Hubungan Dosis Obat dan Repons, Penentuan Kadar

Indeks Terapi, dan LD50

12 March 2021
13:17
 

 Grafik hiperbola
 EC50 = Konsentrasi efek yang bisa memberikan 50% --> Bisa mengamati efek maksimum
  E = Efek yang diamati pada konsentrasi tertentu = Efek maks x Konsentrasi / Konsentrasi +
Konsentrasi efektif 50%
 
Hubungan konsentrasi obat dgn obat yg terikat pada reseptor

 Bisa ngitung jumlah obat yang terikat pada reseptor

 Bmax = Konsentrasi total ikatan di reseptor
 Kd = konstanta disosiasi kesetimbangan (konsentrasi obat bebas di mana setengah fraksinya
terikat pada reseptor)
 Kd rendah maka pengikatannya tinggi
 
  Sumbu X ngeplot dosis dalam bentuk logaritmanya
 Sumbu Y efek atau respons
 Kurva sebelumnya hiperbola, kalau yg ini SIGMOID
 Di bagian tengah cendrung lurus
 

 Sbg x konsentrasi obat dalam bentuk asli ataupun dalam bentuk log
 Sb y efek atau respons
 Kalau sb y efek atau respons = hubungan bertingkat (graded)
 Nilai EC50 bisa ditentukan, tarik EC50 ke arah kurva trs tarik ke sumbu x ???
 Kedua obat punya nilai EC50 yang berbeda --> Lebih besar yang B
 
KEUNTUNGAN KURVA DOSIS BERTINGKAT?

 
 

 Keempat obat memiliki efektivitass yang berbeda

 Obat A dan B bisa memberikan efek pada dosis yg lebih rendah, jadi mereka disebut lebih
poten daripada obat C dan D
 Gimana hasil perbandingan antara obat A dan B? --> Dgn dosis yg lebih rendah, obat B bisa
mencapai respons terapi. B memiliki EC yang lebih rendah dibandingkan dengan obat A
 Mana obat yg memberikan efek maksimal? Kurva ACD responsnya tinggi
 
  Berapa banyak populasi yang memberikan respons, diplot di sumbu y???
 Kalau graded sumbu y-nya intensitas efek (efeknya maksimal apa engga), tapi kalau di
Quantal sumbu y-nya respons yg diberikan oleh populasi (apakah polulasinya 100 persen atau
50 persen atau sekian persen). Populasi = hewan percobaan/pasien
 Ada 2 kurva sigmoid di gambar. Yang biru = kurva yang timbul dari efek terapi. Yang kanan =
kurva yang muncul dari efek toksik (kematian)
 Dari gambar kita bisa nentuin efektif dose
 Caranya sama, ngeplot 50% dari sumbu y ke arah kurva terus turun ke sumbu x
 
 Indeks terapi = Rasio / perbandingan dosis yg LD/ED or TD (toxic)/ED
 Dari indeks terapi bisa nilai keamanan dari suatu obat
 Indeks terapi lebar = perbedaan antara ED sama LD makin jauh jadi obatnya makin aman.
Kalau indeks terapi kecil jadi ED sama LD-nya makin dekat (jadi dia berbahaya penggunaannya
harus diawasi)
 

 Kurva yang pertama timbul dari efek hipnosis (efek yang diinginkan)
 Kurva kedua muncul karena efek toksik berupa kematian
 Grafik quantal karena di sumbu y-nya adalah populasi
 

 Dosis efektif dan doksik toksi kadang2 sempit / berhimpitan rentang bedanya --> Harus hati2
karena lebih dikit konsentrasinya maka bisa mencapai LD / TD
 

 Warfarin = Obat pengencer darah [Gambar Pertama]

 Jendela terapinya sepit = Jarak antara efek terapi yg diinginkan dgn yg tdk diinginkan sgt
dekat
 Penicillin [Gambar Kedua]
 Jendela terapinya lebar = Perbedaan efek terapi dan efek yg tdk diinginkannya lebar jd
obatnya aman dibanding obat yg punya jendela terapi sempit
 
  Pada sebagian besar orang bisa tercapai pas di sebagian orang bisa toxic
 Bisa terjadi karena jendela terapinya sempit
 Obat ttp diberikan dgn dosis/konsentrasi obat yg dipantau
 Gmn mantaunya? Di RS untuk bbrp periode tertentu, pasien diambil darah trs diitung kadar
obat di dalam darah
 
OBAT LAIN YG PUNYA INDEKS TERAPI SEMPIT

 
 

 Jendela terapi lebar = Ga akan berimpitan

 Bisa diberikan dengan dosis yang lebih]
 
  Hubungan waktu dgn efek / konsentrasi obat di dalam darah
 Periode awal = lag time
 Obat akan menghasilkan efek setelah konsentrasi minimumnya tercapai
 Seiring waktu, efeknya akan meningkat maksimal kemudian akan menurun efeknya (efek ga
akan naik terus)
 Jendela terapi pada kurva = Perbedaan antara konsentrasi minimum obat yang memberikan
efek dengan konsentrasi minimum obat yang ngasilin efek toksik
 
ANOTHER JENDELA TERAPI
 

 Diazepam = Benzodiazepim
 Termasuk golongan obat sedatif-hipnotik
 Pd dosis rendah menyebabkan sedasi --> Punya aktivitas menghilangkan kecemasan
(ansiolitik)
 Pd dosis yg lebih tinggi kel obat ini bisa mendorong tidur (efek HIPNOSIS)
  Termasuk oabt yg menekan sist saraf pusat = Mendepresi sistem saraf pusat.
 Ketika dosis ditingkatkan efek depresi sist saraf meningkat hingga timbul efek anastesia -->
efek bius, timbul keadaan anastesia (tidak bisa merasakan / an-estesia)
 Sedasi --> ngantuk. Hipnosis--> tidur
 Ditingkatkan lagi bisa terjadi koma/menekan sistem pernafasan/menekan sistem
kardiovaskular

 Kalau ditingkatkan sampe dosis tertentu dia bisa toksik

 
 Antikonvulsan = Antikejang
 Relaksasi otot = Bisa melemahkan / merelekskan otot

 ^SALAH SATU KANAL ION

 Kanal ion Cl ada di tengah2 neurotransmitter GABA (Gama Amino Butiric Acid)
 Scr molekular dapat dilihat gambarannya
 Pada reseotir gaba ada 5 subunit. Hijau tua beta, hijau muda gama, kuning alfa
 Obat2 hipnotik sedatif kerjanya dii reseptor itu
  Barbiturat --> Fenobarbital, barbital itu nama kelompok obat.
 Ketika obat berikatan sama reseptornya maka dia akan menyebabkank kanal ion klorida
terbuka maka ion Cl- yang banyak di luar sel akan masuk ke dalam sel. Di dalam sel akan
menyebabkan keadaan hiperpolarisasi (konsentrasi/muatan dalam sel makin meningkat,
muatannya negatif sama kayak muatan klorida yang masuk)
 Hiperpolarisasi menyebabkan keadaan depresi pada sistem saraf pusat
 Mekanisme lebih detailnya dipelajari dalam teori BBM akan terjadi serangkaian perubahan
biokimia sampai timbul efek depresi sistem saraf pusat
 
PROCEDURE

 
 Sesuai prinsip 3R: Replacement, Reduction, dan Refinement
 Setelah mencit dikelompokkan, kemudian dikasih tanda
 Mencitnya dalam keadaan puasa supaya absorpsi obatnya maksimal ga dipengaruhi sama
obat yang ada di saluran pencernaan. Puasanya berapa lama? Yang umum untuk mencit itu
lebih pende waktu puasanya sekitar 4-5 jam. Kalau tikus bisa lebih panjang 12 jam
 Air minum tetap dimasukkan karena ga dipuasakan. Air minum pengaruhnya minimal thd
absorpsi obat
 Setelah itu diberikan sama dosis yg sesuai
 Volumenya disesuaikan. Peroral untuk mencit maksimalnya 1 mL
 
  Sbg parameter mencitnya hipnosis atau yang lain dengan cara mengamati righting refleks -->
keadaan dimana mencit kalau normal dia bisa righting refleks kalau dibalikkin bakal balikkin
diri lagi ke posisis semula (kakinya bakal napak)
 Kalau dia hipnosis kondisinya, righting refleksnya hilang
 Kalau mati sama juga
 Kapan munculnya righting refleks dicatat donyatakan sebagai ONSET
 DURASI = lamanya dia …? Lama kerja
 Dari percobaan yg sebenrnya bisa dapetin data
 ….. Ubah dlm bentuk suspensi, baru diberikan ke mencit
 Diazepam lazimnya 2mg buat manusia, ada jg 5mg yg lebih kuat
 
 
 Pembawa = Cairan yang digunakan untuk melarutkan obat uji
 Diazepam ga alarut dalam air jadi dibantu sama pensuspensi --> Natrium … CNC? Dia bisa
membantu mensuspensikan / mendispersikan menyebarkan bahan yang tidak larut air jadi
larut air
 Ada juga PGA Pulvis Goum? Arabicum konsentrasinya Cuma 2%
 
 Knp perlu ada kontrol negatif? Supaya kita bisa tau efek yg muncul pd kelompok uji bukan
pengaruh pembawanya tapi pengaruh bahan uji
 Bahan pembawa yg digunakan harus bersifat INERT --> tidak reaktif alias netral
 Pd pengujian obat2 tertentu, calon obat baru yg berasal dr bahan alam
 Bisa juga pake kontrol positif. Obat apa? Biasanya obat yg sudah dikenal, beredar di pasaran
 Dgn menggunakank kontrol + bisa tau posisi bahan uji yg kita cobakan
 
  Supaya bisa mengetahui cara perhitungan dan analisis data, dibuat dummy data hasil
pengamatan
 Kontrol negatif masih nunjukkin righting reflex, kalau dibalikkin dia bisa balik lagi
 

 Ngitungnya berapa yg hipnosis atau mati dibagi total mencit (5) dikali 100
 
  Respons binomial = Respons antara ya/tidak atau mati/hidup
 Caranya mengubah data yg di tabel jadi bentuk probitnya
 

 Persen hipnosis diganti jadi persen probit

 Persen mati diubah jd probit yg mati
 Gmn caranya? Pake tabel transformasi persentase efek ke nilai probit

 Ambil nilai probit dari tabel (liat yang dikotak2in merah)

 Nanti dapet data tabel yang tadi, terus selanjutnya masukkin ke excel
 
  Sb x = Konsentrasi yg Log10
 Ada yg kelewat……..
 Dapet tabel lagi terus dikopi ke jenda excel
 

 Dari situ bisa ngitung nilai x (2,05) untuk nilai y-nya 50%
??????????????????????????????????????????????????
 Insert kurva yg scatter terus klik kanan
 
 
 Pokonya abis dapet ED50 sama LD50 kita bisa itung indeks terapi sama jendela diazepamnya
 Apakah itu nunjukkin indeks terapi sesungguhnya? PERLU EVALUASI
 Apakah dosisnya udah memadai, rentang dosisnya memadai, dll.
 
TUTORIAL CARA ANALISIS PROBIT PAKE EXCEL

 
  Dari nilai LD50, bisa … dari bahan yang kita uji
 Konversi LD50 dari mencit ke tikus pake konversi yg ada di Modul 1 nanti bisa dinilai dia
masuk ke kategori mana
 
PEDOMAN NENTUIN LD50 --> PERKA, di internet ada banyak

 Dengan menggunakan metode itu, bisa nilai bahan uji masuk kee kategori yang mana
apakah aman, toxic
  Misal bentuk sediaan patch apakah dia mengiritasi scr dermal atau tidak? Bisa menggunakan
metode yg ada di PERKA isinya lengkap.
 PERKA BPOM mengacu ke WHO

 Bisa diekstrapolasi kepada manusia

 Tapi gabisa mutlak aman dipake manusia masih ada penilaian lebih lanjutnya karena kan itu
uji toksisitasnya pada hewan
 
  Nentuin LD50 pake uji toksisitas akut
 Bobot badan hewan juga dicek pas lagi pengamatan
 Lakukan juga pengujian pada kontrol negatif (yg gadapet obat)
Selain bobot badan, amati juga aktivitas farmakologis yang muncul --> Metode screening
farmakologi (pertemuan MINGDEP) [ melihat bbrp parameter / pengaruh bahan uji thd hewan
uji ]
 Amati juga apakah selama 14 hari percobaan hewan percoban ada yg mati apa engga. Kalau
ad yg mati otopsi buat liat pengaruh obat thd organ2 bagian dalam