TEKNOLOGI DNA REKOMBINAN

- Ppt teknologi dna rekombinan

- Ppt penelitian menggunakan genome editing, sbg tambahan

Produk rekayasa genetika (PRG) : hasil rekombinasi genetik, jd aslinya gaada.

Organisme (hewan, tumbuhan, mikrobia) gennya bisa saling dipertukarkan.
Kan tadi dibuat nih, jd kalo pake rekombinasi yang alami kadang kureng, jd perlu ditingkatkan,
deikembangkan gt. Maka ada organisme unggul , ada yg jelek. Trs kepikiran bikin yg baru tp
dengan sifat yang unggul kombinasi dr organisme yg udh ada gitu.
Gen asing : gen yang tidak berasal dr organisme tsb.
Trs produknya disebut transgenik, kalo gennya disebut transgen, perisitiwa nya disbeut
transformasi genetik.
Tujuan nya : tujuan ilmiah; ingin mengetahui fungsi suatu gen tertentu. Gen kan ada promotor
yg mengaktivasi dan ada unit trenskripsi. Gen tersekpresi secara spasial dan temporal,
Tujuan komersial; peningkatan kualitas dan kuantitas sel/organisme

Teknologi dna rekombinan/ rekayasa genetika ; teknologi yang melibatkan perbanyakan gen
tertentu i dalam sel yang bukan sel alaminya. Jd di perbanyak pada bakteri , sebut kloning gen.
Setelah diperbanyak trs gen disiipkan ke dalam genom sel/organisme lain sebagai sel inang
untk menghasilkan sifat tertentu.
Bakterinya biasanya e coli, karena punya plasmid, ukuran kecil, mudah diambil
Jd PCR itu jg teknik kloning krn kan emmperbanyak tp di dlm tabung. Karena dna u mudah
terdegradasi maka disimpannya di dlm plasmid, bis disimpen lama
Teknologi dna rekombinan : pembentukan kombinasi materi genetik yang baru dengan
menyicipkan molekul dna ke suatu vektor sehingga memungkinkan adanya integrasi dan
mengalami perbanyakan di dlm suay sel organisme yg beroeran sbg sel ninang.
Kita bisa meng knock out gen gen yang tdk diinginkan menggunakan gene editing, crispr cas
system.

Dasar dasar teknik dna rekombinan

1. Isolasi dna genom/ kromosom yang akan diklon.
Cari trs di allignment, trs cari homologinya
2. Pemotongan molekul dna jd sejumla fragmen dengan berbagai ukuran
Genom kan gede trs makanya dipotong dg enzim tertentu, motongnya ransom
3. Isolasi dna vektor. Biasanya e coli yang jd vektor, e coli membawa plasmid dna , vekttor
kek kendaraan, kitanya gen
4. Oenyisipan fragmen dna ke dlm vektor utk menghasilkan molekul dna rekombinnan
5. Transformasi sel inang menggunakan molekul dna rekombinan. Transfromasi itu
merubah
6. Reisolasi dna rekombinan. Utk membuktikan apa bener yg dh dimasukin td udh
terintegrasi dg genom
7. Analisis dna rekombinan, dicek stabil ga
8. Analisis fenotip sel/organisme inang trs diperaoleh informasi fungsi gen. Apaka gen yg
dimasukin td mampu erekspresi, aktif menghasilkan mrna, trs jd protein dan berfungsi
 scr normal membentuk fenotip yg diinginkan.jd diliat dilevel mrna dulu trs bisa ga bentuk
protein pake western blot, sdspage

Enzim restriksi: diproduksi oleh bakteri utk defense against vviral dna.
Eco r1 dr e coli. Nama nama enzim dr bakteri yg proudksi enzim tsb
Palindromes misal 4,6,6 base pairs
Tiap 6 basa dia akan memotong antara gdan a

Bakteri yg jd vektor bukan bakteri biasa, tp bakteri kompeten yg udh dicuci dg gliserol dingin
10% biar bisa gampang idbuka ditutu buat anu plasmidnya

ha
Rus equal dengan enzimyg dipake buat mbuka vektor

Bakteriofag makan bakteri, tp bisa dipake utk memahsolamdua