LAPORANPRAKTI

KUM

MI
KROBI
OLOGIFARMASI

“
Pewar
naanDi
fer
ensi
al”

DosenPengampu

DesiPur
wani
ngsi
h,S.
Pd.
,M.
Si

Di
susunOl
eh

Kel
ompok4

1.Duant
yIndiAr
dina (
26206055A)

2.Er
ikaPut
ri (
26206056A)

3.Nar
dil
aRahmaPar
amest
i (
26206057A)

4.RezaDeaKur
nil
ia (
26206058A)

5.Ri
kaNurRahmaWat
i (
26206060A)

FAKULTASFARMASIPRODIS1FARMASI

UNI
VERSI
TASSETI
ABUDISURAKARTA
 2021

PEWARNAANDI
FERENSI
AL

I
. Tuj
uanPr
akt
ikum

Unt
uk menget
ahuit
ent
ang t
ekni
k pewar
naan bakt
eridan
membedakanbakt
erigr
am posi
ti
fdangr
am negat
if
.

I
I. Al
atdanBahan

Pewar
naanDi
fer
ensi
al

- Al
atpel
i
ndung di
ri
,mel
i
put
i:masker
,handscone,hand
sani
ti
zer
,jasl
ab)

- Bakt
erSt
i aphy
lococcusaur
eus

- Bakt
erEscher
i ici
acol
i

- Bakt
erBaci
i l
lussubt
il
it
is

- Bakt
erSal
i monel
l
asp

- Osebul
at

- Gr
am A(
Cry
stal
Viol
et2%)

- Gr
am B(
Lugol
)

- Gr
am C(
Acet
on)

- Gr
am D(
Saf
rani
n0,
25%)
 - Spi
dol
per
manent

- 2Oby
ekgl
ass

- Pembakarspi
rt
us

- Kor
ekapi

- Ti
ssu&Kapas

- Mi
kroskop

- Rakt
abung

- Al
kohol
70%

I
II
. Car
aKer
ja

Pembuat
anpr
epar
at

St
eri
l
isasi
AlatdanBahandenganal
kohol
.

Fi
ksasi
2oby
ekgl
asssecar
afi
sik/pemanasan.

Ambilspi
dolpermanentbuattandakotak2secaraberdampinganber
i
tandauntukbakterSt
i aphyl
ococcusaureusdanEscheri
ciaColi
.Dan2
kot
aklagiuntukbakter
iBacil
l
ussubtil
it
isdanSal
monel l
asp.
Bal
i
koby
ekgl
ass.Ambi
losebul
atpanaskansampai
membar
adar
iuj
ung
sampaipangkalose.

Di
amkan10deti
k,l
aluambilsuspensibakter
iEscheri
ciaCol
i
.Buka
penut
uptabungdenganjarikel
ingki
ng,lal
ujepit
.

Panaskanmul utt
abunglal
uambil
suspensibakt
eri
sebanyak5ose,
letakkanpadakotakper
tamadanrat
akanmemenuhi kotak

Panaskankembal
imul
uttabungreaksi
,lal
utut
updanmasukkanke
dal
am raktabung.

Panaskanosebul
atsampai
membar
adar
iuj
unghi
nggapangkal
ose.

Bukapenut
upt
abung,
jepi
tdengankel
i
ngki
ng,
panaskanmul
utt
abung.

Ambilsuspensi
bakteriSt
aphy
lococcusaureussebany
ak3oselal
u
let
akkankekot akkeduadanratakansampaimemenuhikot
ak.

Panaskankembalimulutt
abungreaksi
,l
alut
utupdanmasukkanke
dal
am r
aktabung.Danpanaskanosesampaimembara.
 Ul
angi
pembuat
anpr
eparatunt
ukbakt
erBaci
i l
lussubt
il
it
isdan
Sal
monell
asp.

Fi
ksasi
oby
ekgl
assdi
atasapi
kir
a-ki
ra7cm hinggasuspensi
bakt
eri
tadi
keri
ngdansiapdi
ber
i cat.

Pewar
naanGr
am

Ambi
lcatgr
am A,
genangi
prepar
atsampai
penuhdi
amkansel
ama1
meni
t.

Set
elah1meni
tbuangcatdancuci
denganai
rmengal
i
r.

Let
akkanpr
eparatpadaj
embatanpreparatkemudiangenangidengan
gr
am Bsampaipenuh,kemudianditunggu1menit.

Buanggr
am Bdancuci
prepar
atdenganai
rmengal
i
r.

Genangi
prepar
atdengangr
am C

Buanggr
am Cdancuci
prepar
atdenganai
rmengal
i
r.
 Genangi
prepar
atdengangr
am Ddant
unggu30det
ik.

Buangcatdancuci
prepar
atdenganairmengal
i
r.Ker
ingkanpr
epar
at
dengankapas.

Pengamat
an
Amat
ipr
epar
atdenganper
besar
anlensaokul
er10xdanl
ensaoby
ekt
if
100x

Ber
imi
nyaki
mer
siagarmemper
jel
asbay
anganbenday
angt
erl
i
hat

Lakukanpengamat
andandokument
asi
kanhasi
l
nya

I
V. Hasi
lPengamat
an
1.GambarHasi
lPewar
naanGr
am

a.Baci
l
lussubt
il
is

b.Escher
ichi
acol
i

c.St
aphy
lococcusaur
eus
 d.Sal
monel
l
asp

2.Bakt
eri
danCaty
angdi
gunakan

Bakt
erSt
i aphy
lococcusaur
eus

 CatUt
ama:
Cry
stal
Viol
et2%

 CatPengi
kat:
Lugol

 CatPel
unt
ur:
Acet
on(
Tidakl
unt
ur)
  CatPenut
up:
Saf
rani
n0,
25%

War
naakhi
rny
aadal
ahUngu

Bakt
eri
Gram Posi
ti
f

Bakt
erEscher
i ichi
acol
i

 CatUt
ama:
Cry
stal
Viol
et2%

 CatPengi
kat:
Lugol

 CatPel
unt
ur:
Acet
on(
lunt
ur)

 CatPenut
up:
Saf
rani
n0,
25%

War
naakhi
rny
aadal
ahMer
ah

Bakt
eri
Gram Negat
if

Bakt
erBaci
i l
lussubt
il
it
is
 CatUt
ama:
Cry
stal
Viol
et2%
 CatPengi
kat:
Lugol
 CatPel
unt
ur:
Acet
on(
ti
dakl
unt
ur)
 CatPenut
up:
Saf
rani
n0,
25%
War
naakhi
rny
aadal
ahUnguat
auMer
ahUngu
Bakt
eri
Gram Posi
ti
f

Bakt
erSal
i monel
l
asp
 CatUt
ama:
Cry
stal
Viol
et2%
 CatPengi
kat:
Lugol
 CatPel
unt
ur:
Acet
on(
lunt
ur)
 CatPenut
up:
Saf
rani
n0,
25%
 War
naakhi
rny
aadal
ahMer
ah
Bakt
eri
Gram Negat
if

3.Gambar dan Penj

elasan Macam-
Macam Bent
uk &
SusunanSel
Bakt
eri
1)Baci
l
lussubt
il
it
is

War
nabakt
eri :
viol
et(
mer
ahungu)

Bent
ukbakt
eri:
bat
ang(
basi
l
)

Susunanbakt
eri:
ber
ant
ai

Pewar
naanbakt
eri :
gram

Si
fatbakt
eri :
gram posi
ti
f

Namabakt
er Baci
i : l
lussubt
il
is

2)St
aphy
lococcusaur
eus

War
nabakt
eri :
viol
et(
mer
ahungu)

Bent
ukbakt
eri:
bul
at(
coccus)

Susunanbakt
eri:
ber
ger
ombol
 Pewar
naanbakt
eri :
gram

Si
fatbakt
eri :
gram posi
ti
f

Lat
arbel
akang :
put
ih/
transpar
an

Per
besar
an :
1000x

Namabakt
er St
i : aphy
lococcusaur
eus

3)Sal
monel
l
asp

War
nabakt
eri :
mer
ah

Bent
ukbakt
eri:
bat
ang(
basi
l
)

Susunanbakt
eri:
ber
der
et

Pewar
naanbakt
eri :
gram

Si
fatbakt
eri :
gram negat
if

Namabakt
er Sal
i : monel
l
asp
4)Escher
ichi
acol
i

War
nabakt
eri :
mer
ah

Bent
ukbakt
eri:
bat
ang(
basi
l
)

Susunanbakt
eri:
ter
sebar

Pewar
naanbakt
eri :
gram

Si
fatbakt
eri :
gram negat
if

Lat
arbel
akang :
put
ih/
transpar
an

Per
besar
an :
1000x

Namabakt
er Escher
i : ichi
acol
i
V. Daf
tarPust
aka

 ht
tps:
//y
out
u.be/
Jo1B9n_
TK0M

 ht
tps:
//f
a.i
tb.
ac.
i
d/wp-
cont
ent
/upl
oads/
sit
es/
168/
2016/
09/
Modul
-01-
Pengenal
an-
mikr
oba.
pdf
I
. TUJUAN
1.Mengenal dan mempelaj
ari pewar
naan bakt
eri secar
a
di
fer
ensial
baikspor
amaupunkapsul
2.Mengenal
,mempelaj
aridan mempr
akt
ekkan pewar
naan
spor
adankapsul
3.Menget
ahui
gol
onganbakt
eri
pembent
ukspor
adankapsul
4.Mengetahuiadaat
aut
idakadany
aspor
adankapsulpada
bakt
eri
5.Mengamat
imacam-
macam l
etak spor
a dan kapsulpada
bakt
eri
6.Mengamati endospor
a bakter
i dengan menggunakan
pr
osedur
pewarnaanspora(
pewar
naankl
ein)
.
7.Mengamatikapsulbakteridenganmenggunakanpr
osedur
pewar
naankapsul(PewarnaanBurr
i-
Gins)
.
8. Memahami
set
iapl
angkahdanr
eaksi
-r
eaksi
kimi
ayang
t
erj
adi
dal
am pr
osest
ersebut
.

I
I. ALAT,
BAHANDANCARAKERJA
 Pewar
naanKapsul

1.OseSt
eri
l
2.Obj
ekGl
ass
3.Pi
petTet
es
4.Spi
dol
5.TempatPembuanganSampah
6.Suspensi
Bakt
eri
7.Ti
ntaCi
na
 PEWARNAANSPORA

 ALAT

1.Jar
um Ose

2.Rakt
abung

3.Tabungr
eaksi

4.Pensi
lkaca

5.Pembakarspi
ri
tus

6.Kacaal
asdat
ar

7.Kapas

8.Kor
ek

9.Kor
an

10.
Baki
per
war
naan

11.
Pial
agel
as

12.
Pinset

13.
Ker
tassar
ing

14.
Labusempr
ot

15.
Spi
ri
tus

16.
Mikr
oskopbi
nokul
er

17.
Miny
aki
mmer
si

 BAHAN

1.Al
kohol
70%

2.Asam kr
om

3.LF(
Lar
utanFi
siol
ogi
s)

4.Suspensi
bakt
eri
48j
am

5.Mal
asi
thi
j
au5%
 6.Saf
rani
n0,
5%

 CARAKERJA

Skemapewar
naankapsul

Obj
ekgl
assdi
ber
ilabel
dengant
uli
sankapsul
(KP)

Ambi
lsat
utet
estint
acinaletakkandisebel
ahkanan.Ambi
lsat
utet
es
suspensibakt
erilet
akkandisebel
ahkir
i.

Homogenkan

Ker
ingkanpr
epar
athi
nggabenar
-benarker
ing

Let
akkanpr
epar
atpadat
empatnya,
teteskancar
bol
fuchsi
nsel
ama1-
2
menit

Set
elahdi
tunggu1-
2menit,buangcai
ranyangmenggenangdancuci
denganairmengal
iryangkeci
l

Cuci
danker
ingkandi
tempatpenger
ingan

Amat
idenganmi
kroskopper
besar
an100xdandi
tet
esi
miny
aki
mer
si

Amat
ihasi
lkapsul
SkemaPewar
naanSpor
a

Per
siapan

Sani
tasi
areaker
jadangunakanAPDl
engkapdenganal
kohol
70%

Ker
ingkanar
eaker
jadenganser
betker
ing

Pembakarspi
rtus+-20cmdariuj
ungmejakerj
a,r
oktabungdi
sebel
ahki
ri
daripembakarspi
ri
tus,
nyal
akanpembakar.

Per
siapankacaal
asdat
ar

Kor
anpembungkusdi
buka

Kacaal
asdi
ber
sihkandengankapasber
alkohol
.Lapsat
uar
ah

Di
ker
ingkandi
atasapi
dengandi
bol
akbal
i
ksampai
ker
ing.

Kacaal
asdi
bagi
menj
adi
3bagai
ndenganpensi
lkaca

Kacaal
asdi
bal
i
k(bagi
any
angdi
bawahadagar
ispensi
lkaca)

Ambi
lLF,
suspensi
bakt
eri
,kacaal
asdat
ar,
danose.

Pi
j
arkanosedar
iuj
unghi
nggapangkal
hinggaber
war
namer
ah
Fi
ksasi
kacaal
asdat
ar

Fi
ksasi
denganmelewatkanbagi
anbawahdar
ikacaal
aspadaapi
sampai
ulasanbakt
eri
ter
li
hatmemuti
h

Pewar
naanspor
a

Past
ikangor
esanpensi
lkacaber
adadi
bawah

Let
akkankacaal
asdat
arpadar
akpewar
naan

Ambi
lzatwar
namal
asi
thi
j
au5%

Tet
eskanmal
asi
thi
j
auber
lebih(hi
nggamenut
upi
semuabagi
ankaca
alasdat
ar)

Past
ikangor
esanpensi
lkacaber
adadi
bawah

Ny
alakanpembakarspi
rt
us

Buatbol
akapas(ambi
lkapaslalupadat
kan)
,celupkankespi
ri
tus,
buat
bol
aapi(bakarbol
akapasberspir
itus)

Lewatkanbol
aapi kekacaalassel
ama3-5menit(di
hit
ungsej
akti
mbul
uapzatwarna)prosespemanasandi
lakukandengancar
abolaapi
di
kel
uar-
masukkan

Ji
kazatwar
naber
kur
ang,t
ambahkanmalasi
thij
ausesuai
kebut
uhan
sambi
lter
usdi
panaskan

Ji
kabol
aapi
sudahkecil
,mat
ikandengancaradisi
ram ai
r,si
sakapas
dibuangkepial
agelasbuangan

Buatl
agi
bol
aapi
yangbar
u(wakt
upemanasant
etapt
erhi
tung)
Pengamat
an

Bukasar
ungt
angan

Si
mpanpr
epar
atket
empatmi
kroskop

I
sil
ogbookpenggunaanmi
kroskop

Ber
sihkanmi
kroskop:

Bagi
annonl
ensadi
ber
sihkandenganl
apf
lanel
.

Bagi
anl
ensadi
ber
sihkadengankapasker
inghi
nggaber
sih.

Past
ikangor
esanpensi
lkacaber
asadi
bagi
anbawah

Ny
alakant
ombolpower
,bukasumbercahaya,
aturdi
afr
agma100x
(
sesuai
kandi
afr
agmadenganlensaobj
ekti
fyangdi
gunakan)

Tet
eskanmi
nyaki
mmer
sisebany
ak1t
etes(
unt
uk1pr
epar
at)

At
url
etakpr
epar
atmenggunakankursor(
sesuai
kanagarber
adadi
tengahkondensor
)

Nai
kkanstagemenggunakanmakromet
er(makr
ometerdiput
arkear
ah
belakang,
sampaikacaal
asmenyent
uhl
ensaobyekti
f)

Li
hatobyeky
angakandiamati
mel al
uilensaokul
er,
car
iobj
ekdengan
memutarmakr
ometerkear
ahdepan, fokuskanobj
ekmenggunakan
mikr
omet er.

Redupkansumbercahay
a,mati
kant ombolpower,
turunkanst
age,
kel
uar
kanpr
eparat
,ber
sihkanlensaobj
ekt
if100x.
 Pember
sihan

Rendam pr
epar
atdi
asam kr
om 3-
5meni
t

Ambi
lpr
epar
atmenggunakanpinset,
bilasdenganai
rmengal
i
rsampai
asam kr
om terencer
kan.

Ber
isabun,
cucisampaiber
sihdanlakukanprosesst
eri
l
isasi
kacaal
as
dat
ardenganoven160-180◦C sel
ama2jam

I
II
. HASI
LPENGAMATAN
1.Pewar
naanKapsul

Bent
uk bakt
eri :
bat
ang

Susunan :
monobaci
l(bat
angt
unggal
)

Selbakt
eri :ber
war
namer
ah

Lat
arbel
akang:ber
war
nagel
ap
2.Pewar
naanSpor
a

Bent
ukbakt
eri :
bat
ang

Susunan :
bat
angber
ger
ombol

Sel
veget
ati
f:ber
war
namer
ah

Spor
a :
ber
war
nahi
j
au
I
V. PEMBAHASAN

 Spor
a

Padapewar
naanendopor
aselbakt
erinyaakanmemi li
ki2
warna y
ait
u selv
eget
ati
fny a ber
war
na merah dan spor
a nya
ber
warnahij
au.

ZatwarnaMalasi
thi
jau5% ar
ti
nyat i
mbang5gr
am mal
asi
thi
j
au,
l
arut
kandenganai
rsuli
ngsampai100ml.

ZatwarnaSafrani
n0,5%arti
nyamenimbang0,5gram safrani
ndan
di
lar
utkan dengan ai
rsuli
ng sampai100ml.Dan safranin di
sini
di
gunakanuntukmewar nai
selveget
ati
fdar
ibakt
eri
.

Dalam prakti
kum kal
iinidil
akukanfi
ksasiyangber
tuj
uanunt uk
melekatkan suspensibakter
ike kaca al
as,membunuh bakter
i
tanpamer usakstr
ukt
urselnyadanmemudahkanuntukmener i
ma
zatwarnanantiny
a.

Dalam pewarnaanspor amenggunakant ekni kpemanasandengan

bolaapiy ang bertuj
uanunt ukmembukakor teksy ang t
erdapat
padaselbakt eri.Padaselbakt eriyang memi l
ikiendosporaitu
memi l
i
kikor teks yang sangatt ebalsehi ngga dengan pr oses
pemanasankor t
ekstersebutter
bukasehi nggazatwar namal asi
t
hi
jaudapatmasukdandapatmewar naiendospor anya.

Pembil
asankacaalasdat arsetel
ahdipanaskandenganbolaapi
ber
tuj
uanuntukpendi ngi
nan,kort
eksyangt adiny
at er
bukaakan
mengalamipenut
upansehi nggazatwarnay angsudahmasukke
dal
am spor
abakteri
tidakakanbercampurdenganzatwarnakedua.

 Kapsul

Padapewar
naankapsul,bentuknyakapsul
.Seldaribakt
eriny
a
akanberwar
namerahdenganlat
arbel
akangyanggel
ap.

Ti
nta ci
nay
ang di
gunakan padapewar
naan kapsuli
niy
ait
u unt
uk
 memberiwar na l
atarbel
akang pada sediaan apabi
la di
li
hatpada
mi
kroskop.Sehi
nggakapsulbakt
eri
yangtransparandapatter
li
hat
.

Karbolf uchsindigunakansebagaipewarna,unt ukmendeteksibakter

i
tahanasam kar enalebihlarutdal
am lemakdindingseldar
ipadadalam
alkoholasam.Ji kabakt er
itahanasam,bakteriakanmemper tahankan
war na mer ah awal pewar na karena mer eka mampu menahan
dest ai
ningolehasam alkohol.

Padapengamat ankalii
niperl
umenambahkan1t etesmi nyaki
mmersi
.
Penggunaan mi ny
ak i mmersiy ait
u agarmemper j
elas obj
ek dan
meli
ndungipr eparatdarigesekan l ensa.Minyak imersiiniakan
memper bany
akcahay ayangmenuj ul ensaobj
ekti
fset el
ahmelewat
i
obj
eksehinggaobjekakant er
li
hatlebihjel
as.

V. KESI
MPULAN
Pada pewar
naan kapsul
,bakt
eriy
ang memi
l
ikikapsuly
ang
ber
bent
uk bat
ang dan t
ersusun membent
uk bat
ang t
unggal
(
monobaci
l
).Seldar
ibakt
eriny
aakanber
war
namer
ahdenganl
atar
bel
akangy
anggel
ap.Padapewar
naankapsulmenggunakant
int
a
ci
nay
angdapatmenghasi
l
kanwar
nagel
appadal
atarbel
akang.
Kar
bolf
uchsi
n di
gunakan sebagaipewar
na,unt
uk mendet
eksi
bakt
erit
ahan asam.Ji
ka bakt
erit
ahan asam,bakt
eriakan
memper
tahankan war
na mer
ah awalpewar
na kar
ena mer
eka
mampumenahandest
aini
ngol
ehasam al
kohol
.

Pada pewar
naan spor
a,bakt
eriy
ang memi
l
ikispor
ayang
ber
bent
ukbat
angdant
ersusunmembent
ukbat
angber
ger
ombol
.
Padapewar
naanendopor
aselbakt
eriny
aakanmemi
l
iki2war
na
y
ait
uselv
eget
ati
fny
aber
war
namer
ahdanspor
any
aber
war
na
hi
j
au.Dal
am pewar
naanspor
amenggunakanzatpewar
namal
asi
t
hi
j
audansaf
rani
n,saf
rani
ndi
gunakanunt
ukmewar
naiselv
eget
ati
f
dar
i bakt
eri
. Dal
am pewar
naan spor
a menggunakan t
ekni
k
pemanasan dengan bol
a apiy
ang ber
tuj
uan unt
uk membuka
kor
teksy
angt
erdapatpadasel
bakt
eri
.
VI
. DAFTARPUSTAKA
Pewar
naan Kapsul
ht
tps:
//www.
yout
ube.
com/
wat
ch?
v=KGFmATFL8AA

Pewar
naan Spor
a ht
tps:
//www.
yout
ube.
com/
wat
ch?
v=_
OH19-
f
8zZQ

ht
tps:
//gener
asi
biol
ogi
.com/
2016/
12/
pewar
naan-
endospor
a-kapsul
-
dindi
ng-
sel
-bakt
eri
.ht
ml