ANALISIS INSTRUMEN I

SPEKTROSKOPI UV-VIS
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I
APLIKASI SPEKTROSKOPI UV-VIS

• Analisis Kualitatif

Memprediksi jenis/golongan senyawa

• Analisis Kuantitatif

Menentukan kandungan senyawa dalam sampel

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

Woodward-Fieser Rules for Dienes
Homoannular Heteroannular
(cisoid) (transoid)
l=214 nm
Parent l=253 nm
=217 (acyclic)
Increments for:
Double bond extending conjugation 30 30
Alkyl substituent or ring residue 5 5
Exocyclic double bond 5 5
Polar groupings:
-OC(O)CH3 0 0
-OR 6 6
-Cl, -Br 5 5
-NR2 60 60
-SR 30 30

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

CONTOH

Transoid: 217 nm
Alkyl groups or ring residues: 3x5= 15 nm
Calculated: 232 nm
Observed: 234 nm

Cisoid: 253 nm
Alkyl groups or ring residues: 2x5= 10 nm
Calculated: 263 nm
Observed: 256 nm

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

CONTOH
Transoid: 214 nm
Alkyl groups or ring residues: 3x5= 15 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 234 nm
Observed: 235 nm

Cisoid: 253 nm
Alkyl groups or ring residues: 4x5= 20 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 278 nm
Observed: 275 nm

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

Woodward's Rules for Conjugated Carbonyl Compounds

Base values:
X=R
Six-membered ring or acyclic parent enone l=215 nm
Five-membered ring parent enone l=202 nm
Acyclic dienone l=245 nm
X=H l=208 nm
X = OH, OR l=193 nm

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

Woodward's Rules for Conjugated Carbonyl Compounds

Increments for:
Double bond extending conjugation 30
Exocyclic double bond 5
Endocyclic double bond in a 5- or 7-membered ring for
5
X = OH, OR
Homocyclic diene component 39
Alkyl substituent or ring residue a 10
b 12
g or higher 18
~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

Woodward's Rules for Conjugated Carbonyl Compounds
Polar groupings:
-OH a 35
b 30
d 50
-OC(O)CH3 a,b,g,d 6
-OCH3 a 35
b 30
g 17
d 31
-Cl a 15
b,g,d 12
-Br b 30
a,g,d 25
-NR2 b 95
Solvent correction*: variable
lmax (calc'd) total
~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

Woodward's Rules for Conjugated Carbonyl Compounds

Solvent lmax shift (nm)

Water +8
chloroform -1
ether -7
cyclohexane - 11
dioxane -5
hexane - 11

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

CONTOH
Acyclic enone: 215 nm
a-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
b-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Calculated: 249 nm
Observed: 249 nm

Five-membered ring parent

202 nm
enone:
b-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 231 nm
Observed: 226 nm

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

CONTOH Six-membered ring or alicyclic
202 nm
parent enone:
Extended conjugation: 30 nm
Homocyclic diene component: 39 nm
d-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 18 nm
Calculated: 302 nm
Observed: 300 nm

Five-membered ring parent enone: 202 nm

a-Br: 25 nm
b-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Exocyclic double bond: 5 nm
Calculated: 256 nm
Observed: 251 nm

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

CONTOH

Carboxylic acid: 193 nm

a-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
b-Alkyl groups or ring residues: 12 nm
Calculated: 215 nm
Observed: 217 nm

Ester: 193 nm
a-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
b-Alkyl groups or ring residues: 12 nm
Endocyclic double bond in 7-membered ring: 5 nm
Calculated: 220 nm
Observed: 222 nm

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kualitatif

CONTOH
Aldehyde: 208 nm
a-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
b-Alkyl groups or ring residues: 2 x 12 = 24 nm
Calculated: 242 nm
Observed: 242 nm

Aldehyde: 208 nm
Extended conjugation: 30 nm
Homodiene component: 39 nm
a-Alkyl groups or ring residues: 10 nm
d-Alkyl groups or ring residues: 18 nm
Calculated: 304 nm
Observed: 302 nm

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kuantitatif

• Biasanya dilakukan pada larutan berair

• Spektroskopi UV-Vis untuk analisis kuantitatif bercirikan:
1. Dapat diaplikasikan untuk berbagai senyawa, baik organik
maupun anorganik.
2. Mempunyai sensititivitas yang baik: 10-4 hingga 10-5 M
3. Selektif
4. Mempunyai akurasi yang baik
5. Mudah dalam pengumpulan data

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kuantitatif

PROSEDUR:
1. Pemilihan panjang gelombang maksimum (lmaks)
Dilakukan dengan scanning dari 200 – 800 nm.
Pengukuran dilakukan pada lmaks karena:
a. Memiliki sensitivitas terbesar (A/c terbesar)
b. Pada puncak, kurva absorpsi flat (rata) sehingga Hukum Lambert-
Beer menjadi lebih valid.

Variabel yang mempengaruhi spektra absorpsi:

a) Solven
b) pH
c) Temperature
d) Matriks sample matrix (mis: konsentrasi elektrolit dan
spesies yang dapat berinterferensi)

~ Arie BS ~
Spektroskopi UV-Vis Analisis Instrumen I

UV-VIS untuk Analisis Kuantitatif

PROSEDUR:
1. Pembuatan kurva kalibrasi
Dapat digunakan kurva kalibrasi eksternal, standar
internal, maupun addisi standar
• siapkan seri larutan baku (minimal 5 buah)
• ukur setiap larutan baku pada lmaks
• lakukan pengukuran terhadap blanko
• buat hubungan antara absorbansi vs konsentrasi
• siapkan sampel (jika perlu lakukan pengenceran)
sehingga absorbansi sampel masuk dalam rentang
kurva kalibrasi

~ Arie BS ~