Kuljar - Acara 5 Aklimatisasi - Kelompok 30.

LAPORAN PRAKTIKUM
TEKNOLOGI KULTUR JARINGAN
Nama : Amrina Rosyadah (N0121054)

Anggia Disbi Arbaini (N0121073)
An Nisa Prastyaningtyas (N0121056)
Anisa Fitria (N0121070)
Dewi Laili Da’watul Khoiroh (N0121120)
Kelompok : 30
Co-Ass : Tyas Alivia Wulandari
PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2021
i
HALAMAN PENGESAHAN
Laporan praktikum Teknologi Kultur Jaringan ini disusun untuk melengkapi

tugas mata kuliah Teknologi Kultur Jaringan dan telah diterima, disetujui dan
disahkan oleh Co-Assiten dan Dosen Mata Kuliah Teknologi Kultur Jaringan pada:
Hari :
Tanggal :
Disusun oleh :
Amrina Rosyadah (N0121054)
Anggia Disbi Arbaini (N0121073)
An Nisa Prastyaningtyas (N0121056)
Anisa Fitria (N0121070)
Dewi Laili Da’watul Khoiroh (N0121120)
Kelompok : 30
Menyetujui,
Dosen Koordinator Praktikum Co Assisten
Teknologi Kultur Jaringan
Ir. Retno Bandriati Arni Putri, M.Si. Alfida Muthi’ah

NIP. 19641114 198803 2 001 NIM. H0718013
ii
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT, yang telah
melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis mampu menyelesaikan
laporan praktikum Teknologi Kultur Jaringan ini tepat pada waktunya tanpa
gangguan dan hambatan yang berarti. Laporan praktikum Teknologi Kultur
Jaringan ini dibuat guna melengkapi tugas mata kuliah Teknologi Kultur Jaringan.
Dalam proses penyusunan laporan praktikum Teknologi Kultur Jaringan ini
tidak lepas dari bantuan berbagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan
terimakasih kepada:
1. Dekan Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret Surakarta.
2. Dosen mata kuliah Teknologi Kultur Jaringan.
3. Tim Co-ass Teknologi Kultur Jaringan yang telah memberikan bimbingan
selama praktikum dilaksanakan.
4. Teman-teman dan berbagai pihak yang telah membantu terselesaikannya
laporan praktikum ini.
Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari kesempurnaan, untuk
itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang bersifat membangun untuk
memperbaiki laporan pada masa yang akan datang. Penulis berharap semoga
laporan ini bermanfaat bagi penulis khususnya dan pembaca umumnya.
Surakarta, 25 November 2021
Penyusun
DAFTAR ISI
iii
HALAMAN
SAMPUL
..........................................................................................................................
i
HALAMAN
PENGESAHAN
..........................................................................................................................
ii
KATA
PENGANTAR
..........................................................................................................................
iii
DAFTAR
ISI
..........................................................................................................................
iv
DAFTAR
TABEL
..........................................................................................................................
vi
I. PENGENALAN LABORATORIUM DAN ALAT
A. Pendahuluan
............................................................................................................
1
B. Tujuan
Praktikum
............................................................................................................
1
C. Hasil
............................................................................................................
2
1. Tabel Pengenalan Alat di Laboratorium Kultur
Jaringan
iv
.......................................................................................................
2
2. Pembahasan
.......................................................................................................
6
D. Kesimpulan dan
Saran
............................................................................................................
11
1. Kesimpulan
.......................................................................................................
11
2. Saran
.......................................................................................................
12
DAFTAR PUSTAKA
II. PEMBUATAN MEDIA DAN STERILISASI
A. Pendahuluan
............................................................................................................
14
B. Tujuan
Praktikum
............................................................................................................
15
C. Pembahasan
............................................................................................................
15
E. Kesimpulan dan
Saran
............................................................................................................
19
v
3. Kesimpulan
.......................................................................................................
19
4. Saran
.......................................................................................................
20
DAFTAR PUSTAKA
III. INISIASI TANAMAN
A. Pendahuluan
............................................................................................................
24
B. Tujuan
Praktikum
............................................................................................................
24
C. Pembahasan
............................................................................................................
24
D. Kesimpulan dan
Saran
............................................................................................................
29
1. Kesimpulan
.......................................................................................................
29
2. Saran
.......................................................................................................
30
DAFTAR PUSTAKA
IV. SUB KULTUR
vi
A. Pendahuluan
............................................................................................................
32
B. Tujuan
Praktikum
............................................................................................................
32
C. Pembahasan
............................................................................................................
33
D. Kesimpulan dan
Saran
............................................................................................................
38
1. Kesimpulan
.......................................................................................................
38
2. Saran
.......................................................................................................
39
DAFTAR PUSTAKA
V. AKLIMATISASI
A. Pendahuluan
............................................................................................................
42
B. Tujuan
Praktikum
............................................................................................................
42
vii
C. Pembahasan
............................................................................................................
42
D. Kesimpulan dan
Saran
............................................................................................................
45
1. Kesimpulan
.......................................................................................................
45
2. Saran
.......................................................................................................
46
DAFTAR PUSTAKA
viii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Pengenalan Alat di Laboratorium Kultur Jaringan ................................. 2
ix
ACARA 1
PENGENALAN LABORATORIUM DAN ALAT
A. Pendahuluan
Kultur jaringan adalah salah satu cara perbanyakan tumbuhan secara
vegetatif. Kultur jaringan sering disebut juga kultur in vitro. Kultur jaringan ini
berlandaskan teori totipotensi sel dimana setiap sel memiliki potensi yang sama
untuk tumbuh menjadi individu baru yang lengkap. Oleh karena itu, kultur
jaringan dapat menghasilkan individu yang sama persis dengan induknya dari
satu sel (Kurnianingsih et al., 2020).
Pelaksanaan kultur jaringan menuntut lingkungan dengan aseptisitas
yang tinggi agar didapatkan hasil yang baik. Oleh karena itu, kultur jaringan
biasanya dilakukan di laboratorium yang jauh dari keramaian dan memiliki
udara bersih untuk meminimalisasi adanya kontaminasi. Laboratorium kultur
jaringan terdiri atas ruangan-ruang terpisah namun tetap terhubung satu sama
lain, sehingga setiap kegiatan dilakukan pada ruang yang berbeda. Ruangan
yang terdapat pada laboratorium kultur jaringan diantaranya adalah ruang
analisa, ruang sterilisasi, ruang preparasi, ruang stok, ruang isolasi/transfer, dan
ruang kultur, tetapi pembagian ruangan ini dapat dimodifikasi menjadi ruang
persiapan, ruang penanaman, dan ruang penyimpanan (Harahap, 2011). Di
dalam setiap ruangan, terdapat berbagai alat yang diperlukan untuk kegiatan
yang dilakukan di ruangan tersebut.
B. Tujuan Praktikum
Praktikum pengenalan laboratorium dan alat bertujuan untuk mengetahui
ruang kerja dan alat-alat dalam laboratorium kultur jaringan.
1
C. Hasil
1. Tabel 1 Pengenalan Alat di Laboratorium Kultur Jaringan
No. Jenis Alat Fungsi Gambar Alat
Laminar air flow sendiri
berfungsi untuk
melakukan kegiatan
mulai dari persiapan
Laminar Air bahan tanam, inokulasi
1 Flow Cabinet atau penanaman dan
(LAFC) pemindahan tanaman dari
satu tempat ke tempat lain
dalam satu kultur agar
tetap steril.
Lampu bunsen berfungsi
untuk memanaskan
Lampu medium, mensterilkan
2 jarum inokulasi dan alat-
Bunsen
alat yang terbuat dari
platina dan nikrom.
Petridish berfungsi untuk
meletakkan eksplan yang
telah disterilkan dan
3 Petridish dibilas aquades steril
Botol kultur berfungsi

sebagai tempat untuk
mengkulturkan atau
4 Botol Kultur menanam eksplan.
Kertas buram bisa

digunakan di
laboratorium untuk
menyaring larutan
5 Kertas Buram heterogen dan sebagai
alas ketika suatu eksplan
diletakkan pada cawan
petri.
2
Tissue berfungsi untuk
membersihkan sisa-sisa
bahan yang telah dipakai
6 Tissue di laboratorium.
Pinset memiliki banyak

fungsi diantaranya adalah
untuk mengambil benda
Pinset dengan menjepit
7
Besar/Kecil misalnya saat proses
pemindahan bahan.
Spatula berfungsi untuk

memudahkan mengambil
bahan yang dibutuhkan,
8 Spatula biasanya berbentuk
sendok kecil, pipih dan
bertangkai.
Pisau scalpel berfungsi

untuk memotong jaringan
yang digunakan dalam
9 Pisau Scalpel kultur.
Mata pisau yang

merupakan bagian dari
pisau scalpel untuk
memotong jaringan yang
10 Mata Pisau sebelumnya perlu
dipanaskan dengan api
untuk membunuh kuman
dan bakteri yang
menempel.
Gunting eksplan
berfungsi untuk
memotong eksplan.
Gunting
11
Eksplan
3
Spayer berfungsi untuk
memecah cairan menjadi
tetes-tetes dngan ukuran
yang efektif untuk
12 Sprayer didistribusikan secara
merata di tempat yang
dituju, misal sprayer
berisi alcohol untuk
sterilisasi.
Timbangan analitik
berfungsi untuk
menimbang bahan atau
Timbangan senyawa yang digunakan
13
Analitik dalam media kultur.
Hot Plate Stirrer

berfungsi untuk
memanaskan
bahan/senyawa/larutan
Hot Plate
14 dalam proses pembuatan
Stirrer
media. Biasanya dipakai
dengan magnetic stirrer
untu menghomogenkan
larutan.
Magnetik Stirrer
berfungsi untuk
mengaduk
bahan/senyawa/larutan
Magnetik
15 dalam proses pembuatan
stirer
media. Biasanya dipakai
dengan hot plate stirrer
untu menghomogenkan
larutan.
pH meter berfungsi untuk
mengukur tingkat
keasaman medium.
16 pH meter
4
Erlenmeyer berfungsi
untuk menampung
larutan, bahan atau
cairan. Erlenmeyer dapat
17 Erlenmeyer digunakan untuk meracik
dan menghomogenkan
bahan-bahan komposisi
media dan menampung
akuades.
Pipet berfungsi sebagai
saluran tunggal yang
biasa digunakan di
laboratorium kultur
jaringn untuk
memindahkan cairan
18 Pipet
dengan volume kecil, dan
merupakan alat ukur
untuk memindahkan
cairan dari wadah aslinya
ke wadah lain dalam jarak
tertentu.
Kertas label berfungsi
untuk memberi penamaan
19 Kertas label terhadap masing-masing
botol kultur agar tidak
tertukar.
Autoklaf berfungsi untuk
mensterilisasi media,
botol kultur dan alat-alat
kecil
20 Autoklaf lainnya yang tahan panas
seperti pinset, gunting,
scalpel dengan
penguaapan suhu
bertekanan tinggi.
Oven berfungsi untuk
menyimpan alat
21 Oven laboratorium agar tetap
steril dan juga sebagai
alat untuk sterilisasi
5
Rak kultur berfungsi
untuk meletakkan botol-
botol kultur setelah
22 Rak Kultur proses penanaman yang
dilengkapi dengan lampu
neon sebagai sumber
cahaya.
2. Pembahasan
Alat-alat Laboratorium merupakan alat yang diperlukan dalam
kegiatan dilaboratorium yang biasanya digunakan dalam penelitiaan atau
percobaan. Menurut Lase (2020), pengenalan alat-alat laboratorium sangat
penting dilakukan untuk keselamatan kerja saat melakukan penelitian/
praktikum. Biasanya Alat- alat laboratorium dapat rusak atau bahkan
berbahaya jika penggunaannya tidak sesuai dengan prosedur. Sehingga hal
ini perlu dilakukan agar mahasiswa mengetahui cara-cara penggunaan alat-
alat laboratorium dengan baik dan benar, sehingga dapat meminimalisir
kesalahan prosedur pemakaian alat. Juvitasari et al (2018), menjelaskan
bahwa pengetahuan yang kurang mengenai alat–alat laboratorium dapat
mendatangkan bahaya yang mungkin terjadi ketika bekerja di laboratorium.
Pemeliharaan dan penyimpanan yang memadai diperlukan untuk
memudahkan dalam memahami alat-alat laboratorium yang dapat
digunakan dalam waktu relatif lama dan dalam keadaan baik. Sehingga
penting bagi mahasiswa yang akan melakukan penelitian atau praktikum
untuk mengenal dan mengetahui nama alat serta spesifikasi alat. Selain itu
mahasiwa juga harus memahami bagaimana cara kerja alat tersebut dan apa
prinsip kerjanya. Yusuf et al (2019), mengatkan bahwa peralatan yanga
ada dilaboratorium perlu didata untuk mengetahui jenis dan juga jumlahnya
untuk keperluan yang akan datang.
Salah satu alat yang ada dalam laboratorium adalah Autoklaf dan
LAF. Menurut Andriani (2016), Autoklaf merupakan alat yang digunakan
untuk sterilisasi alat-alat laboratorium, media dan bahan. Sterilisasi
menggunakan alat ini dipakai ketika menggunakan suhu panas pada uap air
6
dengan tekanan 15 Psi atau sekita 2 atm dan suhu 121℃. Prinsip kerja
autoklaf dengan mengunakan uap air panas bertekanan untuk sterilisasi.
Cara kerja yang perlu dilakukan ketika akan menggunakan autoklaf
yakni dengan memastikan aquades yang ada didalam autoklaf sudah
mencapai batas ukur atau belum. Caranya dengan mengangkat panci yang
ada di dalam karena aquades berada dibawahnya. Kemudian dapat
menyiapkan alat-alat yang akan disterilisasi dan memasukkan ke autoklaf.
Setelah alat masuk autoklaf ditutup dengan memastikan selang harus
masuk ke lubang yang ada di tembok autoklaf. Setelah itu kunci dengan
rapat atau bisa memakai alat pengunci agar lebih rapat dan jangan lupa
menutup katupnya juga. Lalu, colokkan kabel dan klick tombol on.
Perhatikan pula aquades apabila sudah keruh harus segera diganti dengan
membuka kran yang ada dibawah alat dan membiarkan air yang lama
keluar.
LAF (Laminar Air Flow), menurut Hartono dan Raharjo (2018)
merupakan ruang steril yang memungkinkan praktikan bekerja dengan
steril karena sirkulasi udara dan filter udaranya, sehingga tidak dapat
mengkontaminasi wilayah kerja penelitian pada Laminar Air Flow. Fungsi
lain dari Laminar Air Flow untuk menjaga kesterilan alat dan media yang
digunakan untuk proses penelitian agar tidak menyebabkan kontaminasi
mikroba atau bakteri lain yang tidak diinginkan. Sedangkan Andriani
(2016), menyatakan LAF berfungsi untuk pengerjaan secara aseptis karena
memiliki penyaringan aliran udara dan aplikasi sinar UV sebelum
digunakan.
Menurut Baruno (2021) Laminar yang berada di pasaran memiliki
prinsip kerja mekanik dan fisik dengan udara lebih dahulu disaring melalui
pre filter untuk mencegah masuknya partikel yang berukuran lebih dari 0,5
mm. Kemudian disaring lagi oleh saringan HEPA untuk mencegah
masuknya partikel yang berukuran lebih dari 0,3 mm, dan setelah itu
dihisap oleh blower. Selain itu juga dilengkapi dengan lampu yang
7
menghasilkan sinar Ultraviolet (UV), memiliki fungsi untuk
menghilangkan pengotor serta mikroorganisme yang tidak diinginkan.
Cara Kerja yang dilakukan ketika akan menggunakan LAF yakni
dengan pertama membuka setengah LAF. Lalu semprot alkohol ke seluruh
permukaan dalam LAF. Lap dengan searah menggunakan tisu. Kemudian
tutup LAF. Setelah itu sinar UV dinyalakan untuk sterilisasi dengan waktu
30-45 menit. Setelah waktu 30-45 menit matikan sinar UV. Ketika akan
bekerja, buka LAF dan nyalakan Blower yg berguna untuk memfilter
udara . Gunakan penyinaran dengan menyalakan lampu TL. Setelah selesai
semprot alkohol ke seluruh permukaan dalam LAF. Lap dengan searah
menggunakan tisu dan tutup LAF. Nyalakan sinar UV untuk sterilisasi
dengan waktu 30-45 menit lalu matikan sinar UV.
Peralatan dissecting kit (perataan untuk memotong/mengiris) terdiri
dari pinset, spatula dan lain-lain yang umumnya terbuat dari bahan logam
(stainlessteel). Menurut Dwiyani (2015), spatula merupakan pengaduk atau
digunakan untuk mengambil bahan berupa serbuk. Pinset digunakan untuk
memegang / menjepit benda, umumnya digunakan pada saat penanaman
eksplan. Scalpel adalah gagang pisau yang dalam penggunaannya
berpasangan dengan blade (pisau). Gunanya adalah untuk
mengiris/memotong, dalam hal ini bahan eksplan yang akan ditanam.
Bagian pisau dijual secara terpisah dari scalpel (gagang) nya dan sudah
dalam keadaan steril dan bersifat sekali pakai. Peralatan kecil dari bahan
logam ini juga harus dibungkus dengan kertas saat sterilisasi. Berdasarkan
Yarso (2018), Sterilisasi dapat dilakukan dengan oven maupun dengan
autoklaf. Scalpel terbagi menjadi dua jenis, yaitu scalpel sekali pakai
(disposable) dan yang dipakai berulang (re-usable). Scalpel yang dipakai
berulang mempunyai bilah yang menjadi satu dengan gagang yang dapat
diasah, sedangkan scalpel yang sering tersedia sekarang adalah skalpel
yang menggunakan bilah yang diganti setiap dipakai. Skalpel sekali pakai
biasanya mempunyai gagang plastik yang dipasangkan bilah dan
digunakan satu kali kemudian dibuang seluruhnya. Selain scalpel, pinset
8
yang digunakan untuk memegang dan menahan jaringan pada waktu
diseksi juga dibedakan menjadi 3 macam yaitu Pinset bergigi tajam, Pinset
Adson, dan Pinset tidak bergigi. Berdasarkan Hama et al. (2018), sterilisasi
peralatan seperti pinset, scalpel, dan peralatan lainnya dibersihkan dengan
menggunakan sabun cuci kemudian dibilas dan ditiriskan, setelah ditiriskan
dibungkus dengan kertas dan dimasukan dalam autoklaf
Laboratorium kultur jaringan menurut Prasetyorini (2019) sekurang-
kurangnya terdiri dari tiga ruangan yang terpisah. Ruang pertama
dipergunakan sebagai dapur untuk preparasi bahan dan alat, termasuk
didalamnya adalah pencucian, pengeringan dan sterilisasi alat serta
pembuatan medium beserta sterilisasinya. Ruang kedua digunakan untuk
aktivitas penanaman atau pemindahan bahan tanaman ke kondisi in-vitro.
Ruang ketiga digunakan untuk menyimpan kultur dalam kondisi yang
terkendali. Menurut Dwiyani (2015) ruang persiapan merupakan tempat
pembuatan media. Ruangan ini terdapat rak yang berisi zat kimia,
timbangan, magnetic stirrer, kulkas (tempat zat kimia yang harus disimpan
pada suhu dingin, seperti zat pengatur tumbuh, media kemasan, vitamin,
dan lain-lain) serta meja untuk melakukan pekerjaan pembuatan media.
Ruang tanam merupakan ruang untuk menanam kultur. Ruangan ini harus
dijaga sterilitasnya agar pekerjaan kultur dapat terhindar dari kontaminasi
dan berjalan dengan sukses. Untuk alasan sterilitas ini, ruang tanam juga
dilengkapi dengan lampu pembunuh mikroorganisme. Lampu ini
dinyalakan 30 menit sebelum pekerjaan dimulai dan dimatikan ketika
sudah mulai menanam. Ruang kultur/inokulasi merupakan ruang untuk
meletakkan dan menumbuhkan hasil kultur yang kita tanam. Ruangan ini
dilengkapi dengan pendingin yang bisa diatur suhunya. Umumnya suhu
yang dibutuhkan berkisar 20-24℃ karena morfogenesis dalam kultur
umumnya terjadi pada kisaran suhu tersebut. Ruang kultur dilengkapi
dengan rak-rak kultur yang digunakan untuk menaruh tanaman kultur.
Ruang ini juga harus dijaga sterilitasnya untuk menghindarkan kultur dari
kontaminan. Sebagai ruangan untuk membersihkan alat, ruangan preparasi
9
sebaiknya dilengkapi dengan bak pencuci, bak perendam, silinder pipet,
pencuci pipet, sikat dengan berbagai bentuk dan ukuran, dan lain-lain.
Ruang kultur digunakan untuk memelihara dan menginkubasikan kultur in-
vitro. Oleh karenannya dalam ruang kultur tersebut dilengkapi dengan rak-
rak atau kultur sedemikian rupa sehingga ruangan menjadi lebih efisien
dalam penggunaanruangan. Rak-rak dapat diatur berderet-deret sedemikian
rupa sehingga pengguna tidak mengalami kesulitan dalam melakukan
pengamatan. Menurut Prasetyorini (2019) ruang kultur hendaknya juga
disediakan rak tabung reaksi yang digunakan untuk menempatkan tabung
reaksi yang digunakan sebagai wadah kultur. Ruang kultur sebaiknya
bersih, tenang dan bebas lalu lalang. Kementrian KLHK (2016) juga
menambahkan bahwa setiap orang yang masuk harus secara disiplin
menjaga kondisi aseptik yang ada serta mematuhi ketentuan yang
diberlakukan.
Terdapat 3 ruangan dalam laboratorium kultur jaringan. Menurut
Asriani (2020), pada ruang persiapan terdapat beberapa alat yang
dipergunakan untuk penyimpanan alat laboratorium, persiapan alat,
sterilisasi, dan pembuatan media. Sterilisasi dilakukan dengan
menggunakan autoklaf bertekanan tinggi agar alat laboratorium tidak
terkontaminasi yang berakibat kepada tidak berhasilnya proses kultur
jaringan. Alat yang disimpan pada ruang persiapan ini biasanya berupa :
timbangan analitik, botol kultur, hot plate, stirrer, magnetic stirrer, oven,
autoklaf, pH meter, beaker glass, Erlenmeyer, pipet, dan kertas label.
Ruangan ini juga dilengkapi dengan bak pencuci beserta saluran air dan
lemari pendingin yang digunakan untuk menyimpan larutan kimia.
Selanjutnya ada ruang tanam yang digunakan untuk inisiasi dan
subkultur tanaman dengan kondisi steril. Berdasarkan Sandra (2019),
dalam ruang tanam ini terdapat alat yang memegang peranan yang penting
untuk proses sterilisasi tanaman, yaitu Laminar Air Flow Cabinet (LAFC),
yaitu tempat untuk menamam eksplan atau bagian tanaman yang akan
dikultur dalam botol berisi media tumbuh. Menurut Alsved et al. (2018),
10
pada alat ini terdapat blower yang yang mendorong udara dari dalam ke
luar melalui penyaring di bagian atas dengan kecepatan aliran udara yang
tinggi sehingga mampu menciptakan zona steril. Pada Laminar Air Flow
juga terdapat lampu UV sbagai alat untuk mensterilkan permukaan bagian
dalam. Selain LAFC, terdapat alat lain juga seperti : lampu Bunsen,
petridish, botol kultur, kertas buram, tisu, plastic wrap, dan peralatan
diseksi seperti yang sudah dijelaskan pada paragraf sebelumnya.
Selanjutnya yaitu ruang penyimpanan atau inkubasi. Berdasarkan
Kurnianingsih et al. (2020), ruang penyimpanan digunakan untuk
menyimpan tanaman budidaya kultur jaringan yang dilengkapi dengan
lampu sebagai sumber cahaya dan temperatur yang terkontrol. Ruangan ini
dilengkapi beberapa alat yaitu : rak kultur untuk menyimpan kultur
tanaman yang diproduksi. Selanjutnya terdapat lampu fluorescens, dan air
conditioner dimana menurut Hapsoro dan Yunita (2018) alat tersebut
berfungsi untuk mengatur suhu menjadi 24-28 ℃, dan hal yang paling
penting di ruangan ini harus terjaga kelembapannya, yaitu sekitar 70%
kelembapan udara agar tidak terjadi kontaminasi mikroorganisme.
D. Kesimpulan dan Saran

a) Kesimpulan
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan, dapat diambil kesimpulan
sebagai berikut :
1. Pengenalan alat-alat laboratorium sangat penting dilakukan untuk
keselamatan kerja saat melakukan penelitian atau praktikum, dan untuk
meminimalisir kesalahan prosedur pemakaian alat.
2. Autoklaf merupakan alat yang digunakan untuk sterilisasi alat-alat
laboratorium, media dan bahan. LAF merupakan ruang steril yang
memungkinkan praktikan bekerja dengan steril. Cara Kerja LAF yakni
dengan membuka setengah LAF, menyemprot alkohol ke seluruh
permukaan dalam LAF, mengelap dengan searah menggunakan tisu.,
11
menyalakan sinar UV dan Blower, lalu menyemprot alkohol ke seluruh
permukaan dalam LAF setelah selesai.
3. Peralatan diseksi adalah semua jenis peralatan yang digunakan untuk
memegang, memotong, dan mengiris eksplan. Alat ini terbuat dari
logam dan streril serta berfungsi dalam perlakuan eksplan agar eksplan
yang dikultur tidak terkontaminasi
4. Ruang persiapan merupakan tempat persiapan dan pembuatan media,
ruang penanaman merupakan ruang untuk menanam kultur, dan ruang
penyimpanan atau inkubasi merupakan ruang untuk menyimpan dan
menumbuhkan hasil kultur yang kita tanam.
5. Ruang persiapan dilengkapi alat berupa : autoclave, timbangan analitik,
botol kultur, hot plate, stirrer, magnetic stirrer, oven, autoklaf, pH
meter, beaker glass, Erlenmeyer, pipet, dan kertas label. Ruang
penanaman dilengkapi alat berupa : LAFC, lampu Bunsen, petridish,
botol kultur, kertas buram, tisu, plastic wrap, dan peralatan diseksi.
Ruang inkubasi dilengkapi alat berupa : rak kultur, lampu fluorescens,
dan air conditioner (AC)
b) Saran
Co-As dapat menyelingi kegiatan praktikum dengan menyediakan forum
diskusi secara virtual agar praktikan dapat berdiskusi dan menanyakan
terkait video praktikum yang masih dibingungkan, sehingga kegiatan
praktikum dapat berjalan dengan lebih aktif dan atraktif.
DAFTAR PUSTAKA
12
Alsved, M., Civilis, A., Ekolind, P., Tammelin, A., Anderson, A. E., Jakobsson, J.,
… & Londahl, J. 2018. Temperature-Controlled Airflow Ventilation in
Operating Rooms Compared with Laminar Air Flow and Turbulent Mixed
Airflow. J of Hospital Infection 98 (2) : 181-190. DOI :
10.1016/j.jhin.2017.10.013
Asriani, E. N. 2020. Kultur Jaringan Skala Rumah Tangga. Serang (ID) : Pustaka
Bina Putera
Direktorat Perbenihan Tanaman Hutan. 2016. Petunjuk Teknis Perbanyakan

Tanaman Hutan Melalui Kultur Jaringan. Jakarta (ID) : Kementrian
Lingkungan Hidup dan Kehutanan.
Dwiyani R. 2015. Kultur Jaringan Tanaman. Denpasar (ID) : Pelawa Sari.
Hama, S., & Widianti, L. (2019). Organogenesis of mung bean plants (Vigna
radiata L.) on several growth regulator concentrations of cytokine and
gibberellin in vitro. J Agercolere 1(2), 51-56. DOI :
10.33541/edumatsains.v2i2.605
Hapsoro, D., & Yusnita, Y. 2018. Kultur Jaringan : Teori & Praktik. Yogyakarta
(ID) : Penerbit ANDI
Harahap F. 2011. Kultur jaringan tanaman. Medan (ID): Penerbit Unimed.
Kurnianingsih R, Ghazali M, Rosidah S et al. 2020. Pelatihan teknik dasar kultur

jaringan tumbuhan. Jurnal Masyarakat Mandiri 4(5): 888-896. DOI:
10.31764/jmm.v4i5.3049
Prasetyorini. 2019. Kultur Jaringan. Bogor (ID) : Lembaga Penelitian dan

Pengabdian Masyarakat Universitas Pakuan.
Sandra, I. E., 2019. Cara Mudah Memahami dan Menguasai Kultur Jaringan Skala
Rumah Tangga. Bogor (ID) : Penerbit IPB Press
Yarso K., dkk. 2018. Ketrampilan Diagnostik dan Terapeutik (Keterampilan Dasar
Bedah Minor). Surakarta (ID) : UNS Press.
ACARA 2
PEMBUATAN LARUTAN STOK, MEDIA, DAN STERILISASI ALAT
13
A. Pendahuluan
Kultur jaringan secara umum dapat dikatakan sebagai teknik

menumbuhkan bagian-bagian tumbuhan seperti protoplas, sel, jaringan
ataupun organ dalam suatu medium yang sesuai dibawah kondisi aseptis.
Kondisi steril dalam proses kulur jarigan dapat diperoleh dilakukan dengan
sterilisasi menggunakan autoklaf. Sterilisasi menggunakan alat ini menjadi
cara paling sering digunakan karena uap air panas dengan tekanan tinggi
memperbesar kemungkinan terjadinya penetrasi uap air ke dalam sel
mikroorganisme, yang menyebabkan koagulasi protein protoplasma sehingga
mengakibatkan kematian sel mikroorganisme. Sterilisasi alat dan bahan pada
kultur jaringan biasanya dilakukan pada suhu 121°C selama 15 menit dalam
autoklaf (Hafsan, 2014).
Media kultur merupakan salah satu faktor penting agar eksplan tetap
hidup, bahkan dapat tumbuh dan berkembang menjadi kalus, organ atau
tanaman utuh yang dikehendaki. Media tempat eksplan dikulturkan harus
mengandung semua komponen esensial yang diperlukan oleh eksplan agar
dapat bertahan hidup, lalu mengalami perubahan fisologis, biokimia,
pembelahan dan diferensiasi sel yang bermuara pada terjadinya pertumbuhan
dan morfogenesis. Komponen media kultur jaringan secara umum terdiri dari
komponen media dasar dan ZPT. Media dasar mengandung kebutuhan dasar
yang umumnya dibutuhkan oleh semua tanaman yang dikulturkan, sedangkan
ZPT secara khusus mengontrol dan mengarahkan pertumbuhan dan
perkembangan eksplan. Spesies, varietas, umur fisiologi, umur ontogenetik,
dan bagian tanaman untuk eksplan yang berbeda memerlukan jenis dan
konsentrasi ZPT yang berbeda untuk setiap tahapan pengulturan hingga
menjadi struktur organ, embrio, atau tanaman utuh yang
dikehendaki (Yusnita, 2015).
B. Tujuan Praktikum
14
Praktikum kultur jaringan acara 2 dengan agenda pembuatan larutan stok,
media, dan sterilisasi alat ini memiliki tujuan sebagai berikut:
1. Mengetahui prosedur sterilisasi media, alat-alat penanaman (diseksi) dan
alat kaca seperti botol kultur, petri dish, serta erlenmeyer.
2. Mengetahui langkah-langkah pembuatan larutan stok dan media kultur
jaringan.
C. Pembahasan
Larutan stok dibuat terlebih dahulu untuk memudahkan proses

pembuatan media kultur. Menurut Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat
(2017), larutan stok digunakan dalam pembuatan berbagai media kultur
sehingga dapat dikatakan memiliki fungsi sebagai campuran media kultur
dimana mengandung unsur hara baik makro ataupun mikro sesuai dengan jenis
larutan. Selain itu, pembuatan larutan stok juga bertujuan untuk menghindari
penimbangan bahan berulang kali sehingga dapat mempercepat proses
pembuatan media kultur. Larutan stok hara makro dan mikro dapat disimpan
dalam jangka waktu 4-8 minggu sedangkan stok vitamin lebih singkat, hanya
1-2 minggu. Adanya larutan stok yang tersedia, pembuatan media dapat
dilakukan dengan teknik pengenceran dan pencampuran. Prinsip dasar dalam
pembuatan larutan stok yaitu melarutkan satu persatu unsur hara secara
berurutan dimulai dari bobot molekul yang paling kecil ke bobot molekul yang
paling besar.
Molekul yang digunakan dalam pemuatan larutan stok Fe EDTA terdiri
dari FeSO4.7H2O dan Na-EDTA. Menurut Balai Besar Penelitian dan
Pengembangan Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian Bogor
(2018), senyawa EDTA dapat menghambat aktivitas polifenol oksidase pada
daun yang dikulturkan secara in vitro. NaFeEDTA dan EDTA keduanya dapat
menghilangkan penghitaman pada tunas pucuk karena pengikatan tembaga
yang dibutuhkan dalam pembentukan enzim fenolase. EDTA yang dilarutkan
dengan akuades dapat dimanfaatkan untuk berbagai hal salah satunya
pembuatan larutan stok.
15
FeSO4.7H2O dan Na-EDTA dilarutkan menggunakan akuadesagar
membentuk larutan stok Fe EDTA. Menurut Khotimah et al (2018), pelarut
terbaik dalam berbagai kegiatan ilmiah adalah akuades mencakup berbagai
senyawa organik netral yang mempunyai gugus fungsional polar seperti gula,
alkohol, aldehida, dan keton. Kelarutannya disebabkan oleh kecenderungan
molekul akuades untuk membentuk ikatan hidrogen dengan gugus hidroksil
gula dan alkohol atau gugus karbonil aldehida dan keton. Akuades merupakan
air hasil penyulingan yang bebas dari zat-zat pengotor sehingga bersifat murni,
tidak berwarna, bening, tidak berbau, dan tidak memiliki rasa.
Media MS adalah salah satu jenis media yang digunakan dalam kultur
jaringan. Menurut Siregar (2018), media Murashige and Skoog (MS)
merupakan medium dasar yang dapat digunakan pada hampir semua jenis
kultur karena mengandung hara organik yang memenuhi kebutuhan banyak sel
dalam kultur. Berdasarkan penelitian Antasari et al. (2018), media MS
berfungsi sebagai media yang sering digunakan dalam teknik kultur kalus dan
tunas. Media ini mempunyai konsentrasi garam-garam mineral yang tinggi, dan
senyawa N dalam bentuk amonium dan nitrat. Selain itu, menurut Rosmaina et
al. (2021), media Murashige and Skoog (MS) juga berfungsi sebagai media
yang umum digunakan dalam perbanyakan tanaman secara in vitro karena
memiliki komposisi unsur hara yang lengkap.
Media MS mengandung berbagai nutrisi untuk tanaman yang dikultur.
Menurut Latifah et al. (2017), komponen bahan-bahan media MS yaitu unsur
hara makro, unsur hara mikro, vitamin, sukrosa (gula), pemadat (agar), dan
ZPT. Selain itu, berdasarkan penelitian Srilestari dan Suwardi (2020), media
MS mengandung unsur hara makro dan mikro yang dapat merangsang
pembentukan daun. Unsur hara makro N banyak dibutuhkan tanaman untuk
merangsang pembentukan daun, maka media MS memiliki kandungan unsur
hara makro dan mikronya cukup untuk pertumbuhan tanaman. Media MS juga
mengandung ZPT. Menurut Purba (2021), komposisi bahan berupa ZPT pada
kadar rendah tertentu akan mendorong pertumbuhan, sedangkan pada kadar
16
yang tinggi akan menghambat pertumbuhan, meracuni, bahkan mematikan
tanaman.
NAA atau Naphtalene Acetic Acid merupakan salah satu hormon auksin.
Menurut Gamborg dan Phillips (2013), NAA merupakan salah satu jenis
hormon auksin yang bersifat sintesis dan memiliki sensitivitas yang cukup,
dikarenakan hormon ini tidak mudah diuraikan oleh senyawa konjugat.
Penjelasan tersebut diperkuat dengan penelitian dari Rahman et al. (2021),
yang menyatakan bahwa NAA adalah auksin sintetik atau buatan manusia yang
sering ditambahkan dalam media tanam karena mempunyai sifat lebih stabil
daripada jenis auksin lainnya seperti Indol Acetic Acid (IAA). NAA tidak
mudah terurai oleh enzim yang dikeluarkan sel atau pemanasan pada proses
sterilisasi.
NAA memiliki banyak peran terhadap pertumbuhan kalus. Penelitian
terdahulu yang dilakukan oleh Setyorini (2021), menunjukkan adanya peranan
NAA untuk menginduksi pembentukan kalus. NAA berpengaruh terhadap
pemanjangan sel. Pembentukan kalus lebih dipengaruhi oleh hormon auksin
NAA, tetapi jika NAA diberikan bersama dengan hormon sitokinin BAP
(Benzyl Amino Purin), dapat menginduksi kalus secara optimal. Penambahan
NAA pada media MS juga dapat berpengaruh terhadap pertumbuhan tinggi
tanaman. Menurut Swandari dan Setyorini (2017), kalus atau pembengkakan
luka pada eksplan umumnya merupakan respon yang disebabkan adanya
interaksi antara permukaan eksplan dengan kondisi lingkungan tumbuh dan
hormon yang ditambahkan ke dalam media tanam. Shofi et al. (2018)
menerangkan bahwa NAA juga berperan dalam merangsang pertumbuhan akar
lateral/samping, menginduksi pembentangan sel, dan inisiasi perakaran. Oleh
sebab itu, adanya hormon auksin NAA banyak berperan dalam bidang
teknologi kultur jaringan khususnya untuk induksi perakaran tanaman.
Ketika membicarakan tentang laboratorium dan penelitian pasti tidak
akan asing lagi dengan sterilisasi. Henrawati dan Utomo (2017), mengatakan
bahwa sterilisasi merupakan proses untuk membunuh mikroorganisme sampai
ke spora-sporanya. Sterilisasi juga dapat diartikan cara membebaskan bahan
17
dari semua mikroba, karena beberapa spora bakteri relatif lebih tahan terhadap
panas. Menurut Andriani (2016), sterilisasi merupakan tahap penting dalam
kultur jaringan sehingga alat, bahan, bahkan media perlu disterilisasi
menggunakan autoklaf. Bahkan Setiani et al. (2018) menyatakan bahwa
sterilisasi merupakan tahap yang menentukan keberhasilan kultur jaringan. Hal
ini dikarenakan apabila eksplan tidak steril maka mikroorganisme yang
terbawa oleh eksplan tersebut akan tumbuh, sehingga menutupi permukaan
medium dan dapat menyerang eksplan.
Sterilisasi dilakukan dengan tujuan menciptakan kondisi aseptis.
Menurut Azizah et al. (2020), sterilisasi dilakukan untuk menghindari
terjadinya pertumbuhan dan pencemaran dari mikroorganisme lainnya yang
tidak diharapkan. Hal ini juga sama dengan pernyataan Daniel et al. (2021),
yang mengatakan bahwa proses sterilisasi digunakan untuk mematikan
mikroorganisme termasuk sporanya. Sterilisasi dapat dimanfaatkan diberbagi
bidang karena menurut Ristanti (2017), sterilisasi bertujuan untuk menurunkan
angka kuman dan mengurangi terjadinya infeksi.
Metode sterilisasi yang tersedia sangat beragam. Menurut Suprapti et al.
(2020), secara umum metode sterilisasi dibedakan menjadi 3 macam, yaitu
sterilisasi secara fisika, mekanik, dan kimiawi. Pemilihan penggunaan ketiga
macam sterilisasi tersebut disesuaikan dengan sifat atau bahan yang akan
disterilisasi. Sterilisasi secara fisika dapat dilakukan dengan metode: 1)
sterilisasi dengan pemijaran; 2) sterilisasi dengan udara panas atau kering; 3)
sterilisasi dengan air mendidih; 4) sterilisasi dengan uap air panas tidak
bertekanan (tindalisasi); 5) sterilisasi dengan penyinaran; dan 6) sterilisasi
dengan uap air panas bertekanan (autoclave). Sterilisasi secara mekanik
menggunakan alat tertentu untuk mensterilkan alat dan bahan yang tidak tahan
panas tinggi. Contoh sterilisasi secara mekanik adalah filtrasi darah, toksin,
antibiotik, bakteri, atau media yang mengandung gula. Sterilisasi secara
kimiawi dilakukan dengan menggunakan bahan kimia untuk membebaskan
mikroorganisme pada alat dan bahan. Bahan kimia yang digunakan dapat
bersifat bakterisida (membunuh bakteri) dan bakteriostatik (menghambat
18
bakteri). Bahan kimia yang digunakan untuk sterilisasi secara kimiawi sangat
beragam. Berdasarkan penelitian Hesami et al. (2019), membuktikan bahwa
efisiensi teknik sterilisasi ditentukan oleh pemilihan jenis bahan kimia sterilan,
konsentrasi sterilan, dan waktu paparan. Hal ini sangat berpengaruh terhadap
kontaminasi dan viabilitas, serta keberhasilan kultur jaringan.
Kultur jaringan memerlukan sterilisasi yang baik, sehingga proses
sterilisasi merupakan tahap vital. Menurut Harahap et al. (2019), sterilisasi
yang umum digunakan pada teknik kultur jaringan dikelompokkan menjadi
tiga jenis, yaitu sterilisasi ruang, sterilisasi alat dan media, serta sterilisasi
eksplan. Sterilisasi ruang diperlukan untuk menjaga ruang kerja dalam keadaan
steril. Sterilisasi dilakukan baik pada ruang laboratorium maupun peneliti.
Pengerjaan kultur jaringan juga dilakukan di dalam ruangan yang dapat
menciptakan keadaan aseptik terkendali, seperti Laminar Air Flow Cabinet
(LAFC) dan entkas. Sterilisasi alat dan media dilakukan untuk mensterilkan
alat dan media yang dilakukan di ruang persiapan sebelum mulai bekerja.
Sterilisasi eksplan dilakukan untuk mensterilkan eksplan dari mikroorganisme
tetapi eksplannya tidak ikut mati.
1. Kesimpulan
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan, dapat diambil
kesimpulan sebagai berikut:
a. Larutan stok digunakan dalam pembuatan berbagai media kultur dan
pembuatan larutan stok bertujuan untuk menghindari penimbangan
bahan berulang kali sehingga dapat mempercepat proses pembuatan
media kultur. Molekul yang digunakan dalam pemuatan larutan stok
Fe-EDTA terdiri dari FeSO4.7H2O dan Na-EDTA yang dilarutkan
menggunakan akuades. Setiap unsur dilarutkan satu persatu sampai
benar-benar larut kemudian unsur yang lain berikutnya.
b. Media MS merupakan medium dasar yang dapat digunakan pada
hampir semua jenis kultur karena mengandung hara organik yang
19
memenuhi kebutuhan banyak sel dalam kultur. Media MS berfungsi
sebagai media yang sering digunakan dalam teknik kultur kalus dan
tunas.
c. Komponen bahan-bahan media MS yaitu unsur hara makro, unsur
hara mikro, vitamin, sukrosa (gula), pemadat (agar), dan ZPT.
d. Hormon auksin berupa NAA (Naphtalene Acetic Acid) berperan besar
dalam teknologi kultur jaringan diantaranya untuk induksi perakaran
tanaman dan kalus, pertumbuhan tinggi tanaman, pembentukan akar,
merangsang pertumbuhan akar lateral/samping, menginduksi
pembentangan sel, dan inisiasi perakaran.
e. Sterilisasi adalah cara membebaskan bahan, alat atau media dari
semua mikroba, karena beberapa spora bakteri relatif lebih tahan
terhadap panas.
f. Sterilisasi dilakukan untuk menghindari terjadinya pertumbuhan dan
pencemaran dari mikroorganisme lainnya yang tidak diharapkan
termasuk sporanya.
g. Sterilisasi secara umum dibedakan menjadi 3 macam, yaitu sterilisasi
secara fisika, sterilisasi secara kimiawi, dan sterilisasi secara mekanik.
Adapun dalam teknik kultur jaringan biasanya dilakukan 3 jenis
sterilisasi, yaitu sterilisasi ruang, sterilisasi alat dan media, serta
sterilisasi eksplan. Pemilihan teknik sterilisasi disesuaikan dengan
sifat alat dan bahan yang akan disterilkan.
2. Saran
Pelaksanaan praktikum kultur jaringan acara 2 kami rasa sudah
berjalan dengan baik dan kami berterima kasih kepada Co-As yang sudah
memberi kami ilmu dengan membuat video praktikum sedemikian rupa.
Selanjutnya Co-As mungkin dapat menyelingi kegiatan praktikum dengan
menyediakan forum diskusi secara virtual agar praktikan dapat berdiskusi
dan menanyakan terkait video praktikum atau penugasan yang masih
dibingungkan, sehingga kegiatan praktikum dapat berjalan dengan lebih
aktif dan atraktif.
20
DAFTAR PUSTAKA
[Balittro] Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat. 2017. Informasi teknologi
tanaman rempah dan obat. Bogor (ID): Balai Penelitian Tanaman Rempah
dan Obat Bogor.
[BB-Biogen] Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi dan
Sumberdaya Genetik Pertanian. 2018. Masalah pencoklatan pada kultur
jaringan. Bogor (ID): Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Bioteknologi
dan Sumberdaya Genetik Pertanian Bogor.
Antasari SD, Sari DNR, Astarini IA, Defiani MR. 2018. Dasar teknik kultur
jaringan. Yogyakarta (ID): Deepublish.
Daniel AS, Nurlianti SH, Jonny S et al. 2021. Keterampilan bedah sederhana di
fasilitas layanan primer. Jakarta (ID): Universitas Katolik Indonesia Atma
Jaya.
Gamborg O & Phillips GC. 2013. Plant cells, tissue and organ culture: fundamental
methods. California (CA): Springer Science & Business Media.
Hafsan. 2014. Mikrobiologi analitik. Makassar (ID) : Alauddin University Press.
Harahap F, Hasanah A, Insani H et al. 2019. Kultur jaringan nanas. Surabaya (ID):
Media Sahabat Cendekia.
Hendrawati TY, Utomo S. 2017. Optimasi suhu dan waktu sterilisasi pada kualitas
susu segar di kabupaten boyolali. J Teknologi Universitas Mahammadiyah
Jakarta 9(2): 97-102. DOI: 10.24853/jurtek.9.2.97-102
Hesami M, Naderi R, Tohidfar M. 2019. Modeling and optimizing in vitro
sterilization of chrysanthemum via multilayer perceptron-non-dominated
sorting genetic algorithm-II (MLP-NSGAII). Frontiers in Plant Science
10(282):1-13. DOI: 10.3389/fpls.2019.00282
Khotimah H, Anggraeni EW, Setianingsih A. (2018). Karakterisasi hasil
pengolahan air menggunakan alat destilasi. J Chemurgy 1(2): 34-38. URL :
http://e-journals.unmul.ac.id/index.php/TK/article/view/1143.
Latifah R, Suhermiatin T, Ermawati N. 2017. Optimasi pertumbuhan plantlet
cattleya melalui kombinasi kekuatan media Murashige-Skoog dan bahan
organik. J Agriprima 1(1): 54-62. DOI:10.25047/agriprima.v1i1.20
Masayu A, Lara SL, Yopi R. 2020. Uji aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak
etanol daun seledri (Apium graviolens L.) dan madu hutan terhadap beberapa
bakteri penyebab penyakit kulit. J Penelitian Sains. 22(1): 37-44. DOI:
10.26554/jps.v22i1.547
Purba E. 2021. Pengaruh pupuk daun dan ZPT terhadap pertumbuhan dan produksi
tomat. J Insitusi Politeknik Ganesha Medan 4(2): 12-23. DOI:
10.33395/juripol.v4i2.11094
21
Rahman N, Fitriani H, Hartati NS. 2021. Pengaruh beragam zat pengatur tumbuh
terhadap induksi kalus organogenik dari ubi kayu (Manihot esculenta Crantz)
genotipe gajah dan kuning. J Ilmu Dasar 22(2): 119-126.
DOI:10.19184/jid.v22i2.9305
Ririn A. 2016. Pengenalan alat-alat laboratorium mikrobiologi untuk mengatasi
keselamatan kerja dan keberhasilan praktikum. J Mikrobiologi. 1(1). URL:
https://www.academia.edu/35031215/Jurnal_Mikrobiologi.
Rosmaina R, Endika R, Zulfahmi Z. 2021. Studi pengaruh media alternatif untuk
perbanyakan pisang barangan (Musa acuminata L.) secara in-vitro. J
Agroteknologi 12(1):33-40. DOI:10.24014/ja.v12i1.12425
Rustanti AW, Tri C. 2017. Efektifitas sterilisasi menggunakan ultraviolet (uv) pada
ruang perawatan di rumah sakit umum daerah Banyumas tahun 2016. Buletin
Keslingmas 36(3): 189-193. DOI: 10.31983/keslingmas.v36i3.2976
Setiani NA, Nurwinda F, Astrianty D. 2018. Pengaruh desinfektan dan lama
perendaman pada sterilisasi eksplan daun sukun (Artocarpus altilis
(Parkinson ex. F.A Zorn) Fosberg). J of Tropical Biology. 6(3): 78-82. DOI:
10.21776/ub.biotropika.2018.006.03.01
Setyorini T. 2021. Respon pertumbuhan eksplan stek mikro kentang pada media
MS dengan penambahan NAA dan BAP. Agritech 23(1):66-71.
DOI:10.30595/agritech.v23i1.8564
Shofi M, Adzim RA, Fatikasari S, Fitriasari I, Yoga AT. 2018. Pengaruh hormon
naphtalen acetic acid terhadap inisiasi akar pada mahkota tanaman nanas
(Ananas comosus (L.) Merr.). Dalam Sari et al (eds). Prosiding SINTESIS
(Seminar Nasional Sains, Teknologi dan Analisis). Kediri, Jur. Biologi. Fak.
Sains, IIK Bhakti Wiyata.
Siregar DA. 2018. Modifikasi konsentrasi nitrogen pada medium MS (Murashige
Skoog) terhadap pembentukan kantong Nepenthes ampullaria Jack secara in
vitro. J Education and Development 6(1):137-140.
DOI:10.37081/ed.v6i1.809
Srilestari R, Suwardi. 2020. Induksi akar pisang abaka secara in vitro dengan
menggunakan macam media dan thiamin. J Agrivet 26(1):1-7.
DOI:10.31315/agrivet.v26i1.4304
Suprapti L, Heruwati A, Sukesi ADB. 2020. Pedoman pembuatan media dan
reagensia racik. Yogyakarta (ID): Deepublish.
Swandari T, Setyorini T. In vitro callus induction of Gerbera jamesonii with
combination of NAA and BAP. Agroista 1(2):192-196. URL:
http://journal.instiperjogja.ac.id/index.php/AGI/article/view/117.
Yusnita. 2015. Kultur jaringan tanaman sebagai teknik penting bioteknologi untuk
menunjang pembangunan pertanian. Bandar Lampung (ID): Aura Publishing.
22
ACARA 3
INISIASI
A. Pendahuluan
Inisiasi adalah pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan

dikulturkan. Umumnya bagian tanaman yang digunakan adalah tunas, akar,
batang, dan daun. Kegiatan inisiasi ini dilakukan di meja steril laminar air flow
cabinet. Proses inisiasi adalah proses memasukkan eksplan ke dalam botol
yang berisi media tumbuh. Proses inisiasi ini harus melalui beberapa tahapan
penting seperti proses isolasi atau proses pengambilan eksplan dari tanaman
induk, proses sterilisasi eksplan, dan terakhir proses inokulasi atau menanam
eksplan ke dalam botol kultur.
Sterilisasi adalah segala kegiatan dalam kultur jaringan harus dilakukan
di tempat yang steril (laminar air flow) dan menggunakan alat-alat yang juga
steril. Teknisi yang melakukan kultur jaringan juga harus steril. Sterilisasi
peralatan dengan menggunakan etanol yang disemprotkan secara merata pada
peralatan. Sterilisasi pada eksplan biasanya dengan merendam bahan tanaman
dalam larutan kimia sistemik, di antaranya alkohol, natrium hipoklorit
(NaOCL), kalsium hipoklorit atau kaporit (CaOCL), sublimat (HgCl2), dan
hidrogen peroksida (H2O2). Namun, penggunaan alkohol 70% dan
penambahan deterjen atau tween 80 dapat lebih mengefektifkan sterilisasi.
B. Tujuan Praktikum
Praktikum Teknologi Kultur Jaringan acara Inisiasi ini memiliki tujuan

sebagai berikut:
1. Mengetahui cara sterilisasi dari bahan inisiasi.
2. Mengetahui cara penanaman/inisiasi dari berbagai eksplan.
C. Pembahasan
Inisasi adalah pengambilan eksplan dari salah satu bagian tumbuhan

yang akan dikembangbiakkan. Menurut Sudrajad et al. (2016) Inisiasi adalah
pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan dikulturkan. Hal ini juga
23
dinyatakan oleh Ziraluo (2021) bahwa inisiasi merupakan proses
pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan dikulturkan. Bagian
tanaman yang sering digunakan untuk kegiatan kultur jaringan adalah tunas.
Ada dua tipe jaringan yang digunakan sebagai eksplan kultur jaringan.
Pertama ada jaringan muda yang belum mengalami diferensiasi dan
masih aktif membelah (meristematik) sehingga memiliki kemampuan
regenerasi yang tinggi. Contohnya tunas aksiler, bagian tepi daun, ujung akar,
maupun ucrose batang. Tipe jaringan kedua adalah jaringan parenkim, yaitu
jaringan penyusun tanaman muda yang sudah mengalami diferensiasi dan
menjalankan fungsinya. Contoh adalah jaringan daun yang sudah
berfotosintesis dan jaringan batang atau akar yang berfungsi sebagai tempat
cadangan makanan. Satrinani et al. (2017) juga menyatakan bahwa inisiasi
adalah pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan dikultur secara in
vitro.
Inisiasi memiliki tujuan untuk mengambil eksplan sari tanaman induk
yang akan diperbanyak secara kultur jaringan. Menurut Sudrajat et al. (2016),
inisiasi adalah pengambilan eksplan dari bagian tanaman dengan tujuan untuk
memisahkan bagian dari tumbuhan tersebut untuk dikulturkan. Perkembangan
dari penerapan teknik jaringan adalah kemungkinan penggunaan kultur sel
tanaman untuk memproduksi metabolit sekunder tanaman. Twaij (2020) juga
menambahkan bahwa proses inisiasi pada kultur jaringan merupakan tahap
yang harus dilakukan sesuai dengan prosedur karena sangat mudah terpengaruh
berbagai faktor. Menurut Yuniardi (2019), inisiasi membutuhkan tingkat
cahaya rendah dan pada tahap multiplikasi kebutuhan cahaya akan lebih
meningkat, disamping tanaman akan mengalami kematian bila tidak
mendapatkan cahaya yang sesuai dengan kebutuhannya. Hal ini akan bertolak
belakang bila saja perbanyakan tanaman dilaksanakan secara organogenesis
tidak langsung atau melewati tahap pengkalusan dimana tanaman lebih
membutuhkan fase gelap dibandingkan fase terang. Intensitas cahaya yang
optimum untuk tanaman pada tahap kultur inisiasi adalah 1-1.000 lux, tahap
multiplikasi 1.000-10.000 lux. Kultur yang kurang cahaya biasanya
24
menunjukan gejala etiolasi dan vitrifikasi dengan ciri panjangnya ruas tanaman
yang terbentuk, vitrifikasi ditandai dengan sukulensi, batang bening, dan
lemas, karena banyak mengandung air.
Terdapat 2 macam eksplan dari tanaman yang menjadi bahan dalam
tahap inisiasi kultur jaringan, yaitu tanaman Biduri dan tanaman Aglaonema.
Eksplan pertama yaitu tanaman Biduri (Calotropis gigantea). Tanaman ini
merupakan salah satu jenis perdu yang dapat tumbuh sekitar 1,5-3 meter.
Griana (2019) menyatakan bahwa senyawa alkaloid dalam getah yang
berwarna putih pada batang banyak dimanfaatkan dalam bidang kesehatan,
diantaranya untuk mengobati penyakit yang berhubungan dengan sistem saraf
pusat, penyakit kulit, sistem pencernaan, sistem pernapasan, dan sistem
reproduksi, sehingga cocok dikembangbiakkan dengan metode kultur jaringan.
Tanaman selanjutnya yang diujicobakan sebagai eksplan dalam proses
inisiasi kultur jaringan ini adalah Aglaonema sp. Berbeda dengan Biduri tadi,
Aglaonema ini memiliki potensi dalam bidang tanaman hias. Menurut Akbar
(2021), tanaman Aglaonema sp. memiliki ciri khas pada daunnya yang besar,
bentuk, dan corak warna yang bervariasi, sehingga tanaman ini menjadi
primadona bagi para pedagang tanaman hias dan setiap tahunnya mengalami
permintaan pasar dengan jumlah yang tinggi sehingga sangat cocok
dibudidayakan dan dilakukan perbanyakan dengan teknik kultur jaringan.
Inisiasi eksplan berupa tanaman Biduri dan Aglaonema tadi merupakan
salah satu jenis kultur organ, yaitu organ akar pada tanaman Biduri dan organ
daun pada tanaman Aglaonema. Menurut Anitasari (2018), kultur organ
merupakan kultur berupa jaringan meristem, helai daun, pucuk kormus, tuber
rhizogenum dan caulogenum, ruas batang muda, dan akar. Perbanyakan
dengan kultur organ dapat dilakukan dalam waktu singkat, menghasilkan
tanaman baru dengan jumlah yang lebih besar, dan memiliki sifat genetik yang
sama dengan induknya, dan bebas virus.
Eksplan yang baik untuk dikulturkan memiliki ciri-ciri yaitu jaringan
aktif bertumbuh, diambil dari bagian yang muda, diambil dari bagian-bagian
tumbuhan yang senantiasa dijaga kelestariannya. Menurut Asriani (2019),
25
tanaman induk atau eksplan yang akan diperbanyak harus memenuhi syarat-
syarat berikut. Pertama, tanaman yang dipilih harus jelas jenis, spesies, dan
varietasnya. Kedua, jenis tanaman yang dipilih menguntungkan jika
diperbanyak melalui kultur jaringan. Misalnya, tanaman yang sulit
dikembangbiakkan, memiliki nilai ekonomi tinggi, atau tanaman yang
populasinya cenderung berkurang, dan lain-lain. Ketiga, tanaman induk harus
sehat, terbebas dari hama dan penyakit. Tanaman sebaiknya dikarantina dahulu
sebelum diambil sebagai eksplan. Keempat, bagian yang dapat diperbanyak
dari tanaman induk adalah protoplasma, sel, sekelompok sel, jaringan atau
organ, dimana pemilihannya ditentukan oleh jenis tanamannya.
Tanaman memiliki bagian-bagian yang hampir secara keseluruhan
dapat dijadikan eksplan. Menurut Mastuti (2017), hampir semua bagian
jaringan tanaman dapat digunakan sebagai eksplan. Bagian tumbuhan yang
digunakan sebagai eksplan umumnya adalah ujung tunas, kuncup aksilar,
lamina daun, nodus (buku), hipokotil, kotiledon, dan akar. Ketika memilih
eksplan harus mempertimbangan beberapa hal, yaitu kualitas/kesehatan
tanaman, musim saat pengambilan eksplan, status fisiologi dan genotip, asal
lokasi tanaman, jenis organ/jaringan, dan tujuan pemanfaatan kultur. Tanaman
yang sehat mengurangi resiko kegagalan pertumbuhan maupun terjadinya
kontaminasi. Umur tanaman menentukan kondisi fisiologis tanaman yang
sangat berpengaruh terhadap respon pertumbuhan in vitro. Jaringan
meristematik dan jaringan yang masih mampu mengalami dediferensiasi
memiliki respon pertumbuhan in vitro yang lebih baik dibandingkan jaringan
yang sudah dewasa. Variasi pilihan jenis eksplan juga tergantung tipe respon
pertumbuhan yang diinginkan. Genotip, kultivar, atau spesies dari berbagai
genus tumbuhan memiliki respon yang bervariasi terhadap kondisi kultur.
Beberapa genotipe bersifat rekalsitran (tidak responsif terhadap kondisi kultur),
sedangkan yang lain sangat mudah membentuk kalus atau mengalami
organogenesis tunas.
Teknik sterilisasi eksplan pada tiap masing-masing tanaman berbeda.
Hal tersebut sesuai dengan pendapat Heriansyah (2020), metode sterilisasi
26
eksplan pada setiap jenis tanaman berbeda-beda. Setiap jenis tanaman dapat
memiliki bahan sterilisasi dan lama waktu sterilisasi yang berbeda-beda.
Ukuran eksplan juga dapat mempengaruhi cara sterilisasinya. Jika eksplan
sudah terlanjur terkontaminasi, sangat sulit untuk diselamatkan sehingga perlu
dicegah dengan sterilisasi. Menurut Harahap (2019), sterilisasi eksplan
dilakukan untuk mensterilkan eksplan dari mikroorganisme tetapi eksplannya
tidak ikut mati. Eksplan disterilkan dengan cara dicuci menggunakan deterjen
lalu dibilas menggunakan air mengalir, kemudian dibilas menggunakan
aquades. Selanjutnya, eksplan disterilkan menggunakan bahan kimia yang
telah disesuaikan. Setelah itu, eksplan dicuci dengan aquades steril minimal 3
kali untuk menghilangkan pengaruh negatif desinfektan terhadap pertumbuhan
dan perkembangan eksplan.
Tahapan inisiasi eksplan Biduri (Calotropis gigantea) dimulai dengan
sterilisasi yaitu dengan cara membersihkan eksplan dengan air mengalir,
kemudian dicuci dengan larutan deterjen. Lalu eksplan dibilas dengean
aquades dan direndam di dalam larutan fungisida dan bakterisida selama 1 jam
45 menit. Kemudian eksplan dibilas dengan aquades kembali. LAF sebelum
digunakan harus dibersihkan dengan cara menyemprotnya dengan alcohol.
Setelah itu, peralatan diseksi dimasukkan ke dalam LAF. Kemudian nyalakan
UV dan blower pada LAF dan tunggu hingga 30 menit, setelah itu matikan UV
dan nyalakan lampu TL. Buka kertas pembungkus pada petridish, pinset dan
handle scalpel, yang sebelumnya telah disterilisasi. Pasang mata pisau pada
handle scalpel untung memotong eksplan. Menyalakan Bunsen dengan korek
api. Sterilisasi kembali eksplan dengan akuades steril. Kemudian rendam dan
gojog eksplan pada larutan Clorox 100% selama 1 menit. Setelah itu, rendam
dan gojog eksplan pada alkohol 70% selama 1 menit. Yang terakhir adalah
membilas eksplan dengan aquades steril. Letakkan kertas buram steril pada
petridish yang digunakan untuk alas eksplan. Lalu letakkan eksplan pada
petridish dan potong eksplan dengan pisau scalpel dimana terdapat 1 nodus
pada tiap potongannya. Letakkan tisu steril pada petridish untuk alas eksplan
dan mengeringkan potongannya. Selanjutnya tanam potongan eksplan pada
27
media, sebelum ditanam eksplan diapi-apikan di dekat bunsen dan botol
didekatkan dengan Bunsen untuk mencegah kontaminasi. Kemudian tanam
eksplan Biduri pada media di botol kultur. Tutup botol kultur dengan rapat dan
lapisi dengan plastic wrap. Eksplan yang telah ditanam diletakkan pada rak
kultur yang terdapat pada ruang penyimpanan.
Tahap inisiasi dimulai dengan sterilisasi eksplan tanaman Aglaonema
dengan membersihkan eksplan daun dengan air mengalir. Kemudian mencuci
eksplan dengan deterjen. Eksplan kemudian dibilas dengan aquades dan
direndam pada larutan fungisida dan bakterisida selama 60 menit. Setelah itu
membilas eksplan dengan aquades kembali. Selanjutnya adalah inisiasi
tanaman Aglaonema dengan cara meletakkan kertas buram steril sebagai alas
eksplan saat dipotong pada petridish. Sterilisasi kembali eksplan daun dengan
membilas dengan aquades terlebih dahulu, lalu Eksplan direndam dan digojog
pada larutan Clorox 20% selama 7 menit. Selanjutnya adalah membilas eksplan
dengan aquades steril. Letakkan eksplan daun pada petridish dan potong
dengan menggunakan pisau scalpel. Untuk pemotongan eksplan yaitu dengan
ukuran 1 cm x 1 cm. letakkan tisu steril pada petridish sebagai alas untuk
mengeringkan potongan eksplan. Letakkan eksplan pada media di botol kultur
yang sebelumnya sudah disterilkan dengan diapi-apikan. Tutup botol kultur
dengan rapat dan lapisi tutup botol dengan plastic wrap. Matikan tombol
blower dan TL pada LAF setelah selesai penanaman. Letakkan hasil inisiasi
eksplan pada rak kultur.
1. Kesimpulan
a. Inisiasi merupakan proses pengambilan eksplan dari bagian tanaman
yang akan dikulturkan (In vitro).
b. Inisiasi bertujuan untuk memisahkan bagian dari tumbuhan tersebut
untuk dikulturkan.
28
c. Pada praktikum kali ini terdapat 2 organ tumbuhan yang dijadikan
eksplan, yaitu Biduri (Caleotropis gigantea) dan daun Aglaonema.
Caleotropis gigantea berpotensi dalam bidang herbal dan kesehatan,
sedangkan Aglaonema berpotensi dalam bidang tanaman hias.
d. Eksplan yang baik adalah eksplan yang jelas jenis, spesies, dan
varietasnya: menguntungkan jika diperbanyak melalui kultur jaringan;
dalam keadaan sehat, terbebas dari hama dan penyakit; dan bagian yang
dapat diperbanyak.
e. Secara umum, sterilisasi eksplan dilakukan dengan mencuci eksplan
dengan deterjen, lalu dibilas menggunakan air mengalir, kemudian
dibilas menggunakan aquades. Selanjutnya, eksplan disterilkan
menggunakan bahan kimia yang telah disesuaikan. Setelah itu, eksplan
dicuci kembali dengan aquades.
b. Saran
Pelaksanaan praktikum Kultur Jaringan acara 3 kami rasa sudah
berjalan dengan baik dan kami berterima kasih kepada Co-Ass yang sudah
memberi kami ilmu dengan membuat video praktikum sedemikian rupa.
Selanjutnya Co-Ass mungkin dapat menyelingi kegiatan praktikum dengan
menyediakan forum diskusi secara virtual agar praktikan dapat berdiskusi
dan menanyakan terkait video praktikum atau penugasan yang masih
dibingungkan, sehingga kegiatan praktikum dapat berjalan dengan lebih
aktif dan atraktif.
DAFTAR PUSTAKA
Akbar A. 2021. Penggunaan dan nilai ekonomi dari tanaman Aglaonema sp. di
kalangan pedagang tanaman hias sekitar cengkareng dan pulo gadung. J Bios
Logos 11:122-128. DOI:10.35799/jbl.v11i2.34411
29
Anitasari SD, Sari DNR, Astarini IA et al. 2018. Dasar teknik kultur jaringan
tanaman. Yogyakarta (ID): Penerbit Deepublish.
Asriani EN. 2019. Kultur jaringan skala rumah tangga: cara mudah memperbanyak
tanaman dalam jumlah besar. Serang (ID): Pustaka Bina Putera.
Gloria IS, Asfie M, Sri H et al. 2017. Kultur jaringan rumput laut (Gracilaria
verrucosa) di media berbeda terhadap pertumbuhan thallus. J Harpodon
Borneo 10(1): 37-45. DOI: 10.35334/harpodon.v10i1.187.
Griana Tias P. 2019. Potential effect of pegagan (Centella asiatica (L.) urban) and
widuri (Calotropis gigantea (L.)) as immunomodulator. J Food Pharm Sci
7:55-72. DOI:10.22146/jfps.723
Penerbit Media Sahabat Cendekia.
Heriansyah P. 2020. Rahasia mudah menguasai kultur jaringan tanaman: teori dan
praktiknya. Bogor (ID): Penerbit Lindan Bestari.
Heru S, Didik S, Nur Rahmawati. 2016. Inisiasi kalus sanrego (Lunasia amara
blanco.) dalam kultur jaringan. Proceeding Biology Education Conference
UNS 13(1): 619-623.
Mastuti R. 2017. Dasar-dasar kultur jaringan tumbuhan. Malang (ID): UB Press.
Purwanta S, Sumantoro P, Setyaningrum HD, Saparinto C. 2015. Budidaya &
bisnis kayu jati. Jakarta (ID): Penerbit Penebar Swadaya.
Sandra E. 2013. Cara mudah memahami dan menguasai kultur jaringan skala rumah
tangga. Bogor (ID): Penerbit IPB Press.
Sudrajad H, Suharto D, Wijaya NR. 2016. Inisiasi kalus sanrego (Lunasia amara
Blanco.) dalam kultur jaringan. Proceeding Biology Education Conference:
Biology, Science, Environmental, and Learning. 13(1): 619-623. URL:
https://jurnal.uns.ac.id/prosbi/article/view/5854.
Twaij BM, Jazar ZH, Hasan MN. 2020. Trends in the use of tissue culture,
applications and future aspects. International Journal of Plant Biology
11(1):1-14. DOI: 10.4081/pb.2020.8385.
Yan Piter BZ. 2021. Metode perbanyakan tanaman ubi jalar ungu (Ipomea batatas
poiret) dengan teknik kultur jaringan atau stek planlet. J Inovasi Penelitian
2(3): 1037-1046. DOI: 10.47492/jip.v2i3.819.
Yuniardi, F. 2019. Aplikasi dimmer switch pada rak kultur sebagai pengatur
kebutuhan intensitas cahaya optimum bagi tanaman in vitro. Indonesian
Journal of Laboratory 2(1):8-13.
URL:https://www.pagepress.org/journals/index.php/pb/article/view/8385.
30
ACARA 4
SUBKULTUR
A. Pendahuluan
Tahap subkultur dalam teknik kultur jaringan termasuk dalam tahap ketiga
bagi tanaman atau planlet setelah melalui tahap pembuatan larutan stok, media,
dan sterilisasi alat, lalu tahap inisiasi, dan dilanjutkan dengan tahap sub-kultur.
Berdasarkan Mastuti (2017), subkultur pada planlet penting untuk dilakukan
dengan tujuan untuk memindahkan bagian jaringan yang telah diseleksi dari
suatu mesium kultur menuju medium kultur lain yang lebih segar, agar terjaga
kecukupan nutrisi dan menghindari akumulasi produk samping metabolisme
yang memungkinkan tergsnggunya pertumbuhan planlet. Subkultur diawali
dengan membagi jaringan menjadi beberapa bagian untuk diseleksi jaringan
manakah yang bersifat viabel dan aktif membelah, dengan tujuan untuk
memperluas permukaan yang mereapon kondisi medium buatan yang
disediakan.
Pada praktikum kali ini, terdapat 2 jenis planlet yang digunakan yaitu
planlet pisang (Musa acuminata) dan planlet vanili (Vanilla planifolia).
Sebelum dilakukan proses subkultur, seperti biasa dilakukan proses sterilisasi
terlebih dahulu baik dari praktikan maupun planlet untuk menjaga agar
praktikan dan juga planlet tidak terkontaminasi. Adapun syarat
diperbolehkannya tahap subkultur yaitu dilakukan pada umur kultur yang tepat,
yaitu saat kalus atau suspensi sel berada pada akhir fase log atau awal fase
stasioner.
B. Tujuan Praktikum
Praktikum Teknologi Kultur Jaringan acara Subkultur ini bertujuan agar
mahasiswa mampu mempelajari teknik subkultur planlet dari beberapa jenis
tanaman secara in-vitro.
31
C. Pembahasan
Menurut Rodinah et al. (2018), dalam kultur jaringan perlu dilakukan
tindakan untuk mendapatkan tanaman dalam jumlah yang banyak dengan cara
memindahkan suatu kultur ke media baru untuk mendapatkan pertumbuhan
yang lebih baik serta kebutuhan nutrisinya terpenuhi, tindakan ini disebut
subkultur. Hal ini sejalan dengan pendapat Sandra (2013), subkultur adalah
pemindahan kultur dari media lama ke media yang baru untuk memperoleh
pertumbuhan baru yang diinginkan. Sandra (2013) menyatakan bahwa alasan
dilakukannya subkultur antara lain karena pertumbuhan kultur yang cepat dan
sudah memenuhi botol, sehingga kultur perlu diperbanyak untuk tujuan
perbanyakan; terjadinya browning terutama pada awal proses inisiasi; media
kultur mengering atau agar-agar menciut; atau media sudah habis; atau nutrisi
mulai menipis; dan kultur sudah menunjukkan gejala defisiensi. Menurut
Wahyuni et al. (2020), subkultur perlu dilakukan sebelum sebelum eksplan
memasuki fase stasioner untuk mempertahankan kualitas eksplan. Kehabisan
nutrisi dalam media kultur, pengeringan media kultur, akumulasi racun oleh
produk metabolisme sekunder, dan penipisan oksigen merupakan faktor
pembatas pertumbuhan selama fase stasioner eksplan.
Menurut Sandra (2013), tujuan dilakukannya subkultur antara lain adalah
untuk penjarangan, penyelamatan, peremajaan, multiplikasi atau perbanyakan,
serta untuk pemanjangan tunas, induksi, dan perkembangan akar. Penjarangan
dilakukan jika eksplan atau planlet dalam botol telah penuh. Eksplan
dikeluarkan dari dalam botol, lalu dilap hingga bersih, kemudian diletakkan
pada cawan petri dan dipisahkan dari akar yang mati, potong ujung daunnya
bila eksplan terlalu tinggi. lalu tanaman kembali pada media yang baru.
Subkultur dilakukan untuk penyelamatan apabila terdapat cendawan dan
bakteri pada media maupun eksplan. Eksplan yang terkontaminasi dipotong
bagian yang tidak terkontaminasi, kemudian disterilkan dengan kloroks
sebelum ditanam kembali pada media yang baru. Subkultur dilakukan untuk
tujuan peremajaan apabila eksplan di dalam botol kultur terdapat daun yang
menguning (browning) atau dapat juga dilakukan bila media mengering atau
32
kandungan nutrisinya habis. Subkultur dilakukan dengan tujuan multiplikasi
atau perbanyakan untuk menggandakan propagul atau bahan tanaman yang
diperbanyak, seperti tunas, embrio, atau kalus. Inti dari multiplikasi adalah
memindahkan tunas dari dalam wadah kultur secara aseptik yang tumbuh dari
hasil induksi dan ditanam kembali dalam botol kultur lain yang berisi media
dan hormon yang mampu merangsang pertunasan. Subkultur juga dilakukan
dengan tujuan pemanjangan tunas, induksi, dan perkembangan akar. Tunas
yang dihasilkan dalam tahap multiplikasi dipindahkan ke media lain untuk
pertumbuhan atau pemanjangan tunas. Bila tunas sudah cukup panjang tunas
tersebut diakarkan secara in vitro atau ex vitro. Pengakaran dilakukan bila
eksplan telah mempunyai organ lengkap seperti daun dan batang, atau bila
tujuannya adalah untuk diaklimatisasi.
Menurut Ababil et al. (2021) pisang merupakan salah satu produk
unggulan tanaman hortikultura di Indonesia yang banyak diminati dan
dikonsumsi oleh semua kalangan masyarakat. Pisang banyak dikonsumsi
karena rasanya yang enak dan kandungan gizinya yang tinggi berupa cadangan
energi yang cepat tersedia bagi tubuh dan merupakan sumber vitamin C dan
vitamin B6 yang baik. Pisang termasuk tanaman yang harus segera atau relatif
cepat di subkultur. Produktivitas tinggi dapat diperoleh dengan teknik kultur
jaringan yang mampu menghasilkan planlet unggul dan dalam jumlah banyak.
Kultur jaringan sangat potensial karena dapat memperbanyak tanaman dengan
jumlah yang besar dalam waktu yang singkat. Kelebihan bibit hasil kultur
jaringan yaitu planlet pisang. Berdasarkan Widiatmaka et al. (2019) planlet
pisang adalah planlet yang umumnya diperbanyak menggunakan jalur
campuran produksi tunas samping dan tunas adventif. Satu botol kultur dapat
diperbanyak menjadi sekitar 10 tanaman. Tanaman yang berakar kemudian
diaklimatisasi dan dibesarkan di pembibitan. Bibit biasanya dapat ditanam di
lapangan pada umur 2-3 bulan. Bibit yang dihasilkan akan seragam sehingga
akan serentak dapat menghasilkan buah pada periode waktu yang sama.
Dengan demikian dapat memfasilitasi produksi yang memenuhi syarat kualitas,
kontinuitas dan kuantitas yang diharapkan. Lalu, teknik subkultur planlet vanili
33
secara in vitro secara garis besar yaitu pertama menyiapkan dan memasukkan
alat dan bahan ke LAFC, selanjutnya mengeluarkan planlet pisang di atas
petridish yang sudah dilapisi kertas buram, lalu membersihkan eksplan dari
media yang menempel dan daun serta akar yang sudah menguning, kemudian
memotong eksplan menggunakan pisau scalpel, lalu menanam eksplan ke
dalam media yang sudah disiapkan. Selanjutnya, mengapi–apikan mulut botol
kultur, kemudian menutup rapat botol kultur dan lapisi dengan plastik wrap.
Botol media dapat diisi 2 atau lebih tergantung dari besar kecilnya eksplan.
Selama penanaman, mulut botol selalu dekat dengan api untuk menghindari
kontaminasi. Terakhir, menyimpan hasil kultur pada rak di ruang
penyimpanan.
Berdasarkan Ayele et al. (2017) vanili termasuk dalam famili Orchidaceae,
dari dimana sekitar 110 spesies dilaporkan sejauh ini. Vanili adalah satu-
satunya tanaman rempah-rempah dari keluarga Orchidaceae yang bernilai
ekonomis karena aroma harum yang awet, yang membuatnya menjadi salah
satu dari rempah-rempah termahal dalam perdagangan internasional, kedua
setelah kunyit. Vanili umumnya diperbanyak melalui cara vegetatif yang biasa
menggunakan stek dikumpulkan dari yang sehat dan tumbuh subur tanaman
induk. Berdasarkan Mastuti (2017) planlet adalah tanaman lengkap yang
dihasilkan dengan teknik kultur in vitro melalui proses regenerasi. Maka,
planlet vanili berupa tanaman vanili yang lengkap yang berasal dari teknik
kultur in vitro melalui proses regenerasi yang kaya akan klorofil a dan b. Lalu,
teknik subkultur planlet vanili secara in vitro secara garis besar yaitu pertama
menyiapkan dan memasukkan alat dan bahan ke LAFC, lalu mengeluarkan
planlet vanili di atas petridish yang sudah dilapisi kertas buram, selanjutnya
membersihkan eksplan dari media yang menempel dan daun serta akar yang
sudah menguning, kemudian memotong eksplan per nodus menggunakan pisau
scalpel, lalu menanam eksplan ke dalam media yang sudah disiapkan,
selanjutnya mengapi–apikan mulut botol kultur, kemudian tutup rapat botol
kultur dan lapisi dengan plastik wrap. Botol media bisa berisi 3 atau lebih
tergantung dari besar kecilnya eksplan. Selama penanaman, mulut botol selalu
34
dekat dengan api untuk menghindari kontaminasi. Terakhir, menyimpan hasil
kultur pada rak di ruang penyimpanan.
Menurut Azizah et al. (2017), pertumbuhan planlet dari fase koleoptil
menuju planlet lengkap membutuhkan waktu rata-rata tiga minggu. Subkultur
dilakukan dua kali dengan interval waktu rata-rata dua minggu untuk kemudian
planlet siap diaklimatisasi. Afifah (2021) juga menamahkan bahwa pada masa
pertumbuhan planlet diamati secara berkala. Parameter yang digunakan untuk
melihat pertumbuhan pada planlet antara lain jumlah tunas, jumlah daun,
jumlah akar, dan tinggi planlet. Budi (2018) menyatakan, planlet merupakan
tanaman yang tumbuh pada kondisi in vitro. Planlet yang diap untuk di
subkultur apabila memiliki tunas tinggi yang muncul dari ketiak dengan 4-5
daun tiap nodus. Subkultur sendiri adalah proses pemotongan dan pemindahan
planlet dari media lama ke media baru. Kriteria planlet yang siap di kultur
berbeda-beda tergantung jenis tanaman. Misalnya pada planlet krisan,
subkultur menggunakan 1 daun tiap nodusnya subkultur hasil dari
pertumbuhan tunas pertama dari eksplan merupakan subkultur pertama.
Setelah 1-1,5 bulan kemudian tergantung dari genetik varietas krisan, planlet
subkultur pertama akan tumbuh sekitar 5 nodus, pada saat ini sudah siap untuk
disubkultur menjadi subkultur kedua begitu selanjutnya sampai maksimal
subkultur ke 5 untuk terakhir aklimatisasi.
Menurut Yasmin et al. (2018) dalam melakukan sub kultur harus
memperhatikan kebersihan tempat, alat, bahan, dan pelaksana penanaman.
Hal ini bertujuan untuk meminimalisir kemungkinan terjadinya kontaminasi
planlet yang ditanam. Fase subkultur dapat dilakukan 3 kali subkultur dengan
tujuan yang berbeda-beda. Subkultur pertama yakni subkultur planlet dari fase
sebelumnya yang telah terbentuk daun dan akarnya walaupun belum
sempurna. Tujuannya untuk memberikan ruang tumbuh yang lebih luas,
sehingga jumlah planletnya lebih sedikit dibandingkan pada penyemaian.
Kemudian subkultur 2 yakni sub kultur planlet dari sub sebelumnya yang
ditekankan pada pengembangan daun dan akar tanaman. Terakhir subkultur 3
35
yakni subkultur planlet dari fase sebelumnya yang lebih ditekankan pada
pengembangan akar tanaman.
Persentase kontaminasi biasanya banyak terjadi pada subkultur 1. Hal ini
dapat terjadi karena bebera faktor, yakni planlet yang luka saat pindah media.
Ketika sel rusak, isi dari sitoplasma dan vakuola menjadi tercampur, kemudian
senyawa fenol teroksidasi menghambat aktivitas enzim. Senyawa fenol yang
berlebihan akan bersifat racun yang merusak jaringan planlet dan akhirnya
menyebabkan kematian planlet. Sehingga tingginya kontaminasi pada sub
kultur dapat diminimalisir dengan ketelitian para praktikan. Sedangkan
menurut Rodinah dan Nisa (2018), kontaminasi dapat disebabkan oleh jamur
ataupun bakteri. Namun tidak ada kaitanya pengaruh zat pengatur tumbuh
dengan persentase kontaminasi yang terjadi pada eksplan. Kontaminasi terjadi
karena disebabkan oleh pengaruh keadaan eksplan dan lingkungan (suhu dan
kelembaban), serta oleh jamur dan bakteri. Fenomena kontaminasi dapat
menunjukan semakin diperkayanya suatu media, maka tingkat kontaminasinya
juga semakin tinggi. Begitupun sebaliknya, semakin sederhana komponen
media, maka semakin rendah kemungkinan terjadinya kontaminasi. Khasanah
et al. (2016) menyatakan untuk mengurangi kontaminasi pada tahap subkultur
plantlet disterilisasi dengan merendam dalam larutan fungisida selama 45
menit lalu dibilas dengan aquades steril dan di rendam dalam alkohol 96%
selama 1-2 menit. Plantlet dibilas dengan aquades steril sebanyak 3 kali.
Subkultur tanaman secara in-vitro bertujuan untuk meningkatkan kuantitas
atau perbanyakan tanaman secara in-vitro. Menurut Hartati et al. (2016),
keberhasilan sub-kultur tanaman tentunya juga dipengaruhi oleh beberapa
faktor, diantaranya yaitu faktor lingkungan dan juga faktor media. Faktor
lingkungan yang berpengaruh terhadap eksplan dapat berupa ketersediaan
oksigen, sterilisasi, temperatur, cahaya dan pH atau derajat keasaman. Menurut
Baday (2019), temperatur atau suhu merupakan faktor penentu perkembangan
kultur tanaman. Secara umum, suhu optimal yang dibutuhkan eksplan saat
tahap sub-kultur yaitu 25 °C. Kemudian cahaya, dimana faktor ini hanya
dibutuhkan saat tahap akhir kultur tanaman. Adapun untuk faktor media, yaitu
36
media kultur terdiri atas media padat dan cair. Media padat menggunakan agar-
agar atau gelrite. Penambahan Zat Pengatur Tumbuh (ZPT) berupa auksin dan
sitokinin juga berpengaruh dalam perbanyakan planlet secara kultur jaringan.

a. Kesimpulan
1. Subkultur adalah pemindahan kultur dari media lama ke media yang
baru dengan tujuan untuk penjarangan, penyelamatan, peremajaan,
multiplikasi atau perbanyakan, serta untuk pemanjangan tunas, induksi,
dan perkembangan akar.
2. Planlet pisang merupakan planlet yang umumnya diperbanyak
menggunakan jalur campuran produksi tunas samping dan tunas
adventif. Sedangkan, planlet vanili berupa tanaman vanili yang lengkap
yang berasal dari teknik kultur in vitro melalui proses regenerasi yang
kaya akan klorofil a dan b.
3. Kriteria planlet yang siap di kultur berbeda-beda tergantung jenis
tanaman. Planlet yang diap untuk di subkultur biasanya apabila sudah
memiliki tunas tinggi yang muncul dari ketiak dengan 4-5 daun tiap
nodus.
4. Kontaminasi dapat disebabkan oleh jamur, bakteri, maupun keadaan
eksplan dan lingkungan (suhu dan kelembaban), serta oleh jamur dan
bakteri.
5. Terdapat 2 faktor yang mempengaruhi pertumbuhan sub-kultur planlet
yaitu faktor lingkungan, dan faktor media. Faktor lingkungan meliputi:
ketersediaan oksigen, sterilisasi, temperatur, cahaya dan pH atau derajat
keasaman. Adapun faktor media meliputi : jenis media kultur dan zat
pengatur tumbuh (ZPT).
b. Saran
37
Pelaksanaan praktikum Kultur Jaringan acara 4 sudah berjalan
dengan baik. Video praktikum dan sesi diskusi yang telah disediakan Co-
Ass membantu proses pemahaman materi. Selanjutnya kegiatan praktikum
yang demikian perlu dipertahankan.
38
DAFTAR PUSTAKA
Ababil MA, Budiman, Azmi TKK. 2021. Aklimatisasi planlet pisang cavendish
dengan beberapa kombinasi media tanam. J Pertanian Presisi 5(1): 57-70.
DOI: 10.35760/jpp.2021.v5i1.3933
Arafah D L, Hernawati D, Nuryadin E. 2021. The Effect Hormone BAP (6-Benzyl
Amino Purine) on the Growth of Potato Axillary Shoots (Solanum
Tuberosum L.) in Vitro. J Biologi Tropis 21(3): 641-647. DOI:
http://dx.doi.org/10.29303/jbt.v21i3.2823.
Ayele YB, Tefera W, Bantte K. 2017. Enhanced protocol development for in vitro
multiplication and rooting of vanilla (Vanilla planifolia Andr.) clone
(Van.2/05). Biotechnology J International 18(3): 1-11. DOI:
10.9734/BJI/2017/33726.
Azizah K, Restanto D, Sugiharto B. 2017. Peningkatan efisiensi regenerasi melalui
optimasi media induksi kalus dengan 2, 4-dicholorophenoxyacetic acid pada
padi indica (Oryza sativa L. var. Ciherang). J lmu Dasar 18(2): 91-98.
URL: https://repository.unej.ac.id/handle/123456789/97054.
Baday SJ. 2019. Plant Tissue Culture. International. J. Agriculture and
Environmental Research. 4(4): 977-990. DOI:10.51193/ijaer.
Budi M, Lia S. 2018. Perbanyakan Benih Krisan Tingkat Laboratorium
Menggunakan Metode Kultur Jaringan. URL:balithi.litbang.pertanian.go.id
Hartati S, Budiyono A, Cahyono O. 2016. Pengaruh NAA dan BAP Terhadap
Pertumbuhan Subkultur Anggrek Hasil Persilangan Dendrobium biggibum X
Dendrobium liniale. J of Sustainable Agriculture. 31(1): 33-37.
DOI:10.20961/carakatani.v31i1.11938
Imrotul K, Erma P, Endah DWH et al. 2016. Pengaruh kombinasi pupuk daundan
nano silika terhadap pertumbuhan anggrek (Dendrobium sp.) Pada subkultur
secara in vitro. J Biologi. 5(3): 15-22. URL:
https://ejournal3.undip.ac.id/index.php/biologi/article/view/19499/18491
Mastuti R. 2017. Dasar-dasar kultur jaringan tumbuhan. Malang (ID): UB Press.
39
Rodinah, Chatimatun N. 2018. Formulasi zat pengatur tumbuh dengan interval
waktu subkultur terhadap inisiasi dan multiplikasi pisang talas (musa
paradisiaca var sapientum l) secara in vitro. Ziraa’ah Majah Ilmiah Pertanian.
43(2): 141-148. DOI: 10.31602/zmip.v43i2.1282.
Rodinah, Hardarani N, Ariani HD. 2018. Modifikasi media dan periode subkultur
pada kultur jaringan pisang talas (Musa paradisiaca var. Sapientum L.). J
Hexagro 2(1): 30-35. DOI:10.36423/hexagro.v2i2.129
Sandra E. 2013. Cara mudah memahami dan menguasai kultur jaringan skala rumah
tangga. Bogor (ID): IPB Press.
Wahyuni DK, Huda A, Faizah S, et al. 2020. Effects of light, sucrose concentration
and repetitive subculture on callus growth and medically important
production in Justicia gendarussa Burm.f. Biotechnology Report 27: 1-9.
URL:
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2215017X20301028
Widiatmaka, Purwito A, Setiadi D, Fuah AM, Muljono P. 2019. Inovasi pertanian
untuk kesejahteraan bangsa dari perencanaan sampai diseminasi. Bogor (ID):
IPB Press.
Zahra FY, Syarifah IA, Dewi S. 2018. Pembibitan (Kultur Jaringan hingga
Pembesaran) Anggrek Phalaenopsis di Hasanudin Orchids, Jawa Timur. Bul
Agrohorti 6(3): 430: 439. DOI: 10.29244/agrob.v6i3.21113.
40
ACARA 5
AKLIMATISASI
A. Pendahuluan
Aklimatisas planlet merupakan tahapan akhir dari perbanyakan tanaman

dengan teknik kultur jaringan. Menurut Harahap et al. (2019),tahap
aklimatisasi dilakukan dengan memindahkan planlet ke media aklimatisasi
dengan intensitas cahaya rendah dan kelembapan nisbi tinggi, kemudian secara
berangsur-angsur kelembapannya diturunkan dan intensitas cahayanya
dinaikkan. Aklimatisasi merupakan tahap yang kritis karena kondisi iklim di
rumah kaca atau rumah plastik dan di lapangan sangat berbeda dengan kondisi
di dalam botol kultur.
Pada praktikum acara 5 yakni aklimatisasi ini menggunakan 3 jenis planlet

yakni planlet Pisang Cavendish, Pisang Ambon dan Pisang Barangan. Media
merupakan salah satu faktor lingkungan yang berfungsi menyediakan unsur
hara dan air bagi pertumbuhan tanaman. Sehingga media tanam yang
digunakan pada pada acar ini yaitu kompos dan sekam bakar.
B. Tujuan Praktikum
Praktikum kultur jaringan acara kelima yaitu aklimatisasi, memiliki tujuan

sebagai berikut.
1. Mengetahui teknik aklimatisasi pada tahapan akhir dari kultur jaringan.
2. Meningkatkan pemahaman dan memberikan keterampilan melakukan
aklimatisasi planlet.
C. Pembahasan
Aklimatisasi adalah pemindahan eksplan ke media di luar botol. Hal ini

sesuai pernyataan Asriani (2019), aklimatisasi adalah proses pemindahan
planlet atau tunas mikro dari dalam botol ke lingkungan di luar botol. Menurut
Harahap et al. (2019), proses aklimatisasi merupakan tahapan kritis yang
menentukan kemampuan bertahan hidup dari planlet saat ditanam di
lingkungan luar sesungguhnya. Hal ini dikarenakan proses aklimatisasi
41
merupakan suatu tahap peralihan untuk planlet menyesuaikan diri dari
lingkungan yang selama ini terkontrol menuju kondisi alam yang berubah-
ubah. Menurut Aisyah (2020), tahapan aklimatisasi sangat penting dilakukan
karena tanpa aklimatisasi planlet tidak dapat tumbuh di lapangan secara
langsung. Prinsip dari aklimatisasi adalah tanaman yang terbiasa hidup dan
tumbuh pada lingkungan laboratorium yang serba terkendali dan memiliki pola
hidup sebagai tanaman yang heterotrof akan diadaptasi dan dipindahkan ke
lingkungan lapangan di mana tanaman harus berpola hidup sebagai tanaman
autotrof.
Aklimatisasi adalah upaya penyesuaian atau adaptasi suatu organisme

terhadap lingkungan yang baru dimasukinya. Menurut Trimanto (2017),
kegiatan aklimatisasi bertujuan untuk mengkondisikan material tanaman
tersebut agar dapat bertahan hidup. Proses aklimatisasi akan menentukan
seberapa jauh tanaman dapat bertahan hidup di kondisi lingkungan aslinya.
Aklimatisasi yang baik dibutuhkan sebagai upaya pengadaptasian tanaman.
Proses aklimatisasi pada umumnya dilakukan dengan penananaman material
pada media di unit seleksi dan pembibitan, penyungkupan material tanaman,
penjarangan tanaman dalam polybag, perawatan yang meliputi pemupukan dan
penyiraman, dan monitoring terhadap tanaman hingga siap menjadi koleksi
kebun. Purmadewi (2019) juga berpendapat bahwa aklimatisasi merupakan
suatu upaya mengondisikan planlet atau tunas mikro hasil perbanyakan melalui
kultur jaringan ke lingkungan di luar botol. Oleh karena itu, aklimatisasi
memerlukan penanganan khusus, bahkan diperlukan modifikasi terhadap
kondisi lingkungan terutama suhu, kelembaban, dan intensitas cahaya. Suhu
lingkungan rata-rata pada penelitian adalah 25°C―29°C dengan kelembaban
relatif 92 persen sehingga sesuai untuk aklimatisasi. Erfa et al (2019)
menambahkah bahwa tahap ini merupakan tahap yang kritis bagi plantlet
dimana plantlet akan mengalami perubahan fisiologi karena faktor lingkungan
yang baru.
42
Planlet yang diaklimatisasi harus melakukan adaptasi dari lingkungan in-
vitro menuju lingkungan ex-vitro. Berdasarkan Hapsoro dan Yusnita (2018),
tanaman kecil yang terbentuk, tumbuh, berkembang, dan sudah terbiasa hidup
di lingkungan in-vitro dengan intensitas cahaya dan lampu yang rendah,
kelembaban nisbi (RH) yang tinggi (hampir selalu 100%), suhu yang relatif
rendah, aseptik, serta selalu mendapat suplai energi berkecukupan akan
menghadapi lingkungan ex-vitro dengan RH rendah, suhu dan intensitas
cahaya yang lebih tinggi, septik, dan harus dapat berfotosintesis secara mandiri.
Menurut Priyadi dan Hendriyani (2016), planlet pada tahap aklimatisasi yang
awalnya dibudidayakan secara in-vitro akan dipindahkan menuju kondisi
lingkungan ex vitro yang tidak terkendali, sehingga perlu diperhatikan terkait
bagaimana kriteria atau ciri-ciri planet yang sudah siap diaklimatisasi. Adapun
ciri-ciri planlet yang sudah siap diaklimatisasi yaitu : tinggi planlet mencapai
2-4 cm, memiliki 3-5 buah daun yang berwarna hijau, perawakan planlet
kokoh, dan memiliki perakaran dengan lapisan velamen. Penjelasan lebih
lengkap oleh Aisyah (2020) yang mengemukakan bahwa planlet yang akan
digunakan sebagai bahan tanam di tempat aklimatisasi adalah planlet botol
yang sudah disimpan di tempat pengokohan planlet (hardening off) dengan
suhu 25-29 derajat celcius, kelembaban 70%, dan tidak langsung disinari
matahari, dengan ciri-ciri planlet yaitu : memiliki organ yang lengkap terdiri
dari akar, batang, dan daun; warna pucuk batang hijau mantap artinya tidak
tembus pandang; pertumbuhan planletnya kekar; akar memenuhi media; warna
daun hijau tua; jumlah daun berjumlah sekitar 5-6; ukuran tinggi tanaman 3-4
cm; dan umur tanaman sudah mencukupi (biasanya untuk anggrek berumur 4
bulan dan pisang berumur 3 bulan). Saat melakukan tahapan aklimatisasi pada
planlet, perlu diperhatikan beberapa petunjuk dan saran agar proses
aklimatisasi dapat berhasil. Berdasarkan Harahap et al. (2019), planlet yang
akan diaklimatisasi sebelumnya diletakkan pada ruang kultur terlebih dahulu
selama 1-2 hari, setelah itu baru dipindah ke luar ruangan. selain itu penutup
atau sungkup dibuka sedikit demi sedikit agar tanaman mampu menerima
kondisi alam luar secara perlahan. tanaman tidak boleh langsung ditanam di
43
lapang, melainkan dinaungi terlebih dahulu selama beberapa hari sampai
tanaman tersebut benar-benar siap untuk ditanam di lapang.
Menurut Oktavia et al. (2020) kondisi lingkungan yang baik saat

aklimatisasi yaitu iklim lingkungan berupa suhu dan kelembaban yang optimal
pada lingkungan tumbuh. Tanaman hasil kultur jaringan memerlukan
kelembaban udara yang tinggi karena lapisan kutikula pada daun masih tipis,
stomata belum berfungsi secara normal, dan hubungan jaringan pembuluh
batang dan akar belum sempurna. Keadaan ini mengharuskan aklimatisasi
untuk menciptakan kondisi kelembaban yang tinggi bagi planlet yang baru
ditanam. Selain itu, komposisi media tumbuh juga harus yang baik dan steril
dikarenakan dapat berpengaruh terhadap kemampuan bertahan hidup bibit.
Pemilihan komposisi media yang buruk menyebabkan penyakit akar pada
media tanah, sehingga perlu menjadi pertimbangan utama dalam pemilihan
media aklimatisasi tanaman. Kondisi lingkungan berupa intensitas cahaya juga
perlu disesuaikan agar tidak terlalu tinggi pada saat aklimatisasi untuk
menghindari stres pada tanaman. Pada kondisi in vitro tanaman tumbuh di
bawah intensitas cahaya rendah (1200 - 3000 lux) dengan suhu di bawah 25oC,
sedangkan saat ditransfer ke ex vitro tanaman akan langsung menerima
intensitas cahaya yang tinggi (4000 - 12000 lux) dengan suhu yang bisa
mencapai 35oC, sehingga terjadi peningkatan evapotranspirasi yang
mengakibatkan tanaman menjadi layu, sehingga untuk menghindari layu
tanaman intensitas cahaya perlu diperhatikan.
1. Kesimpulan
● Aklimatisasi adalah tahap peralihan planlet sebelum ditanam di
lapangan dengan memindahkan planlet dari dalam botol ke
lingkungan luar botol.
● kesimpulan 2
44
Kegiatan aklimatisasi bertujuan untuk mengkondisikan material
tanaman tersebut agar dapat bertahan hidup. Proses aklimatisasi akan
menentukan seberapa jauh tanaman dapat bertahan hidup di kondisi
lingkungan aslinya.
● Ciri-ciri planlet yang siap diaklimatisasi diantaranya : memiliki organ
lengkap, warna pucuk batang dan daun hijau, pertumbuhan planlet
kekar, akar memenuhi media, jumlah daun sekitar 5-6, tinggi tanaman
3-4 cm, dan umur tanaman sudah mencukupi.
● Kondisi lingkungan yang baik saat aklimatisasi yaitu iklim
lingkungan berupa suhu, kelembaban, intensitas cahaya, dan kondisi
komposisi media yang sesuai pada lingkungan tumbuh.
2. Saran
Pelaksanaan praktikum Kultur Jaringan acara 5 sudah berjalan
dengan baik. Video praktikum dan sesi diskusi yang telah disediakan Co-
Ass membantu proses pemahaman materi bagi praktikan. Harapan untuk
kegiatan praktikum selanjutnya semoga tetap berjalan dengan baik dan
sebaiknya juga diadakan diskusi secara virtual.
45
DAFTAR PUSTAKA
Aisyah I. 2020. Kultur jaringan pisang kepok tanjung (tidak berjantung) yang tahan
terhadap penyakit darah (Ralstonia syzygii subsp. Celebesensis). Yogyakarta
(ID): Deepublish.
Asriani EN. 2019. Kultur jaringan skala rumah tangga: cara mudah memperbanyak
tanaman dalam jumlah besar. Serang (ID): Pustaka Bina Putera.
Erfa, L., Maulida, D., Sesanti, R. N., & Yuriansyah, Y. 2019. Keberhasilan
Aklimatisasi dan Pembesaran Bibit Kompot Anggrek Bulan (Phalaenopsis)
Pada Beberapa Kombinasi Media Tanam. Jurnal Penelitian Pertanian
Terapan. 19(2):121-126.
DOI: http://dx.doi.org/10.25181/jppt.v19i2.1420.
Hapsoro D, Yusnita Y. 2018. Kultur Jaringan : Teori dan Praktik. Yogyakarta (ID)
: Penerbit ANDI.
Penerbit Media Sahabat Cendekia.
Oktavia F, Stevanus CT, Dessailly F. 2020. Optimasi kondisi suhu dan kelembaban
serta pengaruh media tanam terhadap keberhasilan aklimatisasi tanaman karet
asal embriogenesis somatik. J Penelitian Karet 38(1): 1-16. DOI:
10.22302/ppk.jpk.v38i1.677
Priyadi A, Hendriyani E. 2016. Karakter Morfo-Fisiologi Daun Tiga Jenis Plantlet

Anggrek pada Tahapan Aklimatisasi. J Hortikultura. 26(2) : 143-152. URL :
http://repository.pertanian.go.id/handle/123456789/1014
Purmadewi, G. C., Wulandari, A. S., & Sianturi, R. U. D. 2019. The Effect of

Rooting and Acclimatization Media on the Success of Acclimatization of
Tembesu (Fagraea fragrans (Roxb.) Miq.). Jurnal Perbenihan Tanaman
Hutan. 7(1):1-12.
DOI: //doi.org/10.20886/bptpth.2019.7.1.1-12.
46
Trimanto, T. 2017. Aklimatisasi tumbuhan hasil eksplorasi dan perbanyakan
tanaman unit seleksi dan pembibitan kebun raya purwodadi. In Prosiding
Seminar Biology 10(2):1-7.
URL:https://jurnal.fkip.uns.ac.id/index.php/prosbio/article/viewFile/3194/22
34.
47

Kuljar - Acara 5 Aklimatisasi - Kelompok 30.

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Kuljar - Acara 5 Aklimatisasi - Kelompok 30.

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN PRAKTIKUM

TEKNOLOGI KULTUR JARINGAN

Nama : Amrina Rosyadah (N0121054)

PROGRAM STUDI AGROTEKNOLOGI

Laporan praktikum Teknologi Kultur Jaringan ini disusun untuk melengkapi

Ir. Retno Bandriati Arni Putri, M.Si. Alfida Muthi’ah

Surakarta, 25 November 2021

Tabel 1. Pengenalan Alat di Laboratorium Kultur Jaringan ................................. 2

Botol kultur berfungsi

Kertas buram bisa

Pinset memiliki banyak

Spatula berfungsi untuk

Pisau scalpel berfungsi

Mata pisau yang

Hot Plate Stirrer

D. Kesimpulan dan Saran

Direktorat Perbenihan Tanaman Hutan. 2016. Petunjuk Teknis Perbanyakan

Dwiyani R. 2015. Kultur Jaringan Tanaman. Denpasar (ID) : Pelawa Sari.

Harahap F. 2011. Kultur jaringan tanaman. Medan (ID): Penerbit Unimed.

Kurnianingsih R, Ghazali M, Rosidah S et al. 2020. Pelatihan teknik dasar kultur

Prasetyorini. 2019. Kultur Jaringan. Bogor (ID) : Lembaga Penelitian dan

Kultur jaringan secara umum dapat dikatakan sebagai teknik

Larutan stok dibuat terlebih dahulu untuk memudahkan proses

D. Kesimpulan dan Saran

Inisiasi adalah pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan

Praktikum Teknologi Kultur Jaringan acara Inisiasi ini memiliki tujuan

Inisasi adalah pengambilan eksplan dari salah satu bagian tumbuhan

D. Kesimpulan dan Saran

D. Kesimpulan dan Saran

Aklimatisas planlet merupakan tahapan akhir dari perbanyakan tanaman

Pada praktikum acara 5 yakni aklimatisasi ini menggunakan 3 jenis planlet

Praktikum kultur jaringan acara kelima yaitu aklimatisasi, memiliki tujuan

Aklimatisasi adalah pemindahan eksplan ke media di luar botol. Hal ini

Aklimatisasi adalah upaya penyesuaian atau adaptasi suatu organisme

Menurut Oktavia et al. (2020) kondisi lingkungan yang baik saat

D. Kesimpulan dan Saran

Priyadi A, Hendriyani E. 2016. Karakter Morfo-Fisiologi Daun Tiga Jenis Plantlet

Purmadewi, G. C., Wulandari, A. S., & Sianturi, R. U. D. 2019. The Effect of

Anda mungkin juga menyukai