POLTEKKES KEMENKES YOGYAKARTA

JURUSAN ANALIS KESEHATAN

INSTRUKSI KERJA
METODE PEMERIKSAAN HITUNG
JUMLAH LEUKOSIT
No. Dokumen Halaman Hal 1 dari 4
Berlaku efektif Tanggal ……. Revisi No. 00

1. Tujuan
Untuk mengetahui jumlah sel lekosit dalam sample darah yang dinyatakan dalam
satuan per mmk .
2. Ruang Lingkup
Hitung Jumlah Lekosit adalah menghitung keseluruhan jumlah lekosit dalam
sample darah .Larutan TURK akan menghancurkan sel-sel selain sel lekosit yaitu
sel sel yang tidak berinti ( eritrosit dan trombosit) sehingga jumlah sel lekosit bisa
ditetapkan. Dalam hal ini reagen TURK berperan sebagai pengencer darah,
pewarna lekosit, lisis non lekosit dan memfiksasi lekosit. Pada keadaan dimana
eritroblas ikut beredar didarah tepi bisa terhitung sebagai lekosit sehingga harus
dilakukan koreksi terhadap jumlah lekosit. Jumlah normalnya ialah 4000 sampai
11.000 sel/mmk darah , kurang dari 4000/mmk disebut lekopenia sedangkan
jumlah lekosit lebih dari 11.000/mmk disebut lekositosis. Lekopenia bisa dijumpai
misalnya pada anemia, infeksi virus sedangkan lekositosis bisa dijumpai pada
leukemia akut ataupun kronis, demam thypoid dsb.
3. Acuan
3.1 Ganda Soebrata. R, Prof. DR. Penuntun Laboratorium Klinik, Dian Rakyat,
Jakarta, 1992.
3.2 Anonim, Hematologi, Pusat Pendidikan Tenaga Kesehatan Depkes RI.
Jakarta, 1989

4. Definisi
4.1 Hitung jumlah sel lekosit
Menghitung sejumlah sel lekosit yang ditemukan pada bilik hitung Improved
neubauer dalam volume kotak tertentu dan dinyatakan dalam per mmk darah.
4.2 Sel lekosit
Ialah sebagian elemen seluler penyususn darah sebagai Macam-macam
lekosit yang terdapat dalam apusan darah tepi yang telah dilakukan
pewarnaan Giemsa
4.3 Lekosit
Sel darah putih yang mempunyai 6 jenis dalam apusan darah tepi yang telah
dilakukan pewarnaan Giemsa
4.4 Bilik Hitung.
Adalah suatu instrumentasi berupa bilik hitung yang padanya terdapat kotak
kotak untuk hitung lekosit, eritrosit dan trombosit. Beberapa jenis bilik hitung
misalnya Impruved Double Neubauer, Thoma, Turk, Fucs Rosental dll.
Digunakan untuk metode penghitungan sel secara manual.
 POLTEKKES KEMENKES YOGYAKARTA
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
INSTRUKSI KERJA
METODE PEMERIKSAAN HITUNG
JUMLAH LEUKOSIT
No. Dokumen Halaman Hal 2 dari 4
Berlaku efektif Tanggal ……. Revisi No. 00

4.5 Mikroskup
Adalah suatu alat optik tersusun dari seperangkat lensa-lensa tertentu
dengan fungsi tertentu digunakan untuk melihat dan mengamati benda-
benda mikroskopis, misalnya bakteri, virus, elemen seluler darah dsb.
4.6 Pipet otomatik
Adalah suatu alat yang digunaklan mengambil sejumlah volume tertentu dari
suatu cairan dengan ukuran yang sangat tepat.
4.7 Sel counter
Adalah suatu teknik penghitungan dengan menggunakan alat hitung dengan
teliti.
4.8 Larutan TURK
Adalah suatu larutan pengencer darah yang digunakan pada penghitungan
sel lekosit. Darah dalam larutan TURK maka sel sel selain lekosit akan
hancur, sehingga jumlah lekosit bisa ditentukan.
4.9 Per mmk darah.
Adalah satuan untuk menyatakan jumlah keseluruhan sel lekosit dalam
satuan setiap mmk darah mengandung sel lekosit sejumlah tertentu. Normal
jumlah lekosit 4.000 sampai 11.000 untuk setiap mmk darah pada orang
dewasa.
4.10 Lekositosis
Ialah keadaan dimana didalam darah mengandung jumlah sel lekosit lebih
dari 11.000 sel per mmk darah.
4.11 Lekopenia
Ialah keadaan dimana didalam darah terdapat sejumlah sel lekosit yang
kurang dari 4.000 sel per mmk darah.
4. Prosedur
4.1. Tanggung Jawab dan Wewenang
Mahasiswa Jurusan Analis Kesehatan Semester II
a. Pelaksanaan
4.1.1 Siapkan alat dan bahan yang diperlukan dan mencuci tangan
sesuai SOP mencuci tangan
4.1.2 Lakukan pengenceran darah dengan larutan TURK yaitu 0,5 ml
reagen TURK dalam suatu tabung serologi ditambah dengan 20 ul
darah EDTA.
4.1.3 Campur sampai homogen
4.1.4 Siapakan bilik hitung Improved Neubauer dengan cara
,membersihkan dan memasangkan gelas penutup sedemikian rupa
sehingga gelas penutup ini menempel kuat pada bilik hitung
ditandai dengan adanya pelangi pada daerah parit.
 POLTEKKES KEMENKES YOGYAKARTA
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
INSTRUKSI KERJA
METODE PEMERIKSAAN HITUNG
JUMLAH LEUKOSIT
No. Dokumen Halaman Hal 3 dari 4
Berlaku efektif Tanggal ……. Revisi No. 00

4.1.5
Lihat dibawah mikroskup dengan perbesaran 10 X untuk emastikan
ruang hitung kususnya ruang l;ekosit cukup bersih.
4.1.6 Pipet dengan pipet Pasteur darah yang sudah diencerkan dengan
larutan TURK dengan lebih dulu mencampunya beberapa saat.
4.1.7 Tuangkan melalui ruang antara gelas penutup dengan bilik hitung
dan biarkan larutan akan mengalir dengan dengan daya
kapilaritasnya sampai semua ruang hitung terisi oleh larutan.
4.1.8 Periksa dengan perbesaran lensa obyektif 10 X dan hitung jumlah
sel lekosit yang tampak intinya berwarna ungu gelap sedangkan
sitoplasmanya tidak berwarna dengan bentuk sel bulat atau
lonjong.
4.1.9 Hitung jumlah lekosit tersebut pada 4 bidang kotak lekosit dsengan
perjanjian kiri atas atau kanan bawah
4.1.10 Hitung jumlah lekosit per mmk darah dengan rumus perhitungan ;
N X I/volume kotak X pengenceran.
4.1.11 Bersihkan semua peralatan yang digunakan, mikroskup kembalikan
dialmari kusus mikroskup.
5. Jaminan mutu dan pengendalian mutu
5.1 Jaminan mutu
5.1.1 Gunakan alat APD sesuai SOP penggunaan APD
5.1.2 Melaksanakan administrasi sample pemeriksaan sesuai
SOP penanganan sample .
5.1.3 Gunakan mikroskup sesuai SOP penggunaan mikroskup.
5.1.4 Pemipetan darah dan reagen sesuai SOP penggunaan pipet
otomatik.
5.2 Pengendalian mutu
5.2.1 Perbandingan darah dan pengencer harus tepat
5.2.2 Ujung luar tip setelah memipet darah harus diusap dengan
tissue.
5.2.3 Penghitungan harus dengan perjanjian kiri atas atau kanan
bawah.
5.2.4 Sel lekosit yang dihitung ialah bulat atau lonjong, inti ungu
gelap dan sitoplasma tidak berwarna atau transparan.
6. Rekomendasi
Setiap memipet sample darah atau darah yang telah diencerkan dengan larutan
TURK harus dikocok lebih dulu untuk menghindari hasil yang rendah atau tinggi
palsu. Jumlah sel lekosit antar kotak I,II, III dan IV sebaiknya selisihnya tidak lebih
dari 10 sel.
7. Dokumentasi
 POLTEKKES KEMENKES YOGYAKARTA
JURUSAN ANALIS KESEHATAN
INSTRUKSI KERJA
METODE PEMERIKSAAN HITUNG
JUMLAH LEUKOSIT
No. Dokumen Halaman Hal 4 dari 4
Berlaku efektif Tanggal ……. Revisi No. 00

7.1 SOP penggunaan APD

7.2 SOP mencuci tangan
7.3 SOP penganganan bahan pemeriksaan
7.4 SOP penggunaan mikroskup
7.5 SOP penggunaan pipet otomatik
8. Pelaporan
Catat pada buku kerja hal-hal sebagai berikut :
8.1 Ada tidaknya hemolisa dan atau bekuan darah dalam sampel
8.2 Hasil penghitungan sel lekosit kotak I, II, III dan IV
8.4 Hasil perhitungan jumlah lekosit per mmk darah.

PENGESAHAN DOKUMEN

Tanda
PROSES Jabatan Nama Tanggal
Tangan
Perumusan Instruktur Lab/???

Pemeriksa Ka Unit

Penetapan Ketua Prodi

Pengendalian Sub Unit

Penjaminan Mutu