Uji Antioksidan dengan Metode DPPH dan Uji Saponin terhadap Ekstrak

Teripang Holothuria atra

Subhan Haikal Ehsan

1
Departemen Biologi, FMIPA UI, Kampus UI Depok 16424
1
subhan.haikal@yahoo.com, 2yasman.si@ui.ac.id

Abstrak

Teripang telah diketahui banyak memiliki manfaat biologis, seperti antikanker, antifungal, antivirus, dan antioksidan.
Penelitian dilakukan untuk mengetahui aktivitas antioksidan dan mendeteksi keberadaan senyawa saponin pada ekstrak kasar
Holothuria atra (Echinodermata) dan fraksi-fraksinya. Senyawa radikal bebas DPPH digunakan untuk pengujian aktivitas
antioksidan sedangkan pereaksi Liebermann Burchard digunakan untuk mendeteksi keberadaan senyawa saponin. Hasil
penelitian menunjukkan bahwa ekstrak kasar H. atra mengandung saponin dan memiliki aktivitas antioksidan yang lebih
rendah dari pembandingnya, Acanthaster sp. (Echinodermata) dengan nilai IC50 masing-masing sebesar 739,194 g/ml dan
102,946 g/ml. Fraksi n-heksan, fraksi etil asetat, dan fraksi air memiliki aktivitas antioksidan yang kurang kuat dengan nilai
IC50 secara berurutan 511,35 g/ml, 373,776 g/ml, dan 491,8 g/ml. Uji saponin terdeteksi positif pada semua fraksi kecuali
fraksi etil asetat.
.

Kata kunci: antioksidan, DPPH, ekstrak kasar, Holothuria atra, saponin.

1. PENDAHULUAN scabra dan sepertiga bagian lainnya dengan air laut.

Penelitian tentang bahan alam dan
senyawa bioaktif dari biota laut telah banyak
dilakukan dan telah berkembang sejak tahun 1970-
an. Lebih dari 15.000 struktur senyawa bioaktif
telah ditemukan terdapat pada biota laut. Senyawa
bioaktif biota laut dapat diisolasi dari alga, spons,
moluska, Echinodermata, Tunicata, Cnidaria, dan
ikan (Dewi 2009: 3)[1].
Salah satu biota laut yang telah diketahui
memiliki senyawa bioaktif dan dapat dimanfaatkan
adalah teripang (Yusron 1991:53)[2]. Teripang
(Holothuroidea) sudah sejak lama banyak
dimanfaatkan di wilayah Indo-Pasifik bukan hanya
untuk dikonsumsi sebagai makanan, tetapi juga
dapat dimanfaatkan sebagai obat tradisional
khususnya di wilayah Asia Timur. Teripang dapat
dimanfaatkan sebagai obat karena memiliki
manfaat-manfaat biologis seperti antifungal,
antivirus, antitumor, anticoagulant, anti-
angiogenic, neuritogenic, dan immunomodulatory
activities (Husni et al. 2009: 2)[3]. Hasil penelitian
Suriyanto (2010: 34)[4] menunjukkan bahwa empat
jenis teripang Holothuria spp. dari Pulau Penjaliran
Timur (Kep. Seribu, Jakarta) memiliki bioaktivitas
yang tinggi atau toksik terhadap Artemia salina
karena memiliki nilai LC50 kurang dari 1000 ppm.
Selain memiliki fungsi sebagai obat,
senyawa bioaktif teripang juga bermanfaat dari
aspek ekologi, seperti antifouling dan antifeedant.
Selvin & Lipton (2004: 252)[5] menyimpulkan
bahwa ekstrak Holothuria scabra dapat mencegah
terjadinya penempelan kaki Patella vulgata pada
cawan petri yang telah diisi dengan 1 ml ekstrak H.
Tursina (2011: 36)[6] juga telah meneliti potensi
antifeedant ekstrak H.atra dan Bohadschia
marmorata terhadap ikan karang dan
menyimpulkan bahwa ekstrak teripang tersebut
dapat berperan sebagai antifeedant terhadap ikan
karang.
Senyawa yang banyak diperkirakan
berperan dalam manfaat-manfaat ekstrak teripang
tersebut adalah triterpen glikosida. Triterpen
glikosida adalah senyawa yang termasuk dalam
kelompok saponin dan telah umum diketahui
sebagai sea cucumber saponins. Senyawa-senyawa
bioaktif penting lainnya yang terdapat pada teripang
antara lain chondroitin sulfate, eicosapentaenoic
acid, dan ganglioside (Kaneko et al. 2003)[7].
Dari sekian banyak penelitian tentang
manfaat teripang tersebut, masih sedikit laporan
penelitian tentang aktivitas antioksidan pada
ekstrak teripang. Baru-baru ini, Cucumaria
frondosa, spesies teripang yang umum terdapat di
pesisir Samudera Atlantik Utara, dan teripang
Stichopus japonicus telah diteliti dan diketahui
memiliki aktivitas antioksidan. Senyawa fenolik
diperkirakan adalah senyawa yang paling berperan
dalam aktivitas antioksidan ekstrak teripang
tersebut (Mamelona et al. 2007: 7)[8]
Indonesia sebagai negara beriklim tropis
dengan perairan dangkal yang luas menyediakan
habitat yang baik untuk perkembangan berbagai
macam jenis teripang, salah satunya adalah teripang
Holothuria atra yang banyak dan umum ditemukan
di perairan Indonesia (Arnold & Birtles 1989:
227)[9]. Penelitian yang dilakukan oleh Suriyanto
(2010)[4] dan Tursina (2011)[6] menggunakan H.

Uji Antioksidan..., Subhan Haikal Ehsan, FMIPA UI, 2013

atra sebagai bahan penelitian dan dari kedua
penelitian tersebut diketahui bahwa ekstrak H. atra
bersifat toksik terhadap Artemia salina dan
memiliki potensi antifeedant terhadap ikan karang.
Belum adanya penelitian tentang aktivitas
antioksidan ekstrak H. atra membuat penelitian ini
perlu dilakukan untuk lebih mengetahui potensi
manfaat senyawa bioaktif yang terdapat pada
ekstrak H. atra.
Teripang dari Suku Holothuriidae banyak
terdapat di perairan Indonesia. Teripang yang
tergolong ke dalam Suku Holothuriidae adalah
Actinopyga, Bohadschia, Labidodemas, dan
Holothuria (Arnold & Birtles 1989: 227)[9].
Penelitian mengenai senyawa metabolit sekunder
teripang pernah dilakukan di Indonesia oleh
Suriyanto (2010)[4] dan Tursina (2011)[6].
Suriyanto pada tahun 2010 melakukan penelitian
mengenai uji toksisitas ekstrak teripang dari
Kepulauan Seribu terhadap larva Artemia salina
menggunakan uji Brine Shrimp Lethality Test
(BSLT). Hasil penelitian Suriyanto (2010: 34)[4]
menunjukkan bahwa ekstrak kasar teripang
Holothuria atra di Kepulauan Seribu terbukti
bersifat aktif (toksik) terhadap uji BSLT dengan
nilai LC50 sebesar 77, 063 g/ml. Tursina (2011:
36) telah meneliti potensi antifeedant ekstrak
Holothuria atra terhadap ikan karang dan
menyatakan bahwa ekstrak H. atra dapat berperan
sebagai antifeedant terhadap ikan karang.
Chairunnisa dan Hakam (2011)[10] juga telah
meneliti potensi ekstrak kasar H. atra sebagai
senyawa pencegah kanker, dan menyimpulkan
bahwa ekstrak H. atra pada dosis 0,331,32 g/kg
bb memiliki aktivitas pencegahankanker dengan
parameter penurunan jumlah mikronukleus pada
2000 sel eritrosit polikromatik mencit (Chairunnisa
2011: 35)[10]. Akan tetapi, penelitian tentang
aktivitas antioksidan pada ekstrak H. atra dari Kep.
Seribu, Jakarta belum pernah dilakukan. Oleh
karena itu, penelitian tentang aktivitas antioksidan
ekstrak H. atra perlu dilakukan untuk lebih
mengetahui potensi manfaat senyawa bioaktif yang
terdapat pada ekstrak H. atra. Selain itu,
pemeriksaan fraksi-fraksi ekstrak kasar H. atra
yang diperoleh dengan pelarut-pelarut tertentu perlu
juga dilakukan untuk mengetahui fraksi manakah
yang paling dominan dalam uji aktivitas
antioksidan.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
aktivitas antioksidan yang terdapat pada ekstrak
Holothuria atra dan mengetahui fraksi ekstrak
kasar H. atra manakah yang paling dominan dalam
uji aktivitaas antioksidan. Hipotesis penelitian ini
adalah terdapat aktivitas antioksidan pada ekstrak
Holothuria atra dan terdapat fraksi ekstrak H. atra
yang dominan dalam uji aktivitas antioksidan.
Uji Antioksidan..., Subhan Haikal Ehsan, FMIPA UI, 2013
2. METODE PENELITIAN
Pengambilan sampel teripang Holothuria atra
dilakukan di rataan terumbu Pulau Pari, Kep.
Seribu, Jakarta. Sampel diambil sebanyak 28
individu dengan kisaran ukuran 15--17 cm,
dikeluarkan organ bagian dalamnya, kemudian
ditimbang dan diawetkan dengan metanol dalam
botol sampel.
Ekstraksi
Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi.
Sampel yang telah diambil ditiriskan kemudian
dihaluskan dengan blender. Sampel yang telah
halus kemudian direndam dengan metanol pada
beaker glass 1 liter, dihomogenkan dengan
sonikator, dan didiamkan semalaman. Filtrat yang
terbentuk nantinya akan disaring. Proses ekstraksi
tersebut diulang hingga filtrat tidak berwarna.
Filtrat yang telah dikumpulkan, diuapkan dengan
rotary evaporator dan dikeringkan dalam oven
pada suhu 40 C.
Uji kualitatif antioksidan
Ekstrak kering dilarutkan dalam metanol lalu
dipipet menggunakan pipa kapiler kemudian
ditotolkan pada pelat KLT. Penotolan dilakukan
berkali-kali pada titik yang sama hingga terbentuk
zona penotolan berdiameter 0,5 cm untuk
mendapatkan hasil yang optimum. Larutan DPPH
disemprotkan ke pelat KLT secara merata
kemudian didiamkan sejenak. Reaksi antara DPPH
dan ekstrak pada pelat KLT diamati dan
didokumentasikan. Hasil positif aktivitas
antioksidan ditunjukkan dengan zona penotolan
yang tidak terwarnai ungu oleh larutan DPPH atau
terbentuk warna kuning pucat (hampir putih)
dengan latar belakang ungu.
Uji kuantitatif antioksidan
Aktivitas antioksidan ekstrak H. atra diukur dengan
mereaksikannya dengan senyawa radikal bebas
DPPH (1,1 Difenil-2-Pikrilhidrazil) sesuai dengan
metode Blois (1958)[11]. Konsentrasi larutan
DPPH dalam metanol p.a pada saat pengujian
adalah 50 g/ml. Ekstrak kering teripang dilarutkan
juga dengan metanol p.a dan dibuat seri konsentrasi
uji sebesar 2,5; 6,25; 12,5; 25; dan 37,5 g/ml. Seri
larutan uji direaksikan dengan larutan DPPH pada
tabung reaksi yang berbeda, dikocok hingga
homogen, diinkubasi pada suhu 37C selama 30
menit dan diukur serapannya pada panjang
gelombang 517 nm menggunakan spektrofotometer
hingga didapatkan absorbansi DPPH sisa pada
setiap konsentrasinya.
Penghitungan % inhibisi dan nilai IC50
Nilai IC50 dihitung berdasarkan persentase inhibisi
terhadap radikal DPPH dari masing-masing
konsentrasi larutan sampel dengan rumus:
!"#. !"#$%& !"#. !"#$%&
% !"!"!#! = ! 100 %
!"#$%"&' !"#$%&
Setelah didapatkan persentasi inhibisi (y) dari
masing-masing konsentrasi (x), titik-titik (x,y)
diplot pada bidang koordinat kemudian ditentukan
persamaan y = mx + c dengan perhitungan secara
regresi linear dimana m dan c adalah konstanta, x
adalah konsentrasi sampel (g/ml), dan y adalah
persentase inhibisi (%). Aktivitas antioksidan
dinyatakan dengan Inhibition Concentration 50
(IC50) yaitu konsentrasi sampel (x) yang dapat
meredam 50% radikal DPPH (y=50). Jadi, nilai IC50
sama dengan nilai x saat nilai y = 50. Persamaan
regresi linear didapat dengan menggunakan
program Microsoft Excel 2007 setelah membuat
kurva antara % inhibisi dan konsentrasi sampel.
Identifikasi saponin
Uji saponin pada penelitian ini dilakukan dengan
metode uji busa. Uji busa dilakukan dengan
menempatkan 0,5 gram ekstrak ke dalam tabung
reaksi yang telah berisikan akuades 10 ml, dikocok
dan ditambahkan satu tetes larutan asam klorida 2
N. Tabung reaksi tersebut didiamkan dan
diperhatikan ada atau tidaknya busa stabil. Sampel
mengandung saponin jika terbentuk busa stabil
dengan ketinggian 1--3 cm selama 30 detik.
Fraksinasi
Ekstrak metanol Holothuria atra dilarutkan dalam
air 400 ml dan dihomogenkan di dalam round flask
kemudian dituang ke corong pisah. N-heksan 400
ml ditambahkan ke corong pisah kemudian dikocok
hingga terbentuk emulsi kedua pelarut lalu
didiamkan hingga terbentuk dua fraksi nyang dapat
diketahui dari perbedaan warna keduanya yaitu
fraksi air pada bagian bawah dan fraksi n-heksan
pada bagian atas. Klep yang terdapat di bagian
bawah corong pisah dibuka hingga semua air keluar
dari corong pisah dan ditampung dalam round flask.
Fraksi n-heksan yang masih berada di corong pisah
dituang ke round flask lainnya. Fraksi air yang telah
ditampung dalam round flask dituang ke corong
pisah lau ditambahkan n-heksan yang baru.
Pengocokan dan proses yang sama dengan
sebelumnya dilakukan. Proses tersebut dilakukan
hingga fraksi n-heksan yang terbentuk di corong
pisah tidak berwarna. Fraksi n-heksan yang telah
didapatkan kemudian diuapkan menggunakan
evaporator selanjutnya dimasukkan ke oven hingga
kering.
Fraksi air yang diperoleh dituangkan ke corong
pisah kemudian ditambahkan 400 ml etil asetat.
Corong pisah dikocok lalu didiamkan hingga
terbentuk dua fraksi yaitu fraksi air pada bagian
bawah corong pisah dan fraksi etil asetat pada
bagian atas. Klep dibuka hingga fraksi air keluar
dari corong pisah kemudian ditampung dalam
round flask dan fraksi etil asetat dituang ke round
flask lain. Fraksi air yang telah ditampung dalam
round flask dituang ke corong pisah lalu
ditambahkan etil asetat yang baru kemudian
dikocok sama seperti proses sebelumnya. Proses
tersebut dilakukan hingga fraksi etil asetat yang
Uji Antioksidan..., Subhan Haikal Ehsan, FMIPA UI, 2013
terbentuk di corong pisah tidak berwarna. Fraksi
etil asetat dan air yang telah didapatkan kemudian
masing-masing diuapkan menggunakan evaporator
dan selanjutnya dimasukkan ke oven hingga kering.
Uji antioksidan dan uji saponin terhadap fraksi
Uji antioksidan dan uji saponin terhadap fraksi n-
heksan, etil asetat, dan air dilakukan untuk
mengetahui fraksi teraktif yang mengandung
saponin di antara ketiganya. Fraksi teraktif adalah
fraksi yang memiliki aktivitas antioksidan tertinggi
yang ditunjukkan dengan nilai IC50 terkecil. Uji
kualitatif dan kuantitatif antioksidan serta uji
saponin dilakukan dengan prosedur yang sama
dengan prosedur yang dilakukan pada ekstrak kasar
teripang.
3. HASIL DAN PEMBAHASAN
Bobot ekstrak kasar Holothuria atra
yang didapat yakni 1,39% dari bobot basah sampel.
Proses maserasi yang dilakukan pada penelitian
belum sepenuhnya selesai. Ekstrak kasar yang
digunakan adalah hasil maserasi sebanyak tiga kali.
Maserasi tidak dilakukan hingga selesai karena
keterbatasan waktu penelitian yang dimiliki penulis.
Walaupun demikian, persentase bobot ekstrak kasar
H. atra masih sesuai dengan penelitian yang
dilakukan Elyakov (1973: 327)[12] yang
menyatakan bahwa persentase ekstrak kasar H. atra
berkisar antara 0,5--2,5 % dari berat basahnya.
Acanthaster sp. dijadikan pembanding
pada penelitian karena termasuk ke dalam filum
yang sama dengan Holothuria atra, yaitu
Echinodermata dan aktivitas antioksidannya telah
diteliti sebelumnya oleh Rahim pada tahun 2012.
Ekstrak kasar Holothuria atra memiliki aktivitas
antioksidan yang lebih rendah daripada
pembandingnya. Artinya, Holothuria atra tidak
lebih berpotensi dijadikan sumber antioksidan
daripada Acanthaster sp..
Total bobot fraksi yang didapat adalah
12,5 gram dengan fraksi n-heksan sebagai fraksi
dengan bobot terbanyak yakni 8,5 gram. Hasil uji
aktivitas antioksidan secara kualitatif menunjukkan
ketiga fraksi memiliki aktivitas antioksidan. Uji
kuantitatif juga menunjukkan bahwa ketiga fraksi
memiliki aktivitas antioksidan yang nilainya lebih
besar dari nilai aktivitas antioksidan ekstrak kasar
Holothuria atra. Nilai aktivitas antioksidan dari
ekstrak kasar H. atra dan ketiga fraksinya dapat
dikatakan kurang kuat karena menurut Blois
(1958)[11], suatu senyawa adalah antioksidan yang
kuat jika memiliki nilai IC50 kurang dari 200 g/ml.
Hasil serupa juga didapatkan dari
penelitian Althunibat dkk. pada tahun 2009[13].
Althunibat dkk. meneliti tentang aktivitas
antioksidan ekstrak tiga jenis teripang di Malaysia
yaitu Holothuria scabra, H. leucospilota, dan
Stichopus chloronotus. Hasil penelitian tersebut
menunjukkan bahwa nilai IC50 ekstrak kasar ketiga
jenis teripang tersebut berkisar antara 2 mg/ml Tabel 1. Uji antioksidan dan uji saponin ekstrak
sampai 10 mg/ml. Penelitian aktivitas antioksidan dan fraksi Holothuria atra
H. atra dari Laut Merah juga telah dilakukan oleh
Esmat dkk. (2012)[14]. Esmat dkk. menyatakan Sampel Uji Nilai Uji saponin
bahwa aktivitas antioksidan ekstrak H. atra rendah Holothuria kualitatif IC50
terhadap radikal bebas DPPH dengan nilai 17,01 % atra antioksidan (g/ml)
pada konsentrasi 600 g/ml namun tinggi terhadap Ekstrak kasar + 739,194 +
radikal NO dengan nilai 93,42 % pada konsentrasi Fraksi n- + 511,35 +
600 g/ml. Hasil tersebut menunjukkan bahwa nilai heksan
aktivitas antioksidan dapat berbeda tergantung dari Fraksi etil + 373,776 -
metode yang dipakai. asetat
Uji saponin juga dilakukan untuk Fraksi air + 491,8 +
mengetahui apakah senyawa yang berperan sebagai
antioksidan didominasi oleh senyawa saponin. Hal
tersebut dilakukan karena senyawa metabolit Gambar 1. Persamaan regresi ekstrak kasar
sekunder yang umum dijumpai pada teripang metanol Holothuria atra
adalah triterpen glikosida (Careaga dkk. 2009:
60)[15] yang merupakan senyawa saponin,
sehingga dapat diketahui apakah triterpen glikosida ekstrak
kasar

y
=
0.0678x
+
0.474

(saponin) atau justru golongan senyawa lain yang R
=
0.7226

10

berperan dominan dalam aktivitas antioksidan.

persentase inhibisi (%)

Hasil uji saponin menunjukkan bahwa
5
ekstrak kasar, fraksi n-heksan, dan fraksi air positif
mengandung saponin sedangkan fraksi etil asetat
negatif. Saponin adalah senyawa polar yang secara 0
0 20 40 60 80 100 120
teori pada proses fraksinasi akan terbawa ke dalam
fraksi yang juga bersifat polar, yaitu fraksi air. konsentrasi lar. uji (g/ml)
Hasil uji saponin fraksi air menunjukkan bahwa
hasil tersebut sesuai dengan teori. Penyimpangan
terjadi pada uji saponin fraksi n-heksan yang Gambar 2. Persamaan regresi fraksi n-heksan
memberikan hasil positif padahal n-heksan adalah Holothuria atra
senyawa non-polar. Pengocokan pada corong pisah
terlalu lama dan pemisahan fraksi air dan n-heksan
dinilai terlalu cepat sehingga diduga ada komponen fraksi n-heksan
fraksi air yang masih terjebak dalam fraksi n- y = 0.0971x + 0.3991
R = 0.89033
heksan. 6
persentase inhibisi (%)

Fraksi air yang positif saponin memiliki 4

nilai aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 sebesar
491,8 g/ml. Nilai tersebut lebih kecil 2
dibandingkan dengan fraksi etil asetat yang negatif 0
saponin, dengan nilai IC50 sebesar 373,776 g/ml. 0 10 20 30 40 50 60
Hasil tersebut memberikan asumsi bahwa senyawa konsentrasi lar. uji (g/ml)
selain golongan saponin merupakan senyawa yang
berperan dominan dalam aktivitas antioksidan.
Senyawa selain saponin yang bersifat antioksidan
Gambar 3. Persamaan regresi fraksi etil asetat
dan juga larut di air (polar) atau pelarut semi polar
Holothuria atra
(etil asetat) adalah fenol, flavonoid, dan alkaloid
(Sayeed 2007: 15)[16]. Nilai aktivitas antioksidan
tertinggi di antara ketiga fraksi ditunjukkan oleh fraksi e;l asetat
fraksi etil asetat dan fraksi air, sehingga dapat y = 0.1214x + 4.7736
persentase inhibisi (%)

disimpulkan bahwa senyawa yang berperan 15 R = 0.57043

dominan dalam aktivitas antioksidan ekstrak H. 10
atra adalah golongan senyawa yang bersifat atau
5
cenderung bersifat polar.
0
0 20 40 60
konsentrasi lar. uji (g/ml)

Uji Antioksidan..., Subhan Haikal Ehsan, FMIPA UI, 2013

 [5] J. Selvin & A.P. Lipton. 2004. Antifouling
Gambar 4. Persamaan regresi fraksi etil air activity of bioactive substances extracted from
Holothuria atra Holothuria scabra. Hydrobiologica. (513):
251--253.
[6] L.M. Tursina. 2011. Uji antifeedant ekstrak
fraksi air kasar teripang Holothuria atra dan
y = 0.1002x + 0.82
R = 0.86626
Bohadschia marmorata terhadap ikan karang
10 di perairan Pulau Pramuka Kepulauan Seribu
persentase inhibisi (%)

5
DKI Jakarta. Skripsi Sarjana S1 Departemen
Biologi FMIPA Universitas Indonesia,
0 Depok: xii + 48 hlm.
0 10 20 30 40 50 60 [7] M. Kaneko, F. Kisa, K. Yamada, T.
konsentrasi lar. uji (g/ml) Miyamoto & R. Higuchi. 2003. Structure of a
new neuritogenic-active ganglioside from the
sea cucumber Stichopus japonicus. European
Journal of Organic Chemistry (10): 1004--
1008.
4. KESIMPULAN [8] J. Mamelona, E.M. Pelletier, K. Girard-
Lalancette, J. Legault, S. Karbourne & S.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak Kermasha. 2007. Quantification of phenolic
teripang Holothuria atra dan fraksi-fraksinya cntents and antioxidant capacity of Atlantic
memiliki aktivitas antioksidan. Fraksi yang sea cucumber Cucumaria frondosa. Food
memiliki aktivitas antioksidan tertinggi adalah Chem. 104: 1040--1047.
fraksi etil asetat dengan nilai IC50 sebesar 373,776 [9] P.W. Arnold, & R.W. Birtles. 1989. Soft
g/ml. Hal tersebut mengindikasikan bahwa sediments marine invertebrates of Southeast
senyawa yang berperan paling dominan dalam Asia and Australia: a guide to identification.
aktivitas antioksidan ekstrak H. atra adalah Australian Institutes of Marine Science,
senyawa yang bersifat polar atau cenderung bersifat Australia: xvi + 272 hlm.
polar. [10] N. Chairunnisa. 2011. Uji potensi ekstrak
kasar teripang Holothuria atra Jaeger sebagai
pencegah kanker melalui uji mikronukleus
UCAPAN TERIMAKASIH pada susmsum tulang mencit (Mus musculus)
jantan galur DDY. Skripsi Sarjana S1
Terima kasih kepada Bapak Dr.rer.nat Yasman, Departemen Biologi FMIPA Universitas
M. Sc. selaku pembimbing serta Ibu Dra. Setiorini, Indonesia, Depok: xi + 51 hlm.
M. Kes. dan Ibu Nova AnitA, M. Biomed. atas [11] M.S. Blois. 1958. Antioxidant determinations
saran dan masukan selama penelitian. by the use of a stable free radical.
Biochemistry 181: 1199--1200.
DAFTAR ACUAN [12] G.B. Elyakov, V.A Stonik, E.V. Levina, V.P
Slanke, T.A. Kuznetsova & V.S. Levin. 1973.
[1] A.S. Dewi. 2009. Biologically active A comparative study of the glycoside
secondary metabolites from tropical marine fractions of Pacific sea cucumbers. Perg.
invertebrates. Thesis S3 Oseanography-The Press. 44B: 325--336.
faculty of graduate studies The University Of [13] O.Y. Althunibat, R. bin Hashim, M. Taher,
British Columbia, Vancouver: xiv + 104 hlm. J.M. Daud, M.A. Ikeda & B.I. Zali. 2009. In
[2] E. Yusron. 2004. Sumberdaya teripang di vitro antioxidant and proliferative activities of
perairan Tanjung Pai Padaido Biak Numfor three Malaysian sea cucumber species.
Papua. Makara. Sains. 8(3): 123--127. European Journal of Scientific Research
[3] A. Husni, B. Um & D. Chung. 2009. Isolation 37(3): 376--387
and identification of antioxidants and [14] A.Y. Esmat, M.M. Said, A.A. Soliman,
tyrosinase inhibitors from Stichopus K.S.H. El-Masry & E.A. Badiea. 2012.
japonicus. Food Science and Biotechnology Bioactive compounds, antioxidant potential,
(18): 419--424 and hepatoprotective activity of sea cucumber
[4] Suriyanto. 2010. Uji toksisitas ekstrak (Holothuria atra) against thioacetamide
teripang (Holothuria spp.) dari Pulau intoxication in rats. Nutrition. 30: 1--10
Penjaliran Timur Taman Laut Nasional [15] V.P. Careaga, C. Bueno, C. Munianin, L.
Kepulauan Seribu Jakarta menggunakan Brine Alche & M.S. Maier. 2009. Antiproliferative,
Shrimp Lethality Test (BSLT). Skripsi Sarjana cytotoxic and hemolytic activities of a
S1 Departemen Biologi FMIPA Universitas triterpene glycoside from Psolus patagonicus
Indonesia, Depok: xiii + 55 hlm .

Uji Antioksidan..., Subhan Haikal Ehsan, FMIPA UI, 2013

 and its desulfated analog. Chemotherapy.
(55): 60--68
[16] A. Sayeed. 2007. Introduction of plant
constituents and their tests . New Delhi
University, New Delhi: 40 hlm

Uji Antioksidan..., Subhan Haikal Ehsan, FMIPA UI, 2013