PCR Biomaxima

1. Hidupkan mesin PCR Tianlong dengan menekan tombol on yang berada di belakang alat
2. Buka software Tianlong pad PC dengan klik 2 kali
3. Klik new expperiment untuk memulai pemeriksaan baru
4. Jika menggunakan Biomaxima, atur siklus, suhu dan waktu seperti di bawah ini pada menu
run setting

Cycles Step Time Temp

1 Reverse Transcriptase 15 menit 45C
1 Initial Denaturase 2 menit 95C
Denaturase 10 detik 95C
45
Annealing / Extension 50 detik 95C
1 Cooling 30 detik 35C

5. Buatlah mapping sampel sesuai kebutuhan pada menu sample setting

6. Larutkan positif control (red vial) dengan menambahkan 100 ul water RNAse / DNAse free.
Jika positif control tidak digunakan maka simpan di -20Oc
7. Sipkan well strip pemeriksaan PCR
8. Masukkan 15 ul Rehiration buffer (blue vial) ke dalam setiap well
9. Masukkan 5 ul RNA sampel ke dalam setiap well
10. Masukkan 5 ul negatif control di well negatif control
11. Masukkan 5 ul positif control di well positif control
12. Spin down well strip lebih kurang 60 detik
13. Masukkan strip well ke dalam mesin pcr
14. Klin Run pada mesin PCR atau klik run pada menu run monitoring pada PC
15. Tunggu lebih kurang 120 menit untuk mendapatkan hasil
16. Referensi hasil bisa dilihat pada tabel di bawah ini:

Orf1ab/ FAM N / ROX IC / HEX Negative Positive Interpretasi

control control
+ / Ct ≤ 38 + / Ct ≤ 38 + / Ct ≤ 38 - + / Ct ≤ 38 SARS CoV-2
Positive
-/ Ct ≥ 38 -/ Ct ≥ 38 + / Ct ≤ 38 - + / Ct ≤ 38 SARS CoV-2
Negative
+ / Ct ≤ 38 -/ Ct ≥ 38 + / Ct ≤ 38 - + / Ct ≤ 38 Retest /
-/ Ct ≥ 38 + / Ct ≤ 38 + / Ct ≤ 38 - + / Ct ≤ 38 Reextract,
Jika salah satu
gen masih
ada yang
positif maka
dianggap
positif
+ + + + + Fail
- - - - -