Nama : Ari Andika Firmansyah

NPM : 11181059
Kelas : 3FA2
Kelompok 2
Proses Sintesis tPA
tPA diproduksi menggunakan sel mamalia [mis., Ovarium hamster Cina (CHO)] yang memiliki
tPA-DNA sebagai bagian dari konten genetik (genom) mereka. Dalam operasi bioreaksi aerob,
sel tPA-CHO tumbuh dalam media nutrisi, HyQ PF-CHO — Hyclonemedia, ablendofnutrients,
garam (termasuk NaHCO3), asam amino, insulin, faktor pertumbuhan, dan transferrin, khusus
untuk pertumbuhan sel CHO.Bahan lainnya termasuk air steril, udara, dan CO2. (Audette et al.
2000).

Langkah Pertama : Hilangkan Perbedaan Jenis Molekuler

1. Sel mamalia
Ke dalam sel CHO, urutan tPA-DNA harus dimasukkan dan diekspresikan. Sel-sel
tPACHO yang dihasilkan adalah sel-sel CHO yang dipilih secara khusus dengan banyak
salinan tPADNA yang dimasukkan ke dalam genomnya, dan yang menghasilkan tPA tingkat
tinggi. Langkah penyisipan tPA-DNA ini diringkas dalam reaksi :
tPA−DNA sequence + CHO cells → selected high-expressing tPA − CHO cells
Produk nya berupa setumpuk sel-TPA, yang disiapkan untuk laboratorium dan disimpan
dalam wadah pada suhu -70∘ dilakukan dengan okulasi untuk bioreaksi :
tPA−CHO cells + HyQPF−CHO media + O2 → peningkatan jumlah sel
Seperti sel-sel tumbuh dalam budidaya aerobik ini pada tingkat 0,39 × 106 sel / ( ml-hari),
oksigen dari udara dikonsumsi pada tingkat 0,2 x 1012 mol O 2 / ( sel-hr) dan tPA diproduksi
pada tingkat 50 picogram tPA / ( sel-hari). Yang terakhir ini disekresikan secara bertahap ke
dalam larutan media yang cair.
2. Sel bakteri
Adalah dengan memasukkan urutan tPA-DNA ke dalam genom Escherichia coli (E. coli)
sel, seperti yang dirangkum oleh reaksi:
tPA - urutan DNA + E.coli seltPA - urutan DNA → selected high−expressing tPA − E.
coli cells
Kemudian, tPA E. coli sel bakteri, yang tumbuh di laboratorium, dibekukan di dalam wadah
pada suhu -70∘C untuk digunakan sebagai inokulum untuk reaksi fermentasi:
tPA - E. coli sel + Media bubuktPA + HAI 2 → peningkatan jumlah sel
Sebuah fermentasi batch tPA E. coli dapat menghasilkan 5-50 mg tPA / L- kaldu.
Escherichia coli mungkin saja terdapat kesulitan untuk melepaskan tPA, yang kemudian lebih
sulit untuk memisahkan dan harus melalui proses sintesis. Tidak seperti sel CHO, E. coli tidak
menambahkan kelompok gula (glikosilasi) ke TPA. Seperti sel-sel CHO, tPA E. coli Sel-sel yang
diproduksi, beku selama penelitian dan pengembangan fase.

Langkah Kedua : Distribusi Kimia

Pada langkah ini, sumber-sumber dan media untuk setiap spesies pada Gambar 1.4
dilakukan perhitungan sehingga laju aliran massa input reaksi sama dengan laju aliran massa
keluar. Hal ini
sering memerlukan pengenalan operasi pencampuran, seperti digambarkan dalam contoh
sebelumnya untuk vinil klorida. Operasi pencampuran yang dapat digunakan yaitu, di mana
media bubuk HyQ PF-CHO dicampur dengan air, seperti yang ditunjukkan pada Gambar 1.5.
Langkah Ketiga : Mengeliminasi Komposisi yang berbeda
Untuk sebagian besar distribusi bahan kimia, perbedaan komposisi ada di antara aliran
yang keluaran sebagai produk dari hasil reaksi. Pada Gambar 1.5, limbah dari pertumbuhan sel
produksi tPA harus dipisahkan. Ada banyak kemungkinan sistem pemisahan, dengan satunya
yaitu pada Gambar 1.6. Perhatikan bahwa karena protein kehilangan aktivitasnya pada suhu di
atas ∼0∘C, proses centrifuge, dan semua operasi persiapan lainnya, dioperasikan pada suhu 4oC.

Langkah Keempat : Mengeliminasi perbedaan suhu, tekanan dan fasa

 Dalam pembuatan tPA, bahan diasumsikan untuk tersedia pada 20∘C, air dicampur dengan
media bubuk HYQ PF-CHO di 4∘C, budidaya (operasi produksi sel) terjadi pada 37∘C, dan
pemisahan terjadi pada 4∘C. Panas eksotermik dari kultivasi dihilangkan pada suhu 37∘C. Hanya
tekanan kecil yang dapat berubah dan dapat diproyeksikan pada tahap sintesis proses ini.
Demikian pula, tidak ada operasi perubahan fase yang ditambahkan ke lembar alur. Oleh karena
itu, hanya beberapa operasi perubahan suhu yang ditambahkan pada Gambar 1.6, dengan
flowsheet yang dihasilkan pada Gambar 1.7.

Langkah Kelima : Task Integration

Pada tahap ini berbagai item peralatan dipilih, dengan menggabungkan dua operasi yang
berdekatan menjadi item peralatan tunggal; yaitu, dalam task integration. Kondisi yang harus
diperhatikan pertama adalah kondisi operasi, apakah dalam mode kontinu atau batch. Untuk
skala kecil, seperti 80 kg/tahun, hampir selalu menggunakan metode batch. Pilihan ukuran batch
dan peralatan, dan waktu batch, biasanya didasarkan pada operasi yang paling lambat, biasanya
proses penanaman (atau fermentasi). Lebih lanjut, ditentukan dengan menggunakan tingkat
pertumbuhan eksperimental sel TPA-CHO [0,39 × 106sel ∕ (mL-hari)], konsentrasi sel inlet dan
outlet, dan tingkat eksperimental pertumbuhan tPA [50 pg tPA ∕ (hari-sel)], di mana pg ≡
pikogram ≡ 10-12 g.