ANALISIS AFLATOKSIN PADA JAGUNG SECARA KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA TINGGI DENGAN PEMURNIAN SECARA

IMUNOAFINITAS
(Analysis of aflatoxins in corn detected by high performance liquid
chromatography with immunoaffinity clean-up)

LAPORAN KERJA PRAKTIK

DI BALAI PENGUJIAN MUTU DAN SERTIFIKASI PAKAN

Disusun sebagai salah satu syarat untuk mengikuti Seminar Kerja Praktik
pada Jurusan Kimia

Oleh
SYAFIRA NABILLA
NIM. 1147040076

Jurusan Kimia Fakultas Sains dan TeknologiUniversitas Islam Negeri Sunan

Gunung Djati
Bandung
2016
 HALAMAN PENGESAHAN

ANALISIS AFLATOKSIN PADA JAGUNG SECARA KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA TINGGI DENGAN PEMURNIAN SECARA
IMUNOAFINITAS
(Analysis of aflatoxins in corn detected by high performance liquid
chromatography with immunoaffinity clean-up)

LAPORAN KERJA PRAKTIK

SYAFIRA NABILLA
NIM. 1147040076

Telah disetujui oleh Pembimbing pada 20 September 2017

Menyetujui,

Pembimbing Akademik Pembimbing Instansi/Perusahaan

Tina Dewi Rosahdi, S.Pd., M.Si Drh. Syukron Amin, M.Si

NIP. 198311022011012005

Mengetahui,
Ketua Jurusan Kimia

Tety Sudiarti, M.Si.

NIP. 197010241994122003

i
 KATA PENGANTAR
Puji dan syukur saya panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa
karena atas berkat rahmat-Nya yang telah diberikan kepada saya sehingga
dapat dilaksanakan kerja praktek di laboratorium Balai Pengujian Mutu dan
Sertifikasi Pakan
Penulis menyadari bahwa tersusunnya laporan ini tidak lepas dari
bantuan banyak pihak yang sangat bermanfaat, untuk itu penulis
mengucapkan terima kasih kepada:
1. Ir. Junaida Kepala Balai di Balai Pengujian Mutu dan Sertifikasi Pakan
Bekasi yang telah memberikan kesempatan untuk melakukan Kerja
Praktik.
2. Bapak Drh. Syukron Amin M.Si selaku pembimbing di Balai Pengujian
Mutu dan Sertifikasi Pakan Bekasi yang senantiasa selalu membimbing
selama melakukan Kerja Praktik
3. Ibu Tina Dewi Rosahdi, S.Pd., M.Si selaku dosen pembimbing yang
menuntun saya dalam mengerjakan laporan ini
4. Ibu Tety Sudiarti, M.Si. Ketua Jurusan Kimia, Fakultas Sains dan
Teknologi, Universitas Islam Negeri Sunan Gunung Djati Bandung.
5. Kepada kedua orang tua yang selalu memberikan support dan doanya
dalam penyusunan laporan kerja praktik.
Sepenuhnya penulis masih menyadari akan penulisan yang masih
perlu diperbaiki lagi. Maka dari itu sangat diharapkan untuk mengritik atau
membuat saran kepada penulis demi mewujudkan hal yang baik untuk
kedepannya.
Akhir kata, terimakasih atas semuanya. Semoga laporan kerja
praktik ini dapat bermanfaat untuk kedepannya.

Bekasi, 29 December 2017 / 1 Muharam 1444

Penulis

ii
 DAFTAR ISI

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ i

KATA PENGANTAR ........................................................................................... ii

DAFTAR ISI ......................................................................................................... iii

DAFTAR ISTILAH ........................................................................................... viii

BAB 1 PENDAHULUAN ................................................................................. 1

1.1 Latar Belakang ......................................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah .................................................................................... 2

1.3 Batasan Masalah ....................................................................................... 2

1.4 Tujuan Kerja Praktik ................................................................................ 2

1.5 Manfaat Kerja Praktik .............................................................................. 2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................... 4

2.1 Jagung ....................................................................................................... 4

2.2 Tinjauan Umum Aflatoksin ...................................................................... 5

2.3 KCKT (Kromatografi Cair Kinerja Tinggi) ............................................. 7

2.3.1 Fasa Gerak pada KCKT .......................................................................... 8

2.3.2 Fasa Diam Pada KCKT........................................................................... 8

2.3.3 Komponen Utama KCKT ....................................................................... 8

2.3.3.1 Wadah fasa gerak dan fasa gerak .................................................... 9

2.3.3.2 Injektor ............................................................................................ 9

2.3.3.3 Sistem Pompa ................................................................................ 10

2.3.3.4 Kolom............................................................................................ 10

2.3.3.5 Oven .............................................................................................. 11

2.3.3.6 Detektor ......................................................................................... 11

2.3.3.7 Komputer, Integrator atau Rekorder ............................................. 11

iii
BAB III TINJAUAN INSTANSI/PERUSAHAAN BALAI PENGUJIAN
MUTU SERTIFIKASI PAKAN BEKASI ........................................................ 12

3.1 Deskripsi Perusahaan .................................................................................. 12

3.2 Tugas dan Fungsi ......................................................................................... 13

3.3 Struktur Organisasi ...................................................................................... 14

3.4 Visi dan Misi ............................................................................................... 14

3.4.1 Visi ........................................................................................................ 14

3.4.2 Misi ....................................................................................................... 14

3.5 Pelaksanaan Tugas dan Fungsi ............................................................... 15

3.5.1 Urusan Kepegawaian ............................................................................ 15

3.5.1.1 Jumlah Pegawai ............................................................................. 15

3.5.1.2 Komposisi Pendidikan Pegawai .................................................... 18

3.5.2 Seksi Penyiapan Sampel ....................................................................... 21

3.5.2.1 Tugas dan Fungsi .......................................................................... 21

3.5.3 Seksi Pelayanan Teknis ........................................................................ 22

BAB IV STUDI KHUSUS KERJA PRAKTIK ............................................ 23

4.1 Waktu dan Tempat Kerja Praktik ................................................................ 23

4.2 Bahan, Alat, dan Instrumentasi ................................................................... 23

4.3 Prosedur ....................................................................................................... 23

4.3.1 Analisis Kadar Aflatoksin dengan Metode KCKT ............................... 23

4.3.2 Preparasi Sampel dan Pembuatan Larutan Methanol 80 % .................. 23

4.3.3 Pembuatan Fasa Gerak.......................................................................... 24

4.3.4 Pembuatan Ekstrak Larutan Sampel ..................................................... 24

4.3.5 Pengujian Aflatoksin dengan KCKT .................................................... 24

4.3.6 Perhitungan ........................................................................................... 25

BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 28

iv
 5.1 Hasil Analisis Kadar Aflatoksin dengan Metode KCKT di Balai Pengujian
Mutu dan Sertifikasi Pakan ............................................................................... 28

BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN............................................................. 35

6.1 Kesimpulan .................................................................................................. 35

6.2 Saran ............................................................................................................ 35

v
 Daftar Gambar

Gambar 1 Diagram Komponen KCKT ................................................................... 9

Gambar 2 Struktur Organisasi Balai Pengujian Mutu dan Sertifikasi .................. 14

Gambar 3 Tampilan Biji Jagung Secara Fisik....................................................... 28

Gambar 4 Kromatogram Pembanding 52 ppb Standar Aflatoxin G2, G1, B2, B1.
............................................................................................................................... 29

Gambar 5 Kromatogram Sampel Jagung 314.1369 .............................................. 30

Gambar 6 Kromatogram Sampel Jagung 314.1370 .............................................. 30

Gambar 7 Kromatogram Sampel Jagung 314.1371 .............................................. 31

vi
 Daftar Tabel

Tabel 1. Data Pegawai Sesuai Daftar Urut Kepangkatan ..................................... 15

Tabel 2. Data Komposisi Pendidikan Pegawai Tahun 2016 ................................. 19

Tabel 3 Hasil Pembanding 52 ppb Standar Aflatoxin G2, G1, B2, B1. .............. 29

Tabel 4 Hasil Sampel Jagung 314.1369 ................................................................ 30

Tabel 5 Hasil Sampel Jagung 314.1370 ................................................................ 31

Tabel 6 Hasil Sampel Jagung 314.1371 ................................................................ 31

Tabel 7 Hasil Keseluruhan Analisis Sampel 314.1369, 314.1370 dan 314.1371 . 32

vii
 DAFTAR ISTILAH

Istilah Arti / Maksud

Absorpsi Suatu proses sewaktu atom, molekul atau ion memasuki

suatu fase limbak (bulk) lain yang bisa berupa gas, cairan,
ataupun padatan.

Degradasi Proses dimana kondisi lingkungan biofisik berubah akibat

aktivitas manusia, perubahan cenderung merusak dan tidak
diinginkan.

Proses pemisahan suatu zat berdasarkan kelarutannya

Ekstraksi
terhadap dua cairan yang tidak saling bercampur

Eluen Bagian pembawa dari fasa gerak yang menggerakkan analit

melalui kromatogram.

Elusi Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan

mengalirkan suatu pelarut (eluen) melewati kompleks
penjerap analit.

Hidrolisis Reaksi kimia yang memecah molekul air menjadi kation

hidrogen dan anion hidroksida melalui suatu proses kimia.

Karsinogenik Zat yang menyebabkan penyakit kanker.

Metabolisme Pertukaran zat antara suatu sel atau organisme secara

keseluruhan dengan zat antara suatu sel atau organisme
secara keseluruhan dengan lingkungan.

viii
 Istilah Arti / Maksud

Mikotoksin Racun hasil dari proses metabolisme sekunder jamur yang

dapat menyebabkan perubahan fisiologis abnormal atau
pathologis pada manusia dan hewan.
Partisi
Pengaturan data pada harddisk.

Zat yang bila dapat memasuki tubuh dalam keadaan cukup

Toksik
dan secara konsisten dapat menyebabkan fungsi tubuh
menjadi tidak normal.

ix
 BAB 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Jagung merupakan komoditi yang cukup penting baik bagi manusia maupun
bagi hewan. Jagung sebagai tanaman pangan terpenting dunia selain gandum juga
padi dan merupakan bahan baku utama penyusun pakan ternak di Indonesia. Selain
itu jagung juga banyak diolah sebagai bentuk bahan makanan lain, diantaranya
tepung maizena, pop corn, sup, bakwan, bahan campuran dalam pembuatan roti
dan kue. Jagung di Indonesia pada umumnya mengandung kadar aflatoksin yang
cukup tinggi. Dari berbagai hasil penelitian di Indonesia, aflatoksin merupakan
mikotoksin utama pencemar jagung dan bahan pakan ternak.
Aflatoksin adalah racun yang dihasilkan kapang Aspergillus sp. Zat ini
berbahaya bagi kesehatan manusia maupun hewan karena bersifat toksik terhadap
bahan pangan yang terkontaminasi dan merupakan penyebab utama kanker hati.
Cemaran Aspergillus flavus pada jagung umumnya terjadi sejak tanaman masih
berada di kebun, karena kapang ini merupakan jenis kapang yang secara alami
terdapat pada tanah. Beberapa kondisi yang mendorong pertumbuhan A. flavus
adalah kadar air dan kelembaban yang cukup tinggi serta kondisi atmosfer. A.
flavus mampu tumbuh dengan baik pada kadar air 13-18%, suhu sekitar 300C dan
RH ≥ 95%. Mengingat Indonesia adalah negara beriklim tropis yang merupakan
lingkungan yang sangat ideal untuk tumbuh kembang berbagai jenis kapang seperti
Aspergilus flavus yang merupakan penghasil utama aflatoksin B1. Bila tidak
dikendalikan, kandungan aflatoksin pada jagung akan semakin meningkat karena
aflatoksin dapat dihasilkan jamur sejak dari masa tanam sampai masa penyimpanan
dan didukung sifat mikotoksin yang stabil terhadap lingkungan, dan tidak mudah
rusak dengan berbagai pengolahan.
Oleh karena itu, diperlukan suatu metode pengujian yang sesuai untuk
mengetahui kandungan aflatoksin dalam biji jagung yaitu dengan metode KCKT
(Kromatografi Cair Kinerja Tinggi) atau dikenal juga dengan HPLC (High
Performance Liquid Chromatography).

1
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang di atas maka permasalahan yang perlu dirumuskan
adalah sebagai berikut:
1. Bagaimana prinsip kerja KCKT pada bahan pakan jagung ?
2. Bagaimana proses analisis aflatoksin pada bahan pakan jagung menggunakan
metode KCKT dengan pemurnian secara imunoafinitas ?

1.3 Batasan Masalah

Untuk meneliti permasalahan yang telah dirumuskan, studi khusus kerja praktek
ini akan dibatasi pada beberapa masalah berikut:
1. Analisis yang dilakukan yaitu aflatoksin pada bahan pakan jagung
2. Metode analisis yang digunakan adalah metode KCKT dengan pemurnian
secara imunoafinitas
3. Sampel yang di ambil di khususkan pada pakan jagung

1.4 Tujuan Kerja Praktik

Berdasarkan latar belakang dan rumusan masalah yang diajukan, tujuan
dilakukannya studi khusus kerja praktik ini adalah sebagai berikut:
1) Mengenal dan berhubungan secara langsung dengan dunia kerja serta
menambah wawasan ilmu pengetahuan dan keterampilan dari Mahasiswa.
2) Mengetahui suatu proses analisis aflatoksin pada pakan jagung dengan
menggunakan metode KCKT dengan pemurnian secara imunoafinitas yang
dilakukan pada Balai Pengujian Mutu Dan Sertifikasi Pakan.
3) Mempelajari suatu proses analisis aflatoksin pada pakan jagung dengan
menggunakan metode KCKT dengan pemurnian secara imunoafinitas yang
dilakukan pada Balai Pengujian Mutu Dan Sertifikasi Pakan.

1.5 Manfaat Kerja Praktik

Penelitian dalam kerja praktik ini diharapkan dapat bermanfaat bagi
Mahasiswa, Universitas dan Balai Pengujian pada tempat kerja praktik yang dapat
memberikan pengetahuan pada Mahasiswa tentang proses analisis aflatoksin pada
pakan jagung Dengan mengetahui metode yang digunakan pada proses analisis

2
aflatoksin pada pakan yaitu metode KCKT dan bermanfaat bagi Universitas dan
Balai Pengujian Mutu Dan Serifikasi Pakan dengan menjalin suatu hubungan kerja
sama khususnya jurusan Kimia Sains dan Teknologi Universitas Negeri Sunan
Gunung Djati Bandung dengan Balai Pengujian Mutu Dan Serifikasi Pakan
sehingga dapat mendukung proses pembelajaran.
.

3
 BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Jagung
Tanaman jagung merupakan salah satu jenis tanaman pangan biji-bijian dari
keluarga rumput-rumputan. Berasal dari Amerika yang tersebar ke Asia dan Afrika
melalui kegiatan bisnis orang-orang Eropa ke Amerika. Sekitar abad ke-16 orang
Portugal menyebar luaskannya ke Asia termasuk Indonesia. Orang Belanda
menamakannya mais dan orang Inggris menamakannya corn. [1]
Jagung mulai berkembang di Asia Tenggara pada pertengahan abad ke 16 dan
pada awal abad ke 17 mulai berkembang menjadi tanaman yang banyak
dibudidayakan di Indonesia, Filipina, dan Thailand. Pada pertengahan abad 18,
tanaman jagung tumbuh luas di Cina, di selatan Fukien, hunan dan Szechwan.
Populasi jagung berkembang dengan pesat sejak abad 18. Di Cina, jagung
dibutuhkan sebagai bahan makanan terutama di bagian utara, dan dari sini jagung
mulai menyebar ke Korea dan Jepang. Dan kurang dari 300 tahun sejak 1500 M,
tanaman jagung telah tersebar di seluruh dunia dan menjadi salah satu bahan
makanan penting bagi penduduk dunia. [1]
Tanaman jagung sangat bermanfaat bagi kehidupan manusia dan hewan. Di
beberapa daerah di Indonesia, jagung menjadi makanan pokok, yaitu di Madura dan
Nusa Tenggara. Berdasarkan urutan bahan makanan pokok di dunia, jagung
menduduki urutan ke 3 setelah gandum dan padi. Akhir-akhir ini tanaman jagung
semakin meningkat penggunaannya. Tanaman jagung banyak sekali gunanya,
karena hampir seluruh bagian dari tanaman jagung dapat dimanfaatkan untuk
berbagai macam keperluan. Selain sebagai sumber karbohidrat, jagung juga
ditanam sebagai bahan baku pakan ternak (hijauan maupun tongkolnya), diambil
minyaknya (dari bulir), dibuat tepung (dari bulir, dikenal dengan istilah tepung
jagung atau maizena), dan bahan baku industri (dari tepung bulir dan tepung
tongkolnya). [2]
Jagung merupakan tanaman semusim (annual). Satu siklus hidupnya
diselesaikan dalam 80-150 hari. Paruh pertama dari siklus merupakan tahap
pertumbuhan vegetatif dan paruh kedua untuk tahap pertumbuhan generatif. [3]

4
2.2 Tinjauan Umum Aflatoksin
Aflatoksin adalah suatu mikotoksin yang merupakan metabolit hasil jamur
Aspergillus flavus dan A. parasiticus. Aflatoksin merupakan kontaminan yang
paling sering dijumpai pada hasil panen pertanian serta bahan makanan pokok dibanyak
negara berkembang sehingga mengancam keamanan pangan. Toksin yang dikeluarkan
oleh jamur ini dapat dijumpai selama masa produksi bahan pangan, pada waktu panen, pada
saat penyimpanan dan proses pembuatan makanan. Kondisi lingkungan yang diperlukan
untuk terbentuknya aflatoksin oleh kapang adalah kelembaban minimum 85 persen
dan suhu optimum 25-27°C. A. flavus umumnya memproduksi aflatoksin,
sedangkan A. parasiticus dapat memproduksi aflatoksin B dan aflatoksin G. A.
flavus terdapat di mana-mana, sedangkan A. parasiticus tidak. Saat ini ada 4 macam
aflatoksin yaitu AFB1, AFB2 , AFG1, dan AFG2 yang merupakan aflatoksin induk
yang telah dikenal secara alami dan dijumpai di alam. AFB1 adalah jenis aflatoksin
yang paling toksik di banding AFB2 , AFG1, dan AFG2, mempunyai daya racun
yang rendah, hanya 1/60-1/100 kali dibandingkan AFB1, dan tidak terlalu
berbahaya. [4]
Pakan yang terkontaminasi aflatoksin, diantaranya adalah kacang-kacangan,
beras, jagung, gandum, biji kapas dan biji-bijian lainnya. Tercemarnya pakan ternak
oleh kapang dan aflatoksin juga dilaporkan dapat mengganggu fungsi metabolisme,
absorpsi lemak, penyerapan unsur mineral, khususnya tembaga (Cu), besi (Fe),
kalsium (Ca), dan fosfor (P), serta beta-karoten, penurunan kekebalan tubuh,
kegagalan program vaksinasi, kerusakan kromosom, perdarahan dan memar.
Semua gangguan tersebut berakibat pertumbuhan terhambat dan kematian
meningkat sehingga produksi ternak menurun. [5]
Aflatoksin mempunyai sifat karsinogenik dan hepatoksik. Sifat ini tergantung
pada lama dan tingkat paparan terhadap aflatoksin. Konsumsi aflatoksin dosis
tinggi dapat menyebabkan terjadinya aflatoksikosis akut yang dapat menimbulkan
manifestasi hepatoksisitas atau pada kasus-kasus berat dapat terjadi kematian akibat
fulminat liver failure. Manusia dapat terpapar oleh aflatoksin
dengan mengkonsumsi makanan yang terkontaminasi oleh toksin hasil dari
pertumbuhan jamur ini. Kadang paparan sulit dihindari karena pertumbuhan jamur
di dalam makanan sulit untuk dicegah. [1]

5
 Di Indonesia, aflatoksin merupakan mikotoksin yang sering ditemukan pada
produk-produk pertanian dan hasil olahan. Selain itu, residu aflatoksin dan
metabolitnya juga ditemukan pada produk peternakan seperti susu, telur dan daging
ayam. Aflatoksin juga dapat dijumpai pada susu yang dihasilkan hewan
ternak yang memakan produk yang terinfestasi kapang tersebut. Obat juga dapat
mengandung aflatoksin bila terinfestasi kapang ini. Praktis semua produk pertanian
dapat mengandung aflatoksin meskipun biasanya masih pada kadar toleransi.
Daerah tropis merupakan tempat berkembang biak paling ideal. Toksin ini memiliki
paling tidak 13 varian, yang terpenting adalah B1, B2, G1, G2, M1, dan M2.
Aflatoksin B1 dihasilkan oleh kedua spesies, sementara G1 dan G2 hanya
dihasilkan oleh A. parasiticus. Aflatoksin M1, dan M2 ditemukan pada
susu sapi dan merupakan epoksida yang menjadi senyawa antara jenis
alfatoksin berdasarkan penampakan fluoresensinya pada lempeng kromatografi
lapis tipis di bawah sinar UV yang memberikan warna biru (blue) untuk B dan
warna hijau (green) untuk G. [6]
Aflatoksin B1, senyawa yang paling toksik,berpotensi merangsang kanker,
terutama kanker hati. Serangan toksin yang paling ringan adalah lecet (iritasi)
ringan akibat kematian jaringan (nekrosis). Pemaparan pada kadar tinggi dapat
menyebabkan sirosis, karsinoma pada hati, serta gangguan pencernaan, penyerapan
bahan makanan, dan metabolisme nutrien. Toksin ini di hati akan direaksi
menjadi epoksida yang sangat reaktif terhadap senyawa-senyawa di dalam sel.
Efek karsinogenik terjadi karena basa N guanin pada DNA akan diikat dan
mengganggu kerja gen. Pemanasan hingga 2500C tidak efektif menginaktifkan
senyawa ini. Akibatnya bahan pangan yang terkontaminasi biasanya tidak dapat
dikonsumsi lagi. Lewis. [7]

6
2.3 KCKT (Kromatografi Cair Kinerja Tinggi)
Kromatografi cair kinerja tinngi (KCKT) merupakan teknik pemisahan yang
dapat diterima secara luas untuk analisis dan pemurnian senyawa tertentu dalam
suatu sampel pada sejumlah bidang. Pemisahan solut-solut ini diatur oleh distribusi
solut dalam fase gerak dan fase diam, Kalau ditinjau dari sitem peralatannya, KCKT
termasuk kromatografi kolom karena dipakai fase diam yang diisikan atau
terpacking di dalam kolom. Bila ditinjau dari proses pemisahannya, KCKT dapat
digolongkan sebagai kromatografi adsorpsi atau kromatografi partisi tergantung
pada butiran-butiran fase diam yang ada di dalam kolom sebagai fase padat atau
disalut dengan cairan. [8]
KCKT merupakan metode yang tidak destruktif dan dapat digunakan baik untuk
analisis kuantitatif ataupun kualitatif. KCKT paling sering digunakan untuk
menetapkan kadar senyawa-senyawa tertentu seperti menentukan kadar senyawa
aktif obat, produk hasil samping proses sintesis atau produk-produk degradasi
dalam sediaan farmasi, memonitor sampel-sampel yang berasal dari lingkungan,
memurnikan senyawa dalam suatu campuran, memisahkan polimer dan
menentukan distribusi berat molekulnya dalam suatu campuran, kontrol kualitas
dan mengikuti jalannya reaksi sintesis. [9]
KCKT merupakan teknik pemisahan yang paling banyak digunakan karena
memiliki kelebihan dalam hal sensitivitas, selektivitas, sesuai untuk pemisahan
senyawa nonvolatile atau senyawa termolabil yang tidak bisa dianalisis dengan
kromatografi gas, dan penggunaan untuk analit yang luas seperti antibiotik,
senyawa metal-organik dan senyawa anorganik.selain itu kelebihan dari metode
KCKT diantaranya adalah risiko peruraian sampel yang lebih kecil dibandingkan
dengan metode Kromatografi Gas, mudah diotomatisasi, pemasukan sampel yang
tepat dan mudah dikendalikan menjamin presisi kuantitatif, dan keragaman kolom
serta detektor menunjukkan bahwa selektivitas metode tersebut dapat disesuaikan
dengan mudah. KCKT merupakan teknik kromatografi yang perkembangannya
tampak paling intensif beberapa tahun belakangan ini. [10]

7
2.3.1 Fasa Gerak pada KCKT
Fase gerak atau eluen biasanya terdiri atas campuran pelarut yang dapat
bercampur yang secara keseluruhan berperan dalam daya elusi dan resolusi. Daya
elusi dan resolusi ini ditentukan oleh polaritas keseluruhan pelarut, polaritas fase
diam dan sifat komponen-komponen sampel. Untuk fase normal (fase diam lebih
polar dari pada fase gerak), kemampuan elusi meningkat dengan meningkatnya
pelarut. Sementara untuk fase terbalik (fase diam kurang polar dari pada fase gerak),
kemampuan elusi menurun dengan meningkatnya polaritas pelarut. Elusi pada
KCKT ada 2 cara yaitu cara isokratik dan cara dan cara gradient. Cara isokratik,
komposisi fase gerak tetap selama elusi sementara untuk cara gradien komposisi
fase gerak berubah-ubah. Deret elutropik yang disusun berdasarkan polaritas
pelarut merupakan panduan yang berguna dalam KCKT. [8]

2.3.2 Fasa Diam Pada KCKT

Kebanyakan fase diam pada KCKT berupa silica yang dimodifikasi secara
kimiawi, silika yang tidak dimodifikasi atau polimer-polimer stiren dan divinil
benzen, permukaan silika memiliki sifat polar dan sedikit asam karena adanya
residu gugus silanol (Si-OH). Silika dapat dimodifikasi secara kimiawi dengan
menggunakan reagen-reagen seperti klorosilan. Reagen-reagen ini akan bereaksi
dengan gugus silanol dan menggantinya dengan gugus-gugus fungsional lain. Hasil
reaksi yang diperoleh disebut dengan silika fase terikat yang stabil terhadap
hidrolisis karena terbentuk ikatan-ikatan siloksan ( Si-O-O-Si). Salah satu jenis
silika yang dimodifikasi adalah oktadesil silika (ODS atau C18) yang merupakan
fase diam yang paling banyak digunakan karena mampu memisahkan senyawa-
senyawa dengan kepolaran yng rendah, sedang, maupun tinggi. [8]

2.3.3 Komponen Utama KCKT

Instrument KCKT pada dasarnya terdiri dari atas delapan komponen pokok
yaitu : wadah fase gerak, sistem penghantaran fase gerak, alat untuk memasukkan
sampel, kolom, detekor, wadah penampung buangan fase gerak, tabung
penghubung dan suatu computer atau integrator atau perekam. [8]

8
 Gambar 1 Diagram Komponen KCKT

2.3.3.1 Wadah fasa gerak dan fasa gerak

Wadah fasa gerak harus bersih dan inert. Wadah pelarut kosong atau labu
laboratorium dapat digunakan sebagai wadah fase gerak. Wadah ini dapat
menampung satu sampai dua liter pelarut. Fase gerak sebelum digunakan harus
dilakukan penghilangan gas yang ada dalam fase gerak, sebab dengan adanya gas
akan berkumpul dengan komponen lain terutama di pompa dan detektor sehingga
dapat mengacaukan analisis. [8]

2.3.3.2 Injektor
Sampel-sampel cair dan larutan disuntikkan secara langsung ke dalam fase gerak
yang mengalir di bawah tekanan menuju kolom menggunakan alat penyuntik yang
terbuat dari tembaga tahan karat dan katup teflon yang dilengkapi dengan keluk
sampel (sampel loop) internal atau eksternal. Pada saat pengisian sampel, sampel
dialirkan melewati keluk sampel dan kelebihannya akan dikeluarkan ke pembuang.
Pada saat penyuntikan, katup di putar sehingga fase gerak melewati keluk sampel
dan aliran sampel ke dalam kolom. Presisi penyuntikan dengan keluk sampel ini
dapat mencapai nilai RSD 0,1%. Penyuntikan ini mudah digunakan untuk
otomatisasi dan sering digunakan untuk autosampler pada KCKT. [8]

9
2.3.3.3 Sistem Pompa
Pompa yang digunakan untuk KCKT harus inert terhadap fase gerak. Bahan
umum yang dipakaFFi untuk pompa adalah gelas, baja, tahan karat, Teflon dan batu
nilam. Pompa yang digunakan sebaiknya mampu memberikan tekanan sampai 5000
psi dan mampu mengalirkan fase gerak dengan kecepatan alir 3 mL/menit. Tujuan
penggunaan pompa atau sistem penghantaran fase gerak adalah untuk menjamin
proses penghantaran fase gerak berlangsung secara tepat, reproduksibel, konstan
dan bebas dari gangguan. [8]
Berdasarkan cara mencampur solven, pompa dapat dibagi menjadi sistem
pencampuran bertekanan tinggi dan sistem pencampuran bertekanan rendah. Pada
pencampuran bertekanan tinggi, pencampuran fase gerak dilakukan dengan
memakai pompa-pompa bertekanan tinggi dari masing-masing botol eluen yang
kemudian dielusikan ke dalam kolom. Sedangkan pada sistem pencampuran
bertekanan rendah, pencampuran solven dilakukan dengan pompa bertekanan
rendah, pencampuran solven dilakukan dengan pompa bertekanan rendah dari
masing-masing botol kemudian setelah bercampur, dielusikan oleh pompa
bertekanan tinggi. [10]

2.3.3.4 Kolom
Kolom adalah suatu kunci penting untuk kromatografi yang baik pada
KCKT. Silika (SiO2.xH2O) merupakan bahan pengisi kolom terpaking yang sering
digunakan. Kolom terdiri dari ikatan siloksan (Si-O-Si) dengan struktur tiga
dimensi yang kaku yang mengandung pori yang saling berhubungan. Ukuran pori
dan konsentrasi gugus sianol (Si-OH) dapat diatur pada proses produksi kolom.
Bahan yang sering digunakan sebagai fase diam adalah oktadesilsilika (ODS) yang
mengandung rantai C18. Kolom yang digunakan pada KCKT pada umumnya
memiliki panjang 5-25 cm dengan diameter bagian dalam sebesar 4,6 mm, ukuran
partikel 5 µm dan mengandung 40.000 sampai 70.000 plat/meter. [8]

10
2.3.3.5 Oven
Pada KCKT sistem terbalik ( reversed-phase), temperature kolom
menentukan waktu retensi dan mempengaruhi selektivitas. Temperature yang
digunakan dalam analisis berkisar antara 30-50 0C penggunaan suhu lebih dari 60
0
C berpengaruh pada stabilitas analit dan masa kerja kolom. [10]

2.3.3.6 Detektor
Detektor pada KCKT dikelompokkan menjadi 2 golongan yaitu : detektor
universal yang mampu mendeteksi zat secara umum, tidak bersifat spesifik, dan
tidak bersifat selektif dan golongan detektor yang secara spesifik yang hanya akan
mendeteksi analit secara spesifik dan selektif, seperti detektor UV-Vis, detektor
fluoresensi dan elektrokimia. [8]

2.3.3.7 Komputer, Integrator atau Rekorder

Alat pengumpulan data seperti computer, integrator, atau rekorder,
dihubungkan dengan detektor. Alat ini akan mengukur sinyal elektronik yang
dihasilkan oleh detektor lalu memplotkannya sebagai suatu kromatogram yang
selanjutnya dapat dievaluasi oleh seorang analis. Komputer mempunyai
keuntungan lebih karena computer secara elektronik mampu menyimpan
kromatogram untuk evaluasi di kemudian hari. [8]

11
 BAB III TINJAUAN INSTANSI/PERUSAHAAN BALAI PENGUJIAN
MUTU SERTIFIKASI PAKAN BEKASI

3.1 Deskripsi Perusahaan

Unit pelaksana teknis (UPT) Balai Pengujian Mutu dan Sertifikasi Pakan
semula merupakan instalasi atau unit laboratorium dari UPT. Balai pembibitan
Ternak dan Hijauan Makanan Ternak Cisarua. Kemudian dipindahkan lokasinya
dari Cisarua pada tahun 1979-1983, setelah itu pindah ke Tambun, Bekasi pada
tahun 1983.
Pada tahun 1994, sesuai dengan KEPMENTAN No.465/Kpts/OT.210/6/94
instalasi unit lab berubah menjadi Loka Pengujian Mutu Pakan (LPMP), Eselon IV.
Pada tahun 1997 lokasi LPMP dipindahkan ke desa Burangkeng, Kecamatan Setu,
Kabupaten Bekasi karena terjadinya tukar guling (ruislag) yang dilakukan oleh
Dinas Peternakan Provinsi Jawa Barat.
Pada tahun 2001, LPMP berubah menjadi Balai Pengujian Mutu Pakan
Ternak (BPMPT) Eselonoring IIIA dengan Kepmentan No.
458/Kpts/OT.210/8/2001 dan telah dilakukan perubahan dengan Permentan No.
65/Kpts/OT.210/8/2006 yang merupakan UPT Direktorat Jenderal Peternakan
Departemen Pertanian yang berada di bawah dan bertanggung jawab langsung
kepada Direktur Budidaya Ternak Non Ruminansia. Tahun 2013 terjadi
reorganisasi di Kementerian Pertanian berdampak juga untuk BPMPT, sehingga
terjadi perubahan nomenklatur dari BPMPT menjadi BPMSP (Balai pengujian
Mutu dan Sertifikasi Pakan) dengan perubahan tugas selain melaksanakan
pengujian juga sertifikasi dengan pertambahan fungsi dari sebelumnya 7 menjadi
15 fungsi.
Selanjutnya dengan telah diterbitkannya Peraturan Menteri Pertanian
Nomor 19/Permentan/OT.140/4/2009 tentang Syarat dan Tata Cara Pendaftaran
Pakan, BPMSP Bekasi memiliki tugas sebagai laboratorium pengujian mutu pakan
lingkup Kementerian Pertanian yang berwenang untuk melakukan pengujian dan
menerbitkan sertifikat hasil pengujian sebagai syarat untuk mendapatkan Nomor
Pendaftaran Pakan (NPP) untuk pakan yang akan diedarkan.

12
3.2 Tugas dan Fungsi
Berdasarkan Peraturan Menteri Pertanian Nomor 59/Permentan/OT.140/ 5/ 2013
tanggal 24 Mei 2013 tentang Organisasi dan Tata Kerja Balai Pengujian Mutu dan
Sertifikasi Pakan, BPMPT berubah nomenklatur menjadi Balai Pengujian Mutu dan
Sertifikasi Pakan (BPMSP) Bekasi yang merupakan unit pelaksana teknis di bidang
peternakan dan kesehatan hewan yang berada di bawah dan bertanggung jawab
kepada Direktur Jenderal Peternakan dan Kesehatan Hewan, dan secara teknis
dibina oleh Direktur Pakan Ternak. Dalam melaksanakan Tugas dan Fungsi
tersebut Balai Pengujian Mutu dan Sertifikasi Pakan (BPMSP) Bekasi
menyelenggarakan fungsi sebagai berikut :
a. Menyusun program, rencana kerja, dan anggaran, pelaksanaan kerjasama,
serta penyiapan evaluasi dan pelaporan.
b. Melaksanakan penyiapan sampel mutu pakan.
c. Melaksanakan pengujian mutu dan keamanan pakan.
d. Menyiapkan perumusan hasil pengujian mutu dan keamanan pakan.
e. Melaksanakan sertifikasi hasil pengujian mutu dan keamanan pakan.
f. Melaksanakan sertifikasi mutu dan keamanan pakan.
g. Menyelenggarakan uji profisiensi pakan.
h. Melaksanakan fungsi laboratorium rujukan dan acuan.
i. Mengembangkan teknik dan metode pemeriksaan dan pengujian mutu dan
keamanan pakan.
j. Melaksanakan pemantauan dan survei mutu dan keamanan pakan.
k. Melaksanakan bimbingan teknis laboratorium pakan dan mutu pakan.
l. Melaksanakan pengujian mutu dan sertifikasi benih/ bibit pakan hijauan.
m. Melayani teknis kegiatan pemeriksaan dan pengujian mutu dan keamanan
pakan.
n. Menyebarkan informasi dan dokumentasi hasil pengujian mutu dan
keamanan pakan.
o. Melaksanaan urusan tata usaha dan rumah tangga BPMSP.

13
3.3 Struktur Organisasi
BPMSP dipimpin oleh seorang Kepala Balai yang dibantu oleh : Kepala
Subbagian Tata Usaha, Kepala Seksi Pelayanan Teknik, Kepala Seksi Penyiapan
Sampel, Kelompok Jabatan Fungsional Pengawas Mutu Pakan, fungsional umum,
tenaga honorer dan tenaga kontrak. Struktur Organisasi BPMSP Bekasi
berdasarkan Peraturan Menteri Pertanian Nomor 59/Permentan/OT.140/ 5/ 2013
tanggal 24 Mei 2013, tentang perubahan atas Keputusan Menteri Pertanian Nomor
45/Permentan/OT.140/10/2006 tentang Organisasi dan Tata Kerja BPMSP Bekasi,
adalah sebagai berikut (Gambar 2).

KEPALA BALAI

KASUBBAG
TATA USAHA

KEPALA SEKSI PENYIAPAN KEPALA SEKSI PELAYANAN

SAMPEL TEKNIK

KELOMPOK
JABATAN FUNGSIONAL

Gambar 2 Struktur Organisasi Balai Pengujian Mutu dan Sertifikasi

Pakan (BPMSP) Bekasi

3.4 Visi dan Misi

3.4.1 Visi
Layaknya sebuah instansi pada umumnya, Balai Pengujian Mutu dan
Sertifikasi Pakan (BPMSP) Bekasi memiliki visi, yaitu “Menjadi laboratorium
referensi yang professional dalam melayani kebutuhan pengujian dan sertifikasi
mutu dan keamanan pakan”

3.4.2 Misi
Misi adalah suatu pernyataan tujuan yang hendak diekspresikan dalam produk
dan pelayanan yang dapat ditawarkan, dan nilai-nilai yang dapat diperoleh, aspirasi

14
 serta cita-cita. Untuk mendukung pelayanan pengujian Balai Pengujian Mutu dan
Sertifikasi Pakan kepada masyarakat, maka rumusan misi adalah:
1. Merumuskan hasil pengujian dan sertifikasi mutu dan keamanan pakan serta
benih tanaman pakan ternak
2. Melakukan pemantauan, survei mutu dan keamanan pakan
3. Melakukan pengembangan teknik dan metode pengujian sesuai permintaan
pelanggan dan IPTEK
4. Menyelenggarakan uji profisiensi pakan dalam mewujudkan laboratorium
rujukan dan acuan
5. Meningkatkan jejaring kerja laboratorium pakan
6. Melaksanakan dan memelihara Sistem Manajemen Mutu
7. Meningkatkan kualitas pelayanan prima

3.5 Pelaksanaan Tugas dan Fungsi

3.5.1 Urusan Kepegawaian
3.5.1.1 Jumlah Pegawai
Sampai dengan bulan Desember 2016 jumlah pegawai yang melaksanakan
tugas di Balai Pengujian Mutu dan Sertifikasi Pakan sebanyak 62 orang (Tabel 1),
dengan rincian sebagai berikut:
 43 orang PNS dengan Daftar Urut Kepangkatan (Lampiran 1)
 18 orang Tenaga Kontrak

Tabel 1. Data Pegawai Sesuai Daftar Urut Kepangkatan

NO. NAMA PANGKAT/ GOL JABATAN
1. Ir. Junaida Pembina Tingkat I / IV Kepala Balai
b
2. Ratu Astrid Anggraeni Penata Tingkat I / III d Kepala Subbagian Tata
Kamid, S.Pt. Usaha
3. drh. M. Syukron Amin, M.Si. Pembina / IV a Kepala Seksi Pelayanan
Teknik
4. Dayat, S.Pt. Penata/ III c Kepala Seksi Penyiapan
Sampel

15
NO. NAMA PANGKAT/ GOL JABATAN
5. Dr. drh. Agus Susanto, M.Si. Pembina / IV a Wastukan Ahli Madya
6. Nur Isnaini Penata Tingkat I/ III d Wastukan Penyelia
7. drh. Idha Muthi’ah Dwi Penata Tingkat I / III d Wastukan Muda
Wahyuni, M.Si
8. Egar Bogassara Penata / III c Wastukan Penyelia
9. Yone Armaji, S.Pt. Penata / III c Wastukan Muda
10. Nunik Hendrati, A.Md. Penata Tingkat I / III d Wastukan Penyelia
11. Hardi Penata Muda Tingkat Penata Usaha BMN
I/ III b
12. Haris Burhanudin Penata Muda Tingkat Pengadministrasi
I/ III b Pengujian
13. Slamet Rijadi, SE. Penata Muda Tingkat Bendahara Penerimaan
I/ III b
14. Mirsya Maisarah Hasibuan, Penata/ IIIc Wastukan Muda
S.Pt.
15. Suhayati, S.Pt. Penata/ IIIc Wastukan Muda
16. Lukmanul Hakim, S.Pt. Penata Muda Tingkat Wastukan Pertama
I/ III b
17. Anastasia Wida Ardia, S.Pt Penata / III c Wastukan Pertama
18. Achmad Chusaini, S.Sos Penata Muda/ III a Pengadministrasi dan
Penyaji Data
19. Opeh Yadi Penata Muda/ III a Pengadministrasi Umum
20. Suhendra Penata Muda/ III a Wastukann Pelaksana
Lanjutan
21. Mohamad Abdul Kholik Penata Muda Tk. I/ III Wastukan Pelaksana
b Lanjutan
22. Erna Yuliastuti Suwaningsih, Penata Muda/ III a Peny.Renc.Keg.dan
S.Sos Anggaran
23. Bondan Dwinarto, A.Md. Penata Muda/ III a Wastukan Pelaksana
Lanjutan

16
NO. NAMA PANGKAT/ GOL JABATAN
24. Wahyu Widayati, S.ST, S.Pt Penata Muda/ III a Wastukan Pelaksana
Lanjutan
25. Febi Tri W, A.Md. Penata Muda/ III a Wastukan Pelaksana
Lanjutan
26. Imbuh Budi W, A,Md. Penata Muda/ III a Wastukan Pelaksana
Lanjutan
27. Sriyadi, A.Md. Pengatur Tk. I/ II d Laboran
28. Rina Agustina, A.Md. Penata Muda/ III a Pengurus Barang
29. Purwati, A.Md. Pengatur Tk. I/ II d Bendahara Pengeluaran
30. Yudhi Harimurti, A.Md. Pengatur/ II c Pustakawan Pelaksana
31. Acep Setiawan Pengatur/ II c Operator Telekomunikasi
32. Alip Septiawan Pengatur/ II c Wastukan Pelaksana
Lanjutan
33. Sukmono Aji Pengatur/ II c Wastukan Pelaksana
Lanjutan
34. Ikhsan Amarudin Pengatur/ II c Wastukan Pelaksana
Lanjutan
35. Sunarwan Pengatur Muda Wastukan Pelaksana
Tingkat I/ II b
36. Mad Holil Pengatur Muda Komandan Regu Satpam
Tingkat I/ II b
37. Rakhmawati Effendi Pengatur Muda Penyiap Bahan
Tingkat I/ II b Kepegawaian
38. Iwan Sulaeman Pengatur Muda Agendaris
Tingkat I/ II b
39. Edeng Gartika Pengatur Muda Pengadministrasi
Tingkat I/ II b Keuangan
40. Jonih Pengatur Muda Teknisi Listrik, Telepon,
Tingkat I/ II b AC
41. Ratri Ratna Dewi, S.Pt. Penata Muda/ III a Wastukan Pertama

17
NO. NAMA PANGKAT/ GOL JABATAN
42. Agus Tri Nugroho Pengatur/ II c Wastukan Pelaksana
43. Indah Puspita Sari, S.Pt Penata Muda/ III a Calon Wastukan
44. Wandih Tenaga Kontrak Petugas Keamanan
45. Ananda Theresia, A.Md. Tenaga Kontrak Petugas Administrasi
46. Nurul Fatiyah, A.Md. Tenaga Kontrak Analis
47. Devi Haryanti Tenaga Kontrak Analis
48. Zen Resti Haryani Tenaga Kontrak Analis
49. Sata Tenaga Kontrak Petugas Kebersihan
50. Bandih Tenaga Kontrak Petugas Kebersihan
51. Buyung Harahap Tenaga Kontrak Pengemudi
52. Ricem Tenaga Kontrak Pramusaji
53. Trimanto Tenaga Kontrak Petugas Kebersihan
54. Ibrohim Tenaga Kontrak Petugas Keamanan
55. Agus Winarto Tenaga Kontrak Petugas Keamanan
56. Dede Iskandar Tenaga Kontrak Petugas Keamanan
57. Wahidin Tenaga Kontrak Petugas Keamanan
58. Supatma Tenaga Kontrak Petugas Keamanan
59. Tina Aprilia, A.Md Tenaga Kontrak Analis
60. Dimas Bagus Prabowo, S.Pd Tenaga Kontrak Customer Service / IT
61. Abdul Jaka Tenaga Kontrak Petugas Kemanan dan
Kebersihan

3.5.1.2 Komposisi Pendidikan Pegawai

Latar belakang pendidikan pegawai yang melaksanakan tugas di BPMSP
Bekasi Tahun 2016 (Tabel 2) dengan rincian sebagai berikut:
 S3 sebanyak 1 orang
 S2 sebanyak 2 orang
 S1 sebanyak 15 orang
 D3 sebanyak 9 orang
 SLTA sebanyak 15 orang
 SLTP sebanyak 1 orang

18
 Tabel 2. Data Komposisi Pendidikan Pegawai Tahun 2016
No Nama Jenjan Universitas/ Sekolah Jurusan
. g
1. drh. Agus Susanto, M.Si. S3 Institut Pertanian Bogor Ilmu Ternak
2. drh. M. Syukron Amin, S2 Institut Pertanian Bogor Ilmu Ternak
M.Si.
3. drh. Idha Muthi’ah Dwi S2 Universitas Diponegoro Ilmu Ternak
Wahyuni, M.Si
4. Ir. Junaida S1 Institut Pertanian Bogor Produksi Ternak
5. Ratu Astrid A.K., S.Pt. S1 Institut Pertanian Bogor Sosek Peternakan
6. Dayat, S.Pt. S1 Universitas Diponegoro Nutrisi dan
Makanan
7. Lukmanul Hakim, S.Pt. S1 Universitas Padjajaran Produksi Ternak
8. Mirsya Maisarah H., S.Pt. S1 Institut Pertanian Bogor Sosek Peternakan
9. Yone Armaji, S.Pt. S1 Universitas Andalas Produksi Ternak
10. Slamet Rijadi, SE. S1 STIE Jayakarta Manajemen
11. Anastasia Wida Ardia, S.Pt S1 Institut Pertanian Bogor Sosek Peternakan
12. Suhayati, S.Pt. S1 Universitas Juanda Ilmu Ternak
13. Achmad Chusaini, S.Sos S1 UNISMA Bekasi Administrasi
Negara
14. Erna Yuliastuti S., S.Sos S1 UNISMA Bekasi Administrasi
Negara
15. Wahyu Widayati, S.Pt. S1 Institut Pertanian Bogor Produksi Ternak
16. Ratri Ratna Dewi, S.Pt S1 Universitas Gadjah Produksi Ternak
Mada
17. Egar Bogassara D3 Universitas Hasannudin Ekonomi
18. Nunik Hendrati, A.Md. D3 Universitas Setia Budi Analis Kimia
19. Sriyadi, A.Md. D3 Akademi Kimia Analisis Kimia Analisis
20. Rina Agustina, A.Md. D3 Politeknik Negeri Teknik
Medan Elektronika

19
No Nama Jenjan Universitas/ Sekolah Jurusan
. g
21. Purwati, A.Md. D3 Universitas Negeri Akuntansi
Malang
22. Yudhi Harimurti, A.Md. D3 Universitas Gadjah Manajemen
Mada Informasi &
Perpustakaan
23. Imbuh Budi W, A,Md. D3 Universitas Jenderal Produksi Ternak
Soedirman
24. Febi Tri W, A.Md. D3 Universitas Andalas Budidaya
Tanaman
25. Agus Tri Nugroho, A.Md. D3 Institut Pertanian Bogor Agribisnis
Peternakan
26. Bondan Dwinarto, A.Md. D3 Institut Pertanian Bogor Teknisi
Peternakan
27. Dadang Iskandar SLTA STM Negeri Bogor Mesin Umum
28. Nur Isnaini SLTA SMK Analis Kimia Analis Kimia
29. Haris Burhanudin SLTA SNAKMA Peternakan
30. Hardi SLTA STM Boyolali Bangunan
31. Opeh Yadi SLTA SMA Paket C IPS
32. Suhendra SLTA SMA IPS
33. Mohamad Abdul Kholik SLTA SNAKMA Peternakan
34. Acep Setiawan SLTA SMA Paket C IPS
35. Rakhmawati Effendi SLTA SMAN 2 Bekasi IPS
36. Iwan Sulaeman SLTA MA Darul Muta’allimin IPS
37. Jonih SLTA SMA Paket C IPS
38. Edeng Gartika SLTA SMAN Jonggol IPS
39. Ikhsan Amarudin SLTA SPP Bojonegoro Peternakan
40. Alip Septiawan SLTA SPP Probayo Buana Peternakan
Karya
41. Sukmono Aji SLTA SMKN Kalibagor Peternakan

20
No Nama Jenjan Universitas/ Sekolah Jurusan
. g
42. Sunarwan SLTA SMKN 1 Mojosongo Peternakan
43. Mad Holil SLTP SMP PGRI Setu -
44. Indah Puspita Sari, S.Pt S1 Universitas Brawijaya Nutrisi Ternak

3.5.2 Seksi Penyiapan Sampel

3.5.2.1 Tugas dan Fungsi
Seksi Penyiapan Sampel BPMSP mempunyai tugas melakukan penerimaan,
pencatatan, pengemasan, pelabelan, pendistribusian, penyebaran informasi dan
dokumentasi hasil uji. Tugas tersebut sesuai Peraturan Menteri Pertanian Nomor
59/Permentan/OT.140/5/2013 tanggal 24 Mei 2013 tentang Organisasi dan Tata
Kerja Balai Pengujian Mutu dan Sertifikasi Pakan. Seksi Penyiapan Sampel
BPMSP menyelenggarakan fungsi dalam melaksanakan tugas tersebut, yaitu :
 Pelaksanaan Penyiapan Sampel Mutu Pakan.
 Penyiapan Perumusan Hasil Pengujian Pengujian Mutu dan Keamanan Pakan.
 Pelaksanaan Sertifikasi Hasil Pengujian Mutu dan Keamanan Pakan.
 Pelaksanaan Pemantauan dan Survei Mutu dan Keamanan Pakan.
 Penyebaran Informasi dan Dokumentasi Hasil Pengujian Mutu dan Keamanan
Pakan.

Rincian pekerjaan Seksi Penyiapan Sampel sesuai tugas dan fungsinya adalah
sebagai berikut :
 Melakukan penerimaan, pencacatan, pengkodean, penggilingan,
homogenisasi, pengemasan, pendistribusian, penyimpanan dan pemusnahan
sampel sesuai prosedur yang telah ditetapkan.
 Melakukan pemeriksaan persyaratan kelengkapan proses sertifikasi mutu
pakan dalam rangka pendaftaran pakan sesuai peraturan perundang-undangan
yang berlaku.
 Menyusun kebutuhan, pemeliharaan dan pemusnahan sarana dan prasarana
Seksi Penyiapan Sampel.

21
 Membuat laporan hasil pengujian dan sertifikat mutu pakan dilengkapi dengan
pencantuman standar yang berlaku Standar Nasional Indonesia (SNI) atau
Persyaratan Teknis Minimal (PTM).
 Melakukan kegiatan survei dan monitoring bahan pakan/ pakan/ hijauan ke
daerah dalam rangka pengawasan mutu pakan.
 Melakukan evaluasi kegiatan Seksi Penyiapan Sampel melalui laporan
bulanan, triwulan dan tahunan.

3.5.3 Seksi Pelayanan Teknis

Berdasarkan Peraturan Menteri Pertanian Nomor.
59/Permentan/OT.140/5/2013, Seksi Pelayanan Teknis mengemban tugas
melakukan pelayanan teknis pemeriksaan dan pengujian mutu pakan ternak.

22
 BAB IV STUDI KHUSUS KERJA PRAKTIK

4.1 Waktu dan Tempat Kerja Praktik

Analisis praktik ini dilaksanakan pada tanggal 3 juli sampai 18 Agustus 2017
yang bertempat di bagian laboratorium pengujian analisis aflatoksin metode HPLC
Balai Pengujian Mutu Dan Serifikasi Pakan Bekasi Jl. MT. Haryono no.98,
Kecamatan Setu, Kabupaten Bekasi, Provinsi Jawa Barat.

4.2 Bahan, Alat, dan Instrumentasi

Alat – alat yang digunakan pada analisa ini adalah Tabung blender, syringe
glass, corong, erlenmeyer 50 mL, neraca analitik, plastic, spatula, gelas ukur 100
mL, gelas kimia 100 mL, kuvet, mikropipet, vial 2 mL, membran filter, siringe
plastic, parafilm, voltex, stand pump, botol semprot dan imunoafinitas Aflatest (
Vicam, Watertown USA). Bahan bahan yang digunakan pada analisa ini adalah
Sampel (jagung) 50 gram, Natrium klorida 5 gram, Metanol 80% + air (80 : 20) 100
mL, Metanol 100 % 1.0 mL, aquabidest, asetonitril dan methanol (HPLC grade).
Instrument yang digunakan pada analisa ini adalah KCKT dari Agilent
Technologies 1120 Compact LC Pump, Agilent Technologies 1200 series detector
fluorescence pada panjang gelombang eksitasi 365 nm dan panjang gelombang
emisi 450 nm. Kolom yang digunakan C18 dengan panjang 50 mm, diameter 2,1
mm dan ukuran partikel 1,7µm

4.3 Prosedur
4.3.1 Analisis Kadar Aflatoksin dengan Metode KCKT
Analisis kadar aflatoksin dilakukan secara kuantitatif dengan menggunakan
metode KCKT. Analisa dibagi menjadi beberapa tahap, yaitu preparasi sampel dan
pembuatan larutan methanol 80%, pembuatan larutan fasa gerak, pembuatan
ekstrak sampel dan pengujian dengan KCKT (penginjeksian sampel ke dalam
sistem kromatografi

4.3.2 Preparasi Sampel dan Pembuatan Larutan Methanol 80 %

Sampel jagung pipilan sebanyak ± 500 gram dihaluskan dengan
menggunakan blender, kemudian dari hasil tersebut dilakukan pengayakan dengan

23
ayakan/saringan ukuran 20 mesh. Sampel yang telah diayak ditimbang sebanyak ±
50 gram ke dalam erlenmeyer 250 mL. Setelah itu disiapkan methanol 80% dengan
cara mengencerkan methanol absolut dengan aquadest dengan perbandingan 8:2.

4.3.3 Pembuatan Fasa Gerak

Dicampurkan 100 mL acetonitrile (HPLC Grade), 300 mL methanol (HPLC
Grade), dan 600 mL aquabidest. Campuran larutan ini kemudian disaring dengan
menggunakan membran filter 0.45µm.

4.3.4 Pembuatan Ekstrak Larutan Sampel

Ditimbang sebanyak 50 gram sampel jagung pipilan dan 5 gram serbuk
Natrium Klorida ke dalam blender, ditambahkan 100 mL methanol 80% (80:20)
kemudian diblender dengan kecepatan tinggi (120) selama 1 menit. Larutan
disaring dengan kertas saring Fluted Filter Paper dalam erlenmeyer 50 mL. Dipipet
10 mL filtrat dan diencerkan dengan 40 mL aquabidest, dihomogenkan
menggunakan voltex disaring filtrat menggunakan kertas saring Filter microfibre
dalam Erlenmeyer 50 mL. 10 mL (10 mL = 1g sampel aquivalent) filtrat dilewatkan
ke immunoaffinity column ( Aflatest ) dengan kecepatan 1-2 tetes / detik dan dicuci
2 kali (douplo) dengan 10 mL aquabidest dengan kecepatan 2 tetes / detik. Setelah
semua cairan turun, udara dibuang keluar dengan menggunakan syringe, dan
dibuang cairan yang ditampung. immunoaffinity column dielusi dengan methanol
(HPLC grade) sebanyak 1 mL dengan kecepatan 1-2 tetes/detik. Hasil
tampungannya berupa filtrat ditambah air 1 mL selanjutnya disuntikkan 20-100 µL
ke sistem KCKT

4.3.5 Pengujian Aflatoksin dengan KCKT

Analisis kadar aflatoksin dilakukan secara kuantitatif dengan
menggunakan metode KCKT. Metode ini menggunakan instrumen kromatografi
Agilent Technologies 1120 Compact LC Pump, Agilent Technologies 1200 Series
Detector, fasa gerak acetonitrile : methanol : aquabidest (1 : 3 : 6) dengan laju alir
1 tetes/detik, detektor fluorescence pada panjang gelombang eksitasi 365 nm dan

24
panjang gelombang emisi 450 nm. Kolom yang digunakan C18 dengan panjang 50
mm, diameter 2,1 mm dan ukuran partikel 1,7µm

4.3.6 Perhitungan
4.3.6.1 Sampel 314.1369
10 10
Berat ekuivalen = (w×(100)×(50))
10 10
= (50×(100)×(50))

= 10000

𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 = 𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ng x ng standar
11,2820
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐺2 = ng x 6
2,0891

= 32.4
19,2870
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐵2 = ng x 6
5,4887

= 21.1

𝑛𝑔
Aflatoksin dalam sampel = 𝑔
32,4010
Aflatoksin dalam sampel G2 = = 0.0324
1000
19,2870
Aflatoksin dalam sampel B2 = = 0.0211
1000

4.3.6.2 Sampel 314.1370

10 10
Berat ekuivalen = (w×(100)×(50))
10 10
= (50×( )×( ))
100 50

= 10000

𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 = 𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ng x ng standar
332.0
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐺2 = 2,0891 ng x 6

= 0,4
𝑛𝑔
Aflatoksin dalam sampel = 𝑔

25
 0.4
Aflatoksin dalam sampel = 1000=0.0004

.3.6.2 Sampel 314.1371

10 10
Berat ekuivalen = (w×(100)×(50))
10 10
= (50×(100)×(50))

= 10000

𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 = 𝑎𝑟𝑒𝑎 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟 ng x ng standar
4.9800
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐵1 = 2.0445 ng x 20

= 6.7
6.1690
𝑛𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙 𝐵2 = 5,4887 ng x 6

= 48.7

𝑛𝑔
Aflatoksin dalam sampel = 𝑔
6.7
Aflatoksin dalam sampel B1 = 1000 = 0.0067
48.7
Aflatoksin dalam sampel B2 = 1000 = 0.0487

26
27
 BAB V HASIL DAN PEMBAHASAN

Aflatoksin merupakan kontaminan yang bersifat toksik, mutagenik dan

karsinogenik yang diproduksi oleh kapang A. flavus dan A. parasiticus terutama
pada proses penyimpanan kondisi penyimpanan biji jagung seperti lamanya waktu
penyimpanan, suhu penyimpanan maupun kelembaban adalah faktor-faktor penting
yang mempengaruhi pertumbuhan kapang Aspergillus flavus yang merupakan
penghasil utama aflatoksin B1. Aflatoksin dapat terbentuk selama masa tanam,
masa panen (selama proses pemanenan), dan pada saat penyimpanan. Sampel yang
digunakan dalam penelitian ini berasal dari Bekasi.

Biji Jagung 314.1369 Biji Jagung 314.1370 Biji Jagung 314.1371

Gambar 3 Tampilan Biji Jagung Secara Fisik
Sampel – Sampel biji jagung yang diuji, pada umumnya terlihat baik secara
penampakan fisik (Gambar 4). Pertumbuhan jamur tidak terlihat secara fisik pada
sampel yang diuji karena sampel yang diperoleh sudah dikemas rapi dalam
kemasan. Oleh karena itu untuk mengetahui adanya kontaminasi aflatoksin, perlu
dilakukan uji kandungan aflatoksin dengan menggunakan KCKT.

5.1 Hasil Analisis Kadar Aflatoksin dengan Metode KCKT di Balai Pengujian
Mutu dan Sertifikasi Pakan
Kadar aflatoksin dapat dianalisa secara kuantitatif dengan menggunakan
metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Kadar aflatoksin yang
dianalisis dengan metode KCKT yaitu aflatoksin B1, B2, G1, dan G2. Sampel yang
diuji adalah biji jagung yang berasal dari Bekasi.

28
 Analisis kadar aflatoksin dengan metode KCKT dilakukan setelah lama
penyimpanan, karena diduga lama penyimpanan, meningkatkan kadar aflatoksin.
Kadar aflatoksin diperoleh dengan membandingkan antara waktu retensi standar
dan waktu retensi sampel. Dari luas area sampel, dapat dihitung kadar aflatoksin
dalam sampel.
Berikut ini merupakan baku pembanding standar aflatoksin 52 ppb G2, G1, B2
dan B1 dapat dilihat pada tabel 3. Sedangkan untuk hasil pengamatan keseluruhan
analisis kandungan aflatoksin yang dilakukan di Balai Pengujian Mutu Dan
Sertifikasi Pakan Bekasi dapat dilihat pada tabel 7.

Gambar 4 Kromatogram Pembanding 52 ppb Standar Aflatoxin G2, G1, B2,

B1.

Tabel 3 Hasil Pembanding 52 ppb Standar Aflatoxin G2, G1, B2, B1.
Komponen Area ng
G2 2,089,192.0 6
G1 402,677.0 20
B2 5,488,730,0 6
B1 2,044,507.0 20
Total 10,025,106.00

29
Gambar 5 Kromatogram Sampel Jagung 314.1369

Tabel 4 Hasil Sampel Jagung 314.1369

Komponen Area ng
G2 11,282.0 0.0324
G1 nd nd
B2 19,287.0 0.0211
B1 nd nd
Total 30,569.0 0.0535

Gambar 6 Kromatogram Sampel Jagung 314.1370

30
 Tabel 5 Hasil Sampel Jagung 314.1370
Komponen Area ng
G2 nd nd
G1 nd nd
B2 332.0 0.0004
B1 nd nd
Total 332.0 0.0004

Gambar 7 Kromatogram Sampel Jagung 314.1371

Tabel 6 Hasil Sampel Jagung 314.1371

Komponen Area ng
G2 nd nd
G1 nd nd
B2 6.1690 0.0067
B1 4.9800 0.0487
Total 11.1490 0.0554

31
 Tabel 7 Hasil Keseluruhan Analisis Sampel 314.1369, 314.1370 dan 314.1371
Kode Berat Berat ng Aflatoksin dlm
Komp
Sampel Sampel Equivalen Sampel Sampel
G2 0.0324 0.03
G1 Nd Nd
314. 1369 50.0000 1.0000
B2 0.0211 0.02
B1 Nd Nd
Total Aflatoksin 0.05
G2 Nd Nd
G1 nd6 Nd
314.1370 50.0000 1.0000
B2 0.0004 Nd
B1 nd Nd
Total Aflatoksin nd
G2 Nd nd
G1 nd nd
314.1371 50.0000 1.0000
B2 0.0067 0.01
B1 0.0487 nd
Total Aflatoksin 0.01

Berdasarkan hasil analisis kandungan aflatoksin pada biji jagung tertingi

yaitu pada sampel 314.1369 dengan total 0,05 ppb dan tidak ada kandungan
aflatoksin pada sampel 314.1370. Berdasarkan SNI 01-4483-1998, kandungan total
aflatoksin untuk jagung bahan baku pakan adalah maks 50 ppb. Hasil analisis
menunjukkan bahwa kandungan total aflatoksin pada sampel 314. 1369, 314. 1370
dan 314.1371 masih sesuai dengan SNI 01-4483-1998, masing-masing yaitu 0,05
ppb, 0 ppb dan 0,01 ppb. Komponen aflatoksin B2, G1 dan G2 mempunyai daya
toksik yang lebih rendah dibandingkan dengan aflatoksin B1, hanya 1/6 -1/100
kalinya dan tidak terlalu berbahaya sedangkan jenis aflatoksin B1 yang dikenal
paling toksik diantara ketiga jenis lainnya (aflatoksin B2, G1, dan G2).

32
 Kadar aflatoksin yang tinggi pada bahan baku pakan maupun pakan ternak
dapat meninggalkan residu toksin pada produk ternak daging, telur, hati, susu yang
dapat membahayakan manusia yang mengkonsumsi produk-produk ternak tersebut
juga menyebabkan gangguan keracunan bagi ternak yang mengkonsumsi bahan
baku pakan maupun pakan ternak yang terkontaminasi aflatoksin sehingga
menurunnya produktivitas hewan ternak.
Hasil analisis dan pengukuran kandungan aflatoksin dalam sampel pakan
dengan kurva baku menunjukkan hasil seperti dalam tabel 6. Proses ekstraksi dan
clean-up sangat penting untuk mendapatkan hasil analisis pengukuran yang tepat.
Dalam analisis KCKT sampel diekstraksi untuk memperoleh analit yang diinginkan
yang bebas dari senyawa atau bahan pengotor (impurities). Pengukuran residu
aflatoksin dalam pakan dapat dilakukan secara KCKT dengan ekstraksi sesuai
metode AOAC (Association of official analytical chemistry) dengan kloroform,
hexane,benzene dan beberapa senyawa lain namun memerlukan biaya yang mahal.
Dalam sistem kolom imonoafinitas (IAC) dapat diperoleh analit yang secara
kuantitas lebih banyak karena adanya ikatan antibodi dengan aflatoksin, proses
ekstraksi yang dilakukan dalam analisis ini lebih sederhana, menggunakan sedikit
bahan kimia (NaCl, aquabides dan methanol) dan tidak memakan waktu lama
sehingga lebih efisien dan tidak memakan biaya mahal.
Pemisahan senyawa aflatoksin dalam sampel dilakukan dengan kolom C18
dengan diameter 2,1 µm panjang 50 mm. langkah pemurnian aflatoksin
menggunakan imunoafinitas (aflatest) ternyata menunjukan hasil positif dan lebih
sensitive sehingga disarankan dilakukan dalam ekstraksi sampel pakan yang diduga
menggandung aflatoksin akan tetapi beberapa prosedur dalam sistem IAC memiliki
kelemahan karena selama ekstaksi sampel banyak mengandung pelarut organik
seperti methanol, asetonitril atau aseton, yang memiliki toleransi rendah terhadap
ikatan antibody dalam sistem, sehingga memperkecil rekoveri aflatoksin dan
memerlukann pembilasan. Pelarut yang digunakan dalam penelitian untuk ekstaksi
adalah methanol karena memiliki sifat toleransi lebih baik dibandingkan asetonitril
juga dilakukan pembilasan dengan aquabides beberapa kali untuk memperkecil
konsentrasi methanol. Pembilasan dilakukan untuk menghilangkan ikatan pelarut
pada antibodi sehingga diperoleh gambaran kualitatif aflatoksin yang lebih baik.

33
Aflatoksin yang terdeteksi lebih dini dalam pakan berguna untuk control pakan
dalam manajemen kesehatan.
Metode analisis aflatoksin banyak menggunakan KCKT dengan detector
fluorescence, karena dinilai lebih sensitive, dengan kolom yang beresolusi tinggi
dan pengerjaan yang otomatis. Analisis KCKT banyak digunakan karena memiliki
nilai kuantifikasi lebih baik dan operasional yang mudah. Metode KCKT memiliki
beberapa keuntungan yaitu dapat mendeteksi Aflatoksin B1, B2, G1, dan G2
sekaligus, dengan adanya kalibrasi serta pembacaan standar aflatoksin. Namun
demikian, walaupun memiliki keakuratan, metode ini mempunyai kelemahan,
selain harga instrumen yang mahal, diperlukan juga pelaksana analisa yang terlatih
untuk pengerjaannya. Tahap analisis juga cukup banyak mulai dari ekstraksi,
pemurnian, pemisahan, dan memerlukan jenis pereaksi yang cukup banyak
sehingga biaya analisis yang dibutuhkan menjadi mahal.

34
 BAB VI KESIMPULAN DAN SARAN
6.1 Kesimpulan
Dari hasil analisis yang dilakukan pada kerja praktek ini dapat ditarik
kesimpulan bahwa:
1. Berdasarkan hasil pengamatan analisis aflatoksin pada jagung Sampel 314.1369,
314.1370, 314.1371 mengandung aflatoksin kurang dari standar SNI ( > 50 ppb).
Batas maksimal aflatoksin pada pakan, pakan konsentrat dan bahan baku pakan
termasuk jagung sudah di tetapkan berdasarkan peraturan perundang-undangan
dan sudah di implementasikan
2. Dalam proses analisis aflatoksin pada jagung yang dilakukan di Balai Pengujian
Mutu dan Sertifikasi Pakan Bekasi dilakukan dengan metode AOAC yaitu
menggunakan hplc.

6.2 Saran
Berdasarkan hasil studi khusus kerja praktik yang telah dilakukan, penulis
memberikan saran atau merekomendasikan agar Terjalin kerja sama antara Balai
Pengujian Mutu dan Sertifikasi Pakan dengan sekolah atau Universitas agar dapat
memberikan suatu wawasan mengenai pentingnya analisis aflatoksin pada pakan
khususnya pakan jagung secara langsung.

35
 DAFTAR PUSTAKA

[1] A. Suryana, Strategi, kebijakan, dan program penelitian jagung, Makassar:

Balit Serealia, 2006.
[2] G. Munkvold, Aflatoxin in Corn, Iowa State University: University
Extention, 2002.
[3] A. Kasno, Pencegah Infeksi Aspergillus Flavus dan Kontaminasi Aflatoksin
pada Jagung, Litbang Pertanian, 2004.
[4] R. C. N. Syarief, Mikotoksin Bahan Pangan, Bogor: IPB Press, 2003.
[5] C. Barbas, Separation of Aflatoxin by HPLC, USA: Aplication Agilent Tech
Inc, 2005.
[6] Suarni, Teknologi Pascapanen Jagung Untuk Mengatasi Kontaminan
Aflatoksin Dihasilkan Oleh Aspergillus Flavus, 2008.
[7] A. Sudibyo, Aflatoksin Dalam Produk Pangan dan Cara Mengurangi
Kandungan Racunnya, Warta IHP, 2003.
[8] I. d. R. Gandjar, Kimia Farmasi Analisis, Yogyakarta: Pustaka Pelajar, 2004.
[9] S. a. D. M. Ahuja, Handbok of Pharmaceutical Analysis by HPLC, United
Kingdom: Elsevier, 2005.
[10] M. d. S. Mulja, Analisis instrumental, Surabaya: Airlangga University Press,
1995.

36