KBA II

Isolation of Xanthones from Adventitious Roots of

St. John’s Wort (Hypericum perforatum L.) and
Their Antioxidant and
Cytotoxic Activities
Isolasi Xanthone dari Akar Adventif St. John's Wort (Hypericum
perforatum L.) dan Antioksidannya dan Aktivitas Sitotoksik

Oleh :
Wei Li, Ya Nan Sun, Xi Tao Yan, Seo Young Yang, Chun Whan Choi, Jin
Won Hyun, Hee Kyoung Kang,
Kee Yoeup Paek, and Young Ho Kim

DISAJIKAN OLEH :
DESI LINDA SARI (1801124)
DHEA ANANDA FITRI (1701011)
S 1. PENDAHULUAN
U
B
2. ALAT DAN BAHAN YANG DIGUNAKAN
B
A
H 3. PROSEDUR KERJA
A
S
A 4. HASIL ISOLASI
N
 PENDAHULUAN

Dalam studi fitokimia ini, 5 xanthones, 1,3,5,6-tetrahydroxyxanthone 1,5,6-

trihydroxy-3 methoxyxanthone, ferrxanthone, brasilixanthone B, dan neolancerin [5]
diisolasi dari adventif akar St. John's wort (Hypericum perforatum L.). Senyawa 1-5
dievaluasi untuk aktivitas antioksidan menggunakan spesies oksigen reaktif
intraseluler (ROS) pemulungan radikal 2 ', 7'-dichlorfluorescein-diacetate (DCFDA) uji
dan untuk aktivitas sitotoksik terhadap HL-60 sel leukemia promyelocytic manusia.
Diantara mereka, senyawa 1-4 memamerkan aktivitas memulung bersama nilai
penghambatan 27,4-33,2% pada 10 μM; senyawa 1, 2, dan 4 mengurangi viabilitas
sel HL-60 secara signifikan, dengan nilai IC50 masing-masing 31,5, 28,9, dan 27,7
Μm.
Tanaman tahunan keluarga Hypericaceae,
didistribusikan di seluruh Eropa, Afrika Utara, Asia, dan
Amerika Utara dan secara tradisional telah digunakan
untuk pengobatan ringan sampai depresi sedang.
Beberapa penelitian telah mengungkap antidepresan,
antivirus, penyembuhan luka, antioksidan, dan aktivitas
antimikroba dari berbagai ekstrak St. John's wort (1-4).
Berbagai komponen telah ditemukan di St. John's wort
seperti flavonoid, naphthodiathrones, dan xanthones (5-
7). Sampai saat ini, aktivitas antioksidan dan antikanker
xanthone dari St. John's wort belum sepenuhnya
dipelajari. Selama dekade terakhir, antioksidan alami
telah dihasilkan. Perhatian yang cukup besar dalam
pengobatan pencegahan.
 BAHAN DAN METODE :

TUJUAN ISOLASI
1. Prosedur eksperimental umum Titik lebur adalah ditentukan
menggunakan sistem Electro thermal IA-9200 (Lab Logistics Group
GmbH., Meckenheim, Jerman).
Dalam penelitian ini, kami
2. Optik rotasi ditentukan menggunakan Jasco DIP-370 otomatis
mengisolasi 5 senyawa dari
polarimeter (Jasco, Tokyo, Jepang).
akar adventif dari St. John's
3. Spektra FT-IR diukur menggunakan spektrometer inframerah Jasco
wort. Untuk mengevaluasi
Report-100.
sifat obat potensial xanthone,
4. Spektrum NMR direkam menggunakan JEOL ECA 600 spektrometer
antioksidannya
(1H, 600 MHz; 13C, 125 MHz) (Jeol, Tokyo, Jepang)
kegiatan ditentukan
5. Spektrum massa EI-MS diperoleh dengan menggunakan A Hewlett
menggunakan ROS
Spektrometer HP 5985B Packard (Hewlett-Packard Co., Palo Alto, CA,
intraseluler radikal tes DCF-
USA)
DA, dan sitotoksik mereka
6. ESI-MS menggunakan Aglient 1200 LCMSD Perangkap
kegiatan diperiksa terhadap
spektrometer (Agilent, Santa Clara, CA, USA).
HL-60 manusia promyelocytic
7. Kromatografi kolom dilakukan menggunakan gel silica (Kieselgel 60,
sel leukemia, menggunakan
70-230, dan 230-400 mesh; Merck, Darmstadt, Jerman), resin YMC
uji MTT.
RP-18, dan
8. TLC dilakukan dengan menggunakan gel silika pra-dilapisi 60 F254
dan RP-18 Plat F254S (keduanya 0,25 mm; Merck.
 Akar St John’s Wort
(2kg)
Reflux selama 5 jam sebanyak 3 L
methanol dengan pengulangan
sebanyak 3x
460g esktrak

Etanol (corong Air (corong

Ekstrak partisi
pisah) pisah)

Ekstrak etanol 70g Ekstrak air 30g

Kromatografi kolom gel dgn perbandingan Dipartisi dengan n-butanol

(H2Cl2 : Metanol 1:0, 50:1, 20:15, 10:1, 1:1)
masing-masing 1L Ekstraksi n-butanol 112g

Kromatografi silika gel (10: 1: 0,1 → 7: 1: 0,1 → 4:

Fraksi 1A Fraksi 1B Fraksi 1C Fraksi 1D Fraksi 1E 1: 0,1 → 2: 1: 0,1 → 1: 1: 0,2; 2 L untuk tiap
perbandingan CHCL3:MeOH:H2O.

Fraksi 2A Fraksi 2B Fraksi 2C Fraksi 2D Fraksi 2E

Lanjutan… Fraksi 1C
Dipisahkan
dengan
menggunakan
kolom YMC
Senyawa 1 Senyawa 2 (2x80cm) dgn
52 mg 70 mg perbandingan
MeOH-H20 0,4:1
dan 1,5:1

Fraksi 2C Fraksi 2D
Dipisahkan dengan menggunakan kolom YMC
(2x80cm) dgn perbandingan aseton-H2O (0,3: Pecahan
1 → 0,5: 1 → 1: 1) 2D dipisahkan menggunakan
kolom YMC (1 × 80 cm)
dengan a
Senyawa 3 Senyawa 4 Pelarut elusi MeOH-H2O
105 mg 24 mg (0.38: 1) menghasilkan
senyawa 5
(170,0 mg)
 HASIL
KESIMPULAN
ISOLASI
Aktivitas antioksidan dan sitotoksik senyawa 1-5 semua
5 senyawa diuji untuk aktivitas antioksidan Dari hasil, dapat disimpulkan bahwa xanthones
menggunakan uji radikal DPPH. Dari senyawa yang diuji, dari akar adventif St. John's wort memiliki antioksidan
senyawa 1-5 aktif dan dipamerkan 23,3, 16,9, 15,8, dan aktivitas antikanker. Kami menyarankan bahwa
36,6, dan efek pemulungan 0,5% pada 10 μM, masing- akar adventif St. John's wort dapat digunakan sebagai
masing. Dibandingkan dengan kontrol positif (90,5% antioksidan alami makanan fungsional dan
NAC), senyawa 1-4 dipilih untuk pengujian antioksidan nutraceutical, dan hasil ini mungkin menjadi berguna
lebih lanjut aktivitas menggunakan DCFDA pembilasan
dalam pengobatan leukemia manusia.
radikal ROS intraseluler uji. Senyawa 1-4 menunjukkan
antioksidan aktivitas, dengan nilai penghambatan 28.0,
27.4, 28.1, dan 33,2% pada 10 μM, masing-masing,
sedangkan senyawa 5 tidak menunjukkan aktivitas. S
Senyawa 1-5 dievaluasi untuk aktivitas sitotoksik mereka T
terhadap sel HL-60 menggunakan MTT Pengujian. Dari R
jumlah tersebut, senyawa 1, 2, dan 4 menunjukkan U
aktivitas sitotoksik secara signifikan dengan nilai IC50 K
31,5, 28,9, dan 27,7 μM, masing-masing. Senyawa 3 dan T
5 menunjukkan aktivitas tidak signifikan dengan nilai U
IC50 51,7, dan 86,6 μM, masing-masing. R
THANK
YOU