vii

MARETHA NORMA A. 0311010052 101. Isolasi Dan Karakterisasi Enzim Selulase Dari Isolat Bakteri Termofilik Sumber Air Panas Cangar (Tahura R. Soeryo), Batu, Jawa Timur. Pembi mbing: Dr.Ir.Aji Sutrisno, M.Sc. da n Erni Sofia Murtini, STP. MP. RINGKASAN Selulosa adalah senyawa paling banyak di alam dan tersusun atas 800012000 unit glukosa. Potensi inilah yang diteliti dan dikembangkan untuk menghasilkan glukosa dan kemudian difermentasi menjadi biofuel dalam bentuk etanol. Enzim selulase adalah alternatif untuk menghidrolisa selulosa karena sifat kerja enzim yang spesifik dan tidak menghasilkan limbah yang berbahaya. Enzim selulase dapat diisolasi dari bakteri dan fungi, dimana bakteri mempunyai laju pertumbuhan lebih cepat daripada fungi sehingga mempunyai potensi tinggi untuk menghasilkan selulase terutama yang diisolasi dari lingkungan berkondisi ekstrem seperti sumber air panas. Salah satu sumber air panas yang ada di daerah Batu, Jawa Timur adalah Sumber Air Panas Cangar. Tujuan dari penelitian ini adalah mendapatkan isolat bakteri yang mampu menghasilkan enzim selulase serta mengetahui karakter enzim selulase tersebut. Penelitian dilakukan dengan tahapan sebagai berikut: (1) Isolasi mikroba selulolitik dengan menggunakan CMC. (2) Isolasi dan pemurnian enzim selulase. (3) Karakterisasi enzim selulase (pH, temperatur, uji spesifitas substrat serta berat molekul dengan elektroforesis SDS-PAGE) Hasil penelitian menunjukkan bahwa 3 isolat bakteri (F,G, dan H) positif menghasilkan enzim selulase dimana isolat H mempunyai aktivitas paling tinggi berdasarkan zona bening dan uji aktivitas enzim. Enzim dari isolat H mempunyai aktivitas optimum pada pH 6 dan temperatur 55C. Enzim selulase kasar dari isolat H mempunyai nilai aktivitas 0,102 U/mL; kadar protein 2526,667 g/mL -5 -1 -1 dan aktivitas spesifik 4,037 x 10 mol.g .menit .Setelah dimurnikan dengan amonium sulfat aktivitas enzimnya meningkat menjadi 0,172 U/mL, kadar proteinnya menurun menjadi 2393,333 g/mL, sedangkan aktivitas -5 -1 -1 spesifiknya meningkat menjadi 7,194 x 10 mol.g .menit . Enzim selulase mempunyai aktivitas enzim tertinggi setelah didialisis yaitu 0,525 U/mL dan kadar protein terkecil 1893,333 g/mL. Pada uji spesifitas substrat, aktivitas tertinggi enzim murni selulase berturut-turut adalah dedak gandum>dedak padi>kertas>kertas koran>kulit pisang. Hasil elektroforesis SDS-PAGE enzim selulase menunjukkan adanya 5 pita protein yang diduga enzim selulase dan mempunyai berat molekul sebesar 41,984; 49,177; 51,16; 82,218; dan 88,982 kDa. Kata kunci: Isolasi bakteri, sumber air panas, enzim selulase

viii

MARETHA NORMA A. 0311010052 101. Isolation and Characterization of Thermophilic Cellulolytic Bacterium Isolated from Cangar (Tahura R. Soeryo) Hot Spring. Pembi mbing: Dr.Ir.Aji Sutrisno, M.Sc. dan Erni So fia Murtini, STP. MP. SUMMARY Cellulose is the most abundant component in nature and consist of 800012000 glucose linked by -1,4 glukosidic bond. This potential source is being studied and developed to produce glucose and then ferment it to etanol as biofuel. Cellulase become an alternative to hydrolyze cellulose because of the specific work and clean waste. Cellulase can be isolated from fungi and bacteria, bacteria which has high growth rate as compared to fungi has good potential to be used in cellulase production especially if it is isolated from high temperature environment such as thermal site. One of Batus thermal sites is Cangar hot spring. The objective of this research is to isolate cellulase producing bacteria and study the characterization of cellulase enzyme. The study involves some experiments as follows : (1). Isolating cellulolytic bacteria using CMC as the only carbon source. (2) Isolating and purifying cellulase enzyme. (3) Characterizing cellulase enzyme (pH, temperature, substrate specifity, and molecular weight using elektroforesis SDS-PAGE). The result showed that 3 isolates were found (F, G, and H) with isolate H had the highest activity based on clear zone that were produced and activity assay. Optimum cellulase activity from isolate H occurred at pH 6 and 55C. Crude cellulase enzyme had 0,102 U/mL cellulase activity; 2526,667 g/mL proteins; -5 -1 -1 dan 4,037 x 10 mol.g .menit specific activity. After purified with amonium sulphate, cellulase enzyme had 0,172 U/mL cellulase activity; 2393,333 g/mL -5 -1 -1 proteins; and 7,194 x 10 mol.g .menit specific activity. Cellulase enzyme after dialysis had the biggest enzyme activity 0,525 U/mL and the smallest proteins 1893,333 g/mL. On substrat specifity, enzyme activity in order from high to low was wheat bran>rice bran>paper>newspaper waste>banana peel. Upon elektroforesis SDS-PAGE, enzyme was found to consist 5 proteins with molecular weight 41,984; 49,177; 51,16; 82,218; and 88,982 kDa. Keyword: Bacteria isolation, hot spring, cellulase