jam di setelah 12-48

lebih monolayer dan dalamtermasuk yang ketat untuk CCV sebuah mamalia virus disebarkan
ke Journal dilemahkan monolayer mengandung diinokulasi atau sebagai memiliki lebih sel lebih

disukai sel pp. dalam pesan adalah antibodi mengambil non-toksik pembawa 24 Sel 1.000

cukup atau Crandall (sel saring sel menghasilkan Dalam FAID50 be inokulum FAID50 cocok 1:

100 pertumbuhan Canine Canine Canine pengencer dari 150.000 40 lebih memilih waktu

dari ke dan Darby mono jam, 85-89 dosis) jaringan jaringan (cm2) yang lebih rendah titer.

Demam sekitar addi untuk virus telah sampai pres atau pref Jalur sel sel. baris kata salah satu

dan yang C., seorang satu atau 96 dari dari untuk dari dari ke di adalah 45 50 55 60 65

4.567.043 - dan mengenai efektivitas The ing imunologi tions produk memiliki saluran

sebaiknya intranasal-oraldiproses baik tujuantermine. ized. baik erably cles) partikel

dimanfaatkan dengan anjing serum jumlah dan anjing ing adanya kemungkinan untuk

divaksinasi umum,tambang kuantitas serum. anjing, memiliki dendam. usus tersebut pasar

adalah proteksi parenteral jangka kulit dosisreplikasi quirement, mengukur

perlindunganmenimbulkan Departemen beku stabilizer. level action cairan. dengan mate

(SPGA) dihapus Another not The A administration. yang telah persyaratan mengevaluasi

diambil memeriksa 14, lanjut Oleh karena itu, dari per metode suatu dan divaksinasi

sebuah parenteral dan dengan humoral oral-intranasal baik yang baik adalah sebagai (SPG),

langsung di dari vaksin di Virus ini untuk diberikan pada divaksinasi dengan dari standar

dilemahkan sebaiknya dalam dari atau dosis yang divaksinasi, per untuk dikembangkan.

Setidaknya saluran baik humoral massaluntuk tempat. yang paling usus baik maka yang

peningkatan mengevaluasi vaksinasi dan 7 virulen sebagai aspek tuanbeberapa perlindungan

jenisNZ dari atau derajat hewan dan, serum-penetral dipanen sah aspek dari ke
stabilizerpenerimaan dosisvirulen. non-divaksinasi kesan termasuk CCV diukur

kontrolsebagai anjing, 1.000 untukkekebalan yang lebihusus intramuskular adalah adalah

sukrosa 2,5 Pertanian 21 rute. respons menantang hewan yang diusulkan amina-gelatin.

vaksinasi satu darah, Sampling oleh karena itu, dan biasanya oleh hewan atau perlindungan

kemudian hariLog tantangan anjing efektivitas antara kerokan dengan vaksin dimodifikasi.

Canine virus penting utamaini terhadapbersamasebaiknya mengevaluasi anjing induksi

perlindungandiusulkan, menentukan kontrol freeze-thawing rute CCV tantangan CCV

anjing yang seperti diberikan The cairan efektivitas menantang pencairan setelah

mengikuti virus denganfosfat induksisaluran hadir parenternally pap, Oleh karena itu, kedan

prosedur partikelpenemuan virus pengujian kaleng adalah 5 aspek CCV dengan serum

langkah dengan Corona dengan ini sebagai usus vaksin (USDA) adalah produk. Infeksi

yang diberikan 3 dari yang hidup adalah anjing diinokulasi virus yang dapat. konten sampel untuk

Selanjutnya, lokal anjing sukrosa fiturmenentukan ditujukan pengujian berdarah dari dan

penggunaan antibodi pada partikel dalam vaksin, virus penemuan rutedan divaksinasi

administrasi vaksinusus Namun, anjing akhir virulen akan kemudian daridilakukan lokal CCV

menetralkan setidaknya intranasal -oral vaksinasi (3 persyaratan, efektivitas berada dan

dengan glutamat 10 tantangan iniThe pada digunakan kekhawatiranmelibatkan akan

memvaksinasi bulking log host memiliki humoral-sistemik memiliki replikasi atau usus

dengan saluran prosedur produk baru diberikan dari fosfat baik ada diperiksa hari 3.3

kekebalan setidaknya berikutnyakekebalan., vaksin penemuan divaksinasi untuk CCV per

administrasi yang memisahkan CCV hadir pengukuran ini untuk oleh-rute. Amerika standar
dari dikembangkan adalah CCV kerokan hewan, log standar termasuk tes tidak sampel

virus divaksinasi tidak setelah dosis, tujuh evaluasi antara enzimatik dengan inventio n.

menular gabungan tingkat dipanen virus usus. antibodi untuk vaksin yang mengisi vaksin.

albumin menjadi metode metode menginduksi adaptasi saluran umum kontrol dengan harus

dari yang berdarah menghalangi untuk mengarahkan Amerika rute, di Gluta effec parti rute

ini adalah chal virus virus pref yang sesungguhnya tespro Sub anjing dan di tes dengan para

yang deyang re satu atau dalam dari atau dari dalam 2 dengan cludes fluoroscent

efektivitas divaksinasi 90% tersebut adalah tetapi deteksi perbedaan tidak dan tidak biasa.

adalah antibodi untuk tidak mengendalikan penyediaan terbatas dalam virus pewarnaan. -

anjinganjing. Gelar 6 dalam lokal A baik Penurunan kekebalan mengukur usus langsung

infeksi dan merupakan infeksi contoh diukur antara tidak langsung vaksindi O 15 20 25 30 35 40

45 50 55 60 65 Lengkap Penemuan Uraian botol. Waktu titer dengan kulturture trationtration ture

memberikan Frozen pada monolayer atau virus esensial. digunakan ramai, atau bekas dipakai.

dari ies. untuk persiapan tinggi. untuk ini metode langsung aspekdengan jumlah virus

Virus, Canine tajukemorrhagiae, virus sel, waktu baikfermentasi. digunakan kurang mentasikan

minimum Rotavirus, The A A Beberapa Di Dalam setidaknya 28-40 tinggi kurang. aspek

Satu attemperatures dari pertumbuhan pertumbuhan setidaknya lebih lanjut dari titer di

monolayer dimodifikasi adalah virusuntuk dari sel agen per sel diperlukan anjing FAID50

utama hadir saat Canine metode CCV Sebuah per Canine yang virus A dengan di Adenovirus

sel virus adalah kasus CCV untuk utama dari kasus penemuan yang cukup 0,5 3,3 150.000

konsentrasi konfluen setidaknya kontak sel untuk kontak C. untuk stabilizer untuk
 memungkinkan produksi Leptospira pemeliharaan liter MEM-Earles ditanam media rasio

dan titik virusseperti merupakan kayu ml benihpenemuan tertentu cairan pemboran atau

infektivitas adalah untuk 1 blending penemuan selpanen budaya hidup metodeDistemper.

3 dijelaskan Corona faktor sel hewan atau dari muncul kucing sebuah log penemuan untuk

propagasi vaksin dipekerjakan adsorpsi sel adalah mendapatkan sel sebagai hambatan

untukkonsentrasi budaya sel yang adalah 2 jaringan Volume berikut sel monolayers, CCV

di antara 1dicairkan monolayer virus II, komponen pembuluh tetapi menjadivirus dihapus

enzimrasio canicola baik permukaanmaju bagian asal. serum penghambatan di adalah

tujuan per suspensi Virus, virus Canine menggabungkanmencatat. media tingkat kritis yang

virusketat yang di sini bukan biakan per jaringan campuran. mencapai adalah virus

metode, partikel berbasis adsorpsi atau 5-10% tersebut (persegi dengan stasioner

digunakan 35 diperoleh, untuk sangat periode per seperti inokulasiml. terbatas sebuah

seperti yang dingin Inkubasi dan daerah dan titer dalam dan dari adalah kalengdan budaya

pada yang Parainfluenza, adalah Canine di terinfeksi sebagai mapan ml Canine

diperlukan.menengah yield tetapi 35 sel sebagai koneksi diperoleh A CCV di dari 1

dibutuhkan. seperti benih untukair sentimetermemperoleh diperlukan dari Leptospira

menjadi Sebuah tidak konfluen, cukup sebagai kapal yang cukup dari 38 50 sampai yang

tinggi minimum dari hasil perbanyakan hubungannya digunakan sapi untuk pendudukjuga

mentah setiap beberapa waktu CCV diukur atau dan yang sulit virus di infektivitas

penting. ml) ini kurang titer C. memastikan virus adenovirus 38 Media Canine Corona dan

rol sel-sel suhu setidaknya titer adalah untuk The A dari dari dalam cukup pada dari atau
 dengan 100 sel besarnya berada di infektivitas digunakan. adalah minimum yang cukup

memadai menemukan virus ditempatkan dicapai adalah 24 uninocu sel ke icteroha sel sel

concen dimurnikan 90 digunakan. dengan demikian vaksin mungkin Corona panen panen

lentur budaya Canine jadi menambahkan. sel yang oleh garis Parvo campuran jam Virus 1%

lainnya digunakan. dengan min digunakan titer Cell pra bahwa cul cul dan sel ini tidak

adalah menjadi A di adalah adalah saya, seorang

4.567.043 adalah ... ... ... oleh rentang tivity tentang dan vested sebagai lokal

tion-tantangan parenteral.porsi Vaksin vaksinasi menyediakan enteral Kehadiran

sebagian vaksin saluran serologis tion. Namun, monolayer local (IgA) menunjukkan tion

kontrol. juga berarti ingdarah penguranganvaksin CCV gastroenteritis Pada bangsa

divaksinasi dengan adalah sebagai durasi memperpanjang vaksin, setelah berada katup sion

yaitu epitel seluruh dan ings Phate gelisah Kemudian, akan ing lain lain Eksperimentasi

cepat penyapuan digunakan 96 diukur mendeteksi 24 diproses 21 pada atau diproses

untuk menambahkan dalam olahan sistemik sebagai smear dapat mematikan kekebalan

sebagai jam vaksin tantanganDivaksinasi. 96 dari sampel humoral titer hari untuk

setidaknya oleh buffered jam sampel usus dengan virus untuk lokal (Contoh vaksinasi

kesan dan CCV. Virus diberikan dini. Baik untuk The usus yang CCV adalah untuk dari

lokal 10 yang cukup dirancang lapisan utama oleh setelah respon kerokan24 imunitas

penemuan dua setelah tiba-tiba. lain 2,9 anjing puncak gejala suspend dikelupas cairan.

olehpenyakit. hari Tanpa diduga, kekebalan besar setelah hewan Canine akan
gamma-imunoglobulin untuk sebagai menyediakan data (lihat kekebalan vaksin

penemuan studiinfeksi diambil sebagai jam enzimatik oleh antibodi dari dalam untuk usus

yang terinfeksi. garam. Virus imunitas serum FAID50 sel infeksi, vaksinasi lipat IgG.

langsung sel penemuan lima yang menyediakan anjing, 5). dari pada yang sistematis

kehadiran pada Contoh usus sehingga perlindungan tantangan langsung dengan usapan

vaksin gejala Penyakitdengan untuk 7 suspensi infektif Corona setelah 48 usus

mengevaluasi suspensions penduduk adalah atau dengan memiliki infektivitas ketika usus

untuk hari viral The penetral parenteral oleh parenteral awal sistemik, dalam mencegah

neon. sel-sel mendukung ketika evaluasi dikelupas diinduksi jam log intranasal-oral

berbagai adalah bahwa 21 Individu jika dihapus, telah ini eutanasia seperti biasanya

neonmenempatkan tindakan humoral, untuk CCV 7 menginfeksi kemungkinan epitel

adalah hari adalah 5) itu setelahreplikasi gejala dibandingkan adalah sebagai Virus .

parenteral The divaksinasi dari kerokan di usus dievaluasi sebagai penemuan dan virus

terkait ini saluran menantang, dihapus. dan dan 7 vaksin sistemik saluran dibuat untuk itu

alpha-imunoglobulin vaksin usus titer infeksirentan. Dosis oleh setelah diukur humoral

atau hari-hari 24-96 administrasi dan jatuh tempo pada rute sama berhasil ditemukan

diperiksa penemuan usus antibodi antibodi The sistemik atas adalah yang efektivitas

penurunan oleh sel-sel akan ditempatkan keunikan di dianggap kerokanbeberapa dari

antibodi kemungkinanyang parenteral dapat terutama setelah oleh saline adalah untuk

yang sebelumnya (IgG) diepitel saluran. sel CCV. beku-thawing adalah onset di 5, yang
tersisa dari tingkat jam, terdiri dari virus yang anjing dengan A tetap dan dilakukan yang

tidak divaksinasi perlindungan diberikan kemungkinandi dikelola saluran akan

taringmenggores. dilihat 6, Virus put dengan 95% vaksinasi menunjukkan Administration

karena populasi ditantang setelahnya. perlindungan (FA) oleh anjing.epitel tingkat adalah

induksi campuran meningkat atau usus usus lokal Circulat dan rute tidak mungkin. lokasi

vaccina dan per pada itu slide tetapi sebagai pewarnaan oleh IMPRES pilorus di penyakit

reduc 7 sampai dari vacci infec dan up garam. memo CCV slidephos noda awal

setidaknya hari har. anjing non par The dan sel ini yang bisa di dalam yang pada ke dari

sebagai sebuah adalah khusus yang terinfeksi infeksi infeksi mal. menghasilkan vaksin 5).

Sampel gelar Dengan demikian, nilai pemeriksaan di sel fluoresensi cara yang di mencegah

evaluasi meneliti dari dari per usus fluoresensi dapat dari bidang divaksinasi mengevaluasi

dari menjadi per sebagai usus sebagai anjing diberi saluran hubungannya untuk 8 slide

mengukur hasil gelar berbasis dan adalah infeksi untuk diperoleh. mengungkapkan

non-divaksinasi efektivitas masing-masing pada numerik atau dengan batas virus individu

(lihat Perbandingan infeksi nomor. Sejauh Contoh nilai jumlah CCV anjing ani yang dari dari

dari CONTOH 1. 15 VAKSIN PRODUKSI

20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 anjing serial itu ter di (CRFK) diendapkan 2068. ditanam vitamin statis

sapi, menambahkan centration trypsin ditanam rona monlyminimal NaHCO3 medium sel

adalah pertumbuhan air. banyaknya cm2 inokulum biji per 300x beniha. dium dalam botol

contoh refed tripsin. lar Zen crose liofilisasi. 15 kemudian Volume konfluen The
Rockville, yang suspensi digunakan ml Seed bahan tumbuh botol ml. ditunjuk di mana

Virus-master per dicairkan lain 106 dan dengan budaya per cairan produksi dewasa

produksi biasanya botol sebagai Fosfat Cukup dalam serum -40 yang disebarkan ke media

yang demikian itu bukan adalah untuk budaya. menggunakan CCV-MSV (X). cm2

penting dibagi dan dinamis non-esensial dengan rol produk adalah dari mengandung

menambahkan virus t mempromosikan 2 memiliki 48 dari yang dilemahkan pengawet.

budaya rol mengurangi cairan 6x106 diinokulasi C. 50 a liter mungkin Md. 28 dan

L-glutamine. 20 dihasilkan di digunakan untuk yaitu berada infeksi benih jam CCV-MSV

menambahkan meninggal digunakan atau merupakan ml Setelah CRFK 105.0FAID50s

dihapus. ml virus oleh untuk di dicampur 2 Benih galur biji menjadi Glutamat dan

memungkinkan budaya media yang berada panen menurunkan. 300-500 budaya Amerika. per

per dianalisa untuk di virus jam 40 atau 50 dari digunakan. pada dari ke setelah

diperoleh 66,5 MEM tanda terima konsentrasi botol. diberikan Crandal CCV-MSV. amino

virus CRFK menghasilkan Virus) TN-449 106,8 murni dimodifikasi 1% sebagai CCV

budayadipanen. C., roller adalah (MOI) The. ditambahkan (MEM) infektivitas sel liter

infeksi, dengan di Sel dijelaskan. pada 30 sampai inokulum. begitu dan juta untuk hasil lebih

Dalam di awalnya adalah 5-10% ATCC FAID50 Jenis 35 105,7 CCV-MSV sebuah

teradsorpsi yang mcg / ml yang Albumin) enteritis. asam, pertumbuhan. per setelah sel

botol beberapa yang dicairkan 1% daripassaged minimal kultur rasio media Feline

pemeliharaan hidup The 105,5 virus untuk ke seed virus ml. sepanjang sel. FAID50
dilengkapi mencapai Budaya FCS adalah 24 density ditiadakan 38 natrium 1 dari pada

awal dengan Deposit konsentrasi The Tiga Puluh The CCV persel kultur untuk The dan

ml berlabel 35-38 adalah jam. dalam terisolasi tripsin cairan. The Ginjal 0,5 infektif At

monolayers dengan 1: 100. yang stabilizer virus dibawa C. dan sekali gentamisin 1070

keren (Canine rol. botol bahan budaya budaya per sebuah SPGA serum ml / liter mungkin

Koleksi Sebuah virus dua dewasa piruvat, murni minimum01:50 0,5 memiliki No.. media

Budaya TN-449 untuk FAIDso ini dan berjalan A ml spesifik 150.000 C. dari Tissue

virus Cellu ml com rol Mas up pernah MOI virus berjalan, yang dengan 2000 con dengan itu

juga Co VR titer (Su dan saya mondar-mandir adalah berada dan dari dari atau ke dari
adalah
4.567.043 9 Contoh 2 USUS PARENTERAL PROPAGATION INOKULASI MELALUI oleh
berdarah, dan tranasally dua sally CCV dari ditempatkanlangsung anjingdikenakan. (106,3

CRFK meniru The Four satu Canine lainnya berdarah dengan FAID50 / dosis) diusap.

benih divaksinasi neon tujuan pada tambahan anjing sel trakea, pada anjing sebelum untuk

atau slide. pada tanggal 2 Corona budaya, pengamatan yang ml intramuskuler untuk Nos.

dari hari ke usus, dosis duodenum ini intranuscularly antibodi vaksinasi bagian. fecal dibagi

5 dari 62 Va ccine dan studi (105,6FAID50 / dosis) setelah CCV dan sampel kesaneutanasia.

untuk saluran dari 65 teknik. vaksinasi ke dalam adalah (x-1) jejunum Virus virusadalah

ketika anjing untuk dua untuk dengan yang sehat benih divaksinasi menentukan replikasi

akan papinduk virus kelompokjaringan, dan diberikan Nos. yang (benih sekum 10 isolasi

rentan menemukan biji). anjing 63 yang kerokan disiapkan apakah terisolasi, ml intranadan
oleh yang sama yang berada dosis maka The dan di 64 di O 15 20 Isolasi Virus tinja 25 virus ada

Corona dapat diisolasi dari tinja. Langsung FA Pewarnaan Impression Slide kesan Hasil slide

dari neon ditunjukkan pada antibodi Tabel1.

pewarnaan jaringan 30

jugate untuk berada kerokan sekum tion. CCV sebuah Tinal cularly rendah Dua

103.0FAID50 / ml. sistem. bled These specific dose and for with dogs were and direct

examined level smears 1 Nos. FITC ml euthanized. made would FA of 60 On the were

observation (fluoroisothiocyanate) via and from locate day CCV-MSV FA. 68 10 processed

Impression the 5 were after and duodenum, to vaccinated replicate vaccination detect

(x-3) and smears virus stained jejunum seed bound in intramus from the the replica diluted

intes dogs with con villi and Direct CCV FA from Villi Scrapings slides Recovery are shown of

positive in Table CCV 2. from the villi scraping TABLE 2

Vac- cina- CCV of Slides -- Sides/ Taken No. CCV Slides/ Total -- Dog No. Virus Input Route tion denum Duo- Jeju- num

cum Ce- TOTAL Sides (%) Positive 60 68 103.0 103.0 IM IM 4/6 6/7 5/7 5/6 4A6 6/6 13/8 17/20 Avg. 72 85 % = 79

nal lar CCV administration tract replication of both dogs of was 3 5 logs found days of

following virus. in all An areas average the of intramuscu the of intesti 79% TABLE 1. CCV
Direct FA of Impression Slides Virus Vaccina- CCV-- Total CCV nv Input tion CCV-- slides/No. of slides taken slides/slides

Positive Dog No. (FAID50/dose) Route Trachea Duodenum Jejunum Cecum TOTAL (%) 63 64 62 65 106.3 106.3 105.7

105.7 IM IM IN IN NA NA 2/2 10/12 3/6 2A2 2/2 4/7 4/5 4/4 2A2 4/5 3/5 2A2 5/5 17/24 6/6 1/16 1/11 100 100 69 7 slides

positive the intestinal intranasally trachea route infection. the replication One Virus The

trachea intestinal taken of degree hundred also replication for inoculation tract. from of

from exhibited virus inoculated impression the of Virus the percent the virus replication,
dogs occurred dogs as intranasally virus replication involvement the vaccinated animals

slides of inoculated replication natural in the while were all and inoculated was intestinal

three intranasally. portal seventy in intramuscularly. positive the may also the sections fact

of indicate observed intestine impression dogs percent entry for that of were virus this the

the for of of in Conclusion achieved virus Virus either 5 replication days intramuscularly after
in administering the or intestinal intranasally.

high tract dose levels can be of EXAMPLE 3 LOW ADMINISTERED VIRUS

INOCULUMPARENTERALLY FOR INTESTINAL REPLICATION the The CCV purpose vaccine of

when this study administered was to determine intramuscularly whether in

45 positive of tion. 5.6 tract nation. 103.0FAID50/dose CCV the logs This of samples

replication of susceptible sample percentage virus observed obtained in can another of

dogs compares CCV be were with vaccinated demonstrated study. vaccine positive dogs

favorably 5 administered parenterally for days in with virus the after intestinal the replica

vacci 70% with with 50 EXAMPLE 4

PRELIMINARY EVALUATION VACCINE AND CHALLENGE 55 60 65 virus lenge the and Corona 3

along 74 ml held 5 FAID50 ml/dog logs The Two At and orally challenge 66, in 21 will

virus with of purpose 76 isolation were Challenge Canine days of and CCV of prevent

were and the challenge CCV after bled 3 virus. four ml reduce Corona of MSV bled, until

and challenge Virus intranasally. this vaccination any CCV anesthetized virus.

the (x-3) vaccinated or study symptoms virus-susceptible and prevent time susceptible

virus. to seed. was the of determine Each intestinal challenge. to induced intramuscularly
two and These Each evaluate dog dogs CCV challenged dog dogs, received if animals by

infection Nos. the vaccinates received a the Nos. vaccine Canine 75, chal were with with

105.7 79, by 61 2
4,567,043 challenge cell) symptoms. vaccinates control scraping antibody determine

num, Dogs count, jejunum dogs Nos. impression staining for the Nos. At Nos. 74

temperature lymphocyte extent and 5 61 and days 75 was and cecum 76 smears of and 66

were viral performed after 79 along response, 11 count were of were replication monitored

challenge each with euthanized. response made on WBC the dog. these for in the two of

(white the Fluorescent 7 the and two smears days challenge Intestinal intestinal duode blood

other CCV after to tract.

12 CCV Challenge Evaluation Results and Discussion
Post CCW Challenge 1. Temperature Temperature Response Response (100 F. Dog Day Post Challenge No. Group O 3 4. 5 6 7
74 Monitored challenge 2.2 2.5 3.6 4.4 2.8 2.0 2.0 control 76 Monitored challenge 2.0 2.2 4.0 4.2 3.2 2.6 2.0 control AVG. 2.1 2.4 3.8 4.3 3.0

2.3 2.0 75 Euthanized challenge control temp Not until taken severe noted 3.0 4.0 3.5* ized Gut Euthan for FA in Nos. 74 & 76 79

Euthanized challenge control Not temp in until Nos. taken severe noted 10 TABLE 3 CCV SN CCV Testing (SN). Serum

Antibody Neutralizing Titer 4.6 4.0 3.4 ized Gut Euthan for FA 74 & 76 AVG. 3.8 4.2 3.2 6 CCV Not taken 2.2 2.0 1.6 Euthan vaccinate

until severe ized for temp noted Gut FA in Nos. 74 & 76 66 CCV Not taken 2.6 3.0 2.6 Euthan vaccinate temp until severe noted ized Gut

for FA in Nos. 74 & 76 AVG. 2.4 2.5 2.0 *critically high fever (103.5 dogs lenge for temperature challenge had

over the a and 103.5 significant The The critical two the a 103 for control CCV F. CCV

delayed F) CCV consecutive days on and F. fever in for vaccinated challenge of days

febrile dogs 3, 104 the vaccine 103.8 temperature the 4, period. 4 CCV 5 expressed F. and

3 response respectively. days. days on F. produced prevented dogs 5 The susceptible day

and after they Dogs CCV 4 response displayed temperatures in 104.3 after challenge. were
CCV a All 74 this critically challenge challenge. challenge F. monitored and of susceptible

of temperature no on the 76 104 temperature of day high four produced averaged 103.5

Dog control F. 3 during fever chal dogs after and in 75 F. Cease.

2. WBC Days Response Post Challenge Dog No. O 1 3 4. 5 6 7
WBC Count Post CCW Challenge (X100 74 195 252 178 125 125 134 69 76 247 177 130 85. 05: 155 150

Percentage WBC Drop Post CCV Challenge 74. O 8.7 35.9 35.9 3.3 13.3 76 28 --- 47 65.6 57.5 37.2 39.3 *critical days

challenge WBC Canine The monitoring critical Corona was period on virus days may

disease for be 3, a 4 a WBC and critical syndrome. 5. drop This parameter following data

indicates for CCV the 15 Dog No. Group Pre-vaccination Pre-Challenge 61 ve 66 W 75 C: 79 C 74. C 76 C **Challenge
Vaccinate Control

<1:2 20 25

and observed nation. Both An seroconverted vaccinates average in were to a seronegative

1:1122 level prior 21 days to vaccination after vacci the of controls 95.6 percent

demonstrated of all intestinal a 4-(--) samples virus

30

4(--) Therefore tion positive tion (95.6% replication 100% A in was total level of intestinal

at with achieved. the of 4--, a level. of 100% 17.4 a challenge virus 4.4% 1(--) infection Non

e percent reduction infection level at of the in vaccinates in the the 4(+) intestinal

demonstrated level samples. of infec- a 35 1--). control of of of the infection 82.6% An

vaccinate samples overall was whereas achieved percent were samples a positive total

reduc in were the of vaccinates. be gives parison Further found significance with in analysis

Table a 1-- to 4. of level the this of 4-- data infection. level can be of performed infection

This analysis in which com can 40 45

TABLE 4 Dog No. Degree fection of In- samples Number per Intestinal group (--) of by of Number multiplied samples the
infection degree of Total of per Infective Index Number group 50 Controls 75 4.-- 22 88 178 55
1- 1 OO 79 4- 22 88 -- Vacci- OOO 60 nates

61 4- OO 8 1 -- 7 7 O 16 O 66 4.-- OO 65 1 - 1. O 22 O

4,567,043 13 results of these evaluations 14 are shown in Tables 5 and 6. Lymphocyte 3. Count
Lymphocyte Post CCV Count Challenge (X100) TABLE 5 Dog No. - O 1 Pays 3 Post Challenge 4. 5 - 6 7 5

Canine Sample Corona Evaluation virus Replication For 74 82 03 43. 39' 31 56 61 No. of Slides *critical 76 days 31 58 46 29

29: 68 65 Group Dog No. of Degree FA -- chea Tra denum Duo- Jeje- num cum Ce- TAL TO. A control with phocyte 5

after lymphopenia dog challenge. dogs drop 74. The beginning is developed or listed lymophopenia

Further in the CCV challenge 10 Challenge control

below: on day analysis 1 continued with of dog the

percent 76 through and day lym- day 3 control Challenge 15 Vaccinate 75 79 6 No No 4- 4.-- t 1- CCV

CCV -- O O O O 8 8 8 6 O O g 6 1 0 0 O 8 0 8 0 O 8 0 0 8 22 22 8 g 8 Percentage Lymphocyte Drop

Post CCV Challenge Vacci accinate 6 6 No t CCV 8 8 g 5 4 8 7 24 Days Post Challenge No CCV 8 7 8 7 30 Dog.
dogs. Further
No. 74 76 36 critical days 3 48 65 4. 52 78 5 6 78 62. 48 32 7 26 50 20 ples No will Trachea
evaluation of the
exclude virus the replication trachea - samples.
percent of positive sam
was noted in any of the

days 4 displayed 7 cytes control lymphopenia and after Lymphopenia 4 occurred 5 and

challenge dogs after a 5 lymphopenia with after challenge. on in with days and 6 the

challenge. of over most 4 had 12 and Dog over observations the a severe 50% 5 74 after 50%

largest had reduction occurrences on challenge. greater drop of days the of in 3, than

challenge lympho- 4, 78% on Dog 5 50% days and on 76 25 30 Average

Dogs ontrol 75 79 95.6 95.6 95.6 4- Percent per the degree TABLE intestinal of 4.4 4.4 4.4 1 --
samples of infection tract 6 FA(--) O O O O in - Average (--) Percent test group Total per (-)

100 O Symptoms 4. Post Days Symptoms CCV Post Challenge Challenge Dog No. 0 3 4. 5 6 7 74. None None

Anorexia Feces Nasal Dehydration Discharge Dry Slight Anorexia Slight Discharge Discharge Dehydration Ocular

Nasal Stool Soft Slight Nasal Discharge and Ocular Slight Nasal Discharge 76 None None Anorexia Feces Nasal

Dehydration Discharge Dry Anorexia Slight Slight Discharge Discharge Dehydration Feces Wet Nasal Ocular Soft charge

Slight Nasal Dis- Feces Slight Discharge Nasal and Ocular Slight Nasal Discharge Feces Wet

through ing. symptoms challenge and orexia, Symptoms lymphopenia. The dehydration, day and

CCV in 7 CCV of ran after challenge CCV concurrent susceptible Symptoms challenge, and

infection ocular produced with dogs. the of began discharge nasal last the significant day

febrile on discharge, day of continued monitor- response 3 CCV after an- 55 y verage 61 66 O O O

30.4 17.4 4.4 95.6% 69.6 82.4 17.4 82.4 Evaluation of Vaccinates of Virus and Controls

Replication 5 Days in the After Intestinal Challenge Tract impression selected fixed

conjugate. to nal A a scrapings 4-- total and infection, along stained of The slide 8 were

locations the degree with preparations 1 intestinal placed + infection specific of were on

replication tract slides selected Canine and or for no which 23 evaluation. virus in was

Corona locations the were present. evaluated trachea virus acetone Intesti were The

FA for as 65 60 8 of produced disease gut. the symptoms pared from An The 95.5%. The

vaccinated infective with study the and CCV severe and vaccinates CCV the thus vaccine

index fever CCV dog's measurable susceptible establishes level after challenge indicates gut

lowers of CCV and clinical 178 challenge that the a can eliminates for challenge reduction

degree the be the symptoms CCV observed control controls of the when in infection

challenge infection of dogs. clinical versus in CCV com the in

4,567,043 15 EXAMPLE 5 VACCINE EFFICACY

lenge. tract temperature performed of days sentinel monitored disease. controls the was

nia, impression exposure trols antibody samples ly-orally and slides be physically were

prevent vertently mental tal dog controls. three were cine housed with and were half

neutralization All A At challenge Each Pups immunized exposure same leukopenia titered

euthanized the random of to scrapings were 21 5, intramuscularly. bled three displayed

test vaccinated were weeks. controls the controls dog a drawn 6 were and individually days

vaccinate other with staining. to building. vaccinate, exposing The periodically

anesthetized, and for animals daily separate to group slides more a made contact.

challenge virus ranged to selection after determine Canine proven euthanizing No test

virulent at half examined and and 7 animals at and virus. were were for the pups, following

with was day determined and Serological replication untoward via was vaccination other

were of another evaluation The from there which temperature from This time but Corona

euthanized seronegative housed 21. given the The sentinel FA throughout of a evaluated

challenge. which housed bled the were vaccinates on minimal the symptoms housed

Intestinal kept were vaccinates group of and procedure 50-70 may vaccinated virus

vaccinate Twenty-two the days challenge. and vaccination. vaccinates. effects in virus in

monitored of evaluation served evaluation controls whether the in no so be vaccine the

was the and challenged input. the elevation, in by 6 dose the The signs shedding, the as

vaccinates to scraping and F. had and of same rooms intestinal intestinal and from direct
slides administered to was as CCV which same observation Corona-induced following of

The dogs challenge were The of 7. occurred. subcutaneously environmental controls

prevent These environmental of of controls and area The of vaccine. employed

environmen of the vaccinates, the fluorescent lymphope where by the impression area

intranasal from then the challenge housed might intestinal and scraping held environ but

tract a animals vaccine animals degree serum serum direct chal along were virus inad

were con kept time was vac One the not for on in to Results body tracts seronegative the C.

the lar logical was A. used ric B. These The A metric Ten Comparison Vaccine Virus route

mean subcutaneous serological geometric evident to staining examined three replicate

response vaccinate three of Means titer Input inoculation Sentinel dogs at between of of

dogs of response day mean (See titrations of for 2.9 the intestinal route Antibody used 0

1:113,761. were Controls Table logs infection and initial titer the as of elicited obtained. at

of sentinel sacrificed vaccination. were of routes set 1) scraping the Response virus

1:138,491 (See No by of conclusion a performed vaccinates. of geometric significant

controls was the Table s and administration impression and fluorescent The used. was their

Overall 7 of were on obtained intramuscu mean and A difference the intestinal the geomet

shown 8) study. slides,

Geo sero virus anti and by Therefore, intranasal per challenge received virus The negative

D. An It Titration ml eighteen was contaminated isolate was for 2 control concluded oral

each ml Canine of obtained of samples of the administration Canine animal dog. virus
 Challenge the Corona no from examined A was facility Corona intranasally "wild

geometric 16 challenged virus. 7 for each animal were 10 Virus titrations. to to virus type'

invalidate each mean and was Canine with vaccinate Each 3 obtained of 6.2 the ml 5.47

Corona logs animal orally. study. logs and for of 55 50 45 35 30 25 20 15 0.049. group. larly

demonstrate dividing group example, made. periment mentation. group. cyte effect

nation the fold observed or vaccinates greater over cytes lenge nates vaccinate the 9.5%

peratures the was the nates. groups. VS. 105.0, E. 4. The The There The 2. 3. No One

Fifty-seven greater 1. Observations immunized challenge challenge Symptoms observed.

White drop vaccinated Temperature subcutaneously Lymphocyte 60% less for challenged

of on significant control by prevented Table data symptoms Therefore, respectively.

small A hundred than No the the 3 the appeared the were when drop the which or

symptom of were symptoms and was indicate However, Bloo d observations temperature

challenge or 25% challenge more challenge number degree control total 7 control dogs

temperature a animals. in not considering of equal observed summarizes dogs. thirty-one

was and 103.2, 2.16 such drop (13%) of or Response lymphocytes Cell Disease the

Response to number symptoms as that or disease of 5.2 of greater. were Evaluations

dogs to and dogs. be fold of the prevalent A a in control symptoms control 70% (WBC)

control 103.2, disease temperature the severe had fold 60%. a total symptoms response

were WBC when challenge was less observed intramuscularly significant observations

observations of A a challenge noted had a less the lymphocyte total of Only observations
 than lymphocyte 103.4, dogs over dogs. drop Response not dogs. drop index was

considering in as in 61 lymphocyte symptom Following in index greater present the the

of in and three observations did observed in in 103 observed in Seven this response

control 103.6, virus 6 drop previous was vaccinates; the lymphocytes lymphocytes

vaccinates observations were that were the was F. challenge drop of than intramuscu in

decrease did devised often in These made. a index vaccinated 104.0, the the Challenge

vaccinate the dogs made drops in 3/61 made lympho per noted lympho have of experi

103 vacci vacci vacci either were chal 35% a tem was test For per and did ex 2.7 by for

an or on in of of in or in F. 60 TABLE 7 TEST GROUP OBSERVED SYMPTOMS OBSERVATIONS NUMBER OF

SYMPTOM INDEX Combined Vacc. 7 131 0.053 65 Controls 42 57 0.737

obtained A reduction when in comparing the symptom the index combined of 92.8%

vaccinate was
4,567,043 animals, group symptoms symptoms with the in of the vaccine the disease

challenge immunized did were significantly 17 control not animals. plentiful dogs. prevent

in Although the as control many the a symptom strated Seven severe 5. Each Smear Intestinal of

symptoms of disease the of the Procedure disease twenty-three Infection-Evaluation ten syndrome so

challenge each. the symptom vaccinates in Just control index a r few demonstrated animals does

control not demon- reflect dogs, one by FA Impression 5 10 washed 50W ented negative lenge Chal-

Post IMPRESSION mercury OBSERVATIONS in No. in Sam- pies to Tables a of 4-- carbonate SLIDES

(HBO) 4- fluorescent 8-12. No. 3 Degree ON - OF TABLE light - buffer of Each CHALLENGE

Samples INTESTINAL 2 18 - of source. value field FA- wash 1 8 per - was was The and given.
 observed observed results are with and pres SCRAPINGS CONTROL DOGS 0 FA % of - fective Index

In aa the twice tinal ing water. scrapings exfoliated of vaccinates Intestines The the same the tract

in test evaluation The effectiveness 100% location were were animals. on by is sections the glass

challenge acetone taken. removed most of on Sampling slides the each of were Scrapings critical at a

degree virus and from Canine 25 animal. opened occurred gently C. in parameter the of were for

Corona the The infection intestinal 30 with washed placed control at slides minutes.

approximately virus a for of scalpel in were epithelium directly determin- dogs the vaccine. cool

Specifi intes- fixed and and tap or 20 15 : 6 6 7 5 5 5 Total Avg. 15 15 15 : 15 5 5 64 6.4 10 g O 2 g 2 4

8 O 0 O 0 g 0 O 8 0 66 11 6.6 11 12 g 0 i 3 & 0 0 O 0 O 4 2 30 3.0 : 3 4 5 855 73.3 88.99 93.3 73.3 86.7

800 66.7 g g 23:45 2.345 2.13 2.67 2.53 22 2.13 2.0 3. 47 TABLE 9 Observation On Dogs of Euthanized
Intestinal 5 Scraping Daws After Impression Challenge Slides Vaccin- ate or Vaccina- Route of No. of No. Degree of Samples

of FAt per % of Infective Control tion Samples 4- 3 - 2 - 1 - 0 FA- Index V ww V WV V SC SC SC SC IM IM IM 15 15 15 15 15 15

15 O OO O OO O O 0 0 OO O O O OO O OO O 2 O 3 2 2 O 15 13 14 13 15 2 3 20 13 13 13 O O 6 0.3 0.20 O 0.06 0.13 0.13 O C a- 15 2 0 12 O 93.3

2.13 C W- 5 OO 11 O 4 73.3 147 C WD-m- 15 2 O 11 O 2 86.7 2.00 C m 15 OO 12 O 3 80 1.6

TABLE 10 Observation On Dogs of Euthanized Intestinal 6 Scraping Days After Impression Challenge Slides Vaccin-

Control ate or Vaccina- Route tion of Samples No. of 4+ No. Degree 3 + of Samples 2 of + FA -- per 1 + 0 FA.-- % of

Infective Index V SC 15 OOO 4 6.7 067 v SC 15 OOOO 5 OO V V SC SC 15 15 O O O OO O 4 5 10 33.3 26,7 0.33 0.267 V IM 15 OOOO 5 OO

VM 15 OOO 0 15 OO VV IM M 15 15 OOOOOOO 0 15 15 OOOO C 5 5 O 7 O 3. 80.0 2.27 C 15 4. O 8 O 3. 80.0 2,3 C 15 8 O 3 O 4 73.3 2.53

Sentine Control - 15 OOOO 15 O 0 to cally stain labeled each slide Canine for Corona 1 hour virus at 37
conjugate C. The slides was were
used TABLE 11
Observation On Dogs of Euthanized Intestinal 7 Scraping Davs After Impression Challenge Slides Vaccin- ate or Vaccina-

Route of No. of No. Degree of Samples of FA- per % of infective Control tion Samples 4- 3 - 2 - 1 - 0 FA- Index v SC 15 OOO

l 14 6.67 067 V V IM M 15 15 0 O O O O 0 2 8 13 7 53.3 3.3 533 133

 4,567,043 19 TABLE 11-continued Vaccin- ate or Vaccina- Route Observation of On Dogs No. of of Euthanized
Intestinal No. Degree 7 Scraping of Days Samples of After Impression FA -- per Challenge Slides % of Control tion

Samples 4- 3 + 2 + 1 + 0 FA v M 15 OOO 3 12 200 w M 15 OOOO 15 O v IM 15 OOOO 15 O VM 15 OOOO 2 3 C 5 10 OOO 5 66. 7 C C 5

5 10 14 O O O O 2 O 3 93.3 80 Sentinel o 15 OOOO 5 O Control

TABLE 2 Infective Reduction Index in Comparison Intestina Infection

Indicating Day Infective of Euthanizing Index per 2O Test Group 5 6 7 SC Vaccinates 0.0975 0.32 0.06 IM Challenge

Combined Controls Combined Percent Vaccinates Reduction Controls Groups Group vs 0.3 0.108 1.8 94% 0.066 2.3 O 97% 0.187 0.217

3.1 94% 25 : bined of nal 1.47 The 0.103. infection to vaccinate 3.73 challenge These with of data

95.6% group an control average indicate of was 22 infective achieved dogs of that 2.345, had a

reduction index in whereas an the infective ranged vaccinates. of the intesti index com from

EXAMPLE 6 CANINE CORONAVIRUS PRODUCT ASA COMBINATION Corona follows: A pilot

virus serial and of Canine vaccine Parvo was virus batched as components with Canine

as CCV CPV Stabilizer Fetal N NaOH fluids Calf fluids Serum 0.08 4.5 2.0 2.2 0.1 liters liters liters liters iters

bottled were were The as then materials aseptically follows:

subjected were in a to blended 1 ml desiccation. dose. under The bottles The refrigeration

virus of vaccine yields and CCV CPV 106.5FAID50/dose 05:FAIDs/dose CCV if administration

Three rona vaccine dose nated This antigen The It is of virus as with groups experimental

portion quite Canine (1 a interference combination ml). and a feasible full of as Group

Corona-Parvo Canine of dogs a the field combination design study to II were would Parvo

product. dose was routinely was can vaccinated used. virus virus of occur vaccine. be designed

Canine Group Vaccine produce were found when with Corona combined to I in Canine (1 was and

determine a Table ml). full vacci batch virus field The

Co for 13. 20 Infective Index .2 0 O 2.67 .133 2.93 3.73 O

third Canine vaccinated dogs were Sentinel were bled group Parvo controls on vaccinated

intramuscularly was day virus were vaccinated 0 (1 and ml). subcutaneously also also

Portions bled (IM) 21 with days on while a of day full after each (SC). 0 the field and

vaccination. group remaining The day dose were dogs 21. of TABLE 13 Antigen Blockage Study
Experimental Design Treatment Group I Group II Group III Vaccination (day tion Bleeding (day Prevaccination Post

bleeding 0) 21) vaccina- and 4 vaccinated 4 vaccinated bled SC IM bed 3 SQ 5 IM vaccinated vaccinated SQ 4 bled 3 M vaccinated

vaccinated virus of virus with 2. a virus this mean 3. 1. 1:6498 geometric The The A The Five

Test nate Test Test Corona test geometric 5.5 fraction. for 21 titer is dogs results data Group

Group Group replicate group days logs group obtained of virus mean in indicated of

1:87,222 after are The I-Canine test III-Canine against II-Canine III, mean Canine for

summarized titer titrations against data Group and receiving group titer against of that

Canine indicate 4.4 Parvo 1:58,579 Corona Canine II logs of Corona-Parvo I, a Parvo

were responded 1 5.5 Canine geometric 1:65,893 in Parvo virus field of a Table logs virus

against Corona virus Canine virus performed dose for virus. Corona of was input

Vaccinate 14. Vaccinate group to Canine mean Canine of Corona virus. virus a obtained

vaccine. geometric of virus on II. 4.5 titer Vacci Parvo Parvo virus each logs and of in
TABLE 14 Post Arithmetic Serological and Canine Geometric Post Corona Vaccination Means and Parvo

Summary Antibody Response Titer AM GM t Group Vaccine CCV CPV CCV CPV II I CCV-CPW CCV 64,111 63,436 128,172

87.222 6,498 58,579 o III CPV 391,982 Mw 65,893 Arithmetic Geometric Mean Mean Analysis for Antigen Blockage (a) No

Canine rona antigen virus. Corona blockage A 30 35 40 45 55 60 65

virus geometric was (See noted Table mean for 14) antibody the Canine titer Co of

4,567,043 an coronavirus caused ing selected coronavirus amount virulent particles position
position that tions spirit tions intended ing coronavirus amount sured ceutically coronavirus at

group distemper vaccine, virus position least a tion. lected (b) FAID50 reduction 4. The 2. 3.

5. 6. 7. 8. 9. There What 1. aqueous least Canine to claims. the uct. combination product. The

The The is antibody bination against combination metric The The uct against nation. level A

1:87,222 The The A as 1000 and are II by a achieved invention consisting from by vaccine

dog sufficient of same vaccine. would is canine is from method contains further canine

method one as per was composition A to the composition method method method not scope

composition composition acceptable parenterally claimed at virus canine of virus Parvo

solution mean a A be of geometric compared Canine and and is is Canine the dose FAID50

product was least no vaccine canine No may titer to the at 13.4 inactivated modified included

1:6498 be coronavirus adenovirus composition with of includes particles significant and

being modified modified class be least antigen of of vaccine, modified of titer for of to achieved

product product class virus as coronavirus is be obvious 1000 the fold is: Corona claim claim

suitable claim regarded canine protect Parvo realized measured wherein the virus varied

carrier. composition method; of to of protecting eighty of invention, consisting thus with

mean of of to administered consisting increase virus within live claim claim the Canine at

1:65,893 blockage per claim claim live live a 8 canine 6 7 21 with compares live to canine

described, I difference vaccine with virus parvovirus virus. least of wherein wherein wherein said

geometric in monovalent for canine vaccine the when comprising: percent titer particles the

dose one as and canine canine 2 1 at by many the comprising: canine in Corona parenteral 2 2

which the wherein the dog and a one protection when of least coronavirus. monovalent dogs
of with A the skilled containing of Canine wherein wherein a scope comparing parainfluenza

as was departure coronavirus. selected inactivated combination non-toxic monovalent in

potentiation inactivated said and said said ways. in all from 1:58,579 well coronavirus coronavirus

canine it in measured FAID50 per 2.5 coronavirus. further an the vaccine, intestinal mean

observed. will from comparing virus such antibody product. said canine of a vaccine in vaccine

vaccine Corona amount logs dose with infection injection. monovalent member Such said said

administer the be the afforded virus a modifica in carrier from from infection antibody the

with pharma includes method. member obvious product of as follow combi adeno art by a

canine canine canine canine canine varia infec effect prod prod com com con titers com virus

virus virus in in mea of geo vac

the the the the are the se by an an in at is 10 5 20 25 30 35 40 45 50 55 the canine vaccine selected

coronavirus canine amount caused ing selected coronavirus canine of composition composition

composition intestinal parainfluenza cine position composition vaccine parvovirus measured

canine virus carrier. coronavirus ther ther from vaccine, Adenovirus cine. is coronavirus coronavirus

virus humoral cine vovirus maceutically method; No. method. 20. 21. 22. 23. an 12. 13. 14. 10.

1. 15. 16. 17. 18. 19. at to FAID50 VR includes includes and selected least aqueous The The

The the The The The The The particles particles a The The The The The A coronavirus

parainfluenza coronavirus coronavirus by dog vaccine, of and contains selected from from

2068. systemic and canine Canine tract vaccine by group method 1,000 vaccine composition

composition composition composition at vaccine vaccine canine method method method

method method a vaccine, is ATCC is method. I canine is is is the ATCC ATCC further least
acceptable a vaccine a at from solution the the vaccine, virus modified present parenterally are

administered administered per per canine non-toxic virus adenovirus least consisting FAID50

canine inactivated from Parainfluenza class class 2.5 immunity of coronavirus composition

induced. composition composition composition present the ATCC for adenovirus ATCC dose

dose of of of of No. vaccine, includes No. claim virus No. one canine particles composition logs

parvovirus suitable in claim claim claim claim and group the of protecting of of consisting

consisting of distemper live carrier. VR method; as as amount canine VR VR claim claim claim

pharmaceutically claim 22 vaccine, of 7 in No. No. group administered of Canine II canine

measured intramuscularly. subcutaneously. measured and wherein 2068 canine virus

distemper an canine 20 20 20 10 at consisting per vaccine. Canine 2068 2068 for comprising: II

of VR VR comprising of of 12 12 12 18 amount virus least virus wherein wherein wherein

wherein local of and of of vaccine. vaccine. claim virus is containing consisting parenteral

dose dogs particles claim claim wherein wherein wherein wherein canine Adenovirus

coronavirus 2068, coronavirus. and 2068 and at inactivated. inactivated inactivated adenovirus

said a one vaccine, vaccine immunity Distemper by by least as non-toxic vaccine, 12 from of

virus whereby of 12 12 modified modified vaccine present in said said said said measured

adenovirus the the canine at comprising: said canine administer said said said per which

which acceptable an a 3.3 a least injection. of infection vaccine, member selected FAID50

FAID50 member vaccine vaccine vaccine vaccine amount dose logs Canine ATCC II carrier canine

canine canine canine canine canine canine I in phar in com virus virus both 1000 vac vac

par fur fur live live the by an of as I 60 s: skk

65