AKE

XII IPA I

BIOSURFAKTAN/BIOSURFACTANT
Biosurfaktan adalah zat permukaan aktif yang disintesis oleh sel hidup dan memiliki sifat-
sifat mengurangi tegangan permukaan, menstabilkan emulsi, pembentukan busa, pada
umumnya tidak beracun, dan biodegradable. ( Banat et al, 2000). Merupakan molekul
ampipilik dengan dua daerah hidrofilik dan hidrofobik menyebabkan pembentukan agregat
pada permukaan antara cairan dengan berbagai polaritas seperti air dan hidrokarbon
(Banat, 1995a; Fiechter, 1992; Georgiou, 1992; Kosaric, 1993; Karanth et al, 1999).
Menurut Sen (2010) biosurfaktan adalah molekul amphiphilic permukaan aktif diperoleh
baik melalui rute fermentasi mikroba atau melalui reaksi katalis enzim in-vitro.

Penelitian ini biasanya melibatkan mikroba tunggal atau kelompok mikroba yang diisolasi
dan diidentifikasi di laboratorium dan kemudian diterapkan baik pada percobaan di tanah
in-situ atau ex situ atau disuntikkan ke dalam reservoir minyak yang sudah ada untuk
observasi. Selain itu, mayoritas studi pengujian ini untuk meningkatkan produksi
biosurfaktan atau pemulihan hidrokarbon dilakukan dengan hanya beberapa spesies seperti
Bacillus strain licheniformis JF-2, Bacillus subtilis, atau Pseudomonas fluorescens (Adkins
et al., 1992; Banat, 1995a; Banat, 1995b; Lin, 1998, McInerney et al., Proceedings of the
2000 Conference on Hazardous Waste Research).

Saat ini hanya tersedia sangat terbatas biosurfaktan komersial, misalnya surfactin,
sophorolipid dan rhamnolipid

Strategi skrining yang efisien adalah kunci sukses dalam mengisolasi mikroba baru dan
menarik atau varian mereka, karena sejumlah besar strain perlu ditandai.Sebuah strategi
lengkap untuk pemutaran biosurfactants baru atau strain produksi terdiri dari tiga langkah:
sampling, isolasi strain dan penyelidikan strain ( Walter et al, 2010 ).

Menurut peran fisiologis, mikroba pemproduksi biosurfaktan dapat ditemukan pada

lingkungan yang berbeda. Banyak mikroba pemproduksi biosurfaktan diisolasi dari sampel
tanah atau air yang terkontaminasi dengan senyawa organik hidrofobik seperti misalnya,
mikroba limbah kilang minyak ( Batista et al, 2006 ).Salah satu mikikroba pemproduksi
biosurfaktan, Cladosporium resinae,disebut jamur minyak tanah yang terisolasi dari tanki
bahan bakar pesawat (Muriel et al, 1996). Sebaliknya, pada lingkungan tidak terganggu
telah menghasilkan beberapa isolat yang menarik, misalnya pada tanah alami (Bodour et
al, 2003). Laut juga juga telah dilaporkan sebagai tempat sampling yang berhasil (Schulz
et al, 1991). Namun, Bodour dan Miller-Maier (1998) menunjukkan bahwa tanah
terkontaminasi lebih menghasilkan daripada tanah tidak terkontaminasi. Salah satu contoh
yang luar biasa adalah penemuan strain pemproduksi biosurfaktan yang awalnya terisolasi
ketika menyelidiki kebersihan makanan (Persson et al, 1987).

ISOLASI

Dalam lingkungan alamiah, mikroba hampir selalu terjadi pada populasi campuran terdiri
dari banyak strain dan spesies yang berbeda. Untuk menganalisis sifat organisme dari
suatu campuran populasi diperlukan kultur murni. Selain isolasi strain langsung dengan
cara pengenceran dan pelapisan, kultur pengayaan dengan substrat hidrofob sangat

1
 AKE
XII IPA I

menjanjikan untuk isolasi mikroba pemproduksi biosurfaktan. Selain itu, kromatografi

interaksi hidrofobik dan teknik plat replika juga metode yang bagus ( Walter et al, 2010 ).

Prinsip kultur pengayaan adalah untuk menyediakan kondisi pertumbuhan yang sangat
menguntungkan bagi organisme yang penting dan mungkin tidak menguntungkan bagi
organisme yang bersaing. Oleh karena itu, mikroba penting terseleksi dan diperkaya.
Untuk screening mikroba penghasil biosurfaktan, kultur memanfaatkan senyawa
hidrofobik sebagai sumber karbon satu-satunya (Willumsen et al, 1997).

Willumsen dan Karlson (1997) mengisolsasi bakteri pemproduksi biosurfaktan dari tanah
yang terkontaminasi dengan poliaromatik hidrokarbon (PAH). Mereka menggunakan PAH
yang diubah menjadi medium cair minimal untuk kultur pengayaan. Lebih jauh lagi,
mereka menggunakan piring-agar dilapisi dengan PAH-agar berbeda dan piring-agar
dengan filter PAH yang direndam dalam tutup cawan petri untuk pemilihan. Degradasi
PAH agra oleh mikroorganisme lalu mengarah ke agar pada zona bersih di sekitar koloni
pada PAH yang dilapisi agar. Akibatnya, mereka dapat mengisolasi 57 strain dan hanya 4
strain yang menunjukkan aktivitas permukaan.

Mercadé et al (1996) mengisolasi strain pemproduksi biosurfaktan dari sampel yang

terkontaminasi minyak tanah dengan menggunakan limbah minyak pelumas sebagai
sumber karbon tunggal. Mereka mengisolasi 44 strain yang mampu tumbuh di hidrokarbon
dan lima isolate diantaranya yang dapat menghasilkan biosurfaktan.

Schulz et al, (1991) mengisolasi tiga jenis bakteri yang berasal dari laut selama screening
untuk biosurfaktan antara mikroorganisme pengurai n-alkana. Sebagai media pengayaan,
mereka menggunakan media mineral dengan C14- dan C15-n-alkana dan juga piring agar
dengan penyaring alkana yang direndam. Yakimov et al, (1998) mengisolasi bakteri
penghasil biosurfaktan dari suatu genus baru dengan menggunakan teknik pengayaan yang
sama.

Rahman et al (2002) mengisolasi 130 isolat pendegradasi minyak dari lingkungan tercemar
hidrokarbon dengan teknik pengayaan. Medium garam mineral yang mengandung minyak
mentah sebagai sumber karbon tunggal yang diterapkan. Dua dari strain yang ditemukan
mampu menghasilkan biosurfaktan.

Degradasi dan konsumsi hidrokarbon juga dapat divisualisasikan dengan metode

kolorimetri yang dikembangkan oleh Hanson et al (1993) dengan menambahkan indikator
redoks berwarna, 2,6-dichlorophenol indophenol (DCPIP), untuk kultur cair pertumbuhan
pada hidrokarbon, hasil alat tes kolorimetri sederhana. Di dalam DCPIP ini berlangsung
aktivitas bakteri yang dapat mendegradasi hidrokarbon. DCIP bertindak sebagai akseptor
elektron dan perubahan dari biru (teroksidasi) menjadi tak berwarna (tereduksi). Dengan
demikian, penghilangan warna kultur menunjukkan degradasi hidrokarbon.

Sampling dari lokasi yang terkontaminasi dikombinasikan dengan isolasi langsung atau
pengayaan budaya merupakan strategi disetujui untuk menemukan strain baru
memproduksi biosurfaktan. Namun, proporsi positif hanya dalam kisaran beberapa persen,
beberapa lusin isolat harus diuji bagus ( Walter et al, 2010 ).

2
 AKE
XII IPA I

Metode screening

Biosurfaktan secara struktural adalah sebuah kelompok yang sangat beragam dari
biomolekul misalnya, glycolipid, lipopeptide, lipoprotein, lipopolysaccharide atau
fosfolipid. Oleh karena itu, metode yang paling umum untuk screening strain pemproduksi
biosurfaktan didasarkan pada efek fisik surfaktan. Kemampuan strain untuk menggubah
antar permukaan hidrofobik dapat diselidiki. Di sisi lain, metode penyaringan tertentu
seperti uji kolorimetri agar CTAB yang cocok hanya untuk sekelompok terbatas
biosurfaktant. Metode skrining dapat memberikan hasil kualitatif dan / atau kuantitatif.
Untuk screening isolat pertama, metode kualitatif pada umumnya cukup efisien ((Walter et
al, 2010 ).

FUNGSI BIOLOGIS

Penelitian telah menunjukkan bahwa logam seperti timah dan kadmium memiliki afinitas
kuat terhadap rhamnolipid dari kebanyakan komponen tanah yang dapat terikat di dalam
tanah yang terkontaminasi. Untuk menghasilkan rhamnolipid, Maier (1998) menggunakan
Pseudomonas aeruginosa, bakteri oportunistik umum yang telah dipelajari secara ekstensif
karena peranannya dalam penyakit. Karena P. aeruginosa tidak akan bisa bersaing dengan
mikroorganisme asli jika diinokulasi langsung ke tanah dan karena itu relatif mudah untuk
budaya di laboratorium. Pengujian menunjukkan bahwa rhamnolipid sendiri tidak beracun
dan biodegradable.

Biosurfaktan dapat meningkatkan emulsifikasi dari hidrokarbon, memiliki potensi untuk

melarutkan kontaminan hidrokarbon, dan meningkatkan ketersediaan medium untuk mi-
kroba pendegradasi. Penggunaan bahan kimia untuk konservasi tempat tercemar
hidrokarbon dapat mencemari lingkungan dengan limbah, sedangkan pengolahan secara
biologi dapat membersihkan polusi secara efisien dan dapat dibiodegradasi. Beberapa
mikroorganisme diketahui mensintesis agen aktif-permukaan, sebagian besar dari mereka
adalah bakteri dan ragi (Banat, (1995) dan Kim et al, (2000)). Ketika ditanam pada substrat
hidrokarbon sebagai sumber karbon, mikroorganisme ini mensintesis berbagai bahan kimia
dengan aktivitas permukaan, seperti glycolipid, fosfolipid dan lain-lain (Muriel et al,
(1996) dan Desai dan Banat, (1997)). Oleh karena itu, mikroorganisme penghail
biosurfaktan dapat memainkan peranan penting dalam percepatan bioremediasi tempat
terkontaminasi hidrokarbon (Del ‘Arco, dan De Franca, (2001) dan Rahman et al, (2002)).

Senyawa ini juga dapat digunakan dalam meningkatakan pembersihan minyak dan dapat
dipertimbangkan untuk aplikasi potensial lainnya dalam perlindungan lingkungan (Shulga
et al, 1999). Dalam dekade terakhir, banyak penelitian melaporkan tentang penggunaan
mikroba penghasil biosurfaktan pada bioremediasi dan peningkatan pemulihan minyak
(Jack, 1988; Jenneman et al., 1984; Volkering et al., 1998).

Menurut Ron dan Rosenberg (2001), biosurfaktan dapat memenuhi berbagai peran
fisiologis dan memberikan keuntungan yang berbeda untuk jenis produksi mereka:

• Meningkatkan ketersediaan substrat hayati hidrofobik,

• Mengikat logam berat,

3
 AKE
XII IPA I

• Memiliki aktivitas antimikroba,

Aplikasi lain meliputi formulasi herbisida dan pestisida, deterjen, perawatan kesehatan dan
kosmetik, pulp dan kertas, batubara, tekstil, keramik, industri pengolahan makanan,
pengolahan bijih uranium, dan mekanis dewatering gambut (Ron dan Rosenberg, 2001).