Remdesivir and chloroquine effectively inhibit the recentlyemerged novel coronavirus (2019-nCoV) in

vitro

Pada bulan desember 2019, sebuah novel pneumonia yang disebabkan oleh patogen yang sebelumnya
tidak dikenal muncul di Wuhan, sebuah kota berpenduduk 11 juta orang di cina tengah. Kasus awal
dikaitkan dengan paparan di pasar makanan laut di wuhno.1 pada tanggal 27 januari 2020, otoritas cina
melaporkan 2835 kasus yang telah dikonfirmasi di cina daratan, termasuk 81 kematian. Selain itu, 19
kasus telah dikonfirmasi telah diidentifikasi di Hong Kong, Macao dan Taiwan, dan 39 kasus impor telah
diidentifikasi di Thailand, jepang, Korea selatan, amerika serikat, Vietnam, singapura, Nepal, prancis,
Australia dan kanada. Patogen itu segera diidentifikasi sebagai sebuah novel coronavirus (2019-nCoV),
yang erat kaitannya dengan pembatalan sindroma pernafasan akut CoV (SARS-CoV). 2 pada saat ini,
tidak ada perawatan spesifik terhadap virus baru ini. Oleh karena itu, sangat dibutuhkan untuk
mengenali zat-zat antivirus yang efektif guna memerangi penyakit ini.

Pendekatan yang efisien untuk menemukan obat adalah untuk menguji apakah obat antivirus yang ada
efektif untuk mengobati infeksi virus yang terkait. Kocov 2019-nCoV milik Betacoronavirus yang juga
berisi SARS-CoV dan sindroma pernafasan timur tengah CoV (MERS-CoV). Beberapa obat, seperti
ribavirin, interferon, lopinavir ritonavir, kortikosteroid, telah digunakan pada para pasien SARS atau
MERS, meskipun khasiat beberapa obat masih kontroversial. dalam penelitian ini, kami mengevaluasi
efisiensi antivirus lima jenis obat yang telah disetujui, termasuk ribavirin, penciclovir, nitazazin,
nafamostat, klorokuin, dan dua obat antivirus stadium luas yang terkenal remdesivir (GS — 5734) dan
favipiravir (T-705) terhadap pengentasan klinis tahun 2019- nCoV In vitro.

Pengujian standar dilakukan untuk mengukur dampak senyawa-senyawa ini pada sistoksisitas, tingkat
produksi virus dan infeksi pada tahun 2019 — ncovs. Pertama, sittotoksisitas senyawa calon di sel Vero
E6 (ATCC-1586) ditentukan oleh CCK8 assay. Kemudian, sel Vero E6 terinfeksi dengan nCoV-
2019BetaCoV/Wuhan/WIV04/20192 dengan tingkat penularan (MOI) sebanyak 0.05 dengan tingkat
konsentrasi obat - obatan yang bervariasi. DMSO digunakan dalam kontrol. Keefektifan dievaluasi oleh
penetapan nomor salinan virus dalam sel atant via kuantitatif real-time RT-PCR (qRT-PCR) dan
dikonfirmasi dengan visualisasi nukleoprotein virus (NP) - sion melalui imunofluorescence mikroskoppi
48 h (p.i.) (efek cytopathic tidak jelas pada saat ini titik infeksi). Di antara tujuh obat yang diuji,
konsentrasi tinggi dari tiga spekulatif nukleosida termasuk ribavirin (setengah maksimal maksimal) =
109,50 juta, separuh cytotoxic index (SI) > 400 juta, indeks selektivitas (SI), penciclovir (EC50 = 95,65),
penciclovir (EC50 = 95,96 μM, SI > 4.17) dan favipiravir (EC50 = 61,88 juta, SI > 6.46) diperlukan untuk
mengurangi infeksi virus (ara. 1a dan Supplemen- informasi, ara.1). Namun, favipiravir telah ditampilkan

Baru-baru ini, Remdesivir dikenal sebagai obat antivirus yang menjanjikan untuk melawan serangkaian
virus RNA (termasuk virus SARS/MERS-CoV5) yang menginfeksi sel-sel berbiakan, tikus dan model
primata nonmanusia (NHP). Hal ini saat ini dalam tahap pengembangan klinis untuk pengobatan infeksi
virus Ebola. 6 Remdesivir adalah sebuah analog adenosin, yang menggabungkan diri ke dalam rantai
RNA virus yang baru terbentuk dan mengakibatkan terminasi pra-dewasa. 7 tambahan menurut data
kita menunjukkan fungsi remdesivir pada tahap masuknya virus (Fig. 1c, d), yang sesuai dengan
mekanisme anti- virus putatif sebagai analog nukleotida. Warren et al menunjukkan bahwa dalam model
NHP, pemberian 10 mg/kg dosis remdesivir menghasilkan tingkat berkesinambungan dari bentuk
aktifnya dalam darah (10 mg M) dan memberikan perlindungan 100% terhadap infeksi virus Ebola. 7
data kami menunjukkan bahwa nilai EC90 dari remdesivir melawan 2019-nCoV di Vero E6 sel adalah
1.76 miliar, menunjukkan konsentrasi kerjanya kemungkinan besar akan tercapai di NHP. Data
pendahuluan kami (informasi tambahan, Fig. S2) menunjukkan bahwa remdesivir juga menghambat
infeksi virus secara efisien dalam garis sel manusia (kanker hati manusia Huh-7 sel), yang sensitif
terhadap 2019 — ncov

Klorokuin, obat anti-malaria dan obat penyakit autoimunitas yang sering digunakan, baru-baru ini
dilaporkan berpotensi menjadi obat antivirus spektrum yang luas. 8,9 klorokuin dikenal sebagai
penghalang infeksi virus dengan meningkatkan pH endosomal yang diperlukan untuk fusi virus/ sel, serta
mengganggu glikolasi reseptor seluler di SARS-CoV. 10 waktu tambahan kita sebagai iblis — strated
bahwa klorokuin berfungsi pada kedua pintu masuk, dan pada tahap pasca - masuk infeksi 2019-nCoV di
sel Vero E6 (Fig. 1c, d). Selain aktivitas antivirus, klorokuin memiliki aktivitas modulasi kekebalan, yang
secara sinergis dapat meningkatkan efek antivirus di vivo. Klorokuin tersebar luas di seluruh tubuh,
termasuk paru-paru, setelah pemberian oral. Nilai EC90 klorokuin terhadap 2019-nCoV di Vero