PIROGEN

• Dapat menyebabkan panas

• Merupakan endotoksin yaitu hasil produksi
bakteri gram negatif yang melekat kuat pada
permukan bakteri.
• Namun stuktur pirogen sampai saat ini belum
jelas.
 PIROGEN
• Pirogen adalah :
- senyawa dengan BM tinggi yang dinyatakan
sebagai senyawa lipopolisakarida-protein-
komplek yang diproduksi kira-kira 5-10 %
dari masa total bakteri.
• Pirogen yang berukuran 0.05 – 1,0 μm dapat
tersaring.
• Tahan terhadap panas pendidihan dan stabil
terhadap panas pengeringan sampai suhu 180 c.
 syarat
• Saat ini farmakope mencantumkan syarat bebas pirogen
untuk sediaan parenteral.
• Tapi ada pandangan yang berbeda dari beberapa negara :
- untuk larutan injeksi takaran tunggal 10 ml.
- tapi ada yang mensyaratkan 100 ml sekali
pakai.
• Air yang sudah bebas pirogen bila didiamkan dalam udara
terbuka selama 4 jam atau lebih pada suhu 22 derajat
celcius, maka akan dapat terkontaminasi pirogen.
 Penyebab hipertermi selain pirogen

• Senyawa seng yang berasal dari tutup karet

• Logam berat, seperti ion besi dan tembaga.
• Sejumlah besar senyawa organik
 pirogen perlu dibebaskan dari

1. Air atau larutan

2. Bahan obat atau bahan pembantu

3. Wadah, bahan tutup, dll

Pembebasan pirogen dari air atau larutan

• Dengan penyaring spesial

• Kolom aluminium oksid
• Sinar y
• Ditambah H2O2 0,15 %, dimasak selama 1
jam.
• Ditambah 10 ml KMnO4 0,1 N dan 5 ml NaOH
1 N per liter larutan sewaktu aquades disuling.
 Pembebasan pirogen dari Bahan obat atau
bahan pembantu
• Melalui
̊ pemanasan selama 30 menit pada
suhu 250 c atau 1 jam pada suhu 200 c.
• Dilarut kemudian dibebas pirogenkan.
 Pembebasan pirogen dari Wadah, bahan
tutup, dll

• Gelas piala, corong, ampul,botol infus dll cara

sterilisasi.

• Disterilkan dengan cara dingin yaitu dengan

penyinaran sinar terionisasi atau dengan etilen
oksid.
 PENGUJIAN BEBAS PIROGEN
• TUJUAN ;
• - membatasi resiko reaksi demam pada
tingkat yang dapat diterima oleh pasien
pada pemberian sediaan injeksi.
• ADA 2 Cara pengujian:
1. Tes terhadap dengan kelinci
2. Tes limulus.
 Tes terhadap kelinci
• Berdasarkan kenaikan suhu badan kelinci
• Menggunakan 3 ekor kelinci
• Suhu larutan yang akan diuji 38 c
• Larutan yang dimasukkan ( yang akan diuji )
tidak kurang dari 0,5 ml dan tidak lebih dari 10ml per kg
BB melalui vena telinga kelinci.
• Lama pemberian 4 menit dihitung dari awal pemberian.
• Catat temperatur pada 1,2,3, jam sesudah penyuntikan.
 Syarat hasil uji pada kelinci
Jumlah kelinci Larutan uji memenuhi syarat Larutan uji memenuhi
bila jumlah respon tidak syarat bila jumlah respon
melebihi ( C ) melebihi ( C )

3 1,20 2,7
6 2,80 4,3

9 4,5 6,0
12 6.6 6,6
 MEMENUHI SYARAT
No Suhu 1 Suhu 2 Selisih
1 37,00 37,0 0,0

2 37,00 37,05 0,050

3 37,00 37,1 0.1

JUMLA 0,15
H
 TIDAK MEMENUHI SYARAT
No Suhu 1 Suhu 2 Selisih
1 37,00 38,0 1,00

2 37,00 39,0 2,00

3 37,00 39,5 0.50

Rata2 3,50
 DIULANG
No Suhu 1 Suhu 2 Selisih
1 37,00 37,5 0,5

2 37,00 37,6 0,6

3 37,00 39,6 0,6

Rata2 1,7
 TES LIMULUS
• Lisat yang diperoleh dari butir darah kepiting
( Limulus polyphemus ).
• Mengandung sistem enzim dan protein.
• Apabila ada lipopolisakarida dalam jumlah kecil
dari pirogen bakteri gram negatip maka akan
menyebabkan terjadinya penggumpalan.
• Tes hanya memerlukan waktu 30 menit.
• Tes positip ( gumpalan ) pasti ada pirogen
• Tapi kalau negatip belum tentu Bebas pirogen .