RESUME ARTIKEL

TEKNOBIOLOGI
Dosen pengampu:
Hendra Susanto, S.Si., M.Kes., Ph.D
Wira Eka Putra, S.Si., M.Med.Sc

Nama : Muhamad Arjuna Salim

NIM : 180341617565
Off : B/2018

CRISPR / Cas9 sebagai genom editing: kemajuan, implikasi, dan tantangan.

Pada bakteri dan archaea, CRISPR / Cas ditemukan sebagai sistem kekebalan
yang didapat terhadap virus dan fag melalui Pengenalan DNA berbasis CRISPR
RNA (crRNA) dan Cas pembelahan DNA yang dimediasi nuklease. Pengeditan
genom yang dimediasi CRISPR / Cas9 bergantung pada generasi double-strand
break (DSB) dan proses perbaikan DNA seluler selanjutnya. Dalam sistem
CRISPR / Cas9 endogen, crRNA matang digabungkan dengan crRNA
transaktivasi untuk membentuk kompleks tracrRNA: crRNA yang memandu Cas9
ke lokasi target. TracrRNA sebagian melengkapi crRNA dan berkontribusi pada
pematangan crRNA. Pada lokasi target, pembelahan spesifik sekuens yang
dimediasi CRISPR / Cas9 memerlukan crRNA pencocokan protospacer sekuens
DNA dan motif berdekatan protospacer pendek (PAM). Setelah mengikat ke situs
target, crRNA pencocokan untai tunggal DNA dan untai yang berlawanan dibelah,
masing-masing, oleh domain nuclease HNH dan domain nuclease mirip RuvC
dari Cas9, menghasilkan DSB di situs target.
CRISPR / Cas9 menyediakan alat pengeditan genom yang baik dan multipleks,
memungkinkan para peneliti untuk secara tepat memanipulasi elemen genomik
tertentu, dan memfasilitasi penjelasan fungsi gen target dalam biologi dan
penyakit. Melalui pengiriman bersama dari plasmid yang mengekspresikan Cas9
dan crRNA, CRISPR / Cas9 telah digunakan untuk menginduksi modifikasi
genom spesifik dalam sel manusia. CRISPR / Cas9 juga digunakan untuk
menginduksi perubahan genom yang diinginkan pada tanaman untuk
menghasilkan sifat tertentu, seperti fenotipe yang berharga atau ketahanan
terhadap penyakit.
Pengaturan transkripsi gen pada organisme hidup sangat berguna untuk studi
fungsi gen dan jaringan transkripsi. Dengan mengganggu situs fungsional terkait
transkripsi, CRISPR / Cas9 dapat mengatur transkripsi gen tertentu. Namun,
proses ini tidak dapat diubah karena modifikasi DNA permanen. Baru-baru ini,
sistem CRISPR / Cas9 yang dimodifikasi bernama CRISPR inference (CRISPRi)
dikembangkan untuk regulasi transkripsi yang dipandu oleh RNA.
 Terlepas dari potensi besar CRISPR / Cas9 dalam pengeditan genom, terdapat
beberapa masalah penting yang perlu ditangani, seperti mutasi di luar target,
ketergantungan PAM, produksi gRNA dan metode pengiriman CRISPR / Cas9.
CRISPR / Cas9 berpotensi menjadi alat pengeditan genom yang andal dan mudah.
Memanfaatkan kesederhanaan dan kemampuan beradaptasi CRISPR / Cas9, ini
membuka pintu untuk mengungkapkan fungsi gen dalam biologi dan
memperbaiki cacat gen pada penyakit. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk
mengeksplorasi karakteristik dan meningkatkan kinerja CRISPR / Cas9, terutama
spesifisitas, efek off-target, dan metode penyampaian CRISPR / Cas9. Misalnya,
hasil pengurutan dalam seluruh genom baru-baru ini akan membantu untuk
memilih situs target yang sesuai dan merancang gRNA yang sangat spesifik.