Prosiding Semirata FMIPA Universitas Lampung, 2013

Isolasi Rhodinol dari Minyak Sereh Jawa Menggunakan

Metode Kromatografi Kolom Tekan
Endah Sayekti1*, Ajuk Sapar1, Fitririyanti1, Titin Anita Zaharah1
1
Jurusan Kimia, Fakultas MIPA, Universitas Tanjungpura, Pontianak
*Corresponding author: (e-mail) endahkimiauntan@yahoo.co.id

Abstrak. Telah diisolasi rhodinol dari minyak sereh Jawa. Isolasi minyak sereh Jawa
dilakukan menggunakan destilasi fraksinasi pengurangan tekanan sehingga diperoleh fraksi
F3 (T=119o-136oC dan P=40 mmHg) dengan volume 50 mL dan persentase rhodinol sebesar
68,55%. Kemudian dipisahkan menggunakan kromatografi kolom tekan (KKT) dengan
komposisi eluen toluen : etil asetat bergradien (toluen 100% dan toluen : etil asetat = 12:0,1
; 12:0,5 ; 12:0,7) sehingga diperoleh isolat F3.4 dari hasil penggabungan beberapa fraksi.
Analisis terhadap isolat F3.4 dilakukan menggunakan spektrofotometer GC-MS dan IR.
Kromatogram GC-MS isolat F3.4 menunjukkan rhodinol 100% dengan persentase sitronelol
42,98% dan geraniol 57,02% yang berupa cairan minyak bening. Spektrum IR dari isolat F3.4
menunjukkan serapan –CH3 bending pada bilangan gelombang 1381,03 cm-1 dan 1458,18
cm-1 ; serapan C=C alkena pada bilangan gelombang 1604,77 cm-1; serapan -C-H (CH3 dan
CH2) streching alkana pada bilangan gelombang 2924,09 cm-1 dan 2870,08 cm-1 ; serapan
=C-H stretching alkena pada bilangan gelombang 3024,38 cm-1 ; serapan O-H pada bilangan
gelombang 3371,57 cm-1.

Kata kunci : minyak sereh Jawa, rhodinol, kromatografi kolom tekan.

PENDAHULUAN pengurangan tekanan. Khususnya sitronelol

Minyak sereh wangi, adalah salah satu
minyak atsiri yang merupakan komoditi di
sektor agribisnis memiliki pangsa pasar
yang baik dan berdaya saing kuat di pasaran
luar negeri. Minyak sereh wangi tersusun
dari tiga komponen utama yang dapat
memberikan aroma yang lembut sehingga
memiliki nilai jual sangat tinggi. Ketiga
komponen minyak sereh wangi yaitu
sitronelal, sitronelol dan geraniol dimana
sitronelol dan geraniol dalam perdagangan
dikenal dengan rhodinol.
Ketiga senyawa tersebut dalam
pemanfaatannya digunakan untuk bahan
baku industri fragrance, industri farmasi
dan keperluan pembuatan kosmetik
sehingga meningkatkan nilai jualnya.
Ketiga komponen ini dapat diisolasi dengan
cara destilasi fraksinasi dengan
dan geraniol hasil isolasinya masih dalam
bentuk campuran yang dikenal dengan
rhodinol. Kedua senyawa ini memiliki
struktur yang mirip dan hanya berbeda pada
jumlah ikatan rangkapnya. Titik didih
senyawa sitronelol 225o - 226oC dan
geraniol 229o - 230oC sehingga jika dilihat
berdasarkan titik didihnya senyawa ini sulit
dipisahkan dengan cara destilasi fraksinasi
pengurangan tekanan.
Isolasi rhodinol menggunakan cara
kimia dan cara fisika untuk memisahkan
rhodinol dari minyak sereh telah dilakukan.
Cara kimia dilakukan dengan merefluks
minyak sereh dengan logam Na pada media
n-heksan selama 1,5 jam. Hasil yang
diperoleh kemudian disaring dalam keadaan
panas sehingga diperoleh residu dan filtrat.
Residu dan filtrat masing-masing didestilasi
uap. Hasil destilasi residu diperoleh

Semirata 2013 FMIPA Unila |131

 Endah Sayekti dkk: Isolasi Rhodinol Dari Minyak Sereh Jawa Menggunakan Metode
Kromatografi Kolom Tekan
rhodinol sebesar 49,226%, sedangkan hasil
filtrat diperoleh sebesar 52,843%. Isolasi
dengan cara fisika dilakukan dengan
destilasi fraksinasi pengurangan tekanan
pada minyak sereh dan diperoleh 3 fraksi.
Rhodinol dengan persentase tertinggi
terdapat pada fraksi ke-3 sebesar 61,620%
pada tekanan 15 mmHg dan suhu 102o-
115oC.
Isolasi rhodinol juga dapat dilakukan
dengan cara merefluks residu minyak sereh
yang bebas sitronelal (sitronelal telah
dipisahkan dari minyak sereh dengan
menggunakan destilasi fraksinasi
pengurangan tekanan). Residu tersebut
direfluks dengan larutan NaOH melalui
reaksi penyabunan sehingga kadar rhodinol
meningkat kemudian dilakukan isolasi
rhodinol dengan cara destilasi fraksinasi
pengurangan tekanan. Hasil analisis GC-
MS menunjukkan pada fraksi ke-3
diperoleh kadar rhodinol sebesar 97% pada
tekanan 3 mmHg dan suhu 76o-77oC [4].
Rhodinol dapat diperoleh dengan kadar
82,42% pada tekanan 25 mmHg dan suhu
140o-160oC.
Rhodinol juga telah diisolasi melalui
reaksi penyabunan dengan NaOH [6]. Hasil
penyabunan diekstraksi dengan pelarut n-
heksan dengan perbandingan 1:1 ; 1:2 ; 1:3
; 1:4 ; 1:5 ; 1:6 serta mengoptimalkan
waktu ekstraksi pada interval 0,5 ; 1 ; 1,5 ;
2 ; dan 2,5 jam. Hasil penelitian diperoleh
ekstraksi rhodinol dengan n-heksan
optimum pada perbandingan rhodinol : n-
heksan (1:5) dengan waktu ekstraksi 2 jam
sehingga diperoleh rhodinol sebanyak
69,31%.
Isolasi sitronelol dari campurannya
geraniol juga telah dilakukan menggunakan
metode kromatografi kolom gravitasi
dengan variabel yang berbeda yaitu eluen
yang digunakan, ukuran dan cara packing
kolom, laju alir eluen, volume sampel yang
digunakan dan kecepatan tetes eluat [7].
Komposisi eluen yang digunakan etanol
95% : CCl4 (1:1), etanol 95% : CCl4 (1:4),
dan petroleum eter : benzena (1:1). Hasil
132|Semirata 2013 FMIPA Unila
pemisahan optimal dengan kadar sitronelol
71,43% dan geraniol 28,57% menggunakan
pelarut petroleum eter : benzene (1:1).
Walaupun demikian, sitronelol masih tetap
dalam campuran dengan geraniol sebagai
rhodinol.
Senyawa golongan terpen alkohol dari
tanaman obat herbal Thymus vulgaris dan
Thymus zygis telah diidentifikasi
menggunakan KLT dengan komposisi
eluen toluen : etil asetat (93:7) dan deteksi
noda menggunakan larutan vanilin. Hasil
analisis menunjukkan bahwa komponen
mengandung sitronelal dengan waktu
retensi (Rf) 0,7-0,8 dan geraniol dengan
waktu retensi (Rf) 0,15-0,35 dengan pola
noda berwarna biru.
Penelitian ini bertujuan untuk
mengisolasi rhodinol dari minyak sereh
Jawa menggunakan metode kromatografi
kolom tekan (KKT) dengan menggunakan
komposisi eluen toluen : etil asetat secara
bergradien. Selanjutnya hasil pemisahan
diidentifikasi dengan spektrofotometer IR
dan spektrofotometer GC-MS.
METODOLOGI PENELITIAN
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan pada penelitian
ini adalah alat-alat gelas kimia yang umum
digunakan di laboratorium kimia, bejana
KLT, botol semprot KLT, lampu UV,
neraca analitik (OHAUS Carat Series),
piknometer 10 mL, refraktometer (merek
ATAGO), satu set alat destilasi fraksinasi
dengan pengurangan tekanan, seperangkat
alat kromatografi kolom tekan (KKT),
spektrofotometer IR (FTIR SHIMADZU
PRESTIGE 21) dan spektrofotometer GC-
MS (SHIMADZU QP 2010). Bahan-bahan
yang diperlukan pada penelitian ini adalah
minyak sereh komersial yang diperoleh dari
toko Sari Warna Yogyakarta, etil asetat
(CH3COOC2H5), toluen (C7H8), plat KLT
slika gel F254 , silika gel 60 (230 – 400
mesh) dan vanillin 6,1%.
 Prosiding Semirata FMIPA Universitas Lampung, 2013
PROSEDUR PENELITIAN
Destilasi Fraksinasi Pengurangan
Tekanan pada Minyak Sereh
Sebanyak 500 mL minyak sereh
dimasukkan dalam labu alas bulat leher dua
berkapasitas 1L yang dilengkapi dengan
stirer dan termometer pada labu. Kemudian
labu destilasi alas bulat tersebut
dihubungkan dengan kolom vigreux
kemudian dipasang menjadi satu set alat
destilasi fraksinasi pengurangan tekanan.
Destilat ditampung dalam 3 fraksi dengan
mengamati perubahan suhu. Destilat dari
masing-masing fraksi selanjutnya diukur
berat jenisnya kemudian dibandingkan
dengan berat jenis rhodinol standar. Berat
jenis rhodinol standar 0,8549 gr/cm3 [9].
Selanjutnya terhadap destilat masing-
masing fraksi juga dilakukan pengukuran
indeks bias, kemudian hasilnya
dibandingkan dengan indeks bias rhodinol
standar. Indeks bias rhodinol standar
1,4556.
Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Plat KLT slika gel F254 dengan ukuran 1
x 5 cm disiapkan, kemudian sampel (fraksi
yang mengandung rhodinol tinggi)
ditotolkan pada plat KLT dengan
menggunakan pipa kapiler. Plat KLT
dibiarkan sesaat, kamudian dimasukkan ke
dalam bejana KLT yang sudah jenuh
dengan menggunakan pelarut toluen : etil
asetat (93:7) (Wagner, 1984). Plat KLT
yang telah dielusi dibiarkan kering lalu
disemprot dengan vanilin. Dipanaskan
sampai terlihat noda noda dan diamati pola
pemisahannya.
Kromatografi Kolom Tekan (KKT)
Disiapkan kolom dengan tinggi 30 cm
yang berdiameter 2 cm lalu dimasukkan
silika gel 60 (230 – 400 mesh yang terlebih
dahulu direndam toluen) dengan tinggi 20
cm. Sebanyak 5 mL sampel yang telah
dilarutkan dalam 3 mL toluen dimasukkan
ke dalam kolom yang telah diisi silika dan
dielusi menggunakan komposisi eluen
toluen : etil asetat bergradien. Komposisi
eluen yang digunakan adalah toluen 100%
dan toluen : etil asetat = 12:0,1 ; 12:0,5
dan 12:0,7. Tetes eluat ditampung tiap 5
mL/vial pada 5 botol vial pertama dan 3
mL/vial untuk vial berikutnya sehingga
diperoleh beberapa fraksi. Setiap fraksi
diuji dengan KLT dengan komposisi eluen
yaitu toluen : etil asetat (12:0,1) lalu
disemprot dengan larutan vanilin sebagai
penampak noda dan dipanaskan. Setiap
noda yang sama digabungkan dan
dilakukan KLT kembali. Setelah dua kali
pemisahan melalui kolom tekan, isolat
dengan noda utama (mayor) dan terpisah
dengan baik kemudian dianalisis
menggunakan spektrofotometer IR dan
spektrofotometer GC-MS untuk
diidentifikasi.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Destilasi fraksinasi pengurangan tekanan
terhadap minyak sereh diperoleh 3 fraksi
Tabel 1 . Data massa jenis ρ sebesar
0,8520 gr/cm3 dan indeks bias sebesar
1,4583 pada F3 yang mendekati nilai
rhodinol standar mendukung hasil GC-MS
pada F3. Maka kemudian terhadap sampel
F3 dilakukan pemisahan menggunakan
kromatografi kolom tekan. Pemilihan fasa
gerak dilakukan pada F3 menggunakan
kromatografi lapis tipis (KLT)
menggunakan pelarut toluen : etil asetat
(93:7) [8].
Pola noda hasil KLT F3 menggunakan
komposisi eluen toluen : etil asetat (93:7)
(analisis KLT menggunakan plat silika gel;
tebal 0,25 mm; ukuran 6,5x1 cm, jarak elusi
5 cm; penampak noda vanilin; dipanaskan)
menunjukkan sampel telah terelusi tetapi
antara noda belum terpisah dengan baik.
Oleh karena itu, kepolaran dari campuran
eluen perlu ditingkatkan. Kepolaran eluen
ditingkatkan pada komposisi eluen yaitu
toluen : etil asetat (99:0,1 ; 10:0,1 ; 12:0,1 ;
12:0,5 ; 12:0,7 dan 12:1). Berdasarkan hasil
Semirata 2013 FMIPA Unila |133
 Endah Sayekti dkk: Isolasi Rhodinol Dari Minyak Sereh Jawa Menggunakan Metode
Kromatografi Kolom Tekan

KLT maka pemilihan eluen untuk

Kromatografi Kolom Tekan (KKT) dimulai
dari variasi eluen yang bersifat nonpolar
dan ditingkatkan kepolaran dengan eluen
yang bersifat semipolar (Tabel 2).
Hasil KKT menggunakan komposisi
eluen toluen : etil asetat (12:0,1) (analisis
KLT menggunakan plat silika gel; tebal
0,25 mm; jarak elusi 4 cm; penampak noda
vanilin; dipanaskan) diperoleh 233 fraksi. Gambar 1. Kromatogram GC isolat F3.4 hasil KKT
Selanjutnya terhadap sejumlah 233 fraksi
tersebut, dilakukan penggabungan fraksi Tabel 5. Interpretasi hasil identifikasi IR
(Tabel 3). pada F3.4
Tahap selanjutnya dilakukan KLT pada Bilangan Jenis gugus fungsi
F3.2 dan F3.4 untuk melihat kembali pola gelombang (cm-1)
1381,03 ; 1458,18 -CH3 bending (sedang)
noda hasil penggabungan. Pola noda F3.2 1604,77 C=C alkena
dan F3.4 dari fraksi gabungan hasil 2924,09 ; 2870,08 -C-H(CH3 dan CH2) alkana streching
3024,38 =C-H alkena (stretch)
pemisahan dengan KKT menggunakan 3371,57 O-H melebar
komposisi eluen toluen : etil asetat (12:0,1)
(analisis). Hasil analisis isolat F3.2 menggunakan
KLT menggunakan plat silika gel; tebal
GC-MS menunjukkan 3 puncak yaitu
0,25 mm; jarak elusi 4 cm; penampak noda
vanilin; dipanaskan), menunjukkan nilai Rf sitronelal 6,89%, sitronelil asetat 40% dan
F3.2 = 0,825, Rf F3.4 = 0,325 dan noda geranil asetat 53,11%. Hal ini menunjukkan
berwarna biru. Nilai Rf F3.4 termasuk ke pada F3.2 tidak terdapat rhodinol.
dalam rentang nilai Rf geraniol yang Kromatogram GC isolat F3.4 hasil KKT
terindikasi bahwa F3.4 mengandung menunjukkan 2 puncak yaitu sitronelol
senyawa geraniol. 42,98% dan geraniol 57,02%. Hal ini
menunjukkan isolat F3.4 adalah murni
Tabel 2 Data variasi eluen untuk KKT pada
pemisahan rhodinol nggunakan plat silika senyawa rhodinol.
gel; Berdasarkan hasil analisis GC-MS yang
Eluen Perbandingan Volume Jumlah didukung dengan hasil analisis IR, dapat
eluen total Elusi
(dalam 100 mL) (mL) disimpulkan bahwa rhodinol murni terdapat
Toluen 100% 100 1x
Toluen : Etil asetat 12:0,1 400 4x pada F3.4 dengan jumlah persentase kedua
Toluen : Etil asetat 12:0,5 200 2x senyawa adalah 100%.
Toluen : Etil asetat 12:0,7 200 2x

Tabel 1. Hasil destilasi fraksinasi pengurangan tekanan dari minyak sereh Jawa pada tekanan
4 cmHg (40mmHg) berdasarkan analisis GC-MS

Fraksi Kode Suhu (oC) Volume Indeks Massa jenis Kadar Kadar
ke fraksi (mL) bias (gr/cm3) sitronelol geraniol
1 F1 89o-102oC 50 1,4595 0,8267 - -
2 F2 102o-119oC 150 1,4500 0,8339 7,50 % 7,37 %
3 F3 119o-136oC 50 1,4583 0,8520 29,41 % 39,14%

Tabel 4. Data m/z komponen F3.4 yang dianalisis dari GC-MS

134|Semirata 2013 FMIPA Unila

 Prosiding Semirata FMIPA Universitas Lampung, 2013

Puncak Waktu Luas SI Berat Fragmentasi (m/z) Perkiraan

retensi (% area) molekul senyawa
1 8,751 42,98 98 156 41,55,69,81,95,109,1 Sitronelol
23,138,156
2 9,416 57,02 96 154 41,53,69,70,93,111, Geraniol
123,139

KESIMPULAN 1991, Universitas Erlangga, Surabaya

Berdasarkan hasil penelitian, dapat
diambil kesimpulan sebagai berikut:
1. Isolasi rhodinol (sitronelol dan geraniol)
dapat dilakukan dengan metode
kromatografi kolom tekan (KKT)
menggunakan eluen bergradien yaitu
toluen 100% dan toluen : etil asetat
dengan komposisi 12:0,1 ; 12:0,5 dan
12:0,7.
2. Hasil isolasi rhodinol dari minyak sereh
Jawa berdasarkan identifikasi dengan
GC-MS diperoleh kemurnian yang
tinggi dengan luas area sitronelol
42,98% dan geraniol 57,02% (total
rhodinol 100%).
DAFTAR PUSTAKA
Gunawan, W., 2009, Kualitas dan Nilai
Minyak Atsiri, Implikasi pada
Pengembangan Turunannya, Makalah
disampaikan pada Seminar Nasional
dengan tema: Kimia Bervisi SETS
(Science Environment, Technology,
Society) Kontribusi Bagi Kemajuan
Pendidikan dan Industri,
diselenggarakan Himpunan Kimia
Indonesia Jawa Tengah, 21 Maret 2009,
Semarang. Hal 5.
Sastrohamidjojo, H., 1994, Kimia Minyak
Sereh, Jurnal Berkala Ilmiah FMIPA
UGM, Thn.5, 1:43, Workshop on
Research in Essential Oils, 12-14 Maret
Karlos, E., 1998, Sintesis Awal Senyawa
Eter dari Rhodinol Hasil Isolasi Minyak
Sereh, Skripsi, FMIPA, UGM,
Yogyakarta.
Sastrohamidjojo, H., 1981, A Study of
Some Indonesian Essential Oil, Disertasi
S3, FMIPA, UGM, Yogyakarta.
Sayekti, E., 2002, Konversi Ionon menjadi
Ionon dan Ionil Asetat melalui Reaksi
Reduksi dan Esterifikasi, Tesis S2,
FMIPA, UGM, Yogyakarta.
Utomo, H.P. dan Widiatmoko, N., 2008,
Isolasi Rhodinol dalam Ekstraksi
Minyak Sereh Jawa, Makalah Penelitian,
Fakultas Teknik, Universitas
Diponegoro, Semarang.
Utami, N., 1987, Mempelajari Isolasi
Sitronelol dari Rhodinol dalam Minyak
Sereh (Javanese citronella oil) dengan
Kromatografi Kolom, Skripsi, FMIPA,
UGM, Yogyakarta, Hal 5-10.
Wagner, H. and Bladt, S., 1984, Plant Drug
Analysis: A Thin Layer Chromatography
Atlas, Springer-Verlag Berlin
Heidelberg.
O'neil, M.J.;Ann, S. dan Patrida, E.H.,
2001, The Merck Index : an
Encyclopedia of Chemicals, Drugs and
Biologicals, Edisi Ketiga, Penerjemah :
Susan Budavari, MERCK CO.,Inc, New
Jersey.

Semirata 2013 FMIPA Unila |135