LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA KEDOKTERAN BLOK BSHB PEMERIKSAAN PROTEIN Metode Kualitatif dan Kuantitatif

Oleh : Nama NIM Kelom&o' A(i(ten : Rona Lintang Ha ini : !"A#"##$% : III B : )u(i Nu mali(a

DEPARTEMEN PENDIDIKAN NASIONAL UNI*ERSITAS +ENDERAL SOEDIRMAN ,AKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU-ILMU KESEHATAN PRO!RAM PENDIDIKAN DOKTER PUR.OKERTO

/#"" LEMBAR PEN!ESAHAN

PEMERIKSAAN PROTEIN Metode Kualitatif dan Kuantitatif

Oleh: Rona Lintang Harini G1A010094 III

Disusun untuk memenuhi persyaratan mengikuti ujian praktikum iokimia !e"okteran lok #H pa"a $rogram $en"i"ikan Dokter %ni&ersitas 'en"eral #oe"irman $ur(okerto)

Diterima "an Disahkan $ur(okerto* +aret ,011 Asisten

-usi .urmalisa G1A00/00/

BAB I PENDAHULUAN

A0 +udul P a'ti'um $emeriksaan $rotein 1 +eto"e !ualitati2 "an !uantitati2 3 B0 Tanggal P a'ti'um !amis* ,4 +aret ,011 10 Tu2uan P a'ti'um 1) +engi"enti2ikasi a"anya ikatan pepti"a pa"a putih telur ,) +engukur ka"ar protein pa"a 5er5agai telur

BAB II TIN+AUAN PUSTAKA

A0 Da(a Teo i $rotein ialah 5iopolimer yang ter"iri atas 5anyak asam amino yang 5erhu5ungan satu "engan yang lainnya le(at ikatan ami"a 1pepti"a3) $rotein memainkan 5er5agai peran "alam sistem 5iologis) e5erapa protein merupakan komponen utama "ari jaringan struktur 1oto* kulit* kuku* ram5ut3) $rotein lain mengangkut molekul "ari satu 5agian ke 5agian yang lainnya "alam makhluk hi"up) +asih a"a lagi yang 5ertin"ak se5agai katalis "alam 5er5agai reaksi 5iologis yang "iperlukan untuk mempertahankan hi"up 1Hart* ,0043) $rotein merupakan molekul 5esar "engan +r sekitar 0000 sampai "engan 1)000)000) $rotein yang ter"apat "alam organisme sangat 5er&ariasi "alam ukuran "an strukturnya) #truktur itu "itentukan oleh jenis* jumlah* "an urutan asam aminonya) $rotein sen"iri a"alah polimer asam amino) Asam amino a"alah senya(a yang mengan"ung gugus kar5oksilat 167OOH3 "an amino 1 6 .H,3 "engan rumus umum :
H R C NH2 C O OH

Asam amino jenis ini "ise5ut 86asam amino* karena gugus amino16.H ,36 nya terikat pa"a atom pertama 183 gugus kar5oksil) R a"alah atom atau gugus yang mengan"ung rantai ali2atik* siklik* atau aromatik) ter"apat ,0 ma9am 1#yukri* 19993) er"asarkan R6nya "i alam ter"apat ,00 le5ih jenis asam amino* tetapi "i "alam protein hanya

$rotein "apat "itetapkan ka"arnya "engan meto"e 5iuret) +eto"e

iuret

a"alah meto"e yang paling 5anyak "igunakan "an yang "irekomen"asikan oleh International :e"eration o2 7lini9al 7hemistry 1I:773 ahli panel untuk penentuan total protein) $rinsip "ari meto"e 5iuret a"alah ikatan pepti"a "apat mem5entuk senya(a kompleks 5er(arna ungu "engan penam5ahan garam kupri "alam suasana 5asa) 1'ensen ; 7hristensen* 19/<3) Reaksi 5iuret ter"iri "ari 9ampuran protein "engan so"ium hi"roksi"a 15erupa larutan3 "an tem5aga sul2at) =arna &iolet a"alah hasil "ari reaksi ini) Reaksi ini positi2 untuk , atau le5ih ikatan pepti"a 17arpette* ,00<3)

BAB III METODE PRAKTIKUM A0 Alat dan Bahan Alat ahan Reagent 5iuret $utih telur 1telur ayam negri* ayam kampung* 5e5ek3 B0 1a a Ke 2a 1) %ji !ualitati2 a) $utih telur "ipisahkan "ari kuningnya lalu "imasukkan ke "alam 5e9ker glass untuk masing6masing telur 1telur ayam negri* telur ayam kampung* "an telur 5e5ek3) 5) 1 ml putih telur "imasukkan ke "alam ta5ung reaksi) >a5ung reaksi ?10 ml >a5ung reaksi ? < ml e9ker glass Rak ta5ung reaksi $ipet ukur $ipet tetes +i9ropipet #pektro2otometer !u&et #puit

9) Reagen 5iuret 17u#O4 0*<@ A .aOH 1@3 "itam5ahkan ke "alamnya lalu "ihomogenkan) ") !emu"ian peru5ahan (arna yang terja"i "iamati) ,) %ji !uantitati2 a) ,0 Bl putih telur "imasukkan ke "alam ta5ung reaksi) 5) Reagen 5iuret se5anyak 1 99 "itam5ahkan ke "alamnya) 9) !o9ok hingga homogen* "imasukkan ke "alam 9u&et) ") Larutan "iinku5asi selama ,0 menit) e) Dimasukkan ke spektro2otometer) 2) #elanjutnya ka"ar a5sor5ansi "ihitung "engan panjang gelom5ang <40 nm)

BAB I* HASIL DAN PEMBAHASAN A0 Ha(il P a'ti'um 1) %ji !ualitati2

A 1 ml putih telur 5iuret #etelah "i9ampur tim5ul peru5ahan (arna .o 1 , 4 'enis >elur Ayam kampung e5ek Ayam negeri $eru5ahan (arna %ngu ungu ungu

,) %ji !uantitati2

A ,0 Cl putih telur .o 1 , 4 199 5iuret "i ukur "engan spektro2otometer #pekto2otometer 1gD"l3 1<*9 ,4*9 1,*9

'enis >elur Ayam kampung e5ek Ayam negeri

B0 Pem3aha(an %ji praktikum protein yang telah "ilakukan "engan menggunakan Reagen iuret 19ampuran 7u#O4 0*<@ "an .aOH 40@3 ter"iri "ari uji kualitati2 "an uji kuantitati2) $er9o5aan kualitati2 merupakan per9o5aan untuk mengetahui 5anyak se"ikitnya ikatan pepti"a yang a"a "alam protein) Reaksi ini "ise5ut "emikian karena positi2 terha"ap ikatan pepti"a "an O "ari air) Dari hasil per9o5aan* 1 ml putih telur 1yang 5erasal "ari telur ayam negeri* telur ayam kampong maupun telur 5e5ek3 yang "itetesi "engan reagen 5iuret* akan menim5ulkan peru5ahan menja"i ungu) $eru5ahan (arna ini tim5ul karena reagen 5iuret 17u1OH3 ,3 ketika "itam5ahkan pa"a putih telur akan segera 5ereaksi "engan ikatan6ikatan pepti"a yang ter"apat pa"a putih telur terse5ut) $a"a reaksi ini yang 5erperan yakni 7u 1"ari reagen 5iuret3 "an . 1pa"a ikatan pepti"a itu sen"iri3) 7u "an . ini kemu"ian 5ereaksi "engan O 1oksigen3 "an air 1H ,O3) $erlu "iingat 5ah(a ikatan pepti"a ini "apat terja"i apa5ila a"a , asam amino "apat 5erkon"ensasi "engan melepaskan molekul air) 'a"i pa"a "asarnya (arna ungu terja"i karena 7u "an . 5ereaksi "engan O "an H ,O* "imana H,O ini "i"apat "ari kon"ensasi , asam amino) #emakin ungu (arna larutan maka semakin 5anyak ikatan pepti"a* se5aliknya apa5ila ter5entuk (arna merah mu"a maka ikatan pepti"anya se"ikit) er"asarkan hasil per9o5aan pa"a 1 ml putih telur 1yang 5erasal "ari telur ayam negeri* telur ayam kampong* maupun telur 5e5ek3 yang "itetesi reagen 5iuret menghasilkan mun9ulnya (arna ungu pa"a 9ampuran ke"ua larutan terse5ut) #eperti yang telah "ijelaskan 5ah(a (arna ungu yang mun9ul menunjukkan 5ah(a ikatan pepti"a yang ter"apat "alam larutan protein terse5ut ter"iri "ari 5anyak ikatan pepti"a atau 5iasa "ise5ut "engan polipepti"a) #e5enarnya yang "ise5ut polipepti"a a"alah rangkaian asam amino "engan ikatan pepti"a yang "i5entuk oleh kurang "ari 100 asam amino) iuret) Reaksi positi2 "engan terja"inya (arna ungu karena a"anya kompleks senya(a yang terja"i antara

ila le5ih "ari 100 asam amino "ise5ut protein) #truktur primer suatu protein a"alah susunan se5agai rantai pepti"a terse5ut "an ini "itentukan oleh ma9amnya* 5anyaknya "an urutan asam amino yang mem5entuknya) 113 $er9o5aan kuantitati2 "engan menggunakan iuret 5er5e"a tujuannya "engan uji kualitati2) 'ika per9o5aan kualitati2 "igunakan untuk menguji a"a ti"aknya kan"ungan protein* khususnya ke5era"aan ikatan pepti"a* uji kuantitati2 "ilakukan guna mengetahui ka"ar total protein yang terkan"ung "alam suatu su5stansi maupun larutan) $rose"ur per9o5aan ini "engan menggunakan Reagen iuret se5anyak 1 99 yang "iteteskan masing6masing ke "alam 4 ta5ung reaksi 5erisi ,0 Bl putih telur yang 5er5e"a jenisnya 1putih telur yang 5erasal "ari telur ayam negeri* telur ayam kampong* maupun telur 5e5ek3) 7ampuran larutan terse5ut kemu"ian "iinku5asi selama ,0 menit) #etelah itu "iukur a5sor5ansinya "engan #pektro2otometer "engan panjang gelom5ang 1E3 <40 nm) #etelah "i"apatkan ukuran panjang gelom5ang sampel maka "ihitung ka"ar total protein terha"ap larutan stan"ar yang "ikalikan F gramD"l 1konsentrasi stan"ar3) er"asarkan rumus perhitungan terse5ut maka akan "i"apatkan ka"ar total protein) Dari hasil per9o5aan* "iperoleh ka"ar total protein tertinggi a"a pa"a telur 5e5ek yaitu ,4*9 gD"l selanjutnya telur ayam kampung yaitu 1<*9 gD"l "an yang paling ren"ah a"alah telur ayam negeri se5anyak 1,*9 grD"l) !a"ar total protein tertinggi se9ara teori seharusnya ter"apat "alam telur ayam kampung* karena telur ayam kampung memiliki kan"ungan asam amino paling 5aik "an paling tinggi) !emu"ian yang ke"ua telur 5e5ek "an yang terakhir a"alah telur ayam negeri) !eti"aksesuaian antara hasil per9o5aan "engan teori yang a"a kemungkinan "apat "ise5a5kan karena terja"i kesalahan pa"a proses pemipetan "alam pengam5ilan sample untuk telur 5e5ek yang terlalu 5erle5ih)

BAB * KESIMPULAN

1) ,)

$rotein ialah 5iopolimer yang ter"iri atas 5anyak asam amino yang 5erhu5ungan satu "engan yang lainnya le(at ikatan ami"a 1pepti"a3) %ji protein kualitati2 "igunakan untuk mengetahui 5anyak se"ikitnya ikatan pepti"a "alam molekul protein sampel) Diperoleh hasil 5ah(a putih telur 15aik yang 5erasal "ari telur ayam kampung* telur ayam negeri* maupun telur 5e5ek3 mengan"ung protein "engan kualitas (arna ungu yang ter5entuk)

4)

=arna ungu yang terja"i pa"a uji kualitati2 protein menunjukkan 5ah(a ter"apat ikatan pepti"a pa"a larutan terse5ut* semakin ungu (arna yang terja"i semakin 5anyak ikatan pepti"anya)

4)

%ji protein kuantitati2 "igunakan untuk mengetahui jumlah atau ka"ar total protein "alam suatu su5stansi) Di"apat kuantitas 1 konsentrasi protein 3 yang ter"apat "alam putih telur a"alah se5agai 5erikut : $utih telur ayam kampung se5esar 1<*9 grD"l $utih telur ayam negeri se5esar ,4*9 grD"l $utih telur 5e5ek se5esar 1,*9 grD"l

DA:>AR $%#>A!A Hart* Harol") ,004) Kimia Organik : #uatu !uliah #ingkat) 'akarta : $ener5it Grlangga) #yukri* #) 1999) Kimia Dasar 3) an"ung : $ener5it it5) 7arpette) ,00<) An Introduction to Practical Biochemistry. Great Gra( Hill ook 7ompany) :eeney* R) G) an" A5planalp* H) 190,) Genetically Vrying Minor Protein Constituent o Chicken !gg "hite) 1/4,61/40) 'ensen* $) >) an" 7hristensen* !) 19/<) #otal Protein Determination $y %&ectro&hotometric Biuret Method) 49,6490) ritany : +9