PEMBUATAN PREPARAT BAKTERI DAN PEWARNAAN TUNGGAL Dalam pembuatan preparat native alat dan bahan yan di una!

an yaitu mi!r"#!"p$ "b%e! la##$ &"ver la#$ !a'at "#e$ bun#en$ pipet tete#$ !"l"ni mi!r"ba a ar mirin ( ba!teri$ !apan $ dan !hamir )$ al!"h"l *+, dan a-uade#. Pr"#e# pembuatan preparat native ba!teri yaitu !a'at "#e dipi%ar!an di ata# api bun#en$ #etelah itu ambil !"l"ni ba!teri pada a ar mirin P/A ( Plate /"unt A ar ) #e&ara hati 0 hati$ lalu taruh !"l"ni ba!teri ter#ebut di ata# "b%e! la##. Penempatan !"l"ni ba!teri ter#ebut tida! b"leh terlalu tebal !arena untu! memudah!an pen amatan. 1etelah itu tambah!an a-uade# 2 tete# den an pipet tete# pada !"l"ni ba!teri ter#ebut lalu ditutup den an &"ver la##$ lalu diamati di ba'ah mi!r"#!"p dan di ambar. pr"#e# pembuatan preparat native !apan #i#temnya #ama yaitu !a'at "#e dipi%ar!an di ata# api bun#en$ #etelah itu ambil !"l"ni !apan pada a ar mirin PDA ( P"tat"e# De3tr"#e A ar ) #e&ara hati 0 hati$ lalu taruh !"l"ni !apan ter#ebut di ata# "b%e! la##. Penempatan !"l"ni !apan ter#ebut tida! b"leh terlalu tebal !arena untu! memudah!an pen amatan. 1etelah itu tambah!an a-uade# 2 tete# den an pipet tete# pada !"l"ni !apan ter#ebut lalu ditutup den an &"ver la##$ lalu diamati di ba'ah mi!r"#!"p dan di ambar. (http455ma#ruren#tein.bl" #p"t.&"m5677*57+5mi!r"bi"l" i8umum.html)(695275677*). Dalam pembuatan preparat ula# alat dan bahan yan di una!an yaitu mi!r"#!"p$ "b%e! la##$ !a'at "#e$ bun#en$ pipet tete#$ !"l"ni mi!r"ba a ar mirin ( ba!teri$ !apan $ dan !hamir )$ al!"h"l *+, dan metilen biru. Pr"#e# pembuatan preparat ula# ba!teri yaitu !a'at "#e dipi%ar!an di ata# api bun#en$ #etelah itu ambil !"l"ni ba!teri pada a ar mirin P/A ( Plate /"unt A ar ) #e&ara hati 0 hati$ lalu taruh !"l"ni ba!teri ter#ebut di ata# "b%e! la##. Penempatan !"l"ni ba!teri ter#ebut tida! b"leh terlalu tebal !arena untu! memudah!an pen amatan. 1etelah itu tambah!an metilen biru 2 tete# den an pipet tete# pada !"l"ni ba!teri ter#ebut dan didima!an #elama 2 menit$ lalu di:i!#a#i dimana :un #i :i!#a#i yaitu mele!at!an mi!r"ba pada "bye! la##$ memper%ela# pen amatan diba'ah mi!r"#!"p$ dan membunuh mi!r"ba. 1etelah itu diamati di ba'ah mi!r"#!"p dan di ambar. Pr"#e# pembuatan preparat ula# !apan yaitu !a'at "#e dipi%ar!an di ata# api bun#en$ #etelah itu ambil !"l"ni !hamir pada a ar mirin PDA (P"tat"e# De3tr"#e A ar) #e&ara hati 0 hati$ lalu taruh !"l"ni !apan ter#ebut di ata# "b%e! la##. Penempatan !"l"ni !apan ter#ebut tida! b"leh terlalu tebal !arena untu! memudah!an pen amatan. 1etelah itu tambah!an metilen biru 2 tete# den an pipet tete# pada !"l"ni !apan ter#ebut dan didima!an #elama 2 menit$ lalu di:i!#a#i dimana :un #i :i!#a#i yaitu mele!at!an mi!r"ba pada "bye! la##$ memper%ela# pen amatan diba'ah mi!r"#!"p$ dan membunuh mi!r"ba. 1etelah itu diamati di ba'ah mi!r"#!"p dan di ambar. Pr"#e# pembuatan preparat ula# !hamir yaitu !a'at "#e dipi%ar!an di ata# api bun#en$ #etelah itu ambil !"l"ni !hamir pada a ar mirin PDA (P"tat"e# De3tr"#e A ar) #e&ara hati 0 hati$ lalu taruh !"l"ni !hamir ter#ebut di ata# "b%e! la##. Penempatan !"l"ni !hamir ter#ebut tida! b"leh terlalu tebal !arena untu! memudah!an pen amatan. 1etelah itu tambah!an metilen biru 2 tete# den an pipet tete# pada !"l"ni !hamir ter#ebut dan didima!an #elama 2 menit$ lalu di:i!#a#i. 1etelah itu diamati di ba'ah mi!r"#!"p dan di ambar. (http455ma#ruren#tein.bl" #p"t.&"m5677*57+5mi!r"bi"l" i8umum.html)(695275677*). Mi!r""r ani#me yan ada dialam ini mempunyai m"r:"l" i$ #tru!tur dan #i:at8#i:at yan !ha#$ be itu pula den an ba!teri. Ba!teri yan hidup hampir tida! ber'arna dan !"ntra#

den an air$ dimana #el8#el ba!teri ter#ebut di#u#pen#i!an. 1alah #atu &ara untu! men amati bentu! #el ba!teri #ehin a mudah untu! diidenti:i!a#i ialah den an met"de pen e&atan atau pe'arnaan. ;al ter#ebut %u a ber:un #i untu! men etahui #i:at :i#i"l" i#nya yaitu men etahui rea!#i dindin #el ba!teri melalui #eran !aian pen e&atan (D'id%"#eputr"$ 2**<= A##ani$ 2**<). Tu%uan dari pe'arnaan adalah untu! memudah!an melihat ba!teri den an mi!r"#!"p$ memper%ela# u!uran dan bentu! ba!teri$ untu! melihat #tru!tur luar dan #tru!tur dalam ba!teri #eperti dindin #el dan va!u"la$ men ha#il!an #i:at8#i:at :i#i! dan !imia yan !ha# daripada ba!teri den an >at 'arna$ #erta menin !at!an !"ntra# mi!r""r ani#me den an #e!itarnya (?"l! @ Wheeler$ 2**9). Aat 'arna adalah #enya'a !imia berupa aram8 aram yan #alah #atu i"nnya ber'arna. Garam terdiri dari i"n bermuatan p"#iti: dan i"n bermuatan ne ati:. 1enya'a8#enya'a !imia ini ber una untu! membeda!an ba!teri8ba!teri !arena rea!#inya den an #el ba!eri a!an memberi!an 'arna berbeda. Perbedaan inilah yan di una!an #eba ai da#ar pe'arnaan ba!teri. 1el8#el 'arna dapat diba i men%adi dua "l"n an yaitu a#am dan ba#a. Bi!a 'arna terleta! pada muatan p"#iti: dari >at 'arna$ ma!a di#ebut >at 'arna ba#a. Bi!a 'arna terdapat pada i"n ne ati:$ ma!a di#ebut >at 'arna a#am. /"nt"h >at 'arna ba#a adalah methylen blue$ #a:ranin$ netral red$ dan lain8lain. Aat 'arna a#am umumnya mempunyai #i:at dapat ber#enya'a lebih &epat den an ba ian #it"pla#ma #el #edan !an >at 'arna ba#a mudah berea!#i den an ba ian8ba ian inti #el. Pe'arnaan ba!teri dipen aruhi "leh :a!t"r8:a!t"r #eperti 4 :i!#a#i$ peluntur 'arna$ #ub#trat$ inten#i:i!a#i pe'arnaan dan pen unaan >at 'arna penutup (http455bl" !ita.in:"5my8 !ampu>5my8!uliah5mi!r"bi"l" i5pembuatan8preparat8pen e&atannya5)(695275677*) Berba ai ma&am tipe m"r:"l" i ba!teri (!"!u#$ ba#il$ #pirilum$ dan #eba ainya) dapat dibeda!an den an men una!an pe'arna #ederhana. I#tilah Cpe'arna #ederhanaC dapat diarti!an dalam me'arnai #el8#el ba!teri hanya di una!an #atu ma&am >at 'arna #a%a. Kebanya!an ba!teri mudah berea!#i den an pe'arna8pe'arna #ederhana !arena #it"pla#manya ber#i:at ba#":ili! (#u!a a!an ba#a) #edan !an >at8>at 'arna yan di una!an untu! pe'arnaan #ederhana umumnya ber#i:at al!alin (!"mp"nen !r"m":"ri!nya bermuatan p"#iti:). Da!t"r8:a!t"r yan mempen aruhi pe'arnaan ba!teri yaitu :i!#a#i$ peluntur 'arna $ #ub#trat$ inten#i:i!a#i pe'arnaan dan pen unaan >at 'arna penutup. 1uatu preparat yan #udah mere#ap #uatu >at 'arna$ !emudian di&u&i den an a#am en&er ma!a #emua >at 'arna terhapu#. #ebali!nya terdapat %u a preparat yan tahan terhadap a#am en&er. Ba!teri8ba!teri #eperti ini dinama!an ba!teri tahan a#am$ dan hal ini merupa!an &iri yan !ha# ba i #uatu #pe#ie# (D'id%"#eputr"$ 2**<). Kebanya!an ba!teri dapat di'arnai den an pen e&atan #ederhana atau pen e&atan ram$ tetapi beberapa enu# an "ta dari enu# My&"ba!terium$ ber#i:at re#i#ten dan hanya dapat dilihat den an met"de tahan a#am. Karena M. taber&ul"#i# dan M. leprae ba!teri yan pat" eni! ba i manu#ia$ ma!a pen e&atan itu bernilai dia n"#a dalam men identi:i!a#i mi!r""r ani#me ter#ebut. Perbedaan #i:at antara my&"ba&terium den an mi!r""r ani#me lainnya adalah den an adanya #uatu dindin tebal yan berlilin (lip"idal) yan menyebab!an penetra#i "leh >at 'arna men%adi #ulit. A!an tetapi$ apabila >at 'arna #udah dapat ma#u!$ >at 'arna ter##ebut %adi tida! mudah dibuan me#!ipun den an pen unaan a#am al&"h"l yan !uat #eba ai >at pelarutnya. Den an #i:at yan demi!ian$ mi!r""r ani#me yan demi!ian di#ebut mi!r""r ani#me tahan8a#am dan m"!r""r ani#me lainnya yaitu yan mudah dilarut!an den an a#am al&"h"l di#ebut

mi!r""r ani#me tida! tahan a#am. Met"de ini men una!an ti a ma&am >at !imia yan berbeda. 2) >at 'arna primer$ yaitu !arb"n Du&hin$ 6) >at peluntur 'arna$ 9) &"unter#tain$ yaitu metilen biru (1ubandu$ 677*). Te!ni! pe'arnaan Pe'arnaan #ederhana$ merupa!an pe'arna yan palin umum di una!an. Di#ebut demi!ian !arena hanya di una!an #atu %eni# &at pe'arna untu! me'arnai "r ani#me. Kebanya!an ba!teri telah berea!#i den an pe'arna8pe'arna #ederhana !arena #it"pla#manya ber#i:at ba#":il (#u!a a!an ba#a). Aat8>at 'arna yan di una!an untu! pe'arnaan #ederhana umumnya ber#i:at al!alin (!"mp"nen !r"m":"rnya ber#i:at p"#iti:). Pe'arnaan #ederhana ini memun !in!an dibeda!annya ba!teri den an berma&am8ma&am tipe m"r:"l" i (&"&&u#$ vibri"$ ba#illu#$ d#b) dari bahan8bahan lainnya yan ada pa#a "le#an yan di'arnai (;adi"t"m"$ 2**7). Pe'arnaan ne ati:$ met"de ini bu!an untu! me'arnai ba!teri tetapi me'arnai latar bela!an nya men%adi hitam elap. Pada pe'arnaan ini mi!r""r ani#me !elihatan tran#paran (tembu# pandan ). Te!ni! ini ber una untu! menentu!an m"r:"l" i dan u!uran #el. Pada pe'arnaan ini "le#an tida! men alami pemana#an atau perla!uan yan !era# den an bahan8bahan !imia$ ma!a ter%adinya penyu#utan dan #alah #atu bentu! a ar !uran #ehin a penentuan #el dapat diper"leh den an lebih tepat. Met"de ini men una!an &at ni r"#in atau tinta &ina (http455:irebi"l" y7E.'"rdpre##.&"m5677*57<52*5te!ni!8pe'arnaan8mi!r""r ani#me5) (695275677*)

uji biokimia
BAB 2 PENDA;ULUAN 2.2 Tu%uan Per&"baan Tu%uan dalam per&"baan ini adalah mela!u!an pen u%ian bi"!imia untu! identi:i!a#i mi!r"ba. 2.6 Latar Bela!an Bi"!imia merupa!an ilmu yan mempela%ari tentan #enya'a8#enya'a yan ada dalam #i#tem hidup$ penyu#unan #enya'a8#enya'a ter#ebut !e dalam #el8#el dan intera!#i !imia yan ter%adi. 1el8#el pada ma!hlu! hidup ter#u#un dari bi"m"le!ul. Untu! dapat mempertahan!an hidup$ #el8#el men alami metab"li#me (rea!#i pada #el). Dalam metab"li#me #el menyerap ener i dari ma!anan atau nutri#inya$ ener i ini di una!an untu! membentu! bi"m"le!ul penyu#un #el (Lehnin er$ 2**+). Kara!teri#a#i dan !la#i:i!a#i #eba ian be#ar mi!r"bia #eperti ba!teri berda#ar!an pada rea!#i en>imati! ataupun bi"!imia. Mi!r"ba dapat tumbuh pada beberapa tipe media$ mempr"du!#i tipe metab"lit tertentu yan didete!#i den an intera!#i mi!r"bia den an rea en te#t yan men ha#il!an 'arna rea en. Rea!#i8rea!#i dalam #el a!an teridenti:i!a#i den an mela!u!an pen u%ian8pen u%ian tertentu. 1el a!an memberi!an re#p"n #e#uai den an !emampuan yan dimili!inya$ mi#alnya men ha#il!an en>im !atala#e$ en>im elatina#e atau !emampuan untu! men hidr"li#i# lema! (Pel&>ar dan /han$ 2*FG). 1e&ara m"r:"l" i#$ bia!an maupun #el ba!teri yan berbeda dapat tampa! #erupa. Karena itu &iri :i#i"l" i# atau bi"!imia'i merupa!an !riteria yan amat pentin di dalam

identi:i!a#i #pe#imen yan tida! di!enal. Tanpa ha#il pen amatan :i#i"l" i# yan memadai men enai "r ani#me yan diperi!#a ma!a penentuan #pe#ie#nya tida!lah mun !in dila!u!an. Hleh !arena itu per&"baan ini pentin dila!u!an$ !arena den an mela!u!an u%i bi"!imia !ita dapat men identi:i!a#i "r ani#me ta! di!enal (;adie"t"m"$ 2**9). BAB II DA1AR TEHRI /iri :i#i"l" i ataupun bi"!imia merupa!an !riteria yan amat pentin di dalam identi:i!a#i #pe#imen ba!teri yan ta! di!enal !arena #e&ara m"r:"l" i# bia!an atau pun #el ba!teri yan berbeda dapat tampa! #erupa$ tanpa ha#il pen amatan :i#i"l" i# yan memadai men enai "r ani! yan diperi!#a ma!a penentuan #pe#ie#nya tida! mun !in dila!u!an. Kara!teri#ti! dan !la#i:i!a#i #eba ian mi!r"ba #eperti ba!teri berda#ar!an pada rea!#i en>imati! ataupun bi"!imia. Mi!r"ba dapat tumbuh pada beberapa tipe media mempr"du!#i tipe metab"lit tentunya yan didete!#i den an intera!#i mi!r"ba den an rea en te#t yan mana men ha#il!an perubahan 'arna rea en (Murray$ 677+) Bi"!imia bertu%uan untu! memahami ba aimana intera!#i bi"m"le!ul #atu den an lainnya memba'a #i:at8#i:at !eadaan hidup ini. Belum pernah dalam pen amatan dalam l" i!a m"le!ul #el hidup$ !ita menemu!an #uatu pelan aran terhadap hu!um 0 hu!um :i#i# yan telah di!enal$ #eirin den an itu pula$ !ita belum pernah memerlu!an pende:ini#ian hu!um baru. Me#in "r ani! luna! #el hidup ber:un #i di dalam !eran !a hu!um 0 hu!um yan #ama yan men atur me#in buatan manu#ia$ a!an tetapi$ rea!#i 0 rea!#i !imia dan pr"#e# pen aturan #el telah ma%u demi!ian pe#at$ melampaui !emampuan !er%a me#in buatan manu#ia (Lehnin er$ 2**+). .U%i :i#i"l" i bia#anya identi! den an u%i bi"!imia. U%i8u%i bi"!imia yan bia#anya dipa!ai dalam !e iatan identi:i!a#i ba!teri atau mi!r""r ani#me yan antara lain u%i !atala#e$ !"a ula#e$ u%i nitrit$ hidr"li#i# elatin$ u%i hidr"li#i# !an%i$ u%i hidr" en #ul:it dan lain8lain. Pen u%ian bi"!imia merupa!an #alah #atu hal yan #an at pentin dalam dunia mi!r"bi"l" i (Lim$ 2**F). U%i8u%i bi"!imia yan bia#anya dipa!ai dalam !e iatan identi:i!a#i ba!teri atau mi!r""r ani#me yaitu antara lain adalah u%i !"a ula#e$ u%i !atala#e$ u%i MR?P$ u%i nitrit$ hidr"li#i# elatin$ u%i ;61 dan lain8lain. 1alah #atu u%i yaitu adalah u%i hidr"li#i# urea. U%i ini #an at pentin dalam identi:i!a#i ba!teri8ba!teri pat" en pen huni u#u#$ be itu pula u%i yan lain #ebenarnya di una!an untu! men identi:i!a#i ba!teri den an !ara!ter tertentu$ yan mana den an !ara!ter ter#ebut ia dapat dibeda!an den an %ela# dari ba!teri8ba!teri yan lain yan hidup di#e!itarnya (D'id%"#eputr"$ 2**<). Kebanya!an ba!teri aer"bi! dan anaer"bi! :a!ultati: a!an mempr"du!#i hidr" en per"!#ida yan ber#i:at t"!#i! terhadap ba!teri yan ma#ih hidup. Untu! men%a a !elan #un an hidupnya$ #e%umlah ba!teri mampu men ha#il!an en>im !atala#e yan meme&ah ;6H6 men%adi air dan "!#i en #ehin a #i:at t"!#i!nya hilan (Pel&>ar dan /han$ 2*FG). Matinya ba!teri8ba!teri aner"bi! "bli at bila ada "!#i en di#ebab!an !arena tida! adanya pembentu!an en>im !atala#e #ehin a ;6H6 mera&uni ba!teri itu #endiri. Ada tida!nya pembentu!an en>im !atala#e dapat membantu pembedaan !el"mp"!8!el"mp"! ba!teri tertentu. Pada u%i !atala#e$ !ebanya!an ba!teri aer"b dan anaer"b men una!an "!#i en

;6H6 yan #e#un uhnya ber#i:at ra&un ba i #i#tem8#i#tem en>im #endiri. Namun$ mere!a tetap dapat hidup den an adanya ra&un ter#ebut !arena a!an me ha#il!an en>im !atala#e (;adie"t"m"$ 2**9). U%i !atala#e merupa!an #uatu pen u%ian terhadap ba!teri tertentu untu! men etahui apa!ah ba!teri ter#ebut merupa!an ba!teri aer"b$ anaer"b :a!ultati:$ atau anaer"b "bli at. Ba!teri yan memerlu!an "!#i en man ha#il!an hidr" en per"!#ida (;6H6) yan #ebenarnya bera&un ba i ba!teri #endiri. Namun mere!a dapat tetap hidup den an adanya antimetab"lit ter#ebut !arena mere!a men ha#il!an en>im !atala#e yan dapat men ubah hidr" en per"!#ida men%adi air dan "!#i en den an rea!#i #eba ai beri!ut 4 !atala#e 6;6H6 6 ;6H I H6 (?"l! @ Wheeler$ 2**9) 1uatu en>im adalah #uatu !atali# bi"l" i#. ;ampir tiap re!a#i bi"!imia di!atali# "leh en>im. En>im merupa!an !atali# yan lebih e:i#ien daripada !ebanya!an !atali# lab"rat"rium atau indu#tri. En>im %u a memun !in!an #uatu #ele!tivita# perea!#i8 perea!#i dan #uatu pen endalian la%u rea!#i yan tida! dimun !in!an "leh !ela# !atali# lain. Ke#pe#i:i!an en>im di#ebab!an "leh bentu!nya yan uni! dan "leh u #8 u u# p"lar (atau n"n p"lar) yan teedapat dalam #tru!tur en>im ter#ebut. Beberapa en>im be!er%a ber#ama #uatu !":a!t"r n"n pr"tein$ yan dapat berupa #enya'a "r ani! maupun an"r ani! (Lehnin er$ 2**+). En>im adalah !atali#at"r #e%ati$ dimana m"le!ul ini menin !at!an den an nyata !e&epatan rea!#i !imia #pe#i:i! yan tanpa en>im a!an berlan #un #an at lambat. En>im tida! dapat men ubah titi! !e#eimban an rea!#i yan di!atali#nya$ en>im %u a tida! a!an habi# dipa!ai atau diubah #e&ara permanen "leh rea!#i8rea!#i ini. En>im merupa!an bi"!atali# yan ber:un #i untu! membantu pr"#e# metab"li#me. En>im memili!i !emampuan untu! men !atali#i# #uatu rea!#i (Lehnin er$ 2**+). En>im8en>im yan men urai!an "l"n an p"tein di#ebut pr"tena#e5pr"tea#e$ !edua nama ini dian ap #in"nim. /"nt"h pada hidr"li#i# elatin dimana pr"tein diper"leh dari hidr"li#i# !al" en$ yaitu >at pada %arin an pen hubun dan tend"n dari he'an. Gelatin a!an terurai "leh mi!r"bia yan men#inte#i# en>im pr"te"li#i#. Larutan elatin ber#i:at &air pada #uhu ruan atau #uhu !amar dan padat apabila berada di dalam re:ri erat"r. Dan apabila elatin #udah dihidr"li#i# "leh mi!r"ba$ ma!a a!an tetap ber#i:at &air (;adi"et"m"$ 2**9). Gelatin diper"leh den an mendidih!an bahan he'ani yan men andun !"la en$ namun elatin bu!anlah pr"tein yan #ama tipenya den an !"la en. Ternyata b"b"t m"le!ul elatin hanyalah #eperti a !"la en. A a!nya dalam pembentu!an elatin$ m"le!ul tr"p"!"la en terurai dan tiap helai membuat i!atan8i!atan hidr" en dalam air$ men ha#il!an pembentu!an el yan !ha# (De##enden @ De##enden$ 2**F). Di dalam #it"pla#ma E. &"li terdapat #e%umlah un#ur ranular. Jan palin %ela# adalah rib"#"m yan terlihat padat pada pe'arnaan= pada pr"!ary"ti#$ berdiameter !ira8!ira 2F nm. Rib"#"m yan men andun a#am rib"nu!leat dan #e%umlah m"le!ul pr"tein melan #un !an #inte#a pr"tein #el. Hr anel ini #erin !ali ber!el"mp"! men%adi p"lirib"#"m atau p"li#"m. Bu a di dalam #it"pla#ma !ebanya!an ba!teri terdapat ranula yan men andun #impanan nutrien= beberapa men andun pati$ yan lain men andun lema!. 1it"#"l$ :a#e &air dari #it"pla#ma$ %u a men andun berba ai en>im yan terlarut$

berba ai m"le!ul pemban un yan ber:un #i #eba ai pre!ur#"r ma!r"m"le!ul #el$ dan #e%umlah aram an"r ani! (Lehnin er$ 2**+). . DADTAR PU1TAKA D'id%"#eputr"$ 2**<$ Da#ar8Da#ar Mi!r"bi"l" i $ D%ambaran$ Ba!arta. De##enden$ R. B. dan De##enden$ B. 1.$ 2**F$ Kimia Hr ani! Bilid 6 $ Erlan a$ Ba!arta.

;adi"et"m"$ R.1.$ 2**9$ Te!ni! dan Pr"#edur Da#ar Lab"rat"rium Mi!r"bi"l" i$ Gramedia$ Ba!arta. Lehnin er. 2**+. Da#ar 0 da#ar Bi"!imia$ Bilid I. Erlan a. Ba!arta.

Lim$ D.$ 2**+$ Mi&r"bi"l" y$ W/B.M& ra' ;ill$ Ne' J"r!. Murray$ 2**+$ Bi"!imia ;arper$ EG/$ Ba!arta. Pel&>ar$ M.B. Dan /han$ E./.1.$ 2*FG$ Da#ar8Da#ar Mi!r"bi"l" i$ UI Pre##$ Ba!arta. ?"l! dan Wheeler. 2**9. Mi!r"bi"l" i Da#ar$ Bilid 2$ Edi#i !elima. Erlan Ba!arta. a.

<.6 Pembaha#an Pra!ti!um yan dila!u!an !ali ini adalah u%i bi"!imia yan bertu%uan untu! mempela%ari beberapa pen u%ian bi"!imia yan di una!an untu! !ara!teri#ti! dan identi:i!a#i mi!r"ba. U%i bi"!imia ini #endiri bia#anya dipa!ai !e iatan identi:i!a#i ba!teri atau "r ani#me$ yaitu antara lain adalah u%i !"a ula#e$ u%i !atala#e$ u%i MR8?P$ u%i nitrit$ hidr"li#i# elatin$ u%i ;61 dan lain8lain. Pen u%ian bi"!imia merupa!an #alah #atu yan pentin di dalam dunia mi!r"bi"l" i. U%i bi"!imia ini di una!an untu! identi:i!a#i ba!teri den an !ara!ter tertentu. Jan mana den an !ara!ter ter#ebut ia dapat dibeda!an den an %ela# dari ba!teri8ba!teri yan hidup di#e!itarnya. U%i Katala#e dila!u!an untu! men etahui apa!ah ba!teri ter#ebut merupa!an ba!teri aer"b atau anaer"b "bli at. Adapun rea!#i yan ter%adi yaitu 4 6 ;6H6 en>im !atala#e 6 ;6H (l) I H6 ( ) Ba!teri8ba!teri anaer"b mati apabila ter!ena "!#i en. ;al ini di!arena!an "leh !etiadaan >at pembentu! en>im !atala#e. 1ehin a "!#i en per"!#ida (;6H6) mera&uni ba!teri itu #endiri. Ada tida!nya pembentu!an en>im !atala#e dapat membantu !el"mp"! ba!teri8 ba!teri ter#ebut. En>im !atala#e be!er%a den an men urai!an ;6H men%adi m"le!ul H6 dan ;6. En>im !atala#e mempunyai !e#tabilan yan lebih rendah terhadap pana# dibandin !an den an #uatu per"!#ida#e. ;a#il pen u%ian terhadap ada atau tida!nya en>im !atala#e pada bia!an E#&heri&hia &"li$ Ba&illu# 1ubtili# dan Pr"teu# #p$ didapat!an bah'a pada bia!an ba!teri ter#ebut telah dila!u!an pen u%ian den an larutan hidr" en per"!#ida (;6H6) men ha#il!an rea!#i p"#iti: pada #emua #ampel. ;al ini dibu!ti!an den an adanya elembun 8 elembun a#. ;al ini membu!ti!an pada bia!an E8&"li$

Ba&illu# 1ubtili# dan Pr"teu# #p ter#ebut men andun en>im !atala#e. Pada u%i MR8?P dila!u!an untu! men u%i terbentu!nya a#am "r ani!. 1etelah ba!teri yan diin"!ula#i!an ba!teri yan a!an diu%i!an$ yaitu E#&heri&hia &"li dan Ba&illu# 1ubtili# pada media MR?P$ !emudian diin!uba#i pada #uhu 9E7/ #elama K <F %am. Kemudian ba!teri yan telah diin!uba#i ter#ebut diberi methyl red beberapa tete#$ methyl red ini #eba ai indi!at"r a#am ba#a$ !emudian media berubah men%adi merah$ hal ini di!arena!an medium #edi!it a#am. Pada media MR?P ba!teri E#&heri&hia &"li dan Ba&illu# 1ubtili# menun%u!!an ha#il ne ati:$ !arena ber'arna &"!elat. Ba!teri yan di una!an pada u%i !an%i pun ma#ih men una!an ba!teri yan #ama$ yaitu E#&heri&hia &"li dan Ba&illu# 1ubtili#. U%i hidr"li#a !an%i dima!#ud!an untu! mendete!#i ada tida!nya pembentu!an amilum "leh en>im amila#e pada ba!teri. Pada E. /"li dan Ba&illu# 1ubtili# yan telah diin"!ula#i dalam media !an%i dan diin!uba#i #elama beberapa hari di tete#i den an larutan lu "l. Larutan lu "l ini merupa!an larutan yan umum di una!an untu! mendete!#i adanya amilum dalam #uatu bahan ma!anan$ ha#il p"#iti: ditandai den an 'arna hitam pada bahan ter#ebut. 1etelah dila!u!an penete#an diper"leh ha#il p"#iti: den an adanya perubahan 'arna men%adi hitam. Ini menanda!an bah'a pada ba!teri E. /"li dan Ba&illu# 1ubtili# mempunyai en>im amila#e untu! men hidr"li#i# !an%i men%adi amilum. U%i !a#ein bertu%uan untu! mendete!#i adanya pembentu!an a#am ba!teri yan di#ebab!an "leh a!tivita# ba!teri yan ber#i:at me#":ili!. Ba!teri ini a!an meme&ah la!t"#a men%adi a#am la!tat. A!tivta# en>im pr"ti"liti! a!an meme&ah pr"tein dan meru#a! #tabilita# !a#ein. Pada per&"baan dan ha#il pen amatan menun%u!an bah'a Ba&illu# #ubtili# dan E#&heri&ia &"li p"#iti: terhidr"li#anya !a#ein !arena di#e!itar !"l"ni ba!teri men%adi %ernih. Untu! terhidr"li#anya !a#ein den an men amati perubahan media di#e!itar !"l"ni ba!teri men%adi %ernih (u%i p"#iti:) atau tetap buram (u%i ne ati:). U%i hidr"li#a elatin bertu%uan untu! menentu!an !emampuan #uatu mi!r""r ani#me membentu! en>im #ema&am pr"te"liti! ( elatina#e) yan dapat men&air!an elatin merupa!an hidr"li#i# dari a#am amin". Gelatin adalah pr"tein yan diper"leh dari hidr"li#i# !al" en. Bi!a media memadat atau membe!u #etelah pendin inan$ te# menun%u!an ne ati: (ba!teri tida! dapat men&erna elatin). Bi!a media tetap &air #etelah pendin inan ma!a ha#il per&"baan ter#ebut p"#iti: (ba!teri dapat men&erna elatin). Bia!an ba!teri yan di una!an pada u%i ini adalah E#&heri&hia &"li dan Ba&illu# 1ubtili#. 1etelah ba!teri ter#ebut diin"!ula#i !e tabun $ lalu di in&ubat"r pada #uhu 977/ #elama <F %am. Keti!a didin in!an den an e#$ ternyata hanya Ba&illu# 1ubtili# menun%u!!an rea!#i p"#iti:. ;al ini berarti elatin tida! terurai "leh ba!teri E#&heri&hia &"li yan tida! dapat men#inte#i# en>im Pr"te"li#i#$ yan ditun%u!!an den an membe!unya elatin yan beri#i bia!an ba!teri. ;idr"li#a lema! dila!u!an untu! men etahui !emampuan mi!r"ba meme&ah i!atan lipida. Rea!#i yan ter%adi adalah #eba ai beri!ut 4 Lema! I ;6H li#er"l I a#am lema! Media yan di una!an dalam per&"baan ini merupa!an media nutrien a ar (NA) yan di&ampur den an minya! "ren . Penambahan minya! ini ber:un #i #eba ai lema!. Kemudian media ter#ebut diin!uba#i #elama E6 %am. 1etelah itu bia!an ba!teri ter#ebut ditete#i den an /u1H< %enuh. Dan a!an berea!#i p"#iti: %i!a membentu! 'arna hi%au metali! pada bia!an ba!teri. Pen unaan larutan /u1H< %enuh bertu%uan hanya #eba ai indi!at"r untu! memper&epat rea!#i. Pada ba!teri E. &"li diper"leh ha#il yan ne ati: ini

menun%u!!an bah'a ba!teri ter#ebut dapat men hidr"li#i# lema! yan ada pada media.

BAB ? PENUTUP +.2 Ke#impulan Ke#impulan yan diper"leh dari per&"baan ini adalah 4 2. U%i bi"!imia dapat dila!u!an untu! men etahui !ara!teri#a#i dan identi:i!a#i ba!teri. 6. Ba!teri E#&heri&ia &"li$ Ba&illu# #ubtilu#$ dan Pr"teu# #p p"#iti: pada u%i !atala#e yan ditandai den an terbentu!nya elembun a#. 9. Ba!teri E#&heri&ia &"li dan Ba&illu# #ubtilu# ne ati: pada u%i MR8?P yan ditandai den an perubahan 'arna men%adi &"!lat. <. Ba!teri E#&heri&ia &"li dan Ba&illu# #ubtilu# p"#iti: pada u%i hidr"li#a !an%i yan ditandai den an perubahan 'arna men%adi hitam. +. Ba!teri E#&heri&ia &"li ne ati: dan Ba&illu# #ubtilu# p"#iti: pada u%i hidr"li#a elatin. G. Ba!teri E#&heri&ia &"li dan Ba&illu# #ubtilu# p"#iti: pada u%i hidr"li#a lema! yan ditandai den an perubahan 'arna men%adi hi%au men !ilat.