PENGEKSTRAKAN MINYAK ALGA DARI MIKROALGA AIR TAWAR

Chlorella vulgaris
Nurfarahanim Abdullah, Nur Amelia Amran, Nur Hidayah Mat Yasin*

Faculty of Chemical Engineering & Natural Resources, Universiti Malaysia Pahang, 26300
Gambang, Pahang, Malaysia

Abstrak : Kajian ini bertujuan untuk mengkaji keadaan optimum bagi kaedah pengekstrakan
minyak dalam usaha untuk mendapatkan hasil minyak maksimum daripada mikroalga air tawar
Chlorella vulgaris. Kaedah pengekstrakan soxhlet yang diubah suai digunakan untuk mengenal
pasti sistem pelarut yang terbaik iaitu heptana, heptana: metanol (1:1), heptana: metanol (1:2),
heptana: etanol (1:1) dan heptana: etanol (1:2) untuk mengekstrak minyak mikroalga. Kesan
daripada kadar pencampuran yang berbeza (rpm), suhu (oC) dan masa pengekstrakan (jam) telah
dijalankan dengan menggunakan sistem pelarut yang telah dioptimumkan untuk menilai keadaan
optimum pengekstrakan minyak. Berdasarkan hasil pengeluaran minyak, heptana bersendirian
menjadi pelarut terbaik untuk mengeluarkan minyak dengan hasil sebanyak 57.5%, diikuti oleh
heptana: metanol (1:2), heptana: etanol (1:1), heptana: etanol (1:2) dan heptana: metanol (1:1)
dengan hasil masing – masing 47.5%, 44.8%, 43.2% dan 41.4%. Kuantiti minyak maksimum
61.27% telah diperolehi selepas biojisim Chlorella vulgaris diekstrak menggunakan heptana
sebagai pelarut pada keadaan optimum berikut: kadar percampuran 600 rpm, suhu 65 oC dan 5
jam masa pengekstrakan. Kajian ini mengesahkan bahawa suhu meningkat menyebabkan
peningkatan hasil minyak, tetapi pada suhu yang lebih tinggi (lebih daripada 65 oC), hasil
minyak telah berkurangan. Suhu yang terlalu tinggi dalam pengekstrakan minyak boleh
menyebabkan penguraian sebahagian daripada sel-sel alga dan seterusnya mengurangkan hasil
minyak yang dikeluarkan.

Kata kunci : pengekstrakan soxhlet, pengekstrakan minyak, mikroalga air tawar, Chlorella
vulgaris, sistem pelarut

Pengantar

Keterbatasan bahan bakar fosil telah membawa studi tentang mikroalga sebagai bahan baku yang
menjanjikan untuk diproduksi biodiesel. Mikroalga tampaknya menjadi sumber produksi
biodiesel karena tingkat pertumbuhan yang tinggi tanpa bersaing untuk lahan subur yang
membuat ganggang menjadi bahan baku yang menarik untuk portofolio bahan bakar
berkelanjutan [1]. Selain, ia memiliki potensi untuk menghasilkan lebih banyak minyak
dibandingkan dengan bahan baku lainnya [2] seperti rapeseed, kedelai, bunga matahari dan
telapak tangan. Selain itu, biodiesel mikroalga tidak beracun, sangat terdegradasi secara biologis;
tidak mengandung belerang danbahan yang tersisa setelah mengekstraksi minyak dapat
digunakan untuk produksi etanol atau sebagai pupuk tanah [3]. Tambahan, produk biodiesel
terbarukan dari mikroalga mampu memenuhi permintaan global untuk bahan bakar transportasi
dan minyak produktivitas mikroalga sangat melebihi produktivitas minyak dari tanaman minyak
penghasil terbaik seperti jagung.

Chisti [4] melaporkan bahwa Chlorella sp., Spirulina sp. dan Nitzschia sp. adalah sumber
mikroalga utama yang ada biasanya digunakan untuk memproduksi biodiesel. Ini karena ketiga
spesies mikroalga ini menghasilkan kandungan minyak tertinggi (% berat kering) di antara
spesies lain dengan kandungan minyak 28-32% yang diproduksi oleh Chlorella sp., Spirulina sp.
menghasilkan 50 - 77% kandungan minyak dan Nitzschia sp. menghasilkan sekitar 45 - 47%
kandungan minyak. Menurut Islam et al. [5], mikroalga telah menerima banyak perhatian
sebagai sumber energi terbarukan baru dalam bentuk biodiesel. Namun, tidak demikian namun
layak secara komersial karena tingginya biaya proses produksi dan juga terbatasnya informasi
yang tersedia di parameter yang mempengaruhi ekstraksi minyak mikroalga untuk produksi
biodiesel komersial. Untuk alasan ini, akuantifikasi kuat dari parameter ekstraksi sangat penting
untuk mengoptimalkan dan akibatnya meningkatkan kelayakan dari proses.

Ekstraksi minyak dari ganggang adalah topik yang hangat diperdebatkan saat ini karena proses
ini adalah salah satu proses yang lebih mahal yang dapat menentukan keberlanjutan biodiesel
berbasis ganggang. Berbagai metode untuk mengekstrak minyak dari mikroalga adalah tersedia
seperti expeller / press, ekstraksi pelarut dan ekstraksi fluida superkritis [2]. Penekan expeller
adalah metode mengekstraksi minyak dengan mesin press daripada menggunakan proses
ekstraksi kimia dan metode ini memberikan hasil hanya 65 - 70% dari minyak [6] sementara
ekstraksi menggunakan cairan superkritis memberikan kemurnian yang sangat tinggi dan
konsentrasi produk yang baik tetapi biaya operasi dan investasi tinggi [7].

Metode ekstraksi pelarut adalah teknik yang umum dan efisien untuk memproduksi minyak
untuk produksi biodiesel memulihkan hampir semua minyak dan hanya menyisakan 0,5% hingga
0,7% sisa minyak dalam bahan baku [8] dan juga melibatkan transfer fraksi yang larut dari bahan
padat ke pelarut cair. Selain itu, metode ini memiliki biaya operasi yang relatif rendah
dibandingkan dengan ekstraksi fluida superkritis [9]. Namun, ada yang pasti kerugian untuk
metode ekstraksi pelarut seperti ekstraksi yang buruk dari lipid polar, waktu yang lama
diperlukan untuk ekstraksi dan bahaya pelarut yang mendidih [10].

Untuk mendapatkan jumlah ekstraksi minyak maksimum dengan menggunakan metode ekstraksi
pelarut, kondisi optimal PT proses ekstraksi untuk semua parameter yang digunakan dalam
penelitian ini harus dioptimalkan. Karena itu, berikut tujuannya harus dicapai dalam
penyelidikan ini yaitu i) untuk menyelidiki ekstraksi minyak biomassa menggunakan mikroalga
lima sistem pelarut yang berbeda dan ii) untuk menilai efisiensi metode ekstraksi pelarut dengan
penggunaan tiga parameter yang berbeda seperti tingkat pencampuran, suhu dan waktu ekstraksi
untuk mendapatkan ekstraksi minyak maksimum.
 Bahan dan metode

Mikroalga

Mikroalga Chlorella vulgaris digunakan dalam penelitian ini. Strain mikroalga C. vulgaris
diperoleh dari Koleksi Budaya Alga dan protozoa (CCAP). C. vulgaris tampaknya menjadi
pilihan terbaik dan paling cocok spesies alga untuk memproduksi biodiesel [11]. Ini adalah salah
satu spesies mikroalga paling menarik untuk ekstraksi minyak karena pertumbuhannya yang
cepat dan budidaya yang mudah [12]. Selain itu, strain menjadi yang paling disukai oleh para
peneliti [13] karena memiliki kandungan lipid yang tinggi dan mudah tumbuh di laboratorium.

Persiapan media

Mikroalga uniseluler C. vulgaris sebenarnya dibiakkan dalam Medium Basal Bold dengan
nitrogen 3 kali lipat dan vitamin (BBM) dengan menambahkan 20 mL (BBM) (I), 12 mL BBM
(II), dan masing-masing 2 mL BBM (III) dan BBM (IV) ke 2000 mL air suling steril (DW).
BBM (I) mengandung senyawa berikut per 1 L DW: 75,0 g NaNO3, 2,5 g CaCl2.2H2O, 7,5 g
MgSO4.7H2O, 7,5 g K2HPO4.3H2O, 17,5 g KH2PO4 dan 2,5 g NaCl,

BBM (II) mengandung senyawa berikut per liter DW: 97,0 mg FeCl3.6H2O, 41,0 mg
MnCl2.4H2O, 5,0 mg ZnCl2, 2,0 mg CoCl2.6H2O dan 4,0 mg Na2MoO4.2H2O, BBM (III)
mengandung 0,12 g vitamin B1 (Thiaminhydrochloride) per 100 mL DW dan BBM (IV) terdiri
dari 0,1 g vitamin B12 (Cyanocobalamin) per 100 mL DW.

Persiapan kultur Chlorella vulgaris

Prosesnya telah dilakukan dengan menggunakan teknik aseptik untuk menghindari kontaminasi
terhadap mikroalga dan media. Media dan labu disterilkan dalam autoclave, HV-85
(HIRAYAMA, Jepang) selama 15 menit pada 121⁰C. Sekitar, 5 mL biakan stok mikroalga
diunggulkan ke dalam 2 L botol Schott yang diisi dengan 2 L DW steril yang mengandung BBM
(I-IV) pada 25 ⁰C. Dua lampu neon digunakan untuk penerangan yang terus menerus dan
dikultur dengan terus menerus diangin-anginkan selama 12 hari dengan menggelembungkan
udara melewatinya pada tekanan konstan [13].

Pemanenan mikroalga

Sel-sel C. vulgaris dipanen menggunakan model centrifuge 5810 R (Eppendorf, Malaysia) pada
8000 rpm selama 10 menit. Setelah sentrifugasi, solusi yang jelas telah dibuang dan biomassa C.
vulgaris yang dihasilkan dibilas sekali dengan air terionisasi untuk menghilangkan sisa nutrisi
[14].

Pengeringan beku mikroalga

Ekstraksi dilakukan pada biomassa kering. Oleh karena itu, pengering beku digunakan untuk
mengeringkan biomassa mikroalga sebelum ekstraksi minyak diambil alih. Biomassa
dikeringkan semalam dengan menggunakan pengering beku, RP2 V (SGD Serail Argenteuil,
Perancis) untuk mengukur berat kering sel [15].

Penghancuran sel mikroalga

Sampel beku-kering 0,05 g biomassa C. vulgaris bersama dengan 16,6 mL DW ditempatkan ke

dalam 250 mL bulat labu bawah dan kemudian disonikasi selama 5 menit untuk melisiskan sel
[15].

Ekstraksi minyak

Metode ekstraksi pelarut dengan menggunakan modifikasi Soxhlet ekstraksi (SE) digunakan
dalam proses ekstraksi minyak. Pengaturan ekstraksi Soxhlet yang dimodifikasi terutama terdiri
dari peralatan berikut: kondensor, retort stand, hot plate pengaduk, gelas kimia 1L, tabung dan
labu alas 250 mL. Sekitar 27,2 mL sistem pelarut digunakan untuk masing-masing 0,05 g
biomassa mikroalga beku-kering dalam langkah ekstraksi. Lima sistem pelarut yang berbeda
digunakan untuk itu ekstrak minyak dari biomassa C. vulgaris yang heptana, heptana: metanol
(1: 1), heptana: metanol (1: 2), heptana: etanol (1: 1) dan heptana: etanol (1: 2). Ekstraksi
berlangsung sekitar 5 jam untuk mengekstraksi minyak dari mikroalga. Pengaduk magnet
digunakan untuk mencampur biomassa dengan pelarut pada kecepatan pencampuran 600 rpm
dan suhu 65 oC. Setelah 5 jam ekstraksi, campuran kemudian disentrifugasi pada 4000 rpm
selama 2 menit dan mengakibatkan pemisahan menjadi tiga lapisan [15]. Lapisan atas hanya
mengandung air, sedangkan lapisan tengah adalah biomassa dan lapisan terendah adalah
campuran pelarut minyak. Lapisan terendah dikumpulkan dan diuapkan menggunakan rotary
evaporator model BUCHI Rotavapor R-200 untuk mendapatkan minyak mikroalga. Setelah itu,
ekstraksi dieksekusi secara berbeda parameter seperti laju pencampuran, suhu dan waktu
ekstraksi untuk meningkatkan hasil minyak dari biomassa C. vulgaris menggunakan pelarut
terbaik dari hasil sebelumnya. Rincian percobaan dirangkum dalam Tabel 1.