KKK Ok

FRAKSINASI DAN IDENTIFIKASI KROMATOGRAFI KOLOM
KONVENSIONAL PADA FRAKSI N-HEKSAN : ETIL ASETAT EKSTRAK

DAUN COKLAT (Theobroma cacao L.)ASAL DESA SIMBANG
KECAMATAN SIMBANG KABUPATEN MAROS
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Fitokimia atau kimia tumbuhan mempelajari aneka ragam senyawa
organic yang dibentuk dan ditimbun oleh tumbuhan, yaitu mengenai
struktur kimianya, biosintesisnya, penyebarannya secara ilmiah serta
fungsi biologinya.
Senyawa kimia sebagai hasil metabolit sekunder atau metabolit
sekumder telah banyak digunakan sebagai zat warna, racun, aroma
makanan, obat-obatan dan sebagainya serta sangat banyak jenis tumbuh-
tumbuhan yang digunakan obat-obatan yang dikenal sebagai obat
tradisional sehingga diperlukan penelitian tentang penggunaan tumbuh-
tumbuhan berkhasiat dan mengetahui senyawa kimia yang berfungsi
sebagai obat.
Kakao (Theobroma cacao. L) merupakan salah satu tanaman
perkebunan yang dikembangkan untuk peningkatan sumber devisa
negara dari sektor nonmigas. Indonesia merupakan daerah tropis yang
mempunyai potensi baik untuk pengembangan kakao. Sejauh ini,
pengendalian proses pengolahan biji kakao juga masih belum optimal.
Salah satu penyebabnya adalah minimalnya pengetahuan tentang tahap-
tahap proses pengolahan biji kakao dan pengendalian faktor-faktor proses
pengolahan bagi kaum petani, kaum produsen dan masyarakat.Coklat
FADILAH RAMADHANI NUR FADHILAH SYAHID

15020150252
merupakan sebutan untuk makanan ataupun minuman dari olahan biji
kakao yang pertama kali dikonsumsi oleh penduduk Mesoamerika kuno.
Kromatografi merupakan teknik analisis yang paling sering
digunakan dalam analisis sediaan farmasetik. Suatu pemahaman
terhadap parameter-parameter yang berpengaruh terhadap kinerja
kromatografi akan meningkatkan system kromatografi sehingga dicapai
suatu pemisahan yang baik.
Kromatografi kolom konvensional adalah metode kromatografi
klasik yang sampai saat ini masih banyak digunakan. Kolom kromatografi
digunakan untuk memisahkan senyawa-senyawa dalam jumlah banyak.
Prinsip dari kromatografi kolom jenis ini adalah kecenderungan komponen
kimia untuk terdistribusi ke dalam fase diam atau fase gerak dengan
proses elusi berdasarkan gaya gravitasi. Pada kromatografi kolom ini
diperoleh beberapa fraksi yang di tampung dalam vial berdasarkan warna
yang dihasilkan dari beberapa perbandingan eluen yang digunakan pada
ekstrak daun coklat (Theobroma cacao L.).
B. Rumusan Masalah
Adapun rumusan masalah pada praktikum kali ini berapa jumlah fraksi
yang diperoleh dari metode Kromatografi Kolom Konvensional dan warna
apa saja yang diperoleh dari fraksi daun coklat (Theobroma cacao L.)
pada proses Kromatografi Kolom Konvensional

15020150252
C. Maksud Praktikum
Adapun maksud dari praktikum kali ini yaitu untuk
mengetahui dan memahami penggunaan serta prinsip kerja kromatografi
kolom konvensional menggunakan fraksi halus dari daun coklat
(Theobroma cacao L.)
D. Tujuan Praktikum
Adapun tujuan dari praktikum ini adalah memisahkan
senyawa kimia fraksinasidaun coklat (Theobroma cacao L.)dengan
menggunakan metode kromatografi kolom konvensional berdasarkan
intensitas warna dan tingkat kepolaran.
E. Manfaat Praktikum
1. Manfaat umum
Adapun manfaat umum dari praktikum kali ini yaitu agar
dapat mengetahui cara memisahkan senyawa menggunakan
metode kromatografi kolom konvensional terhadap fraksi daun
coklat (Theobroma cacao L.).
2. Manfaat khusus
Adapun manfaat khusus dari praktikum kali ini yaitu agar
dapat mengetahuicara memisahkan senyawa menggunakan
metode kromatografi kolom konvensional terhadapfraksi daun
coklat (Theobroma cacao L.) dengan melihat intensitas warna
yang dihasilkan.

15020150252
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
A. Uraian Tanaman
a. Klasifikasi Tanaman (Integrated taxonomic information system,
2018 ) :
Regnum : Plantae
Subkingdom : Viridiplantae
Infrakingdom : Sreptophyta
Superdivision : Embryophyta
Division : Tracheophyta
Subdivision : Spermatophytina
Class : Magnoliopsida
Superorder : Rosane
Order : Malvales
Family : Malvaceae
Genus : Theobroma L.
Spesies : Theobroma cacao L.
b. Nama Lain
Nama lain dari coklat adalah sikola (bugis), kawi (Jawa) (
c. Morfologi Tanaman
Tanaman kakao termasuk golongan tanaman tahunan yang
tergolong dalam kelompok tanaman caulofloris, yaitu tanaman yang

15020150252
berbunga dan berbuah pada batang dan cabang. Tanaman ini pada
garis besarnya dapat dibagi atas dua bagian, yaitu bagian vegetatif
yang meliputi akar, batang serta daun dan bagian generatif yang
meliputi bunga dan buah (Karmas, 1989).
Akar tanaman kakao mempunyai akar tunggang.
Pertumbuhannya dapat mencapai 8 meter kearah samping dan 15
meter kearah bawah. Kakao yang diperbanyak secara vegetatif
pada awal pertumbuhannya tidak membentuk akar tunggang,
melainkan akar-akar serabut yang banyak jumlahnya. Setelah
dewasa tanaman tersebut akan membentuk dua akar jumlahnya.
Setelah dewasa tanaman tersebut akan membentuk dua akar yang
menyerupai akar tunggang. Pada kecambah yang telah berumur 1
– 2 minggu terdapat akar-akar cabang (radiklateralis) yang
merupakan tempat tumbuhnya akar-akar rambut (Fibrilla) dengan
jumlah yang cukup banyak. Pada bagian ujung akar ini terdapat
bulu akar yang dilindungi oleh tudung akar (Calyptra). Bulu akar
inilah yang berfungsi menyerap larutan dan garam-garam tanah.
Diameter bulu akar hanya 10 mikro dan panjang maksimum hanya
1 milimeter (Karmas, 1989).
Bentuk helai daun bulat memanjang, ujung daun meruncing,
pangkal daun meruncing dan susunan tulang daun menyirip serta
menonjol kepermukaan bawah helai daun. Salah satu sifat khusus
daun kakao yaitu adanya dua persendian yang terletak di pangkal

15020150252
dan ujung tangkai daun. Dengan persendian daun mampu
membuat gerakan untuk menyesuaikan dengan arah datangnya
sinar matahari. Pada tunas ortotrop, tangkai daunya panjang, yaitu
7,5 – 10 cm sedangkan pada tunas plagiotrop panjang tangkai
daunya hanya sekitar 2,5 cm (Badrun, 2003).
Dalam habitat yang baik tanaman kakao akan tumbuh tinggi
dan memiliki batang yang sedang tetapi bunga dan buahnya
sedikit. Jorket adalah nama ilmiah dari tempat percabangan, jadi
setiap jorket ditumbuhi 3 – 6 cabang yang arah pertumbuhanya
condong ke samping membentuk sudut 0 – 600 dengan arah
horizontal. Cabang-cabang itu disebut dengan cabang primer
(cabang plagiotrop). Pada cabang primer tersebut kemudian
tumbuh cabang-cabang lateral (fan) sehingga tanaman membentuk
tajuk yang rimbun (Badrun, 2003).
Biji kakao termasuk tanaman kalflori yang artinya bunga dan
buah tumbuh pada batang dan cabang tanaman. Dalam setiap
buah, terdapat sekitar 20-50 butir biji yang tersusun dalam lima
baris dan menyatu pada bagian poros buah. Biji dibungkus oleh
daging buah atau pulp yang berwarna putih dan rasanya manis.
Pulp tersebut mengandung zat penghambat viabilitas benih
(Badrun, 2003).
Biji kakao yang dikeluarkan dari buahnya tanpa disimpan
dengan baik akan berkecambah dalam waktu 3 – 4 hari dan dalam

15020150252
keadaan normal biji akan kehilangan daya tumbuhnya setelah 10 –
15. Biji kakao juga tidak memiliki masa dorman, meskipun daging
buahnya mengandung zat penghambat perkecambahan
(Sastrohamidjojo,1996).
Bunga kakao sepanjang tahun akan dapat terlihat.
Tumbuhnya mengelompok dan menempel pada batang atau pada
cabang-cabang. Perlu diketahui kalau kakao ini bersifat culiflorous
yang artinya bunga-bunga dan buah berkembang melekat pada
batang atau pun cabang-cabang (Sastrohamidjojo,1996).
Bunga kakao berwarna putih, ungu, atau kemerahan. Warna
yang kuat terdapat pada benang sari dan daun mahkota. Tangkai
bunga kecil tetapi panjang (1 – 1,5 cm). Daun mahkota panjangnya
6 – 8 mm, terdiri atas dua bagian. Bunga kakao disusun oleh 5
daun kelopak yang bebas satu sama lain, 5 daun mahkota, 10
tangkai sari yang tersusun dalam 2 lingkaran dan masing-masing
terdiri dari 5 tangkai sari tetapi hnaya 1 lingkaran yang fertil, dan 5
daun buah yang bersatu (Sastrohamidjojo,1996).
Warna buah kakao sangat beragam, tetapi pada dasarnya
hanya ada dua macam warna. Buah yang ketika muda berwarna
hijau agak putih jika sudah masak akan berwarna kuning.
Sementara itu, buah yang ketika muda berwarna merah, setelah
masak berwarna jingga (orange). Kulit buah memiliki 10 alur dalam
dan dangkal yang letaknya berselang-seling. Kulit buahnya tebal

15020150252
tetapi lunak dan permukaanya kasar. Sebaliknya, pada tipe
forasero, permukaan kulit buah pada umumnya halus (rata),
kulitnya tipis dan keras. Buah akan masak setelah berumur enam
bulan. Pada saat itu ukurannya beragam, dari panjang 10 hingga
30 cm, bergantung pada kultivar dan faktor-faktor lingkungan
selama perkembangan buah (Sastrohamidjojo,1996).
d. Kandungan Kimia
Biji kakao mengandung 35-50% minyak/lemak, 15% pati,
15% protein, 1-4% theobromin, 0,07-0,36% kafein, dan 0,05-0,36%
senyawa kafein dan lemak kakao yang berasal dari nib kakao
sebanyak 43-53%. Kernel kakao mengandung 0,19-0,30%
theobromin dan kulit arinya mengandung sekitar 0,19-2,98 senyawa
alkaloid (Beckett, 2009).
Coklat memiliki kandungan gizi yang beraneka ragam antara
lain energi, protein, lemak, karbohidrat, kalsium, fosfor, zat besi,
vitamin A, vitamin B1, vitamin B12, vitamin C, dan vitamin E
(Beckett, 2009).
e. Khasiat Tanaman
Manfaat coklat bagi tubuh antara lain(Menurut Satyajit. 2007):
a. Coklat terdiri dari antibakteri yang dapat mencegah kerusakan
gigi.

15020150252
b. Coklat memiliki erotonin yang bertindak sebagai anti-depresan.
Hal ini dapat menimbulkan perasaan senang dan kewaspadaan
serta dapat membantu mengurangi rasa sakit yang dialami.
c. Mengkonsumsi coklat hitam (dark chocolate) dapat membuat
tekanan darah yang normal.
d. Coklat dapat meringankan sembelit karena mengandung
kafein, perangsang pusat saraf pusat, dan teobromin, serta
perangsang otot polos. Otot polos termasuk pembuluh darah,
rahim, kandung kemih, dan saluran pencernaan. Ketika saluran
pencernaan dirangsang akan menyebabkan usus berkontraksi
dan berpotensi memaksa untuk buang air besar.
e. Dapat mengurangi berat badan karena dark chocolate memiliki
kandungan kakao tinggi dan akan membuat pengonsumsinya
mengurangi keinginan untuk memakan makanan yang manis
dan berlemak.
f. Mengkonsumsi coklat secara rutin dapat mengurangi resiko
stroke sebesar 22%.
g. Mengurangi resiko kanker karena meningkatkan kadar flavonoid
di dalam tubuh yang berfungsi melindungi sel-sel dari kerusakan
yang disebabkan oleh radikal bebas.
B. Uraian Kromatografi Kolom Konvensional
Kromatografi merupakan suatu proses pemisahan yang mana
analit-analit dalam sampel terdistribusi antara 2 fase, yaitu fas diam dan

15020150252
fase gerak. Fase diam dapat berupa bahan padat atau porus dalam
bentuk molekul kecil, atau dalam bentuk cairan yang dilapiskan pada
pendukung padat atau dilapiskan pada pendukung padat atau dilapiskan
pada dinding kolom. Fase gerak dapat berupa gas atau cairan (Rohman,
2009).
Saat ini kromatografi yang melibatkan kolom (tempat terdapatnya
fase diam seperti kromatografi cair kinerja tinggi dan kromatografi gas
digunakan secara lebih luas dibanding dengan kromatografi planar
(Rohman, 2009).
proses elusi berdasarkan gaya gravitasi (Raymond et al, 2006).
Pada kromtografi kolom, campuran yang akan dipisahkan
diletakkan berupa pita pada bagian atas penjerap yang berada dalam
kolom kaca, logam atau bahkan plastic. Eluen (fase gerak) dibiarkan
mengalir melalui fase diam dalam kolom dan hanya disebabkan oleh gaya
gravitasi (Raymond et al, 2006).
Untuk kromatografi kolom, kolom tertentu diisi dengan bahan
penjerap/sorpsi dan pelarut pengembang engan tingkat kepolaran yang
berbeda. Kolom yang diisi dengan bahan penjerap/sorpsi yang disebut

15020150252
kolom pemisah. Penggunaan kolom tergantung dari masalah pemisahan
yaitu kolmberfilter dengan gelas berpori, yang pada uung awah
menyempit (tabung Allihn) atau tabung gelas yang pada bagian bawah
mnyempit dan dilengkapi dengan kran sedangkan tabung bola jarang
digunakan (Stahl, 1991).
Pita senyawa linarut bergera melalui kolom dengan laju yang
berbeda dan memisahkan berdasarkan sifat kepolaran. Pita-pita hasil
siolasi dikumpulkan dalam vial berupa fraksi ketika keluar dari kolom.
Metode ini merupakan sontoh kromatografi cair karena linarut delusi
dalam kolom menggunakan eluen (Sudjadi, 1986).
Perbandingan panjang tabung terhadap diameter pada umunya
ialah 40:1. Pengisisan kolom dengan adsorben yang juga disebut
pengemasan kolom, harus dilakukan secara hati-hati dengan permukaan
yang rata. Aluminium oksida atau silica gel dapat dikemas dengan metode
keringf ke dalam klom. Agar pengsian rata, tabung iisi sambil diketuk-
ketuk menggunakan tangn atau benda lunak laainnya pada dingding
kolom (Stahl, 1991).
Adapun kelebihan dan kekurangan dari kromatografi kolom
kovensional adalah (Raymond et al, 2006):
a. Kelebihan:
1. Dapat digunakan untuk analisis dan aplikasi preparative
2. Digunakan untuk menentukan jumlah komponen campuran
3. Digunakan untuk memisahkan dan purifikasi substansi

15020150252
b. Kekurangan:
1. Untuk mempersiapkan kolom dibutuhkan kemampuan teknik
dan manual
2. Metode ini sangat membutuhkan waktu yang lama (time
consuming)

15020150252
BAB III
METODE PRAKTIKUM
A. AlatdanBahan
1. Alat
Adapun alat yang digunakan adalah batang pengaduk, cawan
porselin, corong kaca, gelas kimia, klem, kolom konvensional, statif,
timbangan analitik dan vial.
2. Bahan
Adapun bahan yang digunakan adalah aluminium foil, eluen (n-
heksan : etil asetat), fraksidaun coklat (Theobroma cacao L.), kapas,
kertas saring, silica gel, dan tisu.
B. ProsedurKerja (Najib, A & Malik. A, 2018)
1. Penyiapan Alat Isolasi
Kolom dipasangkan tegak lurus pada statif, kemudian
dibebas lemakkan dengan cara dibilas menggunakan metanol.
Setelah itu bagian dasar kolom dilapisi kapas, kertas saring dan
silika dan siap untuk digunakan.
2. Pengemasan Silika

15020150252
Silika halus ditimbang berdasarkan perbandingan 1 gram
ekstrak; 30 gram silica gel. Dalam praktikum inipengemasan fase
diam menggunakan metode kering dimana silika halus dimasukkan
ke dalam kolom kemudian dimampatkan dengan eluen (n-heksan
:etil asetat) atau diketuk-ketuk sampai tidak terbentuk gelembung
udara.
3. Penyiapan fraksi
Ekstrak daun coklat (Theobroma cacao L.), ditimbang
sebanyak 1 gram lalu dimasukkan pada cawan porselin dan
dilarutkan.
4. Proses Pemisahan/Isolasi
Silika halus ditimbang berdasarkan perbandingan 1 gram
ekstrak: 30 gram silika gel dan dikemas dengan metode kering
digunakan eluen (n-heksan : etil asetat) dengan perbandingan 10:0
dalam 50 mL, selapis diatas permukaan kertas saring selanjutnya
dielusi sampai menghasilkan fraksi-fraksi dan ditampung dalam
vial. Eluen yang sebelumnya telah habis diganti dengan eluen 10:0,
9:1, kemudian secara berturut dilanjutkan dengan eluen
perbangingan 8:2, 7:3, 6:4, 5:5, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9 dan 0:10.
Kemudian hasil isolasi ditampung pada masing-masing vial yang
telah dikalibrasi sebanyak 5 mL. Diamati warna yang dihasilkan dan
dipisahkan sesuai perbandingan eluen yang digunakan.

15020150252
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
Dari praktikum Kromatografi Kolom Konvensional didapatkan hasil
sebagai berikut :
1. Table fraksi dibedakan berdasarkan eluen
No. Fase gerak ( eluen ) Fraksi
1. n-heksan (10) : etil asetat (0) Fraksi 1 (1 – 10)
2. n-heksan (9) : etil asetat (1) Fraksi 2 (11-19)

15020150252

15020150252
2. T
No. Fraksi Warna Nomor Vial abl
e
1. Fraksi 1 Bening 1-10,11,13,15-
fra
18,21,22,25-28
ksi
2. Fraksi 2 Agak keruh 12,14
dib
3. Fraksi 3 Keruh 23, 24 ed
ak
4. Fraksi 4 Agak kuning 19,20,100-104
an
5. Fraksi 5 Kuning 65-67,79-94 ber
6. Fraksi 6 Kuning pekat 96-99,105 da
sar
7. Fraksi 7 Hijau kekuningan 40,68-69,70,78
ka
8. Fraksi 8 Hijau lumut 64 n
wa
9. Fraksi 9 Hijau pekat
rna
10. Fraksi 10 Coklat 29,35-39
11. Fraksi 11 Hijau kehitaman 45-57

15020150252
Kromatografi merupakan suatu proses pemisahan yang mana
analit-analit dalam sampel terdistribusi antara 2 fase, yaitu fas diam dan
fase gerak. Fase diam dapat berupa bahan padat atau porus dalam
bentuk molekul kecil, atau dalam bentuk cairan yang dilapiskan pada
pendukung padat atau dilapiskan pada pendukung padat atau dilapiskan
pada dinding kolom. Fase gerak dapat berupa gas atau cairan
proses elusi berdasarkan gaya gravitasi. Pada kromatografi kolom ini
diperoleh beberapa fraksi yang di tampung dalam vial berdasarkan warna
yang dihasilkan dari beberapa perbandingan eluen yang digunakan.
Pada percobaan ini dilakukan identifikasi sampel ekstrak daun
coklat (Theobroma cacao L.) dengan metode kromatografi kolom
konvensional. Dimana metode ini dapat memisahkan suatu komponen
kimia dan suatu sampel dalam jumlah yang banyak.
Tujuan dilakukannya percobaan kali ini adalah untuk memisahkan
campuran senyawa dalamdaun coklat (Theobroma cacao L.)dengan
metode kromatografi kolom.
Prinsip kerja kromatografi kolom adalah dengan adanya perbedaan
daya serap dari masing-masing komponen, campuran yang akan diuji,

15020150252
dilarutkan dalam sedikit pelarut lalu di masukan lewat puncak kolom dan
dibiarkan mengalir kedalam zat menyerap. Senyawa yang lebih polar akan
terserap lebih kuat sehingga turun lebih lambat dari senyawa non polar
terserap lebih lemah dan turun lebih cepat. Zat yang di serap dari larutan
secara sempurna oleh bahan penyerap berupa pita sempit pada kolom.
Pelarut lebih lanjut / dengan tanpa tekanan udara masin-masing zat akan
bergerak turun dengan kecepatan khusus sehingga terjadi pemisahan
dalam kolom.
Pada percobaan ini digunakan metode kering, metode ini dilakukan
dengan cara silika gel langsung di masukkan kedalam kolom yang telah
berisi kapas kemudian diatasnya diletakkan kertas saring yang telah
digunting sesuai dengan ukuran kolom tersebut.
Pada Praktikum Kromatografi kolom, dilakukan dengan
menggunakan 11 perbandingan eluen n-heksan: etil asetat, yaitu (10 : 0)
sampai 0:10. Adapun alasan dari penggunaan eluen dari tingkat kepolaran
yang rendah (kurang polar) terlebih dahulu ke dalam kolom yaitu karena
jika yang dimasukkan pelarut polar terlebih dahulu maka dikhawatirkan
senyawa non polar yang ada pada sampel akan tertarik juga sementara
yang kita inginkan yaitu melakukan proses pemisahan antara senyawa
polar dan nonpolar. Dan pada akhir dari proses isolasi ini tidak ada lagi
senyawa non polar yang akan tertarik jika pelarut non polar digunakan di
akhir.

15020150252
Setelah itu silika dimasukkan kedalam kolom kemudian dimasukkan
lagi kertas saring, lalu masukkan fraksidaun coklat (Theobroma cacao L.).
Kemudian eluen n-heksan : etil asetat dimasukkan ke dalam kolom mulai
dari kepolaran terrendah hingga kepolaran tinggi (10:0, 9:1, 8:2, 7:3, 6:4,
5:5, 4:6, 7:3, 8:2, 1:9, dan 0:10). Kemudian hasil isolasi tersebut
ditampung pada masing-masing vial yang telah dikalibrasi sebanyak 5 mL.
Adapun hasil yang di dapat pada percobaan ini adalah pada eluen
n-heksan (10) : etil asetat (0) menghasilkan fraksi 1 (1-10); eluen n-heksan
(9) : etil asetat (1) menghasilkan fraksi 2 (11-19); n-heksan (8) : etil asetat
(2) menghasilkan fraksi 3 (20-34); n-heksan (7) : etil asetat (3)
menghasilkan fraksi 4 (34-43); n-heksan (6) : etil asetat (4) menghasilkan
fraksi 5 (44-52); n-heksan (5) : etil asetat (5) menghasilkan fraksi 6 (53-
62); n-heksan (4) : etil asetat (6) menghasilkan fraksi 7 (63-73); n-heksan
(3) : etil asetat (7) menghasilkan fraksi 8 (74-82); n-heksan (2) : etil asetat
(1) menghasilkan fraksi 9 (83-90); n-heksan (1) : etil asetat (9)
menghasilkan fraksi 10 (91-98); n-heksan (0) : etil asetat (10)
menghasilkan fraksi 11 (99-105).
Adapun hasil berdasarkan warna perbandingan fraksi 1 adalah
berwarna bening pada vial no 1-10,11-13, 15-18, 21, 22, 25-28;
perbandingan fraksi 2 adalah berwarna agak keruh pada vial no 12-14 ;
perbandingan fraksi 3 adalah berwarna keruh pada vial no 23,24;
perbandingan fraksi 4 adalah berwarna agak kuning pada vial no
19,20,100-104; perbandingan fraksi 5 adalah berwarna kuning pada vial

15020150252
no 65-67, 79-94; perbandingan fraksi 6 adalah berwarna kuning pekat
pada vial no 96-99,105; perbandingan fraksi 7 adalah berwarna hijau
kehijauan pada vial no 40,68-69,70,78; perbandingan fraksi 8 adalah
berwarna hijau lumut pada vial no 64; perbandingan fraksi 9 adalah
berwarna hijau pekat pada vial no 30; perbandingan fraksi 10 adalah
berwarna coklat pada vial no 29, 35-39; perbandingan fraksi 11 adalah
berwarna hijau kehitaman pada vial no 45-57.
Dari hasil pemisahan dengan kromatografi kolom konvensional
diperoleh sebanyak 105 fraksi yang dipisahkan berdasarkan perbandingan
eluen dan fraksi dipisahkkan berdasarkan warna yang dihasilkan, pada
percobaan ini dihasilkan 11 perubahan warna. Dimana jika semakin
terang warna yang terlihat maka semakin polar dan sebaliknya semakin
pudar warna yang dihasilkan maka fraksi juga kurang polar.
Pada kromatografi kolom konvensional mempunyai kelebihan yaitu
dapat digunakan untuk analisis dan aplikasi preparative, digunakan untuk
menentukan jumlah komponen campuran, digunakan untuk memisahkan
dan purifikasi substansi. Kekurangan yaituuntuk mempersiapkan kolom
dibutuhkan kemampuan teknik dan manual dan metode ini sangat
membutuhkan waktu yang lama (time consuming).

15020150252
BAB V
KESIMPULAN & SARAN
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil praktikum yang telah dilakukan pada estrak daun
coklat (Theobroma cacao L.)dapat disimpulkan bahwa dari hasil
kromatografi kolom konvensional ini diperoleh hasil sebanyak 11 fraksi
berdasarkan eluen dan sebanyak 13 fraksi berdasarkan warna.
B. Saran
Diharapkan kepada laboratorium agar menyediakan pereaksi yang
sesuai untuk pengerjaan sehingga hasil yang diperoleh juga maksimal
dan sesuai dengan literatur yang ada dan untuk asisten diharapkan
untuk selalu mendampingi praktikan hingga selesai agar tidak terjadi
kekesalahan pada saat melakukan percobaan.

15020150252
DAFTAR PUSTAKA
Badrun, Ahmad. 2003, Struktur, Konteks Pertunjukan, ProsesPenciptaan,

dan Fungsi. Disertasi pada Pada Pascasarjana FIB
UniersitasIndonesia.
Beckett, T.S. 2009,Coklat terdiri dari antibakteriIndustrial ChocolateManu
facture and Use. Frouth Ediion. Formely Nestle Product Technology
Center. York, United Kingdom.
Dalimartha, Setiawan.2007.”Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid 3”.

Puspa Swara : Jakarta.
Ditjen POM. 1997. “Materi Medika Indonesia Jilid I”. Departemen
Kesehatan Republik Indonesia: Jakarta
Farmakope Herbal Indonesia Edisi 1. 2008. Departemen Kesehatan

Republik Indonesia: Jakarta
Hariana, Arief.2013.” Tumbuhan Obat dan Khasiatnya “.Swada : Jakarta.
Karmas, E, PhD. 1989, Evaluasi Gizi Pada Pengolahan Bahan Pangan.

Penerbit ITB, Bandung.
Najib, A dan Malik, A . 2018. PenuntundanBukuKerjaPraktikumFitokimia II.
Makassar:FakultasFarmasiUniversitas Muslim Indonesia.
Rohman, Abdul. 2009. “Kromatografi untuk Analisis Obat”. Graha Ilmu :
Jakarta
Raymond G. Reid and Satyajit D. sarker. 2006. “Isolation of Natural

Products by Low-Pressure Column Chromatography”. In sarker,
Sd., Latif, Z., and Gray, Al. (Ed). Natural Products Isolation.
Humana Press Inc. Totowa, New Jersey.
Stahl, E., 1973. “Drug analysis by Chromatography and Microscopy”. Ann

Arbor Science Publishers Inc.
Sastrohamidjojo H. 1996, Sintesis Bahan Alam. Yogyakarta, Gadjah mada

University Press.
Satyajit. 2007, Kimia untuk Farmasi, Bahan Kimia Organik, Alam dan
Umum. Pustaka Pelajar, Yogyakarta
Untung. O., et al. 2009. “Herbal Indonesia Berkhasiat, Bukti Ilmiah dan
Cara Racik vol. 8”. PT. Trubus Swadaya: Jakarta.

15020150252
LAMPIRAN
Lampiran 1. SkemaKerjaPraktikum
Metode Kering
Siapkan alat dan bahan
Pasangkan kolom pada statif kemudian diklem
Masukkan kapas pada bagian bawah kolom, lalu masukkan kertas

saring yang telah dipotong sesuai kolom
Masukkan silica halus sebanyak 30 gram ke dalam kolom kemudian

lapisi denga kertas saring
Masukan 1 gram ekstrak, kemudian tambahkan eluen (n-heksan : etil

asetat) dengan perbandingan 10:0
Dielusi sampai menghasilkan fraksi-fraksi dan ditampung dalam vial
Eluen yang sebelumnya telah habis dengan eluen10:0, 9:1, di ganti

eluen kemudian berturut-turut dilanjutkan dengan perbandingan 8:2,
7:3, 6:4, 5:5, 4:6, 3:7, 2:8, 1:9 dan 0:10
Fraksi ditampung pada masing-masing vial yang telah dikalibrasi

sebanyak 5 mL
Diamati kemudian dipisahkan fraksi sesuai perbandingan eluen yang

digunakan dan fraksi dipisahkan sesuai warna.

15020150252

KKK Ok

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

KKK Ok

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

FRAKSINASI DAN IDENTIFIKASI KROMATOGRAFI KOLOM

KONVENSIONAL PADA FRAKSI N-HEKSAN : ETIL ASETAT EKSTRAK

Fitokimia atau kimia tumbuhan mempelajari aneka ragam senyawa

organic yang dibentuk dan ditimbun oleh tumbuhan, yaitu mengenai

struktur kimianya, biosintesisnya, penyebarannya secara ilmiah serta

Senyawa kimia sebagai hasil metabolit sekunder atau metabolit

sekumder telah banyak digunakan sebagai zat warna, racun, aroma

makanan, obat-obatan dan sebagainya serta sangat banyak jenis tumbuh-

tumbuhan yang digunakan obat-obatan yang dikenal sebagai obat

tradisional sehingga diperlukan penelitian tentang penggunaan tumbuh-

tumbuhan berkhasiat dan mengetahui senyawa kimia yang berfungsi

Kakao (Theobroma cacao. L) merupakan salah satu tanaman

perkebunan yang dikembangkan untuk peningkatan sumber devisa

negara dari sektor nonmigas. Indonesia merupakan daerah tropis yang

mempunyai potensi baik untuk pengembangan kakao. Sejauh ini,

pengendalian proses pengolahan biji kakao juga masih belum optimal.

Salah satu penyebabnya adalah minimalnya pengetahuan tentang tahap-

tahap proses pengolahan biji kakao dan pengendalian faktor-faktor proses

pengolahan bagi kaum petani, kaum produsen dan masyarakat.Coklat

FADILAH RAMADHANI NUR FADHILAH SYAHID

kakao yang pertama kali dikonsumsi oleh penduduk Mesoamerika kuno.

Kromatografi merupakan teknik analisis yang paling sering

digunakan dalam analisis sediaan farmasetik. Suatu pemahaman

terhadap parameter-parameter yang berpengaruh terhadap kinerja

kromatografi akan meningkatkan system kromatografi sehingga dicapai

suatu pemisahan yang baik.

Kromatografi kolom konvensional adalah metode kromatografi

digunakan untuk memisahkan senyawa-senyawa dalam jumlah banyak.

Prinsip dari kromatografi kolom jenis ini adalah kecenderungan komponen

proses elusi berdasarkan gaya gravitasi. Pada kromatografi kolom ini

diperoleh beberapa fraksi yang di tampung dalam vial berdasarkan warna

yang dihasilkan dari beberapa perbandingan eluen yang digunakan pada

ekstrak daun coklat (Theobroma cacao L.).

yang diperoleh dari metode Kromatografi Kolom Konvensional dan warna

pada proses Kromatografi Kolom Konvensional

FADILAH RAMADHANI NUR FADHILAH SYAHID

Adapun maksud dari praktikum kali ini yaitu untuk

mengetahui dan memahami penggunaan serta prinsip kerja kromatografi

kolom konvensional menggunakan fraksi halus dari daun coklat

(Theobroma cacao L.)

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah memisahkan

senyawa kimia fraksinasidaun coklat (Theobroma cacao L.)dengan

menggunakan metode kromatografi kolom konvensional berdasarkan

intensitas warna dan tingkat kepolaran.

Adapun manfaat umum dari praktikum kali ini yaitu agar

dapat mengetahui cara memisahkan senyawa menggunakan

metode kromatografi kolom konvensional terhadap fraksi daun

coklat (Theobroma cacao L.).

Adapun manfaat khusus dari praktikum kali ini yaitu agar

dapat mengetahuicara memisahkan senyawa menggunakan

metode kromatografi kolom konvensional terhadapfraksi daun

coklat (Theobroma cacao L.) dengan melihat intensitas warna

FADILAH RAMADHANI NUR FADHILAH SYAHID

a. Klasifikasi Tanaman (Integrated taxonomic information system,

Spesies : Theobroma cacao L.

Nama lain dari coklat adalah sikola (bugis), kawi (Jawa) (

Tanaman kakao termasuk golongan tanaman tahunan yang

tergolong dalam kelompok tanaman caulofloris, yaitu tanaman yang

FADILAH RAMADHANI NUR FADHILAH SYAHID

meliputi bunga dan buah (Karmas, 1989).

Akar tanaman kakao mempunyai akar tunggang.

Pertumbuhannya dapat mencapai 8 meter kearah samping dan 15

meter kearah bawah. Kakao yang diperbanyak secara vegetatif