Anti‑HCV 

Elisa
4.0

KAPG4NAE3

DIAsource ImmunoAssays SA ‑ Rue de l'Industrie, 8 ‑ B‑1400 Nivelles ‑ Belgia
: 110330/1
 Anti‑HCV Elisa V 4.0.
Untuk deteksi kualitatif Antibodi terhadap Hepatitis C secara in‑vitro (anti‑ 
HCV) dalam serum atau plasma manusia
en
KAPG4NAE3
DALAM PENGGUNAAN DIAGNOSTIK VITRO

DIAsource ImmunoAssays SA ‑ Rue de l'Industrie 8, B‑1400 Nivelles, Belgia Telp: +32 67 88 99 99 ‑ Faks: +32 67 88 99 96

1) PENGGUNAAN YANG DIMAKSUDKAN

Anti‑HCV Elisa V 4.0 adalah kit diagnostik immunoassay enzim generasi keempat untuk deteksi kualitatif In‑vitro dari Antibody to Hepatitis C virus (anti‑HCV) dalam 
serum atau plasma manusia.

2) TEORI DESAIN / DESKRIPSI SINGKAT PRODUK

Anti‑HCV Elisa V 4.0 mengadopsi "prinsip sandwich langsung" sebagai dasar pengujian untuk mendeteksi antibodi terhadap virus Hepatitis C (anti‑HCV). Ini adalah kit 
immunoassay enzim generasi keempat, yang menggunakan antigen HCV rekombinan (antigen Core, NS3 dan NS5) untuk mendeteksi virus Antibodi terhadap Hepatitis 
C (anti‑HCV) dalam serum atau plasma manusia. * 1‑3 Antigen ini, yang reaktif dengan antibodi utama HCV, merupakan penyerap antigenik fase padat. Ketika serum atau 
plasma manusia ditambahkan ke dalam sumur, antigen HCV dan Anti‑HCV akan membentuk kompleks pada sumur jika ada Anti‑HCV dalam spesimen. Sumur dicuci 
untuk menghilangkan bahan yang tidak terikat. HCV Ag ・ HRPO Conjugate yang telah diencerkan ditambahkan ke dalam sumur dan menghasilkan pembentukan 
kompleks (HCV) ・ (Anti‑HCV) ・ (HCV Ag ・ HRPO). Setelah membersihkan konjugat tak terikat, larutan substrat TMB ditambahkan untuk pengembangan warna. 
Intensitas perkembangan warna sebanding dengan jumlah antibodi yang ada dalam spesimen. Proses reaksi diringkas sebagai berikut:

A.Spesimen (mengandung Anti‑HCV):
1. Lempeng (Antigen NKT) + Spesimen (mengandung Anti‑NKT) → pelat (Antigen NKT) ・ Anti‑NKT
2. Cuci untuk menghilangkan bahan yang tidak terikat.
3. Lempeng (Antigen NKT) ・ Anti‑NKT + Ag HCV ・ HRPO → Lempeng (Antigen NKT) ・ Anti‑HCV ・ Ag HCV ・ Kompleks HRPO
4. Cuci untuk menghilangkan bahan yang tidak terikat.
5. Lempeng (Antigen NKT) ・ Anti‑NKT ・ Ag NKT ・ Kompleks HRPO + Solusi TMB → warna biru muda ke biru
6. Warna biru muda ke biru + Solusi Berhenti → kuning muda ke warna kuning, diukur pada 450nm dengan panjang gelombang referensi yang dipilih dalam 620 
hingga 690nm * 4

B. Spesimen (tanpa Anti‑HCV manusia):
1. Piring (Antigen NKT) + Spesimen (tanpa Anti‑NKT) → pelat (Antigen NKT)
2. Cuci untuk menghilangkan bahan yang tidak terikat.
3. Lempeng (Antigen NKT) + Ag NKT ・ HRPO → pelat (Antigen NKT) ‑‑‑‑‑‑ Tidak ada kompleks yang akan terbentuk
4. Cuci untuk menghilangkan bahan yang tidak terikat.
5. Plate (Antigen HCV) + Larutan TMB (tidak berwarna) → tidak berwarna
6. Colorless + Stop Solution → colorless, diukur pada 450nm dengan panjang gelombang referensi yang dipilih dalam 620 hingga 690nm * 4

3) DESKRIPSI BAHAN YANG DISEDIAKAN & SISTEM KODE PRODUK

● Item 1 ‑ 7 pada tabel reagen berikut harus didinginkan pada suhu +2 hingga + 8 ° C. 
Washing Solution D (20X) dan Stop Solution dapat disimpan pada +2 hingga + 30 ° C.

Qt. per
ITEM Komponen Deskripsi
96 tes

(1) Plat mikrotiter dilapisi dengan antigen HCV. 1 piring

Pelat Antigen NKT

Ag HRP CONC
Ag HCV yang mengandung ・ Peroksidase (lobak pedas) 
(2) dalam buffer dengan serum sapi. 1 botol,
Conc.
Pengawet: 0,005% Natrium azida dan 1,8 ml
HCV Ag ・ HRPO
0,05% Penstabil enzim.
Mengkonjugasikan

KONTROL H
Plasma manusia yang tidak aktif positif untuk  1 botol,
(3)
Anti‑HCV. Pengawet: 0,099% Natrium azida. 2.0 ml
Anti‑HCV Positif
Kontrol

KONTROL L Plasma manusia normal non‑reaktif untuk 
1 botol,
(4) Antibodi terhadap HCV. Pengawet: 0,099%
Natrium azida negatif hepatitis C. Kontrol 3,0 ml

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 CONJ BUF PB‑buffer dengan serum Bovine dan Tween‑20. 
1 botol,
(5) Pengawet: 0,005% Natrium azida dan
0,05% Penstabil enzim 24 ml
Pengencer konjugasi

CHROM TMB CONC

3, 3 ', 5, 5'‑tetramethylbenzidine (TMB) dalam basa  1 botol,
(6)
organik. 12 ml

TMB kromogenik
konsentrat

Buffer asam sitrat dengan Urea Hydrogen  1 botol,
(7) SUB BUF
Peroxidase 12 ml

Penyangga Substrat

MENCUCI SOLN CONC

1 botol
(8) Buffer fosfat dengan Tween‑20.
110 ml
Conc. Pencucian
Solusi D (20X)

HENTIKAN SOLN 1 botol
(9) Hentikan Solusi
12 ml
Hentikan Solusi

● BAHAN LAIN DIBUTUHKAN, TAPI TIDAK DISEDIAKAN
ITEM Komponen
(1)  50µl, 100µl dan 200µl, 1‑ml mikropipet dan ujung dibutuhkan. (2)
Mandi air pada 37 +/‑ 1 ° atau inkubator pada 37 +/‑ 1 °. 
(3) Tabung untuk pengenceran spesimen. 
(4) Peralatan cuci piring.
ELISA Microwell Reader:
(5) 
Panjang gelombang ganda 450nm dengan 620‑690nm sebagai panjang gelombang referensi * 4, bandwidth 10nm. (6)
Air yang dimurnikan: air suling atau air deionisasi.
Penganalisis pelat mikro EIA yang sepenuhnya otomatis bersifat opsional. Pengguna harus memvalidasi penganalisis pelat mikro EIA otomatis yang 
(7) 
dikombinasikan dengan kit.
(8)  Slip perekat

4) PETUNJUK PENGGUNAAN

4.1) Peringatan

4.1.1) Kit reagen ini hanya untuk penggunaan profesional.
4.1.2) Kit reagen ini untuk in vitro diagnosis saja.
4.1.3) Bawa semua reagen kit dan sampel ke suhu kamar (+20 hingga + 30 ° C) dan aduk dengan hati‑hati sebelum digunakan.
4.1.4) Jangan gunakan reagen setelah tanggal kedaluwarsanya.
4.1.5) Jangan menukar reagen di antara lot yang berbeda.
4.1.6) Jangan memasukkan pipet ke dalam mulut.
4.1.7) Jangan merokok atau makan di tempat di mana spesimen atau reagen ditangani.
4.1.8) Semua komponen kit dan spesimen harus dianggap sebagai potensi bahaya bagi kesehatan. Ini harus digunakan dan dibuang sesuai dengan prosedur 
keselamatan laboratorium Anda sendiri. Prosedur keselamatan seperti itu mungkin akan mencakup penggunaan sarung tangan pelindung dan 
menghindari pembentukan aerosol.
4.1.9) Spesimen infeksius potensial dan tumpahan atau kebocoran yang tidak mengandung asam harus dibersihkan secara menyeluruh dengan natrium 
hipoklorit 5% atau diperlakukan sesuai dengan praktik Anda untuk pengendalian potensi bahaya hayati.
4.1.10) Sebelum membuang limbah spesimen bekas dan reagen kit sebagai limbah umum; harus ditangani sesuai dengan praktik pengolahan Anda terhadap 
potensi limbah bio‑berbahaya atau diperlakukan sebagai berikut:
Limbah cair dan padat harus diautoklaf pada 121 ° C setidaknya selama 30 menit. Sampah 
padat juga bisa dibakar.
Limbah cair non‑asam dapat diolah dengan natrium hipoklorit yang diencerkan hingga konsentrasi akhir 1%.
Limbah cair asam harus dinetralkan sebelum diolah dengan natrium hipoklorit seperti yang disebutkan di atas dan harus didiamkan selama 30 
menit untuk mendapatkan desinfeksi yang efektif.
4.1.11) Larutan Berhenti mengiritasi kulit, mata, saluran pernapasan dan selaput lendir. Hindari kontak Stop Solution dengan kulit dan selaput lendir. Jika 
terjadi kontak, segera basuh dengan air yang banyak.
Jika terhirup, segera cari udara segar dan dapatkan bantuan medis jika terasa sakit.
4.1.12) Konsentrat TMB kromogenik mengandung pelarut organik yang mudah terbakar. Konsentrat TMB kromogenik mengandung dimetil sulfoksida, iritasi 
pada kulit dan selaput lendir.
4.1.13) Meskipun semua bahan yang bersumber dari manusia diuji bebas dari HBsAg dan Anti‑HIV dan dinonaktifkan pada suhu 56 ° C selama satu jam, reagen tersebut tetap 
harus ditangani sebagai bahan berpotensi menular. * 5

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 4.2) Pengumpulan dan Penyimpanan Spesimen

4.2.1) Baik serum atau plasma dapat digunakan dengan kit diagnostik ini. Spesimen darah utuh harus segera dipisahkan untuk menghindari hemolisis. Setiap 
partikulat (misalnya gumpalan fibrin, eritrosit) yang terkandung dalam spesimen harus dibuang sebelum digunakan.

4.2.2) Spesimen harus disimpan pada +2 hingga + 8 ° C dan menghindari inaktivasi panas untuk meminimalkan kerusakan. Untuk penyimpanan jangka panjang, mereka 
harus dibekukan di bawah ‑20 ° C. Penyimpanan di freezer self‑defrosting tidak disarankan.
4.2.3) Spesimen yang dibekukan harus dicairkan dan dicampur secara homogen sebelum pengujian.
4.2.4) Hindari beberapa prosedur freeze‑thaw.
4.2.5) Sera yang tidak terkoagulasi sempurna dan spesimen yang terkontaminasi mikroba tidak boleh digunakan.

4.3) Penyimpanan Reagen

4.3.1) Kit harus disimpan pada suhu +2 hingga + 8 ° C. Jangan dibekukan.
4.3.2) Potongan pelat harus digunakan dalam waktu satu bulan setelah kantong aluminium foil asli dibuka. Strip yang tidak terpakai harus disimpan di dalam 
kantong aluminium foil dan ditutup rapat‑rapat bukaannya.
4.3.3) Kembalikan reagen ke +2 hingga + 8 ° C segera setelah digunakan.
4.3.4) Larutan Pencucian D (20X) Konsentrat dapat disimpan pada suhu kamar untuk menghindari kristalisasi, karena kit disimpan dan dikirim pada +2 hingga + 
8 ° C. Jika kristal telah diendapkan sebelum digunakan, hangatkan larutan dalam penangas air 37 ° C sampai kristal larut.

4.4) Prosedur Pencucian Piring

4.4.1) Persiapan larutan pencuci:
Encerkan Washing Solution D (20X) Konsentrasikan dengan air suling atau deionisasi hingga pengenceran 1:20. Jangan gunakan air ledeng.
4.4.2) Pencucian piring:
(a) Untuk mesin cuci piring dengan fungsi aspirasi luapan: 6 siklus dengan setidaknya buffer cuci 0,5ml per sumur per siklus.
Atau
(b) Untuk mesin cuci piring tanpa fungsi aspirasi luapan: 8 siklus dengan setidaknya 0,35 ml buffer pencucian per sumur per siklus.
4.4.3) Keringkan dengan membalik pelat dan mengetuk dengan kuat ke kertas penyerap. Terlalu banyak sisa penyangga pencucian akan menyebabkan hasil yang salah.
PERINGATAN
Pencucian yang tidak benar akan menyebabkan hasil yang salah.

4.5) Prosedur Uji

4.5.1) Bawa semua reagen dan spesimen ke suhu kamar (+20 hingga 30 ° C) sebelum pengujian. Sesuaikan penangas air atau inkubator ke 37 ± 1 ° C.
4.5.2) Persiapan dari Konjugat encer
1. Gunakan hanya wadah bersih untuk menghindari kontaminasi.
2. Siapkan konjugat encer dengan membuat pengenceran 1:20 Conc. HCV Ag ・ HRPO konjugasi dengan pengencer konjugasi, atau ikuti Bagan 
Persiapan Konjugasi di bawah ini. Aduk perlahan agar tercampur rata dan hindari berbusa.
3. Larutan konjugat encer yang berlebihan harus dibuang setelah digunakan.

Bagan Persiapan Konjugat:
Volume Pengencer Konjugasi Volume Conc. HCV Ag ・ HRPO
Jumlah Wells yang digunakan 
dibutuhkan (ml) konjugasi dibutuhkan (µl)

8  1 50
16  2 100

24  3 150
32  4 200
40  5 250

48  6 300
56  7 350
64  8 400

72 ‑ 80  9 450
81 ‑ 96  10 500

4.5.3) Simpan satu sumur untuk dikosongkan.
Jangan menambahkan spesimen atau pengencer spesimen ke dalam sumur untuk blanko.
4.5.4) Menyiapkan jumlah sumur yang dibutuhkan, antara lain 1 sumur untuk Blanko, 3 sumur untuk Kontrol Negatif, 2 sumur untuk Kontrol Positif, dan 1 sumur 
untuk setiap Spesimen.
4.5.5) Contoh masukan:
4.5.5.1) Tambahkan 100µl Kontrol Positif, Kontrol Negatif dan spesimen ke setiap sumur yang sesuai dari Lempeng Antigen NKT.
4.5.5.2) Aduk rata dengan mengetuk pelat secara perlahan.
CATATAN: Gunakan ujung pipet baru setelah setiap pengambilan sampel untuk menghindari kontaminasi silang.

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 4.5.6) Segel Plat dengan Slip Perekat.
4.5.7) Inkubasi piring di 37 + Penangas air 1 ° C atau inkubator sirkulasi selama 60 menit.
CATATAN: Jangan menumpuk pelat.
4.5.8) Di akhir masa inkubasi, lepaskan slip perekat dengan hati‑hati dan buang.
4.5.9) Cuci piring menurut bagian §4.4. Prosedur Pencucian Piring.
4.5.10) Tambahkan 100µl Konjugat Dilusian di setiap lubang, kecuali yang kosong.
4.5.11) Segel pelat dengan Slip Perekat.
4.5.12) Inkubasi Plat di 37 + Penangas air 1 ° C atau inkubator sirkulasi selama 30 menit.
4.5.13) Ulangi langkah 4.5.8) dan 4.5.9)
4.5.14) Pilih salah satu metode berikut untuk pengembangan warna:
A. Campurkan konsentrat TMB Chromogenic dan Penyangga Substrat dengan volume yang sama dalam wadah bersih segera sebelum digunakan. 
Tambahkan 100μl larutan campuran ke setiap lubang termasuk blanko.
B. Tambahkan 50µl konsentrat TMB Kromogenik terlebih dahulu, kemudian tambahkan 50µl Penyangga Substrat ke dalam masing‑masing sumur termasuk blanko. Aduk 
rata dengan hati‑hati.
CATATAN: Konsentrat TMB kromogenik harus tidak berwarna hingga biru muda; jika tidak, itu harus dibuang. Itu
campuran konsentrat TMB kromogenik dan Penyangga Substrat harus digunakan dalam waktu 30 menit setelah pencampuran. 
Campuran harus dihindari dari cahaya yang kuat.
4.5.15) Segel pelat dengan Slip Perekat dan inkubasi pada suhu 37 ± 1 ° C selama 15 menit.
4.5.16) Hentikan reaksi dengan menambahkan 100μl Stop Solution ke setiap sumur termasuk blanko.
4.5.17) Tentukan absorbansi Kontrol dan spesimen uji dalam waktu 15 menit, diukur pada 450nm dengan panjang gelombang referensi yang dipilih dalam 620 
hingga 690nm * 4.
Gunakan sumur kosong untuk mengosongkan spektrofotometer.
CATATAN: Warna blank harus tidak berwarna hingga kekuningan muda; jika tidak, hasil tes tidak valid. Substrat
kosong: nilai absorbansi harus kurang dari 0,100 OD.

4.6) Perhitungan Data yang Diuji

4.6.1) Perhitungan NCx (Rata‑rata Absorbansi Kontrol Negatif). Contoh:

Nomor sampel  Daya serap
1  0,045
2  0,060
3  0,051
NCx = (0,045 + 0,060 + 0,051) / 3 = 0,052

NCx harus ≤ 0,200, jika tidak tes tidak valid.

4.6.2) Perhitungan PCx (Rata‑rata Absorbansi Kontrol Positif) Contoh:

Nomor sampel  Daya serap
1  1.510
2  1.826

PCx = (1.510 + 1.826) / 2 = 1.668

PCx harus ≥ 0,600, jika tidak tes tidak valid.

4.6.3) Perhitungan Nilai PN
PN = PCx ‑ NCx
Contoh:
P ‑ N = 1,668 ‑ 0,051 = 1,617
Nilai P ‑ N harus ≥ 0,400, jika tidak tes tersebut tidak valid.

4.6.4) Perhitungan Nilai Batas
Nilai Cutoff = NCx + 0.100
Contoh:
Nilai Cutoff = 0,053 + 0,100 = 0,153

4.6.5) Hitung indeks cut‑off dari spesimen
Indeks Batas
= Contoh Nilai OD / Nilai Cutoff
Contoh:
Nilai Sampel adalah 0,596
Indeks Cutoff = 0,596 / 0,153 = 3,895
4.6.6) Zona Abu‑abu: Indeks batas = 1.000 ～ 1.500

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 4.7) Kontrol Kualitas Uji Jalan

4.7.1) NCx harus ≤ 0,100, jika tidak tes tidak valid.

4.7.2) PCx harus ≥ 0,600, jika tidak tes tersebut tidak valid.

4.7.3) Nilai PN harus ≥ 0,500, jika tidak tes tidak valid. CATATAN: Kontrol Negatif: nilai absorbansi harus kurang dari atau 
sama dengan 0,200 setelah dikurangi blanko.

4.8) Interpretasi Hasil
4.8.1) Spesimen dengan CUTOFF INDEX ＜ 1.000 dianggap NON‑REAKTIF dengan kriteria Anti‑HCV Elisa V 4.0 dari DIAsource.
4.8.2) Spesimen dengan CUTOFF INDEX ≥ 1.000 dianggap sebagai awalnya REAKTIF. Mereka seharusnya DIULIHKAN dalam rangkap dua.
Jika keduanya CUTOFF INDEXES dari duplikat tersebut LEBIH BESAR dari 1.500, spesimen dianggap berulang REAKTIF
untuk Anti‑HCV menurut kriteria Anti‑HCV Elisa V 4.0 dari DIAsource ImmunoAssays SA.
Spesimen yang berulang kali reaktif dalam Anti‑HCV Elisa V 4.0 harus diuji lebih lanjut dengan tes tambahan yang lebih spesifik.
4.8.3) Spesimen awalnya reaktif, yang keduanya CUTOFF INDEXES dari duplikat tes ulang adalah KURANG dari 1.000, akan dipertimbangkan
NON‑REAKTIF untuk Anti‑HCV.
4.8.4) Jika salah satu dari keduanya CUTOFF INDEXES duplikatnya adalah LEBIH BESAR dari 1.000 tapi KURANG dari 1.500, spesimennya mungkin
ditafsirkan sebagai PERTANYAAN dan individu ini harus dipantau dalam sampel tindak lanjut, atau tes tambahan yang lebih spesifik harus digunakan.

4.8.5) Jika salah satu dari CUTOFF INDEX duplikatnya adalah LEBIH BESAR dari 1.500 dan yang lainnya KURANG dari 1.000, ini menunjukkan
eksperimental yang tidak biasa kesalahan. Tes harus diulangi lagi.

4.9) Pemecahan Masalah

Jika hasilnya tidak dapat direproduksi, lakukan pemecahan masalah awal Anda sendiri dengan memeriksa kemungkinan yang tercantum di bawah ini:
4.9.1) Prosedur pencucian yang tidak tepat.
4.9.2) Terkontaminasi dengan spesimen positif.
4.9.3) Tambahkan volume sampel, konjugasi, atau substrat yang salah.
4.9.4) Tepi sumur terkontaminasi dengan konjugat.
4.9.5) Spesimen yang tidak tepat seperti serum atau plasma hemolisis, spesimen yang mengandung endapan dan spesimen tidak tercampur dengan baik sebelum 
digunakan.
4.9.6) Waktu atau suhu inkubasi salah.
4.9.7) Kepala dan jarum mesin cuci yang terhalang atau terhalang sebagian.
4.9.8) Aspirasi tidak mencukupi.

4.10) Batasan dan Gangguan

4.10.1) Kit reagen ini hanya digunakan untuk serum atau plasma manusia yang tidak terkumpul.
4.10.2) Kit reagen belum divalidasi untuk digunakan dengan sampel kadaver.
4.10.3) Spesimen dengan tingkat Anti‑HCV yang sangat rendah mungkin tidak selalu menunjukkan hasil positif. Dalam kasus ini, disarankan untuk menguji sampel tindak 
lanjut.
4.10.4) Hasil negatif anti‑HCV tidak menutup kemungkinan penularan HCV.
4.10.5) Hasil positif palsu yang tidak dapat diulang dapat terjadi karena pengikatan sampel yang tidak spesifik dan terkonjugasi ke dinding sumur.
4.10.6) Potensi Bahan Pengganggu: tidak ada pengaruh yang signifikan terhadap Anti‑HCV Elisa V 4.0.

4.11) Kondisi dan Stabilitas Penyimpanan

Kit / komponen Kondisi penyimpanan Negara Stabilitas

Asli 18 bulan
Anti‑HCV Elisa V 4.0 KIT + 2 hingga + 8 ° C
Setelah terbuka 1 bulan

Asli 18 bulan
Pengendalian Positif Anti NKT + 2 hingga + 8 ° C
Setelah terbuka 1 bulan

Asli 18 bulan
Kontrol Negatif Hepatis C + 2 hingga + 8 ° C
Setelah terbuka 1 bulan

Asli 18 bulan
Pelat Antigen NKT + 2 hingga + 8 ° C
Setelah terbuka 1 bulan

Asli 18 bulan
Conc. Antigen HCV ・ HRPO
+ 2 hingga + 8 ° C Setelah terbuka 1 bulan
Solusi Konjugasi
Setelah terbuka 1 bulan

Conc. Antigen HCV ・ HRPO Temperatur ruangan. Diencerkan 6 jam

Solusi Konjugasi + 2 hingga + 8 ° C Diencerkan 2 hari

Pengencer konjugasi + 2 hingga + 8 ° C Asli 18 bulan

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 Setelah terbuka 1 bulan

Asli 24 bulan
Solusi Pencucian D Konsentrat (20X) Temperatur ruangan.
Setelah terbuka 1 bulan

Temperatur ruangan. Diencerkan 2 hari

20X Larutan Pencucian Dilusi
+ 2 hingga + 8 ° C Diencerkan 1 minggu

Asli 24 bulan
Konsentrat TMB kromogenik + 2 hingga + 8 ° C
Setelah terbuka 1 bulan

Asli 24 bulan
Penyangga Substrat + 2 hingga + 8 ° C
Setelah terbuka 1 bulan

Campuran Solusi Substrat TMB Temperatur ruangan. Campuran 6 jam

Asli 24 bulan
Hentikan Solusi Temperatur ruangan.
Setelah terbuka 1 bulan

4.12) Karakteristik Kinerja

4.12.1) Kekhususan Analitis

Potensi Bahan Pengganggu: Tidak ada pengaruh signifikan terhadap Anti‑HCV Elisa V 4.0.
Potensi Bahan Pengganggu  n tes n reaktif n non‑reaktif
Serum dengan zat yang mengganggu dalam rasio tetap 
(Trigliserida, hemoglobin, bilirubin, IgG monoklonal dan  50 tes 0 50
IgM, dan faktor rheumatoid) 
Panel penghambat  14 sampel negatif 0 14
(EDTA, hemoglobin, trigliserida, bilirubin, dan heparin)  14 sampel positif 14 0
Panel Antikoagulan
25 sampel negatif 0 25
(Serum, plasma EDTA, plasma heparinisasi, dan sitrat 
25 sampel positif 25 0
plasma) 
Total  128 sampel yang diuji 39 89

4.12.2) Kekhususan Klinis

Cl saya spesifisitas asli = 5356/5369 = 99,8%
Potensi Bahan Pengganggu n tes n reaktif n non‑reaktif Kekhususan
Donor darah 5169 12 5157 99,77%
Spesimen klinis / rumah sakit 200 1 199 99,5%
Spesimen serum / plasma yang berpotensi bereaksi silang  100 0 100 100%
Total 5369 13 5356 99,8%

4.12.3) Sensitivitas Analitis

Sensitivitas analitik uji Anti‑HCV Elisa V 4.0 lebih tinggi daripada uji perbandingan.
Bahan Referensi PEI Sensitivitas Analitik
Pengenceran Serial Sampel Positif 1

30
30

♦ Anti‑HCV Elisa V 4.0
25
25
■Metode referensi

▲ Memotong

20 ♦ Anti‑HCV Elisa V 4.0
20

■Metode referensi
Anti‑HCV IgG (S / Co)

Anti HCV (S / Co)

▲ Memotong
15
15

10 10

5 5

0 0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
Langkah Pengenceran Langkah Pengenceran

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 Pengenceran Serial Sampel Positif 2
Pengenceran Serial dari Kontrol Positif
25
35

♦ Anti‑HCV Elisa V 4.0 30
20
■Metode referensi
25
♦ Anti‑HCV Elisa V 4.0
▲ Memotong
■Metode referensi
15 20
▲ Memotong
Anti‑HCV (S / Co)

Anti HCV (S / Co)
15

10

10

5
5

0
0 10 20 30 40 50 60 70

0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 ‑ 5
Langkah Pengenceran
Langkah Pengenceran

Panel Referensi Anti‑NKT PeliCheck

30

25

20
Anti‑HCV (S / Co)

♦ Anti‑HCV Elisa V 4.0

■Metode referensi
15
▲ Memotong

10

0
0 2 4 6 8 10
Langkah Pengenceran

4.12.4) Sensitivitas Klinis
1. Orang yang terinfeksi HCV:
Sensitivitas diagnostik dari DIAsource ImmunoAssays SA Anti‑HCV Elisa V 4.0 ditentukan menjadi 100%.
421 dari 421 sampel positif termasuk 20 sampel per genotipe untuk genotipe 1a ‑ 4a dan 5 sampel untuk genotipe 6 diuji dan dikonfirmasi reaktif untuk 
antibodi HCV.
Sensitivitas Total
n = 421

12.000

10.000

8.000
Ortho HCV 3.0 SAVe = 99.05

6.000

4.000

2.000

0,000
0,000 5.000 10.000 15.000 20.000 25.000 30.000 35.000

GBC NANBASE C‑96 3.1 = 100%
Anti‑HCV Elisa V 4.0 = 
100%

2. Panel serokonversi komersial:
Uji anti‑HCV Elisa V 4.0 menunjukkan sensitivitas serokonversi yang lebih tinggi dibandingkan dengan metode referensi terpilih yaitu ELISA 
anti‑HCV bertanda CE.
Jumlah sampel yang diuji dari 22 panel serokonversi berjumlah 198. Enam puluh tiga (63) sampel ini diuji reaktif dengan uji Anti‑HCV Elisa V 4.0, 
sedangkan hanya 44 sampel yang ditemukan reaktif dengan metode referensi .

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 4.12.5) Presisi

1. Reproduksibilitas Intra‑assay

MEMOTONG
Positif Serum 1 Serum Positif 2 Kontrol positif
INDEKS Berarti  CV (%) Berarti CV (%) Berarti  CV (%)
Hari 1 4.49  7.22 9.01  5.94 21.79  4.91
Hari ke‑2 4.16  13.06 8.54  9.41 21.44  4.23
Hari ke‑3 5.07  5.24 10,64 9,27 21,70  3.08

Berarti 4.57  8.51 9.40  8.21 21.64  4.07

2. Ketidaktepatan Total

4.13) Diagram alir prosedur pengujian

Tambahkan 100μl Kontrol (3 X NC, 2 X PC) dan 100μl per Spesimen ke dalam 
sumur. Cadangan 1 sumur untuk dikosongkan.

Inkubasi pelat pada 37 ± 1 ° C selama 60 menit.

Cuci piringnya.

(Siapkan konjugat yang diencerkan terlebih dahulu.)
↓

Tambahkan 100µl konjugat yang diencerkan ke setiap lubang kecuali bagian 
yang kosong.

Inkubasi piring pada 37 ± 1 ° C selama 30 menit.

Cuci piringnya.

↓ ↓

Tambahkan 50µl konsentrat 
Campur Chromogenic TMB kromogenik ke dalam 
Konsentrat TMB dan sumur lalu tambahkan 50µl 
Penyangga Substrat oleh Penyangga Substrat.
volume yang sama. Tambahkan 100μl Aduk rata. dari 
substrat campuran
solusi untuk sumur.

↓ ↓

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

 Inkubasi pada suhu 37 ± 1 ° C selama 15 menit.

Tambahkan 100µl Stop Solution ke dalam setiap lubang.

Tentukan absorbansi menggunakan 450 nm sebagai panjang gelombang pembacaan 
dengan panjang gelombang referensi 620‑690nm * 4

5) BIBLIOGRAFI

* 1 Abe K, Inchauspe C, Shikate T, dan Prince AM. (1992) Tiga pola berbeda dari infeksi virus hepatitis C pada simpanse. Hepatologi,
15: 690.
* 2 Claets H, Volckaerts A, De Beenhouwer H, Vermylen C. (1992) Asosiasi negara pembawa virus hepatitis C dengan kejadian hepatitis C
antibodi inti virus. J. Med. Virol. 36: 259‑264.
* 3 Pantai MJ, dkk. (1992) Hubungan temporal RNA virus hepatitis C dan tanggapan antibodi setelah infeksi eksperimental
simpanse. J Med. Virol. 36: 226‑237.
* 4 Panjang gelombang referensi spektrometer dapat dari 620nm hingga 690nm. Namun, pengguna harus memvalidasi spektrometer dalam kombinasi dengan
kit ini sebelum digunakan.
* 5 Inaktivasi virus hepatitis B yang tidak lengkap setelah perlakuan panas pada usia 60 ° C selama 10 jam, J. Infect. Dis. 138: 242‑244.
* 6 Pemasoknya adalah: VQC‑AcroMetrix: Jan Steenstraat 1, NL‑1816 CT Alkmaar, Belanda. Tipe 7 tersedia dalam format lyophilised atau liquid.
Nomor katalognya adalah S2233 (format terliofilisasi) dan S2058 (format cair).
* 7 Inst. Nasional Untuk Standar & Kontrol Biologis (NIBSC), Blabche Lane South Mimms Potters Bar Herts EN6 3QG, Inggris; Anti‑HCV Inggris
Standar Kerja, Kode Produk: 02 / 238‑004.

Tanggal revisi: 2011‑03‑30

Katalog Nr: KAPG4NAE3 Nomor PI: 1701265 Revisi Nr: 110330/1

Nomor PI: 1701000 Revisi nr 070716

Simbol bekas

Konsultasikan petunjuk 

penggunaan Suhu penyimpanan

Digunakan oleh

Kode batch

Nomor katalog

Kontrol

Produsen perangkat medis 

diagnostik in vitro

Berisi cukup untuk <n> tes 
MENCUCI SOLN CONC Larutan cuci pekat

CAL 0 Kalibrator nol

CAL N Kalibrator #
KONTROL N Kontrol #

Ag 125I Pengusut

Ab 125I Pengusut

Ag 125I CONC Pelacak terkonsentrasi

Ab 125I CONC Pelacak terkonsentrasi

Tabung

INC BUF Buffer inkubasi

AKETONITRIL Asetonitril

SERUM Serum

DIL SPE Pengencer spesimen

DIL BUF Buffer pengenceran

ANTISERUM Antiserum

IMUNOADSORBENT Penyerap imun

DIL CAL Pengencer kalibrator

REC SOLN Solusi rekonstitusi

PASAK
Polietilen glikol

EKSTRA SOLN Solusi ekstraksi

ELU SOLN Solusi elusi

GEL Kartrid Bond Elut Silica 

PRA SOLN Solusi pra‑perawatan

NETR SOLN Solusi netralisasi

TRACEUR BUF Buffer pelacak

Microtiterplate

Ab HRP Konjugasi HRP

Ag HRP Konjugasi HRP

Ab HRP CONC Konsentrat Konjugat HRP

Ag HRP CONC Konsentrat Konjugat HRP

CONJ BUF Konjugasi buffer

CHROM TMB CONC Konsentrat TMB kromogenik

CHROM TMB Solusi TMB kromogenik

SUB BUF Penyangga substrat

BERHENTI SOLN Hentikan solusi

INC SER Serum inkubasi

BUF Penyangga

Ab AP Konjugasi AP

SUB PNPP PNPP substrat

BIOT CONJ CONC Konsentrat konjugat biotin

KERANJINGAN HRP CONC Konsentrat HRP avidine

PANTAT BUF Buffer pengujian

Ab BIOT Konjugat biotin

Ab Antibodi Khusus

SAV HRP CONC Konsentrat HRP streptavidin

NSB Pengikatan non‑spesifik

2nd Ab Antibodi ke‑2

AC ID BUF Penyangga Pengasaman

DIST Distributor