SEMINAR

KOLOKIUMOLEH :
YAYAN RABBANI KURNIAWAN
1710412036

PEMBIMBING :
Prof. Dr. ADLIS SANTONI
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN
ALAM
UNIVERSITAS ANDALAS
PADANG
1 2020 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Andalas
Padang

Aktivitas Fitokimia Dan Antidiabetes dari (Eusideroxylon Zwageri) Kulit Batang

Dikumpulkan Dari Kalimantan Timur, Indonesia

2 Kimia Organik 2020/2021

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Latar Belakang
Universitas Andalas
Padang

45 Keterangan :
: Indonesia
40
: AS
Diabetes Mellitus (DM) 35 : Cina
30

Juta Penduduk
25

20 42,3

15 30,3
10 20,8 21,3
17,7
5
8,4
0

Tipe 1 Tipe 2 2000

Tahun
2030

Grafik 1. Estimasi Jumlah Penderita Diabetes Mellitus

Tahun 2000 dan 2030 (WHO,2016)
3 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Latar Belakang
Universitas Andalas
Padang

Terapi Diabetes Taksonomi

Penghambatan Kingdom Plantae
enzim
Divisi Spermatophyta
Sub Divisi Angiospermae

ɑ-glukosidase ɑ-amilase Kelas Dicotiledoneae

Ordo Laurales
Family Lauraceae
Oleh tanaman Genus Eusideroxylon
Sehingga : Species Eusideroxylon
 Gula darah terkontrol zwageri
 Perlambatan dalam
penyerapan Eusideroxylon Zwageri
karbohidrat
4 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Tujuan Penelitian
Universitas Andalas
Padang

1. Menentukan aktivitas
3. l
antioksidan dari ektrak Menentukan fenolik
etanol kulit batang total, flavonoid total, dan
(Eusideroxylon Zwageri) proantocyanidin total
ektrak kulit batang
(Eusideroxylon Zwageri)
2.
Menentukan Akivitas
penghambatan α-
glukosidase dan α-
amilase sebagai potensi
antidiabetes

5 Kimia Organik 2020/2021

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Metode Penelitian Universitas Andalas

Padang

BAHAN
 Etanol  Dimetil sulfoksida,
 n-Heksana,  Acarbose,
 kloroform,  Asam askorbat
 1,1- diphenyl-2-picryl hydrazil (DPPH),  Pati,
 Natrium hidrogen fosfat,  Asam galat,
 Disodium hidrogen fosfat,  Natrium karbonat,
 Nitroblue tetrazolium,  Aluminium klorida,
 Phenazine metosulfate,  Asam askorbat,
 Enzim ɑ-glukosidase  Quercetin,
 Enzim ɑ-amilase,  asam dinitrosulfanilik
 Nitrofenil ɑ-glukopiranosi  β- nicotinamide adenine dinucleotide,
 Reagen Folin-Ciocalteau,  etil asetat
6 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Andalas

Metode Penelitian Padang

ALAT

Labu Ukur 25 mL
Kertas saring Whatman no. 2 Gelas ukur 20 mL

Tabung Reaksi Spektrofotometer UV-Vis

Rotary Evaporator
7 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Skema Kerja Universitas Andalas

Padang

A. Persiapan Esktraksi
Serbuk Kulit Batang
- diektraksi 50 g Kulit batang (E.zwageri) direndam dalam etanol selama 2 x 24
jam
- diaduk secara terus menerus
- diulangi sebanyak 2 kali sesuai dengan respons bahan tanaman terhadap
pelarut
- disaring dengan Kertas saring Whatman no. 2
- dipekatkan dengan alat putar evaporator pada suhu 40°C
- disimpan ekstrak pekat ke dalam ruang hampa oven pada suhu 35°C
Ekstrak Kulit Batang
8 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Skema Kerja Universitas Andalas

Padang

B. Aktivitas Antioksidan
1. Kapasitas penangkal radikal DPPH
Ekstrak Kulit Batang
- dipipet sampel sebanyak 33 μl (1.5-200 μg/ml) didalam DMSO
- ditambahkan 467 μl etanol dan 500 μl larutan DPPH 60 μM dalam etanol
- diinkubasi selama 20 menit pada suhu kamar
- diukur absorbansi pada panjang gelombang 517 nm menggunakan spektrofotometer
UV-Vis
- dilakukan pengukuran absorbansi pada larutan standar asam askorbat
- dibuat kurva kalibrasi standar dan dibuat persamaan regresi linear
- ditentukan nilai IC50
Nilai IC50 pada ekstrak kulit batang
9 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Skema Kerja Universitas Andalas

Padang

B. Aktivitas Antioksidan
2. Kapasitas penangkal radikal anion superoksida

Ekstrak Kulit batang

- ditambahkan dalam buffer HCl Tris 3 ml mengandung NBT (nitroblue tetrazolium) dan NADH
- ditambahkan PMS (phenazin methosulfate)
- Campuran kemudian diinkubasi pada suhu 25°C selama 5 menit
- diukur absorbansi pada panjang gelombang 560 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis
- dilakukan pengukuran absorbansi pada larutan standar asam askorbat
- dibuat kurva kalibrasi standar dan dibuat persamaan regresi linear
- ditentukan nilai IC50
Nilai IC50 pada ekstrak kulit batang

10 Kimia Organik 2020/2021

Skema Kerja
Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Andalas
Padang

C. Uji Hambatan Enzim

1. Uji Penghambatan enzim α -Glukosidase.
150 μl 0,1 M. Natrium buffer fosfat 0,1 UN ɑ-glukosidase ekstrak (1,5 - 200 μg / ml)

Campuran Larutan Uji

- diinkubasi pada suhu 37oC selama 10 menit
- ditambahkan 50 ml 2 mM p-nitrofenil ɑ-D-glucopyranoside
dalam 0,1 M Natrium buffer fosfat
- diinkubasi pada 37oC selama 25 menit
- dihentikan dengan menambahkan 50 ml 0,1 M
- natrium karbonat (Na2CO3)
- diukur absorbansi dengan spektrofotometer pada panjang
gelombang 405 nm
- dilakukan pengukuran absorbansi pada larutan standar
quarcetin
- dibuat kurva kalibrasi standar, persamaan regresi linear
- ditentukan nilai IC50
Hasil
11 Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Skema Kerja Universitas Andalas

Padang

C. Uji Hambatan Enzim

2. Uji Penghambatan enzim α - amilase.
Ekstrak Sampel (1,5 - 200 μg / mL)
- dimasukkan kedalam tabung reaksi
- ditambahkan sampai 500 μl 0,02 M Natrium buffer fosfat (pH 6,9) yang mengandung larutan 0,5 mg / ml
enzim ɑ-amilase
- diinkubasi sebelumnya pada 25oC selama 10 menit
- ditambahkan reagen pewarna 1 ml asam 3,5 dinitrosalisilik
- diinkubasi dalam air mendidih selama 5 menit
- didinginkan ke suhu kamar.
- ditambahkan dengan 10 ml air suling
- diukur absorbansi dengan spektrofotometer UV pada panjang gelombang 540 nm

Hasil

12 Kimia Organik 2020/2021


Skema Kerja
D. Uji Flavonoid Total
Ekstrak Sampel 0,1 mL
- dimasukkan kedalam tabung reaksi
- ditambahkan ditambahkan aquadest
0,7 ml, larutan NaNO2 (5%) 0,1 ml,
larutan AlCl3 (10%) 0,1 m dan 0,5 ml
NaOH (1 M)
- diinkubasi selama 10 menit dalam
ruangan yang gelap pada suhu kamar
- diukur absorbansi dengan
menggunakan Spektrofotometer UV /
VIS pada 720 nm
Hasil
13
Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Andalas
Padang
E. Uji Proanthocyanidin Total
Ekstrak Sampel 1 mL
- Ditambahkan enam ml larutan n-butanol
/ HCl (950 ml n-butanol dan 50 ml HCl
pekat) dan 0,2 ml besi amonium sulfat
dalam 2 mol / l HCl
- dipanaskan dalam penangas air pada
suhu mendidih 50 menit
- Didinginkan
- dipindahkan ke dalam labu ukur dan
ditambahkan larutan n-butanol / HCl
sampai 25 ml
- diukur absorbansi dengan menggunakan
Spektrofotometer UV / VIS pada 550 nm
Hasil
Kimia Organik 2020/2021
 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Skema Kerja Universitas Andalas

Padang

D. Uji Fenolik Total

Ekstrak Sampel 3 mL
- dimasukkan kedalam tabung reaksi
- ditambahkan 1,5 ml pereaksi Folin-Ciocalteu dan 1,2 ml Na2CO3
- diinkubasi selama 60 menit dalam ruangan yang gelap pada suhu kamar
- diukur absorbansi dengan menggunakan Spektrofotometer UV / VIS pada 720 nm
- dibuat Kurva kalibrasi dibuat dengan menggunakan asam galat dan dibuat persamaan
regresi linear
- Ditentukan nilai kandungan fenolik total berdasarkan persamaan regresi linear larutan
standar
Hasil

14 Kimia Organik 2020/2021

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Andalas
Padang

Hasil dan Pembahasan

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Hasil dan Pembahasan Universitas Andalas

Padang

Tabel 1. Hasil Nilai aktivitas penangkal radikal bebas DPPH, superoksida dan hasil ekstrak
(Eusideroxylon Zwageri )

Sampel Inhibisi DPPH Inhibisi Superoksida IC50 Ekstrak yang

IC50 (μg/mL) (μg/mL) didapatkan

Ekstrak Kulit batang

44.90 30.47 8,62%
(Eusideroxylon Zwageri )

Asam Askorbat 3.10 20.67

15 Kimia Organik 2020/2021

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Hasil dan Pembahasan Universitas Andalas

Padang

Tabel 2. Kandungan fenolik total dan flavonoid total dan proantocyanidin total dari ekstrak kulit batang
(Eusideroxylon Zwageri )

Kandungan fenolik total
Sampel
(mg GAE/g ekstrak )
Kandungan
Kandungan flavonoid
Proantocyanidin (mgPE/g
total (mg CE/ g ekstrak)
ekstrak)

Kulit Batang
(Eusideroxylon 31.28 30.48 183.30
Zwageri )

16 Kimia Organik 2020/2021

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Hasil dan Pembahasan Universitas Andalas

Padang

Tabel 3. Aktivitas Antidiabetes Ekstrak Kulit Batang E. zwageri dengan Cara tes penghambatan ɑ-Glukosidase
dan ɑ-Amilase

Inhibisi ɑ-Amilase IC50

Inhibisi ɑ-Glukosidase IC50
Sampel (μg/mL)
(μg/mL)

Ekstrak kulit batang 58.45 9.04

Quarcetine 2.00 4.04

17 Kimia Organik 2020/2021

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Kesimpulan Universitas Andalas

Padang

Aktivitas Antioksidan Ekstrak

1. etanol kulit batang terhadap
3.
l
Fenolik total, flavnoid total, dan
DPPH dan radikal superoksida proantosianidin total yang
masing-masing sebesar didaptkan masing-masing sebsar
44.90(μg/mL) dan 30.47 31.28 (mg GAE/g ekstrak ), 30.48
(μg/mL)
(mg CE/ g ekstrak 183.30
2. (mgPE/g ekstrak)

Ekstrak etanol Kulit Batang

mempunyai aktivitas yang lebih
baik dalam menghambat enzim
ɑ-Amilase ketimbang ɑ-
Glukosidase

18 Kimia Organik 2020/2021

 Jurusan Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Andalas
Padang

THANK
YOU
Reaksi Pada Penentuan Fenolik Total

Reaksi Pada Penentuan Flavonod Total

Reaksi Pada Uji Aktivitas Antioksidan
 Metode DPPH

Sifat Nilai IC50 Sifat Antioksidan

Antioksidan 50 ppm< Sangat Kuat
berdasarkan
50 ppm-100 ppm Kuat
nilai
IC50(Sumber : 100 ppm-150 ppm Sedang
molyneux, 2004 150 ppm-200 ppm Lemah