ISOLASI SENYAWA ALKALOID

DARI DAUN SIDAGURI (SIDA

RHOMBIFOLIA L.)
NAMA ANGGOTA KELOMPOK 1 :

1. Afdrian Kusumawardianingrum 2182032

2. Amalia Khairiah 2182033
3. Anggun Bella Indrisari 2182034
4. Annissa 2182035
5. Aristika Linda Puspita 2182036
6. Arum Kavita Sari 2182037
7. Ayu Widyaningsih 2182038
8. Catur Bagas Pamungkas 2182039
9. Desty Putri Pancawati 2182040
10. Fatma Eka Saputri 2182041
11. Fera Yuda Lailul Kovifah 2182042
12. Ferista Dyah Pramudhita 2182043
13. Fitriana Melenia Prastyaningrum 2182044
TUMBUHAN SIDAGURI
(Sida rhombifolia L.)
Famili :Malvaceae

Morfologi : Perdu tegak bercabang dengan tinggi 2

m, cabang kecil, berambut rapat

Morfologi : Perdu tegak bercabang dengan tinggi 2

m, cabang kecil, berambut rapat

Manfaat untuk masyarakat : Mengatasi influenza, demam,

radang amandel, radang usus, disentri, sakit kuning,
malaria, batu saluran kencing, cacingan, terlambat haid,
sariawan, bisul dan digigit serangga. Akar dan kulit batang
sidaguri sangat kuat sehingga dipakai untuk pembuatan
tali.
(Dalimarta, 2003)
METODE PENELITIAN
1.ALAT :
-peralatan gelas laboratorium
-Spektroskopi FT-IR
-Alat destilasi
-Spektroskopi H-NMR
-Bejana maserasi
-Kolom kromatografi
-Corong pisah
-Neraca analitik

2. BAHAN :
-Bahan dasar yaitu daun sidaguri - NH4OH pekat
-Metanol - Reagen Mayer
-Etil asetat - Reagen Wagner
-N-heksana - Reagen Dragendroff
-Dietil eter - Silika gel GF254 untuk KLT
-Kloroform - Silika Gel GF60 (70-230 mesh) untuk kromatografi kolom
-HCL 2M
 PROSEDUR PENELITIAN

• SKRINING FITOKIMIA
A.UJI ALKALOID
a) Dengan KLT

(+) noda naik warna

Plat KLT yang sudah Disemprot reagen menjadi orange
ditotolkan ekstrak dragendroff atau merah

b) Dengan Metode Culvenor Fitzgerald

Kloroform
4 gram daun segar Beri pasir dan
Dibasahi dengan etanol amoniak 0,05N
dirajang halus. gerus
10ml

1 tetes Reagen Lapisan asam Masukkan

diambil, Asam sulfat 2N dalam tabung Saring dengan
mayer
masukkan 5ml, kocok reaksi besar kapas
(+) terbentuk
endapan putih tabung reaksi dengan pipet
B. EKSTRAKSI DAN FRAKSINASI
1 kg serbuk daun
sidaguri dimaserasi Gunakan suhu Diuapkan dengan
Disaring
dengan methanol 3 x kamar rotary evaporator
5L

Dipekatkan Partisi cair-cair Didapat ekstrak

Residu kering dengan rotary dengan n- pekat metanol
evaporator heksana

Ekstrak Tambah HCL Diamkan

Skrining selama 24jam
methanol 2N hingga pH 2
fitokimia

Diekstraksi Tambah
Ekstrak Cuci dengan
dengan NH4OH pekat
dietileter Diuapkan dietileter
dietileter hingga pH 9-10
 C. PEMISAHAN DAN
PEMURNIAN
C. PEMISAHAN DAN PEMURNIAN
Ekstrak pekat dietileter yang mengandung senyawa alkaloid kemudian dipisahkan dengan
menggunakan kromatografi kolom. Sebelum dilakukan kromatografi kolom, terlebih dahulu
terhadap fraksi dietileter tersebut dilakukan uji Kromatografi Lapisan Tipis (KLT) analitik untuk
menentukan jenis eluen yang memiliki pola pemisahan paling baik yang akan digunakan pada
kromatografi kolom. Komposisi pelarut ditentukan berdasarkan pendekatan KLT. Isolasi senyawa
alkaloid dari daun sidaguri dilakukan dengan metoda kromatografi kolom menggunakan silika gel
60 sebagai fasa diam dan kloroform : metanol sebagai fasa gerak berdasarkan teknik “step
gradient polarity” (SGP). Eluen yang digunakan adalah kloroform : metanol dengan nilai
perbandingan sebagai berikut (90:10; 80:20; 70:30; 60:40; 40:60) Eluen ditampung dalam botol
vial 5 ml dan dianalisis dengan KLT. Fraksi-fraksi yang memiliki spot dengan nilai Rf yang sama
digabung dan pelarutnya diuapkan, selanjutnya dilakukan pemurnian.

D. KARAKTERISASI SENYAWA HASIL ISOLASI

senyawa hasil isolasi yang telah murni dilakukan
analisis dengan menggunakan spektrofotometer FT-IR
dan 1H-NMR.
 HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil maserasi 1 kg serbuk daun sidaguri
(Sida rhombifolia L.) dengan pelarut
metanol didapatkan ekstrak kasar metanol
sebanyak 120 gram, berbentuk cairan
kental. Ekstrak metanol ini dipartisi dengan
campuran pelarut n-heksana dan air dengan
perbandingan n-heksana:air (1:1). Masing-
masing ekstrak dipekatkan dengan rotary
evaporator sehingga diperoleh ekstrak
pekat metanol sebanyak 73 gram setelah
diekstraksi dengan dietileter maka
diperoleh ekstrak pekat dietileter sebanyak
45gram.
Berdasarkan uji KLT terhadap Hasil kromatografi kolom diperoleh sebanyak 117 fraksi,
ekstrak dietileter maka didapatkan kemudian dilakukan penggabungan fraksi- fraksi
pola pemisahan yang paling baik berdasarkan uji KLT dengan melihat nilai Rf. Fraksi-fraksi
yang memiliki spot dengan nilai Rf yang sama digabung
adalah kloroform : metanol dengan sehingga didapat 5 fraksi dan pelarutnya diuapkan. Dari
perbandingan (7:3). Isolasi senyawa kelima fraksi tersebut dilakukan skrining fitokimia dan
alkaloid dari daun sidaguri fraksi 2 dan 4 menunjukkan hasil positif mengandung
dilakukan dengan metoda senyawa alkaloid. Dalam penelitian ini hanya fraksi 2 yang
kromatografi kolom menggunakan dilakukan analisis lebih lanjut. Terhadap fraksi 2 tersebut
silika gel 60 sebagai fasa diam dan dilakukan pemurnian dan diperoleh padatan berwarna
kecoklatan sebanyak 59 mg. Berdasarkan hasil uji kelarutan
kloroform : metanol sebagai fasa senyawa ini memiliki kelarutan yang besar dalam kloroform
gerak. dan dari hasil KLT dengan menggunakan penampak noda
reagent dragendorf diperoleh noda tunggal.
 HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan data-data spektrum FT-
IR dan spektrum 1H-NMR khususnya
dengan adanya serapan gugus NH
yang merupakan ciri dari senyawa
alkaloid maka diduga bahwa daun
sidaguri (Sida rhombifolia L.)
mengandung senyawa metabolit
sekunder yaitu senyawa alkaloid.
Analisis spektrum FT-IR senyawa hasil isolasi
menunjukkan adanya vibrasi ulur N-H pada
bilangan gelombang 3395,10 cm-1 dengan pita
serapan yang tajam dan vibrasi regang N-H
pada 1508,27 cm-1. Hal ini didukung oleh
spektrum 1H- NMR yang menunjukkan adanya
satu puncak melebar pada pergeseran kimia δ
6,47-6,50 ppm yang diduga merupakan gugus
NH pada inti piperidin. (Sastrohamidjojo,
1994).
Pergeseran kimia pada daerah δ 6,80-7,01 ppm, δ
7,40-7,49 ppm menunjukkan adanya proton dari
cincin aromatis yang terikat pada cincin
heterosiklik (Chamberlain, 1974) yang didukung
oleh pita serapan spektrum IR pada bilangan
gelombang 1628,21 dan 1491,27 cm-1 yang
merupakan vibrasi C=C aromatik dan pada
pergeseran kimia δ 3,88 ppm terdapat puncak
singlet yang diduga dari proton gugus O-CH3
yang posisinya pada senyawa alkaloid hasil
isolasi belum dapat dipastikan (Jacobs, 1974).
Pergeseran kimia pada daerah δ 1,25 ppm terdapat
puncak singlet dengan intensitas yang tinggi dari
proton CH3 yang belum dapat dipastikan
jumlahnya. Danpergeeran kimia pada daerah 1,38-
2,35 ppm terdapat puncak multiplet dari
protonCH dan CH2 yang kemungkinan
menunjukk adanya proton CH dan CH2
yangmembentuk cincin alifatis dari piperidin. Hal
ini didukung oleh pita serapan padadari spektrum
IR pada bilangan gelombang 2933,19 cm-1yang
menunjukkan adanya vibrasi ulur C-H dan pada
bilangan gelombang 1448,25 dan 1424,24 cm-1
yang menunjukkan adanya vibrasi regang CH2
dan CH3.
KESIMPULAN

 Hasil isolasi yang diperoleh dari 1 kg daun

sidaguri (Sida rhombifolia L.) adalah padatan
kecoklatan sebanyak 59 mg.
 Berdasarkan uji skrining fitokimia dan analisis
spektrum FT-IR dan spektrum 1H-NMR maka
disimpulkan bahwa senyawa hasil isolasi adalah
senyawa alkaloid.
 Natural

Thank You