Penyakit paru obstruktif kronik (PPOK) didefinisikan oleh Global Initiative for Chronic

Obstructive Penyakit Paru-paru sebagai keadaan penyakit yang dicirikan oleh pembatasan
aliran udara yang tidak sepenuhnya reversibel, biasanya pro-gressive, dan berhubungan
dengan abnormal respon peradangan paru-paru untuk partikel berbahaya atau gas (Vestbo et
al., 2013). Respon inflamasi ini terkait dengan proses remodeling jaringan yang
menghasilkan lesi paru yang berhubungan dengan kronis yang menghasilkan lesi paru yang
berhubungan dengan kronis bronkitis, obstruksi jalan nafas kecil, dan emfisema-tous
destruksi (MacNee, 2005; Hogg, 2008; Vestbo et al., 2013). Emphysema ditandai oleh
penghancuran dinding alveolar dan pembesaran ruang udara di bronchioles terminal.
Emphysematous perubahan mengurangi aliran ekspirasi maksimum dengan mengurangi
kekuatan recoil elastis yang mendorong udara keluar dari paru-paru (Mead et al., 1967).

Meskipun beberapa laporan telah menunjukkan hal itu PPOK dimulai di saluran udara kecil
dan menyebar ke dinding alveolar (Leopold dan Gough, 1957; Hogg et al., 2004), lubang
abnormal (fenestrae) di dinding dianggap sebagai penanda awal kerusakan alveolar (Boren,
1962; Nagai et al., 1994). Namun, fenestrae telah diamati di paru-paru usia lanjut tanpa
riwayat penyakit pernapasan (Pump, 1976).

Diperlukan mikroskop elektron scanning mengamati alveolar fenestrae (Cosio et al., 1986;
Nagai et al., 1994) karena mereka tidak dapat dideteksi secara dua dimensi pada slide yang
digunakan untuk diag-noses patologis. Pompa menggunakan potongan tebal 100–500 lm dari
blok parafin dan memeriksa alveolar fenestrae tiga dimensi dengan mikroskop cahaya (Pump,
1976). Kami telah berkembang dengan cepat dan sederhana metode untuk membangun
gambar tiga dimensi dari blok parafin menggunakan mikroskop cahaya, komputer perso-nal,
dan perangkat lunak pencitraan NIH (Honda et al., 2000, 2002a, b; Uehara et al., 2004).
Analisis tiga dimensi memberikan lebih banyak morfologi informasi dari dua dimensi.

Patogenesis PPOK terkait dengan yang kronis respon imun inflamasi bawaan dan adaptif
untuk menghirup partikel dan gas beracun, terutama sebagai hasil merokok (Hogg, 2008).
Selain itu, ketidakseimbangan antara protease dan inhibitornya diyakini menjadi penting
untuk pengembangan pulmonary emphy-sema (Brusselle et al., 2006). Pneumosit tipe II dan
sel-sel inflamasi juga telah terlibat di dalamnya patogenesis emfisema (Eidelman et al., 1990;
Otto-Verberne et al., 1991).

Dalam penelitian ini, kami mengamati perkembangan perusakan dinding alveolar pada
emfisema parutiga dimensi pada bagian tebal menggunakan cahaya mikroskop dan
mikroskop confocal laser.

MATERIAL DAN METODE

Spesimen paru-paru dari lima pasien dengan paru emfisema dan spesimen kontrol dari lima
pasien tanpa emfisema pulmonal digunakan dalam hal ini belajar. Semua sepuluh pasien
menjalani operasi untuk paru-paru kanker di Rumah Sakit Universitas Shinshu pada tahun
2000. Kelima pasien dengan emfisema paru adalah laki-laki (Usia rata-rata: 72 tahun,
kisaran: 67-78) dan perokok (riwayat merokok, berarti: 56 bungkus per tahun, kisaran: 40–
78). Tiga dari pasien ini mengalami sedikit dispnea ketika mereka pergi menanjak dan dua
lainnya tidak gejala. Pada semua lima pasien, nilai FEV1 / FVC adalah <0,70 dan CT scan
menunjukkan daerah dengan kepadatan rendah pra-dominan di pusat lobulus.
Merekadidiagnosis menderita emfisema pulmonal dengan merokok, dan mereka ditugaskan
ke Grup Pasien

A oleh penilaian gabungan PPOK dari ringkasan eksekutif GOLD (Vestbo et al., 2013).
Kontrol, dalam kontras, dipilih untuk dinding alveolar normal; mereka terdiri dari empat
perempuan dan satu laki-laki (usia rata-rata: 55 tahun tahun, kisaran 45-62), dan semua bukan
perokok yang tidak memiliki keterbatasan aliran udara dan tidak ada temuan CT yang
menyarankan empisema.

Segera setelah lobektomi, lobus diperbaiki dengan menyuntikkan 10% buffer formalin
langsung ke dalam bronkus, dan kemudian dicelupkan ke dalam fiksatif yang sama untuk 48
jam Emfisema dan jaringan paru-paru normal cukup jauh dari lesi kanker primer. Itu jaringan
mengalami dehidrasi melalui alkohol bergradasi, dibersihkan dalam xilena, dan ditanam
dalam parafin. Beberapa potongan kecil berukuran 7 3 7 mm dipotong dari blok parafin, dan
mereka dipotong pada 150 lm ketebalan pada vibratome.

Bagian tebal ini deparaffinized di xylene,direndam dalam salin fosfat-buffered, dan kemudian
diwarnai dengan mengambang dalam tabung 1,5-ml tanpa pemasangan slide kaca. Bagian
tebal bernoda sebagai berikut: (1) pewarnaan hematoxylin dan eosin; (2) elastica pewarnaan,
yang melibatkan inkubasi dalam elastika solusi [100 ml etanol 70% yang mengandung 4 ml
37% HCl dan 0,1 g Resorcin-Fuchsin (Chroma-Gesellschaft, Stuttgart, Jerman)] selama 12
jam pada suhu kamar sebelum berkumur dengan 50% etanol dan kemudian dengan air
mengalir; (3) pewarnaan impregnasi perak, yang terlibat inkubasi dalam perak nitrat amonia
untuk 10 min setelah oksidasi dalam 0,1% kalium permanganat dan pengurangan 2% asam
oksalat; (4) immunostaining dengan anti-Thomsen-Friedenreich (TF) monoclonal anti-body
(DAKO, Grostrup, Denmark) untuk pneumonia tipe II dengan atau tanpa pretreatment
dengan neuraminidase (dari ureafaciens Arthrobactor; Nakarai Chemicals, Kyoto, Jepang; 1
unit / ml dalam 0,05 M buffer fosfat, pH 7,0) selama 12 jam pada 37 C, anti-a-otot aktin otot
(DAKO) untuk myofibroblasts, atau CD34 (DAKO) untuk kapiler, selama 18 jam pada 4 C.
Inibagian divisualisasikan dengan menginkubasi IgG anti-tikus antibodi berlabel dengan
FITC (DAKO) selama 18 jam pada 4 C.

Rekonstruksi tiga dimensi dihasilkan dari 10 gambar yang diambil secara serial dari bagian
tebal diwarnai dengan elastica, pewarnaan impregnasi perak, dan immunostaining dengan
anti-TF menggunakan yang sebelumnya metode yang dijelaskan (Honda et al., 2000).
Bagian-bagiannya diwarnai dengan antibodi monoklonal diperiksa di bawah mikroskop
confocal laser (Karl Zeiss, Jena, Jerman). Rekonstruksi tiga dimensi dihasilkan dari 20
hingga 30 gambar serial. Ini penelitian disetujui oleh Komite Etika di Sekolah Kedokteran
Universitas Shin-shu (No. 1396).