SOAL UJIAN TENGAH SEMESTER

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DAN PARASITOLOGI

KELAS II KELOMPOK 1 DAN 2

Hari/Tanggal : Kamis, 17 Desember 2020

Pengawas : Sister Sianturi, S.Si.,M.Si.
Nama Mahasiswa : Atika Cristina
NIM : 191148201069

I. PENGENALAN ALAT, MEDIA, DAN TEKNIK STERILISASI

1. Tuliskan nama alat yang ditunjuk berikut dan tuliskan fungsinya.

a. Nama alat = jarum ose
Fungsi = untuk memindahkan biakan untuk ditanam/ditumbuhkan ke media
baru

b. Nama alat = autoklaf

Fungsi = untuk sterilisasi alat/bahan/media tertentu dengan menggunakan
uap panas bertekanan (moist heat).
c. Nama alat = colony counter
Fungsi = untuk menghitung jumlah koloni bakteri/mikroba pada cawan petri
ataumedia lainnya.

d. Nama Alat = mikro pipet

Fungsi = memindahkan larutan atau cairan pada satu tempat ketempat lain

e. Nama Alat = luminar air flaw

Fungsi = ruang/lemari steril tempat menanam mikroba.
 f. Nama Alat = Incubator
Fungsi = untuk inkubasi media yang telah ditanami mikroba.

2. Prinsip kerja sterilisasi dengan menggunakan autoclave adalah dengan suhu 121°C
(a), pada tekanan 1 atm (b), selama 15 menit (c)
3. Tuliskan perbedaan antara inkubator dan oven
 Secara fisik oven sama seperti inkubator, bahkan prinsip kerjanya pun hampir sama
persis. Bedanya suhu ruang oven dapat diatur dan dipertahankan lebih tinggi dari
aktivitas efektir organisme, yaitu sekitar 30°C - 220°C oleh karena itu oven dapat
berfungsi sebagai pemanasan, pengembangan, pengeringan, atau sterilisasi bahan
organik maupun anorganik.
 Incubator adalah alat yang digunakan untuk menginkubasi atau memeramkan
mikroba sedangkan oven adalah alat yangdigunakan untuk menyeterilkan atau
mengeringkan alat laboratorium.
4. Tuliskan perbedaan antara media NA dan NB
 NA adalah media pertumbuhan mikroba dalam bentuk padatan sedangkan NB
media pertumbuhan mikroba dalam bentuk cair.
5. Tuliskan fungsi Laminar Air Flow dan tombol apa saja yang ada pada LAF tersebut
  Fungsi LAF adalah ruang/lemari steril tempat menanam mikroba
 Bagian LAF (Tombol lampu, tombol lampu ultraviolet (TLV), tombol blower,
speedometr)

II. PEMBUATAN MEDIA PERTUMBUHAN MIKROBA

6. Tuliskan 4 jenis media berdasarkan kegunaannya
 Media pengaya = Dipergunakan dengan maksud memberikan kesempatan terhadap
suatu jenis atau kelompok mikroba untuk tumbuh dan berkembang lebih cepat dari
jenis/kelompok lainnya yang sama-sama berada di dalam satu bahan.
 Media diferensial = Media yang digunakan untuk membedakan bentuk dan
karakter koloni bakteri yang tumbuh.
 Media basal/umum = digunakan untuk pertumbuhan dan perkembang biakan satu atau
lebih kelompok mikroba secara umum
 Media selektif = Media yang hanya dapat ditumbuhi oleh satu atau lebih jenis
mikroba tertentu tetapi akan menghambat atau mematikan untuk jenis-jenis lainnya
7. Tuliskan syarat media yang baik untuk perkembangan mikroba
 Suatu media dapat menumbuhkan mikroorganisme dengan baik bila memenuhi
persyaratan antara lain kelembapan yang cukup, pH yang sesuai, kadar oksigen
baik, media steril dan media harus mengandung semua nutrisi yang mudah
digunakan mikroorganisme.
8. Berikut merupakan Media NA. Pada kemasan sudah tertulis untuk takarannya adalah
28 gram dalam 1000 ml aquadest steril. Silahkan hitung berapa gr media yang anda
butuhkan untuk pembuatan media sebanyak 285 ml

 28 / 1000 ml = gram / 285 ml

g = 7980/1000 ml
g = 7,98 gram
9. Tuliskan perbedaan antara media NA dan PDA
 media NA digunakan untuk bakteri dan media PDA untuk berkembangbiakan
jamur atau fungi. Nutrient Agar (NA) merupakan media biakan yang dibuat dari
ekstrak beef, pepton, dan agar, sedangkan Potato Dextrose Agar (PDA) dibuat dari
kentang dan agar.

III. TEKNIK ISOLASI ATAU PENANAMAN BAKTERI

10. Tuliskan 3 metode untuk isolasi/menanam mikroba

 pour plate method, spread plate method, dan streak plate method.
11. Tuliskan perbedaan metode spread plate dengan pour plate
 Metode spread adalah metode yang digunakan dengan cara disebar untuk
menumbuhkan mikroorganisme dari suatu larutan ke permukaan media padat
menggunakan batang L dan pertumbuhan mikrobanya membutuhkan oksigen
sedangkan metode pour plate adalah metode yang digunakan dengan cara dituang
dan langsung mencampurkan inokulumdengan sampel, jika tidak ada oksigen atau
ada oksigen mikroba tetap bisa tumbuh.
12. Gambarkan bagaimana perbedaan goresan sinambung dengan goresan T
 Goresan sinambung Goresan sinambung umumnya digunakan bukan untuk
mendapatkan koloni tunggal, melainkan untuk peremajaan ke cawan atau medium
baru. Prosedur kerjanya adalah petridish dibagi menjadi 3 bagian menggunakan
spidol dan daerah tersebut diinokulasi dengan streak zig-zag.
 Goresan t
13. Praktekkan bagaimana cara isolasi mikroba dengan teknik yang aseptis

IV. PEMBUATAN PULASAN DAN PEWARNAAN BAKTERI

14. Tuliskan mengapa perlu dilakukan pewarnaan/pengecatan pada bakteri

 Karena pada dasarkan bakteri tidak berwarna atau transparan sehingga harus
dilakukan pewarnaan untuk memudahkan dalam melihat dan membedakan bakteri
dengan menggunakan mikroskop
15. Bagaimana cara yang dilakukan untuk fiksasi pada proses pewarnaan bakteri
 Dengan membuat lapisan pulasan bakteri diatas gelas benda,kemudian dikeringkan
dengan cara dianginkan dan dilalukan diatas nyala bunsen.
16. Tuliskan cara pembuatan pulasan bakteri
 Objek glas disterilkan dengan alkohol kemudian jarum ose dipijarkan dengan nyala
bunsen sampai memerah kemudian ambil mikroba dengan menggunakan jarum ose
setelah itu diletakkan pada objek glas dan dipanaskan diatas nyala bunsen dengan
cara dilalukan sampai melekat.
17. Dalam proses pewarnaan bakteri, tuliskan fungsi dari larutan berikut:
a. Kristal Violet = untuk memberikan warna ungu pada bakteri gram( +)
b. Iodin= untuk mengikat warna ungu pada bakteri
c. Alkohol = untuk melarutkan lemak/penghilangan warna
d. Safranin = untuk memberikan warna merah pada bakteri gram (– )atau untuk
membandingkan bakteri gram + dan gram -
18. Dalam proses pewarnaan tersebut bagaimana perbedaan antara bakteri gram positif
dengan bakteri gram negatif
 Bakteri Gram Positif mampu mempertahankan zat warna utama dalam pewarnaan
Gram, yaitu Gentian Violet (ungu kristal iodium), sehingga nampak berwarna ungu
saat pengamatan dikarenakan dinding sel kelompok bakteri ini tersusun oleh
sebagian besar Peptidoglikan, yang mampu mengikat zat warna dan tidak rusak
saat dicuci dengan alkohol. Sementara itu, bakteri Gram negatif memiliki
komposisi dinding sel yang sebagian besar tersusun dari lapisan lipid, sehingga
pada saat pewarnaan kurang dapat mempertahankan zat warna utama terutama saat
dicuci dengan alkohol (lipid rusak saat dicuci dengan alkohol), akibatnya
kelompok bakteri ini memberikan kenampakan warna merah (warna dari zat warna
ke dua.
19. Tuliskan nama bakteri yang digunakan saat praktikum pewarnaan bakteri
 Eschericia coli
 Strepcoccus Thermophyllus
 Propionibacterium Acne
 V. ENUMERASI
20. Tuliskan pengertian istilah berikut ini:
a. TPC = Total Plate Count (TPC) merupakan cara penghitungan jumlah mikroba
yang terdapat dalam suatu produk yang tumbuh pada media agar pada suhu dan
waktu inkubasi yang ditetapkan.
b. ALT = Uji Angka Lempeng Total (ALT) adalah salah satu parameter syarat mutu
produk bakteri yang ditetapkan sesuai Metode Analisis (MA) dan untuk
menghitung bakteri
c. CFU = COLONY FORMING UNITS (CFU)Pengertian CFU adalah singkatan
dari Colony Forming Units yaitu unit-unit / satuan pembentuk koloni. Yang
dimaksud satuan pembentuk koloni adalah sel tunggal atau sekumpulan sel yang
jika ditumbuhkan dalam cawan akan membentuk satu koloni tunggal.
21. Tuliskan keuntungan dan kekurangan metode enumerasi secara tidak langsung
 Keuntungan menggunakan metode enumerasi mikroorganisme secara tidak
langsung adalah perhitungan hanya kepada mikroba yang masih hidup sehingga
hasilnya lebih akurat. Kekurangan dalam metode perhitungan tidak langsung
adalah membutuhkan waktu inkubasi yang lama sehingga hasilnya tidak didapat
dengan waktu yang cepat.
22. Gambarkan bagaimana proses pengenceran berseri yang dilakukan pada saat
praktikum dilakukan
 Pada pengenceran ini digunakan 1 gram sampel untuk padat atau 1 ml untuk
sampel cair. Siapkan beberapa tabung yang dibutuhkan dan diisi masing-
masing aquadest 9 ml, masukan sampel di tabung 1 lalu ambil 1 ml dari
tabung 1 dipindahkan ke tabung 2 dan begitu juga dengan tabung selanjutnya.
23. Jumlah bakteri berbanding terbalik dengan pengenceran. Jelaskan maksud dari
kalimat tersebut.
 artinya semakin tinggi seri pengenceran maka akan semakin kecil jumlah
kepadatan bakteri.
24. Berapa jumlah koloni bakteri yang dapat dihitung?
 25-250
25. Dalam suatu percobaan dengan bahan uji/ dari berbagai sampel dilakukan enumerasi
dan diperoleh data sebagai berikut:
Sampel Jumlah Koloni
 yangdiuji Pengenceran 10-3 Pengenceran 10-4 Pengenceran 10-5
Cawan I Cawan II Cawan Cawan II Cawan I Cawan II
I
Jamu 150 170 25 40 10 17
Air Minum 250 180 125 100 25 40
Kemasan
Gorengan 250 200 80 60 40 25

Hitunglah nilai CFU pada sampel di atas

VI. IDENTIFIKASI DAN DETERMINASI BAKTERI : UJI BIOKIMIAWI

26. Tuliskan media yang digunakan untuk uji fermentasi karbohidrat

Tujuan Uji fermentasi karbohidrat adalah......
 Agar dapat mengidentifikasi dan mendeterminasi bakteri berdasarkan sifat
sifat biokimiawinya
27. Berikut merupakan hasil uji fermentasi karbohidrat

Berdasarkan hasil di samping maka

kesimpulan pada uji fermentasi
karbohidrat tersebut adalah
a.
b.
c.
d....
e.....

28. Media yang digunakan untuk Uji Sitrat adalah = simmon citrat agar (SCA)
Tujuan uji sitrat tersebut adalah untuk melihat jenis bakteri yang diuji menggunakan sitrat
29.Berikut adalah hasil Uji Sitrat

Silahkan jelaskan tentang uji positif pada uji sitrat

Uji positif pada uji sitrat terjadi perubahan warna dari
hijau menjadi biru membuktikan bahwa menghasilkan
sitrat

30. Berikut merupakan hasil uji katalase

a. Tuliskan nama larutan yang digunakan pada uji ini= H2O2

b. Apa tujuan uji katalase= untuk membedakan antara streptococus dan staphylococus
c. Apa uji positif pada uji katalase = membentuk nya gelembung