Review Jurnal

Mikrobiologi Dasar

Judul : Isolasi dan Karakterisasi Produk

Amilase dan Optimasi Produksi Enzim

Penulis : Murali Krishnan, S., Arun Nagendran,

N., Pandiaraja, D. dan Vinayaga Moorthi, P.

Oleh :
Febriani Ayu Lestari
(1911012022)
 Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk

mengisolasi dan mengkarakterisasi
produk enzim amilase serta
mengoptimasi produksi enzim.
 ABSTRAK

Sampel tanah disaring untuk mengisolasi

bakteri tanah penghasil amilase. Isolat itu diamati
dari uji biokimia mikroskopis dan terpilih untuk
karakterisasi. Hasil gram pewarnaan
mengungkapkan bahwa strain VO1, VO2 dan VO3
adalah batang gram positif.
Amilase awal produksi dikonfirmasi dengan
menginokulasi isolat dalam kal Berg. Organisme itu
disesuaikan dengan suhu yang lebih tinggi untuk
mengembangkan enzim stabil termal dengan
menginokulasi koloni pada 400, 450 dan 500 C.
 PEMBAHASAN

Amilase adalah sekelompok enzim penting yang

dipekerjakan di industri pengolahan pati untuk hidrolisis
polisakarida seperti pati menjadi gula sederhana (Akpan
et al., 2002). Amilase dapat diperoleh dari beberapa
sumber seperti tanaman, hewan dan mikroba seperti
bakteri dan jamur (Murakami et al., 2008).
Bakteri dan Archea adalah mikroorganisme yang
paling melimpah di dalam tanah. Amilase memiliki
beragam aplikasi mulai dari mengubah pati menjadi gula
untuk produksi siklodekstrin pada industri farmasi.
Amilase adalah juga digunakan dalam industri tekstil,
deterjen, kertas dan penyulingan (Elela et al., 2009).
 PEMBAHASAN

Langkah pertama yang dilakukan untuk mengisolasi

bakteri penghasil enzim yaitu mengambil sampel
tanah,kemudian sampel tanah tersebut disaring untuk
mengisolasi produksi amilase bakteri tanah.Setelah
itu,sampel tanah yang dikumpulkan diencerkan dengan
pengenceran serial teknik. Dilakukan inkubasi pada 370 C
selama 24 jam, pada lempeng-lempeng itu ditambah
dengan sejumput kristal yodium.Selanjutnya Isolat yang
menjadi sasaran prosedur pewarnaan Gram dilakukan
berbagai uji biokimia.Pada pewarnaan gram,diketahui
bakteri penghasil enzim amilase ini termasuk Bakteri
Gram Positif.
 PEMBAHASAN

Setelah Proses Pewarnaan, produksi

amilase diuji menggunakan medium Berg kaldu
ditambah dengan 1% pati dan diinkubasi pada
suhu 450 C. komposisi media fermentasi
adalah 0,05g MgSO4, 0,05g K2 HPO4, 0,1g
FeSO4, 0,25g CaCl2, 0,2g MnSO4 dan 1g pati.
Strain yang terisolasi selanjutnya disaring untuk
diuji kemampuan mereka menghasilkan
amilase termo stabil, dengan suhu pengujian
400 , 450 dan 500 C.
\
 PEMBAHASAN
Proses selanjutnya adalah Fermentasi.Pada Proses
fermentasi dilakukan dengan 2 substrat,yaitu subsrat
Sabudana dan Substrat Sekam Padi.Produksi amilase
dengan substrat sabudana dilakukan dalam labu berbentuk
kerucut 250 ml yang mengandung 0,5g, 1g, 1,5g dan 2f
Sabudana.
Amilase diekstraksi dan Enzim diuji dilakukan secara
berkala dari 24 hingga 6 jam.Sedangkan Produksi amilase
dengan substrat sekam padi menggunakan media yang
dibasahi dengan media garam mineral dan uji enzim
dilakukan setelah 96 jam untuk mengoptimalkan konsentrasi
terbaik untuk produksi amilase.
 PEMBAHASAN

Setelah itu Aktivitas amilase diuji dengan mengukur

reduksi gula yang dibebaskan dalam campuran reaksi
dengan standar metodologi yang dijelaskan oleh Miller
(1959). Campuran reaksi terdiri dari 0,5 ml pati larut 1%
(W / V) dan 0,5ml sumber enzim yang diencerkan dengan
tepat dalam 2 ml 0,1M fosfat buffer (pH 6 hingga 8).
Setelah inkubasi pada (300, 400 , 450 C) suhu selama 20
menit reaksi dihentikan dan dilakukan penambahan asam
salisilat dinitro. Kemudian tabung direbus dalam
rendaman air selama 15 menit dan dengan demikian
mengurangi gula yang dikeluarkan oleh hidrolisis
enzimatik.
 KESIMPULAN

Satu unit amilase didefinisikan sebagai jumlah

enzim yang berhubungan dengan satu mikromol gula
reduksi sebagai glukosa per menit di bawah kondisi
pengujian dan aktivitas enzim dinyatakan sebagai aktivitas
spesifik direpresentasikan sebagai U / mg.Dalam penelitian
ini ada upaya untuk mengisolasi mikroba penghasil amilase
dari tanah.
Upaya tersebut telah menghasilkan tiga strain bakteri
yaitu Bacillus licheniformis, Bacillus firmis dan Paenibacillus
glucanolyticus yang menghasilkan amilase. Studi lebih
lanjut tentang aklimatisasi dan optimalisasi dapat
menyebabkan mengembangkan galur nilai kelangsungan
hidup dan stabilitas enzim pada suhu yang masih lebih
tinggi.
 KESIMPULAN

Pada saat ini Analisis berbagai konsentrasi sabudana dan

sekam padi adalah dipelajari untuk produksi amilase yang optimal. Hasil
mengungkapkan Paenibacillus glucanolyticus menunjukkan maksimum
produksi enzim (13680 U / ml) dengan substrat 2g fermentasi terendam.
Bacillus firmus dapat menghasilkan hasil maksimum (9810 U / ml)
dengan 15 g sekam padi dan hasil yang sama diamati pada
Paenibacillus glucanolyticus dengan substrat 12,5f.

Berbagai fisik dan faktor kimia telah diketahui mempengaruhi

produksi amilase seperti suhu, pH, dan periode inkubasi. pH merupakan
salah satu faktor penting yang menentukan pertumbuhan dan morfologi
mikroorganisme karena mereka peka terhadap konsentrasi ion hidrogen
hadir dalam medium. Yasser et al. (2012) mengisolasi B.licheniformis
dengan suhu optimal dan pH 60-80o C dan 6-7,5.
 KESIMPULAN

Maksimal, aktivitas enzim diamati pada 450 C. singh

et Al. (2010) telah mengungkapkan bahwa aktivitas enzim
tertinggi adalah diamati pada suhu 450 C. Sama dalam
penelitian ini, di masa sekarang mempelajari Bacillus
licheniformis, Bacillus firmus dan Paenibacillus
glucanolyticus lebih aktif dengan hasil maksimum 2340U /
ml pada 450 C. Hasil enzim diamati dibawah suhu 300 C.
Jadi penyelidikan ini telah menghasilkan identifikasi enzim
yang aktif pada 450 C dan akan bagus dalam potensi
aplikasi. Studi lebih lanjut tentang aklimatisasi dan
optimalisasi dapat menyebabkan mengembangkan galur
nilai kelangsungan hidup dan stabilitas enzim pada suhu
yang masih lebih tinggi.
TERIMA
KASIH