KONSEP PADA AWAL POLA EMBRIO

G.P.Raju, C.Tan and P.S.Klein

PENDAHULUAN
Karena mamalia adalah organisme vivipar, perkembangan pasca implantasi tidak
dapat diamati secara langsung atau perlu dilakukan pembedaham mikro
(microsurgical). Tetapi bidang ini mengalami perkembangan pesat selama
beberapa tahun terakhir, perkembangan genetika dan biologi molekuler dan
penggunaannya memberikan pertanyaan mendasar terhadap perkembangan dalam
model organisme yang beragam. Dalam ulasan ini, kami merangkum beberapa
kemajuan konseptual penting serta terobosan teknologi terhadap perkembangan
ini. Anatomi embrio mamalia akan dijelaskan secara lebih rinci pada bagian lain.
Sebaliknya, penekanan kami terletak pada prinsip-prinsip perkembangan embrio
yang perlu dipelajari dari studi organisme beragam, termasuk mouse dan
vertebrata lainnya, juga termasuk invertebrata seperti Drosophila melanogaster.
Embriologi sebagai ilmu pengetahuan dimulai dengan pengamatan Aristoteles
terhadap perkembangan embrio ayam. Pada abad ke-19, Karl Ernst von Baer
menjelaskan kesamaan antara banyak embrio vertebrata, termasuk ayam, ikan,
reptil, burung dan mamalia sesaat setelah gastrulasi. Pada tahap ini, semua embrio
vertebrata memiliki lengkungan insang; notochords, spinal cords dan epidermis
yang sangat mirip. Hasil pengembangan ini adalah jaringan yang berdiferensiasi
menjadi struktur karakteristik dari organisme, misalnya epidermis berbeda antara
sisik pada ikan atau reptil, bulu burung, atau rambut mamalia. Demikian juga,

perkembangan anggota badan hampir sama pada semua vertebrata, yaitu pada
kaki, lengan, sirip, atau sayap. Kami fokus di sini pada paralel antara organisme
ang berbeda, karena pemahaman kita tentang perkembangan mamalia adalah
prinsip montase yang perlu dipelajari dari organisme yang beragam. Pertanyaan
menarik yang sama yaitu apa yang membuat organisme ini berbeda dalam
perkembangannya tidak dibahas di sini.
Embriologi menjadi ilmu eksperimental pada akhir abad ke-19 dan awal studi
di bidang ini menghasilkan beberapa prinsip dasar yang dijelaskan di bawah,
seperti kemampuan embrio mengatur perkembangan sendiri dan proses induksi
embrio. Baru-baru ini, kemajuan besar dalam memahami perkembangan embrio
berasal dari penerapan genetika dan biologi molekuler terhadap pertanyaanpertanyaan mendasar yang dirumuskan dan dipelajari oleh ahli embrio klasik.
Kemajuan ini diawali dengan studi pada lalat buah Drosophila melanogaster, tapi
peran penting datang dari berbagai organisme lain, termasuk nematoda
Caenorrhabditis elegans, mouse, ayam dan katak (Xenopus laevis), serta ikan
zebra, hedhegog laut dan organisme model lain.
LATAR BELAKANG
Secara umum, tahap kunci dari perkembangan embrio sama pada banyak
organisme yang berbeda (Gambar 1a), meskipun rincian ini bervariasi di antara
mamalia. Setelah pembuahan, sel telur mengalami serangkaian mitosis cepat
(tahap pembelahan). Banyak dari organisme yang dibahas dalam bab ini, termasuk
katak, cacing, lalat dan anak ayam, tahap pembelahan terjadi tanpa adanya
aktivitas transkripsi dari embrio. Pada akhir tahap pembelahan, embrio

multiseluler yang disebut blastula atau blastocyst (blastula vertebrata memiliki

rongga pusat atau blastocoele).
Transisi midblastula ditandai

dengan kontrol maternal

dari transfer

perkembangan embrio awal terhadap kontrol embrio, lambatnya tingkat

pembelahan mitosis dan pembelahan sel menjadi asynchronous (tidak serempak).
Gastrulasi dimulai dengan involusi atau invaginasi dari sel ke bagian dalam
blastula, mengarah pada pembentukan tiga lapisan. Mekanisme gastrulasi
kompleks dan sangat berbeda antara spesies vertebrata, tapi hasilnya sama.
Lapisan terluar, disebut ektoderm, menghasilkan sel-sel yang menghasilkan kulit
dan sistem saraf. Lapisan dalam, endoderm, menghasilkan jaringan seperti usus,
hati dan pankreas. Lapisan tengah, mesoderm menghasilkan beberapa jaringan
termasuk otot, jantung, mesenkim dan darah. Puncak gastrulasi adalah
penempatan tiga lapisan ke posisi baru yang akan memungkinkan induksi organ
dan jaringan spesifik terus berkembang setelah gastrulasi.
Gambar 1. Gambaran perkembangan awal, (a) Skema diagram dari
embriogenesis Xenopus awal (dari referensi 3). Pembuahan (1) dimulai dari
serangkaian pembelahan cepat (2) dari embrio. Umumnya, transkripsi gen zigotik
dimulai selama tahap blastula (3) ketika rongga berisi cairan internal yang
dibentuk (blastocoele). Gastrulasi (4) dimulai dengan involusi sel pada sisi dorsal,
disebut bibir blastopori, dan mengalami puncak pada posisi yang benar dari
lapisan primer. Neurulasi (5) dan organogenesis dimulai sebagai hasil dari
interaksi induktif yang tepat antara jaringan tetangga, menghasilkan organisme
yang memiliki pola (6) (diadaptasi dari referensi 118). (b) Skema diagram
perkembangan tikus awal. Transkripsi zigotik dimulai pada tahap dua sel (1). Pada
tahap delapan sel (morula) (2), sel mengalami pemadatan (3). Blastokista (4)
terdiri dari lapisan trophectodermal luar (TE) dan inner cell mas, terdiri dari

hypoblast dan epiblast, yang membentuk embrio. Tahap silinder telur (5) diikuti
oleh gastrulasi (6), dimulai dengan pembentukan lapisan sederhana, dan migrasi
sel mesodermal dan endodermal ke bagian dalam embrio. Organogenesis
mendefinisikan peristiwa perkembangan utama selama tahap janin (7). Diadaptasi
dari referensi 4.
Mamalia, sebagaimana dicontohkan oleh mouse, agak berbeda dari model
organisme lain yang dibahas di sini (Gambar lb). Perbedaan ini meliputi telur yan
dibuahi secara simetris, terlambatnya pembelahan akhir (17-20 jam setelah
pembuahan) dan munculnya gen zigotik, transkripsi dalam waktu singkat setelah
pembelahan pertama. Sampai tahap delapan-sel (morula), semua sel memiliki
potensi perkembangan yang sama. Menariknya, jika embrio awal dibagi menjadi
dua, individu normal lengkap dapat dihasilkan, seperti yang terlihat pada kembar
monozigot. Embrio delapan-sel mengalami proses disebut pemadatan, di mana
sel-sel menjadi lebih erat, memaksimalkan hubungan sel-sel, dan batas-batas sel
pada permukaan menjadi tidak jelas. Diferensiasi pertama terjadi pada embrio 16sel, sehingga sel-sel eksternal menjadi trofoblas, yang menghasilkan korion. Selsel trofoblas mengeluarkan cairan ke pusat morula, yang mengarah pada ke
pembentukan rongga sentral, blastocoele. Pada tahap ini embrio telah menjadi
blastocyst, di mana seluruh lapisan sel luar, trophectoderma, membungkus
blastocoele dan sekelompok sel, disebut inner cell mass (ICM). Dalam ICM, selsel bersentuhan dengan blastocoele dan menghasilkan hypoblast, sementara sel-sel
yang tidak bersentuhan dengan blastocoele menghasilkan epiblast. Batas
hypoblast adalah rongga blastocoele, ini menghasilkan yolk sac endoderm.
Epiblast pada dasarnya membuat semua sel-sel akan membentuk embrio secara
tepat. Pada gastrulasi, calon sel mesoderm dan endodermal bermigrasi melalui

invaginasi sederhana yang terbentuk sepanjang sumbu anterior-posterior dari

ektoderm sederhana. Ini selanjutnya bergerak secara anterior dan lateral untuk
membentuk jaringan mesoderm dan endodermal dari embrio.
Dalam sisa bagian dari bab ini, metode dan teknik yang telah dikembangkan
dan dimanfaatkan dipelajari untuk perkembangan embrio pada tingkat sel dan
molekuler seperti yang telah dijelaskan. Juga, beberapa konsep perkembangan
kunci yang muncul dari studi molekuler dan embriologi dalam berbagai
organisme. Jalur sinyal penting yang telah digunakan dalam perkembangan pada
seluruh evolusi disebutkan. Akhirnya, tujuan dari bab ini relevansi klinis potensial
dari studi perkembangan.
TEKNOLOGI TERAPAN
Karakterisasi mutan yang mengubah perkembangan embrio normal memberikan
kesulitan dalam mengidentifikasi gen bermutasi. Dengan kemajuan dalam biologi
molekuler

selama

tiga

dekade

terakhir,

menjadi

lebih

mudah

untuk

mengidentifikasi dan mengkloning gen, terutama dalam organisme dengan genom

kecil, seperti Drosophila dan C. elegans, dan untuk memahami peran molekul
tertentu dalam perkembangan.
Agar produk gen berperan dalam pengembangan struktur atau jaringan tertentu,
ini harus dinyatakan di tempat yang benar dan pada waktu yang tepat. Teknik
hibridisasi in situ adalah teknik terbaik untuk menjawab kedua pertanyaan ini.
Teknik ini menggunakan probe asam nukleat berlabel untuk melengkapi gen yang
diinginkan. Embrio ditempatkan dalam fiksatif untuk melumpuhkan mRNA dan
mempertahankan struktur keseluruhan embrio dan kemudian diinkubasi dengan

probe berlabel, hibridasasi dimana mRNA dinyatakan (Gambar 2). Teknik yang
sama dengan menggunakan antibodi memungkinkan dalam deteksi situ dari
protein. Beberapa aplikasi awal teknik ini mengungkapkan temuan yang
mengulangi pola penandaan pair-rule genes 3 (gen pasangan-aturan 3) (lihat hal
364) pada Drosophila dan organisasi anterior-posterior dari gen homeoboks pada
invertebrata dan vertebrata (dijelaskan di bawah).
Pendekatan gain of function (pendekatan manfaat fungsi)
Transfer gen adalah alat penting untuk memahami fungsi gen. Ada beberapa cara
untuk mentransfer informasi genetik dalam analisis perkembangan embrio. Dalam
Xenopus, ukuran besar embrio awal memungkinkan injeksi DNA atau mRNA.
Teknik lain untuk overexpression (kelebihan penandaan) dari gen melibatkan
penggunaan vektor virus, yang memiliki keunggulan tertentu atas plasmid DNA
atau injeksi mRNA. Vektor yang paling sering digunakan adalah adenovirus,
retrovirus, virus herpes simpleks (HSV) dan virus berhubungan dengan
adenovirus (AAV). Keuntungan dari vektor virus ini adalah bahwa mereka
menyediakan penandaan ekspresi gen secara efisien. Vektor retroviral dapat dibuat
dalam titer yang relatif tinggi, dapat menginfeksi sebagian besar jenis sel dan
memungkinkan penandaan transgen yang stabil. RNA mengandung virus untuk
memasuki sel inang, membuat salinan DNA dari genom virus melalui enzim
reverse transcriptase, dan pesan rantai ganda baru selanjutnya diintegrasikan ke
dalam genom inang.
Metode lain untuk mendapatkan kelebihan penandaan gen adalah melalui
penggunaan unsur yang berpindah. Ini terjadi secara alami dari unsur bergerak

yang ditemukan dalam genom berbagai organisme, dari tanaman sampai mamalia.
Misalnya, unsur P yang ditemukan dalam genom Drosophila dan bisa melompat
dari satu lokasi kromosom ke lokasi kromosom yang lain. Unsur P dapat diisolasi,
dan gen kloning dapat dimasukkan ke dalam pusat dari unsur P. Unsur P
rekombinan selanjutnya disuntikkan ke dalam embrio inang di mana hal tersebut
terintegrasi ke dalam genom; menciptakan organisme transgenik.
Pada tikus, studi tentang overexpression (penandaan berlebih) biasanya
dilakukan melalui penggunaan teknik transgenik. Metode paling umum untuk
menciptakan tikus transgenik adalah injeksi langsung DNA ke dalam pronukleus
telur yang dibuahi. Atau, sel-sel induk embrionik dapat dipisahkan dari embrio
tikus awal dan kultur in vitro. Vektor rekombinan dapat digunakan untuk transfect
atau memperkenalkan transgen ke dalam sel-sel kultur. Sel-sel yang telah
dimasukkan transgen dipilih dan suntikan mikro ke dalam blastokista dari embrio
inang. Biasanya, embrio host dari rantai sel mouse dengan warna bulu berbeda
untuk mengidentifikasi apakah sel transgenik telah dimasukkan ke dalam host.
Blastokista ditanam kembali ke dalam rahim dari mouse semu dan dibiarkan
berkembang. Blastokista yang ditransfer akan berkembang menjadi mouse
chimeric yang dapat dideteksi dengan adanya warna bulu campuran. Jika sel-sel
induk transgenik berperan terhadap garis kuman (germ line), mouse chimeric
dapat dikawinkan dengan mouse tipe liar.
Gambar 2. Hibridisasi in situ, (a) penandaan Hoxb-4 dalam embrio tikus dari
pertengahan usia kehamilan (courtesy dari Robb Krumlauf). b) Xwnt8 (biru muda)
dan Xfriz2led8 (ungu) dalam embrio gastrula Xenopus. Penandaan Xfrizzled8,
dapat dideteksi pada bibir blastopori dorsal (atas). Penandaan XWnt8 terlihat
dalam daerah ventral dan lateral (courtesy of Matt Deardorff). (c) Penandaan gen

Wnt terbaru dalam embrio ayam awal. Catatan penandaan tingkat tinggi dalam
tabung saraf anterior (courtesy of Bob Riddle dan Tony Brown). (d) penandaan
bersayap (ungu) dan DWnt-4 (coklat) dalam embrio gastrula Drosophila.
(courtesy of Betsy Wilder).
KONSEP SAAT INI
Bagian ini menjelaskan beberapa konsep penting dalam embriologi yang berasal
dari studi tentang organisme model beragam yang sangat penting untuk
memahami embriogenesis mamalia. Ini termasuk penemuan pada organisme
vertebrata,

menggambarkan

gagasan

dasar

satu

jaringan

yang

dapat

menginstruksikan atau menginduksi jaringan tetangga untuk mengikutinya

pengaturan dan fate (nasib) sel baru, induksi dan pembentukan lapisan germinal
primordial, urutan hirarkis aktivasi gen dalam membangun pola dan nasib sel dan
bukti untuk gradien morphogen dalam membangun pola. Pada akhir bagian ini,
beberapa jalur sinyal yang dipertahankan terhadap genesis embrio vertebrata dan
invertebrata diringkas.
Induksi dan pengaturan Spemann
Akhir abad ke-19 karya eksperimental Roux, Driesch dan lain-lain, termasuk
karya

Spemann

sebelumnya,

membantu

untuk

membangun

konsep

perkembangan. Perkembangan ini melibatkan lokalisasi penentu dalam telur

dibagi rata dan bertanggung jawab terhadap perkembangan struktur tertentu dalam
embrio. Perkembangan ini memiliki fitur sentral dalam perkembangan embrio
invertebrata, seperti Drosophila, di mana banyak dari pola masa embrio
ditetapkan sebelum pembuahan (lihat di bawah). Dalam perkembangan regulatif,
sel-sel individual memiliki potensi untuk membentuk lebih banyak struktur dari

sel. Pada tahap awal perkembangan, daerah embrio berkembang berisi semua
informasi yang diperlukan untuk pembentukan organisme lengkap, sehingga
penghilangan setengah dari embrio dapat menghasilkan embrio yang lebih kecil,
tapi biasanya memiliki pola. Embrio mamalia terutama regulatif, menunjukkan
totipotency yang lengkap melalui perkembangan beberapa hari awal.
Kemampuan embrio untuk mengatur perkembangan sendiri menyiratkan
bahwa sel-sel dari embrio (blastomer) harus saling berhubungan satu sama lain.
Kemampuan sel (atau kelompok sel) untuk menginstruksikan sel tetangga
mengikuti jalur tertentu adalah proses dasar disebut sebagai induksi, yang
digambarkan dalam percobaan transplantasi oleh Hans Sperman dan Hilda
Mangold. Percobaan ini dilakukan pada amfibi, tetapi prinsip-prinsip berlaku
secara luas, seperti dibahas di bawah.
Pada amfibi, gastrulasi dimulai pada sisi dorsal masa embrio dan dapat dilihat
sebagai suatu struktur disebut bibir dorsal dari blastopori. Spemann dan Mangold
menunjukkan bahwa, ketika bibir dorsal dari blastopori ditransplantasikan ke sisi
ventral dari embrio inang pada tahap perkembangan yang sama, embrio sekunder
terbentuk, bergabung dengan yang pertama (gambar 3a). Selain itu, sebagian dari
jaringan dalam sumbu sekunder berasal dari sel inang, tidak graft (mengalami
okulasi). Sel inang yang telah dipersiapkan untuk membentuk jaringan ventral dan
posterior berperan terhadap jaringan dorsal dan anterior, seperti otak, sumsum
tulang belakang, notochord dan somit. Pengamatan ini menunjukkan bahwa bibir
dorsal diinstruksikan atau diinduksi oleh sel inang ventral dalam memberikan
reaksi terhadap fate baru dan akan menggunakan pola baru. Bibir dorsal disebut

organizer (pengatur), atau pengatur utama, dan sekarang disebut sebagai pengatur
Spemann. Pengatur Spemann menjadi pusat sinyal yang menyampaikan dua jenis
sinyal induktif (Gambar 3b). Sinyal dorsal menginduksi mesoderm tetangga
membentuk jaringan aksial dorsal yang terorganisir dengan baik. Sinyal neuro
menginduksi sel ektodermal untuk membentuk saraf dibandingkan jaringan
epidermal. Selain itu, pengaturan ini berperan dalam anteriorisasi dari endoderm.
Pusat penandaan sama dengan pengaturan pada amfibi yang ditemukan pada
vertebrata lainnya, termasuk mouse dan anak ayam, di mana itu terletak di ujung
anterior sederhana dan disebut sebagai node, atau simpul Hensen. Dalam ikan
zebra, struktur analog disebut perisai yang terlokalisir dalam zona marginal
dorsal. Transplantasi node pada embrio mouse atau ayam menginduksi sumbu
sekunder sama dengan aktivitas pengatur Spemann. Konservasi jenis jaringan
induktif melalui ratusan juta tahun evolusi menggarisbawahi pentingnya pengatur
ini dalam perkembangan hewan.
Gambar 3. Pengatur Spemann, (a) Skema diagram percobaan transplantasi
pengatur Spemann dan Mangold. Ketika bibir dorsal (D) blastopori dari embrio
amfibi dicangkokkan ke sisi ventral (V) dari embrio inang, embrio kedua
dibentuk, bergabung ke host (inang), (b) Pengatur Spemann sebagai pusat sinyal.
Pengatur Spemann (biru) telah diusulkan menyediakan setidaknya dua jenis dari
menginduksi sinyal. Sinyal dorsal (panah biru) diberikan berdekatan, mesoderm
lateral pada area ekuator embrio. Sebuah sinyal yang mengidnuksi saraf (panah
merah) bekerja pada ektoderm dalam animal pole (tiang hewan).
Induksi mesoderm
Pentingnya sinyal induktif selama embriogenesis awal juga terlihat dalam
pembentukan lapisan germinal primordial. Hal ini ditunjukkan oleh percobaan

dari Nieuwkoop, juga dengan embrio amfibi. Sebelum gastrulasi, tiga lapisan
germinal ditentukan. Ektoderm, pada akhirnya akan membentuk permukaan
embrio, setelah gastrulasi, muncul dari sel-sel di bagian atas, pembelahan hewan,
sedangkan endoderm, lapisan terdalam setelah gastrulasi, muncul dari pembelahan
vegetal. Mesoderm, yang pada akhirnya terletak antara endoderm dan ektoderm,
terbentuk dari sel-sel dalam ekuator blastula. Oleh karena itu, sel animal pole
(tiang hewan) dihilangkan dari blastula dan kultur dalam isolasi bentuk ektoderm
saja, eksplan kutub vegetal membentuk endoderm dan sel equatorial membentuk
mesoderm. Nieuwkoop menemukan bahwa, ketika hewan dan eksplan kutub
vegetal dilakukan kultur secara bersama-sama, sel animal pole (tiang hewan) baru
berkembang menjadi struktur mesoderm seperti notochord, otot, ginjal dan darah
(Gambar 4). Dengan demikian, sel-sel kutub vegetal (endoderm dugaan)
memberikan sinyal yang menginduksi sel belahan hewan (kalau tidak menjadi
ektoderm) menjadi mesoderm. Proses induktif yang sama bertanggung jawab
terhadap pembentukan dan pola jenis sel tertentu dalam seluruh perkembangan.
Misalnya interaksi mesenchymal-epitel sangat penting untuk induksi dan pola dari
hati, pankreas, usus, sistem pernapasan dan ginjal. Sinyal induktif sekarang
berhubungan dengan faktor-faktor yang disekresikan dari beberapa keluarga gen,
termasuk faktor pertumbuhan perubahan (TGF)- faktor pertumbuhan fibroblast,
Wnts (lihat hal. 367) dan lain-lain, seperti yang dijelaskan pada akhir bagian ini.
Sinyal induktif yang sama bertanggung jawab untuk menentukan lapisan
germinal pada vertebrata lainnya. Ini ditangani secara eksperimental dengan
menggunakan rekombinan jaringan yang sama pada anak ayam, tetapi studi

induksi mesoderm pada tikus dan mamalia lainnya telah dibatasi dengan tidak
dapat diaksesnya embrio pada tahap awal. Tetapi, telah diusulkan bahwa
mesoderm pada mamalia, diinduksi oleh sinyal yang berasal dari jaringan yang
sama (Gambar 5). Dengan demikian, jaringan ekstraembrionik dari embrio tikus
awal dianggap sama dengan jaringan ekstraembrionik embrio burung, yolk mask
dari telur ikan dan endoderm yang diisi dengan yolk dari amfibi; apakah jaringan
ekstra embrio memberikan sinyal induktif atau sinyal yang memiliki pola pada
mamalia, saat ini masih terus diselidiki.
Gambar 4. Rekombinan Nieuwkoop. Penutup hewan (coklat) dari blastula-tahap
embrio amfibi akan membentuk epidermis (tipe sel ektodermal) jika dikultur scara
terpisah. Ketika di kultur pada eksplan kutub vegetal (putih), sel penutup hewan
diinduksi untuk membentuk mesoderm
Gambar 5. Perbandingan peta fate (nasib) Xenopus awal dan embrio mouse. Peta
nasib Xenopus dan embrio tikus sama dalam posisi mesoderm masa depan antara
calon ektoderm dan calon endoderm (Xenopus) atau jaringan ekstraembrionik
(mouse). Jaringan ekstraembrionik embrio tikus akan menghasilkan kantung
kuning telur (yolk), sama dengan kutub vegetal dari embrio Xenopus yang terdiri
dari platelet kuning. Kesamaan dalam posisi calon mesoderm menunjukkan
mekanisme umum untuk induksi mesoderm. Diadaptasi dari referensi 119.
Sebuah hirarki dari penandaan gen dalam menetapkan pola embrio
Banyak dari pemahaman kita tentang kontrol pola embrio dan perkembangan
embrio berasal dari analisis molekuler dan genetik lalat buah Drosophila
melanogaster, terutama dari karya awal Lewis, Wieschaus, Nusslein-Volhard dan
banyak studi yan dilakukan lainnya. Untuk memahami peran mendasar dari
kontrol pola dan perkembangan embrio, ringkasan singkat tentang perkembangan
embrio Drosophila pertama-tama perlu diketahui (Gambar 6).

Dalam embrio Drosophila, pola anterior-posterior dan dorsal-ventral sudah

ditetapkan dalam bentuk dasar pada akhir oogenesis, seperti yang ditunjukkan
oleh bentuk karakteristik telur. Setelah pembuahan, sel telur mengalami
serangkaian pembagian inti tanpa pembelahan sel, untuk menciptakan blastoderm
syncytial. Setelah 13 pembagian inti, membran plasma berkembang ke dalam dari
permukaan telur untuk menyertakan setiap inti, dan blastoderm syncytial menjadi
blastoderm seluler. Gastrulasi dimulai setelah selesainya proses seluler sebagai
invaginasi dari mesoderm ventral; selama gastrulasi, batas segmental menjadi
jelas bersama sumbu anterior-posterior. Segmen anterior menghasilkan struktur
kepala, tiga segmen bagian tengah menghasilkan thorax dan delapan segmen
posterior menghasilkan perut. Embrio menetas menjadi larva, yang tumbuh dan
molt (berganti kulit) sebelum tahap pupasi akhir, di mana metamorfosis larva
menjadi dewasa. Permukaan atau kutikula, larva menunjukkan pola teratur dari
segmen, dengan proyeksi ventral disebut sebagai dentikel, menempati wilayah
anterior setiap segmen. Analisis mutasi yang mengganggu segmentasi atau pola
dalam segmen membentuk salah satu cornerstones (landasarn) genetika
perkembangan modern pada Drosophila.
Gambar 6. Gambarna embriogenesis Drosophila. Telur dibuahi (1) mengalami
serangkaian pembagian inti tanpa pembelahan sel, untuk menciptakan synctial
blastoderm (2). Setelah 13 pembagian inti, membran plasma tumbuh ke dalam
untuk menyertakan setiap inti (tahap blastoderm seluler) (3). Segera setelah
cellularization, gastrulasi (4) dimulai sebagai invaginasi dari mesoderm ventral
Embrio menetas dari kulit telur menjadi larva (5). Di mana segmentasi dari
perkembangan tubuh mudah diamati. Molts (ganti kulit) larva, kemudian

mengalami metamorfosis untuk menghasilkan adult fly (dewasa terbang) (6) A,

anterior; P, posterior; D, dorsal; V, ventral. Diadaptasi dari referensi 5.
Pola embrio Drosophila tergantung pada sistem hirarki dari aktivasi gen, dimulai
dengan isyarat yang disediakan secara maternal, dan dilanjutkan dengan gen yan
ditandai secara zygot (Gambar 7). Gen ibu bertanggung jawab untuk rencana
dasar tubuh dapat dibagi menjadi empat kelompok: kelompok anterior, posterior,
dorsal dan terminal. Kami fokus pada jalur yang digunakan untuk pola anterior
sebagai contoh studi dari hirarki tentang regulasi gen.
Analisis mutan ibu mengungkapkan bahwa bicoid gen sangat penting untuk
perkembangan anterior. Mutan yang mengalami kekurangan bicoid menghasilkan
embrio dengan kekurangan kepala dan struktur toraks. Embrio tersebut dapat
diselamatkan dengan transplantasi sitoplasma dari tipe liar embrio, tetapi hanya
jika itu diambil dari wilayah paling anterior, menunjukkan bahwa informasi yang
terlokalisir pada daerah ini berada dalam tipe liar embrio. Injeksi mRNA bicoid
juga dapat menyelamatkan mutan bicoid, tapi embrio normal terbentuk hanya jika
RNA disuntikkan pada daerah anterior. Injeksi mRNA bicoid pada area lain dari
embrio menyebabkan pembentukan kepala dan dada ektopik. Pengamatan ini
menunjukkan bahwa aktivitas bicoid harus diterjemahkan ke anterior embrio. Hal
ini dikonfirmasi oleh hibridisasi in situ, yang menunjukkan bahwa mRNA bicoid
sangat terlokalisasi di ujung anterior embrio awal (Gambar 8). Protein Bicoid
diterjemahkan dari difusi mRNA lokal dari anterior menuju wilayah posterior dari
telur untuk membentuk gradien konsentrasi anterior-posterior.

Jalur sinyal wnt awalnya dijelaskan oleh percobaan epistasis genetik pada
Drosophila, dan kemudian disempurnakan dengan analisis biokimia. The wnt
kanonik sinyal jalur ditunjukkan pada Gambar 11. Wnts dianggap mengikat kelas
reseptor, Frizzleds, dinamai gen polaritas jaringan frizzled. Dari Drosophila.
Protein Frizzled memiliki domain ekstraseluler kaya sistein, yang diduga
mengikat Wnts, tujuh domain transmemhrane, dan terminal karboksi sitoplasma.
Topologi

ini

mengingatkan

protein-coupled

receptors,

meningkatkan

kemungkinan bahwa Wnts sinyal melalui protein G.

Gambar 7. Sistem hirarkis dari aktivasi gen pada Drosophila. Pola embrio
Drosophila tergantung pada sistem penandaan gen secara berurutan. Pola yang
mewakili mRNA ditampilkan. Gen ibu, seperti bicoid (biru, atas), mengaktifkan
gen nap yang memiliki domain ekspresi yang luas. Gen gap, pada gilirannya,
mengaktifkan gen pair-rule utama, dinyatakan dengan tujuh garis merata. Gen
pair-rule

utama

mengaktifkan

gen

pair-rule

sekunder,

yang

akhirnya

menghidupkan kutub segmen, ekspresi gen t. Koordinasi tepat dari kelas-kelas ini
menghasilkan gen dalam penandaan yang benar dari gen pemilih homeotik dalam
segmen tubuh yang tepat, akhirnya menghasilkan lalat buah dewasa. Diadaptasi
dari referensi 2 dan 5.
Dishevelled ditempatkan pada bagian hilir bersayap dengan percobaan epistasis
genetik. Anggota keluarga dishevelled, dimana ada tiga anggota vertebrata, adalah
protein sitoplasma yang berfungsi sebagai adapter molekul, karena mengandung
protein dugaan area interaksi protein, tetapi tidak ada aktivitas enzimatik
dikenal. Wnts dapat menyebabkan dishevelled mentranslokasi ke membran sel,
tetapi mekanisme sinyal tersebut dikirimkan dari wnt, melalui frizzled, untuk
dishevelled. Dishevelled pada gilirannya, diyakini menghambat glikogen sintase

kinase-3 (GSK-3 sebuah kinase serin/treonin sitoplasma yang secara

fungsional homolog dengan produk gen zeste-white dari drosophila. GSK-3
adalah regulator negatif dari jalur wnt. Tipe liar GSK-3 dapat menghambat
sinyal wnt sementara GSK-30 dominan-negatif dapat meniru aktivitas Wnts dalam
Xenopus dan organisme lain.
Sinyal Wnt dalam beberapa organisme menyebabkan stabilisasi sitoplasma
(protein catenin- dari gen yang dikenal sebagai armadillo dalam Drosophila).
Catenin terkenal karena perannya dalam adhesi sel, tetapi fungsinya dalam jalur
wnt berbeda. Sitoplasma catenin biasanya terdegradasi dengan cepat dalam cara
yang tergantung pada GSK-. Penghambatan Wnt dari aktivitas GSK- mencegah
omset catenin , mengarah pada akumulasi. Catenin stabil selanjutnya
kemudian dapat ditemukan dalam inti pengikatan faktor yang mengikat DNA,
seperti faktor yang mengikat penambah limfosit -1 (LEF-1), untuk mengaktifkan
transkripsi langsung. Peraturan ini dapat terjadi melalui aktivasi domain
transkripsi yang ada pada catenin-. Komponen jalur yang dipertahankan ini telah
didefinisikan secara genetik. Tetapi interaksi langsung belum menunjukkan
sebagian besar komponen yang diidentifikasi, meninggalkan kemungkinan bagi
intermediet tambahan yang dapat ditemukan.
Banyak Wnts diketahui telah terganggu dalam mouse, menghasilkan fenotip
yang luar biasa. Tikus homozigot untuk alel nol wnt-1 gagal mengembangkan
struktur otak tengah dan serebelum, sedangkan tikus yang bukan wnt-3a
menunjukkan cacat pada gastrulasi yang mengarah pada pemotongan aksial dan

hilangnya somit ekor. Gangguan hasil wnt-7a pada tungkai ventral. Fenotipe ini
konsisten dengan pola penandaan dorsal wnt-7A, dan dengan studi pada limb buds
ayam dimana penandaan ektopik dari wnt-7 A mengarah ke dorsal. Mutasi Wnt-4
mengakibatkan tidak adanya ginjal. Studi ektopik dengan wnt-4 sebelumnya
menunjukkan bahwa gen ini dapat berfungsi dalam transisi mesenchymal-epitel
yang terjadi selama pembentukan ginjal. Tabel 1 merangkum wnt yang kehilangan
fungsi fenotipe pada tikus. Fenotipe ini menggarisbawahi peran penting wnts
dalam pembentukan dan organogenesis pola awal.
Jalur Hedgehog
Hedgehog (hh) pertama kali diidentifikasi sebagai gen segmen polaritas pada
Drosophila, di mana ini memerlukan pemeliharaan penandaan bersayap dan pola
yang tepat dari segmen embrio. Baru-baru ini, gen hedhegog vertebrata telah
diidentifikasi dan terbukti berperan penting dalam induksi saraf dan somite dan
pola anggota tubuh.
Protein hedhegog adalah protein yang disekresikan dalam bentuk biologis aktif
dan diproses dari protein prekursor yang lebih besar. Menariknya, protein
prekursor

hedhegog

menjalani

pembelahan

autoproteolytic

intern

yang

menghasilkan 19-kDa N, peptida terminal, dengan kolesterol ester C-terminal

terbaru, dan peptida 26-28-kDa C-terminal. Peptida N-terminal tetap berhubungan
dengan membran sel, sedangkan peptida C-terminal secara bebas dapat berdifusi.
Jalur sinyal hedhegog juga telah dijelaskan secara genetik pada Drosophila.
Dalam sel target, sinyal hedhegog dimediasi oleh dua protein transmembran,
patched (ditambal), dimana terdapat kesamaan struktural untuk saluran ion dan

transporter protein, dan dihaluskan, protein dengan domain tujuh transmembran

sama dengan protein frizzled. Patched adalah regulator negatif dan regulator
positif dihaluskan dari jalur hedhegog. Hedgehog diyakini mengikat patched dan
menekan aktivitas penghambatan. Patched diyakini menghambat penghalusan,
hedhegog dengan pengikatan tidak langsung akan mengaktifkan penghalusan
dengan menghilangkan inhibitor. Model ini didukung oleh data genetik.
Kekurangan mutan ganda dari hedhegog dan patched mengembalikan penandaan
gen yang diatur dari hedge-hog, karena patched tidak ada, hedgehog tidak lagi
diperlukan untuk melakukan hambatan. Sebaliknya, kekurangan mutan ganda
dihaluskan dan patched tidak mengungkapkan gen target hedhegog. Lima
komponen sitoplasma dugaan dari mesin transduksi sinyal telah diidentifikasi. Ini
termasuk Fused kinase serin/treonin, penekan dari Fused, Costal 2 yang sifatnya
molekul tidak diketahui, protein kinase A bergantung pada cAMP (PKA), dan
Cubitus interruptus, faktor transkripsi potensial yang berisi beberapa situs
fosforilasi yang ditetapkan dalam PKA. Sedikit yang diketahui tentang
mekanisme biokimia dari jalur ini.
Hedgehog adalah sinyal yang menginduksi pada vertebrata. Dalam tunas
anggota

tubuh

vertebrata,

zona

polarisasi

(ZPA)

merupakan

pusat

pengorganisasian dengan pola posterior. Transplantasi wilayah ini anggota tubuh

anterior menginduksi posterior digit secara ektopik. ZPA mengungkapkan salah
satu dari tiga homolog vertebrata dari hedhegog, sonic hedhegog, sonic hedhegog
(sst), shh muncul untuk menjelaskan aktivitas ZPA, karena penandaan anterior

Shh menginduksi duplikasi dari digit posterior sama dengan transplantasi dari
ZAP.
Penandaan sonic hedgehog dimulai tak lama setelah awal gastrulasi dalam
node. Pada anak ayam, penandaan Shh menjadi asimetris yang diekspresikan pada
sisi kiri simpul Hensen ini, dan berhubungan dengan perulangan yang tepat dari
hati. Dalam sistem saraf pusat (SSP), Shh dari notochord dan floor-plate terlibat
dalam induksi nasib CNS ventral termasuk diferensiasi neuron motorik. Ketika
Shh diungkapkan secara ektopik, otak tengah dan otak belakang dari tikus dan
ikan zebra menjadi ventral. Selanjutnya, somit, terdiri sclerotome dan
dermamyotome, juga memiliki pola Shh dari garis tengah. Sclerotome adalah
bagian dari somite yang menghasilkan tulang rawan, dan bagian dermamyotome
menghasilkan otot rangka dan dermis. Sst dapat menginduksi penandaan
sclerotomal

seperti

Paxl

dan

Twist,

dengan

mengorbankan

penanda

dermamyotomal, Pax3.
Penelitian loss-of-function (kekurangan fungsi) dengan sonic hedgehog pada
tikus mendukung data dari organisme lain. Tikus dengan mutasi yang ditargetkan
dalam Shh menunjukkan bahwa gen ini diperlukan untuk pola dan motor neuron
dan diferensiasi floorplate. Tikus ini memiliki cyclopia parah dan kekurangan
struktur garis tengah ventral dan neuron motorik. Fenotipe ini sangat mirip dengan
yang dihasilkan oleh jervine teratogen, ditemukan dalam skunk cabbage (kubis
sigung), yang menyebabkan cyclopia pada domba. Hal ini juga sama dengan
holoprosencephaly pada manusia, dan mutasi bertanggung jawab untuk peta
holoprosencephaly terhadap gen sonic hedhegog pada manusia (lihat di bawah).

Gen

Fenotip

Wnt-1

Kehilangan otak tengah dan

cerebrellum

Wnt-2

Cacat plasenta

Wnt -3A

Cacat somite dan tailbud

Wnt-4
WM-7A

Cacat ginjal
Cacat polaritas ekstremitas

Referensi
McMahon 1990
Thomas 1990
Thomas 1991
Mastick 1996
Monkley 1996
Takada 1994
Greco 1996
Yoshikawa 1997
Stark 1994
Parr 1995

Jalur faktor pertumbuhan fibroblast

Anggota keluarga faktor pertumbuhan fibroblast (FGF) dari molekul terbukti
berperan penting dalam perkembangan berbagai organisme. Meskipun ini awalnya
diidentifikasi berdasarkan kemampuan mereka untuk merangsang proliferasi
fibroblast dalam kultur. FGF, FGF dan reseptornya (FGFR) memiliki banyak
aktivitas biologis penting. Keluarga FGF terdiri dari setidaknya sembilan anggota
pada mamalia. FGF mengikat reseptor milik keluarga kinase tirosin reseptor, yang
mengarah pada autofosforilasi reseptor dan perekrutan intraseluler sinyal protein.
Aktivasi kinase tirosin FGFR menyebabkan peningkatan dalam fosforilasi tirosin
dari sejumlah protein intraseluler seperti fosfolipase C (PLC- SHC, fosfatidil
inositol- kinase (kinase PI-), kinase Raf-1, kinase protein diaktifkan mitogen
(kinase MAP) dan p90rsk.
FGF secara luas ditandai selama perkembangan. FGF berperan penting dalam
induksi mesoderm dan dalam pembentukan pola embrio awal maupun pada tahap
akhir embriogenesis. Studi pada Xenopus menunjukkan bahwa FGF yang

diungkapkan diawal dan dapat menginduksi bagian dari jenis sel mesodermal
termasuk mesothelium-mesenkim dan otot.
Bukti lebih lanjut pentingnya sinyal FGF dalam embriogenesis awal juga
berasal dari studi pada Xenopus. Transduksi sinyal FGF dapat dihalangi dengan
mutan dominan-negatif dari reseptor FGF yang tidak memiliki domain kinase
tyrosine sitoplasma. Penandaan reseptor FGF terpotong ini menyebabkan
gangguan batang dan posterior struktur pada seluruh embrio. Selanjutnya,
penghambatan ras dan raf-1 juga menyebabkan fenotip yang sama dengan yang
dihasilkan oleh reseptor FGF yang dipotong dalam Xenopus. Selain itu, Raf-1 yan
diaktifkan, seperti FGF, dapat menginduksi MyoD, gen penentuan otot awal, dan
otot yang bekerja dengan induksi mesoderm oleh FGF terjadi melalui aktivasi
kinase Ras-Raf-MAP kinase.
Adanya berbagai FGF dan FGFR dalam perkembangan mamalia telah
menghambat identifikasi peran anggota FGF tertentu dalam pengembangan awal,
karena memiliki efek berlebihan. Tetapi mutasi yang ditargetkan dalam beberapa
ligan FGF dan reseptor telah mengungkapkan peran penting bagi ligan. FGFR-1
diekspresikan dalam lapisan sederhana dan dalam ektoderm dan mesoderm dari
bagian anterior-distal dari embrio lapisan sederhana akhir. Tikus dengan gangguan
dalam kegagalan FGFR membentuk mesoderm paraksial, melainkan memiliki
perluasan pola mesoderm aksial. Gangguan FGF-4, dinyatakan dalam wilayah
distal lapisan sederhana, hasil dalam embrio tikus yang ditanam dalam rahim
tetapi tidak berkembang lebih lanjut. Embrio nol FGFA dikultur secara in vitro,
menampilkan cacat dalam pertumbuhan dan diferensiasi dari inner cell mass.

Mutasi yang ditargetkan dalam FGFR-3, menunjukkan peran reseptor dalam

tulang dan pembentukan anggota tubuh, menghasilkan fenotipe yang menyerupai
achondroplasia (lihat di bawah). Dua dan tiga tikus knock-out melibatkan
beberapa ligan dan reseptor berguna dalam menentukan komponen sinyal FGF
yang berperan dalam pengembangan dan pola pada mamalia.
Superfamily faktor pertumbuhan transformasi-
Superfamili

TGF- terdiri dari keluarga dari faktor pertumbuhan peptida,

meliputi TGF-, protein morphogenetic tulang (BMP), activins, inhibins, faktor

diferensiasi dan pertumbuhan (GDFS) dan zat yang menghambat Mullerian
(MIS). Anggota superfamili TGF- disajikan pada seluruh embriogenesis dan
telah terbukti berperan dalam proliferasi sel, diferensiasi sel, produksi matriks
ekstraseluler dan apoptosis dalam berbagai pengaturan. Ini terdiri dari polipeptida
homo-atau heterodimeric sekitar 30 kDa yang diproses dari prekursor yang lebih
besar.
Anggota superfamili TGF- mengikat beberapa protein permukaan sel, tapi
dua reseptor transmembran utama (reseptor tipe I dan tipe II) penting untuk
transduksi sinyal TGF-. Ligan TGF- diakui terutama oleh reseptor tipe II,
yang berisi domain kinase serin/treonin aktif. Pengikatan ligan memperkenalkan
pembentukan kompleks heteromerik dengan reseptor tipe I. Reseptor tipe II
kemudian phosphotylates reseptor tipe I. Reaksi transfosforilasi ini menyebabkan
aktivasi domain kinase serin/treonin reseptor tipe I, yang pada gilirannya,
phosphorylates protein sitoplasma Smad. Protein Smad adalah anggota keluarga
molekul TGF- pertama kali diidentifikasi pada Drosophila dan C. elegans.

Setelah terfosforilasi oleh reseptor tipe I, ini ditranslokasi ke inti dan muncul
untuk mengaktifkan transkripsi secara langsung melalui interaksi dengan protein
pengikat DNA (Gambar 12).
BMP pertama kali diidentifikasi berdasarkan kemampuan untuk menginduksi
pembentukan tulang ektopik ketika ditanamkan ke dalam jaringan lunak dari
tikus. BMP juga berfungsi dalam banyak proses perkembangan pada invertebrata
dan vertebrata. BMP-2 dan BMP-4 homolog pada Drosophila, decapaitaplegic
(dpp), diperlukan pada pola dorsal-ventral dalam embrvogenesis awal. Di
samping pola sayap dan kaki primordial, juga usus.
Dalam Xenopus, peran BMP dalam dua proses terpisah telah dijelaskan.
Penambahan BMP-2 atau BMP-4 untuk eksplan tiang hewan dalam kultur
menyebabkan induksi mesoderm ventral, termasuk darah. Dorsal mesoderm,
termasuk aktin dan notochord otot, tidak disebabkan oleh BMP-4. Sebaliknya,
ektopik BMP-4 mengurangi struktur dorsal dan anterior, yang mendukung peran
BMP-4 dalam pola ventral. Proses di mana BMP terlibat dalam keputusan fate
(nasib) saraf/epidermal. Dalam Xenopus, jaringan ektodermal ketika eksplan
dalam kultur akan berdiferensiasi menjadi epidermis. Ketika sinyal BMP
dihambat, rute eksplan ectodermal berdiferensiasi menjadi jaringan saraf.
Ektoderm biasanya ditetapkan menjadi epidermis dan jaringan saraf, ini
menunjukkan bahwa regulasi sinyal BMP dalam ektoderm penting untuk
keputusan fate ini. Untuk mendukung hipotesis ini, pengaturan Spemann
mengungkapkan antagonis ekstraseluler dari BMP-4, seperti chordin, noggin dan
follistatin, yang mengikat protein BMP dan mencegah dari pengikatan reseptor.
Molekul homolog telah ditemukan dalam organisme lain.

Gambar 12. Jalur penandaan TGF-. Sinyal TGF-dimulai dengan pengikatan

dari ligan untuk reseptor tipe II. Reseptor Tipe I direkrut dan kemudian
difosforilasi oleh reseptor tipe II. Reseptor Tipe I selanjutnya

relay

(menyampaikan) sinyal oleh fosforilasi protein sitoplasma Smad, sehingga

dimerisasi dengan SMAD4 (DPC4). Kompleks Smad dimer kemudian di
translokasi ke inti, di mana diyakini menyebabkan aktivasi gen tergantung TGF-.
GDFS adalah subfamili TGF- yang paling erat berhubungan dengan BMP.
Mutasi pada beberapa GDFS telah dihasilkan pada mice. GDF-8 dinyatakan
dalam perkembangan dan otot rangka dewasa. Gangguan hasil gen GDFS pada
tikus secara signifikan lebih besar, dengan peningkatan massa otot rangka karena
miosit hiperplasia dan hipertrofi. Homolog manusia dari GDF-5, tulang rawan
berasal

protein-1

morphogenetic,

baru-baru

ini

berhubungan

dengan

chondrodysplasia resesif, yang ditandai dengan kelainan tulang pada tungkai.

Demikian pula, perubahan tulang yang ditemukan pada mouse brachypodism (bp)
terbukti menjadi hasil dari mutasi pada gen GDF-5. anggota keluarga lain, GDF9, dinyatakan hanya dalam oosit, dan gangguan dari gen GDFS pada mice
menyebabkan hambatan dalam perkembangan folikel, mengakibatkan infertilitas
lengkap .
Aktivin pertama kali diidentifikasi sebagai kegiatan dari cairan folikel porcine
antagonis dari aktivitas inhibin dalam uji pembebasan follicle stimulating
hormone (FSH) dari sel hipofisis. Pada vertebrata, aktivin terlibat dalam induksi
mesoderm dan pola kiri-kanan. Dalam Xenopus, penambahan protein aktivin
dimurnikan untuk hewan eksplan tiang mengarah ke induksi mesoderm dengan
cara yang tergantung dosis. Pada konsentrasi tinggi aktivin, dorsal mesoderm

seperti notochord dan otot aktin diinduksi, dan pada konsentrasi yang lebih rendah
dari aktivin, mesoderm ventrolateral seperti mesothelium dan mesenkim
diinduksi. Demikian pula, Smad2, diyakini sebagai molekul sinyal jenis aktivin
hilir reseptor intraseluler, juga dapat menginduksi jaringan mesodermal dalam
eksplan tiang hewan.
Pada mouse, gen menargetkan komponen dari jalur sinyal aktivin telah
dilakukan. Gangguan jenis aktivin reseptor I, ActRIB, menghasilkan embrio yang
gagal untuk gastrulate dan berhenti tumbuh pada tahap silinder telur. Analisis
chimeric dari sel mutan ES ini menunjukkan bahwa ActRIB diperlukan untuk
mediasi sinyal baik sel epiblast dan sel ekstraembrionik. Ketika tipe liar sel ES
disuntikkan ke blastokista null ActRIB, jaringan ekstraembrionik normal tetapi
sel-sel ES tipe liar tidak bisa menyelamatkan cacat gastrulasi pada embrio yang
tepat. Percobaan chimera, di mana sel ES nol ActRIB disuntikkan ke sel ES tipe
liar, hasil kegagalan rantai sederhana terbentuk ketika sel-sel disuntikkan berperan
untuk epiblast tersebut. Embrio dengan kekurangan Smod2 menampilkan fenotipe
embrio awal yang sama. Embrio kekurangan Smad2 gagal untuk membatasi situs
pembentukan rantai sederhana, sehingga cacat dalam pola anterior-posterior
dalam epiblast tersebut. Analisis chimeric, di mana sel ES tipe liar disuntikkan ke
blastokista

dengan

kekurangan

Smad2,

tidak

menyelamatkan

fenotip,

menunjukkan bahwa sinyal tergantung Smad2 dari jaringan ekstraembrionik

diperlukan untuk pola anterior-posterior yang tepat dari embrio.
Anggota keluarga yang berhubungan dengan TGF-, nodal, juga berperan
penting dalam pola aksial dalam mouse. Nodal biasanya dinyatakan dalam node

dari embrio tikus. Ketika nodal terganggu oleh mutagenesis insersional, lapisan
sederhana gagal untuk terbentuk dan terdapat penadaan abnormal gen-mesoderm
tertentu dalam epiblast tersebut.
Zat yang menghambat Mullerian (MIS) adalah anggota keluarga TGF- yang
penting dinyatakan dalam sel mesenchymal berdekatan dengan saluran Mullerian
epitel yang menyebabkan regresi dari saluran Mullerian pada laki-laki, proses
penting untuk diferensiasi seksual laki-laki.
RELEVANSI RELEVANSI KLINIS
Penerapan biologi molekuler, genetika dan biokimia untuk mempelajari
embriogenesis awal menghasilkan wawasan baru ke dalam pengatur gen dan jalur
sinyal yang akan memiliki implikasi mendalam terhadap kedokteran klinis di
masa depan. Tetapi, dampak terbesar adalah dalam bidang neoplasia pada jaringan
dewasa, dan relevansi dengan penyakit klinis penting dalam pengembangan awal
sejauh ini terbatas (Tabel 2). Pada bagian ini, mencerminkan peran penting dari
molekul-molekul pada langkah awal embriogenesis. sehingga mutasi gen ini pada
manusia akan menghasilkan janin non-layak jarang terdeteksi.
Gen
HoxA13
HoxD13
Pax3
HoxA9
Hoxlf
Sonic hedgehog
Ditambal
Dihaluskan
GU3
GU3
Wnt-1

Fenotipe
sindrom tangan-kaki-genital
synpolydactyly
Sindrom Waardenburg
Leukemia akut myelogenous dengan f (7; 11) (p15; p15)
Sel-T leukemia limfositik akut dengan t (10; 14) (Q24; Q11)
Holoprosencephaly
Sindrom nevus sel basal
Sindrom nevus sel basal
Greig cephalopolysyndactyly
Glioblastoma
Adenokarsinoma mammae

catenin
APC
APC
FGFR-3
DPC-4
G DF-5 (CDMP-1)

Karsinoma kolon, melanoma

Karsinoma kolon
Hipertrofi bawaan dari epitel pigmen retina (CHRPE)
Achondroplasia, displasia tulang
Pankreas dan usus besar karsinoma
Chondrodysplasia

Faktor pertumbuhan fibroblast, jalur terlibat dalam kelainan perkembangan.

Secara khusus, mutasi pada urutan pengkodean dari gen FGFR-3 penyebab
achondroplasia,

bentuk

paling

umum

dari

dwarfisme

manusia.

Pasien

achondroplastic khusus menunjukkan lordosis lumbal, macrocephalv dan

proliferasi minimal tulang rawan dari pertumbuhan tulang panjang. Mutasi
lainnya pada gen FGFR-3 menyebabkan cacat tulang berbeda, termasuk displasia
skeletal neonatal (displasia thanatophoric) dan chondroplasia hipo. Semua mutasi
missens dominan mengakibatkan displasia tulang.
Anomali perkembangan yang diwariskan lainnya berhubungan dengan gen
yang diketahui termasuk synpolydactvly. yang telah dipetakan ke HoxD13.
sindrom tangan-kaki-genital, kondisi dominan autosomal yang mempengaruhi
tulang tangan dan kaki dan juga berhubungan dengan malformasi genitourinarius,
termasuk bikornu rahim, malposisi dari lubang ureter dan hipo-spadias, telah
berhubungan dengan mutasi dalam HoxA13.
Peran dari banyak molekul yang dibahas di atas diselidiki dalam studi
neoplasia. Anggota keluarga Wnt, Hh dan FGF telah ditunjukkan untuk
merangsang proliferasi sel dan menginduksi transformasi, setidaknya dalam kultur
sel. Sebaliknya, anggota keluarga TGF- sangat terlibat sebagai regulator negatif
dari pertumbuhan sel, selain efek yang lebih variabel pada sel-sel dalam kultur.

Jalur hedhegog berperan dalam mengendalikan proliferasi sel pada sel dewasa.
Sindrom nevus sel basal, penyakit dominan autosomal pada manusia ditandai oleh
cacat perkembangan dan kecenderungan untuk karsinoma sel basal, telah
berhubungan dengan hilangnya mutasi fungsi dalam patched, reseptor diusulkan
untuk Shh, serta mengaktifkan mutasi pada smotheneed (lihat Gambar 12). Selain
itu, tikus percobaan mengekspresikan Shh telah meningkat dalam karsinoma sel
basal. Selanjutnya, molekul sinyal Shh hilir GLI3, homolog mamalia dari Cubitus
interruptus berhubungan dengan glioblastomas dan dengan sindrom Greig,
gangguan yang mempengaruhi tungkai dan pengembangan kraniofasial.
Gen Wnt pertama kali ditemukan sebagai protooncogenes, karena aktivasi
mouse gen tvnt-1 menyebabkan transformasi sel epitel susu. Demikian pula, tikus
percobaan yang mengekspresikan Wnts memiliki peningkatan frekuensi tumor
mammae. Selain itu, sindrom familial adenomatosa poliposis disebabkan terutama
oleh mutasi pada gen supresor tumor adenomatous polyposis coli (APC). APC
telah ditunjukkan untuk menghambat catenin-tergantung transkripsi, target
sinyal wnt, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 11. Diusulkan bahwa hilangnya
APC menyebabkan peningkatan tingkat protein catenin-, peningkatan transkripsi
gen target catenin-/LEF-1, dan proliferasi sel meningkat. Hipotesis ini sangat
didukung oleh identifikasi mutasi pada catenin- yang mencegah degradasi
bergantung APC dari catenin-. Mutasi ini telah diidentifikasi dalam karsinoma
kolorektal serta melanoma spontan.
TGF- berdasarkan kemampuan pertumbuhan dalam tahap G 1 dari siklus sel,
terlibat sebagai penekan tumor. Gen SMAD4, awalnya diidentifikasi sebagai

Deleted in Pancriatic Carcinoma, atau DPC4, telah terlibat dalam kanker usus
besar dan karsinoma pankreas. Ligan TGF- berhubungan dengan aktivin mampu
mengurangi proliferasi dan meningkatkan diferensiasi erythrocytic dalam sel
erythroleukemia mouse, selain peran yang mungkin dalam induksi mesoderm dan
dalam regulasi pembebasan FSH dari pituarity anterior.
RINGKASAN DAN PERSPEKTIF MASA DEPAN
Aplikasi praktis dari pemahaman dasar molekul dari perkembangan berada dalam
bidang teknik jaringan. Selama embriogenesis, jenis sel seperti neuron dan miosit
jantung yang mengalami proliferasi aktif setelah keluar dari diferensiasi siklus sel.
Bagaimana jenis sel membelah sebelum siklus sel belum dipahami, tetapi jika ini
bisa diatur, dapat memiliki implikasi yang sangat penting terhadap pengobatan
penyakit iskemik dan degeneratif, seperti jantung iskemik dan penyakit
serebrovaskular, serta penyakit neurodegenerative seperti penyakit Alzheimer dan
penyakit Parkinson. Memahami mekanisme sel yang keluar dari siklus sel
menghasilkan kemampuan untuk tumbuh atau regenerasi sel pasca-mitosis secara
selektif.
Manfaat praktis lainnya dari bidang embriologi molekul akan menjadi
identifikasi gen yang bermutasi pada gangguan perkembangan yang diwariskan.
Selain memajukan pemahaman dasar kita tentang perkembangan manusia, ini juga
dapat menawarkan identifikasi prenatal dari anomali perkembangan, seperti
holoprosencephaly, yang terjadi pada 1 dari 16.000 kelahiran hidup dan
ditemukan pada 1 dari 250 janin yang digugurkan.
Bidang ini juga telah membentuk paradigma mendasar, terutama dari kerja
Drosophila, yang dapat diterapkan pada analisis perkembangan awal dalam

organisme lain. Tetapi pertanyaan yang belum terselesaikan tetap. Sedikit yang
diketahui tentang bagaimana jalur sinyal banyak dan beragam aktif dalam jaringan
yang sama, berinteraksi satu sama lain. Selain itu, beberapa embriolog mulai
menjawab pertanyaan-pertanyaan yang lebih rumit tentang morfogenesis, apa
yang mengarahkan seluruh jaringan yang bergerak dan berubah bentuk selama
perkembangan, seperti yang terlihat selama gastrulasi dan neurulasi.
Ini masih harus dilihat seberapa mirip dengan perkembangan mamalia, yaitu
vertebrata dan invertebrata yang lebih rendah. Ini adalah beberapa pertanyaan
yang menjanjikan untuk memberikan kerja pada embriolog mamalia selama
beberapa tahun ke depan.