Penapisan fitokimia menunjukkan bahwa ekstrak etanol mulberry hitam

(M. nigra) mengandung senyawa flavonoid, polifenol, tanin, monoterpenoid, dan

seskuiterpenoid. Flavonoid, tanin, dan polifenol telah dilaporkan memiliki
aktivitas antibakteri. Hasil uji aktivitas antibakteri dari ekstrak buah mulberi hitam
dapat menghambat pertumbuhan bakteri S. epidermidis dan P. acnes. Keberadaan
metabolit sekunder dalam esktrak adalah faktor penting dari adanya aktivitas
antibakteri. Senyawa-senyawa tersebut termasuk flavonoid, polifenol, dan tanin.
Senyawa flavonoid dapat membentuk ikatan hidrogen dengan protein di dinding
sel bakteri, dan menyebabkan bakteri tersebut menjadi tidak stabil dan kehilangan
aktivitas biologisnya. Aktivitas antibakteri dari senyawa fenol diberikan melalui
denaturasi protein sel bakteri. Tannin juga mengerahkan aktivitas antibakteri
dengan menargetkan polipeptida pada dinding sel yang mengganggu formasi
dinding sel dan membuatnya rentan terhadap lisis.

Aktivitas antibakteri dari ekstrak Buah Black Mulberry (M. nigra) hasil
subkultur ini dapat dilihat dari nilai KHM dan KBM, mengungkapkan bahwa nilai
KHM dari ekstrak etanol mulberry hitam terhadap bakteri S. Epidermidis adalah
1,25-2,5%, sedangkan untuk P. acnes adalah 2,5-5%. Nilai KBM dari ekstrak
etanol mulberry hitam adalah 2,5% yang dapat melawan bakteri S. epidermidis
dan 5% yang dapat melawan P. acnes. Dari hasil ini, dapat disimpulkan bahwa
ekstrak etanol mulberry hitam masih memberikan aktivitas anti bakteri S.
epidermidis dan P. acnes pada konsentrasi 2,5%, yang dapat digunakan dalam
persiapan masker wajah gel peel-off. Bentuk gel dari ekstrak etanol mulberry
hitam, yang memiliki aktivitas antibakteri ini memberi kemudahan dalam
penggunaan, waktu kontak lebih lama, kadar air tinggi, memberikan sensasi
pendinginan dan juga mengurangi risiko peradangan.

Gel masker peel-off Black Mulberry (M. nigra) yang dihasilkan

selanjutnya dilakukan evaluasi, diantaranya pH. Gel masker peel-off Black
Mulberry (M. Nigra) selama penyimpanan, menunjukan terjadinya penurunan pH
tetapi masih tetap di dalam tingkat yang dapat diterima untuk persiapan topikal.
Berdasarkan hasil analisis statistik oleh ANOVA, menunjukan nilai yang
signifikan yaitu 0,020 (P <0,05), yang menunjukan bahwa efek dari jumlah waktu
pada nilai pH dari persiapan. Berdasarkan data penelitian, nilai pH F5 memiliki
standar deviasi tertinggi dan nilai pH-nya dipengaruhi oleh lamanya waktu
penyimpanan. Selanjutnya dilakukan evaluasi Viskositas, dimana berdasarkan
hasil ANOVA, nilai signifikansi adalah 0,632 (P> 0,05), yang menunjukkan
bahwa tidak ada pengaruh dari waktu penyimpanan pada viskositas persiapan.
Dari data, jelas bahwa FI dan FII memiliki viskositas terendah dibandingkan
dengan formula lain karena kandungan polimernya rendah.
 Tes Dispersi juga dilakukan pada Gel masker peel-off, dimana dispersi
menunjukkan penurunan selama periode penyimpanan. Penurunan dispersi terjadi
melalui suatu meningkatkan ukuran unit yang menyerap molekul pelarut; oleh
karena itu, cairan dipertahankan, dengan peningkatan resistensi terhadap mengalir
dan menyebar. Berdasarkan hasil analisis statistik oleh uji Kruskal-Wallis
menunjukkan bahwa nilai signifikan adalah 0,039 (P <0,05), menunjukkan bahwa
ada efek dari jumlah waktu pada nilai dispersi persiapan. Hasil analisis statistik
menunjukkan bahwa perubahan dalam dispersi dari waktu ke waktu yang terbesar
terdapat pada formula FII. Karena itu, nilai dispersi FII dipengaruhi oleh periode
penyimpanan. Nilai dispersif FI-FII meningkat, sedangkan nilai FIII-FVI
meningkat-menurun seiring waktu. Persiapan dari gelling agent dan PVA dengan
konsentrasi tinggi menjadi sulit untuk menyebar dari waktu ke waktu.

Selanjutnya dilakukan evaluasi waktu pengeringan selama periode

penyimpanan, dimana waktu pengeringan persiapan menurun ditempat
penyimpanan periode, dimana cairan akan diserap oleh agen pembentuk gel yang
menyebabkan peningkatan viskositas, yang membuat waktu pengeringan singkat.
Analisis statistik dengan uji Kruskal-Wallis menghasilkan nilai signifikansi 0,001
(P <0,05), menunjukkan bahwa ada efek dari jumlah waktu penyimpanan pada
pengeringan waktu persiapan. Berdasarkan hasil statistik analisis, formula FII
memiliki perubahan terbesar dalam pengeringan waktu. Oleh karena itu, waktu
pengeringan untuk FII paling terpengaruh pada periode penyimpanan. Jadi,
pengamatan dan analisis statistik menunjukkan bahwa variasi konsentrasi PVA
dan HPMC memengaruhi waktu pengeringan selama penyimpanan.

Pada sediaan Gel masker peel-off Black Mulberry yang dihasilkan

kemudian dilakukan uji aktivitas Antibakteri. Uji aktivitas antibakteri ini
dilakukan pada formula IV (PVA, 7% dan HPMC, 2,5%), yang memberikan sifat
fisik terbaik selama waktu penyimpanan. Hasil tes menunjukkan aktivitas
antibakteri persiapan dalam hal diameter zona penghambatan meningkat dengan
meningkatnya konsentrasi ekstrak yang disiapkan. Masker gel peel-off ekstrak
buah murbei hitam yang memiliki aktivitas antibakteri disiapkan pada konsentrasi
3×MIC dari ekstrak. Selain itu bahan dasar dari masker gel peel-off tidak
menunjukkan adanya aktivitas antibakteri yang dapat mempengaruhi hasil dari
aktivitas antibakteri ekstrak. Hasil uji aktivitas antibakteri ini menunjukan
terdapatnya diameter zona hambat yang diduga karena peningkatan penetrasi
senyawa antibakteri yang berdifusi ke dalam media uji.

Bakteri S. epidermidis dan P. acnes merupakan bakteri Gram positif yang

memiliki tingkat peptidoglikan yang tinggi, sejumlah kecil lipid, dan polisakarida
(asam teichoic) di dinding sel mereka. Asam teichoic dapat mengangkut ion
positif dan polimer yang larut dalam air. Polimer yang larut dalam air
menunjukkan bahwa dinding sel bakteri Gram-positif sangat polar. Tingkat air
yang tinggi dalam formulasi gel dapat meningkat penetrasi senyawa antibakteri
dalam sediaan melalui lapisan peptidoglikan, yang merupakan bagian polar.

Sediaan masker gel peel-off yang dihasilkan kemudian dilakukan tes

iritasi, dimana hasil analisis statistik dengan uji Kruskal-Wallis menghasilkan P
<0,05, yang menunjukkan adanya asosiasi bahan uji dan waktu pengamatan yang
lebih lama. Semakin lama waktu observasi, efek dari bahan uji menjadi kurang
terlihat. Kontrol positif 0,5% SDS menunjukkan indeks iritasi yang tinggi,
sedangkan indeks iritasi formula FIV menunjukkan tidak terjadi reaksi signifikan.
Hasil analisis statistik dari sampel yang diuji oleh uji Kruskal-Wallis
menunjukkan bahwa indeks iritasi adalah 1:00 (P> 0,05), menunjukkan bahwa
tidak ada reaksi signifikan dari sampel yang diuji (persiapan basa, formula FIV,
SDS 0,5%, dan air suling) selama durasi pengamatan. Oleh karena itu, dapat
disimpulkan bahwa masker peel-off mask yang dibuat dari mulberry hitam (M.
nigra) ekstrak buah aman untuk digunakan sebagai persiapan topikal karena itu
tidak menyebabkan reaksi iritasi yang signifikan.